精品解析：内蒙古巴彦淖尔市2025-2026学年高二下学期期末考试生物试题

巴彦淖尔市2025—2026学年第二学期高二期末考试生物学 本试卷满分100分，考试用时75分钟。 注意事项： 1.答题前，考生务必将自己的姓名、考生号、考场号、座位号填写在答题卡上。 2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 3.考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 4.本试卷主要考试内容：人教版必修1第1~3章，选择性必修3. 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1. 阿拉善沙漠中有多处盐碱湖，科研人员从湖水中分离得到嗜盐碱古菌和耐盐碱绿藻。下列关于这两种生物细胞的叙述，正确的是（　　） A. 两种细胞的边界均为细胞壁，体现了细胞的统一性 B. 二者的遗传物质均为DNA，且主要分布于细胞核中 C. 嗜盐碱古菌无核糖体，耐盐碱绿藻含有核糖体 D. 二者细胞膜的基本支架相同，但膜蛋白种类存在差异 2. 常见的脂质有脂肪、磷脂和固醇等。下列关于不同脂质与其功能的对应关系，正确的是（　　） A. 脂肪：为细胞生命活动供能，被称为“生命的燃料” B. 磷脂：仅存在于动物细胞膜上，是细胞膜的组成成分 C. 胆固醇：构成各种动、植物细胞细胞膜的重要成分 D. 性激素：促进人和动物生殖器官的发育及生殖细胞的形成 3. 糖类和脂肪均可以为运动提供能量，两者的供能比例与运动强度的关系如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 多糖在人体中主要以纤维素和糖原的形式存在 B. 人摄入的过多的脂肪会大量转化为糖类储存起来 C. 在M点对应的运动强度时，人运动消耗的脂肪和糖类的量相同 D. 若人要进行减脂，则建议其进行低强度运动 4. 某蛋白质由甲、乙、丙3条肽链组成，每条肽链均由60个氨基酸形成，结构如图所示。已知1个二硫键由2个—SH连接形成。下列叙述正确的是（　　） A. 3条肽链间相互通过二硫键连接 B. 该蛋白质形成过程中共减少了358个H C. 该蛋白质至少含有3个游离的氨基或羧基 D. 组成该蛋白质的氨基酸的种类可能大于21种 5. 低温会导致生物膜的流动性降低。生物膜中不饱和脂肪酸链的含量越高，生物膜抵抗寒冷胁迫的能力就越强。下列叙述正确的是（　　） A. 生物膜的流动性是一些生命活动的生理基础，比如中心体的形成 B. 细胞膜中磷脂分子和蛋白质的活动性在一定范围内随温度的升高而升高 C. 所有脂质和蛋白质分子均可以自由运动，这是细胞膜具有流动性的结构基础 D. 推测寒冷地区，植物细胞细胞膜中饱和脂肪酸链的含量较高 6. 制作泡菜的菌种主要是乳酸菌，早在商周时期，我国劳动人民就能利用盐来腌制泡菜。下列有关制作泡菜的说法，正确的是（　　） A. 制作泡菜时加的盐越多，抑菌效果越好，泡菜质量也就越高 B. 为了便于乳酸菌呼吸产生的CO2的释放，发酵器皿不能密封 C. 加入陈泡菜水可以加快泡菜发酵进程，原因是增加了乳酸菌数量 D. 腌制泡菜的发酵中期，泡菜坛内的各种微生物会大量繁殖 7. 某生物兴趣小组欲从校园花圃土壤中分离、筛选出能降解纤维素的细菌。下列关于该实验操作的叙述，正确的是（　　） A. 培养基中需要加入无机碳源、水、氮源和无机盐 B. 取样工具和土壤样本应分别进行灭菌和消毒处理 C. 培养时应设置空白培养基作为对照处理组 D. 可用显微镜直接计数法统计样本中的活菌数量 8. 下列关于各项生物技术应用的叙述，正确的是（　　） A. 利用发酵工程生产酸奶时，需持续向发酵罐内通入无菌空气 B. 可对植物体细胞进行抽样并将其置于低渗溶液中进行检测，以判断其是否“去壁”成功 C. 培育转基因抗除草剂大豆时，可将抗除草剂基因直接导入大豆的受精卵中 D. 可通过接种相应病毒来检测马铃薯“脱毒”是否成功 9. 消毒和灭菌技术在医疗防疫、日常饮食等领域均应用广泛。下列相关操作及判断，正确的是（　　） A. 医护人员使用体积分数为75%的酒精擦拭手部、体温计，该操作属于灭菌 B. 将培养微生物的玻璃培养皿放入干热灭菌箱中进行处理，该操作属于灭菌 C. 新鲜牛奶采用巴氏消毒法处理，可杀死所有微生物及其芽孢、孢子 D. 将饭店的餐具放进沸水中煮沸10分钟，该操作能彻底杀灭一切微生物 10. 实验人员利用植物体细胞杂交技术获得了人参—胡萝卜杂种植株。检测发现，人参和胡萝卜体细胞杂交显著提高了人参次生代谢物的含量。下列叙述错误的是（　　） A. 次生代谢物是生物基本生命活动所必需的物质 B. 植物细胞在进行杂交前需要用相关酶进行处理 C. 植物细胞不同于动物细胞的是其不能用灭活病毒进行诱导融合 D. 植物体细胞杂交技术能在一定程度上打破生殖隔离 11. 研究发现，滑膜干细胞可分化为软骨细胞、成骨细胞、脂肪细胞。医学工作者将滑膜干细胞进行移植，可实现半月板的再生。下列叙述正确的是（　　） A. 软骨细胞、成骨细胞、脂肪细胞中含量最多的化合物均是蛋白质 B. 所有细胞在体外培养时均会发生接触抑制，包括癌细胞 C. 体外培养滑膜干细胞时，CO2的作用是抑制细胞的呼吸作用 D. 利用患者自身的滑膜干细胞进行移植，来治疗半月板损伤，通常不会产生免疫排斥 12. 相比于真核细胞，原核细胞表达外源基因（如抗生素基因）的效率较高。下列叙述错误的是（　　） A. 基因能在异种生物细胞中表达，说明生物界共用一套遗传密码 B. 将外源基因导入大肠杆菌前，需要使用Ca2+对大肠杆菌进行处理 C. 当DNA聚合酶与启动子识别、结合后，相关基因的转录才能启动 D. 相比于原核细胞，真核细胞中生成的抗生素更接近天然活性 13. 某实验室利用PCR扩增如图所示的目的基因片段。下列相关叙述错误的是（　　） A. PCR过程中需要使用耐高温的DNA聚合酶 B. 复性时需要降温，目的是使目的基因重新螺旋 C. 扩增时需要用到序列为5´-CTTGGATGAT-3´的引物 D. 碱基互补配对原则保证了PCR过程可以准确进行 14. 科学家通过蛋白质工程对某药用蛋白进行改造，以提升其在人体内的稳定性。下列思路中不合理的是（　　） A. 通过定点突变技术替换碱基，改变易被蛋白酶识别的氨基酸 B. 改造基因，增加蛋白质分子内二硫键数量，加固空间结构 C. 直接对提纯后的蛋白质进行氨基酸替换处理 D. 依据预期蛋白结构，反向推导并人工合成全新目的基因 15. 科学家将鼠抗人大肠癌单克隆抗体基因（ND-1）与酵母胞嘧啶脱氨酶基因（CD）融合，在大肠杆菌中成功地表达了单克隆抗体与酶的融合蛋白。ND-1-CD融合基因的构建方法如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 引物P2和引物P3的5´端存在互补的碱基序列 B. PCR1获得图中所示的DNA需要经历2次DNA分子的复制 C. 杂交链延伸生成ND-1-CD融合基因的过程不需要再额外加入引物 D. ND-1-CD融合蛋白是利用基因突变技术获得的产物 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。 16. COPⅡ有被小泡负责从内质网到高尔基体的物质运输，正常的内质网驻留蛋白含有一段KDEL序列，若驻留蛋白意外逃逸至高尔基体顺面膜囊，则顺面膜囊区的KDEL受体将识别该蛋白并形成COPⅠ有被小泡，从而将它们运回内质网，过程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 抗体、消化酶的分泌过程需要COPⅡ有被小泡的运输 B. COPⅠ有被小泡对逃逸蛋白的回收与生物膜的流动性无关 C. KDEL受体异常会导致逃逸的驻留蛋白滞留在高尔基体中 D. 上述回收机制保证了内质网与高尔基体的蛋白质组成差异 17. 为了比较菌株M和N在不同条件下降解石油的能力，某实验小组将菌株M和N分别接种到培养基Ⅰ和培养基Ⅱ中，培养相同且适宜的时间后，检测平板上透明圈的大小，结果如表所示。下列说法正确的是（　　） 培养基 Ⅰ Ⅱ 成分 K2HPO4、MgSO4、NH4NO3和石油 K2HPO4、MgSO4和石油 菌株 菌株M 菌株N 菌株M 菌株N 透明圈大小 ++++ ++ ++ — 注：“+”代表存在透明圈，“+”越多透明圈越大，“—”代表无透明圈。 A. 该实验中最好使用平板划线法接种目的菌 B. 实验的自变量为培养基成分的不同和透明圈的直径 C. 制备培养基Ⅰ和Ⅱ的过程中可能加入了琼脂 D. 是否加入氮源，会影响菌株M和N降解石油的能力 18. 科研团队利用体细胞克隆+胚胎分割+胚胎嵌合复合技术培育优良肉牛，流程如下：①取成年高产肉牛耳部体细胞，将其细胞核注入去核的卵母细胞中，经诱导培养获得重组胚胎；②将发育至桑葚胚阶段的重组胚胎均等分割为4份；③取另一种高抗逆型肉牛的囊胚内细胞团细胞，与②中分割后的一部分胚胎进行嵌合培养，获得嵌合胚胎；④将不同类型胚胎移植至同期发情处理的代孕母牛体内。下列相关叙述正确的是（　　） A. 步骤①中卵母细胞的去核操作常借助显微操作仪完成 B. 步骤②进行胚胎分割时，不需要将内细胞团均等分割 C. 步骤③构建的嵌合胚胎仍具备正常发育为完整个体的潜能 D. 步骤④中，同期发情处理的目的是使供、受体子宫生理状态一致 19. 我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列叙述正确的是（　　） A. 过程①可借助农杆菌转化法将特定基因导入成纤维细胞 B. 过程②应选用处于减数分裂Ⅰ中期的卵母细胞 C. 组蛋白去甲基化和乙酰化均有利于重构胚的后续发育 D. 过程④需要待重构胚发育至原肠胚后再进行胚胎移植 20. 限制酶是基因工程中的工具。两种限制酶的识别位点如图所示，已知某DNA上各有1个EcoR Ⅰ、Mfe Ⅰ的识别位点。下列叙述正确的是（　　） A. 所有限制酶的识别序列均由6个核苷酸组成 B. 该DNA同时被两种酶切割，可能生成2个或3个片段 C. 上述两种酶切割后的末端可以被E.coli DNA连接酶或T4 DNA连接酶连接 D. 将被EcoR Ⅰ和Mfe Ⅰ切割后的末端连接，则该连接处不能被EcoR Ⅰ和Mfe Ⅰ识别 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 锡林郭勒草原是我国典型的温带草原生态系统，草原上分布着蒙古野驴、黄羊、蒙古韭、针茅、沙蒿等本土特有生物，是研究生命系统结构层次的天然场地。科研团队对该草原不同区域开展野外调查与取样分析，回答下列问题： （1）黄羊含有心脏、肾脏等多种器官，器官是由__________结合构成的。锡林郭勒草原生态系统与生物圈的关系是__________。 （2）草原上空单独飞行的一只草原雕、土壤中独立存在的一个乳酸菌细胞分别属于生命系统中的__________和__________层次。草原上的沙土__________（填“参与”或“不参与”）构成生命系统的结构层次。 （3）有人提出观点：草原上所有的羊构成一个种群，所有动植物构成生物群落。该观点的错误之处在于__________。 22. 三河牛的乳腺细胞可合成、分泌乳清蛋白，该过程依赖多种细胞器协作。该细胞内乳清蛋白合成、加工与运输的过程如图所示，其中①~⑧代表细胞结构。回答下列问题： （1）乳清蛋白（N端氨基酸为亮氨酸）是乳蛋白的主要成分，在乳清蛋白合成、运输、分泌的过程中，膜面积增大、先增大后减小、减小的相关结构依次是__________（填图中序号）。研究发现，乳腺细胞中附着在内质网上的②的数量远多于骨骼肌细胞中的，请从细胞功能角度分析该差异出现的原因：________________________________________。 （2）若用3H标记亮氨酸追踪乳清蛋白的合成路径，则应标记亮氨酸的_________（填“R基”“氨基”或“羧基”）部位，标记其他位置可能会导致追踪失败，从肽链合成方式角度分析，原因是____________________________________。 （3）除乳清蛋白外，乳腺细胞同时合成胞内呼吸酶。若细胞内结构③受损，则可推测短时间内细胞中还能正常合成胞内呼吸酶，请简述可能原因：____________________________________。 23. 老坛酸菜是我国传统发酵食品的代表之一，其制作过程遵循传统发酵工艺，以新鲜芥菜为原料，加入食盐、辣椒、花椒等辅料，密封于陶坛中，依赖自然环境中的微生物（主要为乳酸菌、酵母菌等）进行发酵。回答下列问题： （1）传统老坛酸菜发酵过程中的乳酸菌主要来自_________。需将坛口密封才能进行发酵过程，原因是_________。 （2）某同学尝试在家制作老坛酸菜，煮熟的芥菜需要冷却后再放入目的菌种，原因是____________________________________。发酵后期发现酸菜出现腐败变质现象，推测原因可能是__________________________________（答出1点）。 （3）近年来，某企业采用“自然接种+人工辅助接种优良乳酸菌”的方式对传统老坛酸菜发酵工艺进行优化，优化后的发酵工艺体现了传统发酵与现代技术结合的优势，其优势是__________________。 24. 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。将基因型为XFXS的女性皮肤组织，利用含血清（含有生长因子、激素、多肽及天然酶抑制剂等多种成分）的培养液进行原代培养，然后制成细胞悬液，转入无血清培养液对不同的单个细胞分别进行单克隆培养。回答下列问题： （1）将原代培养的细胞制成细胞悬液前，需要用________对其进行处理，使之分散成单个细胞。 （2）培养液需要定时更换，目的是________。细胞转入无血清培养液培养时需要加入酶抑制剂，根据题意可推测，其目的是________。 （3）分别从原代培养和各单克隆培养的培养基中取样，对提取到的G6PD进行电泳检测，结果如图所示。其中S型蛋白是XS基因的表达产物，F型蛋白是XF基因的表达产物。 ①单克隆培养细胞3的基因型为________（填“XFXF”“XFXS”或“XSXS”）。 ②根据结果推测，该女性细胞中可能存在一条X染色体随机失活（染色体失活后上面的基因无法正常表达）的现象，作出该推测的理由是________。 25. 乳铁蛋白（LF）是乳汁中一种重要的非血红素铁结合糖蛋白，具有广谱抗菌、抗病毒、抗肿瘤、调节免疫等多种生理功能，被认为是一种新型抗菌、抗癌药物。下图表示研究人员开展人乳铁蛋白（hLF）基因乳腺特异性表达载体构建及转化的研究过程。回答下列问题： 注：AseⅠ、NheⅠ、SalⅠ、BamHⅠ代表相关限制酶切位点，NeoR是新霉素抗性基因。GFP基因是绿色荧光蛋白基因，在荧光显微镜下可观察到含该基因的细胞发出绿色荧光。 （1）过程①操作中需要用到的酶是________。由图可知，为了构建重组质粒，研究人员在hLF基因两侧添加了________和________（填图中限制酶）的识别序列。 （2）过程②为________，是基因工程基本操作程序的第二步。可利用PCR检测重组质粒上的BLG基因与hLF基因是否正确连接，请从引物的特异性角度出发，简单写出实验方案：________________________________________。 （3）将转化后的山羊细胞X置于含新霉素的培养液中培养，能够存活的细胞X说明其已经导入了________（填图中质粒名称），再借助荧光显微镜从存活的细胞中筛选出________的细胞即可能为导入了重组质粒的受体细胞。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 巴彦淖尔市2025—2026学年第二学期高二期末考试生物学 本试卷满分100分，考试用时75分钟。 注意事项： 1.答题前，考生务必将自己的姓名、考生号、考场号、座位号填写在答题卡上。 2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 3.考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 4.本试卷主要考试内容：人教版必修1第1~3章，选择性必修3. 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1. 阿拉善沙漠中有多处盐碱湖，科研人员从湖水中分离得到嗜盐碱古菌和耐盐碱绿藻。下列关于这两种生物细胞的叙述，正确的是（　　） A. 两种细胞的边界均为细胞壁，体现了细胞的统一性 B. 二者的遗传物质均为DNA，且主要分布于细胞核中 C. 嗜盐碱古菌无核糖体，耐盐碱绿藻含有核糖体 D. 二者细胞膜的基本支架相同，但膜蛋白种类存在差异 【答案】D 【解析】 【详解】A、细胞的边界是细胞膜，细胞壁具有全透性，不能作为细胞的边界，A错误； B、嗜盐碱古菌和耐盐碱绿藻的遗传物质均为DNA，但嗜盐碱古菌为原核生物，不存在成形的细胞核，其DNA主要分布在拟核区域，B错误； C、核糖体是原核生物和真核生物共有的细胞器，嗜盐碱古菌也含有核糖体，C错误； D、嗜盐碱古菌和耐盐碱绿藻细胞膜的基本支架均为磷脂双分子层，由于两种生物的功能存在差异，因此膜蛋白的种类存在差异，D正确。 2. 常见的脂质有脂肪、磷脂和固醇等。下列关于不同脂质与其功能的对应关系，正确的是（　　） A. 脂肪：为细胞生命活动供能，被称为“生命的燃料” B. 磷脂：仅存在于动物细胞膜上，是细胞膜的组成成分 C. 胆固醇：构成各种动、植物细胞细胞膜的重要成分 D. 性激素：促进人和动物生殖器官的发育及生殖细胞的形成 【答案】D 【解析】 【详解】A、被称为“生命的燃料”的是葡萄糖，脂肪是细胞内良好的储能物质，并非细胞生命活动的主要能源物质，A错误； B、磷脂是细胞膜的基本支架磷脂双分子层的组成成分，所有细胞的细胞膜都含有磷脂，并非仅存在于动物细胞膜上，B错误； C、胆固醇是构成动物细胞膜的重要成分，植物细胞膜一般不含胆固醇，C错误； D、性激素属于固醇类脂质，其功能就是促进人和动物生殖器官的发育及生殖细胞的形成，D正确。 3. 糖类和脂肪均可以为运动提供能量，两者的供能比例与运动强度的关系如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 多糖在人体中主要以纤维素和糖原的形式存在 B. 人摄入的过多的脂肪会大量转化为糖类储存起来 C. 在M点对应的运动强度时，人运动消耗的脂肪和糖类的量相同 D. 若人要进行减脂，则建议其进行低强度运动 【答案】D 【解析】 【详解】A、纤维素是植物特有的多糖，人体中不存在纤维素，人体的多糖主要以糖原的形式储存，A错误； B、人体中糖类可以大量转化为脂肪，但脂肪不能大量转化为糖类，B错误； C、M点对应的是脂肪和糖类的供能比例相同，由于等质量的脂肪含有的能量远多于糖类，因此此时消耗脂肪的量少于糖类的消耗量，C错误； D、由图可知，运动强度越低，脂肪的供能比例越高，相同运动量下低强度运动消耗的脂肪更多，更适合减脂，D正确。 4. 某蛋白质由甲、乙、丙3条肽链组成，每条肽链均由60个氨基酸形成，结构如图所示。已知1个二硫键由2个—SH连接形成。下列叙述正确的是（　　） A. 3条肽链间相互通过二硫键连接 B. 该蛋白质形成过程中共减少了358个H C. 该蛋白质至少含有3个游离的氨基或羧基 D. 组成该蛋白质的氨基酸的种类可能大于21种 【答案】C 【解析】 【详解】A、由图可知，乙和甲之间、甲和丙之间各有1个二硫键，但乙和丙之间是通过肽键连接的，并非3条肽链间都仅通过二硫键连接，A错误； B、该蛋白质由甲、乙、丙3条肽链组成，每条肽链均由60个氨基酸形成，共有氨基酸3×60＝180个，肽链内的肽键数为180－3＝177，加上乙、丙之间的1个链间肽键，总肽键数为178，共脱去178分子水，每分子水含2个H，共失去178×2＝356个H；图中还有2个二硫键，每个二硫键形成时脱去2个H，共失去2×2＝4个H，因此总共减少356＋4＝360个H，B错误； C、该蛋白质由3条肽链组成，不考虑R基上的氨基和羧基时，每条肽链的末端各有1个游离的氨基和1个游离的羧基，因此该蛋白质至少含有3个游离的氨基和3个游离的羧基，C正确； D、组成生物体蛋白质的氨基酸最多有21种，因此该蛋白质的氨基酸种类不可能大于21种，D错误。 5. 低温会导致生物膜的流动性降低。生物膜中不饱和脂肪酸链的含量越高，生物膜抵抗寒冷胁迫的能力就越强。下列叙述正确的是（　　） A. 生物膜的流动性是一些生命活动的生理基础，比如中心体的形成 B. 细胞膜中磷脂分子和蛋白质的活动性在一定范围内随温度的升高而升高 C. 所有脂质和蛋白质分子均可以自由运动，这是细胞膜具有流动性的结构基础 D. 推测寒冷地区，植物细胞细胞膜中饱和脂肪酸链的含量较高 【答案】B 【解析】 【详解】A、中心体是无膜结构的细胞器，其形成过程与生物膜的流动性无关，A错误； B、分子热运动速率随温度升高而加快，因此在不破坏细胞膜结构的一定温度范围内，细胞膜中磷脂分子和蛋白质的活动性会随温度升高而升高，B正确； C、细胞膜流动性的结构基础是磷脂分子可以侧向自由移动、大多数蛋白质分子可以运动，并非所有蛋白质分子都能自由运动，C错误； D、题干明确生物膜中不饱和脂肪酸链含量越高，抵抗寒冷胁迫的能力越强，因此寒冷地区植物细胞细胞膜中不饱和脂肪酸链含量更高，饱和脂肪酸链含量更低，D错误。 6. 制作泡菜的菌种主要是乳酸菌，早在商周时期，我国劳动人民就能利用盐来腌制泡菜。下列有关制作泡菜的说法，正确的是（　　） A. 制作泡菜时加的盐越多，抑菌效果越好，泡菜质量也就越高 B. 为了便于乳酸菌呼吸产生的CO2的释放，发酵器皿不能密封 C. 加入陈泡菜水可以加快泡菜发酵进程，原因是增加了乳酸菌数量 D. 腌制泡菜的发酵中期，泡菜坛内的各种微生物会大量繁殖 【答案】C 【解析】 【详解】A、制作泡菜时盐浓度过高会抑制乳酸菌的生长繁殖，还会导致泡菜咸度过高、口感变差，并非盐越多泡菜质量越高，A错误； B、乳酸菌为厌氧菌，无氧呼吸的产物只有乳酸，不产生二氧化碳，且泡菜发酵需要无氧环境，发酵器皿必须密封，B错误； C、陈泡菜水中含有大量活性乳酸菌，加入陈泡菜水相当于提高了初始乳酸菌的接种量，可加快发酵进程，C正确； D、泡菜发酵中期，坛内为缺氧、高酸性环境，绝大多数杂菌的生长繁殖被抑制，仅乳酸菌活动旺盛，并非各种微生物大量繁殖，D错误。 7. 某生物兴趣小组欲从校园花圃土壤中分离、筛选出能降解纤维素的细菌。下列关于该实验操作的叙述，正确的是（　　） A. 培养基中需要加入无机碳源、水、氮源和无机盐 B. 取样工具和土壤样本应分别进行灭菌和消毒处理 C. 培养时应设置空白培养基作为对照处理组 D. 可用显微镜直接计数法统计样本中的活菌数量 【答案】C 【解析】 【详解】A、筛选纤维素降解菌的选择培养基，纤维素是唯一有机碳源，不能添加无机碳源；只有可以利用纤维素的细菌才能够在此培养基存活，A错误； B、取样工具需要进行灭菌处理，但土壤样本不能消毒或灭菌，否则会杀死样本中的目的菌，无法完成后续筛选，B错误； C、设置空白培养基培养的对照组，可检验培养基灭菌是否合格、是否被杂菌污染，能提高实验结果的可信度，C正确； D、显微镜直接计数法无法区分死菌和活菌，统计结果包含死菌数量，不能代表活菌数，统计活菌数通常采用稀释涂布平板法，D错误。 8. 下列关于各项生物技术应用的叙述，正确的是（　　） A. 利用发酵工程生产酸奶时，需持续向发酵罐内通入无菌空气 B. 可对植物体细胞进行抽样并将其置于低渗溶液中进行检测，以判断其是否“去壁”成功 C. 培育转基因抗除草剂大豆时，可将抗除草剂基因直接导入大豆的受精卵中 D. 可通过接种相应病毒来检测马铃薯“脱毒”是否成功 【答案】B 【解析】 【详解】A、生产酸奶的菌种是乳酸菌，属于厌氧菌，需要在无氧条件下进行无氧呼吸产生乳酸，若持续通入无菌空气，会抑制乳酸菌发酵，A错误； B、植物细胞去除细胞壁后形成原生质体，失去细胞壁的支持和保护，在低渗溶液中会吸水涨破；未成功去壁的植物细胞因细胞壁的支持、保护作用，在低渗环境下吸水也不会涨破，因此该方法可以判断植物细胞是否“去壁”成功，B正确； C、培育转基因植株时，不能将目的基因直接导入受体细胞，需要先构建基因表达载体，否则目的基因无法在受体细胞中稳定存在、复制并表达，C错误； D、马铃薯“脱毒”是指植株不携带特定病毒，而非获得了抗病毒的抗性，给马铃薯接种相应病毒，原本脱毒的植株也会被病毒感染，无法检测脱毒是否成功，只能用来检测植株的抗病毒能力，脱毒是否成功可通过抗原-抗体杂交、核酸检测等方法来检测，D错误。 9. 消毒和灭菌技术在医疗防疫、日常饮食等领域均应用广泛。下列相关操作及判断，正确的是（　　） A. 医护人员使用体积分数为75%的酒精擦拭手部、体温计，该操作属于灭菌 B. 将培养微生物的玻璃培养皿放入干热灭菌箱中进行处理，该操作属于灭菌 C. 新鲜牛奶采用巴氏消毒法处理，可杀死所有微生物及其芽孢、孢子 D. 将饭店的餐具放进沸水中煮沸10分钟，该操作能彻底杀灭一切微生物 【答案】B 【解析】 【详解】A、体积分数75%的酒精擦拭属于消毒操作，无法杀灭芽孢、孢子，不属于灭菌，A错误； B、干热灭菌箱处理玻璃培养皿属于常用的灭菌方法，可杀灭包括芽孢、孢子在内的全部微生物，该操作属于灭菌，B正确； C、巴氏消毒法属于消毒方法，仅能杀死新鲜牛奶中的绝大多数有害微生物，无法杀灭芽孢、孢子，C错误； D、沸水煮10分钟属于煮沸消毒法，无法杀灭芽孢、孢子，不能彻底杀灭一切微生物，D错误。 10. 实验人员利用植物体细胞杂交技术获得了人参—胡萝卜杂种植株。检测发现，人参和胡萝卜体细胞杂交显著提高了人参次生代谢物的含量。下列叙述错误的是（　　） A. 次生代谢物是生物基本生命活动所必需的物质 B. 植物细胞在进行杂交前需要用相关酶进行处理 C. 植物细胞不同于动物细胞的是其不能用灭活病毒进行诱导融合 D. 植物体细胞杂交技术能在一定程度上打破生殖隔离 【答案】A 【解析】 【详解】A、初生代谢物是生物基本生命活动所必需的物质，次生代谢物是生物生长到一定阶段产生的，并非基本生命活动必需，A错误； B、植物细胞外层有细胞壁，进行杂交前需要用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁获得原生质体，B正确； C、灭活病毒诱导是动物细胞融合特有的诱导方法，植物细胞融合只能用物理法、化学法诱导，不能用灭活病毒诱导，C正确； D、植物体细胞杂交可以实现不同物种的细胞融合，克服远缘杂交不亲和的障碍，在一定程度上打破了物种间的生殖隔离，D正确。 11. 研究发现，滑膜干细胞可分化为软骨细胞、成骨细胞、脂肪细胞。医学工作者将滑膜干细胞进行移植，可实现半月板的再生。下列叙述正确的是（　　） A. 软骨细胞、成骨细胞、脂肪细胞中含量最多的化合物均是蛋白质 B. 所有细胞在体外培养时均会发生接触抑制，包括癌细胞 C. 体外培养滑膜干细胞时，CO2的作用是抑制细胞的呼吸作用 D. 利用患者自身的滑膜干细胞进行移植，来治疗半月板损伤，通常不会产生免疫排斥 【答案】D 【解析】 【详解】A、活细胞中含量最多的化合物是水，蛋白质是细胞干重中含量最多的化合物，A错误； B、正常细胞体外培养时会发生接触抑制，癌细胞细胞膜上糖蛋白减少，细胞黏着性降低，体外培养时不会发生接触抑制，B错误； C、体外培养动物细胞时，通入CO₂的作用是维持培养液的pH稳定，而非抑制细胞呼吸，C错误； D、患者自身的滑膜干细胞的细胞表面抗原和患者自身的组织相容性抗原一致，移植时通常不会产生免疫排斥反应，D正确。 12. 相比于真核细胞，原核细胞表达外源基因（如抗生素基因）的效率较高。下列叙述错误的是（　　） A. 基因能在异种生物细胞中表达，说明生物界共用一套遗传密码 B. 将外源基因导入大肠杆菌前，需要使用Ca2+对大肠杆菌进行处理 C. 当DNA聚合酶与启动子识别、结合后，相关基因的转录才能启动 D. 相比于原核细胞，真核细胞中生成的抗生素更接近天然活性 【答案】C 【解析】 【详解】A、密码子具有通用性，所有生物共用一套遗传密码，因此外源基因可以在异种生物细胞中表达，A正确； B、将外源基因导入大肠杆菌前，需要用处理大肠杆菌使其成为感受态细胞，便于吸收外源DNA分子，B正确； C、启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，启动基因的转录过程；DNA聚合酶参与DNA复制，不能结合启动子启动转录，C错误； D、真核细胞具有内质网、高尔基体等细胞器，可以对表达的蛋白质类抗生素进行加工修饰，原核细胞无这些细胞器，因此真核细胞生成的抗生素更接近天然活性，D正确。 13. 某实验室利用PCR扩增如图所示的目的基因片段。下列相关叙述错误的是（　　） A. PCR过程中需要使用耐高温的DNA聚合酶 B. 复性时需要降温，目的是使目的基因重新螺旋 C. 扩增时需要用到序列为5´-CTTGGATGAT-3´的引物 D. 碱基互补配对原则保证了PCR过程可以准确进行 【答案】B 【解析】 【详解】A、PCR的变性阶段温度可高达90℃以上，普通DNA聚合酶会失活，因此需要使用耐高温的DNA聚合酶（如Taq酶）催化子链合成，A正确； B、复性时降温的目的是使引物与模板DNA的互补单链结合，为延伸阶段做准备，并非使目的基因重新螺旋，B错误； C、DNA子链合成方向为5'→3'，引物需要与模板链的3'端互补配对，题中目的基因的一条模板链3'端对应序列可与序列为5'-CTTGGATGAT-3'的引物互补，因此扩增时需要该引物，C正确； D、PCR的复性、延伸阶段都遵循碱基互补配对原则，保证了扩增过程可以准确进行，D正确。 14. 科学家通过蛋白质工程对某药用蛋白进行改造，以提升其在人体内的稳定性。下列思路中不合理的是（　　） A. 通过定点突变技术替换碱基，改变易被蛋白酶识别的氨基酸 B. 改造基因，增加蛋白质分子内二硫键数量，加固空间结构 C. 直接对提纯后的蛋白质进行氨基酸替换处理 D. 依据预期蛋白结构，反向推导并人工合成全新目的基因 【答案】C 【解析】 【详解】A、通过定点突变技术改变基因序列，进而改变易被蛋白酶识别的氨基酸，可避免药用蛋白被人体内蛋白酶降解，能有效提升其稳定性，A不符合题意； B、二硫键可维持蛋白质空间结构的稳定，通过改造基因增加蛋白质分子内二硫键的数量，能加固蛋白质的空间结构，提升稳定性，B不符合题意； C、蛋白质工程的操作对象是基因，而非直接改造蛋白质。直接对提纯后的蛋白质进行氨基酸替换，操作难度极高，且改造后的蛋白质无法大量扩增生产，C符合题意； D、蛋白质工程的基本流程为：从预期蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→推导并合成对应的目的基因，因此该思路符合蛋白质工程的操作逻辑，D不符合题意。 15. 科学家将鼠抗人大肠癌单克隆抗体基因（ND-1）与酵母胞嘧啶脱氨酶基因（CD）融合，在大肠杆菌中成功地表达了单克隆抗体与酶的融合蛋白。ND-1-CD融合基因的构建方法如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 引物P2和引物P3的5´端存在互补的碱基序列 B. PCR1获得图中所示的DNA需要经历2次DNA分子的复制 C. 杂交链延伸生成ND-1-CD融合基因的过程不需要再额外加入引物 D. ND-1-CD融合蛋白是利用基因突变技术获得的产物 【答案】D 【解析】 【详解】A、该实验为重叠延伸 PCR 技术，引物 P2、P3 的 5‑端设计成互补碱基序列，两个 PCR 扩增产物末端便可依靠碱基互补配对形成杂交链，A正确； B、根据半保留复制特点可知，前1轮循环产生的2个DNA分子的两条链均不等长，第二轮循环产生的DNA分子存在等长的两条核苷酸链，即PCR1获得图中所示的DNA需要经历2次DNA分子的复制，B正确； C、杂交链延伸生成ND-1-CD融合基因的过程不需要再额外加入引物，因为两条单链可以互为模板和引物，C正确； D、ND‑1‑CD 融合蛋白依靠重叠延伸‑PCR 拼接两种独立基因获得；基因突变指 DNA 分子碱基对增添、缺失或者替换，该过程没有诱发基因突变，D错误。 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。 16. COPⅡ有被小泡负责从内质网到高尔基体的物质运输，正常的内质网驻留蛋白含有一段KDEL序列，若驻留蛋白意外逃逸至高尔基体顺面膜囊，则顺面膜囊区的KDEL受体将识别该蛋白并形成COPⅠ有被小泡，从而将它们运回内质网，过程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 抗体、消化酶的分泌过程需要COPⅡ有被小泡的运输 B. COPⅠ有被小泡对逃逸蛋白的回收与生物膜的流动性无关 C. KDEL受体异常会导致逃逸的驻留蛋白滞留在高尔基体中 D. 上述回收机制保证了内质网与高尔基体的蛋白质组成差异 【答案】ACD 【解析】 【详解】A、抗体、消化酶属于分泌蛋白，需经内质网加工后运输到高尔基体进一步加工，结合题干信息，COPⅡ有被小泡负责内质网到高尔基体的物质运输，因此该过程需要COPⅡ有被小泡参与，A正确； B、COPⅠ有被小泡的出芽形成、与内质网膜的融合过程都依赖生物膜的流动性，因此该回收过程与生物膜的流动性有关，B错误； C、逃逸到高尔基体的内质网驻留蛋白需要被KDEL受体识别后，才能通过COPⅠ有被小泡运回内质网，若KDEL受体异常，逃逸蛋白无法被识别和回收，将滞留在高尔基体中，C正确； D、该回收机制可将内质网特有的驻留蛋白运回内质网，避免此类蛋白保留在高尔基体中，保证了内质网与高尔基体的蛋白质组成存在差异，D正确。 17. 为了比较菌株M和N在不同条件下降解石油的能力，某实验小组将菌株M和N分别接种到培养基Ⅰ和培养基Ⅱ中，培养相同且适宜的时间后，检测平板上透明圈的大小，结果如表所示。下列说法正确的是（　　） 培养基 Ⅰ Ⅱ 成分 K2HPO4、MgSO4、NH4NO3和石油 K2HPO4、MgSO4和石油 菌株 菌株M 菌株N 菌株M 菌株N 透明圈大小 ++++ ++ ++ — 注：“+”代表存在透明圈，“+”越多透明圈越大，“—”代表无透明圈。 A. 该实验中最好使用平板划线法接种目的菌 B. 实验的自变量为培养基成分的不同和透明圈的直径 C. 制备培养基Ⅰ和Ⅱ的过程中可能加入了琼脂 D. 是否加入氮源，会影响菌株M和N降解石油的能力 【答案】CD 【解析】 【详解】A、本实验需要通过单菌落周围的透明圈大小判断降解能力，应选用稀释涂布平板法接种，保证单菌落均匀分布，平板划线法不易得到均匀分布的单菌落，不利于透明圈大小的比较，A错误； B、实验的自变量是菌株种类和培养基成分，透明圈的大小是因变量，B错误； C、实验使用的是平板（固体培养基），制备固体培养基时通常需要加入琼脂作为凝固剂，因此制备培养基Ⅰ和Ⅱ的过程中可能加入了琼脂，C正确； D、培养基Ⅰ含氮源NH₄NO₃，培养基Ⅱ不含氮源，对比两组结果：菌株M在含氮源的培养基中透明圈更大，菌株N在无氮源的培养基中无透明圈，说明是否加入氮源会影响菌株M和N降解石油的能力，D正确。 18. 科研团队利用体细胞克隆+胚胎分割+胚胎嵌合复合技术培育优良肉牛，流程如下：①取成年高产肉牛耳部体细胞，将其细胞核注入去核的卵母细胞中，经诱导培养获得重组胚胎；②将发育至桑葚胚阶段的重组胚胎均等分割为4份；③取另一种高抗逆型肉牛的囊胚内细胞团细胞，与②中分割后的一部分胚胎进行嵌合培养，获得嵌合胚胎；④将不同类型胚胎移植至同期发情处理的代孕母牛体内。下列相关叙述正确的是（　　） A. 步骤①中卵母细胞的去核操作常借助显微操作仪完成 B. 步骤②进行胚胎分割时，不需要将内细胞团均等分割 C. 步骤③构建的嵌合胚胎仍具备正常发育为完整个体的潜能 D. 步骤④中，同期发情处理的目的是使供、受体子宫生理状态一致 【答案】ABCD 【解析】 【详解】A、动物细胞核移植过程中，卵母细胞的去核操作属于精细的显微操作，常借助显微操作仪完成，A正确； B、内细胞团是囊胚阶段才分化形成的结构，步骤②是对桑葚胚阶段的胚胎进行分割，该阶段细胞尚未分化，不存在内细胞团，因此不需要进行内细胞团的均等分割，B正确； C、步骤③中参与嵌合的分割后胚胎细胞、高抗逆型肉牛的内细胞团细胞都具备发育的全能性，构建得到的嵌合胚胎仍具备正常发育为完整个体的潜能，C正确； D、胚胎移植前对代孕母牛进行同期发情处理的目的是使供、受体的子宫生理状态一致，为移入的胚胎提供相同且适宜的生理环境，提高胚胎移植的成功率，D正确。 19. 我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列叙述正确的是（　　） A. 过程①可借助农杆菌转化法将特定基因导入成纤维细胞 B. 过程②应选用处于减数分裂Ⅰ中期的卵母细胞 C. 组蛋白去甲基化和乙酰化均有利于重构胚的后续发育 D. 过程④需要待重构胚发育至原肠胚后再进行胚胎移植 【答案】C 【解析】 【详解】A、农杆菌转化法多用于植物细胞导入目的基因；小鼠动物成纤维细胞导入基因常用显微注射法，A错误； B、核移植操作时，卵母细胞需要选用减数第二次分裂中期（MⅡ‑中期） 的卵母细胞，该时期细胞质环境最适合细胞核重编程，不是减 Ⅰ 中期，B 错误； C、结合题图，重构胚在加入Kdm4d的mRNA和TSA后，发育成克隆鼠，而Kdm4d的mRNA表达产物为组蛋白去甲基化酶，可以使组蛋白去甲基化，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂，抑制组蛋白脱乙酰酶的作用，保持组蛋白乙酰化，即过程④组蛋白乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程，C正确； D、小鼠胚胎移植一般选取桑椹胚或者囊胚阶段的重构胚；原肠胚阶段细胞分化程度过高，不适宜胚胎移植，D 错误。 20. 限制酶是基因工程中的工具。两种限制酶的识别位点如图所示，已知某DNA上各有1个EcoR Ⅰ、Mfe Ⅰ的识别位点。下列叙述正确的是（　　） A. 所有限制酶的识别序列均由6个核苷酸组成 B. 该DNA同时被两种酶切割，可能生成2个或3个片段 C. 上述两种酶切割后的末端可以被E.coli DNA连接酶或T4 DNA连接酶连接 D. 将被EcoR Ⅰ和Mfe Ⅰ切割后的末端连接，则该连接处不能被EcoR Ⅰ和Mfe Ⅰ识别 【答案】BCD 【解析】 【详解】A、大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，也有少 数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组 成，并非所有限制酶的识别序列均为6个核苷酸，A错误； B、若该DNA为环状DNA，2个不同的酶切位点被同时切割后会得到2个片段；若该DNA为线性DNA，2个不同的酶切位点被同时切割后会得到3个片段，因此可能生成2个或3个片段，B正确； C、两种限制酶切割后产生相同的黏性末端，E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶都可以连接互补的黏性末端，因此上述两种酶的切割末端都能被这两种DNA连接酶连接，C正确； D、两种酶为同尾酶，切割后的末端连接后，形成的序列为5'-GAATTG-3'/3'-CTTAAC-5'，既不是EcoR Ⅰ的识别序列，也不是Mfe Ⅰ的识别序列，因此该连接处不能被这两种酶识别，D正确。 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 锡林郭勒草原是我国典型的温带草原生态系统，草原上分布着蒙古野驴、黄羊、蒙古韭、针茅、沙蒿等本土特有生物，是研究生命系统结构层次的天然场地。科研团队对该草原不同区域开展野外调查与取样分析，回答下列问题： （1）黄羊含有心脏、肾脏等多种器官，器官是由__________结合构成的。锡林郭勒草原生态系统与生物圈的关系是__________。 （2）草原上空单独飞行的一只草原雕、土壤中独立存在的一个乳酸菌细胞分别属于生命系统中的__________和__________层次。草原上的沙土__________（填“参与”或“不参与”）构成生命系统的结构层次。 （3）有人提出观点：草原上所有的羊构成一个种群，所有动植物构成生物群落。该观点的错误之处在于__________。 【答案】（1） ①. 不同组织 ②. 生物圈包含了包括锡林郭勒草原生态系统在内的所有生态系统 （2） ①. 个体层次 ②. 细胞、个体 ③. 参与 （3）草原上的羊包含多个物种，不属于种群；生物群落必须包含区域内所有生物，仅动植物不能构成群落 【解析】 【小问1详解】 器官由不同组织按一定次序结合形成，可执行特定功能；生物圈是最高层次的生命系统，包含了地球上包括锡林郭勒草原生态系统在内的所有生态系统。 【小问2详解】 草原雕是多细胞动物，一只草原雕属于个体层次；乳酸菌是单细胞生物，一个乳酸菌细胞既属于细胞层次，也属于个体层次。生态系统属于生命系统的结构层次，由生物群落与无机环境（阳光、土壤、水等）共同构成。沙土属于生态系统的非生物成分，因此参与构成生命系统的结构层次。 【小问3详解】 生活在一定区域的同种生物全部个体的集合叫作种群，草原上的羊包含多个物种，不属于同一种群；群落是在相同时间内，同一区域中所有生物的总和，包括动物、植物、微生物，仅动植物不能构成完整的生物群落。 22. 三河牛的乳腺细胞可合成、分泌乳清蛋白，该过程依赖多种细胞器协作。该细胞内乳清蛋白合成、加工与运输的过程如图所示，其中①~⑧代表细胞结构。回答下列问题： （1）乳清蛋白（N端氨基酸为亮氨酸）是乳蛋白的主要成分，在乳清蛋白合成、运输、分泌的过程中，膜面积增大、先增大后减小、减小的相关结构依次是__________（填图中序号）。研究发现，乳腺细胞中附着在内质网上的②的数量远多于骨骼肌细胞中的，请从细胞功能角度分析该差异出现的原因：________________________________________。 （2）若用3H标记亮氨酸追踪乳清蛋白的合成路径，则应标记亮氨酸的_________（填“R基”“氨基”或“羧基”）部位，标记其他位置可能会导致追踪失败，从肽链合成方式角度分析，原因是____________________________________。 （3）除乳清蛋白外，乳腺细胞同时合成胞内呼吸酶。若细胞内结构③受损，则可推测短时间内细胞中还能正常合成胞内呼吸酶，请简述可能原因：____________________________________。 【答案】（1） ①. ⑧⑤③ ②. 与骨骼肌细胞相比，乳腺细胞合成的分泌蛋白较多，分泌蛋白在附着于内质网上的核糖体中合成 （2） ①. R基 ②. 若标记亮氨酸的氨基或羧基，则被标记的H会随着脱水缩合丢失 （3）呼吸酶属于胞内蛋白，胞内蛋白不需要经过内质网的加工 【解析】 【小问1详解】 ③内质网：加工完蛋白质之后，内质网膜出芽，形成运输囊泡离开内质网，内质网膜面积持续减小。⑤高尔基体：内质网囊泡首先和高尔基体膜融合，高尔基体膜面积变大；之后高尔基体再出芽产生新的分泌囊泡，膜面积回落至原本大小。即高尔基体膜面积先增大、后减小，整体几乎不变。⑧细胞膜：高尔基体的分泌囊泡与细胞膜融合，囊泡膜并入细胞膜，细胞膜膜面积增大。所以在乳清蛋白合成、运输、分泌的过程中，膜面积增大、先增大后减小、减小的相关结构依次是⑧⑤③。腺细胞能够合成并分泌乳清蛋白（分泌蛋白），合成分泌蛋白需要在游离的核糖体上合成一段肽链，然后核糖体会转移并附着在内质网上；骨骼肌细胞主要合成胞内蛋白，依靠游离核糖体合成，因此乳腺细胞附着在内质网上的核糖体数量更多。 【小问2详解】 氨基酸脱水缩合时氨基与羧基脱水形成肽键；标记亮氨酸的氨基或羧基，则被标记的H会随着脱水缩合丢失； R基一般不会参与肽键合成、不会随水流失，所以应标记亮氨酸的R基。 【小问3详解】 胞内呼吸酶属于胞内蛋白，由细胞质基质内游离核糖体合成，不需要内质网参与加工，内质网受损不会干扰游离核糖体合成胞内蛋白。 23. 老坛酸菜是我国传统发酵食品的代表之一，其制作过程遵循传统发酵工艺，以新鲜芥菜为原料，加入食盐、辣椒、花椒等辅料，密封于陶坛中，依赖自然环境中的微生物（主要为乳酸菌、酵母菌等）进行发酵。回答下列问题： （1）传统老坛酸菜发酵过程中的乳酸菌主要来自_________。需将坛口密封才能进行发酵过程，原因是_________。 （2）某同学尝试在家制作老坛酸菜，煮熟的芥菜需要冷却后再放入目的菌种，原因是____________________________________。发酵后期发现酸菜出现腐败变质现象，推测原因可能是__________________________________（答出1点）。 （3）近年来，某企业采用“自然接种+人工辅助接种优良乳酸菌”的方式对传统老坛酸菜发酵工艺进行优化，优化后的发酵工艺体现了传统发酵与现代技术结合的优势，其优势是__________________。 【答案】（1） ①. 新鲜芥菜表面、环境等 ②. 乳酸菌发酵时进行的是无氧呼吸，密封可以提供无氧环境 （2） ①. 防止高温杀死菌种 ②. 坛口密封不严，导致杂菌污染；发酵罐或原料清洗不彻底，残留杂菌；发酵温度过高，导致杂菌大量繁殖；食盐用量不足，无法抑制杂菌生长 （3）既能保留传统发酵食品的独特风味，又能通过人工干预提高发酵效率、产品安全性和稳定性 【解析】 【小问1详解】 野外环境下，空气、蔬菜表皮附着大量野生微生物，传统老坛酸菜发酵过程中的乳酸菌主要来自新鲜芥菜表面、环境等。乳酸菌属于严格厌氧菌，密封可以创造无氧环境，保障乳酸菌无氧呼吸产生乳酸。 【小问2详解】 芥菜高温煮沸之后温度很高，如果立刻投入菌种，高温会杀死乳酸菌，因此必须冷却至适宜温度再投放菌种。发酵后期发现酸菜出现腐败变质现象，原因可能是坛口密封不严，氧气进入坛内氧气抑制乳酸菌、促使好氧菌大量繁殖；食盐投放量过少，盐浓度太低无法压制杂菌；发酵环境温度过高，高温利于杂菌繁殖，乳酸菌繁殖受温度限制。 【小问3详解】 传统发酵只依靠蔬菜表面自带野生菌种，菌种数量少、发酵起步慢；菌种品质不稳定；前期杂菌容易抢占优势，酸菜容易变质、风味波动大。优化后的发酵工艺优势是既能保留传统发酵食品的独特风味，又能通过人工干预提高发酵效率、产品安全性和稳定性。 24. 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。将基因型为XFXS的女性皮肤组织，利用含血清（含有生长因子、激素、多肽及天然酶抑制剂等多种成分）的培养液进行原代培养，然后制成细胞悬液，转入无血清培养液对不同的单个细胞分别进行单克隆培养。回答下列问题： （1）将原代培养的细胞制成细胞悬液前，需要用________对其进行处理，使之分散成单个细胞。 （2）培养液需要定时更换，目的是________。细胞转入无血清培养液培养时需要加入酶抑制剂，根据题意可推测，其目的是________。 （3）分别从原代培养和各单克隆培养的培养基中取样，对提取到的G6PD进行电泳检测，结果如图所示。其中S型蛋白是XS基因的表达产物，F型蛋白是XF基因的表达产物。 ①单克隆培养细胞3的基因型为________（填“XFXF”“XFXS”或“XSXS”）。 ②根据结果推测，该女性细胞中可能存在一条X染色体随机失活（染色体失活后上面的基因无法正常表达）的现象，作出该推测的理由是________。 【答案】（1）胰蛋白酶、胶原蛋白酶 （2） ①. 清除细胞代谢物，防止代谢物积累对细胞自身产生危害；同时补充营养物质，保证细胞的营养供应 ②. 保护细胞和培养基中的活性蛋白不被残留的胰蛋白酶或胶原蛋白酶损伤 （3） ①. XFXS ②. 原代培养细胞可以产生S型和F型两种G6PD，而单克隆培养细胞1~细胞9中均只提取到S型和F型两种G6PD中的一种，说明这些细胞中只有XF基因或XS基因能正常表达，而另一种基因无法正常表达 【解析】 【小问1详解】 动物贴壁生长的细胞之间依靠蛋白质粘连，使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶，可以分解细胞间粘连蛋白，将组织分散成单个细胞，制备细胞悬液。 【小问2详解】 细胞培养过程会排出代谢废物，废物堆积会毒害细胞；清除细胞代谢物，防止代谢物积累对细胞自身产生危害且能补充营养成分。题干指明血清含有天然酶抑制剂；现在更换为无血清培养液，缺少抑制剂，添加酶抑制剂可以保护细胞和培养基中的活性蛋白不被残留的胰蛋白酶或胶原蛋白酶损伤。 【小问3详解】 所有单克隆培养的细胞最初均来源于基因型为XFXS的同一个体细胞，遗传物质相同，故细胞3的基因型为XFXS；据电泳结果可知原代培养细胞可以产生S型和F型两种G6PD，而单克隆培养细胞1~细胞9中均只提取到S型和F型两种G6PD中的一种，说明这些细胞中只有XF基因或XS基因能正常表达，而另一种基因无法正常表达。 25. 乳铁蛋白（LF）是乳汁中一种重要的非血红素铁结合糖蛋白，具有广谱抗菌、抗病毒、抗肿瘤、调节免疫等多种生理功能，被认为是一种新型抗菌、抗癌药物。下图表示研究人员开展人乳铁蛋白（hLF）基因乳腺特异性表达载体构建及转化的研究过程。回答下列问题： 注：AseⅠ、NheⅠ、SalⅠ、BamHⅠ代表相关限制酶切位点，NeoR是新霉素抗性基因。GFP基因是绿色荧光蛋白基因，在荧光显微镜下可观察到含该基因的细胞发出绿色荧光。 （1）过程①操作中需要用到的酶是________。由图可知，为了构建重组质粒，研究人员在hLF基因两侧添加了________和________（填图中限制酶）的识别序列。 （2）过程②为________，是基因工程基本操作程序的第二步。可利用PCR检测重组质粒上的BLG基因与hLF基因是否正确连接，请从引物的特异性角度出发，简单写出实验方案：________________________________________。 （3）将转化后的山羊细胞X置于含新霉素的培养液中培养，能够存活的细胞X说明其已经导入了________（填图中质粒名称），再借助荧光显微镜从存活的细胞中筛选出________的细胞即可能为导入了重组质粒的受体细胞。 【答案】（1） ①. 逆转录酶、耐高温的DNA聚合酶 ②. NheⅠ ③. SalⅠ （2） ①. 构建基因表达载体 ②. 设计一对特异性引物，其中一条引物结合在BLG基因上游的3´端上，另一条引物结合在hLF基因下游的3´端上，观察是否可以扩增出相应条带 （3） ①. pEB质粒或pEBL质粒 ②. 不能发出绿色荧光 【解析】 【小问1详解】 分析过程①表示从人乳腺中提取人乳铁蛋白（hLF）的mRNA，经逆转录形成人乳铁蛋白（hLF）的DNA，然后PCR扩增该基因。过程①操作中需要用到的酶是逆转录酶和耐高温的DNA聚合酶。目的基因要插入启动子和终止子之间，分析pEB质粒图和pEBL质粒可知，hLF基因插入到原GFP基因所在的位置，所以研究人员在hLF基因两侧添加了NheⅠ和SalⅠ的识别序列。 【小问2详解】 基因工程包括四步：①获取目的基因 → ②基因表达载体的构建 → ③将载体导入受体细胞 → ④目的基因的检测与鉴定，过程②为基因表达载体的构建，是基因工程最核心步骤。检测重组质粒上的BLG基因与hLF基因是否正确连接可以设计一对特异性引物，其中一条引物结合在BLG基因上游的3´端上，另一条引物结合在hLF基因下游的3´端上，观察是否可以扩增出相应条带。若扩增出特异性条带，则说明BLG基因与hLF基因正确连接；若没有正确连接，则无法扩增出产物。 【小问3详解】 由于新霉素抗性基因不管是普通质粒还是重组质粒中都没有被破坏，将转化后的山羊细胞X置于含新霉素的培养液中培养，能够存活的细胞X说明其已经导入了pEB质粒或pEBL质粒。将目的基因插入质粒时使用Nhe Ⅰ、Sal Ⅰ限制酶破坏了GFP基因，不能借助荧光显微镜观察到绿色荧光，故再借助荧光显微镜从存活的细胞中筛选出不能发出绿色荧光的细胞即为导入了重组质粒的受体细胞。最终可从转基因山羊的乳汁中分离到乳铁蛋白。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $