专题7 变态反应诊断与血清学诊断(课件)-湖南省(对口招生)养殖类《畜禽疫病防治》考纲讲练测
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内容正文:
湖南省(对口招生)养殖类 · 专题7 变态反应诊断与血清学诊断
湖南省养殖类 · 畜禽疫病防治
《畜禽疫病防治》考纲讲练测
专题7
变态反应诊断
与血清学诊断
变态反应
四型分型
血清学诊断
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编写说明:本专辑为湖南省(对口招生)养殖类《畜禽疫病防治》考纲讲练测,严格依据湖南省普通高等学校对口招生考试基本要求及考试大纲(养殖类专业综合知识)的考试范围与要求编写,精准对标考纲,兼顾考点覆盖与实战应用。每套讲练测提供讲义、课件、练习三大配套教学文件,贯穿“讲—练—测”闭环式教学与复习逻辑,助力考生夯实基础、突破重难点。
学习目标与考纲对接
学习目标
变态反应的概念与四型分型
各型发生机制与常见疾病
牛结核菌素试验的操作与判定
血清学试验的影响因素与类型
考纲对接
四型变态反应机制
血清学试验与应用
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知识梳理① 变态反应的概念与类型
知识梳理
概念:对再次进入机体的抗原物质反应过强或不适当,并造成组织器官损伤。
本质:也是免疫应答;引起变态反应的物质称为变应原。
传入途径:呼吸道、消化道、皮肤、黏膜。
分型:按参与细胞、活性物质、损伤机制和时间分Ⅰ~Ⅳ型。
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随堂例题
第 1 题
1.变态反应的本质是( )
A.非特异性免疫
B.免疫应答
C.免疫缺陷
D.免疫耐受
答案:B
解析:变态反应是免疫系统对再次进入机体的抗原物质做出的过于强烈或不适当的、并导致组织器官损伤的免疫反应,其本质也是免疫应答。
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— 4 —
随堂例题
第 2 题
2.下列变态反应中,由细胞介导的是( )
A.Ⅰ型变态反应
B.Ⅱ型变态反应
C.Ⅲ型变态反应
D.Ⅳ型变态反应
答案:D
解析:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型均由抗体介导,反应发生快,为速发型;Ⅳ型由细胞介导,反应较慢,至少12 h 以后才发生,为迟发型。
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— 5 —
知识梳理② Ⅰ型变态反应(过敏反应型)
知识梳理
致敏:变应原首次进入→产生IgE→吸附于肥大细胞、嗜碱性粒细胞。
激发:再次接触同一变应原→与IgE结合→嗜碱性颗粒脱出。
介质:组胺、缓激肽、5-羟色胺、过敏毒素。
效应:支气管平滑肌收缩、毛细血管扩张、腺体分泌增加。
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随堂例题
第 3 题
3.参与Ⅰ型变态反应的抗体是( )
A.IgG
B.IgM
C.IgE
D.IgA
答案:C
解析:变应原首次进入机体,刺激机体产生抗体IgE,IgE 吸附于肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面;再次接触同一变应原时,变应原与细胞表面的IgE 结合,导致嗜碱性颗粒脱出。
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随堂例题
第 4 题
4.Ⅰ型变态反应释放的活性介质不包括( )
A.组胺
B.缓激肽
C.5-羟色胺
D.淋巴毒素
答案:D
解析:嗜碱性颗粒脱出后释放组胺、缓激肽、5-羟色胺和过敏毒素;淋巴毒素是Ⅳ型变态反应中效应性淋巴细胞释放的细胞因子。
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知识梳理③ Ⅱ型变态反应(细胞毒型)
知识梳理
变应原:自身细胞表面抗原(如血型抗原)或药物半抗原。
抗体:细胞溶解性抗体IgG、IgM。
三条途径:激活补体溶解、吞噬细胞吞噬、结合K细胞杀死。
常见病:输血反应、新生动物溶血病、溶血性贫血。
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随堂例题
第 5 题
5.Ⅱ型变态反应又称( )
A.过敏反应型
B.细胞毒型
C.免疫复合物型
D.迟发型
答案:B
解析:四型变态反应依次为过敏反应型(Ⅰ型)、细胞毒型(Ⅱ型)、免疫复合物型(Ⅲ型)和迟发型(Ⅳ型)。Ⅱ型通过激活补体溶解、吞噬细胞吞噬和结合K 细胞三种途径杀伤靶细胞,故称细胞毒型。
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知识梳理④ Ⅲ型变态反应(免疫复合物型)
知识梳理
变应原:异种动物血清、微生物、寄生虫、药物;抗体主要为IgG。
不致病:大颗粒不溶性被吞噬,细小可溶性被肾小球滤过排出。
致病:中等大小可溶性复合物沉积于肾小球、关节、皮肤。
常见病:红斑狼疮、链球菌感染后肾小球肾炎、类风湿性关节炎。
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随堂例题
第 6 题
6.Ⅲ型变态反应造成组织损伤的关键是形成( )
A.大颗粒不溶性复合物
B.中等大小可溶性复合物
C.细小可溶性复合物
D.抗原-抗体-细胞复合物
答案:B
解析:抗原、抗体比例合适或抗体略多时形成大颗粒不溶性复合物,易被吞噬清除;抗原量过多时形成细小可溶性复合物,易通过肾小球滤过排出;只有抗原量稍超过抗体量时形成的中等大小可溶性复合物不易排出,沉积于肾小球、关节、皮肤等处而致病。
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— 12 —
知识梳理⑤ Ⅳ型变态反应与传染性变态反应
知识梳理
特点:由细胞免疫引起,无抗体和补体参加,12 h 后达高峰。
机制:T 细胞母细胞化→效应性淋巴细胞释放淋巴毒素杀伤靶细胞。
三类:传染性变态反应、组织移植排斥反应、接触性皮炎。
应用:牛结核菌素试验、鼻疽菌素检疫。
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随堂例题
第 7 题
7.Ⅳ型变态反应又称( )
A.速发型
B.迟发型
C.细胞毒型
D.免疫复合物型
答案:B
解析:Ⅳ型变态反应由细胞免疫引起,无抗体和补体参加,发生缓慢,多数于再次接触变应原后12 h 或更长时间达到高峰,故又称迟发型变态反应。
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随堂例题
第 8 题
8.结核菌素试验诊断牛结核病,利用的是( )
A.Ⅰ型变态反应
B.Ⅱ型变态反应
C.Ⅲ型变态反应
D.Ⅳ型变态反应
答案:D
解析:结核杆菌属细胞内寄生菌,在传染过程中引起以细胞免疫为主的Ⅳ型变态反应,即传染性变态反应。利用结核菌素给牛点眼并颈部皮内注射,根据局部炎症情况判定是否感染,正是利用这一原理。
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知识梳理⑥ 变态反应的防治与牛结核检疫
知识梳理
防治:找出变应原避免再接触;用脱敏疗法改善异常免疫反应。
脱敏:血清加温至30 ℃,先少量多次皮下注射,再中等量、全量。
急救:0.1% 肾上腺素皮下注射(大型5~10 mL,中小型2~5 mL)。
检疫:颈侧中部上1/3,皮内注射0.1 mL、不低于2000 IU。
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随堂例题
第 9 题
9.牛结核菌素皮内变态反应试验,观察反应的时间是注射后( )
A.第24 小时
B.第48 小时
C.第72 小时
D.第96 小时
答案:C
解析:皮内注射后第72 小时进行观察,仔细观察注射局部有无热、痛、肿胀等炎性反应,并用游标卡尺测量术部皮皱厚度;第72 小时观察后,对阴性反应和疑似反应的牛,于注射后第96 h 和第120 h 再分别判定一次。
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随堂例题
第 10 题
10.牛结核菌素试验,皮厚差为3.0 mm,应判为( )
A.阳性反应
B.疑似反应
C.阴性反应
D.无效,重新试验
答案:B
解析:皮厚差≥4.0 mm 为阳性反应;2.0 mm<皮厚差<4.0 mm 为疑似反应;皮厚差≤2.0 mm 为阴性反应。3.0 mm 落在2.0~4.0 mm 之间,属疑似反应,应于第一次检疫42 d 后复检。
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知识梳理⑦ 血清学试验的概念与影响因素
知识梳理
抗原抗体反应:体内为体液免疫效应,体外用于检测抗原或抗体。
血清学试验:体外抗原抗体结合反应,特异性高,用于鉴定与诊断。
五因素:电解质、温度、酸碱度、振荡、杂质和异物。
要点:0.85%~0.9% 氯化钠、37 ℃感作、pH 6~8、设阴阳性对照。
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随堂例题
第 11 题
11.血清学试验一般在pH 为( )的条件下进行
A.2.0~4.0
B.5.0~6.0
C.6.0~8.0
D.8.5~9.0
答案:C
解析:血清学试验要求在一定的pH 下进行,常用的pH 为6~8;过高或过低均可使已结合的抗原抗体复合物重新解离,若pH 降至抗原或抗体的等电点,会发生非特异性的酸凝集,造成假象。
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随堂例题
第 12 题
12.血清学试验中,常用的电解质是( )
A.10% 氯化钠
B.20% 石灰乳
C.10% 氢氧化钠
D.0.85%~0.9% 氯化钠
答案:D
解析:为促使沉淀物或凝集物形成,常用0.85%~0.9%(人、畜)或8%~10%(禽)的氯化钠或各种缓冲液作为抗原和抗体的稀释液或反应液。
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知识梳理⑧ 凝集试验与沉淀试验
知识梳理
凝集试验:颗粒性抗原与抗体结合成凝集团块;抗原称凝集原。
直接凝集:玻片法定性(鸡白痢、虎红平板),试管法定量测凝集价。
间接凝集:抗原或抗体吸附于载体颗粒:正向查抗体、反向查抗原。
沉淀试验:可溶性抗原与抗体形成白色沉淀:环状沉淀、琼扩。
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知识梳理⑨ 免疫标记技术
知识梳理
三类:荧光抗体标记、酶标抗体标记、同位素标记抗体技术。
荧光:FITC 应用最广,490~495 nm 激发,发黄绿色荧光。
酶标:以HRP应用最广,底物过氧化氢,供氢体OPD、DAB。
ELISA:固相载体聚苯乙烯微量滴定板;OPD 测492 nm。
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随堂例题
第 13 题
13.琼脂凝胶扩散试验以( )应用最广泛
A.单向单扩散
B.单向双扩散
C.双向双扩散
D.双向单扩散
答案:C
解析:琼扩试验可分为单向单扩散、单向双扩散、双向单扩散和双向双扩散四种类型,其中以双向双扩散应用最广泛。
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随堂例题
第 14 题
14.诊断鸡白痢时,常用的血清学试验是( )
A.沉淀试验
B.凝集试验
C.免疫标记试验
D.补体结合试验
答案:B
解析:鸡白痢全血平板凝集试验属直接凝集试验的玻片法,用已知的诊断抗原悬液检测待检血清中是否存在相应抗体,操作简便、快速,是种鸡场检疫鸡白痢的常用方法。
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随堂例题
第 15 题
15.参与沉淀试验的抗原是( )
A.颗粒性抗原
B.可溶性抗原
C.细胞抗原
D.完整菌体
答案:B
解析:沉淀试验是可溶性抗原(如细菌的外毒素、内毒素、菌体裂解液,病毒的可溶性抗原、血清、组织浸出液)与相应抗体结合,在适量电解质存在下形成肉眼可见的白色沉淀;凝集试验参与的才是颗粒性抗原。
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随堂例题
第 16 题
16.酶标抗体技术用于标记的酶,以( )应用最广泛
A.辣根过氧化物酶
B.碱性磷酸酶
C.胰蛋白酶
D.三磷酸腺苷酶
答案:A
解析:用于标记的酶有辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等,其中以HRP 应用最广泛,其次是碱性磷酸酶。HRP 广泛分布于植物界,辣根中含量最高,作用底物是过氧化氢。
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背诵环节(一)
背诵
1.什么叫变态反应?分为哪四型?
答案:免疫系统对再次进入机体的抗原物质做出的过于强烈或不适当的、并导致组织器官损伤的免疫反应,本质也是免疫应答。分为过敏反应型(Ⅰ型)、细胞毒型(Ⅱ型)、免疫复合物型(Ⅲ型)和迟发型(Ⅳ型);前三种由抗体介导,为速发型,Ⅳ型由细胞介导,为迟发型。
口诀:四型记“敏毒合迟”,前三抗体快、第四细胞慢
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背诵环节(二)
背诵
2.Ⅰ型变态反应的抗体、细胞和介质各是什么?
答案:抗体为IgE;致敏细胞为肥大细胞和嗜碱性粒细胞;释放的活性介质有组胺、缓激肽、5-羟色胺和过敏毒素。
口诀:一型IgE肥大碱,组胺缓激五羟胺
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背诵环节(三)
背诵
3.Ⅱ型变态反应通过哪三种途径杀伤靶细胞?
答案:①激活补体,使细胞溶解;②通过吞噬细胞吞噬;③通过结合K 细胞杀死。
口诀:补体溶、吞噬吞、K 细胞杀
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背诵环节(四)
背诵
4.Ⅲ型变态反应中,哪种复合物致病?沉积在哪里?
答案:抗原量稍超过抗体量时形成的中等大小可溶性复合物致病,随血流沉积在肾小球、关节、皮肤等处,引起炎症、水肿、出血、局部坏死。
口诀:不大不小才致病,肾球关节皮肤沉
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背诵环节(五)
背诵
5.Ⅳ型变态反应有何特点?常见于哪些情况?
答案:由细胞免疫引起,无抗体和补体参加,再次接触变应原后12 h 或更长时间达高峰,故称迟发型。常见于传染性变态反应、组织移植排斥反应和接触性皮炎。
口诀:四型无抗补,十二小时慢半拍
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背诵环节(六)
背诵
6.牛结核菌素试验的部位、剂量、观察时间与判定标准?
答案:颈侧中部上1/3 处剪毛,直径约10 cm,皮内注射0.1 mL、不低于2000 IU;第72 小时观察,阴性和疑似于96 h、120 h 复判。皮厚差≥4.0 mm 阳性,2.0~4.0 mm 疑似,≤2.0 mm 阴性;疑似42 d 后复检。
口诀:颈侧上三一毫升,七二观察四判阳
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背诵环节(七)
背诵
7.影响血清学试验的五个因素是什么?
答案:电解质、温度、酸碱度、振荡、杂质和异物。
口诀:电温水振杂,五因记牢它
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常考题
第 1 题
1.下列关于变态反应的叙述,正确的是( )
A.变态反应的本质不是免疫应答
B.变应原只能经消化道进入机体
C.Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型为速发型,Ⅳ型为迟发型
D.Ⅳ型由抗体介导
答案:C
解析:变态反应的本质也是免疫应答;变应原可通过呼吸道、消化道、皮肤、黏膜等途径进入机体;Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型均由抗体介导、发生快,为速发型,Ⅳ型由细胞介导、至少12 h 后才发生,为迟发型。
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常考题
第 2 题
2.青霉素引起的过敏性休克属于( )
A.Ⅰ型变态反应
B.Ⅱ型变态反应
C.Ⅲ型变态反应
D.Ⅳ型变态反应
答案:A
解析:注射青霉素引起的急性全身性反应属Ⅰ型变态反应,反应发生在全身时即可引起过敏性休克,甚至死亡。
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常考题
第 3 题
3.输血反应和新生动物溶血病属于( )
A.Ⅰ型变态反应
B.Ⅱ型变态反应
C.Ⅲ型变态反应
D.Ⅳ型变态反应
答案:B
解析:Ⅱ型变态反应的常见疾病有输血反应、新生动物溶血病、药物和传染性病原体引起的溶血性贫血等,其变应原可为血型抗原或与靶细胞结合的药物半抗原。
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常考题
第 4 题
4.系统性红斑狼疮、链球菌感染后肾小球肾炎属于( )
A.Ⅰ型变态反应
B.Ⅱ型变态反应
C.Ⅲ型变态反应
D.Ⅳ型变态反应
答案:C
解析:Ⅲ型变态反应的常见疾病有系统性红斑狼疮、链球菌感染后引起的肾小球肾炎、类风湿性关节炎、局部免疫复合物病等。
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常考题
第 5 题
5.接触性皮炎和组织移植排斥反应属于( )
A.Ⅰ型变态反应
B.Ⅱ型变态反应
C.Ⅲ型变态反应
D.Ⅳ型变态反应
答案:D
解析:临床常见的Ⅳ型变态反应有传染性变态反应、组织移植排斥反应及接触性皮炎等,由细胞免疫引起,无抗体和补体参加。
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常考题
第 6 题
6.采用变态反应法检疫牛结核病,皮内注射的剂量为( )
A.0.05 mL,不低于1000 IU
B.0.1 mL,不低于2000 IU
C.0.2 mL,不低于2000 IU
D.0.1 mL,不低于4000 IU
答案:B
解析:用牛型提纯结核菌素(PPD)进行皮内变态反应试验,每头牛皮内注射0.1 mL,不低于2000 IU,或按试剂说明书配制的剂量;注射后局部应出现皮丘。
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常考题
第 7 题
7.下列属于沉淀试验的是( )
A.鸡白痢全血平板凝集试验
B.布鲁菌虎红平板凝集试验
C.炭疽Ascoli 试验
D.血型鉴定
答案:C
解析:环状沉淀试验主要用于抗原的定性试验,如诊断炭疽的Ascoli 试验、链球菌的血清型鉴定、血迹鉴定;其余三项均为凝集试验。
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常考题
第 8 题
8.ELISA 中最常用的固相载体是( )
A.硝酸纤维素滤膜
B.聚苯乙烯微量滴定板
C.琼脂凝胶板
D.玻璃板
答案:B
解析:ELISA 的固相载体有聚苯乙烯微量滴定板、聚苯乙烯球珠等,其中聚苯乙烯微量滴定板(40 孔或96 孔板)是目前最常用的载体,小孔呈凹形,操作简便,有利于大批样品的检测;硝酸纤维素滤膜用于斑点-酶联免疫吸附试验。
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高考真题/模拟
第 1 题
1.(模拟题)介导Ⅰ型变态反应的抗体吸附于( )
A.红细胞表面
B.肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面
C.T 淋巴细胞表面
D.巨噬细胞表面
答案:B
解析:IgE 吸附于皮肤、消化道和呼吸道黏膜毛细血管周围组织中的肥大细胞和血液中嗜碱性粒细胞表面,使之致敏。
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高考真题/模拟
第 2 题
2.(模拟题)变应原再次进入机体,与致敏细胞表面的IgE 结合后,首先发生的是( )
A.补体激活
B.嗜碱性颗粒脱出
C.T 细胞母细胞化
D.免疫复合物沉积
答案:B
解析:变应原与细胞表面的IgE 结合形成免疫复合物,导致细胞内的嗜碱性颗粒脱出,脱出的颗粒迅速释放组胺、缓激肽、5-羟色胺和过敏毒素等活性介质。
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高考真题/模拟
第 3 题
3.(模拟题)抗原量过多于抗体量时形成的复合物( )
A.沉积于肾小球
B.易被吞噬细胞清除
C.易通过肾小球滤过排出
D.引起局部坏死
答案:C
解析:抗原量过多于抗体量时可形成细小的可溶性复合物,易通过肾小球滤过而排出,对机体不造成损害;抗原、抗体比例合适或抗体略多时形成大颗粒不溶性复合物,易被吞噬细胞吞噬清除。
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高考真题/模拟
第 4 题
4.(模拟题)传染性变态反应中,作为变应原的是( )
A.病原微生物或其代谢产物
B.异种动物血清
C.组织细胞
D.淋巴毒素
答案:A
解析:结核杆菌、布鲁菌、鼻疽杆菌等细胞内寄生菌在传染过程中能引起以细胞免疫为主的Ⅳ型变态反应,这种变态反应以病原微生物或其代谢产物作为变应原,故称传染性变态反应;临床上常利用它来诊断这类慢性传染病,如牛结核菌素试验、鼻疽菌素检疫。
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高考真题/模拟
第 5 题
5.(模拟题)给动物大剂量注射血清前,为预防血清过敏症,可将血清加温至( )
A.25 ℃
B.30 ℃
C.37 ℃
D.56 ℃
答案:B
解析:为了避免动物血清过敏症的发生,在给动物大剂量注射血清之前,可将血清加温至30 ℃后使用,并且先少量多次皮下注射血清,隔15 min 后再注射中等剂量血清,若无严重反应,15 min 后可全量注射。
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高考真题/模拟
第 6 题
6.(模拟题)动物注射后出现过敏反应,首先应皮下注射( )
A.0.1% 的肾上腺素
B.0.9% 的氯化钠
C.5% 的葡萄糖
D.10% 的氯化钙
答案:A
解析:如果动物在注射后短时间内出现不安、颤抖、出汗或呼吸急促等过敏反应症状,首先用0.1% 的肾上腺素皮下注射(大型动物5~10 mL,中、小型动物2~5 mL),并采取其他对症治疗措施。
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高考真题/模拟
第 7 题
7.(模拟题)试管凝集试验中,某血清最高稀释度出现50% 凝集,该稀释度即为( )
A.凝集原
B.凝集素
C.凝集价
D.沉淀素
答案:C
解析:视不同凝集程度记录为++++(100%)、+++(75%)、++(50%)、+(25%)和−(不凝集),以出现50% 凝集(++)以上的血清最高稀释倍数为该血清的凝集价(也称效价、滴度)。
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高考真题/模拟
第 8 题
8.(模拟题)斑点-酶联免疫吸附试验与常规ELISA 的主要区别之一是( )
A.用琼脂凝胶作固相载体
B.供氢体为不溶性,结果以有色斑点判定
C.不设阴阳性对照
D.不需洗涤
答案:B
解析:Dot-ELISA 与ELISA 原理及步骤基本相同,不同之处有两点:一是将固相载体以硝酸纤维素滤膜、硝酸醋酸混合纤维素滤膜、重氮苄氧甲基化纸等固相化基质膜代替;二是显色底物的供氢体为不溶性的,结果以在基质膜上出现有色斑点来判定。
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课堂练习
第 1 题
1.关于变态反应,下列叙述正确的是( )
A.只由抗体介导
B.仅发生在初次接触抗原时
C.本质是免疫应答,可致组织器官损伤
D.与免疫系统无关
答案:C
解析:变态反应是免疫系统对再次进入机体的抗原物质做出的过于强烈或不适当的、并导致组织器官损伤的免疫反应,其本质也是免疫应答;Ⅳ型由细胞介导,并非只由抗体介导,且均发生在再次接触同一变应原时。
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课堂练习
第 2 题
2.Ⅱ型变态反应的参与抗体是( )
A.IgE
B.IgG 和IgM
C.IgA
D.IgD
答案:B
解析:Ⅱ型变态反应由细胞溶解性抗体IgG 和IgM 参与;Ⅰ型为IgE;Ⅲ型主要为IgG,也有IgM 和IgA。
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课堂练习
第 3 题
3.Ⅳ型变态反应达到高峰的时间一般在再次接触变应原后( )
A.数分钟
B.1~2 h
C.4~6 h
D.12 h 或更长时间
答案:D
解析:Ⅳ型变态反应由细胞免疫引起,无抗体和补体参加,发生缓慢,多数于再次接触变应原后12 h 或更长时间达到高峰,故又称迟发型变态反应。
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— 53 —
课堂练习
第 4 题
4.牛结核菌素试验中测量皮皱厚度应使用( )
A.直尺
B.游标卡尺
C.卷尺
D.皮尺
答案:B
解析:将牛只编号登记后,在颈侧中部上1/3 处剪毛(3 月龄以内的犊牛可在肩胛部),直径约10 cm,用游标卡尺测量术部中央皮皱厚度,做好记录。
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课堂练习
第 5 题
5.鸡白痢全血平板凝集试验,判定结果的时间要求在( )
A.2 min 内
B.10 min 内
C.30 min 内
D.2 h 内
答案:A
解析:在洁净的玻璃板上画3 cm×3 cm 方格并编号,滴加抗原1 滴(约0.05 mL),用针头刺破鸡的冠尖或翅静脉取等量血液与抗原充分混匀,轻轻摇动玻璃板,2 min 内判定结果。
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课堂练习
第 6 题
6.鸡白痢全血平板凝集试验中,判为阳性反应的标准是( )
A.出现25% 凝集(+)以上
B.出现50% 凝集(++)以上
C.出现75% 凝集(+++)以上
D.出现100% 凝集(++++)
答案:B
解析:被检全血与抗原出现50% 凝集(++)以上凝集判为阳性;不发生凝集判为阴性;出现50% 凝集(++)以下凝集判为可疑,可疑鸡隔离饲养1 个月后再检验,仍为可疑反应则按阳性反应判定。
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课堂练习
第 7 题
7.布鲁菌虎红平板凝集试验,血清与抗原的加样量各为( )
A.0.01 mL
B.0.03 mL
C.0.05 mL
D.0.1 mL
答案:B
解析:取洁净玻璃板划分成2 cm×2 cm 方格并标记受检血清号,在方格内加被检血清0.03 mL,再滴加布鲁菌虎红平板凝集抗原0.03 mL,用牙签搅动混匀,室温4 min 内观察结果。
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课堂练习
第 8 题
8.羊布鲁菌病试管凝集试验,山羊、绵羊、猪和狗的血清凝集价达多少判为阳性( )
A.1:25 以上
B.1:50 以上
C.1:100 以上
D.1:200 以上
答案:B
解析:山羊、绵羊、猪和狗的血清凝集价为1:50 以上者,牛、马、鹿和骆驼为1:100 以上者,判为阳性;前者1:25、后者1:50 者判为可疑。
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课堂练习
第 9 题
9.用于吸附可溶性抗原(或抗体)的颗粒称为( )
A.凝集原
B.凝集素
C.载体颗粒
D.沉淀素
答案:C
解析:用于吸附抗原(或抗体)的颗粒称为载体颗粒,常用的载体有红细胞、聚苯乙烯乳胶,其次是活性炭、白陶土、离子交换树脂等;将可溶性抗原吸附到载体颗粒表面的过程称为致敏。
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课堂练习
第 10 题
10.反向间接凝集试验是用( )致敏载体颗粒
A.抗原,以检测抗体
B.抗体,以检测抗原
C.补体,以检测抗原
D.红细胞,以检测抗体
答案:B
解析:将抗原吸附于载体颗粒后与相应抗体反应产生的凝集,为正向间接凝集反应;将特异性抗体吸附于载体颗粒表面,再与相应可溶性抗原结合产生的凝集,为反向间接凝集反应。
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课堂练习
第 11 题
11.荧光色素中应用最广的是( )
A.四乙基罗丹明
B.四甲基异硫氰酸罗丹明
C.异硫氰酸荧光黄
D.藻红蛋白
答案:C
解析:用于标记的荧光色素有异硫氰酸荧光黄(FITC)、四乙基罗丹明(RB200)和四甲基异硫氰酸罗丹明(TMRITC),其中FITC 应用最广,为黄色结晶,呈现明亮的黄绿色荧光。
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课堂练习
第 12 题
12.ELISA 测定中,以OPD 为供氢体时常用的测定波长是( )
A.450 nm
B.492 nm
C.530 nm
D.650 nm
答案:B
解析:ELISA 结果可用肉眼观察,也可用测定仪测OD 值,所用波长随底物供氢体不同而异,如以OPD 为供氢体测定波长为492 nm,TMB 为650 nm(氢氟酸终止)或450 nm(硫酸终止)。
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课堂小结(一)
小结
1
变态反应是免疫系统对再次进入机体的抗原物质做出的过于强烈或不适当的、并导致组织器官损伤的免疫反应,本质也是免疫应答。
2
四型:过敏反应型(Ⅰ)、细胞毒型(Ⅱ)、免疫复合物型(Ⅲ)、迟发型(Ⅳ);前三种由抗体介导为速发型,Ⅳ型由细胞介导为迟发型。
3
Ⅰ型由IgE 介导,作用于肥大细胞和嗜碱性粒细胞,释放组胺等介质;Ⅱ型靠补体溶解、吞噬和K 细胞杀伤靶细胞。
4
Ⅲ型由中等大小可溶性复合物沉积于肾小球、关节、皮肤致病;Ⅳ型无抗体和补体参加,传染性变态反应是其重要应用。
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课堂小结(二)
小结
5
牛结核菌素试验:颈侧上1/3 皮内注射0.1 mL、不低于2000 IU,72 h 观察,皮厚差≥4.0 mm 阳性。
6
血清学试验五大影响因素:电解质、温度、酸碱度、振荡、杂质异物;类型包括凝集、沉淀、补体结合、中和和免疫标记技术。
7
凝集试验查颗粒性抗原,沉淀试验查可溶性抗原;琼扩以双向双扩散最常用;免疫标记以荧光抗体和酶标抗体技术为主,ELISA 应用最广。
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