专题训练12（DNA的粗提取+电泳实验）2026-2027学年高二下学期生物人教版选择性必修3

专题训练12（DNA的粗提取+电泳实验） 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 D D C B A A B D B D 题号 11 答案 B 1．D 【详解】A、DNA粗提取实验需要选取DNA含量相对较高的材料。新鲜的香蕉、菠菜（植物细胞）含有细胞核，有DNA；猪肝（动物细胞）也含有细胞核，存在DNA，这些材料都能用于该实验，A正确； B、在实验进行提取物鉴定时为了增加说服力，需要设置对照实验，B正确； C、酶活性的发挥需要适宜的温度等条件，将过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精的目的是抑制DNA酶的活性，避免DNA被水解，C正确； D、将析出的丝状物先溶于5ml 2mol/L NaCl溶液中，然后加入4mL二苯胺试剂，混匀后沸水浴中加热可出现蓝色，D错误。 2．D 【详解】A、取洋葱研磨液在4℃冰箱中放置几分钟，取上清液加入等体积冷酒精后析出粗提取的DNA，A错误； B、需先将白色丝状物（析出的DNA）溶于2mol/L的NaCl溶液中，再加二苯胺试剂并进行沸水浴，用于鉴定DNA，B错误； C、电泳时应先将PCR产物与上样缓冲液混合后注入加样孔内，再接通电源，C错误； D、琼脂糖凝胶浓度会影响DNA片段的迁移能力，因此琼脂糖凝胶浓度的选择需考虑待分离DNA片段的大小，D正确。 3．C 【详解】A、将洋葱研磨液离心后保留上清液并加入冷酒精静置后，可收集到DNA，A正确； B、电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程，由于同性相斥、异性相吸，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动，B正确； C、将电泳缓冲液加入电泳槽中，电泳缓冲液需要没过凝胶1mm为宜，C错误； D、将电泳缓冲液加入电泳槽，待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时停止电泳，以防止样品流失到缓冲液中，之后取出凝胶置于紫外灯下观察和照相，D正确。 4．B 【详解】A、洋葱切碎加研磨液研磨过滤后，滤液放置4℃冰箱中静置，DNA存在于上清液中，A正确； B、在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会变成蓝色，B错误； C、PCR扩增后，琼脂糖凝胶电泳鉴定结果不止一条条带，可能是引物特异性不强形成了多种DNA分子，C正确； D、待指示剂前沿迁移到达凝胶边缘时需停止电泳以防DNA跑出凝胶，D正确。 5．A 【详解】A、将洋葱切碎加研磨液研磨后，第一次离心是使细胞碎片等杂质沉淀在离心管底部，从而获取含有DNA的上清液，第二次离心是将上清液加入遇冷的95%酒精，利用DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精这一原理析出DNA，因此第二次离心可加速DNA沉淀，A错误； B、DNA粗提取后，对DNA进行鉴定的操作是：将含有DNA的丝状物溶解在2molL的NaCI溶液中，搅拌使其充分溶解后，加入4ml的二苯胺试剂，沸水中加热5min，冷却后观察溶液颜色蓝色，从而鉴定DNA的存在，B正确； C、PCR扩增反应体系中的dNTP水解释放能量，产生脱氧核糖核苷酸，既可以为扩增即DNA复制提供原料，也可以为子链的合成提供能量，C正确； D、凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来，可以在紫外灯下直接观察到DNA条带的分布及粗细程度来评价扩增的结果，D正确。 6．A 【详解】A、将洋葱切碎后加研磨液充分研磨，目的是破碎细胞，使 DNA 释放，与避免 DNA 断裂降解无直接关联，A错误； B、预冷酒精溶液利于 DNA 析出，且低温可减少 DNA 降解（低温抑制相关酶活性），与保证完整性有关，B正确； C、4℃放置，低温抑制 DNA 酶活性，减少 DNA 降解，与保证完整性有关，C正确； D、沿一个方向轻轻搅拌，避免剧烈操作导致 DNA 长链断裂，与保证完整性有关，D正确。 7．B 【详解】A、将洋葱切碎加研磨液研磨、过滤后，滤液中含有DNA、蛋白质等物质，滤液放置4℃冰箱中静置几分钟后，DNA存在于上清液中，A正确； B、向DNA溶液中加入二苯胺试剂，摇匀后需要水浴加热才可观察到溶液变蓝，B错误； C、将扩增得到的PCR产物与凝胶载样缓冲液（内含指示剂）混合，再用微量移液器将混合液缓慢注入凝胶的加样孔内，留一个加样孔加入指示分子大小的标准参照物，C正确； D、如果引物特异性不强，引物可能会与目的基因以外的其他DNA片段结合，扩增出来的条带可能不止一条，即引物设计不合理可能导致琼脂糖凝胶电泳鉴定结果不止一条条带，D正确。 8．D 【详解】A、过程②过滤后，纱布为残留的组织和细胞结构，DNA在滤液中，应取滤液，A正确； B、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，过程⑤加入酒精后，蛋白质溶解，DNA析出，因此离心后弃上清取沉淀，B正确； C、酶活性的发挥需要适宜的温度等条件，将过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精的目的是抑制DNA酶的活性，避免DNA被水解，C正确； D、将析出的丝状物先溶于5ml的2mol/L的NaCl溶液中，然后加入4mL二苯胺试剂，混匀后沸水浴中加热可出现蓝色，D错误。 9．B DNA的鉴定：在沸水浴条件下，DNA与二苯胺反应呈现蓝色，以此鉴定DNA的存在。 【详解】A、可直接将洋葱研磨液倒入塑料离心管中，在1500r/min的转速下离心5min，再取上清液放入烧杯中，A正确； B、在上清液中加入体积相等的、预冷的95%的酒精溶液，静置2～3min，溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA，B错误； C、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液，C正确； D、在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，所以将丝状物溶于2mol/L的NaCl溶液后，滴加二苯胺试剂，沸水浴观察是否出现蓝色，可鉴定其是否为DNA，D正确。 10．D 【详解】A、微量移液器不需要进行高压蒸汽灭菌，微量离心管、枪头都要进行高压蒸汽灭菌，A错误； B、利用PCR技术进行扩增时，退火温度的设定是成败的关键，退火温度过高会使引物无法与模板的碱基配对，所以退火温度的设定与引物有关；延伸时间的设定与扩增片段的长度有关，B错误； C、将扩增得到的PCR产物与凝胶载样缓冲液（内含指示剂）混合，再用微量移液器将混合液缓慢注入凝胶的加样孔内，C错误； D、DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比，分子越大则所受阻力越大，也越难于在凝胶孔隙中蠕行，因而迁移得越慢。当DNA分子较大时，可适当降低凝胶浓度来提高DNA分子的迁移速率，D正确。 11．B 【详解】A、琼脂糖凝胶的浓度会影响DNA分子在凝胶中的迁移率和分辨率，琼脂糖凝胶的浓度通常是根据所需分离的DNA片段大小来选择的。对于较大的DNA片段，比如基因组DNA或质粒DNA，通常选择较低浓度的琼脂糖凝胶，因为它们需要更大的孔径来有效迁移。而对于较小的DNA片段，比如PCR产物或酶切片段，则需要选择较高浓度的琼脂糖凝胶，以提供更好的分辨率和分离效果，A正确； B、电泳缓冲液的作用是在电泳过程中维持合适的pH，并使溶液具有一定的导电性，利于核酸迁移，B错误； C、DNA分子由磷酸、脱氧核糖、含氮碱基组成，因含磷酸基团而带负电，凝胶点样孔端应靠近电泳槽负极接口，C正确； D、琼脂糖凝胶中的DNA分子需被凝胶中的核酸染料染色后，才可在波长为300nm的紫外灯下被检测出来，D正确。 12．(1) 鸡血 哺乳动物成熟的红细胞无细胞核和细胞器(无DNA) (2) 酒精 絮状沉淀或白色丝状物 (3)现配现用 (4)洗涤剂能溶解细胞膜 溶解DNA (5)预冷的体积分数为95%的酒精 13．(1)纤维素酶和果胶酶 (2) 上清液 DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精 (3)二苯胺 (4) 蒜黄 （5）与20℃相比，-20℃的低温抑制了酶的活性，DNA的降解速率更慢 【详解】（1）由于菜花细胞含有细胞壁，可在研磨过程中加入适量的纤维素酶和果胶酶，以缩短研磨时间，避免研磨时间过长，影响DNA的提取量。 （2）将获取的研磨液直接倒入塑料离心管中，然后进行离心处理，再取上清液放入烧杯中。DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精，因此加入体积分数为95%的预冷酒精溶液来初步提取DNA。 （3）将DNA粗提取物溶于2mol·L-1的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂，在沸水浴条件下进行鉴定。 （4）据图2分析，相同温度条件下，蒜黄的DNA粗提取含量最高。同种实验材料在-20℃条件下DNA粗提取含量更高，其原因可能是与20℃相比，-20℃的低温抑制了酶的活性，DNA的降解速率更慢。 答案第6页，共6页 答案第5页，共6页 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题训练12（DNA的粗提取+电泳实验） 1．下列关于“DNA 的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（　　） A．可选用新鲜的香蕉、菠菜、猪肝等作为实验材料 B．在实验进行提取物鉴定时需要设置对照实验 C．过滤液放入 4℃冰箱或加入预冷的酒精都可抑制 DNA 酶的活性 D．将析出的丝状物加入 4mL 二苯胺试剂后沸水浴加热可出现蓝色 2．关于“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验，正确的是（　　） A．取洋葱研磨液在4℃冰箱放置几分钟，取沉淀物加入等体积冷酒精后析出粗提取的DNA B．可将白色丝状物加入二苯胺试剂中并进行沸水浴加热，用于鉴定DNA C．电泳时应先将PCR产物与电泳缓冲液混合后注入加样孔内，再接通电源 D．琼脂糖凝胶浓度的选择需考虑待分离DNA片段的大小 3．有关“DNA粗提取与鉴定”“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述，错误的是（  ） A．将洋葱研磨液离心后保留上清液并加入冷酒精静置后，可收集到DNA B．电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着与它所带电荷相反的电极移动的原理 C．电泳鉴定DNA时，将电泳缓冲液加入电泳槽中，电泳缓冲液不能没过凝胶 D．待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时需停止电泳，并取出凝胶置于紫外灯下观察和照相 4．“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验有关叙述，错误的是（　　） A．洋葱切碎加研磨液研磨过滤后，滤液放置4℃冰箱中静置，DNA存在于上清液中 B．将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴5min，冷却后变紫色 C．PCR扩增后，琼脂糖凝胶电泳鉴定结果不止一条条带，可能是引物特异性不强 D．待指示剂迁移到达凝胶边缘时，需立即停止电泳 5．“DNA的粗提取与鉴定”“利用PCR扩增DNA片段及电泳鉴定”实验叙述，错误的是（ ） A．洋葱切碎加研磨液研磨后，两次离心都是为了加速DNA的沉淀 B．将丝状物溶于2mol/LNaCl，再加入二苯胺试剂沸水浴，冷却后观察颜色变化 C．PCR扩增反应体系中dNTP可为子链的合成提供原料和能量 D．可通过在紫外灯下观察DNA条带的分布及粗细程度来评价扩增的结果 6．在DNA提取过程中应尽量避免导致DNA断裂和降解的各种因素，以保证DNA的完整性。下列操作与保证DNA完整性无关的是（    ） A．将洋葱切碎加入研磨液后再充分研磨 B．在上清液中加入预冷的酒精溶液 C．滤液在4℃冰箱放置几分钟再取上清液 D．加入酒精后用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌 7．“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述，错误的是（　　） A．洋葱切碎加研磨液研磨过滤后，滤液中含有DNA、蛋白质等物质 B．向DNA溶液中加入二苯胺试剂，摇匀后静置一段时间，可观察到溶液变蓝 C．使用电泳鉴定DNA时，通常要留一个加样孔加入指示分子大小的标准参照物 D．引物设计不合理可能导致琼脂糖凝胶电泳鉴定结果不止一条条带 8．某生物兴趣小组的同学用猪肝进行DNA的粗提取与鉴定实验，实验流程如图。错误的（　　） A．过程②过滤后应取滤液 B．过程⑤加入酒精后，也可将溶液倒入离心管离心后取沉淀物 C．过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精都可抑制DNA酶的活性 D．提取到的丝状物直接加入二苯胺试剂中，沸水浴加热后变蓝 9．在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，下列关于操作流程的叙述错误的是（　　） A．可直接将洋葱研磨液倒入塑料离心管中，通过离心获取上清液 B．在上清液中加入体积相等的、70％的酒精溶液，静置2～3min，溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA C．DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液 D．若要鉴定丝状物主要成分为DNA，可利用二苯胺试剂，沸水浴后观察是否出现蓝色 10．PCR和琼脂糖凝胶电泳是基因工程中常用的两种技术，所用试剂和操作正确的是（　　） A．PCR所用微量离心管、微量移液器、枪头都要进行高压蒸汽灭菌 B．PCR扩增前，应根据待扩增DNA片段的长度设置合适的延伸温度 C．需将扩增得到的PCR产物与内含核酸染料的缓冲液混合后进行加样 D．DNA分子较大时，可适当降低凝胶浓度来提高DNA分子的迁移速率 11．关于采用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物的实验，下列叙述错误的是（    ） A．若待分离的DNA片段较大，应适当降低琼脂糖凝胶的浓度 B．凝胶载样缓冲液的作用是维持合适的pH，并使溶液具有一定的导电性 C．DNA分子因含磷酸基团而带负电，凝胶点样孔端应靠近电泳槽负极接口 D．琼脂糖凝胶中的DNA分子与核酸染料结合后，在紫外光透射下可清晰呈现 12．DNA粗提取中的注意事项 (1) 可选用 （“猪血”或“鸡血”）作材料。本实验不能用哺乳动物成熟的红细胞作实验材料，原因是 。 (2)加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫。加入 和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成 。 (3)二苯胺试剂要 ，否则会影响鉴定的效果。 (4)提取植物细胞的DNA时，加入的 ，有利于DNA的释放；加入食盐(主要成分是NaCl)的目的是 。 (5)在DNA进一步提纯时，选用 的作用是溶解杂质和析出DNA。 13．某小组开展了DNA的粗提取与鉴定实验，选择了不同温度（20℃、-20℃）条件下保存的花菜、辣椒和蒜黄作为实验材料，部分实验步骤如图1所示。回答下列问题。 (1)选花菜等植物材料，为使研磨效果更好，可在处理材料时加入适量的 （填酶名称）。 (2)图1中，将获取的研磨液直接倒入塑料离心管中，然后进行离心处理，再取 （填“上清液”或“沉淀物”）放入烧杯中。加入体积分数为95%的预冷酒精溶液来初步提取DNA，这样做的原理是 。 (3)将DNA粗提取物溶于2mol·L-1的NaCl溶液中，加入 试剂，在沸水浴条件下鉴定。 (4)DNA鉴定结果如图2所示。据图2分析；相同温度条件下， 的DNA粗提取含量最高。 （5）据图2分析；同种实验材料在-20℃条件下DNA粗提取含量更高，其原因可能 是 （从酶角度答）。 学科网（北京）股份有限公司 $