项目6 代表性植物组织培养技术 安徽省（分类考试和对口招生）《农业生物技术》（高教版第三版） 单元过关卷（原卷版+解析版）

安徽省（分类考试和对口招生）农林牧渔类 《农业生物技术》（高教版第三版） 项目6 代表性植物组织培养技术 单元过关卷 时间：60分钟 总分：100分 班级＿＿＿＿　姓名＿＿＿＿　学号＿＿＿＿　成绩＿＿＿＿ 一、单项选择题（本大题共15小题，每题2分，共30分） 1. 植物组织培养能够顺利进行，首先必须保证培养过程处于（ ） A. 适宜温度条件 B. 无菌操作条件 C. 适量光照条件 D. 合理激素条件 2. 蝴蝶兰组织培养中，选取茎尖或腋芽作为外植体的主要目的，是利用其（ ） A. 分生组织细胞分裂能力强，易诱导形成再生植株 B. 薄壁组织含水量较高，易直接形成愈伤组织 C. 成熟组织细胞分化程度低，易保持遗传稳定性 D. 输导组织排列规则，易提高培养基吸收效率 3. 蝴蝶兰组织培养过程中，由胚性细胞形成并可继续分化成芽的结构通常称为（ ） A. 愈伤组织 B. 原球茎状体 C. 根瘤组织 D. 维管束鞘 4. 马铃薯脱毒快繁中，常选用茎尖分生组织作为外植体，主要因为该部位（ ） A. 病毒繁殖速度较快，便于筛选抗病毒材料 B. 病毒侵染机会较少，易获得脱毒培养材料 C. 木质化程度较高，能够抵抗培养基的污染 D. 储藏淀粉含量较多，能够促进幼苗快速生长 5. 马铃薯脱毒培养时，优先选取的培养材料是（ ） A. 成熟块茎外皮 B. 膨大根段 C. 茎尖分生组织 D. 老叶叶柄 6. 某马铃薯脱毒苗初始有8株，每代增殖系数为3，连续继代培养4代，且不考虑损失，最终可获得（ ） A. 216株 B. 729株 C. 648株 D. 81株 7. 菠萝试管苗移栽前进行炼苗，主要目的是（ ） A. 促进芽体增殖 B. 降低培养基浓度 C. 提高植株适应性 D. 诱导愈伤组织 8. 要在较短的时间内繁殖出如下图的“名、优、特、新、稀”的花卉幼苗，最为有效的技术措施是（ ） A. 扦插繁殖 B. 分株繁殖 C. 压条繁殖 D. 组培快繁 9. 某美国红栌组织培养试验中，接种外植体500个，无菌存活率为80%；每个存活外植体平均增殖出4个芽，生根率为75%，移栽成活率为90%。不考虑其他损失，最终可获得的成活植株数为（ ） A. 720株 B. 900株 C. 1440株 D. 1080株 10. 某蝴蝶兰增殖实验接种外植体25个，污染率为20%，未污染材料中有80%成功增殖，每个成功增殖材料平均形成3个芽。理论芽数为（ ） A. 48个 B. 40个 C. 60个 D. 36个 11. 马铃薯脱毒与快繁的合理技术流程是（ ） A. 病毒检测、茎尖培养、继代增殖、炼苗移栽 B. 继代增殖、炼苗移栽、茎尖培养、病毒检测 C. 炼苗移栽、茎尖培养、病毒检测、继代增殖 D. 茎尖培养、病毒检测、继代增殖、炼苗移栽 12. 美国红栌外植体接种后切口褐化并逐渐死亡，优先采取的措施是（ ） A. 缩短灭菌时间并加入抗氧化剂 B. 延长灭菌时间并提高培养温度 C. 提高培养基盐浓度并增加光照强度 D. 提高细胞分裂素浓度并延长继代周期 13. 某马铃薯脱毒快繁实验初始接种茎尖80个，污染率为15%；未污染材料中有75%成功增殖；每个成功增殖材料平均形成6个芽。理论芽数为（ ） A. 240个 B. 288个 C. 306个 D. 360个 14. 某菠萝试管苗移栽后叶片萎蔫，根系已经形成，但幼苗未经炼苗且移栽环境湿度较低。最合理的处理措施是（ ） A. 立即降低基质含水量并增强光照 B. 直接施用高浓度肥料并延长通风 C. 继续密闭培养并完全停止喷水 D. 提高湿度、适当遮阴保湿，适应后逐步降湿 15. 某美国红栌快繁实验接种外植体200个，污染率为10%；未污染材料中有75%成功增殖，每个增殖材料平均形成4个芽，其中80%生根，生根苗炼苗移栽成活率为75%。最终可获得成活植株约（ ） A. 270株 B. 324株 C. 360株 D. 400株 二、多项选择题（本大题共10小题，每题3分，共30分） 16. 关于植物组织培养基本操作的说法，正确的是（ ） A. 选择生长健壮的外植体 B. 接种过程应保持无菌操作 C. 培养过程中需按阶段转接 D. 外植体接种后无需进行环境调控 17. 关于马铃薯脱毒与快繁技术的说法，正确的是（ ） A. 茎尖分生组织适合作为脱毒材料 B. 脱毒苗需经过病毒检测 C. 脱毒苗可用于快速繁殖优良种苗 D. 块茎表皮组织是常用脱毒材料 18. 关于蝴蝶兰组织培养的说法，正确的是（ ） A. 原球茎状体可作为增殖材料 B. 增殖材料需转接到适宜培养基 C. 组培苗移栽前应进行炼苗 D. 组培苗出瓶后应立即强光栽培 19. 关于菠萝组织培养技术的说法，正确的是（ ） A. 腋芽、茎尖均可作为外植体 B. 快速繁殖阶段需及时转接 C. 出瓶苗应逐步降低环境湿度 D. 培养苗可未经炼苗直接定植 20. 关于植物生长调节剂在组织培养中的作用，正确的是（ ） A. 较高细胞分裂素有利于芽的增殖 B. 较高生长素有利于根的诱导 C. 生长素与细胞分裂素比例影响器官分化 D. 培养基中调节剂比例对培养结果没有影响 21. 某批马铃薯外植体共200个，污染率为10%，未污染外植体的成苗率为75%。下列说法正确的是（ ） A. 未污染外植体数量为180个 B. 预计获得健壮组培苗135株 C. 污染外植体数量为25个 D. 预计成苗率应按75%乘以污染率计算 22. 关于组培苗炼苗与移栽管理的说法，正确的是（ ） A. 出瓶初期应保持较高空气湿度 B. 移栽初期宜采用遮阴措施 C. 基质应具有良好的透气排水性 D. 炼苗时间越短越有利于提高成活率 23. 某蝴蝶兰培养瓶中接种后数日出现培养基浑浊，外植体基部有黏液。下列分析与处理措施正确的是（ ） A. 可能存在外植体表面消毒不彻底 B. 可能存在接种过程中的无菌操作失误 C. 应及时隔离并清除污染培养瓶 D. 延长光照时间可直接消除污染 24. 某美国红栌芽增殖系数为3，每个增殖周期后均按该系数计算。初始接种芽数为50个，连续增殖2个周期；生根成苗率为80%，炼苗移栽成活率为75%。下列说法正确的是（ ） A. 两个周期后理论芽数为450个 B. 最终移栽成活苗数为270株 C. 生根后理论成苗数为360株 D. 计算最终苗数时只需考虑移栽成活率 25. 某马铃薯脱毒苗外观生长正常，但病毒检测结果呈阳性。下列处理措施正确的是（ ） A. 不应直接作为脱毒原种扩繁 B. 可重新选择茎尖材料进行培养 C. 应结合病毒检测结果筛除阳性苗 D. 只要植株长势正常即可保留扩繁 三、填空题（本大题共5小题，每题2分，共10分） 26. 蝴蝶兰组织培养中，常用的无性繁殖材料是茎尖，其培养过程中形成的球状结构称为______。 27. 马铃薯脱毒培养通常选取病毒含量较低的______进行培养。 28. 植物组织培养中，常用的基础培养基是______培养基，其名称来源于两位研究者姓氏的首字母。 29. 组培苗移栽前，应先在温室或培养室中逐步降低湿度、增强光照，使其适应外界环境，这一过程称为______。 30. 植物组织培养中，细胞分裂素主要用于促进芽的增殖，常用的细胞分裂素是______。 四、分析题（本大题共2小题，每题5分，共10分） 31. 某花卉企业采用蝴蝶兰组织培养技术生产组培苗。培养过程中，部分外植体出现污染，部分原球茎样体在增殖阶段出现玻璃化现象。请分析说明：（1）蝴蝶兰组织培养通常包括哪些主要技术环节？（2）外植体污染的主要原因及预防措施有哪些？（3）针对原球茎样体玻璃化现象，应采取哪些改进措施？ 32. 某马铃薯良种繁育中心发现田间种薯产量逐年下降，检测表明植株感染多种病毒。技术人员拟采用组织培养技术进行脱毒与快繁，并同时开展菠萝和美国红栌组培苗生产。请分析说明：（1）马铃薯脱毒培养宜选取什么部位作为外植体？为什么？（2）简述马铃薯脱毒快繁及质量控制的主要过程。（3）比较菠萝与美国红栌在外植体选择和培养管理方面的主要差异。 五、应用题（本大题共2小题，每题5分，共10分） 33. 某园艺企业采用组织培养技术繁殖蝴蝶兰。技术员选取生长健壮、无病虫害的幼嫩茎尖作为外植体，经清洗和表面消毒后接种于培养基中。培养一段时间后，部分瓶内出现浑浊，外植体基部变黑。请回答下列问题：（1）写出蝴蝶兰外植体接种前的主要处理步骤。（2）说明培养瓶出现浑浊和外植体基部变黑的可能原因，并提出相应改进措施。（3）某批次接种12个无菌原球茎，每个培养周期平均增殖形成4个新芽，成活率为75%。连续培养2个增殖周期后，预计可获得多少个成活芽？ 34. 某马铃薯繁育基地发现部分种薯田植株出现叶片卷曲、矮化和产量下降现象，决定采用茎尖培养进行脱毒，并通过试管苗快繁生产原原种。技术人员先对材料进行热处理，再切取幼嫩茎尖进行无菌培养。请回答下列问题：（1）说明马铃薯茎尖培养脱毒的基本原理，并写出脱毒苗获得后的检测要求。（2）列出马铃薯脱毒苗进行组织培养快繁的主要环节。（3）初始获得8株经检测合格的脱毒苗，每株在一个增殖周期内平均形成5株苗，移栽成活率为80%。连续进行3个增殖周期后，预计获得多少株成活苗？若每株成活苗可繁殖10粒微型薯，理论上可获得多少粒微型薯？ 六、综合应用题（本大题共1小题，每题10分，共10分） 35. 某农业生物技术中心采用茎尖培养法进行马铃薯脱毒与快繁。现有经初步消毒并接种成功的马铃薯茎尖培养材料125个。每代继代培养中，每个存活培养材料平均形成4个有效芽，形成的有效芽中有80％能够成功建立下一代培养；连续继代培养3代，组培苗出瓶后炼苗移栽成活率为75％。（1）计算这批材料连续继代培养3代后，预计可获得多少株成活组培苗？再计算炼苗移栽后可获得多少株成活苗。（2）技术员认为，组培苗只要生长健壮，出瓶后即可直接认定为脱毒苗并移栽到生产田。判断该说法是否正确，并说明理由。（3）若培养过程中出现培养基污染和幼苗玻璃化现象，分别分析一种可能原因，并提出相应的改进措施。 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $ 安徽省（分类考试和对口招生）农林牧渔类 《农业生物技术》（高教版第三版） 项目6 代表性植物组织培养技术 单元过关卷 时间：60分钟 总分：100分 班级＿＿＿＿　姓名＿＿＿＿　学号＿＿＿＿　成绩＿＿＿＿ 一、单项选择题（本大题共15小题，每题2分，共30分） 1. 植物组织培养能够顺利进行，首先必须保证培养过程处于（ ） A. 适宜温度条件 B. 无菌操作条件 C. 适量光照条件 D. 合理激素条件 【答案】B 【解析】植物组织培养需在无菌条件下进行，以防止培养材料被微生物污染。 2. 蝴蝶兰组织培养中，选取茎尖或腋芽作为外植体的主要目的，是利用其（ ） A. 分生组织细胞分裂能力强，易诱导形成再生植株 B. 薄壁组织含水量较高，易直接形成愈伤组织 C. 成熟组织细胞分化程度低，易保持遗传稳定性 D. 输导组织排列规则，易提高培养基吸收效率 【答案】A 【解析】茎尖和腋芽含有分生组织，细胞分裂能力强，脱毒和再生能力较好。 3. 蝴蝶兰组织培养过程中，由胚性细胞形成并可继续分化成芽的结构通常称为（ ） A. 愈伤组织 B. 原球茎状体 C. 根瘤组织 D. 维管束鞘 【答案】B 【解析】蝴蝶兰可通过原球茎状体途径形成大量芽，原球茎状体是其快繁的重要中间结构。 4. 马铃薯脱毒快繁中，常选用茎尖分生组织作为外植体，主要因为该部位（ ） A. 病毒繁殖速度较快，便于筛选抗病毒材料 B. 病毒侵染机会较少，易获得脱毒培养材料 C. 木质化程度较高，能够抵抗培养基的污染 D. 储藏淀粉含量较多，能够促进幼苗快速生长 【答案】B 【解析】茎尖分生组织细胞分裂迅速，维管束尚未充分分化，病毒较难到达，适合进行脱毒培养。 5. 马铃薯脱毒培养时，优先选取的培养材料是（ ） A. 成熟块茎外皮 B. 膨大根段 C. 茎尖分生组织 D. 老叶叶柄 【答案】C 【解析】病毒在茎尖分生组织中的分布较少，利用茎尖培养有利于获得脱毒苗。 6. 某马铃薯脱毒苗初始有8株，每代增殖系数为3，连续继代培养4代，且不考虑损失，最终可获得（ ） A. 216株 B. 729株 C. 648株 D. 81株 【答案】C 【解析】连续增殖4代，株数为8×34＝8×81＝648株。 7. 菠萝试管苗移栽前进行炼苗，主要目的是（ ） A. 促进芽体增殖 B. 降低培养基浓度 C. 提高植株适应性 D. 诱导愈伤组织 【答案】C 【解析】炼苗可使试管苗逐步适应外界温度、湿度和光照条件，提高移栽成活率。 8. 要在较短的时间内繁殖出如下图的“名、优、特、新、稀”的花卉幼苗，最为有效的技术措施是（ ） A. 扦插繁殖 B. 分株繁殖 C. 压条繁殖 D. 组培快繁 【答案】D 【解析】植物组培快繁技术就是利用植物组织培养技术，快速繁殖名、优、特、新、稀等植物品种，使其在短时间内繁衍大量植株的一套技术与方法，又叫植物离体快繁技术或试管快繁技术。 9. 某美国红栌组织培养试验中，接种外植体500个，无菌存活率为80%；每个存活外植体平均增殖出4个芽，生根率为75%，移栽成活率为90%。不考虑其他损失，最终可获得的成活植株数为（ ） A. 720株 B. 900株 C. 1440株 D. 1080株 【答案】D 【解析】无菌存活数为500×80%=400个，增殖芽数为400×4=1600个，生根并移栽成活数为1600×75%×90%=1080株，故选D。 10. 某蝴蝶兰增殖实验接种外植体25个，污染率为20%，未污染材料中有80%成功增殖，每个成功增殖材料平均形成3个芽。理论芽数为（ ） A. 48个 B. 40个 C. 60个 D. 36个 【答案】A 【解析】未污染材料数为25×80%＝20个，成功增殖数为20×80%＝16个，理论芽数为16×3＝48个。 11. 马铃薯脱毒与快繁的合理技术流程是（ ） A. 病毒检测、茎尖培养、继代增殖、炼苗移栽 B. 继代增殖、炼苗移栽、茎尖培养、病毒检测 C. 炼苗移栽、茎尖培养、病毒检测、继代增殖 D. 茎尖培养、病毒检测、继代增殖、炼苗移栽 【答案】D 【解析】应先利用茎尖培养获得材料，再检测脱毒效果，随后进行继代增殖和炼苗移栽。 12. 美国红栌外植体接种后切口褐化并逐渐死亡，优先采取的措施是（ ） A. 缩短灭菌时间并加入抗氧化剂 B. 延长灭菌时间并提高培养温度 C. 提高培养基盐浓度并增加光照强度 D. 提高细胞分裂素浓度并延长继代周期 【答案】A 【解析】切口褐化多与酚类物质氧化有关，应减少损伤和灭菌伤害，并使用抗氧化剂。 13. 某马铃薯脱毒快繁实验初始接种茎尖80个，污染率为15%；未污染材料中有75%成功增殖；每个成功增殖材料平均形成6个芽。理论芽数为（ ） A. 240个 B. 288个 C. 306个 D. 360个 【答案】C 【解析】未污染材料为80×85%＝68个，成功增殖材料为68×75%＝51个，芽数为51×6＝306个。 14. 某菠萝试管苗移栽后叶片萎蔫，根系已经形成，但幼苗未经炼苗且移栽环境湿度较低。最合理的处理措施是（ ） A. 立即降低基质含水量并增强光照 B. 直接施用高浓度肥料并延长通风 C. 继续密闭培养并完全停止喷水 D. 提高湿度、适当遮阴保湿，适应后逐步降湿 【答案】D 【解析】试管苗未经炼苗，蒸腾调节能力弱且环境湿度低，易因失水萎蔫。应提高湿度、适当遮阴保湿，适应后再逐步降低湿度，故选D。 15. 某美国红栌快繁实验接种外植体200个，污染率为10%；未污染材料中有75%成功增殖，每个增殖材料平均形成4个芽，其中80%生根，生根苗炼苗移栽成活率为75%。最终可获得成活植株约（ ） A. 270株 B. 324株 C. 360株 D. 400株 【答案】B 【解析】成活植株数为200×90%×75%×4×80%×75%＝324株。 二、多项选择题（本大题共10小题，每题3分，共30分） 16. 关于植物组织培养基本操作的说法，正确的是（ ） A. 选择生长健壮的外植体 B. 接种过程应保持无菌操作 C. 培养过程中需按阶段转接 D. 外植体接种后无需进行环境调控 【答案】ABC 【解析】组织培养需选取适宜外植体，严格无菌接种，并根据培养阶段及时转接和调节培养条件。 17. 关于马铃薯脱毒与快繁技术的说法，正确的是（ ） A. 茎尖分生组织适合作为脱毒材料 B. 脱毒苗需经过病毒检测 C. 脱毒苗可用于快速繁殖优良种苗 D. 块茎表皮组织是常用脱毒材料 【答案】ABC 【解析】茎尖分生组织病毒含量较低，结合培养和病毒检测可获得脱毒苗，并进一步进行快繁。 18. 关于蝴蝶兰组织培养的说法，正确的是（ ） A. 原球茎状体可作为增殖材料 B. 增殖材料需转接到适宜培养基 C. 组培苗移栽前应进行炼苗 D. 组培苗出瓶后应立即强光栽培 【答案】ABC 【解析】蝴蝶兰可通过原球茎状体增殖，培养材料需适时转接，出瓶苗应先炼苗再逐步适应外界环境。 19. 关于菠萝组织培养技术的说法，正确的是（ ） A. 腋芽、茎尖均可作为外植体 B. 快速繁殖阶段需及时转接 C. 出瓶苗应逐步降低环境湿度 D. 培养苗可未经炼苗直接定植 【答案】ABC 【解析】菠萝组织培养常利用茎尖或腋芽，增殖阶段需及时转接，出瓶苗必须经过逐步炼苗。 20. 关于植物生长调节剂在组织培养中的作用，正确的是（ ） A. 较高细胞分裂素有利于芽的增殖 B. 较高生长素有利于根的诱导 C. 生长素与细胞分裂素比例影响器官分化 D. 培养基中调节剂比例对培养结果没有影响 【答案】ABC 【解析】生长素与细胞分裂素的种类及浓度比例会影响愈伤组织形成、芽增殖和根诱导。 21. 某批马铃薯外植体共200个，污染率为10%，未污染外植体的成苗率为75%。下列说法正确的是（ ） A. 未污染外植体数量为180个 B. 预计获得健壮组培苗135株 C. 污染外植体数量为25个 D. 预计成苗率应按75%乘以污染率计算 【答案】AB 【解析】未污染数为200×（1－10%）=180个，成苗数为180×75%=135株。 22. 关于组培苗炼苗与移栽管理的说法，正确的是（ ） A. 出瓶初期应保持较高空气湿度 B. 移栽初期宜采用遮阴措施 C. 基质应具有良好的透气排水性 D. 炼苗时间越短越有利于提高成活率 【答案】ABC 【解析】组培苗角质层薄、气孔调节能力弱，需通过保湿、遮阴和透气基质逐步适应外界环境。 23. 某蝴蝶兰培养瓶中接种后数日出现培养基浑浊，外植体基部有黏液。下列分析与处理措施正确的是（ ） A. 可能存在外植体表面消毒不彻底 B. 可能存在接种过程中的无菌操作失误 C. 应及时隔离并清除污染培养瓶 D. 延长光照时间可直接消除污染 【答案】ABC 【解析】培养基浑浊和基部黏液通常提示微生物污染，应排查消毒及接种环节，并及时隔离处理。 24. 某美国红栌芽增殖系数为3，每个增殖周期后均按该系数计算。初始接种芽数为50个，连续增殖2个周期；生根成苗率为80%，炼苗移栽成活率为75%。下列说法正确的是（ ） A. 两个周期后理论芽数为450个 B. 最终移栽成活苗数为270株 C. 生根后理论成苗数为360株 D. 计算最终苗数时只需考虑移栽成活率 【答案】ABC 【解析】两周期芽数为50×32=450个，生根成苗数为450×80%=360株，移栽成活数为360×75%=270株，故A、B、C正确。 25. 某马铃薯脱毒苗外观生长正常，但病毒检测结果呈阳性。下列处理措施正确的是（ ） A. 不应直接作为脱毒原种扩繁 B. 可重新选择茎尖材料进行培养 C. 应结合病毒检测结果筛除阳性苗 D. 只要植株长势正常即可保留扩繁 【答案】ABC 【解析】脱毒效果不能仅凭外观判断，病毒检测阳性的植株应淘汰或重新取茎尖培养，并进行复检。 三、填空题（本大题共5小题，每题2分，共10分） 26. 蝴蝶兰组织培养中，常用的无性繁殖材料是茎尖，其培养过程中形成的球状结构称为______。 【答案】原球茎样体 【解析】蝴蝶兰外植体经诱导可形成原球茎样体，随后分化出芽和根，形成完整植株。 27. 马铃薯脱毒培养通常选取病毒含量较低的______进行培养。 【答案】茎尖分生组织 【解析】茎尖分生组织细胞分裂旺盛，维管束尚未充分形成，病毒含量通常较低，适于脱毒培养。 28. 植物组织培养中，常用的基础培养基是______培养基，其名称来源于两位研究者姓氏的首字母。 【答案】MS 【解析】MS培养基营养成分较全面，适用于多种植物的组织培养，名称源于Murashige和Skoog。 29. 组培苗移栽前，应先在温室或培养室中逐步降低湿度、增强光照，使其适应外界环境，这一过程称为______。 【答案】炼苗 【解析】炼苗可使组培苗逐步适应较低湿度和较强光照，增强叶片蒸腾调节能力，提高移栽成活率。 30. 植物组织培养中，细胞分裂素主要用于促进芽的增殖，常用的细胞分裂素是______。 【答案】6-苄氨基嘌呤 【解析】6-苄氨基嘌呤是组织培养中常用的细胞分裂素，适宜浓度下可促进腋芽萌发和丛生芽增殖。 四、分析题（本大题共2小题，每题5分，共10分） 31. 某花卉企业采用蝴蝶兰组织培养技术生产组培苗。培养过程中，部分外植体出现污染，部分原球茎样体在增殖阶段出现玻璃化现象。请分析说明：（1）蝴蝶兰组织培养通常包括哪些主要技术环节？（2）外植体污染的主要原因及预防措施有哪些？（3）针对原球茎样体玻璃化现象，应采取哪些改进措施？ 【答案】（1）主要环节包括外植体选择与处理、表面消毒、初代培养、增殖培养、生根培养、炼苗和移栽。（2）污染主要由外植体带菌、消毒不彻底、培养基或接种环境不洁等引起。应选择健壮材料，严格进行表面消毒，采用无菌操作，并对培养基和器具彻底灭菌。（3）适当降低培养基中细胞分裂素浓度，控制继代时间和培养密度，改善通气条件，适当降低培养环境湿度，及时剔除玻璃化材料。 【解析】（1）蝴蝶兰组培苗生产需经历无菌建立、增殖、生根和炼苗移栽等阶段。（2）污染与材料、培养基及操作环境的无菌程度有关。（3）玻璃化常与水分过多、通气不良和激素浓度不当有关。 32. 某马铃薯良种繁育中心发现田间种薯产量逐年下降，检测表明植株感染多种病毒。技术人员拟采用组织培养技术进行脱毒与快繁，并同时开展菠萝和美国红栌组培苗生产。请分析说明：（1）马铃薯脱毒培养宜选取什么部位作为外植体？为什么？（2）简述马铃薯脱毒快繁及质量控制的主要过程。（3）比较菠萝与美国红栌在外植体选择和培养管理方面的主要差异。 【答案】（1）宜选取茎尖或分生组织。该部位细胞分裂旺盛，维管组织尚未充分发育，病毒含量通常较低，有利于获得脱毒植株。（2）可先对母株进行筛选，必要时结合热处理，再取茎尖进行无菌培养；经诱导、增殖和生根获得试管苗，炼苗移栽后进行病毒检测，合格材料再进行分级扩繁和生产应用。（3）菠萝可选用冠芽、吸芽或腋芽等幼嫩材料，通常再生能力较强，适合快速增殖。美国红栌为木本植物，宜选幼嫩茎段或腋芽，培养时应重视褐化控制和材料的生理年龄，逐步完成增殖、生根及炼苗。 【解析】（1）马铃薯茎尖病毒含量较低，是脱毒培养的常用材料。（2）脱毒苗必须经过培养、扩繁和病毒检测，不能仅凭外观判定。（3）菠萝材料易再生，美国红栌材料木质化程度较高，需重点控制褐化并加强炼苗。 五、应用题（本大题共2小题，每题5分，共10分） 33. 某园艺企业采用组织培养技术繁殖蝴蝶兰。技术员选取生长健壮、无病虫害的幼嫩茎尖作为外植体，经清洗和表面消毒后接种于培养基中。培养一段时间后，部分瓶内出现浑浊，外植体基部变黑。请回答下列问题：（1）写出蝴蝶兰外植体接种前的主要处理步骤。（2）说明培养瓶出现浑浊和外植体基部变黑的可能原因，并提出相应改进措施。（3）某批次接种12个无菌原球茎，每个培养周期平均增殖形成4个新芽，成活率为75%。连续培养2个增殖周期后，预计可获得多少个成活芽？ 【答案】（1）选取健壮无病材料，流水冲洗并用洗涤剂清洗，再用无菌水冲洗；在超净工作台内进行适当表面消毒，最后用无菌水冲洗数次。（2）培养瓶浑浊主要是外植体或培养基受到细菌、真菌污染；基部变黑可能与消毒过度造成组织伤害或酚类物质氧化有关。应改进材料预处理和无菌操作，适当调整消毒时间，并及时转接污染材料。（3）第1周期：（个）；第2周期：（个）。预计获得108个成活芽。 【解析】（1）外植体处理应兼顾清洁、消毒和降低组织损伤。（2）浑浊多为微生物污染，褐变常与组织伤害或酚类氧化有关。（3）每周期均按“原数量×增殖倍数×成活率”计算，连续计算两次。 34. 某马铃薯繁育基地发现部分种薯田植株出现叶片卷曲、矮化和产量下降现象，决定采用茎尖培养进行脱毒，并通过试管苗快繁生产原原种。技术人员先对材料进行热处理，再切取幼嫩茎尖进行无菌培养。请回答下列问题：（1）说明马铃薯茎尖培养脱毒的基本原理，并写出脱毒苗获得后的检测要求。（2）列出马铃薯脱毒苗进行组织培养快繁的主要环节。（3）初始获得8株经检测合格的脱毒苗，每株在一个增殖周期内平均形成5株苗，移栽成活率为80%。连续进行3个增殖周期后，预计获得多少株成活苗？若每株成活苗可繁殖10粒微型薯，理论上可获得多少粒微型薯？ 【答案】（1）茎尖分生组织细胞分裂旺盛，维管束尚未完全形成，病毒较难到达；结合热处理可降低材料中的病毒含量。脱毒苗需经病毒检测，确认无目标病毒后方可扩繁。 （2）外植体消毒与接种、初代培养、继代增殖、生根培养、炼苗移栽和质量检测。 （3）连续3个增殖周期后理论苗数为8×5×5×5=1000株；移栽成活苗数为1000×80%=800株。每株成活苗可繁殖10粒微型薯，理论上可获得800×10=8000粒微型薯。 【解析】茎尖分生组织细胞分裂旺盛、维管束未完全形成，病毒较难到达；热处理可进一步降低病毒含量，脱毒苗须经病毒检测合格后扩繁。快繁环节包括消毒接种、初代培养、继代增殖、生根、炼苗移栽及检测。3个周期后苗数为8×53=1000株，成活800株，可获微型薯800×10=8000粒。 六、综合应用题（本大题共1小题，每题10分，共10分） 35. 某农业生物技术中心采用茎尖培养法进行马铃薯脱毒与快繁。现有经初步消毒并接种成功的马铃薯茎尖培养材料125个。每代继代培养中，每个存活培养材料平均形成4个有效芽，形成的有效芽中有80％能够成功建立下一代培养；连续继代培养3代，组培苗出瓶后炼苗移栽成活率为75％。（1）计算这批材料连续继代培养3代后，预计可获得多少株成活组培苗？再计算炼苗移栽后可获得多少株成活苗。（2）技术员认为，组培苗只要生长健壮，出瓶后即可直接认定为脱毒苗并移栽到生产田。判断该说法是否正确，并说明理由。（3）若培养过程中出现培养基污染和幼苗玻璃化现象，分别分析一种可能原因，并提出相应的改进措施。 【答案】（1）第1代：（株）；第2代：（株）；第3代：（株）。炼苗移栽成活苗数：（株）。（2）该说法不正确。组培苗是否脱毒必须经过病毒检测或指示植物鉴定确认；出瓶后还需逐步炼苗，使其适应外界光照、湿度和温度条件，不能直接移栽到生产田。（3）培养基污染可能是外植体灭菌不彻底或无菌操作不规范造成的，应改进外植体消毒、培养基灭菌和接种过程。幼苗玻璃化可能与培养基水分过多、细胞分裂素浓度过高或通风不足有关，应适当降低激素浓度、增强通风并改善光照条件。 【解析】（1）每代有效增殖系数为，连续计算三代后再乘以炼苗成活率即可。（2）脱毒效果须经检测确认，组培苗出瓶后还需炼苗。（3）污染主要与无菌条件有关，玻璃化主要与培养环境和激素浓度不适宜有关。 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $