内容正文:
《DNA和蛋白质技术易错点例析》
张建尚 江苏省赣榆高级中学
易错点1 DNA粗提取中的滤液分析
【例1】在“DNA粗提取与鉴定”实验中,将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入体积为2mL的四种溶液中,经搅拌后过滤,获得4种滤液。其中含DNA较少的是( )
1
蒸馏水中
搅拌后过滤
滤液E
2
2mol/L的NaCl溶液
搅拌后过滤
滤液F
3
O.14mol/L的NaCl溶液中
搅拌后过滤
滤液G
4
冷却的95%的酒精溶液中
搅拌后过滤
滤液H
A.滤液E和滤液F B.滤液G和滤液H C.滤液E和滤液G D.滤液F和滤液H
【错因分析】对使用的溶液的作用和过滤目的区分不清是该题错选的主要原因。在利用鸡血细胞进行DNA的粗提取与鉴定实验中有三次过滤,但目的不同:(1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液——获得含核物质的滤液;(2)过滤含粘稠物的0.14mol/LNaCl溶液——获得纱布上的粘稠物;(3)过滤溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液——获得含DNA的滤液。
【解析】DNA在蒸馏水和2mol/L的NaCl溶液中溶解度比较高,所以滤液E和F中DNA含量较多;DNA在0.14mol/L的NaCl溶液和95%的冷酒精溶液中溶解度非常低,所以滤液G和H中含DNA较少。
【答案】B
易错点2 引物的特点和数目计算
【例2】 请回答PCR技术方面的有关问题:
(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占比例为 。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。
①第一组: ; ② 。
【错因分析】不能将引物的特点应用于图解分析和对PCR结果中引物的数量变化模糊不清是该题出错的主要原因。PCR反应需要引物,引物的大小要适宜,引物本身不应存在互补序列,引物之间也不应存在互补序列。PCR反应的产物中,引物的数量为2n+1-2。
【解析】(1)根据PCR