课时4.2 血红蛋白的提取和分离-2019-2020学年3月高二生物选修1同步【自学课件】

专题4 DNA和蛋白质技术 4.3 血红蛋白的提取和分离 知识点 蛋白质提取和分离原理 蛋白质提取和分离的方法 知识点1 蛋白质提取和分离原理 1、分离生物大分子的基本思路是什么？ 选用一定的物理或化学的方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。 2、蛋白质的分离和提取的原理是什么？ 根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附的性质和对其他分子的亲和力，等等，可以用来分离不同种类的蛋白质。 思考 凝胶色谱法（分配色谱法） 1、概念：根据被分离物质（如蛋白质）相对分子质量的大小，利用具有多孔网状结构的凝胶的分子筛作用，来进行分离。 性质：微小的多孔球体 本质：多糖类化合物 实例：葡聚糖、琼脂糖 凝胶色谱法分离蛋白质 凝胶色谱法（分配色谱法） 2、原理： 当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。 相对 分子质量 大 小 直径大小 大于凝胶颗粒孔道直径 小于凝胶颗粒孔道直径 运动路径 被阻挡在凝胶颗粒外面而迅速通过 因扩散进入凝胶颗粒内部而被滞留 运动速度 较快 较慢 运动路程 较短 较长 洗脱次序 先 后 自学笔记 缓冲溶液 1、概念：在一定的范围内，能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液pH发生明显变化的溶液。 2、作用：能够抵制外界的酸或碱的对溶液的pH的影响，维持pH基本不变。 3、配制：通常由1－2种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同pH范围内使用的缓冲液。 自学笔记 还记得人体血液中的缓冲液吗？ H2CO3 /NaHCO3 NaH2PO4 /Na2HPO4 单击此处编辑母版文本样式 二级 三级 四级 五级 你认为在血红蛋白整个实验中用的缓冲液是什么？目的是什么？ 本实验使用的是磷酸缓冲液，目的是利用缓冲液模拟细胞内的pH环境，保证血红蛋白的正常结构和功能，便于观察（红色）和科学研究（活性）。 电泳 1、概念：指带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。 2、原理： ①许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。 ②