四川省内江市第一中学2026-2027学年高三上学期开学考试生物试题

**基本信息** 高三入学测试生物试题，以“江南采莲”“黄豆酱发酵”等真实情境为载体，覆盖细胞代谢、遗传进化、生物技术等核心知识，融合生命观念与科学思维，适配开学学情诊断与能力评估。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|15题/45分|生命系统层次、酶活性、发酵工程、遗传规律|第1题借古诗创设生态情境考查种群概念，第4题结合传统发酵技术分析微生物代谢| |解答题|5题/55分|光合作用、细胞分裂、基因工程、实验设计|16题通过马铃薯光合产物运输模型考查物质与能量观，20题以限制酶选择与质粒构建体现探究实践能力|

高2027届高三上学期入学测试生物试题 学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________ 一、单选题 1．“江南可采莲，莲叶何田田，鱼戏莲叶间……”，这是汉代江南劳动人民采莲时的唯美场景。从生物学的角度来理解，下列相关叙述错误的是（　　） A．莲叶与鱼属于不同的生命系统结构层次 B．这片水域中所有的鱼构成了一个种群结构层次 C．“鱼戏莲叶间”这一生命活动需要多种细胞的协调配合 D．这片水域中的所有生物和无机环境构成了一个生态系统 2．科学家用离心技术分离得到有核糖体结合的微粒体，即膜结合核糖体。其核糖体上最初合成的多肽链含有信号肽（SP）以及信号识别颗粒（SRP）。研究发现，SRP与SP结合是引导新合成的多肽链进入内质网腔加工的前提，经囊泡包裹离开内质网的蛋白质均不含SP，此时的蛋白质一般无活性。下列说法错误的是（      ） A．微粒体中的膜是内质网膜结构的一部分 B．内质网腔中含有能够在特定位点催化肽键水解的酶 C．SP合成缺陷的细胞中，分泌蛋白会聚集在内质网腔 D．经囊泡包裹离开内质网的蛋白质可能需要高尔基体的进一步加工 3．羊奶被称为“奶中之王”，羊奶中的维生素及微量元素的含量远高于牛奶中的，且羊奶中的脂肪颗粒体积仅为牛奶中的1/3，更容易被人体吸收。下列说法正确的是（      ） A．羊奶中富含钙、磷、钾、镁、氯、锰等微量元素 B．向羊奶中加入斐林试剂甲液后，再加入乙液以检测还原糖 C．糖类的氧化分解所需要的氧气远远多于同等质量脂肪的 D．羊奶中的脂肪被人体消化吸收后可以被分解用于生命活动 4．黄豆酱是人们喜爱的传统美食，早在春秋时期就有制作方法的相关记载。它以黄豆为主要原料，经米曲霉（好氧菌）、酵母菌、乳酸菌等微生物发酵而成。劳动人民在制作过程中不断改进发酵技术，总结出以下经验。下列叙述错误的是（ ） ①选用具有高蛋白酶活性的米曲霉 ②用蒸煮后的大豆与米曲霉混合堆积 ③将初步发酵后含米曲霉等微生物的曲料摊薄，并适当通风 ④在装坛时，添加适量食盐 ⑤发酵过程中，需保持发酵坛密封 ⑥发酵过程中，需定期搅拌 A. ①和④对黄豆酱风味的形成起重要作用，利于提升品质 B. ②和⑥可以促使微生物和物料充分混合，提高发酵效率 C. ③有利于米曲霉和酵母菌进行有氧呼吸并快速大量增殖 D.⑤中乳酸菌主要集中于发酵坛上部而米曲霉集中于下部 5．下图表示某些因素对纤维素酶活性影响的实验研究，底物壳聚糖与纤维素具有相近的化学结构，纤维素酶对它们都有不同程度的水解作用。下列分析正确的是（ ） A. 纤维素酶对纤维素的水解作用强于对壳聚糖的水解作用 B. 可通过增大底物浓度提高酶的活性，加快酶促反应速率 C. 纤维素酶不止一个结合底物的位点，故它不具有专一性 D. 本实验研究的自变量有 pH 大小、温度高低和底物的种类 6．人体内不同细胞吸收葡萄糖的方式不完全相同，图甲为成熟红细胞从血浆中吸收葡萄糖的模式图，图乙为小肠上皮细胞从肠腔吸收并转运葡萄糖的模式图。据图推测正确的是（     ） A．图甲中细胞内葡萄糖分解形成的丙酮酸进入线粒体氧化供能 B．图乙中细胞吸收葡萄糖和排出Na+所需的能量来源不同 C．人的成熟红细胞在生理盐水中不会发生水分子的跨膜运输，细胞体积不变 D．图乙中葡萄糖和Na+从肠腔到小肠上皮细胞的同向运输，其运输方式相同 7．成熟促进因子（MPF）是一种能催化蛋白质磷酸化的酶，它能使细胞从分裂间期进入到分裂期。下列有关叙述错误的是（　　） A．在细胞周期中，MPF的浓度会出现周期性变化和波动 B．MPF的合成与染色质的复制都发生在细胞分裂间期 C．若抑制MPF的活性，细胞将停留在分裂期无法完成分裂 D．MPF通过磷酸化靶蛋白改变其空间结构以实现功能调控 8．Klotho基因是一种与衰老密切相关的基因，它通过调控离子通道、信号通路或其它基因的表达而发挥抗衰老、保护肾脏和保护心血管等作用。下列相关叙述错误的是（    ） A．正常的细胞衰老有利于机体更好地实现自我更新 B．衰老细胞的细胞核的体积变小，核膜内折，染色质收缩 C．细胞代谢产生的自由基可能会引起Klotho基因突变，导致细胞衰老 D．高等动物衰老的细胞内，Klotho基因的表达可能受到了抑制 9．下列哪项明显体现了转基因生物引发的食物安全问题（      ） A．转基因猪的细胞中含有人的生长激素基因，因而猪的生长速度快，个体大 B．转基因大米中含有β一胡萝卜素，营养丰富，产量高 C．转基因植物合成的某些新蛋白质，引起个别人过敏 D．让转基因牛为人类生产凝血因子，并在牛奶中提取 10．如图1为果酒、果醋制作装置，图2为果酒发酵中酵母菌种群数量、葡萄糖浓度和乙醇浓度的变化曲线，下列叙述正确的是（     ） A．制作果酒的整个过程中，应关闭图1装置的夹子a、b，制作果醋时，则应打开夹子a、b B．由果酒发酵转为果醋发酵时，需要降低温度，并打开夹子a C．图2曲线A～B段，瓶内有大量二氧化碳和水产生，导致瓶内气压增大 D．随着发酵时间的推进，葡萄糖含量降低，乙醇的产生速率先上升后下降为0 11．养猪场里某病毒引发的呼吸道传染病，对猪的养殖具有较强的经济破坏性。科学家通过以下流程培育能自主产生特异性抗体的转基因克隆猪，实现对该传染病的预防和治疗。下列说法错误的是（    ） A．D猪的培育涉及了基因工程、细胞工程和胚胎工程等技术 B．步骤①和步骤②的操作都可以采用相似的物理方法进行处理 C．直接向B猪体细胞培养液接种该病毒，以导入病毒的外壳蛋白基因 D．D猪中检测到病毒外壳蛋白基因，并不能说明转基因猪培育成功 12．传统塑料因难以被微生物降解而造成环境污染，聚羟基脂肪酸酯（PHA）具有类似传统塑料的物化特性及其所不具备的可降解性和生物相容性，有望终结“白色污染”。科学家从咸水湖中找到了可以发酵生产PHA的菌种——野生型LS21。下列叙述正确的是（    ） A．LS21能发酵生产PHA，因为它含有能编码PHA的基因 B．提高LS21发酵培养基中营养物质的浓度，会提高PHA的产量 C．利用LS21生产PHA的过程中可采用过滤、沉淀等方法来获得产品 D．改变发酵条件，不仅会影响LS21的生长繁殖，还可能影响其代谢途径 13．细胞器是有定义的，它至少需要符合两个标准：必须通过宿主细胞世代相传和依赖宿主细胞提供的蛋白质。1998年，科学家发现了一种固氮蓝细菌，并将其命名为UCYN-A。同一时段，其他科学家发现了一种具有固氮能力的藻类植物，该藻类细胞里含UCYN-A。研究发现，UCYN-A和它所在的藻类细胞生长是同步的，且从藻类细胞那里获取部分蛋白质。下列叙述正确的是（    ） A．固氮蓝细菌与藻类植物都含有藻蓝素、叶绿素 B．该时段的UCYN-A存在自养和寄生两种生活方式 C．藻类细胞内UCYN-A的运动与藻类的细胞骨架有关 D．该藻类细胞含核糖体的细胞器只有叶绿体和线粒体 14．雄性东亚飞蝗体细胞中有23条染色体，均为端着丝粒，其性染色体组成为XO型。雌性蝗虫的性染色体组成为XX型。下图显示的是精巢不同区域细胞分裂中期图像，在不发生变异的情况下，据图分析以下叙述正确的是（   ） A．图1细胞继续分裂产生的两个子细胞核中的遗传物质相同 B．图1细胞发生同源染色体非姐妹染色体单体间的交叉互换 C．来源于图2细胞的精子与卵细胞结合后发育的子代均为雌性 D．图1细胞中染色体数和核DNA数与图2细胞中不相同 15．下图表示某植物叶肉细胞光合作用和呼吸作用的示意图，有关叙述正确的是 A．ATP合成发生在A、B、C、D过程 B．在缺氧情况下，C中的丙酮酸可以转化成酒精和水 C．图中①、③、④代表的物质依次是O2、ADP+Pi、C5 D．A和B过程发生在叶绿体中，C和D过程发生在线粒体中 二、解答题 16．马铃薯植株下侧叶片合成的有机物通过韧皮部的筛管运走，主要运向块茎贮藏。图1是马铃薯光合作用产物的形成及运输示意图，图2是蔗糖从叶肉细胞进入韧皮部筛管细胞的模型。请回答下列问题： (1)图1所示的代谢过程中，需要光反应产物参与的过程是______（填标号）。为马铃薯叶片提供C18O2，块茎中会出现18O的淀粉，请据图写出C18O2中18O转移的路径：CO2→______→淀粉。 (2)研究发现，叶绿体中淀粉的大量积累会导致______膜结构被破坏，进而直接影响光反应。保卫细胞中淀粉含量增加会降低气孔导度，使______，进而抑制暗反应。 (3)反义基因与正义基因碱基对序列相同，但反义基因的转录模板链是正义基因转录的非模板链，转录生成的RNA往往不会编码特定蛋白，但会通过与正义基因形成的mRNA互补，进而引发双链RNA的降解。图2中SUT1是一种蔗糖转运蛋白，研究显示在成功导入SUT1反义基因的马铃薯植株中，叶片含糖量增加，但块茎产量降低，分析其原因可能是在成功导入蔗糖转运蛋白反义基因的马铃薯植株中，______。 (4)科研人员以Q9、NB1、G2三个品种的马铃薯为材料，研究不同光周期处理对马铃薯块茎产量的影响，在24h昼夜周期中对马铃薯幼苗分别进行16h（长日照）、12h（中日照）、8h（短日照）三种光照时间处理，保持其他条件相同且适宜，培养一段时间后，发现长日照组叶绿素含量最高，但只有中日照和短日照组有块茎生成，结果如图3。 ①分析上述信息可知，光影响马铃薯幼苗的生理过程可能有______（请写出所有生理过程）。 ②图3实验结果表明，平均单株产量受到光周期影响程度相对较低的品种是______。 ③进一步研究表明，在16h光照下，G2无匍匐茎生成，Q9和NB1仅有部分植株产生匍匐茎。下列关于16h光照下没有生成马铃薯块茎的原因可能有______。 A．长日照导致暗反应时间不足，光合速率低 B．马铃薯匍匐茎是块茎形成的必要条件 C．长日照导致马铃薯叶片叶绿素含量下降 D．长日照不利于有机物向块茎运输 17．图甲表示某高等动物在进行细胞分裂时的图像，图乙为该种生物的细胞内染色体及核 DNA 相对含量变化的曲线图。 (1)图甲A、B、C 细胞中同源染色体的对数分别是 ___________ ，处于有丝分裂的细胞有 ___________(填字母)，不具有姐妹染色单体的细胞有 ___________(填字母)。 (2)图甲中 B 细胞对应图乙中的区间是 _______(用数字表示)，此细胞分裂后得到的子细胞为 _________。 (3)图乙中 8 处染色体与DNA 数量加倍的原因是 ___________(填生理过程)。 (4)下图是显微镜下观察到的某植物(2n=24)减数分裂不同时期的细胞图像。 ①请将上述观察到的细胞图像按减数分裂的时序进行排序：___________(用图中字母和箭头表示)，图B 每个细胞中染色体数目与图 ___________(填图中字母)相同。 ②制作根尖临时装片的四个步骤依次是 ___________。 18．化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业、用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此，某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响，结果见表。 碳源 细胞干重（g/L） S产量（g/L） 葡萄糖 3.12 0.15 淀粉 0.01 0.00 制糖废液 2.30 0.18 回答下列问题。 (1)通常在实验室培养微生物时，需要对所需的玻璃器皿进行灭菌，灭菌的方法有______（答出2点即可）。 (2)由实验结果可知，菌株C生长的最适碳源是______；用菌株C生产S的最适碳源是______。菌株C的生长除需要碳源外，还需要______（答出2点即可）等营养物质。 (3)由实验结果可知，碳源为淀粉时菌株C不能生长，其原因是______。 (4)若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产S的最适碳源浓度，某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路：______。 (5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用，其意义是______（答出1点即可）。 19．利用小鼠胚胎干细胞能诱导出多种细胞，进而还可以用于制备单克隆抗体，某研究团队设计的技术流程如下图。回答下列问题： (1)技术流程中的①过程，可用_________酶处理内细胞团获得一个胚胎干细胞；②过程的原理是_________，基因工程的核心步骤是_________。 (2)甲细胞与乙细胞融合形成丙细胞，丙细胞的特点是_________。 (3)图中的乙细胞是从小鼠体内获得的_________细胞。单克隆抗体的应用中，利用________反应，可以诊断和防治多种疾病。 (4)为鉴定单克隆抗体识别抗原的具体区域，可将抗原（A蛋白）逐步截短，分别与纯化的单克隆抗体反应，实验结果如图所示（“+”表示有反应，“-”表示无反应，“aa”表示氨基酸）。 结果证明该单克隆抗体识别抗原（A蛋白）的区域大概为_________（填“40～50”、“40～55”或“40～60”）位氨基酸。 20．药物A是从某植物体叶肉细胞中提取的一种蛋白质，对治疗糖尿病具有良好的疗效。某研究团队运用生物工程相关技术，利用大肠杆菌来生产这种药物。回答下列问题。 (1)科学家根据药物A的氨基酸序列人工合成DNA片段，由于______，该方法得到的DNA片段有多种可能，也可以用PCR技术从植物细胞中扩增出药物A基因，该技术的原理为______。 (2)下图表示制备工程菌时所使用的质粒、目的基因的结构及其相关限制酶识别位点（限制酶的识别序列和切割位点如表所示），其中lacZ基因表达的产物可将无色物质X-gal催化为蓝色物质，从而使菌落呈现蓝色。回答下列问题。 限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ Sau3AⅠ SmaⅠ XmaⅠ 识别序列和切割位点 -G↓GATCC- -G↓AATTC- -↓GATC- -CCC↓GGG- -C↓CCGGG- ①利用PCR技术获取和扩增目的基因，已知待扩增的目的基因两侧相关序列如下，扩增时选用的两种引物碱基序列为（注明序列的5′和3′端）______、______。    ②分析上图，为将目的基因准确插入质粒中，最好选用______酶切割目的基因，酶切处理后的目的基因和质粒需使用______（填“T4”、“E.coli”或“T4或E.coli”）DNA连接酶处理，才能得到重组质粒。 ③将目的基因导入受体菌时，若要准确筛选出含重组质粒的受体菌，需要将其培养在添加了______的培养基上。 ④若将重组质粒用EcoRⅠ充分酶切后，通过琼脂糖凝胶电泳分离，可得到长度为______bp的条带。对于琼脂糖凝胶电泳结果符合预期的PCR产物条带，通常需进一步通过基因测序确认，原因是______。 2027届高三上学期入学测试生物试题参考答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 B C D D D B C B C D 题号 11 12 13 14 15 答案 C D C A C 16．(1) ② C3→磷酸丙糖→蔗糖 (2) 类囊体 CO2吸收减少 (3)SUTl的表达水平降低（或翻译过程减弱），更多的可溶性糖和淀粉积累在叶片中，难以通过韧皮部（筛管）运输至块茎，使叶片含糖量增加，块茎产量降低。 (4) 叶绿素的合成、光合作用、有机物的运输和储存等 Q9 BD 【详解】（1）在叶绿体中三碳化合物的还原反应需要光反应提供ATP和NADPH，需要ATP和NADPH功能以及需要NADPH提供还原剂；为马铃薯叶片提供C18O2, 块茎中的淀粉会含18O，由图可知，元素18O转移的路径：C18O2→C3 →磷酸丙糖→蔗糖→淀粉。 （2）光反应的场所是类囊体薄膜，因此叶绿体中淀粉的积累会导致类囊体膜结构被破坏，进而直接影响光反应。保卫细胞中淀粉含量增加会降低气孔导度，即气孔的开放程度下降，影响二氧化碳的吸收，即二氧化碳的吸收量下降，进而暗反应速率下降，光合速率下降。 （3）成功导入蔗糖转运蛋白反义基因的马铃薯植株中SUTl的表达水平降低，筛分子-伴胞复合体的蔗糖转运蛋白乙含量减少，叶肉细胞中蔗糖分子通过结构乙转运出叶肉细胞的量减少，叶肉细胞中蔗糖积累，可溶性糖和淀粉总量上升，抑制光合作用，最终导致块茎产量降低。 （4）①本实验研究不同光周期处理对马铃薯产量的影响，最终发现长日照组叶绿素含量最高，但只有中日照和短日照组有块茎生成，由此推断光影响的马铃薯幼苗的代谢过程可能有叶绿素的合成、光合作用、有机物的运输和储存、细胞呼吸、酶的合成等； ②由图可知，对三个不同品种分别进行12h的中日照组和8h短日照处理，比较处理45～75d期间平均单株产量的差值，Q9品种12h中日照处理的差值与8h短日照处理的差值差异最小，因此平均单株产量受到光周期影响程度相对较低的品种是Q9； ③相比于中日照与短日照，三个不同品种的马铃薯在长日照下匍匐茎都生长异常，具有生长异常的匍匐茎的植株均没有块茎生成，因此推测关于16h光照下没有生成马铃薯块茎的原因可能有马铃薯匍匐茎是块茎形成的必要条件和长日照不利于有机物向块茎运输。 故选BD。 17．(1) 4 、2、0 A A 和C (2) 3-4 次级卵母细胞和(第一)极体 (3)受精作用 (4) A→C→E→D→B→F ACE 解离、漂洗、染色、制片 【详解】（1）配对的两条染色体，形状和大小一般都相同，一条来自父方、一条来自母方，叫作同源染色体。A处于有丝分裂后期，含有4对同源染色体，B处于减数分裂I后期，含有2对同源染色体，C处于减数分裂II后期，着丝粒分裂，姐妹染色单体分开形成子染色体，含有0对同源染色体。处于有丝分裂的细胞有A，不具有姐妹染色单体的细胞有AC，着丝粒分裂。 （2）图甲中B细胞含有同源染色体，同源染色体分离，非同源染色体自由组合，处于减数分裂I后期，细胞质不均等分裂，是初级卵母细胞。核DNA数是染色体数目的二倍，对应图乙中的区间是3-4，初级卵母细胞经减数分裂I结束后产生的子细胞为次级卵母细胞和(第一)极体。 （3）图乙中 8 处染色体与DNA 数量加倍的原因是受精作用，受精卵中的染色体数目又恢复到体细胞中的数目。 （4）按减数分裂的时序进行排序：A（减数分裂I前期）→C（减数分裂I中期）→E（减数分裂I后期）→D（减数分裂Ⅱ中期）→B（减数分裂Ⅱ后期）→F（减数分裂Ⅱ末期）。图B 每个细胞中染色体数目为2N，与A（减数分裂I前期）、C（减数分裂I中期）、E（减数分裂I后期）中的染色体数目相同。制作根尖临时装片的四个步骤依次是解离、漂洗、染色、制片。 18．(1)高压蒸汽灭菌、干热灭菌 (2) 葡萄糖 制糖废液 氮源、无机盐、水 (3)缺少淀粉酶 (4)分别配制一系列不同浓度梯度的以制糖废液为唯一碳源的培养基，培养菌株C，其他条件相同且适宜，一段时间后，测定并比较不同浓度制糖废液中的S的产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度即为生产S的最适碳源浓度 配制等量的一系列不同浓度的制糖废液分别接种等量的菌株C，其他条件相同且适宜，一段时间后，测定并比较不同浓度制糖废液中S的产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度即为生产S的最适碳源浓度 (5)减少污染、节省原料、降低生产成本 【详解】（1）通常在实验室培养微生物时，为防止实验用的玻璃器皿等物品中原有的微生物污染培养物，需要使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子，即对所需的玻璃器皿进行灭菌，玻璃器皿常用的灭菌的方法有干热灭菌、高压蒸汽灭菌等。 （2）由实验结果可知，与以制糖废液为碳源相比，以葡萄糖为碳源时菌株C的细胞干重最大，说明最适于菌株C生长的碳源是葡萄糖；而以制糖废液为碳源时，用菌株C生产S的产量高于以葡萄糖为碳源时的产量，说明最适于生产S的碳源是制糖废液。微生物的生长一般都需要水、碳源、氮源和无机盐，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求，故菌株C的生长除需要碳源外，还需要氮源、无机盐、水等营养物质。 （3）分析题图表格可以看出在以淀粉为碳源的培养基中，菌株C不能生长，原因可能是菌株C不能合成淀粉酶或菌株C不能分泌淀粉酶，因而不能利用淀粉。 （4）要测定生产S的最适制糖废液为碳源的浓度，实验自变量为制糖废液的浓度，可分别配制一系列不同浓度梯度的以制糖废液为唯一碳源的培养基，培养菌株C，其他条件相同且适宜，一段时间后，测定并比较不同浓度制糖废液中的S的产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度，即为生产S的最适碳源浓度。 （5）利用制糖废液生产S可以实验废物利用，既有利于减少污染、节省原料，又能降低生产成本。 19．(1) 胰蛋白 细胞克隆 基因表达载体的构建 (2)既能无限增殖，又能产生特异性抗体   (3) B 抗原—抗体杂交 (4)40~55 【详解】（1）①过程可用胰蛋白酶处理内细胞团，使细胞相互分离，获得一个胚胎干细胞。②过程是将一个胚胎干细胞培养成胚胎干细胞群，采用的技术是克隆培养法（细胞克隆），原理是细胞克隆。④过程是基因工程，核心步骤是基因表达载体的构建。 （2）甲细胞（保留分裂能力和分化能力）与乙细胞（浆细胞）融合形成丙细胞，丙细胞的特点是既能无限增殖，又能产生特异性抗体。 （3）图中的乙细胞是从小鼠体内获得的浆细胞。单克隆抗体的应用中，利用抗原—抗体杂交反应，可以诊断和防治多种疾病，可以研究相应抗原的结构、细胞学分布及其功能。 （4）根据图可知，1~50氨基酸序列片段与抗体无反应，而1~55氨基酸序列片段与抗体有反应，说明该单克隆抗体识别的区域应该包括50~55位氨基酸。50~153氨基酸序列片段与抗体无反应，而40~153氨基酸序列片段与抗体有反应，说明该单克隆抗体识别的区域还包括40~50位氨基酸。综上分析可知，该单克隆抗体识别抗原(A蛋白)的区域大概为40~55位氨基酸。 20．(1) 一种氨基酸可能有多种密码子编码（密码子具有简并性） DNA半保留复制 (2) 5′-TCTGTT-3′ 5′-CTTGGA-3′ BamH Ⅰ和Xma Ⅰ T4或E.coli 卡那霉素和X-gal 1700bp和260bp 琼脂糖凝胶电泳技术仅能用于分析待测DNA分子大小，无法确定待测DNA分子碱基序列。 【详解】（1）由于密码子具有简并性，即同一种氨基酸可以对应多种密码子，因此，根据药物A的氨基酸序列人工合成DNA片段的方法得到的DNA片段有多种可能。PCR技术是体外扩增DNA的技术，该技术的原理是DNA的半保留复制。 （2）①由于DNA复制时子链的延伸是从5′端向3′端延伸，含磷酸基团的一端为5′端，含羟基的一端为3′端，因此两个引物的设计需要分别根据模板DNA两条链的3′端进行设计，因此，依据图中目的基因两侧相关序列，扩增时选用的引物碱基序列为5′-TCTGTT-3′和5′-CTTGGA-3′。 ②目的基因与质粒形成重组分子要有相同的末端，且目的基因应插入启动子和终止子之间才能在受体细胞中表达。终止子与启动子之间有三种限制酶识别序列：EcoR I、Xma I和BamH I。据图可知，EcoR I会破坏目的基因，故为将目的基因准确插入质粒中，最好选用Xma I和BamH I切割目的基因。Xma I和BamH I切割得到的是黏性末端，用T4或E.coli DNA连接酶处理均可，都可以得到重组质粒。 ③由图可知，质粒中含有LacZ基因和卡那霉素抗性基因，在构建基因表达载体时LacZ基因被破坏，无法使无色的X-ga1变为蓝色。因此，在培养基中应加入的物质有卡那霉素和X-gal，只有成功导入目的基因的重组质粒的细菌才能不被卡那霉素杀死，同时表现为无色菌落。 ④根据质粒和目的基因中EcoR Ⅰ的酶切位点可知，正向连接后用EcoR Ⅰ切割，可以得到两个片段分别为400+700+600=1700bp，10+50+200=260bp，故通过琼脂糖凝胶电泳分离后，可得到长度为1700bp和260bp的条带。对于电泳结果符合预期的PCR产物条带，通常需进一步通过基因测序确认，这是因为琼脂糖凝胶电泳技术仅能用于分析待检测DNA分子的大小，无法确定待检测DNA分子的碱基序列，因此需要对目标DNA进行碱基序列的确认。 学科网（北京）股份有限公司 $