精品解析：新疆维吾尔自治区喀什第二中学2025-2026学年高二下学期期中考试生物试卷

喀什二中2025—2026学年第二学期高二年级期中考试 生物试卷 试卷分值：100分；考试时间：90分钟 一、单项选择题（本题共25小题，每小题2分，共50分。每小题只有一个选项符合题目要求） 1. 果实中含有多种对人体有益的矿质元素，人们用果实可加工成果汁、果酒、果醋等产品。下列说法错误的是（ ） A. 在制作葡萄酒的过程中，应先用清水冲洗，再去除枝梗，这样可减少杂菌污染 B. 葡萄酒的颜色是葡萄皮中色素进入发酵液形成的 C. 在果酒发酵期间，为保持无氧条件，要始终拧紧发酵瓶的盖子 D. 制作果酒、果醋时，控制通气的情况不同 【答案】C 【解析】 【详解】A、制作葡萄酒时先冲洗再去除枝梗，可避免去枝梗时葡萄破损，减少杂菌污染的概率，A正确； B、发酵过程中葡萄皮细胞死亡，细胞膜失去选择透过性，皮中的色素释放进入发酵液，形成葡萄酒的颜色，B正确； C、果酒发酵过程中酵母菌无氧呼吸会产生CO2，若始终拧紧发酵瓶盖子，瓶内压强过高会导致发酵瓶爆裂，需要定期拧松瓶盖释放CO2，C错误； D、果酒制作时先通气让酵母菌有氧呼吸大量繁殖，之后密封进行无氧呼吸产生酒精；果醋制作的菌种醋酸菌是好氧菌，需要全程通气，二者控制通气的情况不同，D正确。 2. 下列关于微生物培养的叙述，错误的是（ ） A. 获得纯培养物的关键是防止杂菌污染 B. 牛奶等液体常采用高压蒸汽灭菌法灭菌 C. 高温灭菌的目的是杀死微生物的细胞、孢子和芽孢 D. 培养时应把未接种的平板和接种了微生物的平板一起培养，作为对照 【答案】B 【解析】 【详解】A、获得纯培养物的核心是保证培养物仅含有目标微生物，防止杂菌污染是实现该目标的关键，A正确； B、牛奶等液体如果采用高压蒸汽灭菌，高温会破坏其中的营养成分和风味，通常采用巴氏消毒法处理，B错误； C、灭菌的定义是杀死物体内外所有微生物，包括抗性极强的孢子和芽孢，高温灭菌可达到该效果，C正确； D、未接种的平板和接种的平板共同培养，属于空白对照，可通过观察未接种平板是否长出菌落，判断培养基灭菌是否合格，D正确。 3. 下图为实验室培养微生物的有关操作，下列叙述错误的是（ ） A. 步骤①需将接种工具灼烧至变红，以杀灭杂菌 B. 步骤②将接种工具冷却时不宜距酒精灯火焰太远 C. 步骤③可使菌种逐渐稀释，经培养后获得单菌落 D. 接种后应将培养皿倒置并根据结果进行微生物计数 【答案】D 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、步骤①为灼烧灭菌，需要将接种工具灼烧至变红，以杀灭杂菌，A正确； B、步骤②将接种工具冷却时不宜距酒精灯火焰太远，防止再次被杂菌污染，B正确； C、步骤③为平板划线法接种，随着逐渐划线可使菌种逐渐被稀释，经培养后获得单菌落，C正确； D、步骤③是平板划线法接种，不能用于菌体计数，D错误。 故选D。 4. 下列关于传统发酵技术与发酵工程的说法，正确的是（ ） A. 啤酒的工业化生产中焙烤的作用是通过加热使淀粉酶失活 B. 发酵条件的变化会影响微生物的生长、繁殖和代谢途径等 C. 提取发酵工程所得微生物菌体的单细胞蛋白可作为饲料添加剂 D. 与传统发酵技术相比，发酵工程更复杂，通常使用的是混合菌种 【答案】B 【解析】 【详解】A、在啤酒生产中，焙烤的目的是杀死种子胚但不使淀粉酶失活，这样可以在后续的糖化过程中，淀粉酶能够将淀粉分解为糖类，A错误； B、发酵的温度、pH、溶解氧等条件变化会影响微生物的酶活性、呼吸类型等，进而影响微生物的生长、繁殖以及代谢途径，B正确； C、单细胞蛋白本身就是发酵得到的微生物菌体，不需要额外提取，可直接收集后作为饲料添加剂，C错误； D、发酵工程需要严格无菌操作，通常使用选育出的单一纯种菌种保证产品质量和产量，传统发酵技术才多使用天然混合菌种，D错误。 5. 下图是植物组织培养的过程，下列说法正确的是（ ） A. 该技术可用于名贵兰花的微型繁殖，体现了植物细胞的全能性 B. 可使用酒精和次氯酸钠的混合液对外植体进行消毒 C. 过程①形成的愈伤组织细胞，其中遗传物质发生了改变 D. 过程②③都属于再分化，所用植物激素的种类和比例相同 【答案】A 【解析】 【详解】A、植物组织培养技术可用于名贵兰花的微型快速繁殖，该过程中高度分化的离体植物细胞（外植体）最终发育为完整个体，体现了植物细胞的全能性，A正确； B、外植体消毒的操作是先后用酒精、次氯酸钠溶液分别处理，二者不能混合使用，B错误； C、过程①是脱分化，该过程仅使细胞失去特有的分化状态，细胞遗传物质并未发生改变，C错误； D、过程②③都属于再分化，但诱导丛芽形成和诱导生根所需的生长素与细胞分裂素的比例不同，生长素比例偏高利于生根，细胞分裂素比例偏高利于生芽，D错误。 6. 科研人员研究了马铃薯茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响，结果如图。相关叙述正确的是（ ） A. 培育脱毒苗用到的技术有植物组织培养和植物体细胞杂交 B. 用茎尖培育的脱毒苗具有很强的抗病毒的能力 C. 实验结果表明茎尖越小，脱毒率越高，成苗率越低 D. 根据本实验，培养脱毒苗时茎尖的适宜大小为0.60mm 【答案】C 【解析】 【详解】A、培育脱毒苗仅用到植物组织培养技术，不需要植物体细胞杂交技术，A错误； B、用茎尖培育的脱毒苗是自身不含病毒，并不具备抗病毒的能力，B错误； C、结合柱状图可知，茎尖大小从0.12mm到0.60mm逐渐增大时，脱毒率逐渐降低，成苗率逐渐升高，即茎尖越小，脱毒率越高，成苗率越低，C正确； D、培养脱毒苗需要同时兼顾较高的脱毒率和成苗率，0.60mm的茎尖脱毒率极低，不适宜，适宜大小应为0.27mm左右，D错误。 7. 植物细胞工程在农业、医药等方面有着广泛应用。下列叙述错误的是（ ） A. 用微型繁殖技术可以实现名贵兰花的有性繁殖 B. 在紫草宁的工厂化生产过程中使用的是液体培养基 C. 植物组织培养过程中进行诱变容易获得突变植株 D. 紫杉醇等次生代谢产物不是植物基本生命活动所必需的 【答案】A 【解析】 【详解】A、微型繁殖技术的本质是植物组织培养，利用植物体细胞的全能性实现繁殖，属于无性繁殖，可保持亲本的优良性状，并非有性繁殖，A错误； B、紫草宁的工厂化生产需要大量培养紫草愈伤组织，使用液体培养基进行悬浮培养，能让细胞更充分地接触营养物质，提高生产效率，B正确； C、植物组织培养过程中，培养的细胞处于持续分裂的状态，DNA复制时易受诱变因素影响发生变异，因此进行诱变处理容易获得突变植株，C正确； D、次生代谢产物是植物生长到一定阶段产生的、并非植物基本生命活动必需的物质，紫杉醇属于植物次生代谢产物，因此不是植物基本生命活动必需的，D正确。 8. 敲除大鼠心肌细胞H的T基因，对照组与敲除组的H细胞在培养瓶中贴壁生长，检测两组细胞的数量变化，结果如图所示。下列相关叙述不合理的是（ ） A. 体外培养H细胞需要添加动物血清 B. 可用胰蛋白酶处理H细胞便于计数 C. 敲除T基因的H细胞失去了分裂能力 D. 提高T基因表达可能促进心脏损伤修复 【答案】C 【解析】 【分析】对照组与敲除组的区别是有无T基因，相同培养时间内，对照组的H细胞数量多于敲除组，说明T基因的存在能促进细胞的分裂。 【详解】A、动物细胞培养时常加入动物血清，因此体外培养H细胞需要添加动物血清，A正确； B、可用胰蛋白酶处理H细胞使其分离为单细胞，便于计数，B正确； C、随着时间的延长，敲除组的H细胞数量依然增加了，说明敲除T基因的H细胞仍然有分裂能力，C错误； D、对照组含有T基因，相同培养时间内，对照组的细胞数量多于敲除组，说明T基因能促进细胞分裂，因此提高T基因表达可能促进心脏损伤修复，D正确。 故选C。 9. 治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。如图所示流程的叙述不正确的是（ ） A. 去核卵细胞一般取自处于减数分裂Ⅰ中期的卵母细胞 B. 为了提高繁殖效率还可以利用胚胎分割技术获得更多胚胎 C. 该治疗过程中应用的主要技术有核移植、动物细胞培养 D. 图中获得的组织器官移植给个体B理论上不会发生免疫排斥反应 【答案】A 【解析】 【详解】A、核移植技术中作为受体的去核卵母细胞，需取自处于减数分裂Ⅱ中期的卵母细胞，该时期的卵母细胞细胞质含有支持细胞核全能性表达的物质，且便于去核操作，并非减数分裂Ⅰ中期的卵母细胞，A错误； B、胚胎分割技术可将早期胚胎分割为多份遗传物质相同的胚胎，能够提高繁殖效率，B正确； C、该流程首先通过核移植技术获得重组细胞，再经动物细胞培养将重组细胞培养至囊胚阶段，后续还涉及胚胎干细胞诱导分化，应用的核心技术包括核移植、动物细胞培养，C正确； D、图中获得的组织器官的细胞核遗传物质来自个体B，细胞表面抗原与个体B基本一致，理论上移植给个体B不会发生免疫排斥反应，D正确。 10. 科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞形成iPS细胞，iPS细胞可进一步分化为神经元细胞、胰岛细胞、肝细胞等组织细胞。下列说法错误的是（ ） A. iPS细胞是诱导多能干细胞，在诱导过程中不需要破坏胚胎 B. iPS细胞分化为神经元细胞的过程是基因选择性表达的结果 C. iPS细胞分化为神经元细胞的过程体现了细胞的全能性 D. 将干细胞用于临床上的疾病治疗可能存在导致肿瘤发生的风险 【答案】C 【解析】 【详解】A、iPS细胞是通过体外诱导小鼠成纤维细胞（体细胞）获得的多能干细胞，无需从胚胎中获取，因此诱导过程不需要破坏胚胎，A正确； B、细胞分化的实质是基因的选择性表达，iPS细胞分化为神经元细胞属于细胞分化，是基因选择性表达的结果，B正确； C、细胞全能性指已经分化的细胞具有发育成完整个体的潜能，iPS细胞仅分化为神经元这一类组织细胞，并未发育为完整个体，不能体现细胞的全能性，C错误； D、若干细胞的增殖分化调控异常，可能出现不受控的恶性增殖，因此将其用于临床疾病治疗时存在导致肿瘤发生的风险，D正确。 11. 如图为受精作用及胚胎发育示意图，a、b代表两个发育时期，下列叙述正确的是（ ） A. ①过程发生在输卵管，②过程一般发生在子宫中 B. a、b分别表示囊胚和原肠胚，a时期细胞开始分化 C. 在桑葚胚阶段胚胎的内部开始出现含有液体的腔 D. 受精卵早期分裂时，随着细胞数目增加，胚胎的总体积也增加 【答案】B 【解析】 【详解】A、①为受精过程，发生在输卵管；②为卵裂过程，该过程同样发生在输卵管中，并非子宫，A错误； B、胚胎发育的顺序为受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚→成熟胎儿，因此a是囊胚、b是原肠胚，囊胚时期细胞开始分化为滋养层细胞和内细胞团，B正确； C、囊胚阶段胚胎内部才会出现含有液体的囊胚腔，桑葚胚阶段没有出现腔隙，C错误； D、受精卵早期分裂（卵裂期）时，细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加，甚至略有缩小，D错误。 12. 卵母细胞作为生殖细胞，是生物技术中常用的细胞，下列哪项一般不用卵母细胞（ ） A. 克隆动物，细胞核的受体细胞 B. 体外受精，培育试管动物 C. 形成受精卵，作为转基因动物的受体细胞 D. 动物细胞融合，生产单克隆抗体 【答案】D 【解析】 【详解】A、克隆动物的核移植技术中，通常选择去核的MⅡ期卵母细胞作为细胞核的受体细胞，其体积大易操作，且细胞质中存在可诱导细胞核全能性表达的物质，需要用到卵母细胞，A不符合题意； B、体外受精培育试管动物时，需要将获能的精子与培养成熟的卵母细胞在体外适宜环境中完成受精过程，需要用到卵母细胞，B不符合题意； C、在基因工程中培育转基因动物时受精卵作为受体细胞，受精卵是精子和卵母细胞结合形成的，需要用到卵母细胞，C不符合题意； D、生产单克隆抗体时，进行细胞融合的是经抗原免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，不需要使用卵母细胞，D符合题意。 13. 下列关于重组DNA技术的基本工具的叙述，错误的是（ ） A. E.coliDNA连接酶既能“缝合”黏性末端，又能“缝合”平末端 B. 限制性内切核酸酶主要从原核生物中分离纯化 C. 载体上要有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入 D. DNA连接酶能将两碱基通过氢键连接起来 【答案】D 【解析】 【详解】A、在基因工程操作中，DNA连接酶主要有两类：E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。这两类酶都能“缝合”黏性末端和平末端，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键，但E.coliDNA连接酶连接具有平末端的DNA片段的效率要远远低于T4DNA连接酶，A正确； B、限制性内切核酸酶主要从原核生物中分离纯化，原核生物可利用该酶切割入侵的外源DNA，保护自身遗传物质稳定，B正确； C、载体上存在一个至多个限制酶切割位点，可通过限制酶切割获得与外源DNA相同的末端，便于外源DNA片段插入，是载体的必备条件之一，C正确； D、DNA连接酶的作用是连接两个DNA片段之间的磷酸二酯键，碱基之间的氢键可通过碱基互补配对自动形成，不需要DNA连接酶催化，D错误。 14. 下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（ ） A. 研磨液过滤后，于4℃冰箱中静置后再取上清液 B. 加入预冷酒精溶液后离心，取上清液备用 C. DNA能溶于2 mol/L的NaCl溶液 D. 粗提取的DNA可能含有蛋白质、多糖、RNA等杂质 【答案】B 【解析】 【详解】A、研磨液过滤后于4℃冰箱静置可使杂质沉降，DNA溶解于上清液中，因此需取上清液进行后续操作，A正确； B、DNA不溶于预冷的酒精溶液，加入预冷酒精后DNA会以白色絮状物形式析出，离心后DNA存在于沉淀物中，应取沉淀物备用，而非上清液，B错误； C、DNA的溶解度随NaCl溶液浓度变化而改变，在2mol/L的NaCl溶液中DNA溶解度较高，可溶解，C正确； D、粗提取过程仅去除了部分杂质，提取的DNA中仍可能混有和DNA结合的蛋白质、细胞中的多糖、RNA等杂质，D正确。 15. 下列关于如图所示的两种黏性末端的说法，正确的是（ ） A. 限制酶切割位点为b处所示化学键 B. 甲、乙黏性末端是由不同的限制酶切割而成的 C. 切割甲的限制酶也能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子 D. 甲、乙黏性末端在DNA聚合酶的作用下可形成重组DNA分子 【答案】B 【解析】 【详解】A、限制酶切割的是相邻脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，即图中a处的化学键，b处为碱基对之间的氢键，限制酶不切割氢键，A错误； B、限制酶具有特异性，只能识别特定的核苷酸序列并在特定位点切割，甲对应的限制酶识别序列为GAATTC，乙对应的限制酶识别序列为CAATTG，二者识别序列不同，因此是由不同的限制酶切割而成的，B正确； C、甲、乙片段连接形成的重组DNA分子对应位置的序列为GAATTG/CTTAAC，不再是切割甲的限制酶识别的GAATTC序列，因此切割甲的限制酶无法识别该重组DNA分子，C错误； D、连接两个DNA片段形成重组DNA分子需要用DNA连接酶，DNA聚合酶的功能是将单个脱氧核苷酸连接到已有的核苷酸链上，不能实现两个DNA片段的连接，D错误。 16. 下列关于PCR扩增DNA片段及琼脂糖凝胶电泳的叙述，错误的是（ ） A. PCR扩增中，需要用解旋酶使双链DNA解聚 B. 用于PCR扩增的Taq DNA聚合酶是一种耐高温的DNA聚合酶 C. DNA分子大小会影响DNA分子在凝胶中的迁移速率 D. DNA分子与核酸染料结合后可在紫外灯下观察到相应条带 【答案】A 【解析】 【详解】A、PCR扩增过程中，双链DNA解聚依靠90℃以上的高温处理实现，不需要解旋酶参与，A错误； B、PCR的反应体系需要经历多次高温变性步骤，因此所使用的Taq DNA聚合酶是一种耐高温的DNA聚合酶，B正确； C、琼脂糖凝胶电泳中，DNA分子的迁移速率受分子大小、构象等因素影响，通常DNA分子越大，迁移速率越慢，C正确； D、DNA分子可以和核酸染料结合，结合后的复合物在紫外灯照射下会产生荧光，因此可观察到对应的条带，D正确。 17. 质粒载体上的标记基因通常为抗生素抗性基因，可用于筛选含有重组质粒的受体细胞。某质粒的标记基因为氨苄青霉素抗性基因。下列筛选方法正确的是（　　） A. 将受体细胞接种到不含氨苄青霉素的培养基上 B. 将受体细胞接种到含氨苄青霉素的培养基上 C. 筛选出不生长的菌落 D. 无需筛选，所有受体细胞都含重组质粒 【答案】B 【解析】 【详解】A、所有受体细胞（无论是否含重组质粒）均能在不含氨苄青霉素的培养基上生长，无法筛选目标细胞，A错误； B、标记基因的作用是便于筛选成功导入重组质粒的受体细胞，氨苄青霉素抗性基因可使受体细胞在含氨苄青霉素的培养基上生长。仅含重组质粒（具有氨苄青霉素抗性基因）的受体细胞可生长，未成功导入的细胞死亡，可起到筛选作用，B正确； C、不生长的菌落为未成功导入重组质粒的细胞，目标细胞应为能生长的菌落，C错误； D、基因工程中受体细胞导入重组质粒的成功率并非100%，需通过筛选确认，D错误。 故选B。 18. 天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作不正确的是（ ） A. 利用PCR可特异性地快速扩增目的基因B B. DNA连接酶可修复基因B与运载体之间的磷酸二酯键 C. 可将基因B直接导入农杆菌，然后感染玫瑰细胞 D. 利用抗原—抗体杂交技术检测导入玫瑰细胞中的B基因是否翻译 【答案】C 【解析】 【详解】A、PCR技术可根据已知的基因B序列设计特异性引物，快速大量扩增目的基因B，操作正确，A不符合题意； B、DNA连接酶的功能是催化两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，可将基因B与运载体的切口连接，修复二者之间的磷酸二酯键，操作正确，B不符合题意； C、将目的基因导入受体细胞前，必须先构建基因表达载体，保证目的基因能在受体细胞中稳定存在、复制和表达，不能将基因B直接导入农杆菌，操作错误，C符合题意； D、基因翻译的产物是蛋白质，抗原-抗体杂交技术可检测是否生成了基因B对应的蛋白质，从而判断B基因是否完成翻译，操作正确，D不符合题意。 19. 蜘蛛丝机械性能高于普通纤维，有广泛的应用前景。中国科学家利用下图质粒成功构建了蛛丝蛋白基因的重组质粒，并在家蚕丝腺细胞中获得大量蛛丝蛋白。下列说法错误的是（ ） A. 为防止目的基因自身环化，可以用限制酶XbaⅠ和SacⅠ来切割目的基因 B. 构建表达载体时选用蚕丝蛋白基因的启动子利于基因在家蚕丝腺细胞中表达 C. 启动子位于目的基因的上游，可以驱动遗传信息的复制和转录 D. 基因表达载体中的标记基因可以鉴别与选择含有蛛丝蛋白基因的受体细胞 【答案】C 【解析】 【详解】A、用识别序列不同的限制酶XbaⅠ和SacⅠ切割目的基因，可使目的基因两端产生不同的黏性末端，能避免目的基因自身环化，A正确； B、启动子具有特异性，为能从家蚕丝腺细胞中提取蛛丝蛋白，基因表达载体中目的基因的上游必须含有使其能在家蚕丝腺细胞中转录的启动子，即构建表达载体时选用蚕丝蛋白基因的启动子利于基因在家蚕丝腺细胞中表达，B正确； C、启动子位于目的基因上游，是RNA聚合酶识别和结合的位点，仅能驱动转录过程，驱动DNA复制的是复制原点而非启动子，C错误； D、基因表达载体的标记基因可用于鉴别、筛选出导入了目的基因的受体细胞，因此可以筛选出含蛛丝蛋白基因的受体细胞，D正确。 20. 将水稻耐盐碱基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中，培育耐盐碱海水稻新品种。下图PCR扩增OsMYB56时需要添加引物，应选用的引物组合为（ ） A. 5'-CTTGGATGAT-3'和5'-TCTGTTGAAT-3' B. 5'-CTTGGATGAT-3'和5'-TAAGTTGTCT-3' C. 5'-ATTCAACAGA-3'和5'-ATCATCCAAG-3' D. 5'-ATTCAACAGA-3'和5'-GAACCTACTA-3 【答案】A 【解析】 【分析】PCR技术可特异性的扩增DNA片段，关键在于引物可以和特定DNA片段的3'端特异性结合，使Taq酶沿引物的3'端延伸子链。 【详解】—磷酸端为DNA链的5'端，——OH端为DNA链的3'端。进行PCR时，引物与模板链的3'端结合，因此在扩增OsMYB56时需要添加的引物是5'—CTTGGATGAT—3'和5'—TCTGTTGAAT—3'，A正确。 故选A。 21. 荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量。其原理是在PCR体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。Ct值指荧光信号达到设定阈值时的循环数。下列有关叙述错误的是（ ） A. PCR实验结果中，Ct值越大，说明初始模板核酸的量越少 B. 通过该技术检测样本中病毒核酸的含量，为传染病的诊断提供依据 C. 不同浓度初始核酸样品与其所对应的Ct值绘制成的坐标曲线是数学模型 D. 在荧光定量PCR过程中，作为原料的脱氧核苷酸需要用32P标记 【答案】D 【解析】 【详解】A、初始模板核酸的量越少，需要经过更多次的PCR循环扩增，才能使荧光信号积累达到设定阈值，即Ct值越大，A正确； B、该技术可定量检测样本中病毒的核酸含量，可判断样本是否含有病原体以及病原体的载量，为传染病的诊断提供依据，B正确； C、曲线图是数学模型的常见呈现形式，用于反映变量间的定量规律，因此不同浓度初始核酸样品与其对应的Ct值绘制成的坐标曲线属于数学模型，C正确； D、荧光定量PCR的荧光信号来自被Taq酶水解的荧光探针，不需要对作为原料的脱氧核苷酸用³²P标记，D错误。 22. 以下关于基因表达载体组成的说法正确的是（ ） A. 基因表达载体通常采用抗生素合成基因作为标记基因 B. 基因表达载体的构建是基因工程操作程序的核心步骤 C. 终止子在基因的上游，它控制着转录的结束 D. 基因表达载体的组成应包括目的基因、启动子、终止密码子、标记基因等 【答案】B 【解析】 【详解】A、基因表达载体通常采用抗生素抗性基因作为标记基因，用于筛选成功导入载体的受体细胞，而非抗生素合成基因，A错误； B、基因工程操作程序中，基因表达载体的构建是核心步骤，其作用是让目的基因在受体细胞中稳定存在、表达且可遗传给下一代，B正确； C、终止子位于基因的下游，调控转录的结束，位于基因上游、启动转录过程的是启动子，C错误； D、基因表达载体的组分包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等，终止密码子是mRNA上调控翻译终止的序列，不属于DNA层面的基因表达载体的组分，D错误。 23. 为了降低人葡萄糖脑苷脂酶（hGC）缺乏症的治疗成本，研究人员构建了含有hGC基因的重组Ti质粒，并通过农杆菌转化法将hGC基因导入烟草中，并高效表达，其过程如下图所示。下列叙述错误的是（ ） A. ①过程中目的基因需要插入到Ti质粒的T-DNA分子中 B. 将含有hGC基因的重组质粒导入受体细胞后，还需要利用植物组织培养技术 C. 从愈伤组织中提取的蛋白质作为抗原，进行抗原-抗体杂交检测hGC基因是否翻译 D. 农杆菌转化法只适用于双子叶植物和裸子植物，不能用于单子叶植物 【答案】D 【解析】 【详解】A、农杆菌的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体DNA上，因此①构建重组Ti质粒时，需要将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA分子中，才能保证目的基因进入受体细胞后整合到染色体DNA上，A正确； B、将含有hGC基因的重组质粒导入农杆菌后，农杆菌侵染烟草细胞获得转化的烟草细胞，烟草细胞需要经过植物组织培养的脱分化过程才能形成愈伤组织，实现目的基因的高效表达，B正确； C、检测目的基因是否翻译出蛋白质，可采用抗原-抗体杂交技术，若从愈伤组织中提取的蛋白质作为抗原能与hGC的特异性抗体结合出现杂交带，说明hGC基因完成了翻译过程，C正确； D、农杆菌转化法自然状态下主要侵染双子叶植物和裸子植物，随着技术发展，目前农杆菌转化法也可应用于部分单子叶植物，并非绝对不能用于单子叶植物，D错误。 24. 基因工程自20世纪70年代兴起后，在农牧业、医药卫生和食品工业等方面得到了飞速的发展。下列关于基因工程应用的叙述，错误的是（ ） A. 将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组，使获得的转基因奶牛分泌的乳汁中，乳糖的含量降低 B. 一般将基因表达载体导入山羊乳腺细胞来获得在乳腺中表达所需蛋白质的转基因动物 C. 作为乳腺生物反应器的动物体内只有乳腺细胞能表达目的基因 D. 将降解或者抵抗某种除草剂的基因导入作物，可以培育出抗除草剂的作物品种 【答案】B 【解析】 【详解】A、肠乳糖酶基因导入奶牛基因组后，可在乳腺细胞中表达产生乳糖酶，分解乳汁中的乳糖，使乳汁乳糖含量降低，A正确； B、动物高度分化的体细胞全能性难以表达，培育转基因动物时，一般将基因表达载体导入受精卵（而非乳腺细胞），才能发育为完整的转基因动物，B错误； C、构建乳腺生物反应器的表达载体时，目的基因与乳腺蛋白基因的特异性启动子连接，该启动子仅在乳腺细胞中启动目的基因转录，因此动物体内只有乳腺细胞能表达目的基因，C正确； D、降解或抵抗除草剂的基因导入作物后，表达可使作物获得抗除草剂性状，能培育出抗除草剂作物品种，D正确。 25. 聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）塑料难以降解，易造成严重的环境污染。科研人员从某种细菌中发现了一种能降解PET的酶（PETase），但其热稳定性和降解效率较低。通过分析PETase的三维结构，将其中第238位的甘氨酸替换为酪氨酸后，获得的新型酶（FAST-PETase）在40～50℃下的降解效率提高了数百倍，其在塑料回收中展现出应用前景。下列叙述错误的是（ ） A. 改造PETase从根本上是对其编码基因进行修饰 B. 对PETase分子结构与功能的深入了解是成功改造的关键 C. 获得FAST-PETase的基因后，可将其直接导入工程菌用于工业化生产 D. 该改造体现了“从预期功能出发→设计蛋白质结构→改造基因”的蛋白质工程思路 【答案】C 【解析】 【详解】A、蛋白质是由基因编码的，要对蛋白质进行改造，从根本上来说就是要对其编码基因进行修饰，A正确； B、蛋白质工程的前提是明确蛋白质结构与功能的对应关系，对PETase分子结构与功能的深入了解才能实现针对性改造，是成功改造的关键，B正确； C、获得FAST-PETase的基因后，需要先构建基因表达载体后才能导入工程菌，使目的基因在受体细胞中稳定存在并表达，C错误； D、蛋白质工程的基本思路就是从预期功能出发，设计出具有相应功能的蛋白质结构，然后根据蛋白质结构推测出对应的氨基酸序列，进而确定相应的基因序列，对基因进行改造，D正确。 二、非选择题（本题包括5小题，共50分） 26. 动物的粪便中包含食物残渣、肠道微生物、寄生虫虫卵等。为研究者提供了许多宝贵的信息。研究人员欲从反刍性食草动物的粪便中分离出纤维素分解菌。按照下图流程对获取的粪便进行处理，请分析回答下列问题： （1）从粪便中筛选目的菌需要使用以____________为唯一碳源的培养基，这种培养基从功能上属于____________培养基。 （2）如图1所示流程是通过____________法将菌液接种至培养皿，统计活菌数量。一般选择菌落数目为____________的平板进行计数。 （3）若在纯化培养的三个平板中得到的菌落数分别为204个、206个、208个，则1g粪便中含有的纤维素分解菌数量为____________个。该计数结果一般比实际活菌数偏____________（填“多”或“少”），原因是______________________________________________________________。 （4）在添加刚果红的固体培养基上接种挑选出来的菌种，得到图2所示的菌落和透明圈。其中降解纤维素能力最强的是菌落________________。 【答案】（1） ①. 纤维素 ②. 选择 （2） ①. 稀释涂布平板 ②. 30~300 （3） ①. 2.06×107 ②. 少 ③. 当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 （4）E 【解析】 【小问1详解】 实验需要从动物粪便中分离出纤维素分解菌，那培养基只能提供纤维素作为唯一碳源。不能分解纤维素的微生物无法获取碳源、不能生长繁殖；只有可分泌纤维素酶分解纤维素的细菌才能存活，从而淘汰杂菌。像这种允许目标微生物生长、抑制其他微生物生长的培养基为选择培养基。 【小问2详解】 图1为稀释涂布平板法，能用于统计活菌数。菌落＜30时误差极大，随机性强，菌落＞300时菌落重叠、不易区分，计数偏小，因此规范实验选择菌落数30～300的平板统计。 【小问3详解】 由题意知：平均菌落数为(204+206+208)÷3=206，1g粪便梯度稀释后取 0.1mL 稀释度10−4菌液涂布。计算公式：每克活菌数 = 平均菌落数 ÷ 涂布体积 × 稀释倍数=206÷0.1×104=2.06×107。 计数结果偏小的原因：若多个活菌粘连在一起，涂布后只会长成单个菌落，统计时仅计为 1 个，无法区分原本多个菌体，因此统计数值少于实际活菌数量。 【小问4详解】 刚果红染色原理：刚果红能与纤维素结合形成红色复合物；细菌分泌纤维素酶分解周围纤维素后，复合物消失，菌落周围出现透明圈。透明圈直径 / 菌落直径比值越大，分解纤维素能力越强。菌落 E 的透明圈相对自身菌落尺寸最大，降解纤维素能力最强。 27. “白菜-甘蓝”是科学家将白菜（2n=20）和甘蓝（2n=18）利用植物体细胞杂交技术培育的，同普通白菜相比，它具有生长期短、耐热性强、易储存等优点，如图为“白菜—甘蓝”的培育过程，请回答下列问题： （1）在进行体细胞杂交之前，必须利用____________去除细胞壁，获得原生质体A和原生质体B。人工诱导原生质体融合的方法有多种，除高Ca2+-高pH融合法外常用的化学方法是____________，融合完成的标志是__________________。 （2）仅考虑两两融合，融合得到的细胞有____________种类型，其中符合要求的细胞的染色体数是____________。理论上获得的杂种植株是否可育？____________（填“是”或“否”）。 （3）此过程所利用的原理有：________________________________________________________（答出2点）。 （4）植物体细胞杂交技术和传统杂交技术相比，其优点____________________________________。 【答案】（1） ①. 纤维素酶、果胶酶 ②. 聚乙二醇（PEG）融合法 ③. 再生出细胞壁 （2） ①. 3 ②. 38 ③. 是 （3）细胞膜的流动性、植物细胞的全能性、染色体变异（任意答出2点即可） （4）打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 【解析】 【小问1详解】 植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。原生质体融合常用的化学方法除高Ca²⁺-高pH法外，最常用的是聚乙二醇（PEG）诱导法；原生质体融合完成的标志是杂种细胞重新形成新的细胞壁。 【小问2详解】 仅考虑两两融合时，会得到3种融合细胞：白菜-白菜融合细胞、甘蓝-甘蓝融合细胞、白菜-甘蓝杂种细胞；符合育种要求的是白菜-甘蓝杂种细胞，染色体数为白菜（20）+甘蓝（18）=38条。杂种细胞中存在同源染色体，减数分裂可正常联会产生可育配子，因此杂种植株可育。 【小问3详解】 原生质体融合依赖细胞膜的流动性，杂种细胞最终培育为完整植株依赖植物细胞的全能性，同时杂种细胞是融合了白菜和甘蓝的所有染色体，属于染色体数目变异。 【小问4详解】 传统有性杂交存在生殖隔离，只能在同种生物间进行，植物体细胞杂交的突出优点是克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍，打破生殖隔离，实现远缘杂交育种。 28. 紧密连接蛋白（CLDN6）是一种跨膜蛋白，在乳腺癌、肝癌等多种癌症中特异性高表达，能促进肿瘤发生、生长和迁移等，美登素（DM1）是一种抑制微管蛋白聚集的化疗药物，副作用较大。为实现DM1对肿瘤细胞的靶向作用，研究人员以CLDN6为靶点制备相应单克隆抗体并构建抗体-药物偶联物，部分过程及作用机制如图，回答下列问题。 （1）本研究中使用的抗原是_____________，与植物体细胞杂交相比，过程①特有的诱导方法是__________。 （2）制备单克隆抗体的过程中用到的技术有_______________和_________________________________。 （3）过程③需要进行的操作是___________和_____________。过程③处理的目的是得到____________的细胞。 （4）过程④构建的抗体-药物偶联物（CLDN6抗体-DM1），其中起到靶向作用的是__________（填“a”或“b”）部分，最终杀伤肿瘤细胞的是______________（填“a”或“b”）部分。 【答案】（1） ①. CLDN6蛋白 ②. 灭活病毒诱导法 （2） ①. 动物细胞融合 ②. 动物细胞培养 （3） ①. 克隆化培养 ②. 抗体检测 ③. 能分泌抗CLDN6蛋白的杂交瘤 （4） ①. a ②. b 【解析】 【小问1详解】 根据题干信息“研究人员以CLDN6为靶点制备相应单克隆抗体”，因此可知本研究中使用的抗原是CLDN6蛋白。过程①是动物细胞融合，与植物体细胞杂交相比，动物细胞融合特有的诱导方法是灭活病毒诱导法。 【小问2详解】 单克隆抗体制备过程中，首先通过动物细胞融合技术获得杂交瘤细胞，再通过动物细胞培养技术培养筛选杂交瘤细胞，因此用到的两种技术为动物细胞融合技术和动物细胞培养技术。 【小问3详解】 将CLDN6蛋白抗原注射到小鼠体内，从该小鼠脾脏中获得能产生抗体的B淋巴细胞，将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，通过第一次筛选获得杂交瘤细胞，然后对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，多次筛选后得到能分泌抗CLDN6蛋白的杂交瘤细胞。因此过程①为B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，过程②为筛选获得杂交瘤细胞，过程③为筛选获得能分泌抗CLDN6蛋白的杂交瘤细胞，过程③需要进行的操作是克隆化培养和抗体检测。 【小问4详解】 该偶联物中，a为CLDN6抗体，可特异性识别结合肿瘤细胞表面的CLDN6，发挥靶向作用；b为化疗药物DM1，最终发挥杀伤肿瘤细胞的作用。 29. 如图为利用生物技术获得生物新品种的过程，据图回答： （1）在基因工程中，A表示目的基因，B表示构建的基因表达载体，完成B一般所用的酶有___________和______________。构建成功的产物除目的基因外，还必须有启动子、终止子以及___________等，其中启动子是______________识别和结合的部位。 （2）B→C为转基因绵羊的培育过程，其中②过程常用的方法是______________。若想通过转基因绵羊可分泌的乳汁来生产人类蛋白质，在基因表达载体中，目的基因的首端必须含有_______________等调控元件。 （3）B→D为转基因抗虫棉的培育过程，若使用的棉花受体细胞为茎尖细胞，⑤表示的生物技术是___________________。要确定目的基因（抗虫基因）导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，其中检测目的基因是否转录出了mRNA，常用方法是___________________。 【答案】（1） ①. 限制酶（或限制性内切核酸酶） ②. DNA连接酶 ③. 标记基因 ④. RNA聚合酶 （2） ①. 显微注射技术 ②. 乳腺中特异性表达的基因的启动子 （3） ①. 植物组织培养 ②. 分子杂交技术 【解析】 【小问1详解】 构建基因表达载体时，需要先用限制酶切割目的基因和载体，再用DNA连接酶连接二者，得到重组表达载体。完整的基因表达载体除目的基因外，还需要启动子、终止子、标记基因（用于筛选含重组载体的受体细胞）；启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动目的基因转录。 【小问2详解】 将目的基因导入动物受体细胞，最常用的方法是显微注射法；若要让转基因绵羊通过乳汁生产人类蛋白，需要目的基因在乳腺细胞中特异性表达，因此目的基因首端必须添加乳腺中特异性表达的基因的启动子这一调控元件。 【小问3详解】 植物体细胞具有全能性，将离体植物细胞培育为完整植株需要通过植物组织培养技术；检测目的基因是否转录出mRNA，常用分子杂交技术（用标记的目的基因探针与mRNA杂交，判断是否转录成功）。 30. 尖孢镰刀菌（Fo）会引起百合鳞茎腐烂病，对百合的生产和繁育造成损失。野生百合一般不抗Fo，科学家从岷江百合中获得了Lr70基因，培育出了高抗性的百合品种。Lr70基因的表达依赖强启动子pL，二者的结构如图1所示。Ti质粒用于研究强启动子pL的活性，如图2所示。回答下列问题： 注：图1标注了多个限制酶的识别及切割的位点，图2中gus基因表达的GUS酶能使X-Gluc变成蓝色。 （1）在体外利用PCR技术扩增Lr70基因时，在反应体系中加入___________种引物，引物的作用是___________________________。为激活DNA聚合酶的活性，在反应体系中可加入____________。能使反应体系中的DNA解链为单链的条件是____________。 （2）扩增后，常用______________法鉴定PCR扩增的产物。将pL-Lr70基因转入百合受体细胞的常用方法是_________________________。 （3）图2为研究强启动子pL的活性，构建重组质粒时要用强启动子pL替换质粒启动子，则应选用图示的限制酶____________和____________进行切割。 （4）将农杆菌（对照）和转染后的农杆菌培养在含有____________的培养基上，预期实验结果是对照组培养基出现蓝色，实验组培养基出现_______________________。 【答案】（1） ①. 2 ②. 使DNA聚合酶从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸 ③. Mg2+ ④. 高温 （2） ①. 琼脂糖凝胶电泳 ②. 花粉管通道法（或农杆菌转化法） （3） ①. HindⅢ ②. BamHⅠ （4） ①. X-Gluc ②. 深蓝色 【解析】 【小问1详解】 PCR扩增双链DNA，需要一对引物，分别结合目的基因两条模板链的3'端，正向、反向引物各1种，共2种。Taq DNA 聚合酶不能从头合成DNA，只能沿着已有核酸链的3'羟基延伸脱氧核苷酸；引物与模板互补配对后，为DNA聚合酶提供延伸起点。Mg2+是Taq酶的辅因子，能激活DNA聚合酶活性，同时影响引物退火、链延伸效率。PCR变性步骤温度90~95℃，高温破坏 DNA 双链间氢键，使双链DNA解旋为单链。 【小问2详解】 通常用琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行鉴定。DNA带负电，在电场中向正极移动；片段越小迁移速度越快，电泳后通过条带位置、大小判断是否扩增出目标长度的Lr70基因。 转化百合（植物）常用方法：①农杆菌转化法：Ti质粒T-DNA可携带目的基因整合到植物细胞染色体DNA，是双子叶 / 多数单子叶植物转基因首选。②花粉管通道法：直接将重组DNA导入授粉后花粉管通道，操作简便，适用于开花植物百合。 【小问3详解】 图 1启动子pL两侧酶切位点有Hind Ⅲ（左端）、BamH Ⅰ（右端）；图 2质粒原有启动子两侧同样有Hind Ⅲ、BamH Ⅰ；利用这两种酶能精准切下质粒原有启动子，定向插入 pL，保证pL位于gus上游，正常驱动gus转录。 【小问4详解】 题干说明gus表达的GUS酶能催化X-Gluc生成蓝色物质，因此需添加该底物显色，判断启动子活性。对照组（空农杆菌，无pL启动子）：仅质粒自带弱启动子驱动少量gus表达，蓝色浅；实验组（含强启动子pL）：pL转录活性强，大量 gus基因表达，产生更多GUS酶，分解更多X-Gluc，因此出现深蓝色。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 喀什二中2025—2026学年第二学期高二年级期中考试 生物试卷 试卷分值：100分；考试时间：90分钟 一、单项选择题（本题共25小题，每小题2分，共50分。每小题只有一个选项符合题目要求） 1. 果实中含有多种对人体有益的矿质元素，人们用果实可加工成果汁、果酒、果醋等产品。下列说法错误的是（ ） A. 在制作葡萄酒的过程中，应先用清水冲洗，再去除枝梗，这样可减少杂菌污染 B. 葡萄酒的颜色是葡萄皮中色素进入发酵液形成的 C. 在果酒发酵期间，为保持无氧条件，要始终拧紧发酵瓶的盖子 D. 制作果酒、果醋时，控制通气的情况不同 2. 下列关于微生物培养的叙述，错误的是（ ） A. 获得纯培养物的关键是防止杂菌污染 B. 牛奶等液体常采用高压蒸汽灭菌法灭菌 C. 高温灭菌的目的是杀死微生物的细胞、孢子和芽孢 D. 培养时应把未接种的平板和接种了微生物的平板一起培养，作为对照 3. 下图为实验室培养微生物的有关操作，下列叙述错误的是（ ） A. 步骤①需将接种工具灼烧至变红，以杀灭杂菌 B. 步骤②将接种工具冷却时不宜距酒精灯火焰太远 C. 步骤③可使菌种逐渐稀释，经培养后获得单菌落 D. 接种后应将培养皿倒置并根据结果进行微生物计数 4. 下列关于传统发酵技术与发酵工程的说法，正确的是（ ） A. 啤酒的工业化生产中焙烤的作用是通过加热使淀粉酶失活 B. 发酵条件的变化会影响微生物的生长、繁殖和代谢途径等 C. 提取发酵工程所得微生物菌体的单细胞蛋白可作为饲料添加剂 D. 与传统发酵技术相比，发酵工程更复杂，通常使用的是混合菌种 5. 下图是植物组织培养的过程，下列说法正确的是（ ） A. 该技术可用于名贵兰花的微型繁殖，体现了植物细胞的全能性 B. 可使用酒精和次氯酸钠的混合液对外植体进行消毒 C. 过程①形成的愈伤组织细胞，其中遗传物质发生了改变 D. 过程②③都属于再分化，所用植物激素的种类和比例相同 6. 科研人员研究了马铃薯茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响，结果如图。相关叙述正确的是（ ） A. 培育脱毒苗用到的技术有植物组织培养和植物体细胞杂交 B. 用茎尖培育的脱毒苗具有很强的抗病毒的能力 C. 实验结果表明茎尖越小，脱毒率越高，成苗率越低 D. 根据本实验，培养脱毒苗时茎尖的适宜大小为0.60mm 7. 植物细胞工程在农业、医药等方面有着广泛应用。下列叙述错误的是（ ） A. 用微型繁殖技术可以实现名贵兰花的有性繁殖 B. 在紫草宁的工厂化生产过程中使用的是液体培养基 C. 植物组织培养过程中进行诱变容易获得突变植株 D. 紫杉醇等次生代谢产物不是植物基本生命活动所必需的 8. 敲除大鼠心肌细胞H的T基因，对照组与敲除组的H细胞在培养瓶中贴壁生长，检测两组细胞的数量变化，结果如图所示。下列相关叙述不合理的是（ ） A. 体外培养H细胞需要添加动物血清 B. 可用胰蛋白酶处理H细胞便于计数 C. 敲除T基因的H细胞失去了分裂能力 D. 提高T基因表达可能促进心脏损伤修复 9. 治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。如图所示流程的叙述不正确的是（ ） A. 去核卵细胞一般取自处于减数分裂Ⅰ中期的卵母细胞 B. 为了提高繁殖效率还可以利用胚胎分割技术获得更多胚胎 C. 该治疗过程中应用的主要技术有核移植、动物细胞培养 D. 图中获得的组织器官移植给个体B理论上不会发生免疫排斥反应 10. 科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞形成iPS细胞，iPS细胞可进一步分化为神经元细胞、胰岛细胞、肝细胞等组织细胞。下列说法错误的是（ ） A. iPS细胞是诱导多能干细胞，在诱导过程中不需要破坏胚胎 B. iPS细胞分化为神经元细胞的过程是基因选择性表达的结果 C. iPS细胞分化为神经元细胞的过程体现了细胞的全能性 D. 将干细胞用于临床上的疾病治疗可能存在导致肿瘤发生的风险 11. 如图为受精作用及胚胎发育示意图，a、b代表两个发育时期，下列叙述正确的是（ ） A. ①过程发生在输卵管，②过程一般发生在子宫中 B. a、b分别表示囊胚和原肠胚，a时期细胞开始分化 C. 在桑葚胚阶段胚胎的内部开始出现含有液体的腔 D. 受精卵早期分裂时，随着细胞数目增加，胚胎的总体积也增加 12. 卵母细胞作为生殖细胞，是生物技术中常用的细胞，下列哪项一般不用卵母细胞（ ） A. 克隆动物，细胞核的受体细胞 B. 体外受精，培育试管动物 C. 形成受精卵，作为转基因动物的受体细胞 D. 动物细胞融合，生产单克隆抗体 13. 下列关于重组DNA技术的基本工具的叙述，错误的是（ ） A. E.coliDNA连接酶既能“缝合”黏性末端，又能“缝合”平末端 B. 限制性内切核酸酶主要从原核生物中分离纯化 C. 载体上要有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入 D. DNA连接酶能将两碱基通过氢键连接起来 14. 下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（ ） A. 研磨液过滤后，于4℃冰箱中静置后再取上清液 B. 加入预冷酒精溶液后离心，取上清液备用 C. DNA能溶于2 mol/L的NaCl溶液 D. 粗提取的DNA可能含有蛋白质、多糖、RNA等杂质 15. 下列关于如图所示的两种黏性末端的说法，正确的是（ ） A. 限制酶切割位点为b处所示化学键 B. 甲、乙黏性末端是由不同的限制酶切割而成的 C. 切割甲的限制酶也能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子 D. 甲、乙黏性末端在DNA聚合酶的作用下可形成重组DNA分子 16. 下列关于PCR扩增DNA片段及琼脂糖凝胶电泳的叙述，错误的是（ ） A. PCR扩增中，需要用解旋酶使双链DNA解聚 B. 用于PCR扩增的Taq DNA聚合酶是一种耐高温的DNA聚合酶 C. DNA分子大小会影响DNA分子在凝胶中的迁移速率 D. DNA分子与核酸染料结合后可在紫外灯下观察到相应条带 17. 质粒载体上的标记基因通常为抗生素抗性基因，可用于筛选含有重组质粒的受体细胞。某质粒的标记基因为氨苄青霉素抗性基因。下列筛选方法正确的是（　　） A. 将受体细胞接种到不含氨苄青霉素的培养基上 B. 将受体细胞接种到含氨苄青霉素的培养基上 C. 筛选出不生长的菌落 D. 无需筛选，所有受体细胞都含重组质粒 18. 天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作不正确的是（ ） A. 利用PCR可特异性地快速扩增目的基因B B. DNA连接酶可修复基因B与运载体之间的磷酸二酯键 C. 可将基因B直接导入农杆菌，然后感染玫瑰细胞 D. 利用抗原—抗体杂交技术检测导入玫瑰细胞中的B基因是否翻译 19. 蜘蛛丝机械性能高于普通纤维，有广泛的应用前景。中国科学家利用下图质粒成功构建了蛛丝蛋白基因的重组质粒，并在家蚕丝腺细胞中获得大量蛛丝蛋白。下列说法错误的是（ ） A. 为防止目的基因自身环化，可以用限制酶XbaⅠ和SacⅠ来切割目的基因 B. 构建表达载体时选用蚕丝蛋白基因的启动子利于基因在家蚕丝腺细胞中表达 C. 启动子位于目的基因的上游，可以驱动遗传信息的复制和转录 D. 基因表达载体中的标记基因可以鉴别与选择含有蛛丝蛋白基因的受体细胞 20. 将水稻耐盐碱基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中，培育耐盐碱海水稻新品种。下图PCR扩增OsMYB56时需要添加引物，应选用的引物组合为（ ） A. 5'-CTTGGATGAT-3'和5'-TCTGTTGAAT-3' B. 5'-CTTGGATGAT-3'和5'-TAAGTTGTCT-3' C. 5'-ATTCAACAGA-3'和5'-ATCATCCAAG-3' D. 5'-ATTCAACAGA-3'和5'-GAACCTACTA-3 21. 荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量。其原理是在PCR体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。Ct值指荧光信号达到设定阈值时的循环数。下列有关叙述错误的是（ ） A. PCR实验结果中，Ct值越大，说明初始模板核酸的量越少 B. 通过该技术检测样本中病毒核酸的含量，为传染病的诊断提供依据 C. 不同浓度初始核酸样品与其所对应的Ct值绘制成的坐标曲线是数学模型 D. 在荧光定量PCR过程中，作为原料的脱氧核苷酸需要用32P标记 22. 以下关于基因表达载体组成的说法正确的是（ ） A. 基因表达载体通常采用抗生素合成基因作为标记基因 B. 基因表达载体的构建是基因工程操作程序的核心步骤 C. 终止子在基因的上游，它控制着转录的结束 D. 基因表达载体的组成应包括目的基因、启动子、终止密码子、标记基因等 23. 为了降低人葡萄糖脑苷脂酶（hGC）缺乏症的治疗成本，研究人员构建了含有hGC基因的重组Ti质粒，并通过农杆菌转化法将hGC基因导入烟草中，并高效表达，其过程如下图所示。下列叙述错误的是（ ） A. ①过程中目的基因需要插入到Ti质粒的T-DNA分子中 B. 将含有hGC基因的重组质粒导入受体细胞后，还需要利用植物组织培养技术 C. 从愈伤组织中提取的蛋白质作为抗原，进行抗原-抗体杂交检测hGC基因是否翻译 D. 农杆菌转化法只适用于双子叶植物和裸子植物，不能用于单子叶植物 24. 基因工程自20世纪70年代兴起后，在农牧业、医药卫生和食品工业等方面得到了飞速的发展。下列关于基因工程应用的叙述，错误的是（ ） A. 将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组，使获得的转基因奶牛分泌的乳汁中，乳糖的含量降低 B. 一般将基因表达载体导入山羊乳腺细胞来获得在乳腺中表达所需蛋白质的转基因动物 C. 作为乳腺生物反应器的动物体内只有乳腺细胞能表达目的基因 D. 将降解或者抵抗某种除草剂的基因导入作物，可以培育出抗除草剂的作物品种 25. 聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）塑料难以降解，易造成严重的环境污染。科研人员从某种细菌中发现了一种能降解PET的酶（PETase），但其热稳定性和降解效率较低。通过分析PETase的三维结构，将其中第238位的甘氨酸替换为酪氨酸后，获得的新型酶（FAST-PETase）在40～50℃下的降解效率提高了数百倍，其在塑料回收中展现出应用前景。下列叙述错误的是（ ） A. 改造PETase从根本上是对其编码基因进行修饰 B. 对PETase分子结构与功能的深入了解是成功改造的关键 C. 获得FAST-PETase的基因后，可将其直接导入工程菌用于工业化生产 D. 该改造体现了“从预期功能出发→设计蛋白质结构→改造基因”的蛋白质工程思路 二、非选择题（本题包括5小题，共50分） 26. 动物的粪便中包含食物残渣、肠道微生物、寄生虫虫卵等。为研究者提供了许多宝贵的信息。研究人员欲从反刍性食草动物的粪便中分离出纤维素分解菌。按照下图流程对获取的粪便进行处理，请分析回答下列问题： （1）从粪便中筛选目的菌需要使用以____________为唯一碳源的培养基，这种培养基从功能上属于____________培养基。 （2）如图1所示流程是通过____________法将菌液接种至培养皿，统计活菌数量。一般选择菌落数目为____________的平板进行计数。 （3）若在纯化培养的三个平板中得到的菌落数分别为204个、206个、208个，则1g粪便中含有的纤维素分解菌数量为____________个。该计数结果一般比实际活菌数偏____________（填“多”或“少”），原因是______________________________________________________________。 （4）在添加刚果红的固体培养基上接种挑选出来的菌种，得到图2所示的菌落和透明圈。其中降解纤维素能力最强的是菌落________________。 27. “白菜-甘蓝”是科学家将白菜（2n=20）和甘蓝（2n=18）利用植物体细胞杂交技术培育的，同普通白菜相比，它具有生长期短、耐热性强、易储存等优点，如图为“白菜—甘蓝”的培育过程，请回答下列问题： （1）在进行体细胞杂交之前，必须利用____________去除细胞壁，获得原生质体A和原生质体B。人工诱导原生质体融合的方法有多种，除高Ca2+-高pH融合法外常用的化学方法是____________，融合完成的标志是__________________。 （2）仅考虑两两融合，融合得到的细胞有____________种类型，其中符合要求的细胞的染色体数是____________。理论上获得的杂种植株是否可育？____________（填“是”或“否”）。 （3）此过程所利用的原理有：________________________________________________________（答出2点）。 （4）植物体细胞杂交技术和传统杂交技术相比，其优点____________________________________。 28. 紧密连接蛋白（CLDN6）是一种跨膜蛋白，在乳腺癌、肝癌等多种癌症中特异性高表达，能促进肿瘤发生、生长和迁移等，美登素（DM1）是一种抑制微管蛋白聚集的化疗药物，副作用较大。为实现DM1对肿瘤细胞的靶向作用，研究人员以CLDN6为靶点制备相应单克隆抗体并构建抗体-药物偶联物，部分过程及作用机制如图，回答下列问题。 （1）本研究中使用的抗原是_____________，与植物体细胞杂交相比，过程①特有的诱导方法是__________。 （2）制备单克隆抗体的过程中用到的技术有_______________和_________________________________。 （3）过程③需要进行的操作是___________和_____________。过程③处理的目的是得到____________的细胞。 （4）过程④构建的抗体-药物偶联物（CLDN6抗体-DM1），其中起到靶向作用的是__________（填“a”或“b”）部分，最终杀伤肿瘤细胞的是______________（填“a”或“b”）部分。 29. 如图为利用生物技术获得生物新品种的过程，据图回答： （1）在基因工程中，A表示目的基因，B表示构建的基因表达载体，完成B一般所用的酶有___________和______________。构建成功的产物除目的基因外，还必须有启动子、终止子以及___________等，其中启动子是______________识别和结合的部位。 （2）B→C为转基因绵羊的培育过程，其中②过程常用的方法是______________。若想通过转基因绵羊可分泌的乳汁来生产人类蛋白质，在基因表达载体中，目的基因的首端必须含有_______________等调控元件。 （3）B→D为转基因抗虫棉的培育过程，若使用的棉花受体细胞为茎尖细胞，⑤表示的生物技术是___________________。要确定目的基因（抗虫基因）导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，其中检测目的基因是否转录出了mRNA，常用方法是___________________。 30. 尖孢镰刀菌（Fo）会引起百合鳞茎腐烂病，对百合的生产和繁育造成损失。野生百合一般不抗Fo，科学家从岷江百合中获得了Lr70基因，培育出了高抗性的百合品种。Lr70基因的表达依赖强启动子pL，二者的结构如图1所示。Ti质粒用于研究强启动子pL的活性，如图2所示。回答下列问题： 注：图1标注了多个限制酶的识别及切割的位点，图2中gus基因表达的GUS酶能使X-Gluc变成蓝色。 （1）在体外利用PCR技术扩增Lr70基因时，在反应体系中加入___________种引物，引物的作用是___________________________。为激活DNA聚合酶的活性，在反应体系中可加入____________。能使反应体系中的DNA解链为单链的条件是____________。 （2）扩增后，常用______________法鉴定PCR扩增的产物。将pL-Lr70基因转入百合受体细胞的常用方法是_________________________。 （3）图2为研究强启动子pL的活性，构建重组质粒时要用强启动子pL替换质粒启动子，则应选用图示的限制酶____________和____________进行切割。 （4）将农杆菌（对照）和转染后的农杆菌培养在含有____________的培养基上，预期实验结果是对照组培养基出现蓝色，实验组培养基出现_______________________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $