内容正文:
酶的制备及活力测定
【学习目标】
研究酶的存在和简单制作方法,尝试利用酶活力测定的一般原理和方法。
【学习重难点】
研究酶的存在和简单制作方法,尝试利用酶活力测定的一般原理和方法。
【学习过程】
课中学习
一、酶
1.在活细胞内合成,在细胞内起催化作用,称为_____________。
2.提取酶的方法:提取胞内酶,需要破碎_____________,可用破碎仪、研磨器或匀浆机。使酶从中释放出来,进入细胞外的溶液中,经过滤、离心制备成_____________。在酶的提取过程中,_____________、_____________等多种环境条件都可能影响酶的空间结构导致酶变性直至丧失活力。因而,提取出的酶首先需要检测酶的_____________。
3.酶的活力
(1)定义:通常以单位时间内_____________或者单位时间内_____________。
(2)测定方法:_____________和_____________。
二、实践案例:《植物淀粉酶的制备及活力测定》
材料器具:
活动程序:
1.提取酶液
2.滴加酶液:取4支试管编号后均加入PH=5.6的________________缓冲溶液。
向1、2试管中各加入未煮过的________1ml
向3、4试管中各加入已煮过的________1ml
3.恒温处理:为什么要进行恒温40℃处理?答:保证酶在________温度下充分发生反应。
4.钝化处理:钝化处理的原因?答:使酶的活性________,从而使反应减慢或停止。
5.测定吸光值:用分光光度计在波长________处进行比色。
6.绘制标准曲线
7.结果分析:(1)从标准曲线中查出______________。
(2)计算淀粉酶的活力。
通关检测
1.制备过氧化氢酶粗酶液
以新鲜________、________________为材料经过粉碎、研磨、离心,取________即可得到过氧化氢酶粗酶液。
2.用分光光度法测定过氧化氢酶的活力
在过氧化氢酶存在时,过氧化氢将愈创木酚氧化生成________色产物,这种产物在波长470nm处有最大吸收峰,通过测定________可以计算出过氧化氢酶的活力。
3.用高锰酸钾滴定法测定过氧化氢酶的活力
如果在反应系