精品解析：内蒙古自治区鄂尔多斯市市一中分校区2026～2027学年度第一学期期中考试高二生物试题

市一中分校区2026～2027学年度第一学期期中考试试题 高二生物 答题要求： 1．考试时间75分钟，试卷满分100分 2．用黑色笔作答 3．考试结束只交答题纸 第Ⅰ卷 一、单选题（每题2分，每题只有一个选项正确，共30分） 1. 下列关于“泡菜制作”相关内容说法正确的是（ ） A. 向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水形成内部无菌环境 B. 向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入 C. 泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气 D. 果酒发酵时温度宜控制在18-25℃，泡菜发酵时温度宜控制在30-35℃ 【答案】B 【解析】 【详解】A、向泡菜坛盖边沿水槽注满水的作用是隔绝外界空气，形成坛内无氧环境，满足乳酸菌厌氧代谢的需求，该操作无法实现内部无菌环境，A错误； B、水封结构下，坛内发酵产生的气体使内部气压升高时，可通过水槽向外排出，而外界的空气（含氧气）无法进入坛内，可维持无氧发酵环境，B正确； C、泡菜发酵全程不能开盖，开盖会导致氧气和杂菌进入，既会抑制厌氧的乳酸菌活动，还会造成杂菌污染使泡菜变质，坛内产生的气体可通过水封结构自行排出，无需开盖放气，C错误； D、果酒发酵利用酵母菌，适宜温度为18~25℃，但30~35℃是果醋发酵（醋酸菌）的适宜温度，并非泡菜乳酸菌发酵的适宜温度，D错误。 2. 如图表示精子入卵后，发生（或引起的）一系列变化形成受精卵的过程，下列叙述错误的是（ ） A. 图中X指卵细胞膜反应，Y指卵子完成减数分裂Ⅱ B. 精子的膜与卵细胞膜融合的瞬间便发生了X，防止多精入卵 C. 精子入卵后形成的雄原核比原来精子的核还大 D. 雌、雄原核充分发育后，相向移动，彼此靠近，核膜消失 【答案】B 【解析】 【详解】A、防止多精入卵的第二道屏障是卵细胞膜反应，因此X为卵细胞膜反应；精子入卵后可激活卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后形成雌原核，因此Y指卵子完成减数分裂Ⅱ，A正确； B、精子穿越透明带接触卵细胞膜的瞬间，首先发生透明带反应（第一道防止多精入卵的屏障），精子完全入卵后才发生卵细胞膜反应（X，第二道屏障），并非精卵细胞膜融合的瞬间发生X，B错误； C、精子入卵后尾部脱离、原有核膜破裂，之后形成新的核膜，最终形成的雄原核体积比原来精子的核更大，C正确； D、雌、雄原核充分发育后会相向移动、彼此靠近，随后核膜消失，二者的染色体会融合，最终形成受精卵，D正确。 3. 实验中常根据菌落外表特征鉴别微生物，进而对实验结果做出判断，下列实验不是根据菌落外表特征做出判断的是（ ） A. 艾弗里证明肺炎链球菌的转化因子是DNA B. 判断分离酵母菌的固体培养基是否被毛霉污染 C. 利用浸有抗生素的滤纸片筛选大肠杆菌中耐药性强的菌株 D. 判断在尿素为唯一氮源的培养基上生长的尿素降解菌是否有不同种类 【答案】C 【解析】 【分析】1、在艾弗里证明遗传物质是DNA的实验中，艾弗里将S型细菌的DNA、蛋白质、糖类等物质分离开，单独的、直接的观察它们各自的作用。另外还增加了一组对照实验，即DNA酶和S型活菌中提取的DNA与R型菌混合培养。 2、培养酵母菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。 3、抗生素消灭细菌的原理是抑制细菌细胞壁的合成、与细胞膜相互作用、干扰蛋白质的合成以及抑制核酸的复制和转录等。利用浸有抗生素的滤纸片筛选大肠杆菌中耐药性强的菌株可从抑菌圈边缘菌落挑取大肠杆菌，可能获得目的菌株。 4、将一定稀释度的样品接种在以尿素为唯一氮源的培养基上，并在适宜的条件下培养。分解尿素的微生物能在该培养基上生长繁殖，而不能利用尿素的微生物不能生长繁殖，这是因为只有能够分解尿素的微生物能够产生脲酶，从中获取氮源。 【详解】A、艾弗里将S型细菌的DNA、蛋白质、糖类等物质分离开，单独的、直接的观察它们各自的作用进行对比，R型肺炎双球菌没有荚膜（菌落表面粗糙），S型肺炎双球菌有荚膜（菌落表面光滑），该实验是通过观察培养基上形成的不同菌落特征，来判断转化是否成功的，A不符合题意; B、毛霉属于多细胞的真菌，由细胞形成菌丝，可根据毛霉的形态判定固体培养基是否是被毛霉污染了，B不符合题意; C、抗生素可消灭细菌，利用浸有抗生素的滤纸片筛选大肠杆菌中耐药性强的菌株是从抑菌圈边缘菌落挑取大肠杆菌来获得目的菌株，没有依靠菌落外表形态特征做出判断，C符合题意; D、不同尿素降解菌降解尿素的能力不同，因此在分离出的以尿素为唯一氮源的尿素降解菌后，若要验证其中是否有不同种类降解菌，可在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若根据菌落周围出现红色环带的大小判定其种类，D不符合题意。 故选C。 4. 马铃薯种植过程中很容易受到棒形杆菌的侵染导致维管束环状腐烂。棒形杆菌主要在种薯上传播，也可在土壤中存活。如图所示，利用特定的选择培养基可以从土壤中筛选出棒形杆菌，下列说法错误的是（ ） A. 从种植过患病马铃薯的土壤中取样更易筛选到目的菌 B. 平板划线法结果如图乙所示，则接种时接种环总共灼烧6次 C. 细菌一般在30～37℃的温度下培养1～2 d，选取菌落数稳定时的记录作为结果 D. 若图甲培养后的棒形杆菌菌落平均数为120个，则每克土壤约含棒形杆菌1.2×107个 【答案】D 【解析】 【详解】A、棒形杆菌可以在患病马铃薯的土壤中存活，种植过患病马铃薯的土壤中目的菌含量更高，因此从该土壤取样更易筛选到目的菌，A正确； B、平板划线法中，每次划线前后都需要灼烧接种环。图乙共完成了5次划线，因此接种前灼烧1次，每次划线后灼烧1次，总共灼烧5+1=6次，B正确； C、细菌的适宜培养温度为30～37℃，培养1～2d后，待菌落数稳定时记录结果，可以避免因培养时间不足导致菌落计数偏小，C正确； D、称取1g某土壤样品，转入99mL无菌水中，稀释了100倍，而经梯度稀释后，此时相当于稀释了100000倍，从图③号试管取0.1mL菌悬液涂布在固体培养基上，重复3次，若菌落平均数为120个，故该样本中每克土壤约含棒形杆菌（120÷0.1）×100000=1.2×108个/g，D错误。 5. 为高效检测抗菌剂的抗菌效果，研究人员构建了能够表达外源荧光素酶的重组菌Q，将其接种到有足量荧光素的液体培养基中，一段时间后添加待测抗菌剂，定时检测培养液的荧光强度。下列有关该实验的叙述，错误的是（　　） A. 需要设置一个对照组保证检测结果的准确性 B. 实验过程中所用的培养基是一种鉴定培养基 C. 在重组菌Q胞内的荧光素酶可能催化荧光素水解 D. 培养液的荧光强度变化可作为抗菌效果的判断依据 【答案】C 【解析】 【详解】A、实验需设置不加抗菌剂的对照组，以排除荧光素自然分解、细菌自然死亡等因素对荧光强度的干扰，确保结果准确性，A正确； B、该培养基中加入了 “足量荧光素”，其核心作用并非筛选细菌，而是作为底物，通过 “荧光强度” 这一特异性反应来鉴定 / 判断细菌的代谢活性（死活）。因此，从功能上看，它属于鉴定培养基，B正确； C、如果酶仅仅是催化水解，通常不会伴随明显的发光现象。实验的核心依据是 “荧光强度”，这意味着反应类型是氧化还原反应，C错误； D、抗菌剂抑制重组菌Q生长会降低其代谢活性，导致荧光素酶催化效率下降，培养液荧光强度减弱程度可反映抗菌效果，D正确。 故选C。 6. 自然条件下，甲、乙两种鱼均通过体外受精繁殖后代，甲属于国家保护的稀有物种，乙的种群数量多且繁殖速度较甲快。我国科学家通过下图所示流程进行相关研究，以期用于濒危鱼类的保护。下列叙述正确的是（ ） A. 诱导后的iPGCs具有胚胎干细胞的特性 B. 移植的iPGCs最终产生的配子具有相同的遗传信息 C. 该实验中，子一代的遗传物质来源于物种甲 D. 通过该实验可以获得甲的克隆 【答案】C 【解析】 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理。②配种或人工授精。③对胚胎的收集、检查、培养或保存。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。 体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。 【详解】A、胚胎干细胞具有发育的全能性，iPGCs是诱导型原始生殖细胞，具有成为卵原细胞或精原细胞的潜能，诱导后的iPGCs不具有胚胎干细胞的特性，A错误； B、移植的iPGCs分化形成卵原细胞或精原细胞后，通过减数分裂形成配子，在减数分裂过程中基因会发生重组，最终产生的配子的遗传信息不一定相同，B错误； C、由图可知，将物种甲的囊胚期的iPGCs移植到阻止PGCs形成的乙鱼的胚胎中，培育出的乙鱼的生殖腺中的细胞由甲鱼的iPGCs增值分化而来，该乙鱼再与物种甲杂交，配子均是由物种甲的生殖腺细胞产生，故子一代的遗传物质来源于物种甲，C正确； D、克隆属于无性繁殖，该实验过程中涉及到有性生殖，D错误。 故选C。 7. 谷氨酸除用于制造味精外，还可以用来治疗神经衰弱以及配制营养注射液等，我国的谷氨酸发酵在产量、质量等方面已有了较大的提高。下列关于谷氨酸发酵的叙述，不正确的是（ ） A. 发酵之前要对谷氨酸菌种进行扩大培养 B. 谷氨酸发酵生产中，中性或弱碱性条件下容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺 C. 在发酵结束之后，采取适当的提取、分离和纯化措施可获得谷氨酸 D. 菌体中谷氨酸的排出，有利于谷氨酸的合成和产量的提高 【答案】B 【解析】 【详解】A、工业发酵前对菌种进行扩大培养，可获得足够数量的高活性菌种，缩短发酵周期，提高发酵效率，A正确； B、谷氨酸发酵生产中，酸性条件下容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，中性或弱碱性条件下更易积累谷氨酸，B错误； C、发酵获得的产物需要经过提取、分离、纯化的步骤，才能得到符合要求的谷氨酸产品，C正确； D、谷氨酸在菌体内大量积累会通过反馈调节抑制相关酶的活性，阻碍谷氨酸的进一步合成，及时将谷氨酸排出菌体可解除反馈抑制，提高谷氨酸产量，D正确。 8. 人RecQ解旋酶可作为新的白血病和乳腺癌肿瘤干细胞标志物。以RecQ解旋酶免疫小鼠为材料，融合免疫小鼠脾脏中的细胞及骨髓瘤细胞，筛选出杂交瘤细胞以此制备抗RecQ解旋酶单克隆抗体，流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 在利用96孔板筛选杂交瘤细胞时，需要稀释至每孔尽量只含1个细胞 B. ③过程中灭活的病毒能诱导A和B细胞表面的糖蛋白失去活性促进细胞融合 C. 将能产生抗体的杂交瘤细胞Ⅱ注入小鼠体内，从血浆中大量分离抗体 D. 抗RecQ解旋酶单克隆抗体与RecQ解旋酶特异性结合，促进了肿瘤细胞的增殖 【答案】A 【解析】 【详解】A、在利用96孔板筛选杂交瘤细胞时，需要进行有限稀释，使每孔最多1个细胞，这样可以保证每孔中的细胞是由单个细胞增殖而来，从而筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，A正确； B、③过程中灭活的病毒能诱导细胞融合，其原理是病毒表面的糖蛋白等物质可以与细胞膜上的糖蛋白等受体结合，进而促进细胞融合，而不是使细胞表面糖蛋白失去活性，B错误； C、将能产生抗体的杂交瘤细胞Ⅱ注入小鼠体内，从小鼠的腹水中大量分离抗体，C错误； D、人RecQ解旋酶可作为肿瘤干细胞标志物，抗RecQ解旋酶单克隆抗体与RecQ解旋酶特异性结合，会抑制肿瘤细胞的增殖等相关活动，而不是促进肿瘤细胞增殖，D错误。 9. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的分析，正确的是（　　） A. 可选择羊成熟的红细胞作为提取细胞中DNA的材料 B. 研磨液在4℃下静置，主要目的是降低DNA分子的溶解度 C. 在上清液中加入预冷酒精后轻缓搅拌，可避免DNA分子的断裂 D. 用二苯胺试剂对粗提取的DNA进行鉴定时无需设置对照实验 【答案】C 【解析】 【详解】A、羊属于哺乳动物，哺乳动物成熟红细胞没有细胞核和众多细胞器，几乎不含DNA，无法作为提取DNA的实验材料，A错误； B、研磨液在4℃下静置的主要目的是降低DNA酶的活性，防止DNA被酶降解，B错误； C、在上清液中加入预冷酒精后轻缓搅拌，可减少对DNA分子的机械损伤，避免DNA分子断裂，便于收集到完整的DNA絮状物，C正确； D、用二苯胺试剂鉴定DNA时需要设置对照实验，可排除其他物质对实验结果的干扰，保证实验结论的科学性，D错误。 10. 利用植物细胞培养技术在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养使其增殖，可获得植物细胞的某些次生代谢物。下列说法正确的是（ ） A. 利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物 B. 植物细胞体积小，故不能通过该技术进行其产物的工厂化生产 C. 次生代谢物是植物所必需的，但含量少，应选择产量高的细胞进行培养 D. 该技术主要利用促进细胞生长的培养条件提高单个细胞中次生代谢物的含量 【答案】A 【解析】 【分析】由于植物细胞的次生代谢物含量很低，从植物组织提取会大量破坏植物资源，有些产物又不能或难以通过化学合成途径得到，因此人们期望利用植物细胞培养来获得目标产物，这个过程就是细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、有些产物不能或难以通过化学合成途径得到，故可利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物，A正确； B、利用植物细胞培养技术在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养使其增殖，可获得植物细胞的某些次生代谢物，故可通过该技术进行植物细胞产物的工厂化生产，B错误； C、次生代谢物不是植物生长所必需的，其含量少，可以通过增加细胞的数量来增加次生代谢产物的产量，C错误； D、细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞分裂的培养条件，提高了多个细胞中次生代谢物的含量，不能提高单个细胞中次生代谢物的含量，D错误。 故选A。 11. 基于AI（人工智能）的蛋白质设计方法可以利用现有蛋白质数据库以及机器深度“学习算法”来预测新型蛋白质的结构及功能。下列说法错误的是（ ） A. AI可帮助人们更深入了解蛋白质的结构与功能关系 B. AI预测新型蛋白质的结构和功能依据的原理是中心法则 C. 可通过改造或合成基因来获得AI设计的蛋白质 D. AI可帮助人们高效地设计出自然界没有的蛋白质 【答案】B 【解析】 【分析】1、蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求，蛋白质工程能对现有的蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质；而基因工程原则上能生产自然界已有的蛋白质。 2、蛋白质工程的基本思路：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。 【详解】A、AI可以利用现有蛋白质数据库帮助人们更深入了解蛋白质的结构与功能关系，A正确； B、AI对新型蛋白质的预测应从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，B错误； C、对蛋白质的改造是通过改造或合成基因来完成的，C正确； D、AI可用于蛋白质工程，帮助人们高效地设计出自然界没有的蛋白质，D正确。 故选B。 12. 现将XplA和XplB两种能降解弹药使用后残留的危险污染物的基因转入实弹射击场的柳枝稷草中。若要通过PCR检测所获转基因柳枝稷草中是否含有正确插入的XplA和XplB基因，应选择的引物组合是（ ） A. 引物1+引物3 B. 引物1+引物2 C. 引物2+引物3 D. 引物3+引物4 【答案】A 【解析】 【分析】引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。用于PCR的引物长度通常为20~30个核苷酸，检测所获转基因柳枝稷草中是否含有正确插入的XplA 和 XplB 基因，应该是扩增包括XplA 和 XplB 基因和两侧T-DNA基因片段。 【详解】根据启动子的位置，若正确插入，模板链应为题甲图中下链，则引物1应与下链的3′端结合，引物3可以结合题甲图上链的3′端，若XplA和XplB基因正确插入，则使用引物1+引物3可通过PCR扩增出XplA和XplB基因融合片段，若XplA和XplB基因其中一个基因反接或者两个都基因反接，通过PCR均无法扩增出XplA和XplB基因融合片段，因此，使用引物1+引物3通过PCR可检测所获转基因柳枝稷草中是否含有正确插入的XplA和XplB基因，A正确；BCD错误。 故选A。 13. 关于生物武器的相关叙述，不正确的是（ ） A. 生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌 B. 生物武器可以直接或者通过食物、生活必需品等散布到其他地方 C. 经过基因重组的生物武器可能使受害国居民感染而施放者不易感染 D. 世界各国达成协议仅允许少数国家保存和使用生物武器 【答案】D 【解析】 【分析】生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。 【详解】A、结合分析可知，生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等，A正确； B、生物武器可以直接或者间接通过食物、生活必需品等散布，由此生物武器是可怕的，B正确； C、经过基因重组的生物武器，是经过定向改造之后产生的，因此可能使受害国居民感染而施放者不易感染，C正确； D、为了世界和平，各国共同努力达成协议，即不允许任何国家保存和使用生物武器，D错误。 故选D。 14. 如图是被农杆菌侵染的水稻植株的DNA片段，研究者将其连接成环并以此环为模板进行PCR，扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列，据此来确定T-DNA插入的具体位置。下列叙述正确的是（ ） A. 农杆菌在自然条件下主要侵染单子叶植物和裸子植物，其T-DNA位于Ti质粒上 B. PCR扩增时需要DNA连接酶和耐高温的DNA聚合酶，Mg²+可激活DNA聚合酶 C. 将用引物②③扩增出来的序列与水稻基因组序列比对可确定T-DNA的插入位置 D. 切割T-DNA两侧可用同种限制酶，经3轮扩增能得到含未知序列的等长的DNA片段 【答案】D 【解析】 【详解】A、农杆菌在自然条件下主要侵染双子叶植物和裸子植物，T-DNA存在于其Ti质粒上，A错误； B、PCR扩增时需要耐高温的DNA聚合酶，不需要DNA连接酶，Mg2+可激活DNA聚合酶，B错误； C、扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列，需要用引物①④扩增，将扩增出的目的片段与水稻基因组比对可确定T-DNA的插入位置，C错误； D、切割T-DNA两侧可用同种限制酶，产生相同黏性末端，经3轮扩增能得到含未知序列的等长DNA片段，D正确。 15. 下列关于试管婴儿和设计试管婴儿的叙述中，正确的是（ ） A. 二者都需要进行遗传学诊断 B. 二者都是为了解决不孕不育的问题 C. 二者都需要体外受精、早期胚胎培养及胚胎移植等技术 D. 试管婴儿的生殖方式是有性生殖，但设计试管婴儿属于无性生殖 【答案】C 【解析】 【分析】1、试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。 2、设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎，然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。 【详解】A、试管婴儿是在体外受精并经早期胚胎培养后进行胚胎移植获得的，不需要进行遗传学诊断，A错误； B、设计试管婴儿是为了治疗一些疾病，因此需要从体外受精获得的多个胚胎中进行筛选符合要求的胚胎进行移植，B错误； C、无论是试管婴儿还是设计试管婴儿，都需要体外受精、早期胚胎培养及胚胎移植等技术，C正确； D、试管婴儿和设计试管婴儿都存在受精作用，都属于有性生殖，D错误。 故选C。 二、不定项选择题（每小题有一项或多项符合题目要求，每小题3分，全部选对得3分，选对但不全得1分，错选或不答得0分，共15分） 16. MAC琼脂培养基常用于革兰氏阴性肠道致病细菌的分离和鉴定，其典型配方包含蛋白胨、乳糖、胆盐（抑制革兰氏阳性菌）、中性红（能使分解乳糖产酸的细菌呈粉色）和琼脂。下列叙述不正确的是（ ） A. 该培养基中蛋白胨、乳糖、琼脂可为所培养的细菌提供碳源 B. 用该培养基接种时，若使用接种环需进行多次灼烧灭菌 C. 配制好的MAC培养基经高压蒸汽灭菌后，在使用前应调节pH至弱碱性 D. 若将配方中的乳糖替换为葡萄糖，该培养基将失去选择作用 【答案】ACD 【解析】 【详解】A、琼脂是固体培养基的凝固剂，不属于营养物质，不能为细菌提供碳源，A错误； B、使用接种环接种（如平板划线法）时，接种操作前、每次划线后、操作结束后都需要灼烧接种环灭菌，因此需进行多次灼烧灭菌，B正确； C、配制培养基的正确流程是先调节pH，再进行高压蒸汽灭菌，若灭菌后再调pH会引入杂菌造成污染，C错误； D、该培养基的选择作用主要来自胆盐对革兰氏阳性菌的抑制效果，将乳糖替换为葡萄糖后胆盐仍存在，依然具备选择革兰氏阴性菌的作用，仅失去了鉴别分解乳糖产酸细菌的功能，D错误。 17. 培养足量的圆形软骨细胞是构建软骨组织的基础，其贴壁培养和悬浮培养的部分结果如图。其中贴壁培养的软骨细胞逐渐变为长梭形，悬浮培养的软骨细胞保持圆形并形成细胞团块。下列叙述正确的是（ ） A. 两种方式均需5%CO2来刺激细胞呼吸为增殖供能 B. 两种方式进行传代培养时均用酶处理后再离心收集细胞 C. 与悬浮培养相比，贴壁培养更有利于快速构建软骨组织 D. 随时间延长，P0和P4软骨细胞的增殖速率均先增大后减小 【答案】BD 【解析】 【详解】A、无论是贴壁培养，还是悬浮培养，CO2的作用均是维持培养液的pH的相对稳定，而非刺激细胞呼吸为增殖供能，A错误； B、贴壁培养的细胞需用胰蛋白酶处理后收集，而悬浮培养形成的细胞团块，为了后续传代常需蛋白酶分解以分散成单个细胞，再离心收集，B正确； C、贴壁培养的软骨细胞逐渐变为梭形，表现出一定程度的“成纤维样”去分化，不利于保持软骨细胞的圆形表型；而悬浮培养能帮助细胞维持圆形并形成团块，更有利于构建软骨组织，C错误； D、据图可知，无论是原代培养(P0)还是传代四代(P4)，都表现出了典型的“增殖速率先增大后减小”的生长曲线规律，D正确。 故选BD。 18. 波尔山羊享有“世界山羊之王”的美誉，具有生长速度快、肉质细嫩等优点。生产中常采用胚胎工程技术快速繁殖波尔山羊。下列叙述错误的是（ ） A. 选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行超数排卵处理 B. 胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测 C. 胚胎移植可提高受体母羊的繁殖潜力 D. 生产中对提供精子的波尔公山羊无需筛选 【答案】CD 【解析】 【详解】A、胚胎工程中供体需要选择遗传性状优良、健康的个体，对供体母羊进行超数排卵处理可获得更多卵母细胞，有利于后续胚胎培育，A正确； B、囊胚阶段的滋养层细胞将来发育为胎膜和胎盘，采集滋养层细胞进行遗传学检测不会影响将来发育为胎儿的内细胞团，因此可在胚胎移植前采用该方法做相关检测，B正确； C、胚胎移植可充分发挥优良供体母羊的繁殖潜力，受体母羊仅承担妊娠功能，其自身繁殖潜力并未提高，C错误； D、供体公山羊的精子携带的遗传物质会影响子代性状，因此需要筛选性状优良、精子活力合格的公山羊提供精子，D错误。 19. 如图为植物体细胞杂交过程，下列叙述错误的是（ ） A. 已知番茄、马铃薯分别为四倍体、二倍体，则“番茄—马铃薯”属于六倍体植株 B. 若细胞膜表面只有红色荧光，则融合的原生质体至少由两个番茄细胞形成 C. ③过程为脱分化，过程中杂种细胞失去了其特有的结构和功能 D. ③过程通常需要避光培养，愈伤组织需培养在密闭无菌的容器中 【答案】D 【解析】 【详解】A、植物体细胞杂交得到的杂种植株，染色体组数目为两种亲本细胞染色体组数目之和，番茄为四倍体、马铃薯为二倍体，因此“番茄—马铃薯”染色体组为4+2=6 ，属于异源六倍体，A正确； B、番茄原生质体带红色荧光标记，马铃薯原生质体带绿色荧光标记，融合的原生质体至少由2个细胞融合形成，若仅含红色荧光，说明参与融合的细胞均为番茄细胞，即至少由两个番茄细胞形成，B正确； C、③过程是杂种细胞经脱分化形成愈伤组织的过程，脱分化的实质是已分化的细胞失去其特有的结构和功能，转变为未分化的薄壁细胞的过程，C正确； D、③脱分化过程通常需要避光培养，愈伤组织培养需要无菌环境，但不能密闭，细胞有氧呼吸需要氧气，容器需要保证一定的透气性，D错误。 20. cDNA末端快速扩增技术（RACE），是一种基于逆转录PCR从样本中分别快速扩增cDNA的5′端和3′端的技术，特点是在仅知mRNA中间的部分序列可供设计特异性引物的条件下，仍能完成扩增，其过程如图所示。下列说法正确的是（ ） 注：mRNA3′末端天然存在的Poly（A）尾是一段腺苷酸长链；末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）在图中②链3′末端添加Poly（C）尾。 A. 逆转录酶、TdT和TaqDNA聚合酶参与RACE扩增cDNA序列 B. 与引物1相比，引物2是实现3′-RACE特异性扩增的决定因素 C. 图中3′-RACE和5′-RACE不能在同一PCR反应体系中同时进行 D. 将上述两种产物连接时，反应体系中需要添加引物1、4 【答案】ABC 【解析】 【详解】A、根据题干信息，cDNA末端快速扩增技术（RACE），是一种基于逆转录PCR从样本中分别快速扩增cDNA的5'端和3'端的技术，所以需要逆转录酶、TaqDNA聚合酶以及TdT，A正确； B、3' - RACE中，引物2是与已知序列互补的特异性引物，引物1是多聚T引物（利用mRNA的Poly(A)尾 ），实现特异性扩增的决定因素是引物2，B正确； C、引物2与引物3互补，3' - RACE和5' - RACE不能在同一PCR反应体系中同时进行，C正确； D、将上述两种产物连接时，由于引物2与引物3互补，两种产物变性后可通过碱基互补配对连接，不需要添加引物，D错误。 第Ⅱ卷 三、非选择题（共55分） 21. 大熊猫是我国特有的珍稀野生动物，每只成年大熊猫每日进食竹子量可达12～38 kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。回答下列问题： （1）为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以________为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于_______培养基。 （2）配制的培养基必须进行_________灭菌处理，目的是______________________________。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是____________________________。 （3）简要写出测定大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数的实验思路__________________________。 （4）为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株_______，理由是____________________。 菌株 秸秆总重（g） 秸秆残重（g） 秸秆失重（%） 纤维素降解率（%） A 2.00 1.51 24.50 16.14 B 2.00 1.53 23.50 14.92 C 2.00 1.42 29.00 23.32 【答案】（1） ①. 纤维素 ②. 选择 （2） ①. 高压蒸汽 ②. 为了杀死培养基中的所有微生物（微生物和芽孢、孢子） ③. 不接种培养（或空白培养） （3）将大熊猫新鲜粪便样液稀释适当倍数后，取0.1 mL涂布到若干个平板（每个稀释度至少涂布三个平板），对菌落数在30～300的平板进行计数，则可根据公式推测大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数 （4） ①. C ②. 接种C菌株后秸秆失重最多，纤维素降解率最大 【解析】 【小问1详解】 若想筛选纤维素分解菌，应将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以纤维素为唯一碳源的固体培养基上进行培养；由于该培养基能够筛选纤维素分解菌，因此该培养基从功能上分类属于选择培养基。 【小问2详解】 培养基的灭菌方法为高压蒸汽灭菌法，灭菌的目的是彻底杀死培养基中包括芽孢、孢子在内的所有微生物，避免杂菌和目标菌竞争营养或产生其他代谢物干扰实验结果；检测灭菌效果的常用方法是设置空白对照：培养未接种的培养基，若出现菌落说明灭菌不彻底，无菌落则说明灭菌合格。 【小问3详解】 测定活菌数常用稀释涂布平板法，梯度稀释可保证涂布后培养基上的单菌落由单个活菌繁殖而来，所以测定大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数的实验思路为：将大熊猫新鲜粪便样液稀释适当倍数后，取0.1 mL涂布到若干个平板（每个稀释度至少涂布三个平板），对菌落数在30～300的平板进行计数，则可根据公式（C÷V×M）推测大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数。 【小问4详解】 依据表格信息可知，接种菌株C后，秸秆失重最多，纤维素降解率最大，所以菌株C纤维素酶活力最高。 22. 乳糖不耐受症是由于人体小肠中乳糖酶缺乏，导致无法消化乳糖而引起的胃肠不适。利用基因工程菌生产乳糖酶，进而制备低乳糖乳制品，是解决该问题的重要途径。科研人员将乳酸克鲁维酵母的LacZ基因（编码乳糖酶）导入大肠杆菌构建工程菌，LacZ基因和质粒的结构如图甲所示。回答下列问题。 注：1．AmpR为氨苄青霉素抗性基因；2．限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ的识别序列分别为5′-G↓GATCC-3′和5′-G↓AATTC-3′。 （1）构建重组质粒是构建工程菌的核心工作。 ①若用单酶切法（仅用一种限制酶）构建重组质粒，应选择限制酶___________；在快速扩增LacZ基因时，需在2个引物的5′端添加__________________________________（填碱基序列）。 ②若用双酶切法（EcoRⅠ和BamHⅠ）构建重组质粒，需要利用基因编辑技术将LacZ基因中BamHⅠ识别序列进行替换。 （2）已知乳糖酶可以分解无色物质X-gal产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色。将重组质粒导入大肠杆菌后，检测大肠杆菌工程菌构建成功的思路是_______________________________________________。 （3）为便于分离纯化，研究人员将纤维素结合结构域（CBD）基因与LacZ基因融合，构建了新的表达载体（如图乙）。 注：1．F1、F2、R1、R2为引物；2．CBD基因编码的蛋白结构域能可逆地吸附在纤维素材料表面。 ①构建新的重组质粒后，为了确定CBD基因连接到质粒中且插入方向和位置正确需要PCR后电泳检测，若仅用一对引物，应选择图乙中的引物是________________________________________。 ②经检测，融合蛋白成功表达。请简述利用该融合蛋白的特性，分离获得纯净乳糖酶的基本思路：________________________________________________________________________________。 （4）若希望将该工程菌用于大规模工业化生产乳糖酶，在完成上述实验室构建和验证后，还需在哪些方面进行深入研究？（答出2点即可）________________________________________________________。 【答案】（1） ①. EcoRⅠ ②. 5′-GAATTC-3′ （2）将工程菌涂布在含X-gal（和氨苄青霉素）的固体培养基上，培养后筛选蓝色菌落 （3） ①. F2和R1 ②. 利用CBD与纤维素的亲和性获取融合蛋白，再切除CBD获得纯净乳糖酶 （4）发酵工程中培养基配方和发酵条件；乳糖酶的最适条件和热稳定性等合理即可 【解析】 【小问1详解】 ① 单酶切时，LacZ基因内部已经存在BamHⅠ的识别位点，使用BamHⅠ切割会破坏目的基因，因此只能选择EcoRⅠ；需要在引物的5′端添加EcoRⅠ的识别序列GAATTC，方便后续酶切构建重组质粒。 ②若用双酶切法（EcoRⅠ和BamHⅠ）构建重组质粒，需要利用基因编辑技术将LacZ基因中BamHⅠ识别序列进行替换，替换过程中需要保留切割部位的密码子不发生改变。 【小问2详解】 氨苄青霉素抗性基因可筛选出成功导入质粒的大肠杆菌，而成功构建的工程菌会表达乳糖酶，分解X−gal使菌落变蓝，因此可通过将工程菌涂布在含氨苄青霉素和X-gal的固体培养基上，培养后筛选蓝色菌落。 【小问3详解】 ①PCR验证插入方向时，引物需要分别结合在插入片段CBD的上游、下游目的序列LacZ的下游，只有F2（CBD上游正向引物）和R1（LacZ下游反向引物）符合，若能扩增出对应长度的片段，说明插入方向和位置正确。 ② 结合题意可知，为了获得纯净乳糖酶，需要利用CBD与纤维素的亲和性获取融合蛋白，再切除CBD获得纯净乳糖酶。 【小问4详解】 若希望将该工程菌用于大规模工业化生产乳糖酶，在完成上述实验室构建和验证后，还需在发酵工程中培养基配方和发酵条件；乳糖酶的最适条件和热稳定性等方面进行深入研究，这样可以提高乳糖酶产量。 23. 甲植物细胞核基因具有耐盐碱效应，乙植物细胞质基因具有高产效应。某研究小组用甲、乙两种植物细胞进行体细胞杂交相关研究，基本过程包括获取原生质体、诱导原生质体融合、筛选融合细胞、杂种植株再生和鉴定，最终获得高产耐盐碱再生植株。回答下列问题： （1）为了便于观察细胞融合的状况，通常用不同颜色的原生质体进行融合，若甲植物原生质体采用幼苗的根为外植体，则乙植物可用幼苗的____________为外植体。 （2）通常采用相应的酶进行去壁处理来获取原生质体。在原生质体融合前，需对原生质体进行处理，分别使甲原生质体和乙原生质体的_____________失活。对处理后的原生质体在显微镜下用______________计数，确定原生质体密度。两种原生质体1∶1混合后，通过添加适宜浓度的PEG进行融合；一定时间后，加入过量的培养基进行稀释，稀释的目的是____________________________________。除了化学法，诱导植物细胞原生质体融合的方法还有_______、_________等物理法。 （3）将融合原生质体悬浮液和液态的琼脂糖混合，在凝固前倒入培养皿，融合原生质体分散固定在平板中，并独立生长、分裂形成愈伤组织。同一块愈伤组织所有细胞源于_________________。下列各项中能说明这些愈伤组织只能来自于杂种细胞的理由有__________。 A．甲、乙原生质体经处理后失活，无法正常生长、分裂 B．同种融合的原生质体因甲或乙原生质体失活而不能生长、分裂 C．培养基含有抑制物质，只有杂种细胞才能正常生长、分裂 D．杂种细胞由于结构和功能完整可以生长、分裂 【答案】（1）叶片 （2） ①. 细胞质、细胞核 ②. 血细胞计数板 ③. 降低PEG浓度，使其失去融合作用 ④. 电融合法 ⑤. 离心法 （3） ①. 一个融合原生质体 ②. ABD 【解析】 【小问1详解】 为了便于观察细胞融合的状况，通常用不同颜色的原生质体进行融合，若甲植物原生质体采用幼苗的根为外植体，则乙植物可用绿色幼苗的叶片为外植体。 【小问2详解】 植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，所以通常采用纤维素酶和果胶酶进行去壁处理来获取原生质体。为使获得的杂种细胞具有耐盐碱效应（甲植物的细胞核基因）和高产效应（乙植物的细胞质基因），所以在原生质体融合前要分别使甲原生质体的细胞质和乙原生质体的细胞核失活。原生质体体积比较大，所以对处理后的原生质体在显微镜下用血细胞计数板进行计数，以确定原生质体的密度，用适宜浓度的PEG促进融合后，加入过量的培养基进行稀释，稀释的目的是降低PEG浓度，使其失去促融合作用，终止原生质体融合。除了化学法外，诱导植物细胞原生质体融合的方法还有电融合法、离心法等物理方法。 【小问3详解】 愈伤组织是单个细胞经有丝分裂形成的细胞群，因此同一块愈伤组织的所有细胞均来自同一个融合原生质体。由于甲、乙原生质体分别破坏了细胞质和细胞核，未融合的原生质体和同种融合的原生质体都不能正常生长、分裂，只有杂种细胞具有完整的核质结构，可以正常生长、分裂，因此这些愈伤组织只能来自杂种细胞，ABD符合题意，C不符合题意。 24. 异种器官移植是解决人类器官短缺的重要途径。近年来，我国科研团队在此领域取得了突破性进展。云南农业大学某研究团队与多家机构合作，于2025年成功培育出无特定病原体的10基因编辑猪，并利用体细胞核移植技术克隆10基因编辑猪，用于异种器官移植研究，主要技术操作流程如图所示。回答下列问题。 （1）过程①所用培养液的成分除无机盐、维生素、血清外，还含的营养成分有________（答出2点即可）等，培养箱中需要通入含95%空气和5%CO2的混合气体，其中CO2的主要作用是________。 （2）过程②可通过显微操作对MⅡ期卵母细胞进行“去核”，“去核”实际上去除的是“纺锤体—染色体复合物”，理由是________。 （3）过程③可采用________（答出2点即可）等化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程。 （4）为提高基因编辑猪细胞核移植的成功率，可以用胚胎细胞核移植替代体细胞核移植，原因是________。 （5）研究人员培育10基因编辑猪的过程包括：敲除猪的3个抗原基因（GGTA1、CMAH和β4GalNT2）和导入7个人源基因（hCD55、hCD59、hTBM等），其中敲除猪的3个抗原基因的目的是________。若要检测基因编辑猪胚胎中是否成功导入hCD55基因，操作的基本程序是：先从被测胚胎中取出几个细胞，提取DNA，然后用hCD55基因的一段碱基设计________，以胚胎细胞中的DNA作为模板，进行PCR扩增，最后用hCD55基因特异性探针检测扩增产物，也可以采用________来鉴定PCR的产物。 【答案】（1） ①. 糖类、氨基酸 ②. 维持培养液的pH （2）MⅡ期卵母细胞中原有的核仁已解体，核膜已消失，新的核膜和核仁未出现，新的细胞核还没有形成 （3）Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂 （4）动物的胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植 （5） ①. 减少异种器官移植时的免疫排斥反应 ②. 引物 ③. 琼脂糖凝胶电泳 【解析】 【分析】分析图解：以 “普通猪” 为基础，先通过 “基因编辑” 获得 “10 基因编辑猪”，作为供体细胞的来源（提供含目标编辑基因的细胞核）； 同时以 “普通猪” 的卵母细胞为材料，经 “去核” 处理获得去核卵母细胞（作为核移植的受体细胞，提供细胞质环境）；将供体细胞与去核卵母细胞通过技术手段融合，形成 “重构胚”（含供体细胞核与受体细胞质的重组细胞）；重构胚经激活、培养后，通过 “胚胎移植” 技术转移至 “代孕母猪” 体内，最终发育为 “克隆猪（10 基因编辑猪）”。 【小问1详解】 动物细胞培养所需的营养物质包括无机盐、维生素、血清，还需糖类、氨基酸等有机营养成分，以满足细胞代谢需求。 培养箱中通入含95%空气和 5% CO2的混合气体，CO2的主要作用是维持培养液的 pH，保证细胞培养环境的稳定性。 【小问2详解】 MⅡ 期卵母细胞处于减数第二次分裂中期，此时原有的核仁已解体，核膜已消失，新的核膜和核仁未出现，新的细胞核还没有形成，所以 “去核” 实际去除的是 “纺锤体 - 染色体复合物”。 【小问3详解】 激活重构胚使其完成细胞分裂和发育进程的化学方法有Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等，这些方法可模拟体内环境信号，启动胚胎发育程序。 【小问4详解】 胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易；而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难；动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。因此，用胚胎细胞核移植替代体细胞核移植，可提高基因编辑猪细胞核移植的成功率。 【小问5详解】 敲除猪的 3 个抗原基因（GGTA1、CMAH和β4GalNT2），目的是减少异种器官移植时的免疫排斥反应，因为这些抗原基因表达的产物会引发人体免疫系统的攻击。 PCR 技术需要根据目的基因（hCD55 基因）的一段碱基设计引物，引物与模板 DNA 结合后才能启动扩增过程。 鉴定 PCR 产物可采用琼脂糖凝胶电泳，通过观察电泳条带的位置和大小，判断是否成功扩增出 hCD55 基因片段。 25. 培育转VEGF基因的山羊，有利于提高羊绒产量。但转基因动物含有标记基因可能造成安全性问题。研究者利用Cre/LoxP系统删除标记基因。回答下列问题。 （1）基因表达载体除了含有标记基因外，还应有____（写出两点）等，其中标记基因的作用是____。 （2）如图1所示，Cre酶能切割特定位点形成黏性末端。结合图1和图2分析，Cre酶能将____（填“①”或“②”）中的目标片段删除，并且其余片段末端可以连接形成一个DNA分子。 （3）为保证转化后可删除标记基因并构建P1，图3中引物a和b应添加的LoxP序列分别为5’-____-3’、5’-____-3’（写出已知的8个碱基），同时限制酶识别序列需添加在LoxP序列的____端。用BglⅡ和HindⅢ处理P1并对产物进行电泳鉴定，结果长度为____，说明P1构建成功。 （4）将P1导入山羊皮肤成纤维细胞，经检测VEGF已成功表达。此时还需要____的作用将标记基因删除。利用荧光显微镜观察，结果为____，说明已成功删除标记基因。 【答案】（1） ①. 启动子、目的基因、终止子、复制原点 ②. 便于重组DNA分子的筛选 （2）② （3） ①. GCATACAT ②. ATGTATGC ③. 5’ ④. 3600bp和4100bp （4） ①. Cre酶 ②. 无（红色）荧光 【解析】 【小问1详解】 基因表达载体的核心组成包括： 启动子：RNA 聚合酶的结合位点，启动目的基因的转录； 目的基因：需要表达的外源基因（本题中为 VEGF 基因）； 终止子：终止转录的 DNA 序列； 复制原点：载体在受体细胞中复制的起点； 标记基因：如抗生素抗性基因、荧光蛋白基因等，作用是筛选出成功导入重组载体的受体细胞（未导入载体的细胞无法在选择培养基上存活，或无荧光信号）。 【小问2详解】 结合图 1 和图 2 分析： 图 1 显示：Cre 酶识别 LoxP 序列，在5'-GCATACAT...-3'和3'-CGTATGTA...-5'之间剪切，产生黏性末端； 图 2 中，②的两个 LoxP 序列方向一致，Cre 酶剪切后，两个 LoxP 之间的目标片段被删除，剩余的黏性末端可以互补连接，形成完整的 DNA 分子； ①的 LoxP 序列方向相反，Cre 酶剪切后会导致片段倒位，而非删除。因此 Cre 酶能将②中的目标片段删除。 【小问3详解】 根据图 1，LoxP 序列的已知 8 个碱基为5'-GCATACAT-3'（正链），其互补链为3'-CGTATGTA-5'（即5'-ATGTATGC-3'）。引物 a 和 b 需要添加 LoxP 序列，因此引物 a 添加5'-GCATACAT-3'，引物 b 添加5'-ATGTATGC-3'。限制酶需要识别并切割 DNA，因此其识别序列必须添加在 LoxP 序列的5' 端，才能保证后续酶切操作正常进行。图 3 中，P₁载体总长度为 7700bp，VEGF 基因长度为 5600bp。 用HindⅢ单酶切：载体被切成 1 个片段，长度为 7700bp； 用BglⅡ 和 HindⅢ双酶切：载体被切成 2 个片段： 含 VEGF 的片段：7700bp - 4100bp = 3600bp, 含 LoxP、DsRed、KanR的片段：4100bp（图中标注）因此电泳结果出现3600bp 和 4100bp两个条带，说明 P₁构建成功。 【小问4详解】 本题利用Cre/LoxP 系统删除标记基因，因此需要Cre 酶识别 LoxP 序列，剪切并删除两个 LoxP 之间的标记基因（DsRed 红色荧光基因、KanR卡那霉素抗性基因）。标记基因包含DsRed 红色荧光基因，若标记基因被成功删除，细胞将不再表达红色荧光蛋白。因此用荧光显微镜观察，结果为无（红色）荧光，说明标记基因已成功删除。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 市一中分校区2026～2027学年度第一学期期中考试试题 高二生物 答题要求： 1．考试时间75分钟，试卷满分100分 2．用黑色笔作答 3．考试结束只交答题纸 第Ⅰ卷 一、单选题（每题2分，每题只有一个选项正确，共30分） 1. 下列关于“泡菜制作”相关内容说法正确的是（ ） A. 向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水形成内部无菌环境 B. 向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入 C. 泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气 D. 果酒发酵时温度宜控制在18-25℃，泡菜发酵时温度宜控制在30-35℃ 2. 如图表示精子入卵后，发生（或引起的）一系列变化形成受精卵的过程，下列叙述错误的是（ ） A. 图中X指卵细胞膜反应，Y指卵子完成减数分裂Ⅱ B. 精子的膜与卵细胞膜融合的瞬间便发生了X，防止多精入卵 C. 精子入卵后形成的雄原核比原来精子的核还大 D. 雌、雄原核充分发育后，相向移动，彼此靠近，核膜消失 3. 实验中常根据菌落外表特征鉴别微生物，进而对实验结果做出判断，下列实验不是根据菌落外表特征做出判断的是（ ） A. 艾弗里证明肺炎链球菌的转化因子是DNA B. 判断分离酵母菌的固体培养基是否被毛霉污染 C. 利用浸有抗生素的滤纸片筛选大肠杆菌中耐药性强的菌株 D. 判断在尿素为唯一氮源的培养基上生长的尿素降解菌是否有不同种类 4. 马铃薯种植过程中很容易受到棒形杆菌的侵染导致维管束环状腐烂。棒形杆菌主要在种薯上传播，也可在土壤中存活。如图所示，利用特定的选择培养基可以从土壤中筛选出棒形杆菌，下列说法错误的是（ ） A. 从种植过患病马铃薯的土壤中取样更易筛选到目的菌 B. 平板划线法结果如图乙所示，则接种时接种环总共灼烧6次 C. 细菌一般在30～37℃的温度下培养1～2 d，选取菌落数稳定时的记录作为结果 D. 若图甲培养后的棒形杆菌菌落平均数为120个，则每克土壤约含棒形杆菌1.2×107个 5. 为高效检测抗菌剂的抗菌效果，研究人员构建了能够表达外源荧光素酶的重组菌Q，将其接种到有足量荧光素的液体培养基中，一段时间后添加待测抗菌剂，定时检测培养液的荧光强度。下列有关该实验的叙述，错误的是（　　） A. 需要设置一个对照组保证检测结果的准确性 B. 实验过程中所用的培养基是一种鉴定培养基 C. 在重组菌Q胞内的荧光素酶可能催化荧光素水解 D. 培养液的荧光强度变化可作为抗菌效果的判断依据 6. 自然条件下，甲、乙两种鱼均通过体外受精繁殖后代，甲属于国家保护的稀有物种，乙的种群数量多且繁殖速度较甲快。我国科学家通过下图所示流程进行相关研究，以期用于濒危鱼类的保护。下列叙述正确的是（ ） A. 诱导后的iPGCs具有胚胎干细胞的特性 B. 移植的iPGCs最终产生的配子具有相同的遗传信息 C. 该实验中，子一代的遗传物质来源于物种甲 D. 通过该实验可以获得甲的克隆 7. 谷氨酸除用于制造味精外，还可以用来治疗神经衰弱以及配制营养注射液等，我国的谷氨酸发酵在产量、质量等方面已有了较大的提高。下列关于谷氨酸发酵的叙述，不正确的是（ ） A. 发酵之前要对谷氨酸菌种进行扩大培养 B. 谷氨酸发酵生产中，中性或弱碱性条件下容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺 C. 在发酵结束之后，采取适当的提取、分离和纯化措施可获得谷氨酸 D. 菌体中谷氨酸的排出，有利于谷氨酸的合成和产量的提高 8. 人RecQ解旋酶可作为新的白血病和乳腺癌肿瘤干细胞标志物。以RecQ解旋酶免疫小鼠为材料，融合免疫小鼠脾脏中的细胞及骨髓瘤细胞，筛选出杂交瘤细胞以此制备抗RecQ解旋酶单克隆抗体，流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 在利用96孔板筛选杂交瘤细胞时，需要稀释至每孔尽量只含1个细胞 B. ③过程中灭活的病毒能诱导A和B细胞表面的糖蛋白失去活性促进细胞融合 C. 将能产生抗体的杂交瘤细胞Ⅱ注入小鼠体内，从血浆中大量分离抗体 D. 抗RecQ解旋酶单克隆抗体与RecQ解旋酶特异性结合，促进了肿瘤细胞的增殖 9. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的分析，正确的是（　　） A. 可选择羊成熟的红细胞作为提取细胞中DNA的材料 B. 研磨液在4℃下静置，主要目的是降低DNA分子的溶解度 C. 在上清液中加入预冷酒精后轻缓搅拌，可避免DNA分子的断裂 D. 用二苯胺试剂对粗提取的DNA进行鉴定时无需设置对照实验 10. 利用植物细胞培养技术在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养使其增殖，可获得植物细胞的某些次生代谢物。下列说法正确的是（ ） A. 利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物 B. 植物细胞体积小，故不能通过该技术进行其产物的工厂化生产 C. 次生代谢物是植物所必需的，但含量少，应选择产量高的细胞进行培养 D. 该技术主要利用促进细胞生长的培养条件提高单个细胞中次生代谢物的含量 11. 基于AI（人工智能）的蛋白质设计方法可以利用现有蛋白质数据库以及机器深度“学习算法”来预测新型蛋白质的结构及功能。下列说法错误的是（ ） A. AI可帮助人们更深入了解蛋白质的结构与功能关系 B. AI预测新型蛋白质的结构和功能依据的原理是中心法则 C. 可通过改造或合成基因来获得AI设计的蛋白质 D. AI可帮助人们高效地设计出自然界没有的蛋白质 12. 现将XplA和XplB两种能降解弹药使用后残留的危险污染物的基因转入实弹射击场的柳枝稷草中。若要通过PCR检测所获转基因柳枝稷草中是否含有正确插入的XplA和XplB基因，应选择的引物组合是（ ） A. 引物1+引物3 B. 引物1+引物2 C. 引物2+引物3 D. 引物3+引物4 13. 关于生物武器的相关叙述，不正确的是（ ） A. 生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌 B. 生物武器可以直接或者通过食物、生活必需品等散布到其他地方 C. 经过基因重组的生物武器可能使受害国居民感染而施放者不易感染 D. 世界各国达成协议仅允许少数国家保存和使用生物武器 14. 如图是被农杆菌侵染的水稻植株的DNA片段，研究者将其连接成环并以此环为模板进行PCR，扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列，据此来确定T-DNA插入的具体位置。下列叙述正确的是（ ） A. 农杆菌在自然条件下主要侵染单子叶植物和裸子植物，其T-DNA位于Ti质粒上 B. PCR扩增时需要DNA连接酶和耐高温的DNA聚合酶，Mg²+可激活DNA聚合酶 C. 将用引物②③扩增出来的序列与水稻基因组序列比对可确定T-DNA的插入位置 D. 切割T-DNA两侧可用同种限制酶，经3轮扩增能得到含未知序列的等长的DNA片段 15. 下列关于试管婴儿和设计试管婴儿的叙述中，正确的是（ ） A. 二者都需要进行遗传学诊断 B. 二者都是为了解决不孕不育的问题 C. 二者都需要体外受精、早期胚胎培养及胚胎移植等技术 D. 试管婴儿的生殖方式是有性生殖，但设计试管婴儿属于无性生殖 二、不定项选择题（每小题有一项或多项符合题目要求，每小题3分，全部选对得3分，选对但不全得1分，错选或不答得0分，共15分） 16. MAC琼脂培养基常用于革兰氏阴性肠道致病细菌的分离和鉴定，其典型配方包含蛋白胨、乳糖、胆盐（抑制革兰氏阳性菌）、中性红（能使分解乳糖产酸的细菌呈粉色）和琼脂。下列叙述不正确的是（ ） A. 该培养基中蛋白胨、乳糖、琼脂可为所培养的细菌提供碳源 B. 用该培养基接种时，若使用接种环需进行多次灼烧灭菌 C. 配制好的MAC培养基经高压蒸汽灭菌后，在使用前应调节pH至弱碱性 D. 若将配方中的乳糖替换为葡萄糖，该培养基将失去选择作用 17. 培养足量的圆形软骨细胞是构建软骨组织的基础，其贴壁培养和悬浮培养的部分结果如图。其中贴壁培养的软骨细胞逐渐变为长梭形，悬浮培养的软骨细胞保持圆形并形成细胞团块。下列叙述正确的是（ ） A. 两种方式均需5%CO2来刺激细胞呼吸为增殖供能 B. 两种方式进行传代培养时均用酶处理后再离心收集细胞 C. 与悬浮培养相比，贴壁培养更有利于快速构建软骨组织 D. 随时间延长，P0和P4软骨细胞的增殖速率均先增大后减小 18. 波尔山羊享有“世界山羊之王”的美誉，具有生长速度快、肉质细嫩等优点。生产中常采用胚胎工程技术快速繁殖波尔山羊。下列叙述错误的是（ ） A. 选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行超数排卵处理 B. 胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测 C. 胚胎移植可提高受体母羊的繁殖潜力 D. 生产中对提供精子的波尔公山羊无需筛选 19. 如图为植物体细胞杂交过程，下列叙述错误的是（ ） A. 已知番茄、马铃薯分别为四倍体、二倍体，则“番茄—马铃薯”属于六倍体植株 B. 若细胞膜表面只有红色荧光，则融合的原生质体至少由两个番茄细胞形成 C. ③过程为脱分化，过程中杂种细胞失去了其特有的结构和功能 D. ③过程通常需要避光培养，愈伤组织需培养在密闭无菌的容器中 20. cDNA末端快速扩增技术（RACE），是一种基于逆转录PCR从样本中分别快速扩增cDNA的5′端和3′端的技术，特点是在仅知mRNA中间的部分序列可供设计特异性引物的条件下，仍能完成扩增，其过程如图所示。下列说法正确的是（ ） 注：mRNA3′末端天然存在的Poly（A）尾是一段腺苷酸长链；末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）在图中②链3′末端添加Poly（C）尾。 A. 逆转录酶、TdT和TaqDNA聚合酶参与RACE扩增cDNA序列 B. 与引物1相比，引物2是实现3′-RACE特异性扩增的决定因素 C. 图中3′-RACE和5′-RACE不能在同一PCR反应体系中同时进行 D. 将上述两种产物连接时，反应体系中需要添加引物1、4 第Ⅱ卷 三、非选择题（共55分） 21. 大熊猫是我国特有的珍稀野生动物，每只成年大熊猫每日进食竹子量可达12～38 kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。回答下列问题： （1）为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以________为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于_______培养基。 （2）配制的培养基必须进行_________灭菌处理，目的是______________________________。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是____________________________。 （3）简要写出测定大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数的实验思路__________________________。 （4）为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株_______，理由是____________________。 菌株 秸秆总重（g） 秸秆残重（g） 秸秆失重（%） 纤维素降解率（%） A 2.00 1.51 24.50 16.14 B 2.00 1.53 23.50 14.92 C 2.00 1.42 29.00 23.32 22. 乳糖不耐受症是由于人体小肠中乳糖酶缺乏，导致无法消化乳糖而引起的胃肠不适。利用基因工程菌生产乳糖酶，进而制备低乳糖乳制品，是解决该问题的重要途径。科研人员将乳酸克鲁维酵母的LacZ基因（编码乳糖酶）导入大肠杆菌构建工程菌，LacZ基因和质粒的结构如图甲所示。回答下列问题。 注：1．AmpR为氨苄青霉素抗性基因；2．限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ的识别序列分别为5′-G↓GATCC-3′和5′-G↓AATTC-3′。 （1）构建重组质粒是构建工程菌的核心工作。 ①若用单酶切法（仅用一种限制酶）构建重组质粒，应选择限制酶___________；在快速扩增LacZ基因时，需在2个引物的5′端添加__________________________________（填碱基序列）。 ②若用双酶切法（EcoRⅠ和BamHⅠ）构建重组质粒，需要利用基因编辑技术将LacZ基因中BamHⅠ识别序列进行替换。 （2）已知乳糖酶可以分解无色物质X-gal产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色。将重组质粒导入大肠杆菌后，检测大肠杆菌工程菌构建成功的思路是_______________________________________________。 （3）为便于分离纯化，研究人员将纤维素结合结构域（CBD）基因与LacZ基因融合，构建了新的表达载体（如图乙）。 注：1．F1、F2、R1、R2为引物；2．CBD基因编码的蛋白结构域能可逆地吸附在纤维素材料表面。 ①构建新的重组质粒后，为了确定CBD基因连接到质粒中且插入方向和位置正确需要PCR后电泳检测，若仅用一对引物，应选择图乙中的引物是________________________________________。 ②经检测，融合蛋白成功表达。请简述利用该融合蛋白的特性，分离获得纯净乳糖酶的基本思路：________________________________________________________________________________。 （4）若希望将该工程菌用于大规模工业化生产乳糖酶，在完成上述实验室构建和验证后，还需在哪些方面进行深入研究？（答出2点即可）________________________________________________________。 23. 甲植物细胞核基因具有耐盐碱效应，乙植物细胞质基因具有高产效应。某研究小组用甲、乙两种植物细胞进行体细胞杂交相关研究，基本过程包括获取原生质体、诱导原生质体融合、筛选融合细胞、杂种植株再生和鉴定，最终获得高产耐盐碱再生植株。回答下列问题： （1）为了便于观察细胞融合的状况，通常用不同颜色的原生质体进行融合，若甲植物原生质体采用幼苗的根为外植体，则乙植物可用幼苗的____________为外植体。 （2）通常采用相应的酶进行去壁处理来获取原生质体。在原生质体融合前，需对原生质体进行处理，分别使甲原生质体和乙原生质体的_____________失活。对处理后的原生质体在显微镜下用______________计数，确定原生质体密度。两种原生质体1∶1混合后，通过添加适宜浓度的PEG进行融合；一定时间后，加入过量的培养基进行稀释，稀释的目的是____________________________________。除了化学法，诱导植物细胞原生质体融合的方法还有_______、_________等物理法。 （3）将融合原生质体悬浮液和液态的琼脂糖混合，在凝固前倒入培养皿，融合原生质体分散固定在平板中，并独立生长、分裂形成愈伤组织。同一块愈伤组织所有细胞源于_________________。下列各项中能说明这些愈伤组织只能来自于杂种细胞的理由有__________。 A．甲、乙原生质体经处理后失活，无法正常生长、分裂 B．同种融合的原生质体因甲或乙原生质体失活而不能生长、分裂 C．培养基含有抑制物质，只有杂种细胞才能正常生长、分裂 D．杂种细胞由于结构和功能完整可以生长、分裂 24. 异种器官移植是解决人类器官短缺的重要途径。近年来，我国科研团队在此领域取得了突破性进展。云南农业大学某研究团队与多家机构合作，于2025年成功培育出无特定病原体的10基因编辑猪，并利用体细胞核移植技术克隆10基因编辑猪，用于异种器官移植研究，主要技术操作流程如图所示。回答下列问题。 （1）过程①所用培养液的成分除无机盐、维生素、血清外，还含的营养成分有________（答出2点即可）等，培养箱中需要通入含95%空气和5%CO2的混合气体，其中CO2的主要作用是________。 （2）过程②可通过显微操作对MⅡ期卵母细胞进行“去核”，“去核”实际上去除的是“纺锤体—染色体复合物”，理由是________。 （3）过程③可采用________（答出2点即可）等化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程。 （4）为提高基因编辑猪细胞核移植的成功率，可以用胚胎细胞核移植替代体细胞核移植，原因是________。 （5）研究人员培育10基因编辑猪的过程包括：敲除猪的3个抗原基因（GGTA1、CMAH和β4GalNT2）和导入7个人源基因（hCD55、hCD59、hTBM等），其中敲除猪的3个抗原基因的目的是________。若要检测基因编辑猪胚胎中是否成功导入hCD55基因，操作的基本程序是：先从被测胚胎中取出几个细胞，提取DNA，然后用hCD55基因的一段碱基设计________，以胚胎细胞中的DNA作为模板，进行PCR扩增，最后用hCD55基因特异性探针检测扩增产物，也可以采用________来鉴定PCR的产物。 25. 培育转VEGF基因的山羊，有利于提高羊绒产量。但转基因动物含有标记基因可能造成安全性问题。研究者利用Cre/LoxP系统删除标记基因。回答下列问题。 （1）基因表达载体除了含有标记基因外，还应有____（写出两点）等，其中标记基因的作用是____。 （2）如图1所示，Cre酶能切割特定位点形成黏性末端。结合图1和图2分析，Cre酶能将____（填“①”或“②”）中的目标片段删除，并且其余片段末端可以连接形成一个DNA分子。 （3）为保证转化后可删除标记基因并构建P1，图3中引物a和b应添加的LoxP序列分别为5’-____-3’、5’-____-3’（写出已知的8个碱基），同时限制酶识别序列需添加在LoxP序列的____端。用BglⅡ和HindⅢ处理P1并对产物进行电泳鉴定，结果长度为____，说明P1构建成功。 （4）将P1导入山羊皮肤成纤维细胞，经检测VEGF已成功表达。此时还需要____的作用将标记基因删除。利用荧光显微镜观察，结果为____，说明已成功删除标记基因。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $