项目3 免疫诊断《畜禽疫病防治》（高教版 第三版）单元过关卷 山东省（原卷版+解析版）

中职专业课章节过关卷 职教 》 《畜禽疫病防治》（高教版第三版） 项目3免疫诊断 考试时间：60分钟 满分：100分 班级 姓名 学号 成绩 一、单选题（本题共25道小题，每题2分，共50分) 1.变态反应是指免疫系统对再次进入机体的抗原物质做出的过于强烈或不适当的免疫反应， 其本质是什么？() A免疫应答 B.自身免疫 C.免疫缺陷 D.免疫耐受 2.I型变态反应中，变应原首次进入机体刺激产生并吸附于肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面的 抗体是哪一种？() A IgG B.IgE C.IgM D.IgA 3.体外发生的抗原抗体结合反应称血清学试验，因抗体主要存在于血清中。血清学试验具有 怎样的重要特点？() A反应速度极慢 B.只能在体内进行 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 中职专业课章节过关卷 醇A职教 》 C.具有高度的特异性 D.不需要电解质参与 4.Ⅱ型变态反应又称细胞毒型，参与反应的抗体主要是什么？() AIgE和IgA B.IgD和IgE C.IgM和IgA D.IgG和IgM 5.动物注射血清后若出现不安、颤抖、出汗或呼吸急促等过敏反应症状，首先应皮下注射什 么药物进行急救？() A0.1%肾上腺素 B.10%葡萄糖酸钙 C.地塞米松磷酸钠 D.苯海拉明 6.Ⅲ型变态反应中，何种比例的抗原抗体能形成中等大小的可溶性复合物，沉积于肾小球、 关节等处引起病变？() A抗体量远多于抗原量 B.抗原量稍超过抗体量 C.抗原抗体比例合适 D.抗原量远多于抗体量 7.细菌、细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合，在适量电解质作用下凝聚形成肉眼可见的凝集 团块，该试验称为什么？() A沉淀试验 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 中职专业课章节过关卷 每A职教 》 B.中和试验 C.凝集试验 D.补体结合试验 8.血清学试验中，抗原与抗体发生结合后须有何种物质参与才能形成大块的凝集或沉淀？( A葡萄糖 B.蛋白质 C.维生素 D.电解质 9.血清学试验中，凝集和沉淀反应通常在什么温度下感作一定时间以促进反应现象出现？( A37℃ B.4℃ C.56℃ D.100℃ 10.I型变态反应中，致敏细胞再次接触变应原后脱出颗粒，迅速释放多种活性介质。下列 哪项不属于I型变态反应释放的活性介质？() A组胺 B.补体 C缓激肽 D.5-羟色胺 11.V型变态反应由细胞免疫引起，无抗体和补体参加，反应发生缓慢。至少多长时间以后 反应才达到高峰？( 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 中职专业课章节过关卷 ©AI职教 .xk.com 》 A30分钟 B.2小时 C.12小时 D.30分钟以内 12.可溶性抗原与相应抗体结合，在适量电解质存在下形成肉眼可见的白色沉淀，该试验称为 什么？() A凝集试验 B.中和试验 C.补体结合试验 D.沉淀试验 13.直接凝集试验的玻片法是一种定性试验。将已知抗体的诊断血清与待检悬液在玻板上混 合，数分钟后出现颗粒状凝集即为阳性。此法常用于什么场景？() A新分离菌的鉴定或定型 B.测定血清抗体的精确效价 C.大量样本的定量分析 D.病毒的分离培养 14.试管凝集法以出现多少百分比凝集以上的血清最高稀释倍数为该血清的凝集价？() A25%凝集(+) B.50%凝集(+) C.75%凝集（+) D.100%凝集(+) 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 中职专业课章节过关卷 醉A职教 》 15.环状沉淀试验用于抗原的定性试验。将已知沉淀素血清加入小口径试管，沿管壁小心加入 待检抗原于血清表面，数分钟后两层液面交界处出现什么现象为阳性？() A红色环状带 B.蓝色环状带 C.白色环状沉淀 D.气泡产生 16.间接凝集试验中将可溶性抗原吸附到载体颗粒表面的过程称为什么？() A免疫 B.接种 C.吸附 D.致敏 17.将特异性抗体吸附于载体颗粒表面，再与相应的可溶性抗原结合产生凝集现象，这种方法 称为什么？() A反向间接凝集反应 B.正向间接凝集反应 C.直接凝集反应 D.沉淀反应 18.琼脂凝胶扩散试验中双向双扩散应用最广泛。若两相邻孔为同一抗原时，两条沉淀带呈现 什么形态？() A两条交叉的沉淀带 B.两条沉淀带完全融合 C.不完全融合并出现叉角 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 中职专业课章节过关卷 ©AI职教 hiiao.kw.com 》 D.不出现沉淀带 19.V型变态反应由细胞免疫引起，受变应原刺激后什么细胞分化成效应性淋巴细胞？ () AB细胞 B.NK细胞 C.T细胞 D.巨噬细胞 20. 免疫标记技术将抗原抗体反应的特异性和标记分子极易检测的敏感性相结合。荧光抗体标 记技术中应用最广的荧光色素是哪一种？() A四乙基罗丹明 B.四甲基罗丹明 C.碘化丙啶 D.异硫氰酸荧光黄 21.结核杆菌、布鲁菌等细胞内寄生菌在传染过程中能引起以细胞免疫为主的V型变态反应， 这种在传染过程中发生的变态反应称为什么？() A传染性变态反应 B.药物性变态反应 C.血清病 D.接触性皮炎 22.牛结核菌素皮内变态反应试验中，注射后第几小时进行首次观察，并用游标卡尺测量皮皱 厚度？() A24小时 B.72小时 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 中职专业课章节过关卷 醇A职教 》 C.48小时 D.96小时 23.琼扩双向双扩散试验中，两个相邻孔的抗原在分子结构上有部分相同抗原决定簇时，沉淀 带呈现什么形态？() A两条沉淀带完全融合 B.形成两条交叉的沉淀带 C.不完全融合并出现一个叉角 D.仅出现一条沉淀带 24.某养殖场牛群需同时进行结核病和布鲁菌病检疫。关于两种检疫方法的免疫学原理，以下 描述正确的是哪项？() A两种检疫均基于I型变态反应 B.两种检疫均基于凝集试验 C.布鲁菌病检疫基于变态反应 D.结核病检疫基于V型变态反应，布鲁菌病常用凝集试验 25.在给动物大剂量注射血清前，为预防血清过敏症，通常采用什么方法？() A脱敏疗法，先少量多次皮下注射 B.一次性快速静脉推注 C.将血清冷冻后注射 D.先口服抗组胺药物后注射 二、简答题（本题共5道小题，每题8分，共40分) 1.简述变态反应的四种类型及各自的主要特点。 2.简述影响血清学试验的五个主要因素。 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 中职专业课章节过关卷 山职教 》 3.比较直接凝集试验玻片法和试管法的操作特点和应用场景。 4.简述免疫标记技术的主要类型及荧光抗体标记技术的基本原理。 5.简述琼脂凝胶扩散试验双向双扩散的原理及三种沉淀带形态的判定意义。 三、综合分析题（本题共1道小题，每题10分，共10分) 1.某规模化奶牛场需对全场200头牛进行年度结核病和布鲁菌病检疫。请设计一套完整的检 疫方案：(1)说明牛结核病检疫的具体操作步骤和结果判定方法；(2)说明布鲁菌病的血清 学检测方法及操作要点；(3)分析两种检疫方法所基于的免疫学原理有何不同，并说明为什 么结核病不采用血清学方法而布鲁菌病可采用血清学方法进行检疫。 ⊙⊙原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 《畜禽疫病防治》（高教版 第三版） 项目3 免疫诊断 考试时间：60分钟 满分：100分 班级________ 姓名________ 学号________ 成绩________ 一、单选题（本题共25道小题，每题2分，共50分） 1. 变态反应是指免疫系统对再次进入机体的抗原物质做出的过于强烈或不适当的免疫反应，其本质是什么？（ ） A. 免疫应答 B. 自身免疫 C. 免疫缺陷 D. 免疫耐受 【答案】A 【解析】变态反应的本质也是免疫应答。引起变态反应的物质称为变应原，变应原可通过呼吸道、消化道、皮肤、黏膜等途径进入动物机体而引发变态反应。 2. I型变态反应中，变应原首次进入机体刺激产生并吸附于肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面的抗体是哪一种？（ ） A. IgG B. IgE C. IgM D. IgA 【答案】B 【解析】I型变态反应发生机制：变应原首次进入机体刺激产生IgE，IgE吸附于肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面使之致敏。再次接触同一变应原时，IgE结合变应原导致细胞脱出颗粒释放活性介质。 3. 体外发生的抗原抗体结合反应称血清学试验，因抗体主要存在于血清中。血清学试验具有怎样的重要特点？（ ） A. 反应速度极慢 B. 只能在体内进行 C. 具有高度的特异性 D. 不需要电解质参与 【答案】C 【解析】血清学试验具有高度的特异性，广泛应用于微生物的鉴定、传染病及寄生虫病的诊断和监测。体外的抗原抗体结合反应主要用于检测抗原或抗体，用于免疫学诊断。 4. Ⅱ型变态反应又称细胞毒型，参与反应的抗体主要是什么？（ ） A. IgE和IgA B. IgD和IgE C. IgM和IgA D. IgG和IgM 【答案】D 【解析】Ⅱ型变态反应中变应原刺激机体产生细胞溶解性抗体IgG和IgM，这些抗体与靶细胞表面抗原结合，通过激活补体使细胞溶解、吞噬细胞吞噬或K细胞杀伤三种途径杀死靶细胞。 5. 动物注射血清后若出现不安、颤抖、出汗或呼吸急促等过敏反应症状，首先应皮下注射什么药物进行急救？（ ） A. 0.1%肾上腺素 B. 10%葡萄糖酸钙 C. 地塞米松磷酸钠 D. 苯海拉明 【答案】A 【解析】如果动物在注射后短时间内出现过敏反应症状，首先用0.1%的肾上腺素皮下注射（大型动物5～10mL，中、小型动物2～5mL），并采取其他对症治疗措施。常用药物还有肾上腺素皮质激素、抗组胺药物和钙制剂等。 6. Ⅲ型变态反应中，何种比例的抗原抗体能形成中等大小的可溶性复合物，沉积于肾小球、关节等处引起病变？（ ） A. 抗体量远多于抗原量 B. 抗原量稍超过抗体量 C. 抗原抗体比例合适 D. 抗原量远多于抗体量 【答案】B 【解析】当抗原量稍超过抗体量时形成中等大小的可溶性复合物，不易被机体排出，随血流在肾小球、关节、皮肤等处形成沉积，引起炎症、水肿、出血、局部坏死等一系列反应。 7. 细菌、细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合，在适量电解质作用下凝聚形成肉眼可见的凝集团块，该试验称为什么？（ ） A. 沉淀试验 B. 中和试验 C. 凝集试验 D. 补体结合试验 【答案】C 【解析】凝集试验是颗粒性抗原或吸附在颗粒性载体表面的可溶性抗原与相应抗体结合，在适量电解质作用下形成肉眼可见凝集团块。参与凝集试验的抗原称为凝集原，抗体称为凝集素。 8. 血清学试验中，抗原与抗体发生结合后须有何种物质参与才能形成大块的凝集或沉淀？（ ） A. 葡萄糖 B. 蛋白质 C. 维生素 D. 电解质 【答案】D 【解析】抗原与抗体发生结合后，须有电解质参与才能进一步使抗原抗体复合物相互靠拢聚集形成大块的凝集或沉淀。若无电解质参加，则不出现可见反应。常用0.85%～0.9%的氯化钠或各种缓冲液。 9. 血清学试验中，凝集和沉淀反应通常在什么温度下感作一定时间以促进反应现象出现？（ ） A. 37℃ B. 4℃ C. 56℃ D. 100℃ 【答案】A 【解析】在一定温度范围内，温度越高抗原抗体分子运动速度越快，可增加碰撞机会，加速结合和反应现象出现。凝集和沉淀反应通常在37℃感作一定时间，以促进反应现象的出现。 10. Ⅰ型变态反应中，致敏细胞再次接触变应原后脱出颗粒，迅速释放多种活性介质。下列哪项不属于Ⅰ型变态反应释放的活性介质？（ ） A. 组胺 B. 补体 C. 缓激肽 D. 5-羟色胺 【答案】B 【解析】Ⅰ型变态反应脱出的颗粒迅速释放组胺、缓激肽、5-羟色胺和过敏毒素等活性介质。补体参与Ⅱ型和Ⅲ型变态反应，不是Ⅰ型释放的介质。 11. Ⅳ型变态反应由细胞免疫引起，无抗体和补体参加，反应发生缓慢。至少多长时间以后反应才达到高峰？（ ） A. 30分钟 B. 2小时 C. 12小时 D. 30分钟以内 【答案】C 【解析】Ⅳ型变态反应是由细胞介导，反应较慢，至少12h以后才发生，故称为迟发型变态反应。前三种（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型）均由抗体介导，反应发生快，称为速发型变态反应。 12. 可溶性抗原与相应抗体结合，在适量电解质存在下形成肉眼可见的白色沉淀，该试验称为什么？（ ） A. 凝集试验 B. 中和试验 C. 补体结合试验 D. 沉淀试验 【答案】D 【解析】可溶性抗原（如细菌外毒素、内毒素、菌体裂解液等）与相应抗体结合，在适量电解质存在下经过一定时间形成肉眼可见白色沉淀，称为沉淀试验。参与沉淀试验的抗原称为沉淀原，抗体称为沉淀素。 13. 直接凝集试验的玻片法是一种定性试验。将已知抗体的诊断血清与待检悬液在玻板上混合，数分钟后出现颗粒状凝集即为阳性。此法常用于什么场景？（ ） A. 新分离菌的鉴定或定型 B. 测定血清抗体的精确效价 C. 大量样本的定量分析 D. 病毒的分离培养 【答案】A 【解析】玻片法简便快速，适用于新分离菌的鉴定或定型，如沙门菌和链球菌的鉴定、血型的鉴定多采用此法。也可用已知诊断抗原检测待检血清中是否存在相应抗体，如布鲁菌的虎红平板凝集试验。 14. 试管凝集法以出现多少百分比凝集以上的血清最高稀释倍数为该血清的凝集价？（ ） A. 25%凝集（+） B. 50%凝集（++） C. 75%凝集（+++） D. 100%凝集（++++） 【答案】B 【解析】以出现50%凝集（++）以上的血清最高稀释倍数为该血清的凝集价（或称为效价、滴度）。生产中此法常用于布鲁菌病的诊断与检疫。 15. 环状沉淀试验用于抗原的定性试验。将已知沉淀素血清加入小口径试管，沿管壁小心加入待检抗原于血清表面，数分钟后两层液面交界处出现什么现象为阳性？（ ） A. 红色环状带 B. 蓝色环状带 C. 白色环状沉淀 D. 气泡产生 【答案】C 【解析】环状沉淀试验方法为在小口径试管中加入已知沉淀素血清，沿管壁加入等量待检抗原于血清表面使之分层。数分钟后，两层液面交界处出现白色环状沉淀，即为阳性反应。主要用于诊断炭疽的Ascoli试验等。 16. 间接凝集试验中将可溶性抗原吸附到载体颗粒表面的过程称为什么？（ ） A. 免疫 B. 接种 C. 吸附 D. 致敏 【答案】D 【解析】将可溶性抗原（或抗体）先吸附于一种与免疫无关的不溶性颗粒的表面，此过程称为致敏。用于吸附抗原或抗体的颗粒称为载体颗粒，常用的载体有红细胞、聚苯乙烯乳胶等。 17. 将特异性抗体吸附于载体颗粒表面，再与相应的可溶性抗原结合产生凝集现象，这种方法称为什么？（ ） A. 反向间接凝集反应 B. 正向间接凝集反应 C. 直接凝集反应 D. 沉淀反应 【答案】A 【解析】将抗原吸附于载体颗粒与相应抗体反应产生凝集称为正向间接凝集反应。将特异性抗体吸附于载体颗粒表面，再与相应可溶性抗原结合产生凝集现象，称为反向间接凝集反应。 18. 琼脂凝胶扩散试验中双向双扩散应用最广泛。若两相邻孔为同一抗原时，两条沉淀带呈现什么形态？（ ） A. 两条交叉的沉淀带 B. 两条沉淀带完全融合 C. 不完全融合并出现叉角 D. 不出现沉淀带 【答案】B 【解析】双向双扩散中，两相邻孔为同一抗原时，两条沉淀带完全融合；如二者在分子结构上有部分相同抗原决定簇，则两条沉淀带不完全融合并出现一个叉角；两种完全不同的抗原，则形成两条交叉的沉淀带。 19. Ⅳ型变态反应由细胞免疫引起，受变应原刺激后什么细胞分化成效应性淋巴细胞？（ ） A. B细胞 B. NK细胞 C. T细胞 D. 巨噬细胞 【答案】C 【解析】机体受到某种变应原刺激使T细胞母细胞化，进一步分化成效应性淋巴细胞使机体致敏。再次接触同一变应原时，效应性淋巴细胞释放多种细胞因子直接杀伤靶细胞引起变态反应。此型无抗体和补体参加。 20. 免疫标记技术将抗原抗体反应的特异性和标记分子极易检测的敏感性相结合。荧光抗体标记技术中应用最广的荧光色素是哪一种？（ ） A. 四乙基罗丹明 B. 四甲基罗丹明 C. 碘化丙啶 D. 异硫氰酸荧光黄 【答案】D 【解析】用于标记的荧光色素有异硫氰酸荧光黄（FITC）、四乙基罗丹明（RB200）和四甲基异硫氰酸罗丹明（TMRITC），其中FITC应用最广，为黄色结晶，可呈现明亮的黄绿色荧光。 21. 结核杆菌、布鲁菌等细胞内寄生菌在传染过程中能引起以细胞免疫为主的Ⅳ型变态反应，这种在传染过程中发生的变态反应称为什么？（ ） A. 传染性变态反应 B. 药物性变态反应 C. 血清病 D. 接触性皮炎 【答案】A 【解析】结核杆菌、布鲁菌、鼻疽杆菌等细胞内寄生菌在传染过程中能引起以细胞免疫为主的Ⅳ型变态反应。这种变态反应以病原微生物或其代谢产物作为变应原，在传染过程中发生，因此称为传染性变态反应。临床上利用传染性变态反应来诊断这些慢性传染病。 22. 牛结核菌素皮内变态反应试验中，注射后第几小时进行首次观察，并用游标卡尺测量皮皱厚度？（ ） A. 24小时 B. 72小时 C. 48小时 D. 96小时 【答案】B 【解析】皮内注射后第72小时进行观察，仔细观察注射局部有无热、痛、肿胀等炎性反应，并用游标卡尺测量术部皮皱厚度。对阴性反应和疑似反应的牛，于注射后第96h和第120h再分别判定一次。 23. 琼扩双向双扩散试验中，两个相邻孔的抗原在分子结构上有部分相同抗原决定簇时，沉淀带呈现什么形态？（ ） A. 两条沉淀带完全融合 B. 形成两条交叉的沉淀带 C. 不完全融合并出现一个叉角 D. 仅出现一条沉淀带 【答案】C 【解析】当二者在分子结构上有部分相同抗原决定簇，则两条沉淀带不完全融合并出现一个叉角。同一抗原时两条沉淀带完全融合；完全不同的抗原形成两条交叉的沉淀带。此沉淀带形成后像一道特异性屏障，继续扩散而来的相同抗原只能使沉淀带加浓加厚。 24. 某养殖场牛群需同时进行结核病和布鲁菌病检疫。关于两种检疫方法的免疫学原理，以下描述正确的是哪项？（ ） A. 两种检疫均基于Ⅰ型变态反应 B. 两种检疫均基于凝集试验 C. 布鲁菌病检疫基于变态反应 D. 结核病检疫基于Ⅳ型变态反应，布鲁菌病常用凝集试验 【答案】D 【解析】结核病检疫利用传染性变态反应（Ⅳ型），通过皮内注射结核菌素观察局部炎症反应。布鲁菌病检疫常用血清学试验中的凝集试验（如虎红平板凝集试验和试管凝集试验），原理是抗原抗体特异性结合。两种方法免疫学基础不同。 25. 在给动物大剂量注射血清前，为预防血清过敏症，通常采用什么方法？（ ） A. 脱敏疗法，先少量多次皮下注射 B. 一次性快速静脉推注 C. 将血清冷冻后注射 D. 先口服抗组胺药物后注射 【答案】A 【解析】为了避免动物血清过敏症的发生，在给动物大剂量注射血清之前，可将血清加温至30℃后使用，并先少量多次皮下注射血清（中型动物每次0.2mL，大型动物每次2mL），隔15min后再注射中等剂量，若无严重反应，15min后可全量注射。这是脱敏疗法的应用。 二、简答题（本题共5道小题，每题8分，共40分） 1. 简述变态反应的四种类型及各自的主要特点。 【答案】根据变态反应中所参与的细胞、活性物质、损伤组织器官的机制以及产生反应所需的时间等，将变态反应分为四种类型：（1）I型变态反应（过敏反应型），由IgE介导，肥大细胞和嗜碱性粒细胞参与，释放组胺等活性介质，反应发生快；（2）Ⅱ型变态反应（细胞毒型），由IgG和IgM介导，通过激活补体、吞噬或K细胞杀伤靶细胞；（3）Ⅲ型变态反应（免疫复合物型），抗原略多于抗体时形成中等大小可溶性复合物，沉积于肾小球、关节等处引起炎症；（4）Ⅳ型变态反应（迟发型），由T细胞介导，无抗体和补体参加，反应至少12h后发生。前三种为速发型，第四种为迟发型。 【解析】四种变态反应的类型及特点：I型（过敏反应型，IgE介导，肥大细胞/嗜碱性粒细胞脱颗粒释放介质）；Ⅱ型（细胞毒型，IgG/IgM介导，激活补体或吞噬杀伤靶细胞）；Ⅲ型（免疫复合物型，中等大小复合物沉积引起炎症）；Ⅳ型（迟发型，T细胞介导，无抗体补体参与，至少12h后发生）。前三种为速发型，第四种为迟发型。 2. 简述影响血清学试验的五个主要因素。 【答案】影响血清学试验的因素有五个：（1）电解质，抗原与抗体结合后须有电解质参与才能形成大块凝集或沉淀，常用0.85%～0.9%（人、畜）或8%～10%（禽）的氯化钠或各种缓冲液作为稀释液；（2）温度，温度越高分子运动越快，增加碰撞机会，加速反应，凝集和沉淀反应通常在37℃感作；（3）酸碱度，血清学试验要求在一定pH下进行，常用pH为6～8，过高或过低可使复合物重新解离；（4）振荡，适当机械振荡能增加碰撞加速反应，但强烈振荡可使复合物解离；（5）杂质和异物，试验介质中如有与反应无关的杂质会抑制反应或引起非特异性反应，故每批试验都应设阳性对照和阴性对照。 【解析】影响血清学试验的五个因素：电解质（参与形成可见反应，常用0.85%～0.9%氯化钠）、温度（37℃加速反应）、酸碱度（pH6～8，过高过低使复合物解离）、振荡（适度加速，过强解离）、杂质和异物（抑制反应或引起非特异反应，需设阴阳对照）。 3. 比较直接凝集试验玻片法和试管法的操作特点和应用场景。 【答案】玻片法为定性试验，在玻璃板或瓷片上进行。将含有已知抗体的诊断血清与待检悬液各滴一滴在玻板上混合，数分钟后如出现颗粒状或絮状凝集即为阳性反应。此法简便快速，适用于新分离菌的鉴定或定型，如沙门菌和链球菌的鉴定、血型鉴定，也可用已知诊断抗原检测待检血清中抗体，如布鲁菌的虎红平板凝集试验和鸡白痢全血平板凝集试验。试管法为定量试验，在试管中进行，将待检血清用生理盐水作倍比稀释后加入等量一定浓度的抗原，放入37℃水浴或温箱中数小时后观察，以出现50%凝集（++）以上的血清最高稀释倍数为该血清的凝集价。生产中常用于布鲁菌病的诊断与检疫。 【解析】玻片法：定性试验，在玻板或瓷片上进行，操作简便快速，适用于新分离菌鉴定或定型（沙门菌、链球菌）、血型鉴定及虎红平板凝集、鸡白痢全血平板凝集等。试管法：定量试验，血清倍比稀释后加等量抗原，37℃感作观察，以50%凝集（++）以上最高稀释倍数为凝集价，用于布鲁菌病检疫等精确诊断。 4. 简述免疫标记技术的主要类型及荧光抗体标记技术的基本原理。 【答案】免疫标记技术是利用抗原抗体反应的特异性和标记分子极易检测的高度敏感性相结合形成的试验技术。主要类型有：（1）荧光抗体标记技术，用荧光色素标记在抗体或抗原上，与相应抗原或抗体特异性结合后用荧光显微镜观察标记的荧光，以分析示踪相应的抗原或抗体；（2）酶标抗体技术，最为简便，应用较广；（3）同位素标记抗体技术。三者的敏感性和特异性大大超过常规血清学方法。荧光抗体标记技术中，荧光素在超低浓度时仍可被短波光源激发，在荧光显微镜下观察到荧光，它将抗原抗体反应的特异性、荧光检测的高敏性和显微镜技术的精确性三者结合。常用的荧光色素有异硫氰酸荧光黄（FITC）、四乙基罗丹明等，其中FITC应用最广。 【解析】免疫标记技术三类型：荧光抗体标记技术（FITC标记抗体，荧光显微镜观察）、酶标抗体技术（最简便应用广）、同位素标记技术。特点：敏感性和特异性远超常规血清学方法，广泛用于传染病诊断和病原微生物鉴定。荧光抗体法将抗原抗体反应特异性、荧光检测高敏性、显微镜精确性三结合。 5. 简述琼脂凝胶扩散试验双向双扩散的原理及三种沉淀带形态的判定意义。 【答案】琼脂凝胶扩散试验双向双扩散是以1%琼脂浇成厚2～3mm的凝胶板，在其上按设计图形打圆孔或长方形槽，封底后在相邻孔（槽）内滴加抗原和抗体，饱和湿度下扩散24～96h，观察沉淀带。抗原抗体在琼脂凝胶中相向扩散，在两孔间比例最适当的位置上形成沉淀带。沉淀带形成后像一道特异性屏障，继续扩散而来的相同抗原或抗体只能使沉淀带加浓加厚，而不能再向外扩散。三种沉淀带形态的判定意义为：（1）两相邻孔为同一抗原时，两条沉淀带完全融合，表明抗原完全相同；（2）二者在分子结构上有部分相同抗原决定簇，则两条沉淀带不完全融合并出现一个叉角；（3）两种完全不同的抗原，则形成两条交叉的沉淀带。此法广泛用于细菌、病毒的鉴定和传染病诊断。 【解析】双向双扩散原理：抗原抗体在1%琼脂凝胶中相向扩散，在比例最适当位置形成沉淀带，此带形成后像特异性屏障。三种沉淀带形态与判定：同一抗原→两条沉淀带完全融合；部分相同抗原→不完全融合出现叉角；完全不同抗原→两条交叉的沉淀带。不同分子的抗原抗体系统可各自形成两条或更多的沉淀带。广泛用于传染病诊断（马传染性贫血、口蹄疫、禽流感等）。 三、综合分析题（本题共1道小题，每题10分，共10分） 1. 某规模化奶牛场需对全场200头牛进行年度结核病和布鲁菌病检疫。请设计一套完整的检疫方案：（1）说明牛结核病检疫的具体操作步骤和结果判定方法；（2）说明布鲁菌病的血清学检测方法及操作要点；（3）分析两种检疫方法所基于的免疫学原理有何不同，并说明为什么结核病不采用血清学方法而布鲁菌病可采用血清学方法进行检疫。 【答案】（1）牛结核病检疫采用牛型提纯结核菌素（PPD）皮内变态反应试验。操作步骤：将牛编号后在颈侧中部上1/3处剪毛（直径约10cm），用游标卡尺测量术部中央皮皱厚度并记录；75%酒精消毒后，皮内注射0.1mL结核菌素（不低于2000IU），注射后局部应出现皮丘；注射后第72小时观察，检查局部有无热、痛、肿胀等炎性反应，用游标卡尺测量皮皱厚度。对阴性反应和疑似反应的牛，于第96h和第120h再分别判定一次。根据局部炎性反应程度和皮厚差判定阳性、疑似或阴性。 （2）布鲁菌病血清学检测常用虎红平板凝集试验（初筛）和试管凝集试验（确诊）。虎红平板凝集试验操作：在玻板上滴加被检血清和虎红平板凝集抗原各一滴混合，数分钟内如出现凝集即为阳性。试管凝集试验将血清倍比稀释后加等量抗原，37℃感作后观察凝集程度，以50%凝集（++）以上的最高稀释倍数为凝集价。 （3）原理不同：牛结核病检疫基于传染性变态反应（Ⅳ型），结核杆菌为细胞内寄生菌，感染后主要引起T细胞介导的细胞免疫和迟发型变态反应，血清中抗体水平低且出现晚，血清学方法敏感性不足。布鲁菌病检疫基于血清学试验（凝集反应），布鲁菌感染后机体产生大量特异性抗体，血清中抗体水平高且稳定，适合用血清学方法检测。 【解析】两种检疫方法的免疫学基础不同：结核病采用传染性变态反应（Ⅳ型/T细胞介导），因为结核杆菌是细胞内寄生菌，感染后主要激发细胞免疫而非体液免疫，血清抗体水平低；布鲁菌病采用血清学凝集试验（抗原抗体反应），因为布鲁菌感染后机体产生大量特异性抗体，血清学检测敏感且可靠。检疫方案需根据病原体在宿主体内的免疫应答特点选择合适方法。 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 学科网（北京）股份有限公司 $