内容正文:
1.2 基因工程的基本操作程序
专题一 基因工程
基因工程的基本操作程序
目的基因的获取
基因表达载体的构建
将目的基因导入受体细胞
目的基因的检测与鉴定
为什么要有“目的基因的获取”这一步?
有了目的基因,我们才能赋予一种生物以另一种生物的遗传特性。
一、目的基因的获取
真核细胞的基因结构
什么是“目的基因” ?
原核细胞的基因结构
*
目的基因主要是______________________,也可以是一些具有调控作用的因子
编码蛋白质的结构基因
目前被广泛提取使用的目的基因有:苏云金杆菌抗虫基因、植物抗病基因(抗病毒、抗细菌)、种子贮藏蛋白基因及人胰岛素基因等。
3)人工合成
1)从基因文库中获取目的基因
获得目的基因的方法
2)利用PCR技术扩增目的基因
未知目的基因的核苷酸序列
已知目的基因的核苷酸序列
且基因比较小
且基因比较大
将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。
1.基因文库概念
2.基因文库的分类:按外源DNA片段的来源分类
种类
部分基因文库:只包含了一种生物的部
分基因,如:cDNA文库
基因组DNA文库:含有一种生物的全部
基因
3、基因文库的构建
(1)基因组文库的构建
提取某生物
全部DNA
用适当
限制酶切割
许 多
DNA片段
与载体连接
导入受体菌群
该生物基
因组文库
(每个受体菌含有一段不同的DNA片段)
(2)cDNA文库的构建——mRNA反转录形成
与载体连接
导入受体菌群
mRNA
逆转录酶
杂交双链
核酸酶H
单链DNA
DNA聚合酶
双链DNA
(cDNA)
该生物
cDNA文库
基因组DNA文库
cDNA文库
真核生物转录过程
基因组DNA文库与cDNA文库的比较
某种生物部分基因
某种生物全部基因
小
大
无
有
无
有
可以
部分基因可以
文库类型 cDNA文库 基因组文库
基因多少
文库大小
启动子
内含子
物种间的基因交流
村长, 为什么要构建基因文库?直接从含有目的基因的生物中提取不行吗???
当然行啊。构建基因文库只是获取目的基因的方法之一。但是,有时我们完全不知道目的基因序列,或者