1.2.2 微生物的培养技术及应用课件-2026-2027学年高二下学期生物人教版选择性必修3

微生物的培养技术及应用 --微生物的基本培养技术(二) 1 03 微生物的纯培养 培养物 纯培养物 纯培养 将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体 由单一个体繁殖所获得的微生物群体 过程 配制培养基→灭菌→接种→分离→培养 菌落 2 03 微生物的纯培养 酵母菌的纯培养 探究·实践 原理 ①分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。 ②采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。 3 03 微生物的纯培养 原理 平板划线法 通过接种环在固体培养基（平板）表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经数次划线后培养，可以分离得到由单个微生物繁殖而形成的单菌落。 酵母菌的纯培养 探究·实践 4 03 原理 平板划线法 通过接种环在固体培养基（平板）表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经数次划线后培养，可以分离得到由单个微生物繁殖而形成的单菌落。 ▲注意： ①接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次； ②划线首尾不能相接； ③每次划线前接种环进行灭菌； ④划线后，培养皿倒置培养。 微生物的纯培养 酵母菌的纯培养 探究·实践 5 03 原理 平板划线法 思考1：为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物； 每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种。使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。 划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 微生物的纯培养 酵母菌的纯培养 探究·实践 6 03 材料 天平、小刀、纱布、烧杯、锥形瓶、棉塞、牛皮纸(或报纸)、皮筋、培养皿、接种环、酒精灯、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、干热灭菌箱、恒温培养箱 酵母菌培养液 提供接种 用的酵母菌 马铃薯 葡萄糖(或蔗糖) 蒸馏水 琼脂 配制酵母菌固体培养基 微生物的纯培养 酵母菌的纯培养 探究·实践 7 03 步骤 1.配置培养基 马铃薯 (200g) 去皮、切块 马铃薯块 加水 (1000mL) 煮沸 纱布过滤 滤液 加葡萄糖/蔗糖 (20g) 加琼脂 加水定容 (1000mL) 酵母菌培养基 2.灭菌 酵母菌培养基 --高压蒸汽灭菌 转移 包牛皮纸 锥形瓶 加棉塞 皮筋勒紧 放入高压蒸汽灭菌锅中(100kPa、121℃) 灭菌15~30min 微生物的纯培养 酵母菌的纯培养 探究·实践 8 03 步骤 3.倒平板 ①拔出锥形瓶的棉塞 ②将瓶口迅速通过火焰 ③用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基（10 ~ 20mL）倒入培养皿，立即盖上皿盖 ④等待培养基冷却凝固后，将培养皿倒转过来放置 待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板 ④ ③ ① ② 防止瓶口微生物污染 防止冷凝水滴落在培养基上引发污染 微生物的纯培养 酵母菌的纯培养 探究·实践 9 03 步骤 4.接种和分离酵母菌 ①将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环的金属丝烧红 ②在火焰旁冷却接种环，同时拔出装有酵母菌培养液的试管的棉塞 ③将试管口通过火焰 ④在火焰附近用接种环蘸取一环菌液 微生物的纯培养 酵母菌的纯培养 探究·实践 10 03 步骤 4.接种和分离酵母菌 ⑤将试管口通过火焰，并塞上棉塞 ⑥在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线，盖上皿盖 微生物的纯培养 酵母菌的纯培养 探究·实践 11 03 步骤 5.培养酵母菌 完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右 (培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异) 的恒温培养箱中培养24 ~ 48h。 微生物的纯培养 酵母菌的纯培养 探究·实践 12 03 讨论1.在未接种的培养基表面是否有菌落生长?如果有,说明了什么? 在未接种的培养基表面应该没有菌落生长，如果有，说明培养基被杂菌污染了。 讨论2.在接种酵母菌的培养基上,你是否观察到了单菌落？这些菌落的颜色、形状和大小是否一致？如果你观察到了不同形态的菌落，你能分析出可能是由哪些原因引起的吗？ 如果观察到了不同形态的菌落，可能是接种的菌种不纯或者无菌操作不规范等原因引起的。 微生物的纯培养 酵母菌的纯培养 探究·实践 13 04 课后习题 1.微生物的纯培养既需要适宜的培养基,又要防止杂菌污染。判断下列相关表述是否正确。 (1)培养基中的营养物质浓度越高,对微生物的生长越有利。 （ ） (2)消毒和灭菌的杀菌程度存在差异。 （ ） (3)微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物。（ ） × √ × 2.日常生活中保存食品的方法有哪些?这些方法是如何阻止或抑制微生物生长的? 日常生活中保存食品的方法有干制、腌制、低温储存等。 干制可以降低食品的水分含量; 腌制可以通过食盐、糖等制造高渗环境，从而抑制微生物的生长和繁殖； 低温则是通过降低微生物的代谢速率来抑制微生物的生长和繁殖。 14 3.某同学将5个手指尖在贴有“洗手前”标签的培养基上轻轻按一下。然后用肥皂将该手洗干净,再将5个指尖在贴有“洗手后”标签的同种培养基上轻轻按一下。将这两个培养皿放入37 ℃恒温培养箱中培养24 h后，发现贴有“洗手后”标签的培养皿中菌落较少。请分析回答下列问题。 (1)这个实验中需要进行灭菌处理的材料用具有_________________ (2) “将指尖在培养基上轻轻按一下”相当于微生物培养中的哪一步操作? 培养皿和培养基 接种 04 课后习题 (3)从实验结果来看,洗手后我们就能进行无菌操作了吗？操作时，我们可以采用什么方法来避免手上微生物的污染? 通过实验结果可以看到,洗手后手上还有一些微生物,不能直接进行无菌操作。可以通过用酒精棉球擦拭双手,或戴消过毒的手套等方法来避免手上微生物的污染。 4.某生物兴趣小组将从葡萄皮上成功分离来的野生酵母菌分别接种于3个盛有等量同种液体培养基的锥形瓶中,并放置在摇床上培养，摇床转速分别为210 r/min，230 r/min和250 r/min。培养时间与酵母菌种群密度的关系如下图所示。请分析回答下列问题 (1)摇床转速不同,意味着培养条件有什么不同? 意味着培养液中02含量不同。 04 课后习题 (2)从图中数据你可以得出什么结论?其原因是什么? 培养液中02含量越高,酵母菌种群密度越大。 (3)为什么培养8h后，其中2个能瓶中酵母菌的种群密度基本达到稳定? 这时候已经达到了环境容纳量。 $