内容正文:
专题13
生物技术实践
答案速填:
①水、碳源、氮源、无机盐 ②灭菌 ③尿素 ④显微镜直接计数法 ⑤酵母菌 ⑥压榨法 ⑦纸层析
考纲要求:
1.微生物的分离和培养
2.某种微生物数量的测定
3.培养基对微生物的选择作用
4.利用微生物进行发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用
5.从生物材料中提取某些特定的成分
6.运用发酵加工食品的基本方法
热点一 微生物的分离、培养及应用
【示范题1】(2017·全国卷Ⅰ·T37)某些土壤细菌可
将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。回答下列
问题: 世纪金榜导学号
(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者
能产生______________。能分解尿素的细菌不能以尿
素的分解产物CO2作为碳源,原因是________________
____________________________,但可用葡萄糖作为碳
源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是__________
_____________________________________________
___(答出两点即可)。
(2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应
选择______________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素
+NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的原因是
__________________________________________。
(3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和
Na2HPO4,其作用有______________________________
____________(答出两点即可)。
常失分点 参考答案
第(1)小题:常因“脲酶”错写为“尿酶”而失分;因考虑不到“自养或异养”而失分;易漏答“为其他有机物的合成提供原材料”而失分。
第(2)小题:易忽略“NH4NO3不能起到筛选作用”而失分。
第(3)小题:易漏答“作为缓冲剂保持细菌生长过程中pH稳定”而失分。 (1)脲酶 分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2合成有机物 为细胞生命活动提供能量,为其他有机物的合成提供原材料
(2)尿素 其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用
(3)为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂保持细菌生长过程中pH稳定
【考题追问】如果用稀释涂布平板法测定某一土壤样
品中分解尿素的细菌数,统计的菌落数往往比活菌实际
数目低,原因是:__________________________________
___________________。
当两个或多个细胞连在一起时,平板上
看到的只是一个菌落
【热点·纵横联】
微生物的分离、计数与鉴定
1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数:
(1)过程:土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察。
(2)筛选菌株:利用选择培养基(本实验选用尿素作为唯一氮源)筛选菌株。
(3)计数:稀释涂布平板法常用于活菌计数,为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。
2.分解纤维素的微生物的分离:
(1)实验原理:
即:可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
(2)鉴定方法:刚果红染色(鉴别培养基)。
(3)流程:土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选产生透明圈的菌落。
【对点·聚焦练】
1.(2017·江苏高考)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题: 世纪金榜导学号
(1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、
苯酚和水,其中可作为碳源的有____________________。
(2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐____________,以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集,应进一步____________,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加____________。
(3)下图为连续划线法示意图,在图中____________(填图中序号)区域更易获得单菌落。
(4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中1~5 号比色管的苯酚浓度应分别为______________。
管号 1 2 3 4 5 6
苯酚浓度(mg/L) 1
如果废水为50 mg/L苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释____________(填序号:①5
②10 ③20)倍后,再进行比色。
【解