内容正文:
专题2 细胞工程
人教版生物自学课件
2.2.1动物细胞培养和核移植技术
知识点
动物细胞培养技术
核移植技术
知识点1 动物细胞培养技术
一、动物细胞培养
就是从动物机体中取出相关组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖。
1、动物细胞培养概念:
2、原理:细胞增殖
强调一:细胞贴壁过程
■细胞贴壁:在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。
■培养瓶或培养皿壁要求:表面光滑、无毒、易于贴附。
强调二:接触抑制
细胞的接触抑制
细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止,数量不再增加。
瓶壁上的细
胞层数是:
一层
(或单层)!
原代培养:人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。一般培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。
传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官
细胞悬液
10代细胞
传代培养
无限传代
单个细胞
加培养液
原代培养
剪碎、用胰蛋白酶处理(或胶原蛋白酶)
细胞贴壁,出现接触抑制
用胰蛋白酶处理
分瓶传代培养
50代细胞
3、过程
★
自学笔记
细胞株:传代细胞一般能传到10-50代,遗传物质一般不会发生改变,叫细胞株。
细胞系:传代50代以后又出现细胞生长停滞状态,部分细胞遗传物质发生了改变,能连续传代,获得不死性,叫细胞系。
▲细胞株和细胞系的区别: 细胞系的遗传物
质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑
制,容易传代培养。
P44思考
1、用胰蛋白酶分散细胞,由此可说明细胞间的物质主要是什么成分?
2、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗?那将动物组织分散成单个细胞时要注意什么问题呢?
3、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?为什么?
主要是蛋白质(胶原蛋白等)。
能,应注意时间的控制
不能,因为动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4,此环境下胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。
■目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常在10代以内的原因:
以保持正常二倍体核型
(或10代以内的细胞遗传物质不改变)。
■选动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料的原因:
因为其细胞生命力旺盛,