内容正文:
5.3 新提升·课后作业
一、 选择题(每小题5分,共50分)
1.在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽,与其有关的是 ( )
A.凝胶色谱柱的制作
B.色谱柱的装填
C.洗脱过程
D.样品的处理
【解析】 色谱柱装填时不能有气泡的存在,气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,若色谱柱装填得很成功、分离操作也正确,则能清楚的看到红色区带均匀、狭窄、平整,随着洗脱液缓缓流出,如果出现红色带区域歪曲、散乱、变宽的现象,说明分离的效果不好,这与凝胶色谱柱的装填有关,B项正确,A、C、D三项均错误。
【答案】 B
2.下图能正确表示相对分子质量不同的蛋白质,在凝胶中的行进过程的是( )
【解析】 相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道,路程短,移动的速度快,A错误;相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程长,移动的速度慢,相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道,路程短,移动的速度快,B正确;相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道,C错误;相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道,且其路程短,移动的速度快,D错误。
【答案】 B
3.下列关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述,正确的是( )
A.为了防止血液凝固,应在采血器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠
B.红细胞洗涤使用5倍体积的蒸馏水,直到离心后上清液不呈现黄色为止
C.利用0.9%的NaCl对血红蛋白溶液的透析12小时,可以去除小分子杂质
D.在凝胶柱中加入蛋白样品后即可连接缓冲溶液洗脱瓶进行洗脱和收集样品
【解析】 为了防止血液凝固,应在采血器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠,A正确;红细胞的洗涤过程应该用生理盐水洗涤,不能用蒸馏水洗涤,B错误;将血红蛋白溶液通过透析进行粗分离时应该选用磷酸缓冲液,不是质量分数为0.9%的NaCl溶液,C错误;凝胶柱中加入蛋白样品后要使样品完全进入凝胶层后,小心加入缓冲液到适当高度后才可连接缓冲溶液洗脱瓶进行洗脱和收集样品,D错误。
【答案】 A
4.下图为凝胶色谱法分离蛋白质示意图和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳示意图。据图分析不正确的是( )
A.在装填图甲中凝胶色谱柱时一旦发现柱内有气泡存在,就需要重装
B.图甲中大分子蛋白质因阻力大而移动慢,所以最后从层析柱中流出来
C.图乙中凝胶中加入的SDS可以使蛋白质迁移速率完全取决于分子大小
D.已知凝胶中的SDS带负电,则应在电泳槽的①处接电源负极,②处接电源正极
【解析】 在装填凝胶色谱柱时,凝胶装填在色谱柱内要均匀,不能有气泡存在,因为气泡会影响蛋白质洗脱的次序,A正确;图甲中大分子蛋白质因不容易进入凝胶内部的通道,路程短,移动速度快,所以最先从层析柱中流出来,B错误;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移速率完全取决于分子大小,因此图乙中凝胶中加入的SDS可以使蛋白质迁移速率完全取决于分子大小,C正确;凝胶中的SDS带负电,所以电泳槽的①处接电源负极,②处接电源正极,D正确。
【答案】 B
5.下列有关“血红蛋白提取和分离”的相关叙述中,正确的是( )
A.用蒸馏水进行红细胞的洗涤,其目的是去除细胞表面杂蛋白
B.将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较大的杂质
C.血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂
D.整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持血红蛋白的结构
【解析】 对红细胞洗涤时应该用生理盐水,不能用蒸馏水,A错误;将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较小的杂质,B错误;血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是溶解磷脂,加速血红蛋白的释放,C错误;整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持pH相对稳定,防止血红蛋白的结构发生改变,D正确。
【答案】 D
6.以下关于猪血红蛋白提纯的描述,不正确的是( )
A.洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂
B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少
C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测
D.在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢
【解析】 洗涤红细胞时,洗涤的目的是去除杂蛋白以利于后续步骤的分离纯化,加入的是生理盐水,可防止红细胞破裂,A正确;哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核与众多的细胞器,提纯时杂蛋白较少,B正确;血红蛋白是有色蛋白,因此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液,C正确;在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白的分子量比杂蛋白大,质量越大的,通过凝胶色谱柱的速度越快,D错误。
【答案】 D
7.下列关于凝胶色谱法的原理及操作不正确的是( )
A.是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法
B.在洗脱过程中,大分子不能进入凝胶内部而最先流出,而小分子可以进入凝胶内部而流速缓慢,最