内容正文:
1.培养基的基本成分:水、无机盐、碳源、氮源;根据有无琼脂将培养基分为固体培养基和液体培养基。液体培养基用于微生物的扩大培养,固体培养基用于微生物的分离。
2.常用灭菌方法及适用器材:(1)高压蒸汽灭菌法,如培养基、各种器皿等;(2)灼烧,如接种环、玻璃刮刀等;(3)G6玻璃砂漏斗过滤,如尿素培养基。
3.分离微生物最常用方法:划线分离法和涂布分离法(后者更容易获得单菌落)。
4.划线分离时,接种环只蘸取一次菌液,每次划线前均需灼烧接种环;接种微生物后,培养基需倒置培养。
5.脲酶分解尿素为NH3,NH3使培养基的pH升高,遇酚红指示剂变红色,通过检测红色环带大小判断脲酶的活力。脲酶分解尿素的反应式为:(NH2)2C==O+H2O2NH3+CO2。
6.分离以尿素为唯一氮源的微生物时,尿素培养基中加入琼脂糖而非琼脂(保证尿素为唯一氮源);土样从有哺乳动物排泄物的地方获取,用无菌水稀释后只取悬液。
7.任何大肠杆菌如果进入人的泌尿系统,都会对人体产生危害。
8.接种时,先将接种环在酒精灯火焰上烧红后冷却,然后蘸取带菌的培养物,放到新的培养基中。
9. 划线分离法可用于分离细菌,将污染的杂菌除去。
10.无菌操作的首要条件是各种器皿必须是无菌的。
11.实验中所需的棉花不能用脱脂棉,因脱脂棉易吸水,吸水后容易引起污染。
12.在将培养基转移到三角瓶和试管中时必须用三角漏斗;向培养皿中转移已灭菌的培养基时,也不要沾在壁上。
13.塞子制作的好坏是控制污染发生的关键。如果有条件,可以用封口膜代替棉塞。
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选修1 第一部分 微生物的利用
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选考必背
1.培养基的基本成分:水、无机盐、碳源、氮源;根据有无琼脂将培养基分为固体培养基和液体培养基。液体培养基用于微生物的扩大培养,固体培养基用于微生物的分离。
2.常用灭菌方法及适用器材:(1)高压蒸汽灭菌法,如培养基、各种器皿等;(2)灼烧,如接种环、玻璃刮刀等;(3)G6玻璃砂漏斗过滤,如尿素培养基。
3.分离微生物最常用方法:划线分离法和涂布分离法(后者更容易获得单菌落)。
4.划线分离时,接种环只蘸取一次菌液,每次划线前均需灼烧接种环;接种微生物后,培养基需倒置培养。
5.脲酶分解尿素为NH3,NH3使培养基的pH升高,遇酚红指示剂变红色,通过检测红色环带大小判断脲酶的活力。脲酶分解尿素的反应式为:(NH2)2C==O+H2O 2NH3+CO2。
6.分离以尿素为唯一氮源的微生物时,尿素培养基中加入琼脂糖而非琼脂(保证尿素为唯一氮源);土样从有哺乳动物排泄物的地方获取,用无菌水稀释后只取悬液。
7.任何大肠杆菌如果进入人的泌尿系统,都会对人体产生危害。
8.接种时,先将接种环在酒精灯火焰上烧红后冷却,然后蘸取带菌的培养物,放到新的培养基中。
9. 划线分离法可用于分离细菌,将污染的杂菌除去。
10.无菌操作的首要条件是各种器皿必须是无菌的。
11.实验中所需的棉花不能用脱脂棉,因脱脂棉易吸水,吸水后容易引起污染。
12.在将培养基转移到三角瓶和试管中时必须用三角漏斗;向培养皿中转移已灭菌的培养基时,也不要沾在壁上。
13.塞子制作的好坏是控制污染发生的关键。如果有条件,可以用封口膜代替棉塞。
本课结束
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第1课时 大肠杆菌的培养和分离
[学习目标] 1.进行大肠杆菌的扩增,利用液体培养基进行细菌培养的操作。2.进行大肠杆菌的分离,用固体平面培养基进行细菌的划线培养。3.说明大肠杆菌培养的条件和实验原理。
一、微生物培养的基本条件
1.微生物
(1)概念:结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物。
(2)用途:许多种抗生素来源于放线菌和霉菌;酒由酵母发酵产生;腐乳由红曲霉和毛霉发酵制成;微生物能用于治理环境污染,在新能源领域也将发挥巨大作用。
2.培养基
(1)概念:培养基是微生物生存的环境和营养物质。
(2)分类:培养基按物理性质常可分为固体培养基和液体培养基,一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四类营养物质,另外还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。通常细菌培养基要用蛋白胨和酵母提取物来配制,还要加入一定量的氯化钠以维持一定的渗透压;霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。
(3)酸碱性:细菌通常要求在中性偏碱的环境中生长,霉菌要求在中性偏酸的环境中生长;因此,在制备培养基时需调节培养基的酸碱度。
特别提醒 有关培养微生物所需营养的三点提醒
(1)不同微生物对营养的需求不同,所以培养不同的微生物所需要的营养可能不同。
(2)对异养微生物来说,含C、H、O、N的有机物既是碳源又是氮源、能源。
(3)培养微生物时营养物质要协调。营养物质过少不能满足微生物的营养需要,过多对微生物的生长有抑制作用。