项目3 植物组织培养基础 安徽省（分类考试和对口招生）《农业生物技术》（高教版第三版） 单元过关卷（原卷版+解析版）

安徽省（分类考试和对口招生）农林牧渔类 《农业生物技术》（高教版第三版） 项目3 植物组织培养基础 单元过关卷 时间：60分钟 总分：100分 班级＿＿＿＿　姓名＿＿＿＿　学号＿＿＿＿　成绩＿＿＿＿ 一、单项选择题（本大题共15小题，每题2分，共30分） 1. 植物组织培养又称为（ ） A. 离体培养 B. 器官培养 C. 单细胞培养 D. 细胞工程 【答案】A 【解析】植物组织培养是指将植物的器官、组织、细胞或原生质体等材料置于离体条件下，在适宜的培养基和环境条件下进行培养。因此，植物组织培养又称为离体培养，选A。 2. 植物再生功能的产生，是由于植物受伤组织产生了______，促进了周围组织的生长而形成愈伤组织，进而又产生新的器官。（ ） A. 赤霉素 B. 生长素 C. 细胞分裂素 D. 创伤激素 【答案】D 【解析】植物再生功能的产生，是由于植物受伤组织产生了创伤激素，促进了周围组织的生长而形成愈伤组织，凭借内源激素和储存营养的作用又产生新的器官。 3. 根据植物组织培养过程可归纳为： 外植体完整植物 下列说法不正确的是（ ） A. ①到③过程中细胞增殖方式为有丝分裂 B. ②表示再分化，有两种不同的形式 C. 该过程发生的原理是植物细胞全能性 D. ① 表示愈伤组织，不具有分裂能力 【答案】D 【解析】①是愈伤组织，具有分裂能力，②是再分化，③是根、芽等，①到③再分化过程细胞增殖方式为有丝分裂。 4. 利用作物生物技术中的组织培养技术或基因工程技术改良作物的基 因而培育出来的作物称为（ ） A. 生物肥料 B. 生物农药 C. 生物技术作物 D. 植物组织培养作物 【答案】C 【解析】生物技术作物是指利用作物生物技术中的组织培养技术或基因工程技术改良作物的基 因而培育出来的作物，这种作物也叫基因改性作物或基因重组作物。 5. 硅胶管准备，将硅胶颗粒用无菌镊子转入无菌试管中，大约占试管的_____体积。（ ） A. 1/2 B. 1/3 C. 1/4 D. 1/6 【答案】B 【解析】硅胶颗粒用于吸收水分、保持试管内干燥。装入时一般约占试管总体积的1/3，既能满足吸湿需要，又可避免装得过满影响使用。因此选B。 6. 兰花种子通常发育不全，在自然条件下萌发率极低。能让名贵的兰花大量、快速地繁殖方法是（ ） A. 组培快繁 B. 分株繁殖 C. 压条繁殖 D. 扦插繁殖 【答案】A 【解析】植物组培快繁技术就是利用植物组织培养技术，快速繁殖“名、优、特、新、稀”等植物品种，使其在短时间内繁衍大量植株的一套技术与方法，又叫植物离体快繁技术或试管快繁技术。 7. 关于灭菌与消毒叙述正确的是（ ） A. 灭菌是指杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用 B. 消毒是指用物理或化学方法杀死物体表面和孔隙内一切微生物或生物体 C. 灭菌是把所有有生命的物质全部杀死 D. 消毒主要杀死芽孢、厚垣孢子 【答案】C 【解析】消毒是指杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用。灭菌是指用物理或化学方法杀死物体表面和孔隙内一切微生物或生物体。消毒主要杀死或抑制物体表面的微生物但芽孢、厚垣孢子一般不会死亡。 8. 外植体一般采用的灭菌方法是（ ） A. 干热灭菌 B. 湿热灭菌 C. 浸泡灭菌 D. 擦拭灭菌 【答案】C 【解析】外植体一般采用浸泡灭菌的方法。 9. 下图属于______灭菌设备（ ） A. 湿热灭菌设备 B. 其他灭菌设备 C. 过滤灭菌设备 D. 干热灭菌设备 【答案】D 【解析】干热灭菌设备利用高温烘烤或灼烧的方法进行灭菌，包括烘箱（器皿和器械的灭菌）、酒精灯（用于接种工具的灭菌）、接种器械灭菌器等。 10. 下列关于外植体的灭菌和接种叙述不正确的是（ ） A. 外植体一般采用浸泡灭菌的方法 B. 接种前需将外植体切割到适当大小 C. 外植体接种过程在酒精灯火焰旁操作 D. 接种完成，直接完成瓶口封闭 【答案】D 【解析】接完种后，将瓶口在火焰上再灼烧数秒钟，盖上瓶盖或封口膜。然后再接下一瓶，直到全部接种完毕。 11. 培养基灭菌一般采用的灭菌方法是（ ） A. 湿热灭菌 B. 干热灭菌 C. 浸泡灭菌 D. 擦拭灭菌 【答案】A 【解析】培养基灭菌一般采用湿热灭菌，特殊情况下采用过滤无菌。 12. 关于下图所示接种工具适用的灭菌方法是（ ） A. 用高压蒸汽锅进行湿热灭菌 B. 酒精灯外焰灼烧灭菌 C. 紫外线照射灭菌 D. 浸入70%~75%的酒精中浸泡灭菌 【答案】B 13. 接种用具及超净工作台表面等使用前可用______ %新洁尔灭溶液进行擦拭灭菌（ ） A. 1~3 B. 0.1~0.2 C. 0.5~1 D. 0.3~0.6 【答案】B 【解析】新洁尔灭是常用的表面消毒剂，接种用具和超净工作台表面使用前可用0.1%～0.2%的新洁尔灭溶液擦拭处理。因此选B。 14. 植物上的真菌分离过程中将剪取的病组织放入70%酒精中浸3～5 s 后，在0.1%升汞（氯化汞）中浸泡 1 min， 然后在无菌水中连续漂洗3次，漂洗的目的是（ ） A. 去除叶片表面的灰尘、杂物 B. 消毒 C. 除去表面残留的消毒剂 D. 保持湿润 【答案】C 【解析】植物上的真菌分离过程中取真菌性叶斑病的新鲜病叶，用剪刀剪取病健交界处的组织（边长4～5 mm）数块 （图7-37）；将病组织放入70%酒精中浸3～5 s 后，将病变组织在0.1%升汞（氯化汞）中消毒 1 min， 然后在无菌水中连续漂洗3次，除去表面残留的消毒剂。 15. 蝴蝶兰初代培养时 ， 已知所需6-BA 的量为 3 mg/L，而配制好的6-BA 浓度为0.5mg/mL， 配 制2L培养基时需加入6-BA______mL。（ ） A. 2 B. 6 C. 8 D. 12 【答案】D 【解析】3 mg/L ⅹ 2L = 6mg ，6mg ÷ 0.5mg/mL = 12mL 。 二、多项选择题（本大题共10小题，每题3分，共30分） 16. 根据培养条件划分，植物组织培养可分为（ ） A. 固体培养 B. 液体培养 C. 光培养 D. 暗培养 【答案】CD 【解析】根据培养条件划分，植物组织培养可分为光培养和暗培养。 17. 下列属于植物组织培养技术在农业生产中常见应用的是（ ） A. 快速繁殖优良无性系苗木 B. 培育无病毒的脱毒种苗 C. 通过离体培养保存珍稀植物种质 D. 通过增加田间施肥提高作物产量 【答案】ABC 【解析】植物组织培养可利用离体培养快速繁殖优良苗木，结合茎尖培养等技术获得脱毒种苗，也可在适宜条件下保存珍稀植物种质。增加田间施肥属于栽培管理措施，不属于植物组织培养技术的直接应用。 18. 植物组织培养所要达到的目的是经过______的过程，使已分化的细胞表达出其全能性，发育成完整植株（ ） A. 分生 B. 分化 C. 脱分化 D. 再分化 【答案】CD 【解析】一个已分化的细胞要表达出其全能性，就要经过脱分化和再分化的过程，这就是植物组织培养所要达到的目的。 19. 按照培养对象划分，植物组织培养的类型包括（ ） A. 器官培养 B. 组织培养 C. 细胞培养 D. 继代培养 【答案】ABC 【解析】按照培养对象划分，植物组织培养包括器官培养、组织培养、细胞培养和原生质体培养等类型。继代培养是按照培养过程或培养阶段划分的方式，不属于按培养对象划分的类型。 20. 根据培养方式划分，植物组织培养可分为（ ） A. 固体培养 B. 液体培养 C. 光培养 D. 暗培养 【答案】AB 【解析】根据培养方式划分，植物组织培养可分为固体培养和液体培养。 21. 关于用具灭菌下列叙述正确的是（ ） A. 干热灭菌比湿热灭菌能源消耗大，时间花费长。 B. 接种工具可采用灭菌器烘烤、酒精灯外焰灼烧的方法灭菌。 C. 高压蒸汽灭菌器内温度高可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。 D. 把镊子、剪子、解剖刀等浸入70%~75%的酒精中浸泡灭菌，取出即可使用。 【答案】ABC 【解析】在无菌操作时，把镊子、剪子、解剖刀等浸入70%~75%的酒精中浸泡，使用之前取出在酒精灯外焰上灼烧，待冷却后使用，D错误。 22. 下图展示植物组织培养的基本过程，植物组织培养发展迅速，应用范围广泛，主要具备的特点包括（ ） A. 培养材料来源复杂，遗传信息高度一致 B. 取材经济，管理方便，工作效率高 C. 培养条件人为控制，试验、生产可周年连续进行 D. 生长快，周期短，繁殖率高 【答案】BCD 23. 接种用具及超净工作台表面等使用前可用______进行擦拭灭菌（ ） A. 70%酒精 B. 碘酒 C. 0.1%~0.2%新洁尔灭溶液 D. 无水乙醇 【答案】AC 【解析】接种用具及超净工作台表面等使用前可用70%酒精或0.1%~0.2%新洁尔灭溶液进行擦拭灭菌。 24. 下列关于外植体的灭菌和接种叙述正确的是（ ） A. 外植体一般采用浸泡灭菌的方法 B. 接种前需将外植体切割到适当大小 C. 外植体接种过程在酒精灯火焰旁操作 D. 接种完成，直接完成瓶口封闭 【答案】ABC 【解析】接完种后，将瓶口在火焰上再灼烧数秒钟，盖上瓶盖或封口膜。然后再接下一瓶，直到全部接种完毕。 25. 在常用植物组织培养培养基中，按使用浓度分类属于大量元素的是（ ） A. N B. K C. P D. Fe 【答案】ABC 【解析】大量元素是指在培养基中使用浓度较高的元素，常包括氮、磷、钾、钙、镁和硫。铁在培养基中的使用浓度相对较低，通常归入微量元素。 三、填空题（本大题共5小题，每题2分，共10分） 26. 离体试管保存种质资源，其原理是植物细胞具有______。 【答案】全能性 【解析】植物细胞具有全能性，即植物体的细胞在适宜的离体培养条件下，能够表达其全部遗传潜能，经过脱分化和再分化形成完整植株。因此答案为“全能性”。 27. 一般湿热灭菌掌握在______MPa压力下20～30 min。 【答案】0.1～0.15 【解析】一般湿热灭菌采用高压蒸汽灭菌法，通常在0.1～0.15 MPa压力下处理20～30 min，以达到杀灭培养基及器具中微生物的目的。因此答案为“0.1～0.15”。 28. ______是指用物理或化学方法杀死物体表面和孔隙内一切微生物或生物体。 【答案】灭菌 【解析】灭菌是指用物理或化学方法杀死或除去物体表面、内部及孔隙中的一切微生物和生物体，包括耐受性较强的微生物。因此答案为“灭菌”。 29. 培养基按选用营养物质的来源不同，分为______、______、______。 【答案】① 无天然培养基 ② 半合成培养基 ③ 合成培养基 【解析】按营养物质来源，培养基分为无天然培养基、半合成培养基和合成培养基，故依次填入。 30. 氧气是植物组织培养中必需的因素，配置培养基时要考虑通气问题，固体培养基可加入______来增加通气度；液体培养时应考虑用______、______和滤纸桥培养的方式进行。 【答案】① 活性炭 ② 振荡培养 ③ 旋转培养 【解析】固体培养基中加入活性炭，可利用其多孔结构改善培养基的通气性；液体培养时可采用振荡培养、旋转培养和滤纸桥培养等方式，促进培养材料与培养液接触并增加氧气供应。因此答案依次为“活性炭、振荡培养、旋转培养”。 四、分析题（本大题共2小题，每题5分，共10分） 31. 什么是植物细胞的全能性？植物细胞要表达全能性需要什么条件？ 【答案】（1）植物细胞全能性是指植物体上每个具有完整细胞核的植物活细胞，都具有该植物体的全部遗传信息和再生完整植株的能力。植物细胞全能性是一种潜在的能力，不管是性细胞还是体细胞，在特定条件下都能表达出来，长成一个完整植株。 （2）植物细胞全能性是一种潜在能力，在一个完整的植株上，各部分体细胞只是表现一定的形态，具备一定的功能，其全能性没有充分表现出来。植物细胞要表达全能性首先必须脱离所在器官或组织的束缚，处于离体状态。其次，是需要在一定的营养、激素和外界条件作用下，才可能表现出全能性，生长发育成为完整的植株。 【解析】植物细胞全能性是指植物体的活细胞在具有完整遗传信息的基础上，在适宜条件下能够形成完整植株的潜在能力。植物细胞在完整植株中通常只表现特定的形态和功能，其全能性没有充分表达。要使全能性得以表达，细胞首先要脱离原有器官或组织，处于离体状态；其次还需要适宜的营养条件、植物生长调节物质、温度、光照、湿度和无菌环境等条件，经过脱分化、再分化，最终形成完整植株。 32. 植物组织培养技术为育种提供了现代的技术手段，解决了育种周期长、技术繁琐、短期不见效果的问题。谈谈利用植物组织培养进行植物新品种的培育的技术手段有哪些？ 【答案】通过花药和花粉培养进行单倍体育种，通过体细胞杂交获取远缘杂交新品系，通过胚胎培养拯救杂种胚，通过细胞突变体的筛选获取新植株，通过原生质体的培养、外源基因的导入培育新品种。 【解析】利用植物组织培养培育新品种的主要技术手段包括：通过花药培养或花粉培养进行单倍体育种，以缩短育种年限；通过原生质体融合进行体细胞杂交，获得远缘杂交新品系；通过胚胎培养拯救杂种胚，提高杂交成功率；通过培养细胞并筛选突变体，获得具有优良性状的新植株；通过原生质体培养和外源基因导入，培育具有目标性状的新品种。 五、应用题（本大题共2小题，每题5分，共10分） 33. 某植物组织培养实验室需要配制 1 L 以 MS 培养基为基础的工作培养基。现有 20 倍大量元素母液、200 倍微量元素母液、200 倍铁盐母液和 1000 倍有机物母液，另需加入蔗糖 30 g、琼脂 7 g。请完成下列操作：（1）分别计算配制 1 L 工作培养基所需各类母液的体积。（2）简述培养基配制、调节酸碱度、分装和灭菌的主要步骤。（3）指出配制过程中应注意的两项操作要求。 【答案】（1）20 倍大量元素母液用量为 mL；200 倍微量元素母液用量为 mL；200 倍铁盐母液用量为 mL；1000 倍有机物母液用量为 mL。（2）量取约 700 mL 蒸馏水，依次加入各类母液并充分搅拌；加入蔗糖和琼脂，加热使其充分溶解；用蒸馏水定容至 1 L，调节 pH 至 5.8；分装入培养瓶并封口，置于高压蒸汽灭菌器中灭菌。（3）加入母液时应按规定顺序并充分搅拌，避免产生沉淀；调节 pH 应在定容前后按实验室规定进行，且分装量不宜过多，防止灭菌时溢出。 【解析】（1）母液用量按“工作浓度等于母液浓度乘以母液体积与终体积之比”计算。（2）培养基需完成溶解、定容、调 pH、分装和高压蒸汽灭菌等步骤，操作不当易产生沉淀或造成污染。 34. 某组培实验室准备对一批幼嫩茎段进行外植体表面灭菌。现有体积分数为 10％的次氯酸钠溶液，要求配制 500 mL 体积分数为 2％的工作液。实验方案为：先用流水清洗材料，再用 75％乙醇处理 30 s，随后用次氯酸钠工作液处理 8 min，最后用无菌水冲洗 3 次。请完成下列操作：（1）计算配制 500 mL 次氯酸钠工作液所需原液和无菌水的体积。（2）按先后顺序写出外植体表面灭菌的主要操作步骤。（3）若接种后第 3 天培养瓶内出现浑浊液体并伴有异味，判断可能发生的情况，并说明处理措施。 【答案】（1）根据 ，所需原液体积为 ；需加入无菌水 mL。（2）将外植体剪切成适宜大小，用流水充分清洗；在无菌操作台内用 75％乙醇处理 30 s；转入 2％次氯酸钠工作液处理 8 min；用无菌水冲洗 3 次；用无菌滤纸吸去表面水分后接种。（3）培养瓶内浑浊并有异味，通常表明培养物受到细菌等微生物污染。应立即隔离并封存污染瓶，按实验室规定进行灭菌处理和废弃，检查外植体灭菌、冲洗、接种及器具灭菌等环节。 【解析】（1）采用稀释公式计算，原液为 100 mL，无菌水为 400 mL。（2）乙醇处理、次氯酸钠处理和无菌水冲洗必须按顺序完成。培养液浑浊并有异味是微生物污染的典型表现，应隔离污染源并追查无菌操作环节。 六、综合应用题（本大题共1小题，每题10分，共10分） 35. 某植物组织培养企业的配液岗位需配制 3.6 L 的 MS 固体培养基。现有 10 倍浓缩的 MS 基础培养基母液，工作培养基中母液的终浓度为 1 倍；蔗糖用量为 30 g/L，琼脂用量为 7 g/L，培养基 pH 调至 5.8。实验室同时需要加入一种遇热易失活的植物生长调节物质，该物质已配制成溶液。请完成下列任务：（1）计算配制 3.6 L 工作培养基所需的 MS 基础培养基母液、蔗糖和琼脂的用量，并写出主要计算过程。（2）判断下列操作是否合理：将配好的基础培养基调节 pH 后，分装于培养瓶中并加盖，采用 121 ℃、20 min 高压蒸汽灭菌；待培养基冷却至适宜温度后，在超净工作台内加入经 0.22 μm 微孔滤膜过滤除菌的植物生长调节物质溶液。说明理由。（3）培养基灭菌后，接种初期仍有部分培养瓶出现细菌污染。请从实验室操作和灭菌消毒两个方面，分析可能原因并提出改进措施。 【答案】（1）设所需 10 倍母液体积为 ，则，。蔗糖质量为 。琼脂质量为 。因此需取 360 mL 母液，加入蔗糖 108 g、琼脂 25.2 g，再用蒸馏水定容至 3.6 L。（2）合理。高压蒸汽可对基础培养基进行湿热灭菌；热敏性物质采用过滤除菌，并在培养基冷却后于无菌操作条件下加入，可避免高温使其失活。（3）可能原因及措施：超净工作台、培养瓶或器具灭菌不彻底，应按规定清洁、消毒和灭菌；操作人员未规范洗手、穿戴工作服或操作时间过长，应加强无菌操作训练；培养基装量过多、瓶口密封不严或灭菌参数不足，应控制装量、检查瓶盖并核验灭菌温度和时间。 【解析】（1）按浓缩倍数用 计算母液体积，再按单位体积用量计算蔗糖和琼脂质量。（2）基础培养基适合高压蒸汽灭菌，热敏物质适合过滤除菌后无菌加入。（3）污染通常与器具、环境、人员或灭菌参数不合格有关，应分别排查并改进。 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $ 安徽省（分类考试和对口招生）农林牧渔类 《农业生物技术》（高教版第三版） 项目3 植物组织培养基础 单元过关卷 时间：60分钟 总分：100分 班级＿＿＿＿　姓名＿＿＿＿　学号＿＿＿＿　成绩＿＿＿＿ 一、单项选择题（本大题共15小题，每题2分，共30分） 1. 植物组织培养又称为（ ） A. 离体培养 B. 器官培养 C. 单细胞培养 D. 细胞工程 2. 植物再生功能的产生，是由于植物受伤组织产生了______，促进了周围组织的生长而形成愈伤组织，进而又产生新的器官。（ ） A. 赤霉素 B. 生长素 C. 细胞分裂素 D. 创伤激素 3. 根据植物组织培养过程可归纳为： 外植体完整植物 下列说法不正确的是（ ） A. ①到③过程中细胞增殖方式为有丝分裂 B. ②表示再分化，有两种不同的形式 C. 该过程发生的原理是植物细胞全能性 D. ① 表示愈伤组织，不具有分裂能力 4. 利用作物生物技术中的组织培养技术或基因工程技术改良作物的基 因而培育出来的作物称为（ ） A. 生物肥料 B. 生物农药 C. 生物技术作物 D. 植物组织培养作物 5. 硅胶管准备，将硅胶颗粒用无菌镊子转入无菌试管中，大约占试管的_____体积。（ ） A. 1/2 B. 1/3 C. 1/4 D. 1/6 6. 兰花种子通常发育不全，在自然条件下萌发率极低。能让名贵的兰花大量、快速地繁殖方法是（ ） A. 组培快繁 B. 分株繁殖 C. 压条繁殖 D. 扦插繁殖 7. 关于灭菌与消毒叙述正确的是（ ） A. 灭菌是指杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用 B. 消毒是指用物理或化学方法杀死物体表面和孔隙内一切微生物或生物体 C. 灭菌是把所有有生命的物质全部杀死 D. 消毒主要杀死芽孢、厚垣孢子 8. 外植体一般采用的灭菌方法是（ ） A. 干热灭菌 B. 湿热灭菌 C. 浸泡灭菌 D. 擦拭灭菌 9. 下图属于______灭菌设备（ ） A. 湿热灭菌设备 B. 其他灭菌设备 C. 过滤灭菌设备 D. 干热灭菌设备 10. 下列关于外植体的灭菌和接种叙述不正确的是（ ） A. 外植体一般采用浸泡灭菌的方法 B. 接种前需将外植体切割到适当大小 C. 外植体接种过程在酒精灯火焰旁操作 D. 接种完成，直接完成瓶口封闭 11. 培养基灭菌一般采用的灭菌方法是（ ） A. 湿热灭菌 B. 干热灭菌 C. 浸泡灭菌 D. 擦拭灭菌 12. 关于下图所示接种工具适用的灭菌方法是（ ） A. 用高压蒸汽锅进行湿热灭菌 B. 酒精灯外焰灼烧灭菌 C. 紫外线照射灭菌 D. 浸入70%~75%的酒精中浸泡灭菌 13. 接种用具及超净工作台表面等使用前可用______ %新洁尔灭溶液进行擦拭灭菌（ ） A. 1~3 B. 0.1~0.2 C. 0.5~1 D. 0.3~0.6 14. 植物上的真菌分离过程中将剪取的病组织放入70%酒精中浸3～5 s 后，在0.1%升汞（氯化汞）中浸泡 1 min， 然后在无菌水中连续漂洗3次，漂洗的目的是（ ） A. 去除叶片表面的灰尘、杂物 B. 消毒 C. 除去表面残留的消毒剂 D. 保持湿润 15. 蝴蝶兰初代培养时 ， 已知所需6-BA 的量为 3 mg/L，而配制好的6-BA 浓度为0.5mg/mL， 配 制2L培养基时需加入6-BA______mL。（ ） A. 2 B. 6 C. 8 D. 12 二、多项选择题（本大题共10小题，每题3分，共30分） 16. 根据培养条件划分，植物组织培养可分为（ ） A. 固体培养 B. 液体培养 C. 光培养 D. 暗培养 17. 下列属于植物组织培养技术在农业生产中常见应用的是（ ） A. 快速繁殖优良无性系苗木 B. 培育无病毒的脱毒种苗 C. 通过离体培养保存珍稀植物种质 D. 通过增加田间施肥提高作物产量 18. 植物组织培养所要达到的目的是经过______的过程，使已分化的细胞表达出其全能性，发育成完整植株（ ） A. 分生 B. 分化 C. 脱分化 D. 再分化 19. 按照培养对象划分，植物组织培养的类型包括（ ） A. 器官培养 B. 组织培养 C. 细胞培养 D. 继代培养 20. 根据培养方式划分，植物组织培养可分为（ ） A. 固体培养 B. 液体培养 C. 光培养 D. 暗培养 21. 关于用具灭菌下列叙述正确的是（ ） A. 干热灭菌比湿热灭菌能源消耗大，时间花费长。 B. 接种工具可采用灭菌器烘烤、酒精灯外焰灼烧的方法灭菌。 C. 高压蒸汽灭菌器内温度高可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。 D. 把镊子、剪子、解剖刀等浸入70%~75%的酒精中浸泡灭菌，取出即可使用。 22. 下图展示植物组织培养的基本过程，植物组织培养发展迅速，应用范围广泛，主要具备的特点包括（ ） A. 培养材料来源复杂，遗传信息高度一致 B. 取材经济，管理方便，工作效率高 C. 培养条件人为控制，试验、生产可周年连续进行 D. 生长快，周期短，繁殖率高 23. 接种用具及超净工作台表面等使用前可用______进行擦拭灭菌（ ） A. 70%酒精 B. 碘酒 C. 0.1%~0.2%新洁尔灭溶液 D. 无水乙醇 24. 下列关于外植体的灭菌和接种叙述正确的是（ ） A. 外植体一般采用浸泡灭菌的方法 B. 接种前需将外植体切割到适当大小 C. 外植体接种过程在酒精灯火焰旁操作 D. 接种完成，直接完成瓶口封闭 25. 在常用植物组织培养培养基中，按使用浓度分类属于大量元素的是（ ） A. N B. K C. P D. Fe 三、填空题（本大题共5小题，每题2分，共10分） 26. 离体试管保存种质资源，其原理是植物细胞具有______。 27. 一般湿热灭菌掌握在______MPa压力下20～30 min。 28. ______是指用物理或化学方法杀死物体表面和孔隙内一切微生物或生物体。 29. 培养基按选用营养物质的来源不同，分为______、______、______。 30. 氧气是植物组织培养中必需的因素，配置培养基时要考虑通气问题，固体培养基可加入______来增加通气度；液体培养时应考虑用______、______和滤纸桥培养的方式进行。 四、分析题（本大题共2小题，每题5分，共10分） 31. 什么是植物细胞的全能性？植物细胞要表达全能性需要什么条件？ 32. 植物组织培养技术为育种提供了现代的技术手段，解决了育种周期长、技术繁琐、短期不见效果的问题。谈谈利用植物组织培养进行植物新品种的培育的技术手段有哪些？ 五、应用题（本大题共2小题，每题5分，共10分） 33. 某植物组织培养实验室需要配制 1 L 以 MS 培养基为基础的工作培养基。现有 20 倍大量元素母液、200 倍微量元素母液、200 倍铁盐母液和 1000 倍有机物母液，另需加入蔗糖 30 g、琼脂 7 g。请完成下列操作：（1）分别计算配制 1 L 工作培养基所需各类母液的体积。（2）简述培养基配制、调节酸碱度、分装和灭菌的主要步骤。（3）指出配制过程中应注意的两项操作要求。 34. 某组培实验室准备对一批幼嫩茎段进行外植体表面灭菌。现有体积分数为 10％的次氯酸钠溶液，要求配制 500 mL 体积分数为 2％的工作液。实验方案为：先用流水清洗材料，再用 75％乙醇处理 30 s，随后用次氯酸钠工作液处理 8 min，最后用无菌水冲洗 3 次。请完成下列操作：（1）计算配制 500 mL 次氯酸钠工作液所需原液和无菌水的体积。（2）按先后顺序写出外植体表面灭菌的主要操作步骤。（3）若接种后第 3 天培养瓶内出现浑浊液体并伴有异味，判断可能发生的情况，并说明处理措施。 六、综合应用题（本大题共1小题，每题10分，共10分） 35. 某植物组织培养企业的配液岗位需配制 3.6 L 的 MS 固体培养基。现有 10 倍浓缩的 MS 基础培养基母液，工作培养基中母液的终浓度为 1 倍；蔗糖用量为 30 g/L，琼脂用量为 7 g/L，培养基 pH 调至 5.8。实验室同时需要加入一种遇热易失活的植物生长调节物质，该物质已配制成溶液。请完成下列任务：（1）计算配制 3.6 L 工作培养基所需的 MS 基础培养基母液、蔗糖和琼脂的用量，并写出主要计算过程。（2）判断下列操作是否合理：将配好的基础培养基调节 pH 后，分装于培养瓶中并加盖，采用 121 ℃、20 min 高压蒸汽灭菌；待培养基冷却至适宜温度后，在超净工作台内加入经 0.22 μm 微孔滤膜过滤除菌的植物生长调节物质溶液。说明理由。（3）培养基灭菌后，接种初期仍有部分培养瓶出现细菌污染。请从实验室操作和灭菌消毒两个方面，分析可能原因并提出改进措施。 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $