精品解析：山西省晋中市介休市第一中学校2025-2026学年高二下学期7月期末考试生物试题

介休一中2025-2026学年高二下学期7月考试生物试题 考试时间：75分钟 试题满分：100分 一、选择题（本题包括16小题，每小题3分，共48分。每小题只有1个选项符合题意） 1. 黏菌是一类特殊的真核微生物，主要以土壤中的细菌和酵母菌为食，环境胁迫使黏菌由单细胞聚集形成多细胞聚集体（具有孢子囊结构）。关于黏菌，下列说法错误的是（　　） A. C、H、O、N四种元素含量很高 B. 环状DNA分子存在于拟核中 C. 单细胞生活阶段主要以有丝分裂方式繁殖 D. 吞噬食物需要消耗能量 【答案】B 【解析】 【详解】A、所有具有细胞结构的生物中，C、H、O、N都是含量最高的四种元素，黏菌是有细胞结构的真核生物，因此这四种元素含量很高，A正确； B、黏菌是真核生物，有以核膜为界限的细胞核，不存在原核生物特有的拟核结构，环状DNA存在于拟核是原核生物的特征，B错误； C、真核细胞的体细胞主要的增殖方式为有丝分裂，黏菌单细胞生活阶段为真核细胞，主要以有丝分裂方式进行繁殖，C正确； D、黏菌吞噬食物的方式为胞吞，胞吞过程需要消耗能量，D正确。 2. 研究人员常通过观察现象对相关物质或代谢过程进行检测和推测，下列说法正确的是（ ） A. 经蛋白酶水解后的蛋清溶液与新配制的双缩脲试剂混合后不发生紫色反应 B. 将斐林试剂加入萌发的大麦种子研磨液，经水浴加热后可生成砖红色沉淀 C. 向含DNA的溶液中加预冷95%酒精，静置后离心，取上清液即为DNA D. 利用果酒生产果醋的过程中，可观察气泡生成速率判断醋酸菌的呼吸强度 【答案】B 【解析】 【详解】A、蛋白酶的化学本质是蛋白质，且蛋清经蛋白酶水解后产生的多肽仍含有肽键，肽键可与双缩脲试剂发生紫色反应，因此混合后会出现紫色反应，A错误； B、萌发的大麦种子中淀粉会水解为还原糖（如麦芽糖、葡萄糖），还原糖与斐林试剂在水浴加热条件下反应生成砖红色沉淀，因此加入斐林试剂水浴加热后可生成砖红色沉淀，B正确； C、DNA不溶于预冷的95%酒精，加入酒精后DNA会以白色絮状物形式析出，离心后沉淀物为DNA，上清液为可溶性杂质，C错误； D、醋酸菌进行有氧呼吸将酒精转化为醋酸的过程不产生CO2，无气泡生成，因此无法通过气泡产生速率判断醋酸菌的呼吸强度，D错误。 3. 将某油料植物种子置于黑暗、蒸馏水中萌发，实验期间不进行光合作用，检测发现一周内种子干重不降反升。下列对该现象解释最合理的是（ ） A. 种子吸收了环境中的无机盐 B. 种子的无氧呼吸产生了有机物 C. 脂肪转化为糖类等有机物，导致干重增加 D. 种子吸收的水分全部转化为结合水，增加了干重 【答案】C 【解析】 【详解】A、实验中种子置于蒸馏水中，环境不存在无机盐，种子无法从环境吸收无机盐，A错误； B、无氧呼吸是分解有机物释放能量的过程，不会积累新的有机物，反而会消耗有机物使干重下降，B错误； C、油料种子富含脂肪，与糖类相比脂肪的氧元素含量更低、氢元素含量更高，脂肪转化为糖类等有机物的过程中，会结合来自水中的氧元素，使有机物总质量升高，因此干重增加，C正确； D、干重是细胞除去全部水分后的重量，无论是自由水还是结合水都不属于干重范畴，水分存在形式的变化不会影响干重，D错误。 4. 在细胞培养液中加入某大分子荧光染料，细胞膜上先出现荧光，一段时间后，胞内逐渐出现多个荧光小泡。下列叙述错误的是（　　） A. 小泡的形成与膜流动性有关 B. 小泡的形成过程无需消耗能量 C. 小泡的运输与细胞骨架相关 D. 小泡的形成速率受温度的影响 【答案】B 【解析】 【详解】A、胞吞过程中细胞膜内陷形成小泡，该过程依赖生物膜的流动性，因此小泡的形成与膜流动性有关，A正确； B、胞吞是细胞主动摄入大分子的过程，需要消耗细胞呼吸释放的能量，B错误； C、细胞骨架具有维持细胞形态、参与细胞内物质运输和囊泡转运的功能，因此小泡的运输与细胞骨架相关，C正确； D、温度会影响细胞膜的流动性，也会通过影响呼吸酶的活性改变能量供应，因此小泡的形成速率受温度的影响，D正确。 5. 染料Z是一种能与蛋白质上的氨基特异性结合的小分子荧光染料。该染料不能透过细胞膜且对细胞无毒性。下列说法错误的是（　　） A. 染料Z和苏丹Ⅲ都属于脂溶性染料 B. 染料Z和甲紫都可以将染色体染色 C. 染料Z和台盼蓝都可以用于鉴别动物细胞是否死亡 D. 染料Z和标记膜蛋白的红、绿荧光染料都可用于探究细胞膜的流动性 【答案】A 【解析】 【详解】A、苏丹Ⅲ是脂溶性染料，可通过相似相溶原理自由扩散透过细胞膜；染料Z不能透过细胞膜，说明其不具备脂溶性，因此不都属于脂溶性染料，A错误； B、染色体由DNA和蛋白质组成，染料Z可与蛋白质的氨基特异性结合，当细胞死亡后细胞膜丧失选择透过性，染料Z可进入细胞结合染色体上的蛋白质使其染色；甲紫是碱性染料，可使染色体着色，二者都可以将染色体染色，B正确； C、活细胞的细胞膜具有选择透过性，染料Z和台盼蓝都无法进入活细胞，死细胞细胞膜失去选择透过性，两种染料都可进入细胞使细胞显色，因此都可用于鉴别动物细胞是否死亡，C正确； D、染料Z不能透过细胞膜，可特异性结合细胞膜外侧的膜蛋白的氨基，实现对膜蛋白的荧光标记，和标记膜蛋白的红、绿荧光染料作用类似，都可用于探究细胞膜的流动性，D正确。 6. 大规模生产治疗性单克隆抗体时，常采用悬浮细胞表达系统。下列叙述错误的是（ ） A. 该类抗体在细胞中的翻译起始于游离在细胞质基质中的核糖体 B. 该类抗体在细胞的内质网和高尔基体中修饰加工 C. 悬浮细胞在培养过程中出现增殖能力下降的原因是接触抑制 D. 一种治疗性单克隆抗体一般只能与一种抗原结合 【答案】C 【解析】 【详解】A、抗体属于分泌蛋白，分泌蛋白的翻译起始于细胞质基质中游离的核糖体，合成一段信号肽后才转移至附着在内质网的核糖体上继续合成，A正确； B、抗体作为分泌蛋白，需要先在内质网中完成折叠、初步糖基化等加工，再进入高尔基体完成进一步的修饰加工，才具备生物活性，B正确； C、接触抑制是贴壁生长的动物细胞特有的现象，即贴壁细胞增殖到细胞间相互接触时就会停止分裂增殖，悬浮培养的细胞不需要贴壁生长，不会出现接触抑制，其增殖能力下降与接触抑制无关，C错误； D、单克隆抗体具有特异性强的特点，一种单克隆抗体只能识别一种抗原的特定抗原表位，因此一般只能与一种抗原结合，D正确。 7. 从牛卵巢采集卵母细胞进行体外成熟培养，探究高温对卵母细胞成熟的影响，结果如图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A. 选取发育状态一致的卵母细胞进行培养 B. 体外培养卵母细胞时通常加入的血清不能采用湿热灭菌的方法灭菌 C. 对采集的卵母细胞传代培养以产生大量卵细胞 D. 体外培养时高温降低了卵母细胞发育的成熟率 【答案】C 【解析】 【详解】A、实验设计需遵循单一变量原则，选取发育状态一致的卵母细胞可排除无关变量对实验结果的干扰，A正确； B、血清中含有大量不耐热的活性成分（如生长因子、蛋白质类物质），湿热灭菌的高温环境会破坏这些成分，因此血清不能采用湿热灭菌，通常用过滤法除菌，B正确； C、卵母细胞是高度分化的细胞，不具备有丝分裂增殖的能力，无法通过传代培养产生大量卵细胞，采集的卵母细胞需培养至减数第二次分裂中期才具备受精的能力，C错误； D、对比两组实验，总培养时长均为24h，经过高温处理的实验组，成熟卵母细胞的数量更少，即卵母细胞发育成熟率更低，说明高温会降低卵母细胞发育的成熟率，D正确。 8. 生物碱为铁皮石斛的次级代谢产物。下图是以铁皮石斛为材料，培养拟原球茎(简称PLBs, 类似愈伤组织)生产生物碱的实验流程。下列说法正确的是（ ） A. 生物碱是铁皮石斛生长所必需的物质 B. 图中过程①为脱分化形成PLBs, 过程②为再分化生产生物碱 C. 培养高产细胞系应选择细胞数量/生物碱产量值大的PLBs D. 该过程运用了植物细胞培养技术，原理是植物细胞增殖 【答案】D 【解析】 【分析】在一定的激素和营养等条件的诱导下，外植体可脱分化形成愈伤组织。在脱分化过程中，植物细胞的分化程度逐渐降低，全能性逐渐升高。脱分化形成的愈伤组织由一些排列疏松而无规则，高度液泡化、呈无定形状态的薄壁细胞组成。 【详解】A、生物碱是铁皮石斛的次生代谢物，不是细胞进行正常生命活动必需的物质，A错误； B、题意显示PLBs类似愈伤组织，因此，图中过程①为脱分化形成PLBs，过程②为植物细胞培养过程，不属于再分化，B错误； C、该实验目的是要生产生物碱，故需要选择生物碱产量/细胞数量的值大的PLBs作为高产细胞系，C错误； D、该过程中的PLBs类似愈伤组织，运用了植物细胞培养技术，过程②为植物细胞培养过程，原理是植物细胞增殖，D正确。 故选D。 9. 将黑色小鼠囊胚的内细胞团部分细胞注射到白色小鼠囊胚腔中，接受注射的囊胚发育为黑白相间的小鼠（Mc）。据此分析，下列叙述正确的是（　　） A. 获得Mc的生物技术属于核移植 B. Mc表皮中有两种基因型的细胞 C. 注射入的细胞会分化成胎盘和胎膜 D. 将接受注射的囊胚进行二等分时，注意要将滋养层细胞均等分割 【答案】B 【解析】 【详解】A、内细胞团由已经分化的细胞组成，获得Mc的生物技术并未利用核移植技术，A错误； B、接受注射的囊胚发育为黑白相间的小鼠，说明Mc表皮中有两种基因型的细胞，B正确； C、内细胞团能发育成胎儿的各种组织，注射的细胞来自黑色小鼠的内细胞团，会分化成Mc的多种组织，C错误； D、利用胚胎分割技术将接受注射的囊胚均分为二，注意要将内细胞团进行均等分割，D错误。 10. 利用细胞融合技术将小鼠骨髓瘤细胞和烟草叶肉细胞融合，拟通过观察细胞器确认杂种细胞，下列能作为确认依据的细胞器组合是（　　） A. 线粒体和液泡 B. 叶绿体和中心体 C. 叶绿体和线粒体 D. 内质网和高尔基体 【答案】B 【解析】 【详解】A、线粒体是动物细胞和植物细胞共有的细胞器，无法证明细胞中含有小鼠骨髓瘤细胞的成分，A错误； B、叶绿体是烟草叶肉细胞特有的细胞器，小鼠骨髓瘤细胞不含叶绿体；中心体是动物细胞特有的细胞器，烟草是高等植物，细胞不含中心体，若融合细胞同时含有这两种细胞器，即可证明是两种细胞融合得到的杂种细胞，B正确； C、线粒体是两种细胞共有的细胞器，仅能通过叶绿体证明含有烟草叶肉细胞的成分，无法证明含有小鼠骨髓瘤细胞的成分，C错误； D、内质网和高尔基体是动物细胞和植物细胞共有的细胞器，无法区分两种细胞的成分，D错误。 11. 植物细胞工程技术可用于马铃薯育种，下列分析错误的是（ ） A. 将融合的原生质体在细胞壁形成前转到固体培养基上，以诱导愈伤组织 B. 用优良栽培品种与抗青枯病野生种进行体细胞杂交，以获得抗病新材料 C. 采集四倍体植株的花粉进行组织培养，以获得单倍体植株 D. 利用茎尖进行组织培养，以培育脱毒苗 【答案】A 【解析】 【详解】A、融合的原生质体需要先再生出细胞壁，完成细胞融合的标志后，再转到固体培养基上诱导脱分化形成愈伤组织，细胞壁形成前转移无法正常诱导愈伤组织，A错误； B、体细胞杂交技术可克服远缘杂交不亲和的障碍，将优良栽培品种和抗病野生种的体细胞融合，可培育出同时具备两种优良性状的抗病新材料，B正确； C、单倍体是由配子直接发育而来的个体，花粉是植物的雄配子，无论亲本是几倍体，经花粉组织培养得到的植株都是单倍体，C正确； D、植物茎尖分生区细胞分裂旺盛，几乎不含病毒，利用茎尖进行组织培养可获得脱毒苗，D正确。 12. 泡菜中存在大量的乳酸菌，摄入一定量的乳酸菌利于保持肠道菌群平衡，但要发挥良好的保健作用，则要有足够量的活性菌经过胃到达小肠才可实现。下列叙述正确的是（ ） A. 平板倒置培养可为乳酸菌生长创造无氧环境 B. 图2中过程Ⅰ采用的接种方法可以纯化计数乳酸菌（平板划线法不能计数） C. 图2中富集培养所用培养液的pH可控制在1.5左右 D. 经图1过程获得了菌落数分别为80、79、81的三个平板，则10毫升陈泡菜水中的活菌数为8.0×106个 【答案】C 【解析】 【详解】A、平板倒置培养的作用是防止皿盖的冷凝水滴落污染培养基、减少培养基水分蒸发，不能为乳酸菌创造无氧环境，A错误； B、图2过程Ⅰ是平板划线法，该方法仅能纯化乳酸菌，无法对活菌进行计数，B错误； C、据题干可知要发挥乳酸菌良好的保健作用，则要有足够量的活性菌经过胃到达小肠才可实现。胃中的pH为1.5左右，故富集培养所用培养液的pH可控制在1.5左右，C正确； D、三个平板的平均菌落数为（80＋79＋81）/3=80个，总稀释倍数为104，涂布体积为0.1mL，每毫升原泡菜水活菌数=C÷V×M（C为平均菌落数、V是涂布液的体积、M是稀释倍数）=80÷0.1×104=8.0×106个，则10毫升陈泡菜水中的活菌数为8.0×107个，D错误。 13. “渐冻症”是由突变的基因导致运动神经元合成了某种毒蛋白，从而阻碍了轴突内营养物质的流动。最新研究结果表明，利用诱导多功能干细胞（iPS细胞）制作前体细胞，然后移植给渐冻症实验鼠，能延长其寿命。下列相关描述错误的是（　　） A. iPS细胞分化成的多种细胞中所有核酸相同，蛋白质却不完全相同 B. iPS细胞分化的实质是基因的选择性表达，细胞种类增多 C. 若将合成毒蛋白的基因替换，则可以起到良好的治疗作用 D. 植入神经干细胞，恢复部分受损的运动功能，会使“渐冻症”病情改善 【答案】A 【解析】 【详解】A、核酸包括DNA和RNA，iPS细胞分化成多种细胞的过程中，不同细胞的核DNA相同，但由于基因的选择性表达，细胞内的RNA存在差异，蛋白质也不完全相同，A错误； B、细胞分化的实质是基因的选择性表达，该过程会使细胞的形态、结构和功能产生稳定性差异，最终细胞种类增多，B正确； C、渐冻症是突变基因指导合成毒蛋白导致的，若替换合成毒蛋白的致病基因，可阻止毒蛋白的合成，能起到良好的治疗作用，C正确； D、植入的神经干细胞可分化出正常的运动神经元，恢复部分受损的运动功能，可改善“渐冻症”病情，D正确。 14. 为探究编码酪氨酸酶的T基因对狗毛色的影响，有人通过如图所示过程获得了两只小狗。下列叙述正确的是（ ） A. 采集卵子后立即与获能的精子受精，可有效提高受精率 B. 将胚胎1培养至桑葚胚期，取成纤维细胞完成后续实验 C. 用蛋白酶合成抑制剂激活重构胚，可获得胚胎2和胚胎3 D. 利用现代生物技术获得的两只小狗毛色和性别可能都不一样 【答案】C 【解析】 【详解】A、采集的卵子需要在体外培养至减数第二次分裂中期（MⅡ 中期）才具备受精能力，不能采集后立即和获能精子受精，否则无法正常完成受精，A错误； B、桑葚胚阶段的细胞尚未分化，还没有成纤维细胞；囊胚仅分化为滋养层细胞和内细胞团，尚未分化形成成纤维细胞，无法直接分离得到成纤维细胞，B错误； C、核移植后形成的重构胚需人工激活以启动发育程序，常用方法包括蛋白酶合成抑制剂、电脉冲或钙离子载体等，可有效诱导胚胎2和胚胎3的形成，C正确； D、成纤维细胞甲与乙均来自同一胚胎1，核遗传物质除T基因外其余都相同，性染色体组成一致，故小狗甲与乙性别一定相同。毛色受T基因影响（编码酪氨酸酶），敲除后可能导致白化表型，但其他毛色相关基因未变，因此毛色“可能不同”，D错误。 15. 洋葱表皮细胞的质膜紧贴细胞壁。为在荧光显微镜下辨别某荧光标记蛋白是否定位于表皮细胞的质膜，可使细胞质壁分离后再观察。下列分析正确的是（ ） A. 质壁分离过程中，细胞液的渗透压逐渐减小 B. 原生质层比细胞壁的伸缩性小是质壁分离的原因之一 C. 紫色洋葱鳞片叶的内表皮不可作为该实验的实验材料 D. 除质壁分离外，也可利用纤维素酶和果胶酶制备原生质体后再观察 【答案】D 【解析】 【详解】A、质壁分离过程中细胞不断失水，细胞液溶质浓度升高，渗透压随浓度升高而逐渐增大，A错误； B、质壁分离的内因是原生质层的伸缩性比细胞壁大，细胞失水时原生质层收缩程度大于细胞壁，才会出现质壁分离现象，B错误； C、本实验的观察指标是荧光标记蛋白的分布，紫色洋葱鳞片叶内表皮细胞可以发生质壁分离，且无紫色大液泡干扰荧光观察，可作为该实验的材料，C错误； D、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁后得到的原生质体，最外层即为质膜，可通过观察荧光的位置判断蛋白是否定位于质膜，D正确。 16. RT-PCR是将RNA逆转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术，可以用来检测RNA病毒，具体过程如下，有关叙述错误的是（ ） A. 过程Ⅰ需用到游离的脱氧核苷酸、逆转录酶、核酸酶等 B. 利用RT-PCR技术获取的目的基因能在物种之间交流 C. 图中单链cDNA在PCR扩增n次后，理论上需要引物B2n-1个 D. 该技术提高了待测RNA逆转录产生的DNA数量，提高了检测的灵敏度 【答案】A 【解析】 【详解】A、过程 Ⅰ 是逆转录：以 mRNA 为模板、脱氧核苷酸为原料，在逆转录酶催化合成 cDNA，该过程不需要添加核酸酶，A错误； B、由于生物共用一条密码子表，所以利用RT-PCR技术获取的目的基因可以转入其他物种，且正常表达，因此利用RT-PCR技术获取的目的基因能在物种之间交流，B正确； C、经过过程Ⅰ形成双链DNA，所以单链cDNA在PCR扩增n次，实际相当于双链DNA扩增了n-1次，所以根据DNA的半保留复制可知理论上需要2n-1个引物B，C正确； D、RT- PCR将RNA逆转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增反应，提高了待测RNA逆转录产生的DNA数量，提高了检测的灵敏度，D正确。 二、非选择题（共5小题，除标注外每空1分，共52分） 17. 研究发现，分泌蛋白的释放分为经典分泌途径和非经典分泌途径。经典分泌依赖内质网—高尔基体加工，需N端信号肽引导；非经典分泌不依赖该途径，存在多种释放方式（如图）。回答下列问题： （1）经典分泌途径中，参与分泌蛋白合成、加工、运输和能量供应的细胞器依次为____________________________________；用__________法分离这些细胞器；囊泡与细胞膜融合释放蛋白质的过程________（填“需要”或“不需要”）载体蛋白的协助。 （2）白细胞介素-1β是一种由153个氨基酸组成的单链非经典分泌蛋白，在细胞质基质中游离核糖体合成后，通过图中a（溶酶体分泌）途径释放到细胞外，若该蛋白肽链中第1位氨基酸被切除，则剩余肽链中含有的肽键数为_________个；若人为在该蛋白肽链的N端连接一段经典分泌途径所需的信号肽，推测该蛋白将主要通过_________（填“经典分泌”或“非经典分泌”）途径释放，请从信号肽功能的角度，阐述判断依据：_________________________________。 （3）若细胞中过程c的分泌受阻，外泌体无法与细胞膜融合，引发细胞应激反应；非经典分泌途径过程中_________（填字母）过程可使细胞膜面积增大，_________（填字母）过程可使细胞膜面积减小。 （4）研究发现，部分细胞在受到病原体感染时，会优先通过非经典分泌途径分泌炎症因子，请从分泌效率和功能角度分析其意义：_____________________________________________（答出一点即可）。 【答案】（1） ①. 核糖体、内质网、高尔基体、线粒体 ②. 差速离心 ③. 不需要 （2） ①. 151 ②. 经典分泌 ③. 信号肽可引导肽链进入内质网，启动内质网 — 高尔基体的经典分泌途径 （3） ①. ac ②. d （4）非经典分泌无需内质网 — 高尔基体加工，分泌速度更快，可快速释放炎症因子启动免疫应答 【解析】 【小问1详解】 参与分泌蛋白合成、加工、运输和能量供应的细胞器依次为：核糖体、内质网、高尔基体、线粒体（核糖体合成→内质网初步加工→高尔基体进一步加工，线粒体供能）。用差速离心法分离细胞器。囊泡与细胞膜融合释放蛋白质的过程不需要载体蛋白的协助（属于膜融合的胞吐过程，依赖膜的流动性）。 【小问2详解】 肽键数 = 氨基酸数 - 肽链数 = (153 - 1) - 1 = 151 个。 若在 N 端连接经典分泌的信号肽，该蛋白将主要通过经典分泌途径释放。判断依据：信号肽可引导新生肽链进入内质网，启动内质网 — 高尔基体的经典分泌加工与运输途径，从而使蛋白不再通过非经典途径释放。 【小问3详解】 若过程 c（外泌体介导）的分泌受阻，外泌体无法与细胞膜融合，会导致细胞内外泌体积累，引发细胞应激反应。 使细胞膜面积增大的过程：a（溶酶体分泌）、c（外泌体介导）（囊泡 / 膜泡与细胞膜融合，膜面积增加）。 使细胞膜面积减小的过程：d（质膜出泡）（形成囊泡，膜面积减少）。 【小问4详解】 从分泌效率看：非经典分泌不依赖内质网 — 高尔基体的加工运输，步骤更短，分泌速度更快，能在病原体感染时快速释放炎症因子启动免疫应答；从功能角度看：可避免炎症因子在经典分泌途径中被过度修饰或降解，保证其活性与功能完整性，更高效地发挥免疫防御作用。 18. 发酵工程在医药上的应用非常广泛，其中青霉素的发现和产业化生产进一步推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。产黄青霉菌是一种广泛存在于自然界中的霉菌，是生产青霉素的重要工业菌种。工业上生产青霉素的发酵工程流程如图所示。回答下列相关问题： （1）在制备发酵罐中的培养液时，除了添加________、________、水和无机盐等主要的营养成分外，还需要将pH调至________性。 （2）整个发酵过程的中心环节是________。为保证产品质量，需要随时检测培养液中的________、________等，以了解发酵进程。过程④可采用________方法将菌体分离干燥。 （3）支原体肺炎是一种常见的传染病，其病原体是一种称为肺炎支原体的单细胞生物。支原体可能是最小、最简单的单细胞生物，没有细胞壁，遗传物质是DNA。临床发现，大环内酯类药物如罗红霉素、阿奇霉素对支原体有很好的疗效，而青霉素类药物能有效抑制其他细菌生长繁殖而对支原体并不起作用。尝试从细胞结构方面解释，青霉素药物对支原体引起的肺炎治疗无效的原因可能是____________。 【答案】（1） ①. 碳源 ②. 氮源 ③. 酸 （2） ①. 发酵罐内发酵 ②. 溶氧量 ③. pH ④. 过滤、沉淀 （3）青霉素的作用机制是抑制细菌细胞壁的合成，而支原体没有细胞壁，因此青霉素对其不起作用 【解析】 【小问1详解】 不同的培养基的配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐等营养物质。除了上述几种主要的营养物质，培养基还需要满足微生物对pH、特殊营养物质以及O2的需求。培养青霉菌需要将pH调至酸性。 【小问2详解】 发酵罐中发酵是发酵工程的中心环节。在发酵过程中，为保证产品质量，需要随时检测培养液中的溶氧量、pH等。如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥即可得到产品，如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。过程④获得的发酵产品是微生物细胞本身，可采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥。 【小问3详解】 青霉素药物的作用机理主要是抑制细菌细胞壁的形成导致细菌细胞破裂死亡，而支原体无细胞壁，因而青霉素对支原体无效。 19. 某抗膜蛋白治疗性抗体药物研发过程中，需要表达N蛋白胞外段，制备相应的单克隆抗体，增加其对N蛋白胞外段特异性结合的能力。N蛋白胞外段抗原制备流程如图1，分析回答下列问题： （1）用脂质体（如图2）将重组慢病毒质粒导入病毒包装细胞，质粒被包在脂质体________（填“a”或“b”）处。 （2）N蛋白胞外段单克隆抗体制备流程如图3，用N蛋白胞外段作为抗原对小鼠进行免疫后，取小鼠脾组织用________酶处理，制成细胞悬液，置于含有______________混合气体的________中培养，离心收集小鼠的B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞进行融合，利用了细胞膜______________的结构特点。 （3）用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进行克隆化培养。用___________原理检测每孔中的抗体，筛选既能产生N蛋白胞外段抗体，又能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株，将其进行扩大培养，扩大培养的方法有哪些___________________________，经扩大培养后，提取单克隆抗体。 （4）利用此方法获得的单克隆抗体的优点是_______________________________________（答出任意两点）。 【答案】（1）b   （2） ①. 胰蛋白或胶原蛋白 ②. 95%空气和5%的CO2 ③. CO2培养箱 ④. 一定流动性 （3） ①. 抗原与抗体杂交特异性结合 ②. 体外培养或在小鼠腹腔中培养  （4）能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备     【解析】 【小问1详解】 图2中a处表示疏水区，b处表示亲水区；重组慢病毒质粒导入病毒包装细胞需要依赖膜融合，且核酸分子为亲水性的，质粒是环状的DNA分子，即质粒是亲水性的，故质粒被包在脂质体的b处。 【小问2详解】 进行动物细胞培养时，需要取小鼠脾组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，制成细胞悬液，置于含有95%空气和5%的CO2混合气体的CO2培养箱中培养，B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合的过程利用了细胞膜一定流动性的结构特点。 【小问3详解】 可以用抗原-抗体杂交技术，即抗原与抗体杂交特异性结合的原理检测每孔中的抗体，筛选既能产生N蛋白胞外段抗体，又能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株，经体外扩大培养，扩大培养的方法有体外培养或在小鼠腹腔中培养，经扩大培养后，提取单克隆抗体。 【小问4详解】 利用此方法获得的单克隆抗体的优点是能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备。 20. 已知某种青花菜远缘植物的细胞质中存在抗除草剂基因，研究人员利用植物体细胞杂交技术，培育细胞质中存在抗除草剂基因的优良青花菜新品种，基本流程如图所示，图中字母代表相应的过程。回答下列问题： （1）图中________（填“甲”或“乙”）植株是青花菜植株。 （2）过程B中常用______________________（答出2种）等化学方法诱导原生质体融合。 （3）步骤D代表________的过程，常用________________（填植物激素名称）诱导愈伤组织分化形成杂种植株，需要光照的是过程________（填字母）。 （4）研究人员发现，培育的青花菜新品种植株的细胞中具有抗除草剂基因，但未表现出抗除草剂的性状，推测其原因是________________________。 （5）由该实验可知，与传统杂交相比，植物体细胞杂交技术的优点是________________________。 【答案】（1）甲 （2）PEG融合法、高Ca2+-高pH融合法   （3） ①. 脱分化 ②. 生长素和细胞分裂素 ③. E （4）抗除草剂基因不能表达   （5）可以打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 【解析】 【小问1详解】 分析题意，青花菜远缘植物的细胞质中存在抗除草剂基因，则在植物体细胞杂交时应保留青花菜的细胞核和远缘植物的细胞质（含抗除草剂基因），图中的乙原生质体细胞核失去活性，但细胞质正常，应是青花菜远缘植物，甲的原生质体细胞质失活，应表示青花菜植株。 【小问2详解】 诱导原生质体融合的化学方法包括PEG融合法、高Ca2+-高pH融合法；由于细胞融合的概率低，融合细胞中具有未发生融合和同种细胞融合的细胞，需要从中筛选出杂种细胞，故过程C需要进行筛选。 【小问3详解】 图中 C 是融合细胞培养筛选，D 是由融合细胞形成愈伤组织的过程，在植物组织培养中步骤D称为脱分化，E 是由愈伤组织形成杂种植株的过程，称为再分化，植物组织培养过程中常用生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织分化形成杂种植株；关于光照：脱分化（D）一般避光进行（光照会抑制愈伤组织形成，促进分化）；再分化（E）过程需要光照，因为叶绿体的形成和幼苗的光合作用需要光，即需要光照的是过程E。 【小问4详解】 植物体细胞杂交过程中，由于基因间的相互作用，培育的青花菜新品种植株的细胞中具有抗除草剂基因，但由于抗除草剂基因不能表达，故未表现出抗除草剂的性状。 【小问5详解】 与传统杂交相比，植物体细胞杂交技术的优点是可以打破生殖隔离，实现远缘杂交育种。 21. 原蛋白在维持器官、组织、细胞等方面发挥着关键作用。科学家将合成胶原蛋白的基因kit导入大肠杆菌构建基因工程菌，过程如下图所示。请据图回答下列问题： （1）上图重组质粒中启动子的功能是_______________________________________，目的基因与质粒连接后可以导入不同物种细胞中表达出同种蛋白质，其原理是_______________，若导入原核生物大肠杆菌中，但由于原核细胞中缺少_______________等细胞器，影响表达产物进一步加工，可能会影响蛋白质的功能。 （2）已知kit基因的部分序列如下图，采用PCR技术进行扩增时，选用的引物为________（填字母），为使基因与质粒成功连接，需要在引物的________端添加________________两种限制酶识别序列。 5´-CGGGATCCA………………AGAATTCCG-3´ 3´-GCCCTAGGT………………TCTTAAGGC-5´ A. 5´-GCCCTAGGT-3´ B. 5´-CGGAATTCT-3´ C. 5´-CGGGATCCA-3´ D. 5´-GCCTTAAGA-3´ （3）正确选择引物后对目的基因进行PCR，PCR程序设置如图2所示，其中60℃20 s环节的目的是___________________，在PCR反应体系中除了添加模板、引物、耐高温的DNA聚合酶、4种dNTP外，一般还需要添加Mg2+，添加Mg2+的作用是___________________，获取的PCR产物还需要经_________鉴定。通常DNA分子片段带负电荷，所以电泳开始前应将PCR样品加入_________电极端的点样孔内。 （4）为便于纯化胶原蛋白，现改进生产路线，另将小段TAP基因序列（标签）与kit基因相连，构建出能表达融合蛋白的重组DNA（如下图，F1、F2、R1、R2表示引物）。为确定融合基因插入并且方向正确，进行PCR检测，可选择下图中的引物组合有_________（填字母）。 【答案】（1） ①. 是RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动目的基因转录 ②. 所有生物共用一套遗传密码（密码子具有通用性） ③. 内质网、高尔基体 （2） ①. B、C  ②. 5’ ③. BamHⅠ和EcoRⅠ （3） ①. 使引物与互补的DNA单链模板结合（退火/复性） ②. 激活耐高温DNA聚合酶（Taq酶）的活性 ③. 琼脂糖凝胶电泳 ④. 负（阴） （4）F2和R1 【解析】 【小问1详解】 上图重组质粒中启动子是RNA聚合酶识别和结合位点，能驱动基因的转录，目的基因与质粒连接后可以导入不同物种细胞中表达出同种蛋白质，这是因为所有生物共用一套遗传密码（密码子具有通用性），因此同一段mRNA序列在不同细胞中翻译出的氨基酸序列一致，若导入原核生物大肠杆菌中，由于原核细胞中缺少内质网和高尔基体等细胞器，影响表达产物进一步加工，可能会影响蛋白质的功能。 【小问2详解】 采用PCR技术进行扩增时需要根据目的基因的相关序列设计引物，引物需要分别结合目的基因两条链的3'端，子链沿5'→3'方向延伸，据此可以选择目的基因的上游引物序列为5'-CGGGATCCA-3'，对应C，下游引物序列为5'-CGGAATTCT-3'，对应反向引物选B；因此PCR过程中的引物是BC。DNA聚合酶只能从引物的3'端延伸子链，因此只能在引物的5'端添加额外的限制酶识别序列，这样可以保证目的基因的完整性；质粒上目的基因插入区域有三种限制酶识别位点，但HindⅢ在该区域外还有一个识别序列，因而只能选择限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ，因此需要在两种引物的5'端分别添加限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ的识别序列。 【小问3详解】 PCR的三步流程为变性→复性→延伸，60℃属于复性温度，该温度条件下可让引物和单链DNA模板互补配对结合；PCR技术中Mg2+是Taq酶的激活剂，激活耐高温DNA聚合酶的活性；核获取的PCR产物还需要经琼脂糖凝胶电泳法进行鉴定；由于DNA带负电，电泳时向正极移动，因此样品需要加在电泳槽的负极端点样孔中。 【小问4详解】 要验证融合基因插入且方向正确，需要引物组合的扩增区间跨载体序列和插入的融合基因，F1在载体启动子下游、插入片段外侧，搭配R1（载体终止子上游）：可扩增出覆盖整个融合插入片段的条带，可验证是否插入，但不能验证是否方向正确；F1搭配R2：扩增区间跨载体序列+kit基因部分序列，仅当融合基因正向插入时才能得到对应长度的扩增产物，但没有包含标签序列； 若选F2和R2，扩增区间仅在融合基因内部，无法验证插入到质粒的方向和位置。F2在kit基因上游，搭配R1扩增区间跨kit+TAP基因+载体终止子序列，不仅能检验是否插入，而且也可验证插入方向是否正确。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 介休一中2025-2026学年高二下学期7月考试生物试题 考试时间：75分钟 试题满分：100分 一、选择题（本题包括16小题，每小题3分，共48分。每小题只有1个选项符合题意） 1. 黏菌是一类特殊的真核微生物，主要以土壤中的细菌和酵母菌为食，环境胁迫使黏菌由单细胞聚集形成多细胞聚集体（具有孢子囊结构）。关于黏菌，下列说法错误的是（　　） A. C、H、O、N四种元素含量很高 B. 环状DNA分子存在于拟核中 C. 单细胞生活阶段主要以有丝分裂方式繁殖 D. 吞噬食物需要消耗能量 2. 研究人员常通过观察现象对相关物质或代谢过程进行检测和推测，下列说法正确的是（ ） A. 经蛋白酶水解后的蛋清溶液与新配制的双缩脲试剂混合后不发生紫色反应 B. 将斐林试剂加入萌发的大麦种子研磨液，经水浴加热后可生成砖红色沉淀 C. 向含DNA的溶液中加预冷95%酒精，静置后离心，取上清液即为DNA D. 利用果酒生产果醋的过程中，可观察气泡生成速率判断醋酸菌的呼吸强度 3. 将某油料植物种子置于黑暗、蒸馏水中萌发，实验期间不进行光合作用，检测发现一周内种子干重不降反升。下列对该现象解释最合理的是（ ） A. 种子吸收了环境中的无机盐 B. 种子的无氧呼吸产生了有机物 C. 脂肪转化为糖类等有机物，导致干重增加 D. 种子吸收的水分全部转化为结合水，增加了干重 4. 在细胞培养液中加入某大分子荧光染料，细胞膜上先出现荧光，一段时间后，胞内逐渐出现多个荧光小泡。下列叙述错误的是（　　） A. 小泡的形成与膜流动性有关 B. 小泡的形成过程无需消耗能量 C. 小泡的运输与细胞骨架相关 D. 小泡的形成速率受温度的影响 5. 染料Z是一种能与蛋白质上的氨基特异性结合的小分子荧光染料。该染料不能透过细胞膜且对细胞无毒性。下列说法错误的是（　　） A. 染料Z和苏丹Ⅲ都属于脂溶性染料 B. 染料Z和甲紫都可以将染色体染色 C. 染料Z和台盼蓝都可以用于鉴别动物细胞是否死亡 D. 染料Z和标记膜蛋白的红、绿荧光染料都可用于探究细胞膜的流动性 6. 大规模生产治疗性单克隆抗体时，常采用悬浮细胞表达系统。下列叙述错误的是（ ） A. 该类抗体在细胞中的翻译起始于游离在细胞质基质中的核糖体 B. 该类抗体在细胞的内质网和高尔基体中修饰加工 C. 悬浮细胞在培养过程中出现增殖能力下降的原因是接触抑制 D. 一种治疗性单克隆抗体一般只能与一种抗原结合 7. 从牛卵巢采集卵母细胞进行体外成熟培养，探究高温对卵母细胞成熟的影响，结果如图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A. 选取发育状态一致的卵母细胞进行培养 B. 体外培养卵母细胞时通常加入的血清不能采用湿热灭菌的方法灭菌 C. 对采集的卵母细胞传代培养以产生大量卵细胞 D. 体外培养时高温降低了卵母细胞发育的成熟率 8. 生物碱为铁皮石斛的次级代谢产物。下图是以铁皮石斛为材料，培养拟原球茎(简称PLBs, 类似愈伤组织)生产生物碱的实验流程。下列说法正确的是（ ） A. 生物碱是铁皮石斛生长所必需的物质 B. 图中过程①为脱分化形成PLBs, 过程②为再分化生产生物碱 C. 培养高产细胞系应选择细胞数量/生物碱产量值大的PLBs D. 该过程运用了植物细胞培养技术，原理是植物细胞增殖 9. 将黑色小鼠囊胚的内细胞团部分细胞注射到白色小鼠囊胚腔中，接受注射的囊胚发育为黑白相间的小鼠（Mc）。据此分析，下列叙述正确的是（　　） A. 获得Mc的生物技术属于核移植 B. Mc表皮中有两种基因型的细胞 C. 注射入的细胞会分化成胎盘和胎膜 D. 将接受注射的囊胚进行二等分时，注意要将滋养层细胞均等分割 10. 利用细胞融合技术将小鼠骨髓瘤细胞和烟草叶肉细胞融合，拟通过观察细胞器确认杂种细胞，下列能作为确认依据的细胞器组合是（　　） A. 线粒体和液泡 B. 叶绿体和中心体 C. 叶绿体和线粒体 D. 内质网和高尔基体 11. 植物细胞工程技术可用于马铃薯育种，下列分析错误的是（ ） A. 将融合的原生质体在细胞壁形成前转到固体培养基上，以诱导愈伤组织 B. 用优良栽培品种与抗青枯病野生种进行体细胞杂交，以获得抗病新材料 C. 采集四倍体植株的花粉进行组织培养，以获得单倍体植株 D. 利用茎尖进行组织培养，以培育脱毒苗 12. 泡菜中存在大量的乳酸菌，摄入一定量的乳酸菌利于保持肠道菌群平衡，但要发挥良好的保健作用，则要有足够量的活性菌经过胃到达小肠才可实现。下列叙述正确的是（ ） A. 平板倒置培养可为乳酸菌生长创造无氧环境 B. 图2中过程Ⅰ采用的接种方法可以纯化计数乳酸菌（平板划线法不能计数） C. 图2中富集培养所用培养液的pH可控制在1.5左右 D. 经图1过程获得了菌落数分别为80、79、81的三个平板，则10毫升陈泡菜水中的活菌数为8.0×106个 13. “渐冻症”是由突变的基因导致运动神经元合成了某种毒蛋白，从而阻碍了轴突内营养物质的流动。最新研究结果表明，利用诱导多功能干细胞（iPS细胞）制作前体细胞，然后移植给渐冻症实验鼠，能延长其寿命。下列相关描述错误的是（　　） A. iPS细胞分化成的多种细胞中所有核酸相同，蛋白质却不完全相同 B. iPS细胞分化的实质是基因的选择性表达，细胞种类增多 C. 若将合成毒蛋白的基因替换，则可以起到良好的治疗作用 D. 植入神经干细胞，恢复部分受损的运动功能，会使“渐冻症”病情改善 14. 为探究编码酪氨酸酶的T基因对狗毛色的影响，有人通过如图所示过程获得了两只小狗。下列叙述正确的是（ ） A. 采集卵子后立即与获能的精子受精，可有效提高受精率 B. 将胚胎1培养至桑葚胚期，取成纤维细胞完成后续实验 C. 用蛋白酶合成抑制剂激活重构胚，可获得胚胎2和胚胎3 D. 利用现代生物技术获得的两只小狗毛色和性别可能都不一样 15. 洋葱表皮细胞的质膜紧贴细胞壁。为在荧光显微镜下辨别某荧光标记蛋白是否定位于表皮细胞的质膜，可使细胞质壁分离后再观察。下列分析正确的是（ ） A. 质壁分离过程中，细胞液的渗透压逐渐减小 B. 原生质层比细胞壁的伸缩性小是质壁分离的原因之一 C. 紫色洋葱鳞片叶的内表皮不可作为该实验的实验材料 D. 除质壁分离外，也可利用纤维素酶和果胶酶制备原生质体后再观察 16. RT-PCR是将RNA逆转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术，可以用来检测RNA病毒，具体过程如下，有关叙述错误的是（ ） A. 过程Ⅰ需用到游离的脱氧核苷酸、逆转录酶、核酸酶等 B. 利用RT-PCR技术获取的目的基因能在物种之间交流 C. 图中单链cDNA在PCR扩增n次后，理论上需要引物B2n-1个 D. 该技术提高了待测RNA逆转录产生的DNA数量，提高了检测的灵敏度 二、非选择题（共5小题，除标注外每空1分，共52分） 17. 研究发现，分泌蛋白的释放分为经典分泌途径和非经典分泌途径。经典分泌依赖内质网—高尔基体加工，需N端信号肽引导；非经典分泌不依赖该途径，存在多种释放方式（如图）。回答下列问题： （1）经典分泌途径中，参与分泌蛋白合成、加工、运输和能量供应的细胞器依次为____________________________________；用__________法分离这些细胞器；囊泡与细胞膜融合释放蛋白质的过程________（填“需要”或“不需要”）载体蛋白的协助。 （2）白细胞介素-1β是一种由153个氨基酸组成的单链非经典分泌蛋白，在细胞质基质中游离核糖体合成后，通过图中a（溶酶体分泌）途径释放到细胞外，若该蛋白肽链中第1位氨基酸被切除，则剩余肽链中含有的肽键数为_________个；若人为在该蛋白肽链的N端连接一段经典分泌途径所需的信号肽，推测该蛋白将主要通过_________（填“经典分泌”或“非经典分泌”）途径释放，请从信号肽功能的角度，阐述判断依据：_________________________________。 （3）若细胞中过程c的分泌受阻，外泌体无法与细胞膜融合，引发细胞应激反应；非经典分泌途径过程中_________（填字母）过程可使细胞膜面积增大，_________（填字母）过程可使细胞膜面积减小。 （4）研究发现，部分细胞在受到病原体感染时，会优先通过非经典分泌途径分泌炎症因子，请从分泌效率和功能角度分析其意义：_____________________________________________（答出一点即可）。 18. 发酵工程在医药上的应用非常广泛，其中青霉素的发现和产业化生产进一步推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。产黄青霉菌是一种广泛存在于自然界中的霉菌，是生产青霉素的重要工业菌种。工业上生产青霉素的发酵工程流程如图所示。回答下列相关问题： （1）在制备发酵罐中的培养液时，除了添加________、________、水和无机盐等主要的营养成分外，还需要将pH调至________性。 （2）整个发酵过程的中心环节是________。为保证产品质量，需要随时检测培养液中的________、________等，以了解发酵进程。过程④可采用________方法将菌体分离干燥。 （3）支原体肺炎是一种常见的传染病，其病原体是一种称为肺炎支原体的单细胞生物。支原体可能是最小、最简单的单细胞生物，没有细胞壁，遗传物质是DNA。临床发现，大环内酯类药物如罗红霉素、阿奇霉素对支原体有很好的疗效，而青霉素类药物能有效抑制其他细菌生长繁殖而对支原体并不起作用。尝试从细胞结构方面解释，青霉素药物对支原体引起的肺炎治疗无效的原因可能是____________。 19. 某抗膜蛋白治疗性抗体药物研发过程中，需要表达N蛋白胞外段，制备相应的单克隆抗体，增加其对N蛋白胞外段特异性结合的能力。N蛋白胞外段抗原制备流程如图1，分析回答下列问题： （1）用脂质体（如图2）将重组慢病毒质粒导入病毒包装细胞，质粒被包在脂质体________（填“a”或“b”）处。 （2）N蛋白胞外段单克隆抗体制备流程如图3，用N蛋白胞外段作为抗原对小鼠进行免疫后，取小鼠脾组织用________酶处理，制成细胞悬液，置于含有______________混合气体的________中培养，离心收集小鼠的B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞进行融合，利用了细胞膜______________的结构特点。 （3）用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进行克隆化培养。用___________原理检测每孔中的抗体，筛选既能产生N蛋白胞外段抗体，又能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株，将其进行扩大培养，扩大培养的方法有哪些___________________________，经扩大培养后，提取单克隆抗体。 （4）利用此方法获得的单克隆抗体的优点是_______________________________________（答出任意两点）。 20. 已知某种青花菜远缘植物的细胞质中存在抗除草剂基因，研究人员利用植物体细胞杂交技术，培育细胞质中存在抗除草剂基因的优良青花菜新品种，基本流程如图所示，图中字母代表相应的过程。回答下列问题： （1）图中________（填“甲”或“乙”）植株是青花菜植株。 （2）过程B中常用______________________（答出2种）等化学方法诱导原生质体融合。 （3）步骤D代表________的过程，常用________________（填植物激素名称）诱导愈伤组织分化形成杂种植株，需要光照的是过程________（填字母）。 （4）研究人员发现，培育的青花菜新品种植株的细胞中具有抗除草剂基因，但未表现出抗除草剂的性状，推测其原因是________________________。 （5）由该实验可知，与传统杂交相比，植物体细胞杂交技术的优点是________________________。 21. 原蛋白在维持器官、组织、细胞等方面发挥着关键作用。科学家将合成胶原蛋白的基因kit导入大肠杆菌构建基因工程菌，过程如下图所示。请据图回答下列问题： （1）上图重组质粒中启动子的功能是_______________________________________，目的基因与质粒连接后可以导入不同物种细胞中表达出同种蛋白质，其原理是_______________，若导入原核生物大肠杆菌中，但由于原核细胞中缺少_______________等细胞器，影响表达产物进一步加工，可能会影响蛋白质的功能。 （2）已知kit基因的部分序列如下图，采用PCR技术进行扩增时，选用的引物为________（填字母），为使基因与质粒成功连接，需要在引物的________端添加________________两种限制酶识别序列。 5´-CGGGATCCA………………AGAATTCCG-3´ 3´-GCCCTAGGT………………TCTTAAGGC-5´ A. 5´-GCCCTAGGT-3´ B. 5´-CGGAATTCT-3´ C. 5´-CGGGATCCA-3´ D. 5´-GCCTTAAGA-3´ （3）正确选择引物后对目的基因进行PCR，PCR程序设置如图2所示，其中60℃20 s环节的目的是___________________，在PCR反应体系中除了添加模板、引物、耐高温的DNA聚合酶、4种dNTP外，一般还需要添加Mg2+，添加Mg2+的作用是___________________，获取的PCR产物还需要经_________鉴定。通常DNA分子片段带负电荷，所以电泳开始前应将PCR样品加入_________电极端的点样孔内。 （4）为便于纯化胶原蛋白，现改进生产路线，另将小段TAP基因序列（标签）与kit基因相连，构建出能表达融合蛋白的重组DNA（如下图，F1、F2、R1、R2表示引物）。为确定融合基因插入并且方向正确，进行PCR检测，可选择下图中的引物组合有_________（填字母）。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $