3.2基因工程的基本操作程序知识清单 2025-2026高二下学期生物人教版选择性必修3

该高中生物学知识清单系统梳理了基因工程的基本操作程序。从培育转基因抗虫棉的四个核心步骤出发，涵盖PCR技术的原理、条件、过程及结果，基因表达载体的构建目的与组成，目的基因导入不同细胞的方法，检测鉴定的分子与个体水平手段，以及DNA片段扩增与电泳鉴定的探究实践。 知识链路以操作程序为主线，逻辑连贯，从理论基础到技术细节再到实践应用层层递进。通过填空题强化核心概念，探究实践题培养科学思维与动手能力，答案准确详细。体现科学思维的严谨性和探究实践的创新性，助力学生构建完整的基因工程知识框架。

第3章 基因工程 第2节 基因工程的基本操作程序 1.培育转基因抗虫棉主要需要四个步骤：______________________、____________________、_________________________、______________________________。 2.PCR是______________的缩写，它是一项根据______________的原理，在体外提供___________的各种组分与反应条件，对_______________________进行大量复制的技术。 3,.PCR反应所需条件：DNA模板、分别与两条模板链结合的2种________、四种__________、_______________________。 4.引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的____________。其作用是__________________________。 5.PCR过程包括________（90-95℃，双链DNA解旋为单链）、_________（55-60℃_______与单链DNA互补结合）、___（72℃，TaqDNA聚合酶催化合成新的DNA链）三个步骤，循环往复实现DNA片段的指数级扩增。常采用______________来鉴定PCR的产物。 6.PCR的结果：每一次循环后目的基因的量可以增加一倍。（即成_______形式扩增（约为______，其中n为扩增循环的次数））。在第____轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。循环n次，共需要消耗_____对引物。循环n次，得到两条脱氧核苷酸链等长的DNA分子数_______，得到两条链不等长的DNA分子数__________。 7.构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中____________，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够________和发挥作用。 8.基因表达载体的组成，除了目的基因、标记基因、_________外，还必须有__________等。 9.启动子：一段有特殊结构的______片段，位于基因的首端，是____________识别和结合的部位，能驱动基因转录出_______，最终获得所需要的蛋白质。 10.诱导型启动子是指当诱导物存在时，可以_____________目的基因的表达。 11.将目的基因导入植物细胞的方法有______________（我国独创）、_____________(最常用)。 12.农杆菌的特点：农杆菌自然条件下侵染__________植物和_____植物；农杆菌的Ti质粒上的_______能够整合到所侵染细胞的______________上。 13..农杆菌转化过程是使目的基因入_______的________上→导入植物细胞→整合到_____________中→表达。 14..将目的基因导入动物细胞，最常用的方法是__________，此方法的受体细胞多是_______。 15.将目的基因导入微生物细胞的方法是_______，使细胞处于一种_____________的生理状态。 16.目的基因的检测与鉴定的方法： ①检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因或转录出mRNA，采用_______和_____________。 ②检测目的基因是否翻译出蛋白质，采用_________________检测。 ③个体水平的鉴定，目的是检测个体是否具有___________ ；鉴定方法：_________（如通过采摘抗虫棉的叶片饲喂棉铃虫）、____________ 、活性鉴定等。 探究•实践：DNA片段的扩增及电泳鉴定 1. DNA体外扩增的原理：PCR利用了__________原理和__________原理，通过调节______来控制DNA双链的解聚与结合。 2. DNA片段电泳鉴定的原理：在凝胶中DNA分子的迁移速率与_______________________等有关。凝胶中的DNA分子通过染色，可以在__________________________下被检测出来。 3. 为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头和蒸馏水等在使用之前必须进行_____________处理。 4. 在向微量离心管中添加反应组分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须_____，避免试剂的污染。 5.DNA片段进行电泳鉴定的结果是____条带，如果结果不止一条条带，原因可能的原因有：__________________________________________等。 第2节 基因工程的基本操作程序（答案） 1.目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建（核心）、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定 2.聚合酶链式反应；DNA半保留复制；参与DNA复制；目的基因的核苷酸序列 3,.引物、脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶 4.短单链核酸；使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸。 5.变性；复性（引物）、延伸；琼脂糖凝胶电泳 6指数（约为2n）； 3 ；2n-1 ； 2n-2n； 2n 7.稳定存在；表达 8.复制原点；启动子、终止子 9.DNA；RNA聚合酶；mRNA 10.激活或抑制 11.花粉管通道法、农杆菌转化法 12.双子叶、裸子；T­DNA；染色体DNA 13..Ti质粒；T-DNA；受体细胞的染色体DNA 14..显微注射法；受精卵。 15.CA2+处理法；能吸收周围环境中DNA分子 16.①PCR技术和DNA分子杂交技术。②抗原-抗体杂交③相应性状 ；抗虫鉴定、抗病鉴定  探究•实践：DNA片段的扩增及电泳鉴定 5. DNA热变性、DNA半保留复制；温度 6. 凝胶的浓度、DNA分子的大小和构像；波长为300nm的紫外灯 7. 高压灭菌 8. 更换 9. 1条；引物设计不合理、退火温度过低、DNA聚合酶的质量不好 1 学科网（北京）股份有限公司 $