内容正文:
生物技术实践
第十二单元
第39讲 微生物的培养与应用
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第十二单元 生物技术实践
高考总复习 · 生物
1.微生物的分离和培养。2.培养基对微生物的选择作用。3.某种微生物数量的测定。4.微生物在其他方面的应用。
栏
目
导
航
考点一 培养基及微生物的纯化培养技术
考点二 微生物的筛选和计数
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1.培养基
(1)概念:人们按照微生物对___________的不同需求,配制出供其___________的营养基质。
(2)营养组成:一般都含有__________________和无机盐。此外,还需要满足微生物生长对________、氧气以及_______________的要求。
(3)种类:按照物理性质可分为________培养基和固体培养基。
考点一 培养基及微生物的纯化培养技术
营养物质
生长繁殖
水、碳源、氮源
pH
特殊营养物质
液体
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2.无菌技术
(1)含义:指在培养微生物的操作中,所有防止____________的方法。
(2)关键:防止___________的入侵。
(3)不同对象的无菌操作方法(连线)
杂菌污染
外来杂菌
739.psd
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3.大肠杆菌的纯化培养
(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
①操作步骤
称量
灭菌
倒平板
eq \x(计算)→eq \x(____________)→eq \x(溶化)→eq \x(____________)→eq \x(____________)
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②倒平板的方法及注意事项
a.请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程:__________________。
b.甲、乙、丙中的灭菌方法是____________。
c.丁中的操作需要等待________________才能进行。
丙→乙→甲→丁
灼烧灭菌
平板冷却凝固
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(2)纯化大肠杆菌的方法
①纯化培养原理:想方设法在培养基上得到________________________的肉眼可见的________,即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤:________。
③常用的微生物接种方法有两种
a.平板划线法:是通过____________在琼脂固体培养基表面___________的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
b._______________法:是将菌液进行一系列的____________,然后将____________的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
由一个细胞繁殖而来
菌落
接种
接种环
连续划线
稀释涂布平板
梯度稀释
不同稀释度
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(3)菌种的保存方法
①对于频繁使用的菌种,可以采用____________的方法。
②对于需要长期保存的菌种,可以采用___________的方法。
临时保藏
甘油管藏
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1.消毒和灭菌的比较
项目 条件 结果 常用方法 应用范围
消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物 煮沸消毒法 日常用品
巴氏消毒法 不耐高温的液体
化学药剂消毒法 用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源
灭菌 强烈的理
化因素 杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子 灼烧灭菌法 接种工具
干热灭菌法 玻璃器皿、金属工具
高压蒸汽灭菌法 培养基及容器的灭菌
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2.纯化微生物的接种方法
项目 平板划线法 稀释涂布平板法
原理 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基上。在数次划线后培养,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,即菌落 将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落
优点 可以观察菌落特征,对混合菌进行分离 可以计数,可以观察菌落特征
缺点 不能计数 操作较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延
适用范围 适用于好氧菌 适用于厌氧菌和兼性厌氧菌
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走出微生物培养的4个误区
(1)平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同
①第一次操作:杀死接种环上原有的