内容正文:
专题5课题1《DNA的粗提取与鉴定》
【学习目标】
1.尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取 2.了解DNA的物理化学性质
3.理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理
【新知预习】
一、基础知识
1.提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同的____________性质的生物大分子。对于DNA的粗提取而言,就是要利用DNA与RNA、________和脂质等在____________性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
2.DNA的粗提取主要是利用了DNA的溶解性和耐受性。
(1)利用DNA的溶解性:DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的________中的溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使________充分溶解而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。DNA在________mol/L NaCl溶液中的溶解度最小,DNA分子析出,其他杂质溶解;当NaCl溶液的浓度________此浓度时,DNA的溶解度都较高。此外,DNA不溶于________,但是细胞中的某些蛋白质能溶于其中,据此也可使DNA和蛋白质分离。
(2)利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性:蛋白酶能水解________,但是对________没有影响。大多数蛋白质不能忍受_____°C的高温,而DNA在________°C以上才会变性。洗涤剂能够溶解______________,但对DNA没有影响。
3.DNA的鉴定:DNA在________的条件下,遇二苯胺会被染成________色。
二、实验设计
1.实验材料的选取
原则上凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,但选用________________的生物组织,成功的可能性更大。
2.破碎细胞,获取含DNA的滤液
(1)动物细胞的破碎[来源:学科网]
在鸡血细胞液中加入一定量的________,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集________即可。
(2)植物细胞的破碎
先将洋葱切碎,然后加入一定量的________和食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收
集________。
3.去除滤液中杂质
(1)方案一:通过控制________的浓度去除杂质。
(2)方案二:直接向滤液中加入________,反应10~15 min。嫩肉粉中的____________能够分解蛋白质。
(3)方案三:将滤液放在__