精品解析：湖南省株洲市第二中学2025—2026学年高二上学期第一次月考生物试题

株洲市二中2025年上学期高二年级第一次月考试试卷 生物试题 时量：75min分值：100分 一、单选题：本大题共12小题，每小题2分，共24分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 小古文《腌菜》中有“寒霜屡下，园菜渐肥，取而曝之，俟（等待）略干，置缸中，腌以盐。旬余，便可取食。若藏之于瓮，泥封其口，虽留至明年，犹可食也。”下列有关说法正确的是（　　） A. 古人多选择秋冬季节腌菜与乳酸菌的最适温度低有关 B. 为成功制得腌菜，需要对“园菜”、“瓮”等进行沸水泡烫以去除杂菌 C. 腌菜时“泥封其口”是防止灰尘和杂菌进入瓮内影响腌菜的品质 D. “旬余，便可取食”与发酵过程中乳酸含量和亚硝酸盐含量的变化有关 【答案】D 【解析】 【分析】1、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。 2、乳酸菌是原核生物，代谢类型为异养厌氧型。 【详解】A、古人多选择在秋冬季节腌菜是因为春夏季节时温度高，杂菌繁殖速度快，容易导致菜腐烂变质，A 错误； B、“园菜”不能用沸水泡烫，因为传统发酵过程中制作腌菜所需乳酸菌主要来自蔬菜表面，B错误； C、腌菜时“泥封其口”的目的是创造无氧环境，因为无氧且酸度较高的条件可减少杂菌污染，C错误； D、“旬余，便可取食”，是因为发酵过程中亚硝酸盐含量先升高后逐渐降低并于10日左右达到最低点，而乳酸含量随之发酵的进行不断的升高而后趋向稳定，故“旬余，便可取食”与发酵过程中乳酸含量和亚硝酸盐含量的变化有关，D正确。 故选D。 2. 荔枝酒是岭南佳酿，在唐代也称“荔枝烧”，唐代大诗人白居易有诗云：“荔枝新熟，鸡冠色，烧酒初开琥珀春。”，荔枝酒以新鲜荔枝为原料酿制，下列有关荔枝酒的说法中正确的是（ ） A. 发酵时加入适量的葡萄糖能提高荔枝酒的酒精浓度 B. 密封不严导致的荔枝酒变酸主要和乳酸菌的繁殖有关 C. 加样过程中，为防止杂菌污染，需将荔枝去梗后再冲洗干净 D. 酒精发酵过程中维持适宜的温度，目的是促进酵母菌的繁殖 【答案】A 【解析】 【详解】A、酵母菌无氧呼吸分解葡萄糖产生酒精，添加适量葡萄糖可增加反应底物，最终提高酒精的产量和浓度，A正确； B、密封不严时氧气进入发酵体系，荔枝酒变酸是醋酸菌有氧发酵产生醋酸导致的；乳酸菌为厌氧微生物，有氧条件下代谢受抑制，不会导致酒变酸，B错误； C、为避免去梗时荔枝果皮破损，造成杂菌污染、汁液流失，应先冲洗荔枝，再去除果梗，C错误， D、酒精发酵阶段为无氧环境，酵母菌繁殖受抑制，维持适宜温度的目的是保证酵母菌无氧呼吸相关酶的活性，提高酒精产率，而非促进酵母菌繁殖，D错误。 3. 聚乙烯醇（PVA）是难降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶降解PVA。PVA可与碘形成蓝绿色复合物，复合物被降解后蓝绿色消失，形成透明圈。下图为PVA分解菌的筛选过程，其中SG培养基为一种分离培养基，①~⑤表示过程，I-III表示菌落。下列叙述正确的是（ ） A. 过程①接种时，用灭菌后的涂布器蘸取少量菌液并均匀地涂布在培养基表面 B. 过程③应选菌落II中的菌种进行接种，该菌种分解PVA的能力最强 C. 过程①和③所用接种方法可用于菌液中的PVA分解菌的计数 D. 丙培养基以PVA作为唯一碳源，对筛选出的PVA分解菌进行扩大培养 【答案】B 【解析】 【详解】A、稀释涂布平板法的正确操作是先将少量菌液滴加在培养基表面，再用灭菌冷却后的涂布器将菌液涂布均匀，并非用涂布器蘸取菌液，A错误； B、透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明菌种分解PVA的能力越强，菌落Ⅱ的该比值大于Ⅰ，菌落Ⅲ无透明圈无分解能力，因此应选菌落Ⅱ的菌种接种，B正确； C、过程①为稀释涂布平板法，可用于微生物计数；过程③为挑取单菌落进行纯化接种，用的是平板划线法，该方法无法用于计数，C错误； D、丙培养基是对筛选得到的PVA分解菌进行扩大培养的液体培养基，此时已经获得目的菌，扩大培养需要提供充足的营养，不需要以PVA为唯一碳源，D错误。 4. 青蒿素是传统的中药材，是治疗疟疾的重要药物。研究人员利用青蒿细胞悬浮培养技术进行工厂化生产青蒿素，实验流程和培养装置如下图所示。下列有关叙述错误的是（ ） A. 实验流程中可用果胶酶和纤维素酶处理愈伤组织，有利于制备悬浮细胞 B. 此青蒿素的工厂化生产利用到了植物细胞的全能性及细胞增殖的原理 C. 此细胞培养装置中搅拌叶轮可使培养液与细胞充分接触 D. 青蒿素是一种小分子有机物，属于次生代谢物 【答案】B 【解析】 【详解】A、植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，使用果胶酶和纤维素酶处理愈伤组织可分解细胞壁，使细胞分散，便于制备悬浮细胞，A正确； B、植物细胞全能性的定义是已分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能，该生产过程仅获得大量悬浮细胞并提取代谢产物青蒿素，没有培育出完整青蒿植株，因此未利用植物细胞的全能性，仅利用了细胞增殖的原理，B错误； C、搅拌叶轮转动可使培养液与细胞充分接触，保障细胞的营养供应，同时可增加培养液溶氧量，C正确； D、青蒿素是青蒿细胞产生的、对其生长发育非必需的小分子有机物，属于植物次生代谢物，D正确。 5. 蝴蝶兰属是兰科植物中极具观赏价值的一个类群，其野生种群因被过度采集和适宜生境的丧失而濒临灭绝。外植体直接诱导生芽能直接快速扩繁蝴蝶兰，花梗、茎尖都可以成为最常用的外植体。下列叙述正确的是（ ） A. 当培养基中生长素的含量与细胞分裂素的比值较高时，有利于芽的分化 B. 诱导愈伤组织期间以及后续再分化培养过程中，一般需要光照使植物生长发育 C. 与一般的组织培养过程相比，外植体直接诱导生芽省去了脱分化形成愈伤组织的过程 D. 在蝴蝶兰组织培养操作中，使用的培养基、器械需要分别进行灭菌、消毒处理 【答案】C 【解析】 【详解】A、植物组织培养中，培养基中生长素含量与细胞分裂素的比值较低时才有利于芽的分化，比值较高时有利于根的分化，A错误； B、诱导愈伤组织的脱分化阶段一般需要避光处理，光照会抑制愈伤组织的形成，再分化阶段需要光照，B错误； C、常规植物组织培养需要经过外植体脱分化形成愈伤组织、再分化出芽和根的过程，外植体直接诱导生芽无需经过脱分化形成愈伤组织的步骤，C正确； D、组织培养操作中，培养基和器械都需要进行灭菌处理，消毒用于对外植体的处理，D错误。 6. 科研人员研究了马铃薯茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响，结果如下图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 利用马铃薯茎尖外植体培育脱毒苗的过程涉及脱分化和再分化两个阶段 B. 可利用射线或化学物质等处理马铃薯茎尖来获得突变体，从而获得脱毒苗 C. 脱毒苗具有很强的抗病毒能力，因此可对脱毒苗进行病毒检测以确保其质量 D. 据实验可知，0.12 mm的茎尖脱毒率较高，适宜取此大小的茎尖来培养脱毒苗 【答案】A 【解析】 【详解】A、利用茎尖培育脱毒苗采用植物组织培养技术，该过程需经历外植体脱分化形成愈伤组织、愈伤组织再分化发育为完整植株两个阶段，A正确； B、脱毒苗的制备原理是茎尖部位病毒极少甚至无病毒，直接对茎尖进行组织培养即可获得，射线、化学物质处理是诱变育种的手段，目的是获得突变体以筛选新品种，和制备脱毒苗无关，B错误； C、脱毒苗仅为本身几乎不携带病毒，不具备抗病毒能力，仍可能被病毒侵染，因此需要进行病毒检测确保其质量，C错误； D、0.12mm的茎尖虽然脱毒率较高，但成苗率仅约20%，培养成本过高，0.27mm的茎尖同时兼顾较高的成苗率和脱毒率，更适宜用于培养脱毒苗，D错误。 7. 培育肉是利用动物体内分离的肌肉母细胞，采用动物细胞培养技术培养出类似于动物肌肉的肉丝，同时添加了人体所需的元素如铁、钙等，使之营养更加丰富。下列相关叙述错误的是（ ） A. 用胰蛋白酶处理肌肉组织，可以获得分裂能力强的肌肉母细胞 B. 生物反应器内应控制温度适宜，并充入一定量的CO₂，保证培养液pH相对稳定 C. 培养液中的支架提供了更大的细胞附着面积，有利于细胞贴壁生长 D. 为保证细胞生长的无毒环境，培养液需要定期更换 【答案】A 【解析】 【详解】A、胰蛋白酶处理肌肉组织的作用是分解细胞间的蛋白质，将组织分散为单个细胞，得到的是包含成熟肌肉细胞、肌肉母细胞等的混合细胞，不能直接获得分裂能力强的肌肉母细胞，A错误； B、动物细胞培养需要适宜温度保证细胞代谢相关酶的活性，充入一定量的二氧化碳可以维持培养液pH相对稳定，B正确； C、动物细胞培养时多数细胞具有贴壁生长的特性，培养液中的支架可增大细胞附着面积，有利于细胞贴壁生长，C正确； D、细胞代谢过程中会产生有毒的代谢废物，定期更换培养液可以清除代谢废物、补充营养物质，保证细胞生长的无毒环境，D正确。 8. 正常情况下，机体中细胞分化往往不可逆转。然而，在特定的实验条件下，已分化的细胞被逆转后可恢复全能性状态，或者形成胚胎干细胞系，或者进一步发育成一个新个体。科学家已尝试采用多种方法来制备诱导多能干细胞（iPS细胞）。下列叙述错误的是（ ） A. iPS细胞具有细胞周期，它分化形成的神经细胞一般不具有细胞周期 B. 诱导iPS细胞分化成的多种细胞中DNA相同，RNA和蛋白质不完全相同 C. iPS细胞最初是在体内由成纤维细胞突变而来的 D. 由iPS细胞用于临床治疗中可能存在导致肿瘤发生的风险 【答案】C 【解析】 【详解】A、iPS细胞是可连续分裂的多能干细胞，具有细胞周期；神经细胞是高度分化的细胞，一般不再进行分裂，不具有细胞周期，A正确； B、细胞分化的实质是基因的选择性表达，iPS细胞分化形成的多种细胞的核DNA完全相同，但由于基因选择性表达，细胞中的RNA和蛋白质不完全相同，B正确； C、iPS细胞是通过人工体外诱导已分化的细胞（如成纤维细胞）重编程获得的，并非体内成纤维细胞突变而来，C错误； D、iPS细胞分裂能力较强，若临床使用时诱导分化不完全，残留的未分化iPS细胞可能在体内异常增殖，存在导致肿瘤发生的风险，D正确。 9. 如图表示双抗体夹心法检测抗原的过程，该方法是医学上常用的定量检测抗原的方法，利用细胞工程技术制备的单克隆抗体能增强该过程的有效性。下列叙述错误的是（ ） A. 图示两种抗体与样品中待测抗原的结合位点不同 B. 该检测方法中酶标抗体的作用是当抗体与待测抗原结合后催化特定底物反应 C. 用双抗体夹心法检测抗原需要制备两种能与抗原结合的单克隆抗体 D. 双抗体夹心法与只使用单克隆抗体相比，能增加可识别抗原的种类 【答案】D 【解析】 【详解】A、抗原表面存在多个不同的抗原结合位点，固相抗体和酶标抗体分别与抗原的不同位点结合，不会出现竞争结合的情况，A正确； B、酶标抗体的本质是携带酶的抗体，既可以和待测抗原特异性结合，其携带的酶还可以催化后续加入的检测底物发生反应，通过产物的量可定量判断抗原含量，B正确； C、双抗体夹心法需要制备两种针对同一抗原不同结合位点的单克隆抗体，分别作为固相抗体和酶标抗体使用，C正确； D、双抗体夹心法的两种抗体均针对同一种待测抗原，仅识别该抗原的不同位点，并没有增加可识别抗原的种类，D错误。 10. 2017年中国科学家利用“聪明的化学方法和操作技巧（10 s内去核，15 s内核移植）”成功培育了体细胞克隆猴，流程如下，下列叙述正确的是（ ） A. 卵母细胞应在体外培养至成熟后再进行去核操作 B. 利用显微操作去核，保证克隆猴的遗传物质全部来自体细胞 C. 重构胚是指人工重新构建的胚胎，之后将自主完成细胞分裂和发育 D. “聪明的化学方法”主要指图中①②，通过调节组蛋白修饰而促进基因表达 【答案】D 【解析】 【详解】A、动物体细胞核移植时，受体卵母细胞需培养至减数第二次分裂中期再进行去核操作，并非完全发育至减数分裂完成的成熟状态，该时期卵母细胞的细胞质含有诱导供体核全能性表达的物质，且第一极体和细胞核位置接近，便于去核操作，A错误； B、利用显微操作去核的机理是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性，但并不能保证克隆猴的遗传物质全部来自体细胞，因为卵母细胞的细胞质中也含有少量的DNA分子，B错误； C、重构胚需要经过图中①②的人工激活处理，且需移植到代孕母猴的子宫中才能继续完成细胞分裂和发育，无法自主完成全部发育过程，C错误； D、重构胚中有部分基因进行选择性表达，本质可能是表观遗传修饰，所以需要用组蛋白去甲基化酶的mRNA来降低组蛋白甲基化水平，组蛋白脱乙酰化抑制剂来提高组蛋白乙酰化水平，从而促进基因表达，D正确。 故选D。 11. 胚胎工程技术的应用为优良牲畜的大量繁殖提供了有效的解决办法，如奶牛活体采卵—体外胚胎生产（OPU-IVP）技术。已知雄性奶牛Y染色体上有一段雄性特异的高度重复序列，依据该重复序列设计引物，建立了用于奶牛胚胎性别鉴定的PCR体系（SRY-PCR）。下列叙述错误的是（ ） A. 体外受精后，在透明带和卵细胞膜间观察到两个极体说明受精成功 B. 此奶牛活体采卵—体外胚胎生产（OPU-IVP）技术生产良种奶牛属于有性生殖 C. 取滋养层细胞进行SRY-PCR，应选择结果为阴性的胚胎进行移植 D. 为防止受体母牛发生免疫排斥反应，胚胎移植前需要进行免疫检查 【答案】D 【解析】 【详解】A、受精过程中，卵子在精子刺激下完成减数第二次分裂并排出第二极体，因此在透明带和卵细胞膜间观察到两个极体是受精成功的标志，A正确； B、该技术包含体外受精（两性生殖细胞结合形成受精卵）的环节，因此属于有性生殖，B正确； C、SRY是Y染色体上雄性特有的序列，PCR结果为阴性说明胚胎无Y染色体，为能产奶的雌性奶牛，适合移植，C正确； D、胚胎移植的生理学基础之一是受体母牛对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，因此胚胎移植前无需进行免疫检查，D错误。 12. 下图表示“DNA的粗提取和鉴定”的相关流程。下列叙述正确的是（　　） A. 步骤1和步骤2的目的是获取研磨液中的沉淀物 B. 步骤3中的DNA溶于酒精，而某些蛋白质不溶于酒精 C. 步骤4中DNA在2mol·L-1的NaCl溶液中溶解度较高 D. 利用二苯胺试剂鉴定DNA时，将试管置于50℃的温水中 【答案】C 【解析】 【分析】DNA的粗提取和鉴定的原理：DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理，可以初步分离DNA和蛋白质。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2 mol⋅L−1 的NaCl溶液中。在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。 【详解】A、步骤1和步骤2的目的是获取研磨液中的上清液，A错误； B、步骤3中的DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精，B错误； C、DNA在不同浓度的NaCl中溶解度不同，DNA在2 mol⋅L−1 的NaCl溶液中溶解度较高，C正确； D、利用二苯胺试剂鉴定DNA时，将试管置于沸水中，D错误。 故选C。 二、不定项选择题：本大题共4小题，每小题4分，共16分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求，全部选对得4分，选对但不全的得2分，有选错的得0分。 13. 土壤中95%以上的磷为植物很难利用的无效磷。解磷菌能够将磷矿粉等无效磷转化为植物易利用的速效磷。为研究解磷菌的解磷机理，科研人员将磷矿粉制成培养液，培养从土壤中分离出的2种解磷菌（M-3-01、B3-5-6），测定培养液的上清液pH及其中的速效磷含量；结果如图，下列叙述错误的是（ ） A. 由图可知，168 h以内M-3-01解磷能力较强 B. 2种解磷菌是用以磷矿粉作为唯一碳源的培养基分离出来的 C. B3-5-6转化无效磷的能力与培养溶液pH显著相关 D. 据图推测B3-5-6可能借助分泌酸性物质溶解磷矿粉 【答案】B 【解析】 【详解】A、168h以内，M-3-01组培养液上清液的速效磷含量远高于B3-5-6组，说明此时间段内M-3-01解磷能力较强，A正确； B、磷矿粉的主要成分是磷酸盐，可为微生物提供磷源，不含碳元素不能作为碳源，分离解磷菌应使用以磷矿粉为唯一磷源的选择培养基，B错误； C、B3-5-6组培养液pH逐渐降低的过程中，上清液速效磷含量逐渐升高，pH稳定后速效磷含量也逐渐稳定，说明其转化无效磷的能力与培养液pH显著相关，C正确； D、B3-5-6培养过程中培养液pH持续下降，同时速效磷含量上升，磷矿粉（磷酸钙类）可在酸性条件下溶解，因此可推测B3-5-6可能借助分泌酸性物质溶解磷矿粉，D正确。 14. 植物甲（2n=16）抗旱、抗病性强，植物乙（2n=12）分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，如下图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 获得的杂种植株丙因含有不同来源的染色体，减数分裂时将发生联会紊乱 B. 过程①可抽真空处理使酶溶液渗入细胞间隙，缩短保温时间 C. 过程④可采用灭活的病毒诱导融合后需经过筛选再进行培养 D. 过程⑤获得成功的标志是杂种细胞再生出新的细胞壁 【答案】AC 【解析】 【详解】A、植物甲是二倍体（含2个染色体组），植物乙是二倍体（含2个染色体组），体细胞杂交获得的杂种植株丙含有甲的2个染色体组、乙的2个染色体组，减数分裂时甲来源的同源染色体、乙来源的同源染色体可分别正常联会，不会发生联会紊乱，A错误； B、过程①为酶解法去除细胞壁，抽真空处理可排出细胞间隙的空气，使酶溶液充分渗入细胞间隙、与细胞壁接触，加快酶解速率，缩短保温时间，B正确； C、过程④为植物原生质体融合，诱导方法为物理法、化学法，灭活的病毒是诱导动物细胞融合的特有方法，不能用于植物原生质体融合，C错误； D、融合的原生质体再生出新的细胞壁是杂种细胞形成的标志，即过程⑤获得成功的标志，D正确。 15. PSMA是某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白，CD28是T细胞表面受体。将两株不同杂交瘤细胞融合形成的双杂交瘤细胞，既能够悬浮在培养基中生长繁殖，又可以产生双特异性抗体PSMA×CD28。PSMA×CD28既能选择性地靶向结合某种癌细胞表面的PSMA蛋白，又能特异性地结合T细胞表面的CD28蛋白，从而激活T细胞，通过活化的T细胞来识别和杀灭目标癌细胞。图1所示为双特异性抗体PSMA×CD28的制备流程，图2所示为双特异性抗体PSMA×CD28的结构及作用机理。下列分析正确的是（ ） A. ①过程给小鼠注射的X/Y为PSMA蛋白/CD28蛋白 B. 因骨髓瘤细胞分裂增殖时通常会发生接触抑制现象，因此需分瓶进行传代培养 C. 对⑤过程得到的双杂交瘤细胞进行传代培养前，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 D. 培养杂交瘤细胞XY的培养基通常加入了血清等天然成分 【答案】AD 【解析】 【详解】A、①过程为注射抗原以获取能产生特异性抗体的B淋巴细胞，要获得可产生抗PSMA和抗CD28抗体的B细胞，注射的X/Y应为PSMA蛋白/CD28蛋白，A正确； B、骨髓瘤细胞是癌变细胞，增殖过程中不存在接触抑制现象，B错误； C、题干明确说明双杂交瘤细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，仅贴壁生长的细胞传代前需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，悬浮细胞无需该操作，C错误； D、动物细胞体外培养，血清属于天然成分，含有细胞生长必需的未知营养因子；杂交瘤细胞培养基通常添加血清，D正确。 16. 下图是蛋白质工程中改造目的基因的一种技术路线。S1核酸酶可以去除双链DNA突出的单链区；外切核酸酶Ⅲ只能从DNA双链的3'末端逐个水解核苷酸，产生不同长度的5'突出末端。下列叙述正确的是（　　） A. 步骤一需使用两种限制酶切割目的基因片段M B. 步骤二、三分别使用了S1核酸酶、外切核酸酶Ⅲ C. 步骤四宜选用T4DNA连接酶处理DNA片段 D. 质粒载体2中目的基因片段N的长度可有多种 【答案】ACD 【解析】 【分析】图示为构建基因表达载体的过程，需要限制酶和DNA连接酶，是实施基因工程的核心步骤；蛋白质工程实质是对基因进行改造，获得自然界中不存在的蛋白质。 【详解】A、步骤一需使用两种限制酶切割目的基因片段，可防止含目的基因的外源DNA片段自身环化，A正确； B、外切核酸酶Ⅲ只能从DNA双链的3'末端逐个水解单核苷酸，可以产生不同长度的5'突出末端，由图可知，步骤二应使用外切核酸酶Ⅲ，步骤三应使用S1核酸酶，B错误； C、T4DNA连接酶可连接平末端，故步骤四宜选用T4 DNA连接酶处理DNA片段，C正确； D、质粒载体2中目的基因片段N的长度有多种，因为外切核酸酶Ⅲ处理后可以获得不同长度的5'突出末端，D正确。 故选ACD。 三、非选择题：本大题共5小题，共60分（除特别标注外，每空2分） 17. 酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题： （1）这样通过发酵获得的可作为饲料蛋白来源的菌体称为__________。 （2）实验室中配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，及时对培养基进行分装，放入__________（填仪器）中进行灭菌。 （3）步骤③中，培养基冷凝后要将培养皿倒置，原因是______________________。 （4）步骤⑤中，应保证__________（填“充足的氧气供应”或“无氧环境”）。为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，经等体积台盼蓝染液染色。用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的______色细胞总数，理论上应不少于________个才能达到每毫升5×10⁹个活细胞的预期密度。 （5）可以怎样逐步筛选出甲醇高耐受菌株？_______________________。 【答案】（1）单细胞蛋白 （2）高压蒸汽灭菌锅 （3）防止冷凝水落入培养基中造成污染 （4） ①. 充足的氧气供应 ②. 无 ③. 50 （5）可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株 【解析】 【小问1详解】 单细胞蛋白指通过发酵获得的微生物菌体，可直接用作饲料蛋白，酵母菌体就属于单细胞蛋白。 【小问2详解】 培养基常采用高压蒸汽灭菌法灭菌，需要用到的仪器是高压蒸汽灭菌锅。 【小问3详解】 倒平板后倒置培养皿的主要原因是防止冷凝水回落滴到培养基，造成污染，此外还能减缓培养基水分蒸发。 【小问4详解】 酵母菌通过有氧呼吸大量繁殖，因此为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和氧气；活细胞膜具有选择透过性，经等体积台盼蓝染液染色，无色细胞是活细胞才能计数；为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数（假设为n），达到每毫升5×109个活细胞的预期密度，而台盼蓝与菌液等体积加入（相当于稀释2倍），则n÷80×400÷（0.1×10-3）×1000×2=5×109（80为5个中方格含有小方格的总数），n=50。 【小问5详解】 配制一系列甲醇浓度逐渐升高的选择培养基，将分离得到的酵母菌株依次接种在甲醇浓度逐步升高的培养基上培养，能够在高浓度甲醇培养基上正常生长繁殖的菌株即为甲醇高耐受菌株。 18. 中医治疗疾病多用复方，三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”。研究者欲将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，实现有效成分的快速工厂化生产，具体操作如图1。 （1）取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用__________溶液和5%的次氯酸钠溶液对其进行消毒，每次处理后用无菌水冲洗叶片，去除残留于叶片上的药剂，处理后的叶片撕去表皮，切成1 mm薄片备用。 （2）过程②可利用化学诱导剂______诱导融合，主要利用到的细胞学原理是___________________。 （3）通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。 组别 A组 B组 C组（空白对照组） 实验处理 三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物 三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物 每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量 ①将表格中C组的实验处理补充完整__________。 ②若实验结果为__________，则支持利用细胞融合技术将复方的配伍提前实现有效成分的工厂化生产。 ③某同学认为利用细胞产物的工厂化生产复方的配伍主要是通过为细胞生长提供优越的条件，从而提高单个细胞代谢产物的含量，你同意该同学的观点吗？为什么？_______________________。 【答案】（1）70%乙醇 （2） ①. PEG##聚乙二醇 ②. 细胞膜的流动性 （3） ①. 等量的蒸馏水 ②. A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组 ③. 不同意，利用细胞产物的工厂化生产代谢产物主要是通过增加细胞数量从而增加代谢产物的产量，而非提高单个细胞代谢产物的含量。 【解析】 【小问1详解】 为防止微生物污染，应取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用70%乙醇和5%的次氯酸钠对其消毒；为防止杂菌污染，每次处理后用无菌水冲洗叶片2—3次，去除残留于叶片上的药剂。 【小问2详解】 过程②诱导植物细胞融合常利用的化学诱导剂是PEG。原生质体融合的细胞学原理是细胞膜具有一定的流动性，可以变形、融合。 【小问3详解】 ①本实验目的是判断融合体对动物免疫力的影响，因为C组为对照组，因此根据对A、B两组的处理，C组应用等量的蒸馏水每天一次等量灌胃，连续一周。②若实验结果为A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。③植物细胞工厂化生产次生代谢物，主要是利用液体悬浮培养增殖出大量细胞，而总产物的量= 单个细胞产量 × 细胞总数。所以利用细胞产物的工厂化生产代谢产物主要是通过增加细胞数量从而增加代谢产物的产量，而非提高单个细胞代谢产物的含量。 19. 单克隆抗体免疫疗法能够抑制恶性肿瘤的发展。奥加伊妥珠单抗是一种新型的抗体-药物偶联物，由识别肿瘤细胞表面CD22蛋白的单克隆抗体和具有细胞毒性的卡奇霉素结合组成；卡妥索单抗是一种双特异性抗体，其制备原理与作用原理如下图所示： （1）单克隆抗体制备涉及的动物细胞工程技术手段有__________。 （2）得到特定的杂交瘤细胞需要经过两次筛选，第一次是将细胞群稀释后在选择培养基中培养，只有__________能够存活并增殖，第二次是用__________法经多次筛选得到特定的杂交瘤细胞。 （3）科研人员推测奥加伊妥珠单抗和卡妥索单抗联合给药对恶性肿瘤的抑制效果更好。为验证这一推测，某兴趣小组设计如下实验方案：将培养好的癌细胞悬液对无胸腺裸鼠（简称裸鼠）进行皮下接种，接种后2周可观察各裸鼠背部长出肿块，证明实验接种成功，将上述处理的裸鼠随机分为2组：生理盐水组和奥加伊妥珠单抗+卡妥索单抗组（联合给药组）。各组均采用腹腔注射给药，给药后每两日测量并记录1次肿瘤体积。上述实验方案的不足之处有：①__________②__________。 【答案】（1）动物细胞融合技术、动物细胞培养技术 （2） ①. 杂交瘤细胞 ②. 抗原-抗体杂交 （3） ①. 应补充单独添加奥加伊妥珠单抗和单独添加卡妥索单抗的两组给药实验组 ②. 在分组给药前应先测量每只小鼠的肿瘤体积并记录；卡妥索单抗通过识别T细胞表面的CD3分子增强特异性，题干中给的实验小鼠是不含T细胞的裸鼠，无法验证卡妥索单抗的作用 【解析】 【小问1详解】 单克隆抗体制备的一般过程为先将 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行动物细胞融合获得杂交瘤细胞，再通过动物细胞培养扩增杂交瘤细胞，获得大量单克隆抗体。所以动物细胞融合技术、动物细胞培养技术是单克隆抗体制备涉及关键的动物细胞工程技术手段。 【小问2详解】 得到特定的杂交瘤细胞需要经过两次筛选，第一次是用选择培养基淘汰未融合细胞、同种融合细胞，只保留异种融合的杂交瘤细胞；第二次用抗原‑抗体杂交检测杂交瘤细胞是否是能产生目标抗体的杂交瘤细胞。 【小问3详解】 分析实验，题中所设计的实验应补充单独添加奥加伊妥珠单抗和单独添加卡妥索单抗的两组给药实验组，无法证明 “联合给药效果更好”；在分组给药前应先测量每只小鼠的肿瘤体积并记录，否则无法准确比较肿瘤的生长变化；卡妥索单抗通过识别T细胞表面的CD3分子增强特异性，题干中给的实验小鼠是不含T细胞的裸鼠，无法验证卡妥索单抗的作用。 20. 中国科学院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，实验流程如图所示。请回答下列问题： （1）采集卵母细胞时，可用__________对雌性小鼠进行超数排卵处理得到大量卵母细胞。 （2）为了获得更多甲的后代，在得到的重构胚发育到______或囊胚期时，对其进行分割；在分割囊胚阶段的胚胎时，应注意__________，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育。 （3）卵细胞、精子分别转化为phESC、ahESC，它们类似于胚胎干细胞，胚胎干细胞具有发育成完整个体的潜能，原因是_______________________。不考虑致死情况，得到的孤雄小鼠性染色体组成有______种类型。 （4）据图分析，只依赖雄性小鼠不能得到孤雄小鼠，请写出理由：_______________________。 【答案】（1）促性腺激素 （2） ①. 桑葚胚 ②. 将内细胞团均等分割 （3） ①. 胚胎干细胞内含有全套的遗传信息 ②. 3 （4）需要将ahESC和另一个精子一起注入一个去核卵细胞中；重构胚必须移植到雌性小鼠体内才能发育为个体 【解析】 【小问1详解】 用促性腺激素对雌性小鼠进行超数排卵处理可得到大量卵母细胞。 【小问2详解】 为了获得更多甲的后代，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，将其移入盛有操作液的培养皿中，然后在显微镜下用分割针或分割刀分割。在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育。 【小问3详解】 胚胎干细胞具有发育全能性，因为细胞内含有该物种全套遗传物质。不考虑致死情况，孤雌小鼠具有双母亲来源，因此其性染色体组成为XX，而孤雄小鼠的染色体来源于两只雄鼠产生的精子，精子的性染色体为X或Y，所以孤雄小鼠的性染色体组成可能是XX、XY或YY。 【小问4详解】 结合题图可知，只依赖雄性小鼠不能得到孤雄小鼠，这是因为要获得孤雄小鼠需要将ahESC和另一个精子一起注入一个去核卵细胞中，而卵细胞来自雌性小鼠，另外获得的重构胚必须移植到雌性小鼠体内才能发育为个体，可见离开雌性小鼠不能获得孤雄小鼠。 21. 水杨酸广泛存在于植物中，是一种常见的药用成分，具有消炎、抗菌、镇痛等作用。由于从植物中提取水杨酸的成本过高，科学家利用基因工程在大肠杆菌基因组中导入关键基因将原有的代谢途径改造成如图1所示（图中L-Tyr为L-酪氨酸），获得工程菌SA01，但发酵产量一直受限。 （1）基因工程需要用到“分子手术刀”限制酶，它能使DNA链中特定部位的____________断开。 （2）在SA01的基础上敲除基因组中的酶A基因后获得SA02，发酵结果如图2。结合图1分析，相比SA01，SA02在水杨酸产量和细胞生长变化的可能机制____________。 （3）在______（填“SA01”或“SA02”）的基础上，将酶A对应的起始密码子由AUG改为大肠杆菌不常用的GUG后，弱化酶A表达中的______过程，获得图2中的SA03。 （4）在SA03的后续发酵过程中发现，随着发酵的时间推移，葡萄糖仍然有较高浓度，pH、溶解氧等发酵条件仍适宜，但水杨酸的产量增长逐渐停滞。结合图1信息，推测出现该现象的原因可能是__________环节受阻。 【答案】（1）磷酸二酯键 （2）敲除基因组中的酶A基因后，分支酸无法合成L-Tyr（L-酪氨酸），所以分支酸合成的水杨酸更多，但L-酪氨酸是细胞生长所必需的氨基酸，因此生长变慢了 （3） ①. SA01 ②. 翻译 （4）葡萄糖合成分支酸 【解析】 【小问1详解】 限制酶切割 DNA的原理是断开脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。 【小问2详解】 据图1分析，在SA01的基础上敲除基因组中的酶A基因后，则分支酸无法合成L-Tyr（L-酪氨酸），分支酸合成的水杨酸更多，L-酪氨酸是细胞生长所必需的氨基酸，因此SA02在水杨酸产量上增加且细胞生长变慢。 【小问3详解】 据图可知，SA03的水杨酸产量介于SA01和SA02之间，且细胞生长情况也介于SA01和SA02之间，且SA02中的酶A对应的基因敲除了，故在SA01的基础上，将酶A对应的起始密码子由AUG改为大肠杆菌不常用的GUG后，获得图2中的SA03。基因表达包括转录和翻译两个过程，翻译是指在核糖体上以mRNA为模板、以氨基酸为原料合成蛋白质的过程，故将酶A基因对应的起始密码子由AUG改为大肠杆菌不常用的GUG后，弱化了酶A基因表达中的翻译过程。 【小问4详解】 据图1分析，在葡萄糖仍然有较高浓度，pH、溶解氧等发酵条件仍适宜的情况下，在SA03的后续发酵过程中发现，随着发酵的时间推移，水杨酸的产量增长逐渐停滞，推测可能的原因是葡萄糖转化成分支酸的环节受阻，导致分支酸无法进一步合成水杨酸。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 株洲市二中2025年上学期高二年级第一次月考试试卷 生物试题 时量：75min分值：100分 一、单选题：本大题共12小题，每小题2分，共24分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 小古文《腌菜》中有“寒霜屡下，园菜渐肥，取而曝之，俟（等待）略干，置缸中，腌以盐。旬余，便可取食。若藏之于瓮，泥封其口，虽留至明年，犹可食也。”下列有关说法正确的是（　　） A. 古人多选择秋冬季节腌菜与乳酸菌的最适温度低有关 B. 为成功制得腌菜，需要对“园菜”、“瓮”等进行沸水泡烫以去除杂菌 C. 腌菜时“泥封其口”是防止灰尘和杂菌进入瓮内影响腌菜的品质 D. “旬余，便可取食”与发酵过程中乳酸含量和亚硝酸盐含量的变化有关 2. 荔枝酒是岭南佳酿，在唐代也称“荔枝烧”，唐代大诗人白居易有诗云：“荔枝新熟，鸡冠色，烧酒初开琥珀春。”，荔枝酒以新鲜荔枝为原料酿制，下列有关荔枝酒的说法中正确的是（ ） A. 发酵时加入适量的葡萄糖能提高荔枝酒的酒精浓度 B. 密封不严导致的荔枝酒变酸主要和乳酸菌的繁殖有关 C. 加样过程中，为防止杂菌污染，需将荔枝去梗后再冲洗干净 D. 酒精发酵过程中维持适宜的温度，目的是促进酵母菌的繁殖 3. 聚乙烯醇（PVA）是难降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶降解PVA。PVA可与碘形成蓝绿色复合物，复合物被降解后蓝绿色消失，形成透明圈。下图为PVA分解菌的筛选过程，其中SG培养基为一种分离培养基，①~⑤表示过程，I-III表示菌落。下列叙述正确的是（ ） A. 过程①接种时，用灭菌后的涂布器蘸取少量菌液并均匀地涂布在培养基表面 B. 过程③应选菌落II中的菌种进行接种，该菌种分解PVA的能力最强 C. 过程①和③所用接种方法可用于菌液中的PVA分解菌的计数 D. 丙培养基以PVA作为唯一碳源，对筛选出的PVA分解菌进行扩大培养 4. 青蒿素是传统的中药材，是治疗疟疾的重要药物。研究人员利用青蒿细胞悬浮培养技术进行工厂化生产青蒿素，实验流程和培养装置如下图所示。下列有关叙述错误的是（ ） A. 实验流程中可用果胶酶和纤维素酶处理愈伤组织，有利于制备悬浮细胞 B. 此青蒿素的工厂化生产利用到了植物细胞的全能性及细胞增殖的原理 C. 此细胞培养装置中搅拌叶轮可使培养液与细胞充分接触 D. 青蒿素是一种小分子有机物，属于次生代谢物 5. 蝴蝶兰属是兰科植物中极具观赏价值的一个类群，其野生种群因被过度采集和适宜生境的丧失而濒临灭绝。外植体直接诱导生芽能直接快速扩繁蝴蝶兰，花梗、茎尖都可以成为最常用的外植体。下列叙述正确的是（ ） A. 当培养基中生长素的含量与细胞分裂素的比值较高时，有利于芽的分化 B. 诱导愈伤组织期间以及后续再分化培养过程中，一般需要光照使植物生长发育 C. 与一般的组织培养过程相比，外植体直接诱导生芽省去了脱分化形成愈伤组织的过程 D. 在蝴蝶兰组织培养操作中，使用的培养基、器械需要分别进行灭菌、消毒处理 6. 科研人员研究了马铃薯茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响，结果如下图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 利用马铃薯茎尖外植体培育脱毒苗的过程涉及脱分化和再分化两个阶段 B. 可利用射线或化学物质等处理马铃薯茎尖来获得突变体，从而获得脱毒苗 C. 脱毒苗具有很强的抗病毒能力，因此可对脱毒苗进行病毒检测以确保其质量 D. 据实验可知，0.12 mm的茎尖脱毒率较高，适宜取此大小的茎尖来培养脱毒苗 7. 培育肉是利用动物体内分离的肌肉母细胞，采用动物细胞培养技术培养出类似于动物肌肉的肉丝，同时添加了人体所需的元素如铁、钙等，使之营养更加丰富。下列相关叙述错误的是（ ） A. 用胰蛋白酶处理肌肉组织，可以获得分裂能力强的肌肉母细胞 B. 生物反应器内应控制温度适宜，并充入一定量的CO₂，保证培养液pH相对稳定 C. 培养液中的支架提供了更大的细胞附着面积，有利于细胞贴壁生长 D. 为保证细胞生长的无毒环境，培养液需要定期更换 8. 正常情况下，机体中细胞分化往往不可逆转。然而，在特定的实验条件下，已分化的细胞被逆转后可恢复全能性状态，或者形成胚胎干细胞系，或者进一步发育成一个新个体。科学家已尝试采用多种方法来制备诱导多能干细胞（iPS细胞）。下列叙述错误的是（ ） A. iPS细胞具有细胞周期，它分化形成的神经细胞一般不具有细胞周期 B. 诱导iPS细胞分化成的多种细胞中DNA相同，RNA和蛋白质不完全相同 C. iPS细胞最初是在体内由成纤维细胞突变而来的 D. 由iPS细胞用于临床治疗中可能存在导致肿瘤发生的风险 9. 如图表示双抗体夹心法检测抗原的过程，该方法是医学上常用的定量检测抗原的方法，利用细胞工程技术制备的单克隆抗体能增强该过程的有效性。下列叙述错误的是（ ） A. 图示两种抗体与样品中待测抗原的结合位点不同 B. 该检测方法中酶标抗体的作用是当抗体与待测抗原结合后催化特定底物反应 C. 用双抗体夹心法检测抗原需要制备两种能与抗原结合的单克隆抗体 D. 双抗体夹心法与只使用单克隆抗体相比，能增加可识别抗原的种类 10. 2017年中国科学家利用“聪明的化学方法和操作技巧（10 s内去核，15 s内核移植）”成功培育了体细胞克隆猴，流程如下，下列叙述正确的是（ ） A. 卵母细胞应在体外培养至成熟后再进行去核操作 B. 利用显微操作去核，保证克隆猴的遗传物质全部来自体细胞 C. 重构胚是指人工重新构建的胚胎，之后将自主完成细胞分裂和发育 D. “聪明的化学方法”主要指图中①②，通过调节组蛋白修饰而促进基因表达 11. 胚胎工程技术的应用为优良牲畜的大量繁殖提供了有效的解决办法，如奶牛活体采卵—体外胚胎生产（OPU-IVP）技术。已知雄性奶牛Y染色体上有一段雄性特异的高度重复序列，依据该重复序列设计引物，建立了用于奶牛胚胎性别鉴定的PCR体系（SRY-PCR）。下列叙述错误的是（ ） A. 体外受精后，在透明带和卵细胞膜间观察到两个极体说明受精成功 B. 此奶牛活体采卵—体外胚胎生产（OPU-IVP）技术生产良种奶牛属于有性生殖 C. 取滋养层细胞进行SRY-PCR，应选择结果为阴性的胚胎进行移植 D. 为防止受体母牛发生免疫排斥反应，胚胎移植前需要进行免疫检查 12. 下图表示“DNA的粗提取和鉴定”的相关流程。下列叙述正确的是（　　） A. 步骤1和步骤2的目的是获取研磨液中的沉淀物 B. 步骤3中的DNA溶于酒精，而某些蛋白质不溶于酒精 C. 步骤4中DNA在2mol·L-1的NaCl溶液中溶解度较高 D. 利用二苯胺试剂鉴定DNA时，将试管置于50℃的温水中 二、不定项选择题：本大题共4小题，每小题4分，共16分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求，全部选对得4分，选对但不全的得2分，有选错的得0分。 13. 土壤中95%以上的磷为植物很难利用的无效磷。解磷菌能够将磷矿粉等无效磷转化为植物易利用的速效磷。为研究解磷菌的解磷机理，科研人员将磷矿粉制成培养液，培养从土壤中分离出的2种解磷菌（M-3-01、B3-5-6），测定培养液的上清液pH及其中的速效磷含量；结果如图，下列叙述错误的是（ ） A. 由图可知，168 h以内M-3-01解磷能力较强 B. 2种解磷菌是用以磷矿粉作为唯一碳源的培养基分离出来的 C. B3-5-6转化无效磷的能力与培养溶液pH显著相关 D. 据图推测B3-5-6可能借助分泌酸性物质溶解磷矿粉 14. 植物甲（2n=16）抗旱、抗病性强，植物乙（2n=12）分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，如下图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 获得的杂种植株丙因含有不同来源的染色体，减数分裂时将发生联会紊乱 B. 过程①可抽真空处理使酶溶液渗入细胞间隙，缩短保温时间 C. 过程④可采用灭活的病毒诱导融合后需经过筛选再进行培养 D. 过程⑤获得成功的标志是杂种细胞再生出新的细胞壁 15. PSMA是某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白，CD28是T细胞表面受体。将两株不同杂交瘤细胞融合形成的双杂交瘤细胞，既能够悬浮在培养基中生长繁殖，又可以产生双特异性抗体PSMA×CD28。PSMA×CD28既能选择性地靶向结合某种癌细胞表面的PSMA蛋白，又能特异性地结合T细胞表面的CD28蛋白，从而激活T细胞，通过活化的T细胞来识别和杀灭目标癌细胞。图1所示为双特异性抗体PSMA×CD28的制备流程，图2所示为双特异性抗体PSMA×CD28的结构及作用机理。下列分析正确的是（ ） A. ①过程给小鼠注射的X/Y为PSMA蛋白/CD28蛋白 B. 因骨髓瘤细胞分裂增殖时通常会发生接触抑制现象，因此需分瓶进行传代培养 C. 对⑤过程得到的双杂交瘤细胞进行传代培养前，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 D. 培养杂交瘤细胞XY的培养基通常加入了血清等天然成分 16. 下图是蛋白质工程中改造目的基因的一种技术路线。S1核酸酶可以去除双链DNA突出的单链区；外切核酸酶Ⅲ只能从DNA双链的3'末端逐个水解核苷酸，产生不同长度的5'突出末端。下列叙述正确的是（　　） A. 步骤一需使用两种限制酶切割目的基因片段M B. 步骤二、三分别使用了S1核酸酶、外切核酸酶Ⅲ C. 步骤四宜选用T4DNA连接酶处理DNA片段 D. 质粒载体2中目的基因片段N的长度可有多种 三、非选择题：本大题共5小题，共60分（除特别标注外，每空2分） 17. 酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题： （1）这样通过发酵获得的可作为饲料蛋白来源的菌体称为__________。 （2）实验室中配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，及时对培养基进行分装，放入__________（填仪器）中进行灭菌。 （3）步骤③中，培养基冷凝后要将培养皿倒置，原因是______________________。 （4）步骤⑤中，应保证__________（填“充足的氧气供应”或“无氧环境”）。为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，经等体积台盼蓝染液染色。用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的______色细胞总数，理论上应不少于________个才能达到每毫升5×10⁹个活细胞的预期密度。 （5）可以怎样逐步筛选出甲醇高耐受菌株？_______________________。 18. 中医治疗疾病多用复方，三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”。研究者欲将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，实现有效成分的快速工厂化生产，具体操作如图1。 （1）取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用__________溶液和5%的次氯酸钠溶液对其进行消毒，每次处理后用无菌水冲洗叶片，去除残留于叶片上的药剂，处理后的叶片撕去表皮，切成1 mm薄片备用。 （2）过程②可利用化学诱导剂______诱导融合，主要利用到的细胞学原理是___________________。 （3）通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。 组别 A组 B组 C组（空白对照组） 实验处理 三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物 三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物 每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量 ①将表格中C组的实验处理补充完整__________。 ②若实验结果为__________，则支持利用细胞融合技术将复方的配伍提前实现有效成分的工厂化生产。 ③某同学认为利用细胞产物的工厂化生产复方的配伍主要是通过为细胞生长提供优越的条件，从而提高单个细胞代谢产物的含量，你同意该同学的观点吗？为什么？_______________________。 19. 单克隆抗体免疫疗法能够抑制恶性肿瘤的发展。奥加伊妥珠单抗是一种新型的抗体-药物偶联物，由识别肿瘤细胞表面CD22蛋白的单克隆抗体和具有细胞毒性的卡奇霉素结合组成；卡妥索单抗是一种双特异性抗体，其制备原理与作用原理如下图所示： （1）单克隆抗体制备涉及的动物细胞工程技术手段有__________。 （2）得到特定的杂交瘤细胞需要经过两次筛选，第一次是将细胞群稀释后在选择培养基中培养，只有__________能够存活并增殖，第二次是用__________法经多次筛选得到特定的杂交瘤细胞。 （3）科研人员推测奥加伊妥珠单抗和卡妥索单抗联合给药对恶性肿瘤的抑制效果更好。为验证这一推测，某兴趣小组设计如下实验方案：将培养好的癌细胞悬液对无胸腺裸鼠（简称裸鼠）进行皮下接种，接种后2周可观察各裸鼠背部长出肿块，证明实验接种成功，将上述处理的裸鼠随机分为2组：生理盐水组和奥加伊妥珠单抗+卡妥索单抗组（联合给药组）。各组均采用腹腔注射给药，给药后每两日测量并记录1次肿瘤体积。上述实验方案的不足之处有：①__________②__________。 20. 中国科学院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，实验流程如图所示。请回答下列问题： （1）采集卵母细胞时，可用__________对雌性小鼠进行超数排卵处理得到大量卵母细胞。 （2）为了获得更多甲的后代，在得到的重构胚发育到______或囊胚期时，对其进行分割；在分割囊胚阶段的胚胎时，应注意__________，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育。 （3）卵细胞、精子分别转化为phESC、ahESC，它们类似于胚胎干细胞，胚胎干细胞具有发育成完整个体的潜能，原因是_______________________。不考虑致死情况，得到的孤雄小鼠性染色体组成有______种类型。 （4）据图分析，只依赖雄性小鼠不能得到孤雄小鼠，请写出理由：_______________________。 21. 水杨酸广泛存在于植物中，是一种常见的药用成分，具有消炎、抗菌、镇痛等作用。由于从植物中提取水杨酸的成本过高，科学家利用基因工程在大肠杆菌基因组中导入关键基因将原有的代谢途径改造成如图1所示（图中L-Tyr为L-酪氨酸），获得工程菌SA01，但发酵产量一直受限。 （1）基因工程需要用到“分子手术刀”限制酶，它能使DNA链中特定部位的____________断开。 （2）在SA01的基础上敲除基因组中的酶A基因后获得SA02，发酵结果如图2。结合图1分析，相比SA01，SA02在水杨酸产量和细胞生长变化的可能机制____________。 （3）在______（填“SA01”或“SA02”）的基础上，将酶A对应的起始密码子由AUG改为大肠杆菌不常用的GUG后，弱化酶A表达中的______过程，获得图2中的SA03。 （4）在SA03的后续发酵过程中发现，随着发酵的时间推移，葡萄糖仍然有较高浓度，pH、溶解氧等发酵条件仍适宜，但水杨酸的产量增长逐渐停滞。结合图1信息，推测出现该现象的原因可能是__________环节受阻。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $