内容正文:
武平一中2026-2027学年第一学期第二次阶段检测高三生物试题
(考试时间:75分钟 总分:100分)
一、选择题(本大题15小题,1-10小题每题2分,11-15小题每题4分,共40分。)
1. 下列关于骨架的叙述,错误的是( )
A. 内质网膜、高尔基体膜、核糖体膜都以磷脂双分子层为基本骨架
B. 糖原、蛋白质、核酸等生物大分子都以碳链为基本骨架
C. 细胞骨架和植物细胞壁的主要成分不同,但都有维持细胞形态的作用
D. 在DNA结构中脱氧核糖和磷酸交替连接构成DNA分子的基本骨架
【答案】A
【解析】
【详解】A、核糖体是无膜细胞器,不存在以磷脂双分子层为基本骨架的膜结构,A错误;
B、糖原、蛋白质等生物大分子都以碳链为基本骨架,B正确;
C、细胞骨架和植物细胞壁都有维持细胞形态的作用,但细胞骨架是由蛋白质纤维构成,而植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶,C正确;
D、DNA分子中脱氧核糖和磷酸交替连接排列在外侧,构成DNA分子的基本骨架,D正确。
2. 同位素标记法可用于示踪物质的运行和变化规律,下列实验中没有利用同位素标记法的是( )
A. 鲁宾和卡门探究氧气的来源
B. 人鼠细胞融合实验探究细胞膜结构
C. 分泌蛋白的合成和运输
D. 卡尔文探究有机物中碳的来源
【答案】B
【解析】
【详解】A、鲁宾和卡门通过分别标记H218O和C18O2,证明光合作用释放的氧气来自水,使用了同位素标记法,A不符合题意;
B、人鼠细胞融合实验利用荧光染料标记膜蛋白,观察细胞膜流动性,属于荧光标记法,未使用同位素标记,B符合题意;
C、分泌蛋白的合成和运输实验通过3H标记亮氨酸,追踪放射性出现的位置,明确分泌蛋白的运输路径,使用了同位素标记法,C不符合题意;
D、卡尔文用14C标记CO2,探明光合作用中碳的转移途径(卡尔文循环),使用了同位素标记法,D不符合题意.
故选B。
3. 实验原理是实验设计的依据。利用相关实验原理,下列与糖类有关的说法,错误的是( )
A. 淀粉酶能催化淀粉水解,可以用其探究温度对酶活性的影响
B. 在酸性条件下用重铬酸钾检测酵母菌产生酒精时需将葡萄糖耗尽
C. 斐林试剂可与葡萄糖在特定条件下生成砖红色沉淀,但一般不用于尿糖检测
D. 制备纯净细胞膜时可用纤维素酶水解后的植物细胞作实验材料
【答案】D
【解析】
【分析】淀粉和蔗糖都是非还原糖,它们在酶的催化作用下都能水解成还原糖,还原糖能够与斐林试剂发生氧化还原反应,生成砖红色的氧化亚铜沉淀。用淀粉酶分解催化淀粉和蔗糖的水解反应,再用斐林试剂鉴定水解产物中有无还原糖的存在。
【详解】A、淀粉酶是温度敏感型酶,符合探究温度对酶活性影响的实验要求。淀粉水解可通过碘液检测,操作简便且现象直观,A正确;
B、重铬酸钾在酸性条件下与酒精反应呈灰绿色,但葡萄糖等还原糖可能干扰检测结果(如被氧化产生假阳性)。酵母菌发酵实验中需耗尽葡萄糖,确保检测特异性,B正确;
C、斐林试剂需加热至50~65℃才能与还原糖(如葡萄糖)反应生成砖红色Cu2O沉淀,操作繁琐且需定量对比。尿糖检测通常采用葡萄糖氧化酶试纸,避免斐林试剂非特异性反应(如与其他还原糖交叉反应),C正确;
D、纤维素酶仅水解细胞壁,但植物细胞含多种膜结构(如液泡膜、核膜等),无法获得“纯净”细胞膜。更优实验材料:哺乳动物成熟红细胞(无细胞器膜和核膜)是提取纯净细胞膜的标准材料,D错误。
故选D。
4. 2024年4月,科学家发现了第一种能固氮的单细胞真核生物——贝氏布拉藻,其内部存在“特殊氨工厂”硝基体这一细胞器,可以固定空气中的氮气。研究发现“硝基体”曾经是某种固氮细菌,在藻类内部转化而成。“硝基体”中大约有一半蛋白质编码依赖宿主基因组。下列相关叙述正确的是( )
A. 贝氏布拉藻固定的氮元素在细胞内可以参与合成脂肪和蛋白质
B. 贝氏布拉藻细胞的遗传物质是RNA,共含有4种碱基
C. 细胞呼吸可为硝基体合成蛋白质、固氮等生命活动提供能量
D. 硝基体可以在没有氮源但其他成分适宜的培养基中独立存活
【答案】C
【解析】
【详解】A、氮元素可参与合成蛋白质(含氨基)、核酸等,但脂肪仅含C、H、O元素,不含氮元素,故无法参与脂肪合成,A错误。
B、贝氏布拉藻为真核生物,遗传物质是DNA,含A、T、C、G 4种碱基,B错误;
C、硝基体固氮和蛋白质合成需能量,宿主细胞呼吸产生的ATP可通过细胞质基质运输至硝基体供能,C正确;
D、硝基体作为细胞器,依赖宿主基因组编码部分蛋白质,无法独立完成代谢,D错误。
故选C。
5. 农谚是我国劳动人民智慧的结晶和经验的总结,其中蕴含着很多生物学原理。下列关于农谚的分析,错误的是( )
A. “玉米带大豆,十年九不漏”讲的是套种的好处,农业生产上的间作、套种均是通过不同作物对资源的互补利用来提高农作物产量的
B. “谷连谷,坐着哭”突显了轮作的优势,轮作可避免田地中一些元素大量减少
C. “锄头出肥”指的是松土有利于植物生长,土壤板结主要影响植物根系的呼吸作用,进而影响植物的光合作用
D. “无水肥无力”是指施肥的同时应适当浇水,矿质元素溶解在水中容易被植物吸收,在细胞中各元素主要以离子形式存在
【答案】D
【解析】
【详解】A、间作和套种通过不同作物对光、养分等资源的互补利用,提高资源利用率,如玉米与大豆套种可分层利用光能,大豆固氮补充土壤养分,A正确;
B、轮作避免同种作物持续吸收相同元素导致土壤贫瘠,如谷类消耗氮较多,轮作豆科植物可恢复土壤氮含量,B正确;
C、松土促进根细胞有氧呼吸,为吸收矿质元素提供能量;土壤板结导致无氧呼吸,能量不足且可能积累酒精毒害根系,矿质吸收减少(如Mg²⁺缺乏影响叶绿素合成),进而影响光合作用,C正确;
D、矿质元素需溶解在水中以离子形式被吸收,但细胞内的元素大多以化合物形式存在(如水、蛋白质中的元素),而非“各元素主要以离子形式”,D错误。
故选D。
6. 未折叠蛋白在内质网腔中累积造成内质网应激,细胞启动未折叠蛋白响应,对未折叠蛋白重新折叠,以恢复蛋白质稳态,VMP1蛋白缺失的细胞对内质网应激的敏感性降低。下列叙述错误的是( )
A. 内质网一般通过出芽形成囊泡的方式将折叠的蛋白转运到高尔基体
B. VMP1蛋白缺失的细胞内未折叠的蛋白可能增多
C. 蛋白质能进行折叠是因为氨基酸之间能够形成肽键
D. 细胞将折叠的蛋白分泌出细胞会引起内质网膜面积发生改变
【答案】C
【解析】
【详解】A、分泌蛋白的加工过程中,内质网一般通过出芽形成囊泡的方式将折叠的蛋白转运到高尔基体,A正确;
B、由题意可知,内质网可以对未折叠蛋白重新折叠,以恢复蛋白质稳态,而VMP1蛋白缺失导致细胞对内质网应激敏感性降低,说明其可能参与未折叠蛋白的修复或清除,缺失后未折叠蛋白可能积累,B正确;
C、蛋白质折叠依赖氨基酸侧链(R基)间的相互作用(如氢键、二硫键等),而肽键是氨基酸脱水缩合形成多肽链的基础,与折叠无关,C错误;
D、折叠蛋白经内质网→高尔基体→细胞膜途径分泌时,内质网通过出芽形成囊泡会导致其膜面积暂时减小, D正确。
故选C。
7. 核孔含有多种核孔蛋白,是核膜上负责物质双向运输的通道。下列叙述错误的是( )
A. 核孔蛋白的差异由不同氨基酸间的连接方式决定
B. 核孔的数量会影响核质间物质交换和信息交流
C. 核孔通过核孔蛋白识别和转运特定的生物大分子
D. 真核细胞合成蛋白质的指令通过核孔进入细胞质
【答案】A
【解析】
【分析】细胞核包括核膜(将细胞核内物质与细胞质分开)、染色质(DNA和蛋白质)、核仁(与某种RNA的合成以及核糖体的形成有关)、核孔(核膜上的核孔的功能是实现核质之间频繁的物质交换和信息交流)。细胞核是遗传物质贮存和复制的场所,是细胞遗传和代谢的控制中心。
【详解】A、核孔蛋白的差异由氨基酸的种类、数量、排列顺序及蛋白质的空间结构决定,而不是连接方式,A错误;
B、大分子物质如蛋白质和RNA通过核孔进出细胞核,核孔的数量会影响核质间物质交换和信息交流,B正确;
C、核孔控制生物大分子进出细胞核具有选择性,核孔通过核孔蛋白识别和转运特定的生物大分子,C正确;
D、细胞核是细胞代谢和遗传的控制中心,真核细胞合成蛋白质的指令通过核孔进入细胞质,D正确。
故选A。
8. 水淹胁迫下,某植物经糖酵解过程(细胞呼吸第一阶段)分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸可以进一步转化成乙醇或乳酸以响应水淹胁迫。下列叙述正确的是( )
A. 在水淹胁迫下该植物细胞产生乙醇或乳酸的场所相同
B. 葡萄糖分解生成丙酮酸的过程只能在无氧条件下进行
C. 长时间水淹会导致糖酵解过程产生的[H]在细胞中积累
D. 无氧呼吸过程中,有机物中的能量大部分以热能形式散失
【答案】A
【解析】
【详解】A、糖酵解及丙酮酸转化为乙醇或乳酸的过程均在细胞质基质中进行,场所相同,A正确;
B、葡萄糖分解生成丙酮酸的过程为细胞呼吸的第一阶段,有氧呼吸和无氧呼吸第一阶段都能进行此过程,并非只能在无氧条件下进行,B错误;
C、糖酵解过程产生的[H]在无氧条件下与丙酮酸反应生成乙醇或乳酸,不会在细胞中积累,C错误;
D、无氧呼吸有机物分解不彻底,大部分能量仍储存在乙醇或乳酸中,仅少部分转化为ATP和热能,D错误。
故选A。
9. 多年生高等植物黑藻喜欢在光照充足的环境中生长,是生物学实验的良好材料。下列利用黑藻进行实验的相关叙述正确的是( )
A. 观察黑藻叶肉细胞的质壁分离时,制作装片的流程包括解离→漂洗→染色→制片
B. 用黑藻叶片进行色素的提取和分离实验,得到的色素带中条带最宽的是叶绿素a
C. 将黑藻置于NaHCO₃溶液中,通过不断改变光照强度并测量溶液中溶解氧含量来探究光照强度对光合作用的影响
D. 用电子显微镜观察黑藻叶肉细胞的叶绿体,可观察到中心体和大量的绿色基粒结构
【答案】B
【解析】
【详解】A、质壁分离实验需保持细胞活性,而解离步骤会杀死细胞,因此无需解离,A错误;
B、叶绿素a在叶绿体中含量最多,色素带最宽,B正确;
C、探究光照强度对光合作用的影响时,需控制单一变量(如光照强度),但“不断改变光照强度并测量溶解氧”会导致无法明确因果关系,正确方法是设置不同光照强度的实验组(如通过调整光源距离),每组独立测量单位时间内叶圆片上浮数量,C错误;
D、黑藻是高等植物,高等植物细胞中没有中心体,中心体存在于动物细胞和某些低等植物细胞中,D错误。
故选B。
10. 帕蒂西兰是用于治疗家族性淀粉样多发性神经病变(FAP)的小干扰RNA类药物,它由两条链构成,核苷酸链含有游离的磷酸基团端为5'端,另一端为3'端。两条链各含21个核苷酸,形成19个碱基对;每条链的3'末端含有两个悬空的未配对核苷酸。下列有关叙述正确的是( )
A. 帕蒂西兰3'末端共含2个未配对碱基
B. 帕蒂西兰彻底水解得到的碱基最多有5种
C. 人体细胞中含有RNA,但RNA不是人的遗传物质
D. 帕蒂西兰既可用于治疗FAP,又是遗传信息的载体
【答案】C
【解析】
【详解】A、根据题干,每条链的 3' 末端含有2 个未配对核苷酸,而药物由两条链构成,因此 3' 末端未配对碱基总数应为 2×2=4 个,A错误;
B、帕蒂西兰是小干扰RNA类药物,RNA彻底水解得到的碱基是A(腺嘌呤)、U(尿嘧啶)、C(胞嘧啶)、G(鸟嘌呤),共4种,B错误;
C、人体细胞中含有DNA和RNA,但只有DNA是遗传物质,RNA主要承担催化、传递遗传信息等功能,并非遗传物质,C正确;
D、遗传信息的载体是 DNA,帕蒂西兰是RNA类药物,可用于治疗FAP,但不是遗传信息的载体,D错误。
故选C。
11. 草莓和葡萄是重要的经济作物,对其光合作用和呼吸作用进行研究,可以指导生产。在温度和CO₂浓度相同且适宜的条件下,某研究小组测定了葡萄植株和草莓植株在不同光照强度下的光合速率,结果如下图,据图分析正确的是( )
A. 该实验的自变量为光照强度,因变量为CO₂吸收量
B. 若将葡萄植株移植到缺Mg的环境中培养,一段时间后P点会右移
C. N点之后限制草莓光合速率的主要因素是光照强度
D. 在Y光照强度下,草莓和葡萄植株光合作用合成有机物的速率相等
【答案】B
【解析】
【详解】A、根据图示信息可知,该实验的自变量为光照强度和植物类型,因变量为CO2吸收量,A错误;
B、Mg是构成叶绿素的元素,将葡萄植株移植到缺Mg的环境中培养,叶绿素合成减少,光合速率下降,呼吸速率不变,一段时间后P点会右移,B正确;
C、N点之后草莓的CO2吸收量不再随光照强度的增加而增加,说明限制草莓光合速率的主要因素不是光照强度,C错误;
D、在Y光照强度下,草莓和葡萄植株的CO2吸收量相等,说明草莓和葡萄植株积累有机物的速率相等,由于葡萄的呼吸速率大于草莓的呼吸速率,所以有机物的合成速率(积累有机物的速率与呼吸速率之和)葡萄大于草莓,D错误。
故选B。
12. 室温条件下,将紫色洋葱鳞片叶外表皮置于一定浓度的某溶液中,其原生质层对细胞壁的压力随时间变化的关系如图所示。下列说法正确的是( )
A. 细胞失水只发生在t0~t1,吸水只发生在t2~t3
B. t1时刻细胞液的浓度最大,细胞液颜色最深
C. 与t0时刻相比,t3时刻对应的细胞液浓度可能较高
D. 若溶液为KNO3溶液,细胞从t2时开始吸收K+和NO3-
【答案】C
【解析】
【详解】A、t0∼t1压力下降,细胞失水,原生质层逐渐收缩,t1时压力降为0,原生质层与细胞壁完全分离;t1~t2时原生质层对细胞壁的压力为0,该过程中细胞由失水变为吸水,A错误;
B、t0~t1这段时间内细胞失水,细胞液浓度增大,t1后还可能发生失水,因而不能确定t1时刻细胞液的浓度最大,细胞液颜色最深,B错误;
C、与t0时刻相比,t3 时刻吸收了一定量的溶质,细胞液浓度可能仍高于 t0,C正确;
D、若溶液为KNO3溶液,K+和 NO3-可进入细胞,在细胞失水(t0~t1)时就已开始吸收,并非从t2开始。正是由于离子持续进入细胞,导致细胞液浓度升高,才引发后续吸水,D错误 。
13. 玉米叶片具有特殊的结构,其维管束鞘细胞周围的叶肉细胞可以利用PEP羧化酶固定较低浓度的CO2,并转移到维管束鞘细胞中释放,参与光合作用的暗反应。据图分析,下列叙述错误的是
A. 维管束鞘细胞的叶绿体能进行正常的光反应
B. 维管束鞘细胞中暗反应过程仍需要ATP和NADPH
C. PEP羧化酶对环境中较低浓度的CO2具有富集作用
D. 玉米特殊的结构和功能使其更适应高温干旱环境
【答案】A
【解析】
【详解】A、光反应的场所是叶绿体的类囊体薄膜上,基粒是由类囊体堆叠而成的,维管束鞘细胞的叶绿体没有基粒,所以维管束鞘细胞的叶绿体不能进行光反应,A错误;
B、维管束鞘细胞中的暗反应过程需要光反应提供的ATP和NADPH,B正确;
C、由图2可知,PEP羧化酶可富集环境中较低浓度的CO2,PEP与低浓度的CO2生成C4 ,C正确;
D、玉米维管束鞘细胞周围的叶肉细胞可以利用PEP羧化酶固定较低浓度的CO2,并转移到维管束鞘细胞中释放,高温、干旱时植物会关闭气孔,玉米在外界二氧化碳供应不足时,C4能分解产生二氧化碳继续供暗反应正常进行,故玉米特殊的结构和功能,使其更适应高温干旱环境,D正确。
14. SOS1和NHX均可以同时反向运输Na+和H+,两者分别位于细胞膜和液泡膜上。柽柳通过这两种转运蛋白将Na+运输至细胞外或液泡中,减少其在细胞质基质中的积累,保证生命活动的正常进行,从而适应高盐环境,上述过程均依赖于H+的顺浓度梯度运输。下列叙述错误的是( )
A. 运输过程中,Na+需要与SOS1和NHX结合
B. 推测细胞外的H+浓度低于细胞质基质的
C. 上述Na+的运输过程不会直接消耗ATP
D. 促进与SOS1合成相关基因的表达有助于提高柽柳的抗盐胁迫能力
【答案】B
【解析】
【分析】1、自由扩散的特点是顺浓度梯度,与膜内外物质浓度梯度有关,不需要载体蛋白协助,不消耗能量。
2、协助扩散的特点是顺浓度梯度,与膜内外物质浓度梯度有关,还需要膜上蛋白质的协助,不消耗能量。
3、主动运输的特点是逆浓度梯度,需要载体蛋白协助,需要消耗能量。
【详解】A、SOS1和NHX均可以同时反向运输Na+和H+,依赖于H+的顺浓度梯度运输,所以SOS1和NHX属于载体蛋白,运输过程中,Na+需要与SOS1和NHX结合,A正确;
B、SOS1进行反向运输Na+和H+,其位于细胞膜上,可以将Na+运输至细胞外,且该过程依赖于H+的顺浓度梯度,可推知,细胞外的H+浓度高于细胞质基质,B错误;
C、上述Na+的运输过程均依赖于H+的顺浓度梯度运输所产生的电化学势能,所以不会直接消耗ATP,C正确;
D、SOS1将Na+运输至细胞外,减少其在细胞质基质中的积累,保证生命活动的正常进行,从而适应高盐环境,所以促进与SOS1合成相关基因的表达有助于提高柽柳的抗盐胁迫能力,D正确。
故选B。
15. 取鸡蛋清,加入蒸馏水,混匀并加热一段时间后,过滤得到浑浊的滤液。以该滤液为反应物,探究不同温度对某种蛋白酶活性的影响,实验结果如表所示。
组别
1
2
3
4
5
温度(℃)
27
37
47
57
67
滤液变澄清时间(min)
16
9
4
6
50 min未澄清
据表分析,下列叙述正确的是( )
A. 滤液变澄清的时间与该蛋白酶活性呈正相关
B. 若实验温度为52℃,则滤液变澄清时间为4~6min
C. 若实验后再将组5放置在57℃,则滤液变澄清时间为6min
D. 组3滤液变澄清时间最短,酶促反应速率最快
【答案】D
【解析】
【详解】A、浑浊的滤液为变性的蛋白质液体,滤液变澄清的时间与该蛋白酶活性呈负相关,即蛋白酶活性越强,蛋白质水解越快,澄清时间越短,A错误;
B、47℃和57℃的澄清时间分别为4min和6min,说明最适温度可能在47℃~57℃之间。若实验温度为52℃,可能更接近最适温度,酶活性更高,澄清时间可能短于4min,B错误;
C、组5蛋白酶已经失活,实验后再将组5放置在57℃,滤液也不会澄清,C错误;
D、组3滤液变澄清时间最短,说明酶活性最高,酶促反应速率最快,D正确。
二、非选择题:本题共5小题,共60分。
16. 小球藻由于光合效率高、油脂含量高等特点被视为新型生物柴油的首选原料之一。图1为小球藻叶绿体内的光反应机制,其中PSI和PSII表示光系统,图2表示小球藻细胞合成生物柴油等代谢的过程。
(1)ATP合成酶分布于图1和图2中的____________________膜上,作用是_____________;水光解产生的电子经一系列的传递,与①共同形成了②_________,PSI和PSII吸收的光能储存于_____________________中,参与暗反应。
(2)图2中,物质X是_____________,可跨膜转运至线粒体内,转变为________________参与三羧酸循环;此外,物质X还能在相关酶的作用下生成_____________________。
(3)科研人员将小球藻在不同条件进行培养,发现在缺氮条件下,小球藻会降低蛋白质、淀粉的合成,转而合成更多的油脂,请从元素组成和能量角度分析小球藻调整物质合成的意义________________。
【答案】(1) ①. 类囊体薄膜和线粒体内 ②. 催化和运输 ③. NADPH ④. ATP 和 NADPH
(2) ①. 丙酮酸 ②. 乙酰 CoA ③. 甘油三酯、乙醇(和 CO2 )
(3)油脂不含氮元素,且储存能量高,有利于小球藻的代谢和生长
【解析】
【分析】光合作用过程:①光反应场所在叶绿体类囊体薄膜,发生水的光解、ATP和NADPH的生成;②暗反应场所在叶绿体的基质,发生CO2的固定和C3的还原,消耗ATP和NADPH。
【小问1详解】
ATP合成酶的作用是催化ADP和Pi生成ATP,从图1看出,ATP合酶分布在叶绿体类囊体薄膜上,同时在图2中,ATP合酶分布在线粒体内膜上(有氧呼吸第三阶段)。图1还可知ATP合成酶可以运输H+。
水光解产生的电子经一系列的传递,与①NADP+共同形成了②NADPH,PSI和PSII吸收的光能储存在ATP和NADPH中,参与暗反应。
【小问2详解】
有氧呼吸第一阶段的物质X是丙酮酸,丙酮酸跨膜转运至线粒体基质参与有氧呼吸第二阶段,结合图示可知,丙酮酸在线粒体基质中转变为乙酰CoA参与三羧酸循环,该阶段不需要氧气的参与。此外,丙酮酸还可以在细胞质基质中在相关酶的作用下生成酒精和二氧化碳(参与无氧呼吸)或生成甘油三酯。
【小问3详解】
缺氮条件下,小球藻会降低蛋白质、淀粉的合成,转而合成更多的油脂,因为油脂不含氮元素,且储存能量高,有利于小球藻的代谢和生长。
17. 肠抑脂素(Ch)是肠道分泌的调控胆固醇合成的多肽类激素,作用机制如图1所示。
(1)胆固醇除参与血液中脂质的运输,还参与构成_______ 。GPR146是 Ch的_______ ,Ch与GPR146结合说明了细胞膜具有_______的功能。
(2)用3H标记的氨基酸探究 Ch的合成和分泌时,3H是否适合标记在氨基酸的羧基位置。 _______ (填“是”或“否”),原因是_______ 。
(3)研究者利用 Ch基因敲除小鼠探究肠道分泌 Ch对胆固醇合成的调控作用。实验结果如图2所示。
①结合图示结果分析,各组处理应为:A组为野生型小鼠+普通饮食,B组为野生型小鼠+高胆固醇饮食,C组为_______ ,D组为_______ 。
②由实验结果可知,在_______ (填“普通饮食”或“高胆固醇饮食”)条件下,Ch对小鼠血浆胆固醇影响更大。结合图1分析,C组小鼠胆固醇水平高于A组的原因是_______ 。
【答案】(1) ①. 动物细胞膜 ②. 受体 ③. 进行细胞间信息交流
(2) ①. 否 ②. 3H标记在氨基酸的羧基位置时,在脱水缩合时会形成水
(3) ①. Ch基因敲除小鼠+普通饮食 ②. Ch基因敲除小鼠+高胆固醇饮食 ③. 普通饮食 ④. C组小鼠无法合成Ch,不能与GPR146受体结合,解除了对PKA信号通路抑制,胆固醇合成增加
【解析】
【分析】脂质通常包括脂肪、磷脂、固醇等,它们有些是细胞结构的重要组成成分,有些参与重要的生命活动过程。
【小问1详解】
胆固醇除参与血液中脂质的运输外,还是动物细胞膜的重要组成成分。由图可知,GPR146是Ch的受体,Ch与GPR146结合传递信号,说明细胞膜具有进行细胞间信息交流的功能。
【小问2详解】
3H标记在氨基酸的羧基位置时,在脱水缩合时会形成水,羧基会脱去-OH,导致3H标记的羧基中-O3H丢失,无法追踪多肽的合成与分泌过程。
【小问3详解】
①由题意可知,本实验为利用Ch基因敲除小鼠探究肠道分泌Ch对胆固醇合成的调控作用,自变量为小鼠的类型和是否含有胆固醇,A组为野生型小鼠+普通饮食,B组为野生型小鼠+高胆固醇饮食,CD组则应使用Ch基因敲除小鼠,即C组为Ch基因敲除小鼠+普通饮食,D组为Ch基因敲除小鼠+高胆固醇饮食。
②由实验结果可知,在普通饮食条件下,A组与C组的胆固醇水平差异更显著,说明Ch对小鼠血浆胆固醇影响更大。C组为Ch基因敲除小鼠,无法合成Ch,结合图1可知,Ch不能与GPR146受体结合,解除了对PKA信号通路抑制,胆固醇合成增加,所以C组小鼠胆固醇水平高于A组。
18. 细胞可维持正确折叠蛋白质的稳定性,同时降解错误折叠蛋白质,从而实现蛋白质稳态。维持蛋白质稳态对于人体的正常生理功能至关重要。错误折叠的异常蛋白会导致疾病的发生。我国科学家发明一种小分子绑定化合物ATTEC,这种“小分子胶水”(ATTEC)能将自噬标记物LC3和错误折叠的异常蛋白黏在一起,形成黏附物,进而将黏附物包裹形成自噬体进行降解,从而达到治疗疾病的目的。其过程如图甲所示。
(1)从生物膜的组成成分和结构分析,溶酶体膜和自噬体膜能相互转化的原因是_______。
(2)研究发现,在亨廷顿舞蹈症(HD)患者的大脑中,突变后的mHTT蛋白会使得纹状体神经退行,造成神经元的大量死亡,最终表现为运动障碍、认知障碍等症状。研究表明,ATTEC可有效治疗HD,试分析其作用机制:_______。
(3)网织红细胞是哺乳动物红细胞成熟过程中的一个阶段,细胞内存在大量血红蛋白,若某些血红蛋白出现错误折叠形成不正常的空间结构,则它们会被一种特殊的途径所降解。科研人员检测了该细胞在不同条件下错误折叠蛋白质的降解率,结果如图乙。据图乙结果分析:ATP能够______(填“促进”或“抑制”)蛋白质的降解;你认为参与蛋白质降解的酶是不是溶酶体中的酸性水解酶,并说明理由______。(填“是”或“不是”)。理由是______。
【答案】(1)两种膜的组成成分和结构相似(主要成分都是磷脂和蛋白质;都以磷脂双分子层为基本支架)
(2)ATTEC将大脑神经元细胞中突变后的mHTT蛋白与LC3黏在一起,形成黏附物后被包裹形成自噬体最终被降解
(3) ①. 促进 ②. 不是 ③. 降解反应的最适 pH为8.0,呈碱性
【解析】
【分析】由图可知,ATTEC可以和LC3结合到异常蛋白,而不能和正常蛋白结合,结合异常蛋白后会被包裹形成自噬体,自噬体与溶酶体结合,通过溶酶体中的酶将异常蛋白降解。
【小问1详解】
溶酶体膜和自噬体膜的组成成分和结构相似(主要成分都是磷脂和蛋白质;都以磷脂双分子层为基本支架),故这两种膜能够相互转化。
【小问2详解】
突变后的mHTT蛋白为异常蛋白,ATTEC能将大脑神经元细胞中突变后的mHTT蛋白与LC3黏在一起,形成黏附物后被包裹形成自噬体最终被降解,因此ATTEC可有效治疗HD。
【小问3详解】
由图2可知,与不加ATP相比,加入ATP后的蛋白质降解率提高,说明ATP能够促进蛋白质的降解。据图可知,pH为8.0时,蛋白质降解速率最高,说明降解反应的最适pH为8.0 ,呈碱性。参与蛋白质降解的酶,如果是溶酶体中的酸性水解酶,则在pH为8.0时会失活,所以该酶不是溶酶体中的酸性水解酶。
19. 研究人员对马桑(具药用价值的多年生乔木)的光合作用进行研究,结果如图1所示。马桑对铅(Pb)胁迫有一定的适应能力,研究发现ABC转运蛋白(PcABC)在马桑适应铅(Pb)胁迫中发挥重要作用。如图2为PcABC对Pb2+的转运途径之一。
回答下列问题:
(1)马桑绿叶中的色素经层析液分离,扩散最快的色素为_________。当光照强度为400 μmol·m−2·s−1时,马桑植株的真正光合速率为_________μmol·m−2·s−1。
(2)光照强度大于1100 μmol·m−2·s−1后,胞间CO2浓度增加的原因:________(写出两点)。
(3)土壤中的镉(Cd)也会对马桑产生不良影响。某生物兴趣小组猜想PcABC蛋白也能转运Cd2+,于是他们设计了如下实验:
备选材料用具:
A.生理状况相同的马桑细胞若干;
B.普通培养液;
C.不含Pb2+、Cd2+的完全培养液;
D.不含Pb2+、含Cd2+完全培养液;
E.一定量能抑制PcABC活性的药物。
实验步骤:
①将生理状况相同的马桑细胞随机均分为甲、乙两组;
②甲组用不含Pb2+、含Cd2+的完全培养液培养马桑细胞;乙组作为实验组,处理是:________;(填写字母编号)
③一段时间后,检测并比较两组培养液中________。
预期结果及结论:
若________,则说明PcABC能转运Cd2+;
若________,则说明PcABC不能转运Cd2+。
【答案】(1) ①. 胡萝卜素 ②. 9.5
(2)净光合速率下降,消耗的CO2减少;且气孔导度增加,从外界环境进入的CO2增多
(3) ①. D+E ②. Cd2+的剩余量 ③. 甲组培养液中Cd2+的剩余量低于乙组 ④. 甲组和乙组培养液中Cd2+的剩余量基本相同(无显著差异)
【解析】
【小问1详解】
马桑绿叶中的色素经层析液分离,扩散最快的色素为胡萝卜素,因为胡萝卜素在层析液中的溶解度最高。真正光合速率等于呼吸速率与净光合速率之和,由图1可知,当光照强度为400 μmol·m−2·s−1时,马桑植株的真正光合速率为1.5+8=9.5μmol·m−2·s−1。
【小问2详解】
由图1可知:光照强度大于1100 μmol·m−2·s−1后,净光合速率下降,消耗的CO2减少,气孔导度增加,从外界环境进入的CO2增多,导致胞间CO2浓度增加。
【小问3详解】
由题意可知:本实验的目的是探究PcABC蛋白是否也能转运Cd2+,实验的自变量为PcABC蛋白是否发挥作用,因变量为Cd2+的运输速率(检测指标为培养液中Cd2+的剩余量),其它无关变量各组应相同且适宜,因此实验步骤为:①将生理状况相同的马桑细胞随机均分为甲、乙两组;②甲组作为对照组,用不含Pb2+、含Cd2+的完全培养液培养马桑细胞;乙组作为实验组,用不含Pb2+、含Cd2+完全培养液并在该培养液中加入一定量能抑制PcABC活性的药物来培养马桑细胞,即乙组的处理是:D+E。③一段时间后,检测并比较两组培养液中Cd2+的剩余量。
若PcABC蛋白能转运Cd2+,则甲组培养液中Cd2+的剩余量低于乙组。若PcABC不能转运Cd2+,则甲组和乙组培养液中Cd2+的剩余量基本相同(无显著差异)。
20. A蛋白是某种激素合成的关键酶。为鉴定该激素合成的部位及生理作用,科研团队利用无缝克隆技术将A蛋白结合蛋白基因(P基因)与葡萄糖苷酸酶基因(GUS基因)融合,构建A蛋白检测探针,通过农杆菌转化法导入拟南芥进行实验。相关原理、过程及质粒的结构如下图所示。
注:①bar为抗草甘膦(一种除草剂)基因;Ter为四环素抗性基因;Amp'为氨苄青霉素抗性基因。②F1、F2、R1、R2为引物。③BamHI、SmaI、BclI为限制酶。
(1)无缝克隆时所需的酶除TS核酸外切酶外,还有_______。用无缝克隆技术构建GUS-P融合基因的关键是引物R2的5'端序列与引物_________互补。
(2)利用双酶切法将GUS-P融合基因插入Ti质粒,选用的限制酶为________。扩增GUS-P融合基因所需的引物R1和F2应选用下列引物组合为________。
①5'-CTTGGATGAT-3' ②5'-ATTCAACAGA-3' ④5'-TAAGTTGTCT-3' ③5'-TCTGTTGAAT-3'
(3)为了验证重组后的Ti质粒是否导入到农杆菌体内,需要筛选出能在含_______培养基上生长而不能在含________培养基上生长的农杆菌。
【答案】(1) ①. 耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)和DNA连接酶 ②. F1
(2) ①. BclI和SmaI ②. ①③
(3) ①. 四环素 ②. 氨苄青霉素
【解析】
【分析】基因工程的基本操作步骤主要包括四步:①目的基因的获取;②基因表达载体的构建;③将目的基因导入受体细胞;④目的基因的检测与表达。
【小问1详解】
无缝克隆时所需的酶除TS核酸外切酶外,还有耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)和DNA连接酶。用无缝克隆技术构建GUS-P融合基因的关键是引物R2的5'端序列与引物F1的部分序列互补,才能实现无缝克隆。
【小问2详解】
利用双酶切法将GUS-P融合基因插入Ti质粒,选用的限制酶为BclI和SmaI,因为BamHI有两个切割位点,因而不选择。结合图示可知融合基因的左侧为F2引物,右侧为R1引物,对应融合基因两侧的已知序列可知,扩增GUS-P融合基因所需的引物R1和F2应选用下列引物组合为①③。
【小问3详解】
为了验证重组后的Ti质粒是否导入到农杆菌体内,需要筛选出能在含四环素培养基上生长而不能在含氨苄青霉素培养基上生长的农杆菌,因为重组质粒中抗四环素的基因没有被破坏,而抗氨苄青霉素的基因被破坏,同时农杆菌不具有抗除草剂的特性。
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武平一中2026-2027学年第一学期第二次阶段检测高三生物试题
(考试时间:75分钟 总分:100分)
一、选择题(本大题15小题,1-10小题每题2分,11-15小题每题4分,共40分。)
1. 下列关于骨架的叙述,错误的是( )
A. 内质网膜、高尔基体膜、核糖体膜都以磷脂双分子层为基本骨架
B. 糖原、蛋白质、核酸等生物大分子都以碳链为基本骨架
C. 细胞骨架和植物细胞壁的主要成分不同,但都有维持细胞形态的作用
D. 在DNA结构中脱氧核糖和磷酸交替连接构成DNA分子的基本骨架
2. 同位素标记法可用于示踪物质的运行和变化规律,下列实验中没有利用同位素标记法的是( )
A. 鲁宾和卡门探究氧气的来源
B. 人鼠细胞融合实验探究细胞膜结构
C. 分泌蛋白的合成和运输
D. 卡尔文探究有机物中碳的来源
3. 实验原理是实验设计的依据。利用相关实验原理,下列与糖类有关的说法,错误的是( )
A. 淀粉酶能催化淀粉水解,可以用其探究温度对酶活性的影响
B. 在酸性条件下用重铬酸钾检测酵母菌产生酒精时需将葡萄糖耗尽
C. 斐林试剂可与葡萄糖在特定条件下生成砖红色沉淀,但一般不用于尿糖检测
D. 制备纯净细胞膜时可用纤维素酶水解后的植物细胞作实验材料
4. 2024年4月,科学家发现了第一种能固氮的单细胞真核生物——贝氏布拉藻,其内部存在“特殊氨工厂”硝基体这一细胞器,可以固定空气中的氮气。研究发现“硝基体”曾经是某种固氮细菌,在藻类内部转化而成。“硝基体”中大约有一半蛋白质编码依赖宿主基因组。下列相关叙述正确的是( )
A. 贝氏布拉藻固定的氮元素在细胞内可以参与合成脂肪和蛋白质
B. 贝氏布拉藻细胞的遗传物质是RNA,共含有4种碱基
C. 细胞呼吸可为硝基体合成蛋白质、固氮等生命活动提供能量
D. 硝基体可以在没有氮源但其他成分适宜的培养基中独立存活
5. 农谚是我国劳动人民智慧的结晶和经验的总结,其中蕴含着很多生物学原理。下列关于农谚的分析,错误的是( )
A. “玉米带大豆,十年九不漏”讲的是套种的好处,农业生产上的间作、套种均是通过不同作物对资源的互补利用来提高农作物产量的
B. “谷连谷,坐着哭”突显了轮作的优势,轮作可避免田地中一些元素大量减少
C. “锄头出肥”指的是松土有利于植物生长,土壤板结主要影响植物根系的呼吸作用,进而影响植物的光合作用
D. “无水肥无力”是指施肥的同时应适当浇水,矿质元素溶解在水中容易被植物吸收,在细胞中各元素主要以离子形式存在
6. 未折叠蛋白在内质网腔中累积造成内质网应激,细胞启动未折叠蛋白响应,对未折叠蛋白重新折叠,以恢复蛋白质稳态,VMP1蛋白缺失的细胞对内质网应激的敏感性降低。下列叙述错误的是( )
A. 内质网一般通过出芽形成囊泡的方式将折叠的蛋白转运到高尔基体
B. VMP1蛋白缺失的细胞内未折叠的蛋白可能增多
C. 蛋白质能进行折叠是因为氨基酸之间能够形成肽键
D. 细胞将折叠的蛋白分泌出细胞会引起内质网膜面积发生改变
7. 核孔含有多种核孔蛋白,是核膜上负责物质双向运输的通道。下列叙述错误的是( )
A. 核孔蛋白的差异由不同氨基酸间的连接方式决定
B. 核孔的数量会影响核质间物质交换和信息交流
C. 核孔通过核孔蛋白识别和转运特定的生物大分子
D. 真核细胞合成蛋白质的指令通过核孔进入细胞质
8. 水淹胁迫下,某植物经糖酵解过程(细胞呼吸第一阶段)分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸可以进一步转化成乙醇或乳酸以响应水淹胁迫。下列叙述正确的是( )
A. 在水淹胁迫下该植物细胞产生乙醇或乳酸的场所相同
B. 葡萄糖分解生成丙酮酸的过程只能在无氧条件下进行
C. 长时间水淹会导致糖酵解过程产生的[H]在细胞中积累
D. 无氧呼吸过程中,有机物中的能量大部分以热能形式散失
9. 多年生高等植物黑藻喜欢在光照充足的环境中生长,是生物学实验的良好材料。下列利用黑藻进行实验的相关叙述正确的是( )
A. 观察黑藻叶肉细胞的质壁分离时,制作装片的流程包括解离→漂洗→染色→制片
B. 用黑藻叶片进行色素的提取和分离实验,得到的色素带中条带最宽的是叶绿素a
C. 将黑藻置于NaHCO₃溶液中,通过不断改变光照强度并测量溶液中溶解氧含量来探究光照强度对光合作用的影响
D. 用电子显微镜观察黑藻叶肉细胞的叶绿体,可观察到中心体和大量的绿色基粒结构
10. 帕蒂西兰是用于治疗家族性淀粉样多发性神经病变(FAP)的小干扰RNA类药物,它由两条链构成,核苷酸链含有游离的磷酸基团端为5'端,另一端为3'端。两条链各含21个核苷酸,形成19个碱基对;每条链的3'末端含有两个悬空的未配对核苷酸。下列有关叙述正确的是( )
A. 帕蒂西兰3'末端共含2个未配对碱基
B. 帕蒂西兰彻底水解得到的碱基最多有5种
C. 人体细胞中含有RNA,但RNA不是人的遗传物质
D. 帕蒂西兰既可用于治疗FAP,又是遗传信息的载体
11. 草莓和葡萄是重要的经济作物,对其光合作用和呼吸作用进行研究,可以指导生产。在温度和CO₂浓度相同且适宜的条件下,某研究小组测定了葡萄植株和草莓植株在不同光照强度下的光合速率,结果如下图,据图分析正确的是( )
A. 该实验的自变量为光照强度,因变量为CO₂吸收量
B. 若将葡萄植株移植到缺Mg的环境中培养,一段时间后P点会右移
C. N点之后限制草莓光合速率的主要因素是光照强度
D. 在Y光照强度下,草莓和葡萄植株光合作用合成有机物的速率相等
12. 室温条件下,将紫色洋葱鳞片叶外表皮置于一定浓度的某溶液中,其原生质层对细胞壁的压力随时间变化的关系如图所示。下列说法正确的是( )
A. 细胞失水只发生在t0~t1,吸水只发生在t2~t3
B. t1时刻细胞液的浓度最大,细胞液颜色最深
C. 与t0时刻相比,t3时刻对应的细胞液浓度可能较高
D. 若溶液为KNO3溶液,细胞从t2时开始吸收K+和NO3-
13. 玉米叶片具有特殊的结构,其维管束鞘细胞周围的叶肉细胞可以利用PEP羧化酶固定较低浓度的CO2,并转移到维管束鞘细胞中释放,参与光合作用的暗反应。据图分析,下列叙述错误的是
A. 维管束鞘细胞的叶绿体能进行正常的光反应
B. 维管束鞘细胞中暗反应过程仍需要ATP和NADPH
C. PEP羧化酶对环境中较低浓度的CO2具有富集作用
D. 玉米特殊的结构和功能使其更适应高温干旱环境
14. SOS1和NHX均可以同时反向运输Na+和H+,两者分别位于细胞膜和液泡膜上。柽柳通过这两种转运蛋白将Na+运输至细胞外或液泡中,减少其在细胞质基质中的积累,保证生命活动的正常进行,从而适应高盐环境,上述过程均依赖于H+的顺浓度梯度运输。下列叙述错误的是( )
A. 运输过程中,Na+需要与SOS1和NHX结合
B. 推测细胞外的H+浓度低于细胞质基质的
C. 上述Na+的运输过程不会直接消耗ATP
D. 促进与SOS1合成相关基因的表达有助于提高柽柳的抗盐胁迫能力
15. 取鸡蛋清,加入蒸馏水,混匀并加热一段时间后,过滤得到浑浊的滤液。以该滤液为反应物,探究不同温度对某种蛋白酶活性的影响,实验结果如表所示。
组别
1
2
3
4
5
温度(℃)
27
37
47
57
67
滤液变澄清时间(min)
16
9
4
6
50 min未澄清
据表分析,下列叙述正确的是( )
A. 滤液变澄清的时间与该蛋白酶活性呈正相关
B. 若实验温度为52℃,则滤液变澄清时间为4~6min
C. 若实验后再将组5放置在57℃,则滤液变澄清时间为6min
D. 组3滤液变澄清时间最短,酶促反应速率最快
二、非选择题:本题共5小题,共60分。
16. 小球藻由于光合效率高、油脂含量高等特点被视为新型生物柴油的首选原料之一。图1为小球藻叶绿体内的光反应机制,其中PSI和PSII表示光系统,图2表示小球藻细胞合成生物柴油等代谢的过程。
(1)ATP合成酶分布于图1和图2中的____________________膜上,作用是_____________;水光解产生的电子经一系列的传递,与①共同形成了②_________,PSI和PSII吸收的光能储存于_____________________中,参与暗反应。
(2)图2中,物质X是_____________,可跨膜转运至线粒体内,转变为________________参与三羧酸循环;此外,物质X还能在相关酶的作用下生成_____________________。
(3)科研人员将小球藻在不同条件进行培养,发现在缺氮条件下,小球藻会降低蛋白质、淀粉的合成,转而合成更多的油脂,请从元素组成和能量角度分析小球藻调整物质合成的意义________________。
17. 肠抑脂素(Ch)是肠道分泌的调控胆固醇合成的多肽类激素,作用机制如图1所示。
(1)胆固醇除参与血液中脂质的运输,还参与构成_______ 。GPR146是 Ch的_______ ,Ch与GPR146结合说明了细胞膜具有_______的功能。
(2)用3H标记的氨基酸探究 Ch的合成和分泌时,3H是否适合标记在氨基酸的羧基位置。 _______ (填“是”或“否”),原因是_______ 。
(3)研究者利用 Ch基因敲除小鼠探究肠道分泌 Ch对胆固醇合成的调控作用。实验结果如图2所示。
①结合图示结果分析,各组处理应为:A组为野生型小鼠+普通饮食,B组为野生型小鼠+高胆固醇饮食,C组为_______ ,D组为_______ 。
②由实验结果可知,在_______ (填“普通饮食”或“高胆固醇饮食”)条件下,Ch对小鼠血浆胆固醇影响更大。结合图1分析,C组小鼠胆固醇水平高于A组的原因是_______ 。
18. 细胞可维持正确折叠蛋白质的稳定性,同时降解错误折叠蛋白质,从而实现蛋白质稳态。维持蛋白质稳态对于人体的正常生理功能至关重要。错误折叠的异常蛋白会导致疾病的发生。我国科学家发明一种小分子绑定化合物ATTEC,这种“小分子胶水”(ATTEC)能将自噬标记物LC3和错误折叠的异常蛋白黏在一起,形成黏附物,进而将黏附物包裹形成自噬体进行降解,从而达到治疗疾病的目的。其过程如图甲所示。
(1)从生物膜的组成成分和结构分析,溶酶体膜和自噬体膜能相互转化的原因是_______。
(2)研究发现,在亨廷顿舞蹈症(HD)患者的大脑中,突变后的mHTT蛋白会使得纹状体神经退行,造成神经元的大量死亡,最终表现为运动障碍、认知障碍等症状。研究表明,ATTEC可有效治疗HD,试分析其作用机制:_______。
(3)网织红细胞是哺乳动物红细胞成熟过程中的一个阶段,细胞内存在大量血红蛋白,若某些血红蛋白出现错误折叠形成不正常的空间结构,则它们会被一种特殊的途径所降解。科研人员检测了该细胞在不同条件下错误折叠蛋白质的降解率,结果如图乙。据图乙结果分析:ATP能够______(填“促进”或“抑制”)蛋白质的降解;你认为参与蛋白质降解的酶是不是溶酶体中的酸性水解酶,并说明理由______。(填“是”或“不是”)。理由是______。
19. 研究人员对马桑(具药用价值的多年生乔木)的光合作用进行研究,结果如图1所示。马桑对铅(Pb)胁迫有一定的适应能力,研究发现ABC转运蛋白(PcABC)在马桑适应铅(Pb)胁迫中发挥重要作用。如图2为PcABC对Pb2+的转运途径之一。
回答下列问题:
(1)马桑绿叶中的色素经层析液分离,扩散最快的色素为_________。当光照强度为400 μmol·m−2·s−1时,马桑植株的真正光合速率为_________μmol·m−2·s−1。
(2)光照强度大于1100 μmol·m−2·s−1后,胞间CO2浓度增加的原因:________(写出两点)。
(3)土壤中的镉(Cd)也会对马桑产生不良影响。某生物兴趣小组猜想PcABC蛋白也能转运Cd2+,于是他们设计了如下实验:
备选材料用具:
A.生理状况相同的马桑细胞若干;
B.普通培养液;
C.不含Pb2+、Cd2+的完全培养液;
D.不含Pb2+、含Cd2+完全培养液;
E.一定量能抑制PcABC活性的药物。
实验步骤:
①将生理状况相同的马桑细胞随机均分为甲、乙两组;
②甲组用不含Pb2+、含Cd2+的完全培养液培养马桑细胞;乙组作为实验组,处理是:________;(填写字母编号)
③一段时间后,检测并比较两组培养液中________。
预期结果及结论:
若________,则说明PcABC能转运Cd2+;
若________,则说明PcABC不能转运Cd2+。
20. A蛋白是某种激素合成的关键酶。为鉴定该激素合成的部位及生理作用,科研团队利用无缝克隆技术将A蛋白结合蛋白基因(P基因)与葡萄糖苷酸酶基因(GUS基因)融合,构建A蛋白检测探针,通过农杆菌转化法导入拟南芥进行实验。相关原理、过程及质粒的结构如下图所示。
注:①bar为抗草甘膦(一种除草剂)基因;Ter为四环素抗性基因;Amp'为氨苄青霉素抗性基因。②F1、F2、R1、R2为引物。③BamHI、SmaI、BclI为限制酶。
(1)无缝克隆时所需的酶除TS核酸外切酶外,还有_______。用无缝克隆技术构建GUS-P融合基因的关键是引物R2的5'端序列与引物_________互补。
(2)利用双酶切法将GUS-P融合基因插入Ti质粒,选用的限制酶为________。扩增GUS-P融合基因所需的引物R1和F2应选用下列引物组合为________。
①5'-CTTGGATGAT-3' ②5'-ATTCAACAGA-3' ④5'-TAAGTTGTCT-3' ③5'-TCTGTTGAAT-3'
(3)为了验证重组后的Ti质粒是否导入到农杆菌体内,需要筛选出能在含_______培养基上生长而不能在含________培养基上生长的农杆菌。
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