内容正文:
动物细胞融合
单克隆抗体
资料: 1970年,有两位科学家做了一个人—鼠细胞融合的实验,以证明细胞膜的流动性。那么,如何实现人—鼠细胞的融合?
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通
细胞膜连接
细胞融合,形成杂种细胞(细胞膜具有一定的流动性)
生物法:
灭活的病毒
一、动物细胞融合
1.概念:
指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
2.结果:
形成单核的杂交细胞
3.原理:
细胞膜的流动性
4.诱导方式
物理法:离心、振动、电激
化学法:聚乙二醇(PEG)
生物法:灭活的病毒
突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。(种间、属间、科间、动植物之间)
成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。
生物种类 细胞来源 成功年代
酵母菌—鸡 原生质体—血红细胞 1975年
人—胡萝卜 腹水癌细胞—原生质体 1976年
人—小鼠 纤维肉瘤细胞——畸胎瘤细胞 1978年
特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体
5.意义:
6.应用:
比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合
原理 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性
细胞融合方法 用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合 用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散后,诱导细胞融合
诱导手段 离心、电激、振动、聚乙二醇等诱导 与植物体细胞杂交相比,还可用灭活的病毒诱导
结果 形成杂种植株 形成杂交细胞,以生产细胞产品
用途 克服远缘杂交不亲和的障碍,扩展杂交亲本范围,培育新品种 制备单克隆抗体、病毒疫苗、干扰素等
意义 突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能
比较:动物细胞融合与植物体细胞杂交
回顾
抗体的化学本质?
1
抗体由什么细胞产生?
2
抗体的作用特点?
3
抗体的传统生产方法:
再从动物血清中分离抗体
该法制备抗体的不足:
产量低、纯度低,且抗体的特异性差、灵敏度低。
输入
浆细胞
动物体内
某抗体
某抗原
单克隆抗体:
人们发现,在动物发生免疫反应的过程中,体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体,但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体,必须用单个B细胞进行无性繁殖,即克隆。
单: 单个细胞 克隆: 无性繁殖
单个细胞克隆产生的单一特异性强的抗体
创始人:米尔斯坦
一个B淋巴细