3.1重组DNA技术的基本工具练习题2026-2027学年高二下学期生物人教版选择性必修3

**基本信息** 聚焦重组DNA技术工具，通过基础概念辨析、原理应用分析及系统知识整合三阶分层，实现从单一知识点到综合技能的递进巩固，适配新授课知识内化需求。 **分层设计** |层次|知识覆盖|设计特色| |----|----------|----------| |基础层|限制酶/载体的基本概念、DNA提取原理|选择题1-5题，通过正误辨析强化结构与功能观| |提升层|酶切位点分析、工具协同作用|选择题6-8题，结合BsaI酶切实例培养科学思维| |综合层|工具系统整合、操作流程梳理|填空题9-12题，以填空形式构建知识网络，落实探究实践能力|

2026-2027学年高二下学期生物人教版选择性必修三 3.1重组DNA技术的基本工具 练习题 一、选择题 1 . 下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验，叙述错误的是（        ） A．DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精 B．DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同 C．充分研磨的目的是使细胞破裂并释放出DNA等物质 D．用二苯胺试剂鉴定DNA的过程中，DNA的结构不变 2 . 下列有关基因工程的叙述中，错误的是（        ） A．基因工程育种的遗传学原理是基因突变 B．基因工程的操作水平是DNA分子水平 C．目的基因跨物种表达的理论依据是生物界共用一套遗传密码 D．基因工程的优点是能够按照人们的愿望定向改造生物的性状 3 . 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（        ） A．新鲜的洋葱、香蕉、鸡肝、猪血都可作为实验材料 B．DNA不溶于95%的冷酒精，溶于2mol/L的NaCl溶液 C．过滤液沉淀过程在4℃温度下进行是为了防止DNA降解 D．用二苯胺试剂鉴定DNA时，沸水浴加热后呈蓝色 4 . 质粒是基因工程中的“分子运输车”，其结构与功能相适应。下列说法错误的是（        ） A．质粒主要来自噬菌体或动植物病毒 B．质粒上有一个至多个限制酶切割位点，便于外源基因插入 C．被用作载体的质粒上常具有某些特殊的标记基因 D．质粒可以携带外源DNA片段，并可将其整合到受体DNA上 5 . 基因工程中常用质粒作为载体将目的基因导入受体细胞。下列关于质粒载体的叙述，错误的是（        ） A．质粒上含有复制原点，能在受体细胞中自主复制 B．质粒上含有标记基因，便于筛选含重组质粒的受体细胞 C．质粒上含有限制酶的识别序列，便于目的基因的插入 D．质粒是天然存在的，不需要人工改造即可直接作为载体使用 6 .  限制性内切核酸酶与DNA连接酶是基因工程常用的工具。下列叙述正确的是（        ） A．限制酶可识别并切割单链DNA特定位点 B．限制酶多存在于原核生物以防御外源DNA C．DNA连接酶可识别碱基序列并连接DNA D．PCR延伸时需耐高温的DNA连接酶参与 7 .  某生物实验小组利用菜花进行“DNA粗提取与鉴定”实验。下列操作正确的是（        ） A．利用酒精对DNA和蛋白质进行分离，其原理是DNA易溶于酒精 B．将菜花研磨液倒入放有滤纸的漏斗中，以获取含大量DNA的滤液 C．将析出的丝状物加入2mol·L-1的NaCl溶液中，以去除其中的杂质 D．用二苯胺对DNA进行鉴定时需将试管置于沸水中，且需对照实验 8 . 限制酶BsaI识别序列为5'-GGTCTC-3'，其切割位点位于识别序列下游1个碱基之后，酶切后可形成含3个碱基的黏性末端（由“NNN”3个碱基组成的黏性末端，N表示任意碱基）。下列叙述错误的是（       ） A．BsaI在DNA链内部定点切开磷酸二酯键，属于限制性核酸内切酶 B．酶切生成的黏性末端碱基由识别序列下游序列决定，理论存在43种末端类型 C．不同来源的DNA片段经该酶切割，若末端碱基互补便可实现片段拼接 D．黏性末端连接形成重组DNA后，大多数能够保留BsaI完整的识别序列 二、填空题 9. 重组DNA技术的基本工具 (1)限制性内切核酸酶（也称“限制酶”） ①______；②______；③______。 (2)DNA连接酶 ①______ (3)载体 ①______；②______；③______；④______。 10. 基因工程概述 (1)①______； (2)②______； (3)③______； (4)④______； (5)⑤______。 11. (1)限制性内切核酸酶（限制酶）主要是从原核生物中分离纯化出来的，能够识别双链DNA分子的特定_________，并使每一条链中特定部位的_________断裂。 (2)大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式，即_________末端和平末端。 (3)DNA连接酶根据来源不同可分为两类，一类是从_________中分离得到的E．coliDNA连接酶，另一类是从T4噬菌体细胞中分离得到的T4DNA连接酶。 (4)基因工程中常用的载体除质粒外，还有噬菌体、_________等。 (5)作为基因工程的载体，质粒需要具备的条件包括：能在宿主细胞中自我复制并稳定保存；具有一或多个限制酶切点；具有特殊的_________基因，便于重组DNA分子的筛选。 (6)在基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过_________的。 12. DNA基因工程至少需要三种工具：“分子手术刀”——______________（又叫_________）；“分子缝合针”——___________；“分子运输车”——基因进入受体细胞的_________。 （1）“分子手术刀” ①来源：主要是从_________中分离纯化出来的。 ②功能：能识别双链DNA分子的某种_____的核苷酸序列，且使每一条链中_____部位的两个核苷酸之间的____________断开，因此具有______性。 ③结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：___________和__________。 （2）“分子缝合针”——_______________ ①两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较： a.相同点：都缝合__________________。 b.区别：E·coli DNA连接酶来源于______________，将双链DNA片段互补的_______之间的___________键连接起来的效率较高；T4DNA连接酶能缝合________，连接平末端的之间的效率较___。 ②与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将_________加到已有的核苷酸片段的末端，形成_________。DNA连接酶是连接_______________的末端，形成_____________。 （3）“分子缝合针” ①作用： 将双链 DNA 片段“缝合” 起来， 恢复被________切开的两个核苷酸之间的__________________。 ②种类： 种类 来源 特点 E.coliDNA连接酶 ___________ “缝合”具有_________的双链DNA片段效率较高 T4DNA连接酶 __________ 既可以“缝合”双链DNA片段____________，又可“缝合”双链DNA片段的_________。 （4）“分子运输车” ①载体具备的条件： a.能在受体细胞中_______并___________。 b.具有__________________，供外源DNA片段插入。 c.具有___________，供重组DNA的______和_______。 ②最常用的载体是_______，它是一种裸露的、结构简单的、独立于______________，并具有___________的双链_______DNA分子。 ③其它载体：_____________________、___________。 答案 一、选择题 1 答案：D A 解析：DNA 不溶于冷酒精，部分蛋白质可溶于酒精，可利用酒精提纯 DNA，正确。 B 解析：NaCl 浓度 0.14mol/L 时 DNA 溶解度最低，2mol/L 时溶解度高，溶解度随盐浓度变化，正确。 C 解析：研磨破碎细胞膜、核膜，释放核内 DNA，正确。 D 解析：二苯胺沸水浴与 DNA 发生化学反应，DNA 双链解旋、结构改变，错误。 2 答案：A A 解析：基因工程原理是基因重组，诱变育种原理才是基因突变，错误。 B 解析：操作对象是 DNA 分子，属于分子水平操作，正确。 C 解析：所有生物共用一套密码子，外源目的基因可在受体细胞翻译表达，正确。 D 解析：定向导入外源基因，定向改造生物性状，正确。 3 答案：A A 解析：猪成熟红细胞无细胞核，不含 DNA，不能作为提取材料，错误。 B 解析：DNA 易溶于高浓度 2mol/L NaCl，不溶于 95% 冷酒精，正确。 C 解析：低温抑制 DNA 水解酶活性，防止 DNA 降解，正确。 D 解析：沸水浴条件下二苯胺与 DNA 反应呈现蓝色，正确。 4 答案：A A 解析：质粒是细菌、酵母菌细胞质中的环状 DNA，病毒不属于质粒，错误。 B 解析：质粒含多个限制酶切点，方便插入外源目的基因，正确。 C 解析：抗生素抗性基因等标记基因，用于筛选转化细胞，正确。 D 解析：质粒可携带外源 DNA，部分质粒能整合到宿主染色体 DNA，正确。 5 答案：D A 解析：复制原点保证质粒在细胞自主复制，正确。 B 解析：标记基因用于筛选含重组质粒的受体细胞，正确。 C 解析：限制酶识别序列作为插入位点，正确。 D 解析：天然质粒缺陷多，需人工改造（添加标记基因、多酶切位点）才能作载体，错误。 6 答案：B A 解析：限制酶只识别切割双链 DNA，不能切割单链，错误。 B 解析：原核生物依靠限制酶切割入侵的外源 DNA，抵御噬菌体侵染，正确。 C 解析：DNA 连接酶无碱基识别特异性，只催化磷酸二酯键形成，错误。 D 解析：PCR 延伸用耐高温 Taq DNA 聚合酶，不需要 DNA 连接酶，错误。 7 答案：D A 解析：DNA 不溶于酒精，利用酒精析出 DNA，错误。 B 解析：滤纸会吸附大量 DNA，过滤 DNA 应使用纱布，错误。 C 解析：2mol/L NaCl 溶解 DNA，不能去除杂质；析出丝状物需用低浓度盐溶液，错误。 D 解析：二苯胺鉴定必须沸水浴，同时设置空白对照排除干扰，正确。 8 答案：D A 解析：限制酶定点切割 DNA 磷酸二酯键，BsaI 属于限制性内切核酸酶，正确。 B 解析：黏性末端 3 个碱基，每个碱基 4 种可能，4³ 种末端，正确。 C 解析：只要黏性末端碱基互补，DNA 连接酶即可拼接片段，正确。 D 解析：切割位点在识别序列外侧，拼接后不再保留完整 BsaI 识别序列，错误。 二、填空题 9 (1)①核苷酸序列；②磷酸二酯键；③黏性末端 (2) 限制酶 (3)①λ 噬菌体；②受体细胞染色体 DNA；③限制酶切割位点；④标记 10 ①生物；②性状；③人类需求；④重组 DNA；⑤遗传性状 11 (1) 核苷酸序列；磷酸二酯键 (2) 黏性 (3) 大肠杆菌 (4) 动植物病毒 (5) 标记 (6) 人工改造 12 限制性内切核酸酶；限制酶；DNA 连接酶；载体 (1)①原核生物；②特定；③特定；④磷酸二酯键；⑤专一；⑥黏性末端；⑦平末端 (2) DNA 连接酶 a. 磷酸二酯键 b. 大肠杆菌；黏性末端；磷酸二酯；黏性末端和平末端；低 DNA 单体；磷酸二酯键；两段 DNA；磷酸二酯键 (3) 限制酶；磷酸二酯键 大肠杆菌；黏性末端；T4 噬菌体；黏性末端；平末端 (4) a. 自我复制；稳定保存 b. 多个限制酶切割位点 c. 标记基因；鉴别；筛选 ②细菌染色体外；自我复制；环状 ③λ 噬菌体；动植物病毒 学科网（北京）股份有限公司 $