精品解析：江西省景德镇市乐平市第一中学2025-2026学年高二下学期7月期末考试生物试题

2025—2026学年下学期期末考试 高二生物试卷 一、单选题（本题共12小题，每小题2分，共24分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的） 1. 我国利用传统发酵技术制作腐乳、泡菜的历史悠久，极大丰富了人们的饮食。下列相关叙述不正确的是（ ） A. 家庭制作泡菜和腐乳通常利用天然菌种进行发酵 B. 发酵过程中，原料中有机物的总量和种类会不断减少 C. 制作泡菜时，亚硝酸盐的含量会先上升后下降 D. 制作腐乳时，利用毛霉等微生物产生的蛋白酶 【答案】B 【解析】 【详解】A、家庭制作泡菜和腐乳无需人工接种纯化菌种，通常利用原料表面、空气中天然存在的菌种进行发酵，A正确； B、发酵过程中微生物会通过呼吸作用消耗原料中的有机物，因此有机物总量减少；但微生物代谢会将大分子有机物分解为多种小分子中间产物、代谢产物，有机物种类会增加，并非总量和种类都不断减少，B错误； C、制作泡菜初期，硝酸还原菌等杂菌繁殖，将硝酸盐还原为亚硝酸盐，亚硝酸盐含量上升；随着发酵进行，乳酸积累抑制杂菌活性，亚硝酸盐被逐步分解，含量下降，因此亚硝酸盐含量先上升后下降，C正确； D、腐乳制作过程中，毛霉等微生物产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，是腐乳制作的核心原理之一，D正确。 2. 进行土壤中尿素分解菌的选择培养所使用的培养基组分及含量如下表所示。下列叙述错误的是（　　） 组分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 蒸馏水 含量 1.4g 2.1g 0.2g 10.0g 1.0g 15.0g 定容至1000mL A. 由表可知，该培养基属于固体培养基 B. 尿素可以为尿素分解菌提供氮源 C. 将培养基先进行高压蒸汽灭菌再调节pH D. 该培养基上也可能长出不能分解尿素的细菌 【答案】C 【解析】 【详解】A、由表可知，培养基有琼脂成分，则该培养基属于固体培养基，A正确； B、葡萄糖的组成元素为C、H、O，可以为尿素分解菌提供碳源，B正确； C、在制备固体培养基时需要先对pH进行调节，再进行高压蒸汽灭菌，C错误； D、能够利用尿素作为氮源的微生物能在该种培养基上生长，除此之外，固氮菌也可在该培养基上生长，D正确。 3. 苹果醋是以苹果为原料经甲、乙两个阶段发酵而成的，如下图所示。下列说法正确的是（ ） A. 甲阶段的发酵温度低于乙阶段的发酵温度 B. 根据醋酸菌的呼吸作用类型分析，乙阶段需要在无氧条件下完成 C. 过程①在酵母菌细胞的细胞质基质中进行，过程②③在线粒体中进行 D. 无论什么条件下，醋酸菌都可直接将葡萄糖分解为乙酸 【答案】A 【解析】 【详解】A、甲阶段为酵母菌酒精发酵，最适发酵温度为18~25℃，乙阶段为醋酸菌醋酸发酵，最适发酵温度为30~35℃，因此甲阶段的发酵温度低于乙阶段，A正确； B、醋酸菌是需氧型微生物，乙阶段醋酸发酵必须在有氧条件下完成，无氧条件下醋酸菌无法正常代谢，B错误； C、过程①是细胞呼吸第一阶段，场所为细胞质基质；过程②是酵母菌无氧呼吸第二阶段，场所也为细胞质基质，只有过程③是有氧呼吸第二、三阶段，场所为线粒体，C错误； D、醋酸菌仅在氧气、糖源都充足的条件下，可直接将葡萄糖分解为乙酸；若糖源不足，醋酸菌会先将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为乙酸，并非任何条件下都能直接分解葡萄糖产乙酸，D错误。 4. 菊花的组织培养实现了从茎段到植株的转变。下列说法正确的是（　　） A. 培养基、玻璃器皿和金属器具需进行干热灭菌 B. 诱导愈伤组织的培养基中，生长素与细胞分裂素的质量比大于1 C. 外植体茎段先脱分化形成愈伤组织，再诱导生芽 D. 愈伤组织后续分化培养过程一般不需要光照 【答案】C 【解析】 【详解】A、培养基需用高压蒸汽灭菌，干热灭菌会破坏培养基的营养成分、导致水分流失，仅玻璃器皿、金属器具可采用干热灭菌，A错误； B、诱导愈伤组织时，生长素与细胞分裂素的比值适中，当二者比值大于1时更有利于诱导生根，而非愈伤组织形成，B错误； C、植物组织培养过程中，外植体茎段首先经脱分化形成愈伤组织，调整培养基激素比例后可诱导愈伤组织分化生芽，C正确； D、愈伤组织诱导阶段一般不需要光照，但后续再分化（分化）培养时需要光照，用于诱导叶绿素合成，满足植株光合作用需求，D错误。 5. 2025年，中国科学家首次实现基因编辑猪肝脏并移植到人体内，该供体猪经过基因编辑，敲除猪的GGTA1、B4GALNT2和CMAH基因，并引入人类的CD55、CD46和TBM基因，移植肝脏维持功能长达9天。下列相关叙述错误的是（　　） A. 猪的GGTA1、B4GALNT2和CMAH基因可能是抗原决定基因 B. 培育出的转基因克隆猪器官不会引起免疫排斥反应 C. 猪的内脏构造、大小和血管分布与人的极为相似 D. 与灵长类动物相比较，猪体内隐藏的可导致人类患病的病毒更少 【答案】B 【解析】 【详解】A、将猪器官移植到人体内时首要解决的是免疫排斥问题，敲除GGTA1、B4GALNT2和CMAH基因可降低免疫排斥风险，说明这三个基因可能是控制抗原合成的抗原决定基因，A正确； B、基因编辑后，供体猪的肝脏移植后能维持功能9天，说明该器官可能仍会引发免疫排斥反应，该基因编辑只能减弱免疫排斥反应，无法完全消除免疫排斥，B错误； C、猪的内脏构造、大小和血管分布与人极为相似，是猪适宜作为异种器官供体的重要生理基础，C正确； D、灵长类动物与人类亲缘关系更近，其体内携带的可导致人类患病的病毒更容易跨物种感染人类，数量远高于猪，D正确。 6. 下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，不正确的是（　　） A. ②→③可用Ca2+处理农杆菌，有助于促进重组Ti质粒转入农杆菌细胞中 B. ③→④用农杆菌侵染植物细胞，重组Ti质粒整合到植物细胞的染色体上 C. ④→⑤用植物组织培养技术培养，利用了植物细胞的全能性 D. 培育转基因抗虫植物的最后步骤是对植株进行抗虫性状鉴定 【答案】B 【解析】 【详解】A、②→③可用Ca2+处理农杆菌，使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态，这样有助于促进重组Ti质粒转化到农杆菌细胞中，A正确； B、③→④用农杆菌侵染植物细胞，重组Ti质粒的T-DNA片段整合到植物细胞的染色体上，B错误； C、④→⑤用植物组织培养技术培养，利用了植物细胞的全能性，将植物细胞培育成完整的植株，C正确。 D、培育转基因生物的最后步骤是对生物性状进行鉴定，D正确。 7. 科学家们已通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等。采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是（　　） ①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列 ②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列 ③蓝色荧光蛋白基因的合成 ④表达出蓝色荧光蛋白 A. ①②③④ B. ②①③④ C. ②③①④ D. ④②①③ 【答案】B 【解析】 【详解】蛋白质工程的正确流程为：先进行蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计（②），再推测其氨基酸序列和对应的基因核苷酸序列（①），之后人工合成蓝色荧光蛋白基因（③），最终让基因表达出蓝色荧光蛋白（④），顺序为②①③④，B正确，ACD错误。 8. 下列有关细胞工程的叙述，错误的是（ ） A. 细胞工程应用的是细胞生物学、分子生物学和发育生物学等学科的原理和方法 B. 可以通过在分子水平上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质 C. 根据操作对象的不同，可以分为植物细胞工程和动物细胞工程 D. 细胞工程可以打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 【答案】B 【解析】 【详解】A、细胞工程以细胞生物学、分子生物学为基础，可能涉及发育生物学（如胚胎工程）等学科的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术，A正确； B、“分子水平操作改变遗传物质”属于基因工程的特点，而细胞工程主要在细胞或细胞器水平操作，B错误； C、根据操作对象的不同，细胞工程分为植物细胞工程和动物细胞工程，如植物组织培养和动物细胞融合，C正确； D、细胞工程（如植物体细胞杂交）可克服生殖隔离，实现远缘杂交，D正确。 故选B。 9. 女性甲患有严重的线粒体遗传病，现用线粒体置换技术从其卵母细胞中取得细胞核，植入女性乙的去核卵母细胞中，经体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植，最后生育出健康婴儿。下列说法正确的是（　　） A. 可采用紫外线长时间照射等方法去除女性乙的卵母细胞核 B. 将MⅡ期卵母细胞与获得能量的精子共同培养完成体外受精 C. 卵裂期胚胎总体积不增加，发育到囊胚阶段可进行胚胎移植 D. 线粒体置换技术能完全去除来自女性甲卵母细胞的致病基因 【答案】C 【解析】 【详解】A、若要通过紫外线照射去除细胞核，应短时间照射，A错误； B、精子在发生受精作用之前需要进行获能处理，但不是指“获得能量”，而是指获得受精能力，B错误； C、卵裂期细胞数量增加但胚胎的总体积不增加，在发育至桑葚胚或囊胚期可进行胚胎分割和胚胎移植，C正确； D、由题干信息可知，线粒体置换技术相当于核移植，在核移植过程中，无法保证只移植细胞核而不连带线粒体，而是有可能会移植少量细胞质中的线粒体，所以该技术不能完全去除来自女性甲卵母细胞的致病基因，D错误。 10. 近期我国研究人员利用新型人工诱导多能干细胞，在具有肾脏分化缺陷的猪囊胚时期注射3~5个人源供体细胞，以构建嵌合胚胎，将嵌合胚胎在等比例混合的胚胎培养基和干细胞培养基中培养24小时后，移植入代孕猪，从嵌合猪胎儿可获得人源细胞占比高达70％的肾脏，为人体器官移植供体的来源探索了新途径。下列相关叙述错误的是（　　） A. 多能干细胞具有全能性，可以分化形成完整的个体 B. 构建嵌合胚胎需将人源细胞注入到猪囊胚的内细胞团中 C. 植入嵌合胚胎前的代孕母猪需注射激素进行同期发情处理 D. 通过嵌合胚胎获得的肾源，移植到人体内可减少排斥反应 【答案】A 【解析】 【详解】A、多能干细胞具有发育为多种组织细胞的潜能，但无法发育成完整个体，只有全能干细胞（如受精卵）才具有这种能力，A错误； B、囊胚的内细胞团将发育为胎儿的各种组织，将人源细胞注入此处可使其参与器官形成，B正确； C、胚胎移植前需对代孕母猪进行同期发情处理，使其生理状态与供体一致，C正确； D、嵌合胚胎中的人源细胞与受体同种，移植后免疫排斥反应会降低，D正确。 故选A。 11. 下列关于生物技术安全性和伦理的叙述，正确的是（ ） A. 生物技术可广泛应用在人类自身基因组改造和新物种创造中 B. 生殖性克隆人破坏了人类遗传多样性的天然属性，不利于人类的生存和进化 C. 鼓励发展基因编辑技术来设计试管婴儿解决不孕问题 D. 转基因食品中的外源基因经过食用后会进入人体细胞并整合到人体的基因组中 【答案】B 【解析】 【分析】1、生殖性克隆指将克隆技术用于生育目的，即用于产生人类个体。治疗性克隆指利用克隆技术产生特定细胞和组织(皮肤、神经或肌肉等)用于治疗性移植。 2、中国政府:禁止生殖性克隆人，坚持四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验，不反对治疗性克隆人。 3、转基因生物的安全性问题：食物安全(滞后效应、过敏源、营养成分改变)、生物安全(对生物多样性的影响)、环境安全(对生态系统稳定性的影响)。 【详解】A、人类自身基因组改造和新物种创造中，要严防滥用，A错误； B、生殖性克隆人破坏了人类遗传（基因）多样性的天然属性，不利于人类的生存和进化，B正确； C、基因编辑技术存在安全风险，不可滥用设计试管婴儿技术选择性设计婴儿，C错误； D、转基因食品中的外源基因经过食用后会被消化分解，不会进入人体细胞并整合到人体的基因组中，D错误。 故选:B。 12. 生物安全是指国家有效防范和应对危险生物因子及相关因素威胁，生物技术能够稳定健康发展，人民生命健康和生态系统相对处于没有危险和不受威胁的状态，生物领域具备维护国家安全和持续发展的能力。下列说法错误的是（　　） A. 生物武器是指致病菌类和病毒类，其攻击范围广，传播途径多、传播时具有潜伏期 B. 我国禁止生殖性克隆人的实验，对治疗性克隆实验也进行严格审查 C. 在转基因工作中科学家会采取很多方法防止基因污染，如阻断淀粉储藏使花粉失活 D. 为避免可能产生的基因歧视，基因检测机构不能随意泄露基因检测的结果 【答案】A 【解析】 【详解】A、生物武器不仅包括致病菌类和病毒类，还可能包含毒素及基因重组的致病生物等，A错误； B、我国明确禁止生殖性克隆人，但对治疗性克隆（如干细胞研究）进行严格监管，B正确； C、转基因作物可通过阻断花粉形成（如花粉败育技术）避免基因污染，阻断淀粉储藏导致花粉失活是可行方法，C正确； D、基因检测结果涉及隐私，泄露可能导致基因歧视，因此需严格保密，D正确。 二、多选题（本题共4个小题，每小题4分，共16分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得4分，选对但不全的得2分，有选错的得0分） 13. 幽门螺杆菌（Hp）可通过手、不洁食物和餐具等途径传染，日常饮食中养成良好的卫生习惯能预防Hp感染。Hp产生的脲酶能催化尿素分解为NH3和CO2，若需检测某人是否感染Hp，可使其服用含有以14C标记的尿素胶囊。下列有关叙述正确的是（　　） A. 若进行实验室培养Hp，则培养基的pH应设置在中性或弱碱性 B. Hp可以分解尿素产生氨中和胃酸，适应胃部的酸性环境 C. 日常饮食中的分餐制和使用公筷可防止Hp交叉传播 D. 服用胶囊后，可通过检测呼出气体是否带有放射性判断其是否感染 【答案】BCD 【解析】 【详解】A、Hp生存的胃部为强酸性环境，实验室筛选培养Hp时需要设置酸性的培养基环境，以维持其活性，A错误； B、Hp产生的脲酶可催化尿素分解产生碱性的NH3，能够中和Hp周围的胃酸，营造适宜其生存的微环境，从而适应胃部的酸性环境，B正确； C、题干明确Hp可通过不洁食物、餐具等途径传染，分餐制和使用公筷可切断Hp的传播途径，有效防止交叉传播，C正确； D、人体细胞不含有脲酶，无法分解尿素，若受试者感染Hp，Hp产生的脲酶会将服用的14C标记的尿素分解为带放射性的14CO2，随呼气排出，因此可通过检测呼出气体的放射性判断是否感染，D正确。 14. 现代生物技术广泛应用于农业生产与医药领域。下列叙述正确的有（　　） A. 利用植物组织培养技术繁育脱毒苗，原理是植物细胞的全能性 B. PCR扩增目的基因时，需要解旋酶和热稳定DNA聚合酶共同作用 C. 构建基因表达载体时，限制酶与DNA连接酶均作用于磷酸二酯键 D. 胚胎分割移植可获得遗传物质完全相同的后代，属于无性生殖 【答案】ACD 【解析】 【详解】A、繁育脱毒苗时一般选取植物茎尖（几乎不含病毒）的分生区细胞进行植物组织培养，原理是植物细胞具有全能性，A正确； B、PCR扩增目的基因时，依靠高温变性使DNA双链解旋，不需要额外加入解旋酶，仅需要热稳定DNA聚合酶（Taq酶），B错误； C、限制酶断裂DNA的磷酸二酯键以切割DNA，DNA连接酶形成磷酸二酯键以连接DNA片段，二者均作用于磷酸二酯键，C正确； D、胚胎分割得到的多个后代均来自同一个受精卵，遗传物质完全相同；该过程没有两性生殖细胞的结合，属于无性生殖，D正确。 15. 控制哺乳动物的性别对畜牧生产具有重要意义，目前常用的方法是通过分离精子技术和胚胎工程技术培育出所需性别的试管动物。下图表示利用上述技术培育试管牛的过程。下列叙述错误的是（　　） A. 试管牛和克隆牛的培育均属于有性生殖，过程①指的是体外受精技术 B. 过程①中，卵细胞膜发生生理反应是阻止多精入卵的最后一道屏障 C. 若想得到2个相同的母牛犊牛，则最好在原肠胚时期进行胚胎分割 D. 胚胎移植前需要对供体和受体进行免疫检查，防止发生免疫排斥反应 【答案】ACD 【解析】 【详解】A、试管牛的培育经过了体外受精，属于有性生殖；克隆牛的培育采用的是核移植技术，没有两性生殖细胞的结合，属于无性生殖，A错误； B、过程①，精卵结合的过程，其中卵细胞膜发生的生理反应（卵细胞膜反应）是阻止多精入卵的最后一道屏障，B正确； C、若想得到遗传物质完全相同的同卵双胎，胚胎分割的最佳时期是桑椹胚或囊胚期，原肠胚时期细胞已发生明显分化，分割后成活率低，不适合进行胚胎分割，C错误； D、受体子宫对移入的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，胚胎移植前不需要对供体和受体进行免疫检查，D错误。 16. 干细胞有自我更新能力及分化潜能，小鼠成纤维细胞可被诱导成为iPS细胞，而小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞用于研究。某科研小组采用“胚胎干细胞介导法”将荧光素基因导入纯种灰色小鼠胚胎干细胞（ES细胞）中并整合到染色体上，然后将转基因的ES细胞注射到纯种黄色小鼠囊胚中培育嵌合体小鼠。下列正确的是（ ） A. 荧光素基因可用于检测子代小鼠体内由灰色小鼠胚胎发育的部分 B. iPS细胞也能由已分化的B细胞和T细胞诱导而来，用iPS细胞分化形成的器官组织治疗疾病理论上可以避免免疫排斥 C. 注入ES细胞的囊胚移植前需用激素对受体母鼠进行同期发情处理 D. 割取黄色小鼠囊胚的滋养层细胞做DNA分析或核型分析即可检测嵌合体子代鼠的性别 【答案】ABC 【解析】 【详解】A、荧光素基因整合到灰色小鼠ES细胞的染色体上，由该ES细胞分化发育而来的组织细胞会表达荧光素，因此可用于检测子代小鼠体内由灰色小鼠胚胎来源的ES细胞发育的部分，A正确； B、已分化的B细胞、T细胞等体细胞均可被诱导为iPS细胞，由患者自体体细胞诱导得到的iPS细胞分化形成的器官组织，与患者的组织相容性抗原一致，理论上可以避免免疫排斥，B正确； C、胚胎移植前需对受体母鼠进行同期发情处理，使受体与供体的生殖器官生理状态相同，为移入胚胎提供适宜的生理环境，保证胚胎能够正常着床，C正确； D、囊胚的滋养层细胞将来发育为胎膜和胎盘，不发育为子代小鼠个体，且该囊胚为嵌合体，滋养层细胞可能来自黄色小鼠或灰色小鼠ES细胞，仅检测滋养层细胞无法确定嵌合体子代鼠的性别，D错误。 三、非选择题（本题共5小题，共60分） 17. Ⅰ.淀粉酶在工业生产上应用最早，迄今仍是用途最广、产量最大的酶制剂产品之一。为了提高淀粉酶的生产水平，首先要从土壤中筛选出产淀粉酶的活性菌株。研究人员对所取土样进行产淀粉酶的细菌的分离操作（A组）和计数操作（B组），过程如图Ⅰ。图Ⅱ是一种接种方法示意图。 请回答下列问题： （1）步骤③、④所用培养基的成分，最大的区别是____________种类不同。 （2）步骤④、⑤所用培养基的成分，最大的区别是固体培养基中添加了____________。步骤⑤、⑧接种时需设置未接种培养基做对照，目的是________________________。 （3）图Ⅱ中甲、乙、丙为划线的三个区域，为正确完成整个接种过程，接种环要进行________次灭菌。 Ⅱ.我国十分重视对环境污染的治理，随着生物技术的发展，利用微生物降解污染物成为环境治理的重要方法之一。工业污水中含有的多环芳烃类化合物会造成农田土壤污染，请围绕污染土壤修复的微生物筛选，回答下列问题。 （4）为了获得能降解多环芳烃化合物的菌株，配制的培养基中________是唯一碳源。 （5）在分离纯化过程中，土壤样品需经________后再涂布平板，原因是防止浓度过高，不便于分离菌落。如果分离纯化菌株不是纯培养物，除稀释涂布平板法之外，还可以采用________法进一步分离纯化。 【答案】（1）碳源 （2） ①. 琼脂 ②. 检测培养基是否被污染 （3）4##四 （4）多环芳烃化合物 （5） ①. 梯度稀释##稀释 ②. 平板划线 【解析】 【小问1详解】 步骤③是扩大培养，培养基中通常使用普通碳源（如葡萄糖），目的是让所有细菌都能生长，增加菌量。步骤④是选择培养基培养，为了筛选产淀粉酶的细菌，会使用淀粉作为唯一碳源，这样只有能利用淀粉的产淀粉酶细菌才能生长繁殖，其他细菌因缺乏碳源无法生长。因此二者最大的区别是碳源种类不同。 【小问2详解】 步骤④中为液体培养基，步骤⑤所用的培养基为固体培养基，两者最大的区别是固体培养基中添加了琼脂作为凝固剂；为检测培养基是否被污染，步骤⑤、⑧接种时需设置未接种培养基做对照，通过比较空白培养基与接种培养基的菌落数目检测污染情况进而检测培养基是否被污染。 【小问3详解】 图Ⅱ所用的接种方法称为平板划线法；甲、乙、丙为划线的三个区域，为正确完成整个接种过程，接种环要进行4次（每次划线前1次，最后一次划线结束后还有1次）灼烧灭菌，第一次灭菌是为了防止杂菌污染，后三次灭菌是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，其中最后一次灭菌是防止菌种污染环境。 【小问4详解】 为了获得能降解多环芳烃化合物的菌株，配制的培养基中应以多环芳烃化合物为唯一碳源，在此培养基上，只有能降解多环芳烃化合物的菌株能生长，而不能降解多环芳烃化合物的菌株会因为缺乏碳源而不能生长。 【小问5详解】 因为只有稀释倍数足够高的情况下才能获得单菌落，因此在分离纯化过程中，土壤样品经梯度稀释后再涂布平板，以防止菌液浓度过高，不便于分离菌落。如果分离纯化菌株不是纯培养物，除稀释涂布平板法之外，还可以采用平板划线法进一步分离纯化，但该方法不能计数。 18. 科学家利用单克隆抗体技术，分别获得鼠抗体与人抗体，再将抗体进行改造，生产出效果更好的鼠-人嵌合抗体，用于癌症治疗。下图表示形成鼠-人嵌合抗体的过程。请据图回答： （1）培养骨髓瘤细胞时，需用________处理一段时间，这样组织就会分散成单个细胞；制备单克隆抗体时，先用特定的选择性培养基进行筛选，获得________；然后对上述细胞进行抗体检测，选取________的细胞进行克隆化培养。 （2）在细胞内DNA合成一般有两条途径。主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基喋呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。根据此原理，向经诱导后的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基喋呤，________（填“能”或“不能”）筛选出杂交瘤细胞。 （3）改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠—人嵌合抗体，属于________（生物工程）的范畴。经过改造的鼠—人嵌合抗体，与鼠源杂交瘤抗体相比较，突出的优点是________________（从免疫角度考虑）。 【答案】（1） ①. . 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） ②. 杂交瘤细胞 ③. 专一抗体检验阳性（或能产生专一抗体） （2）能 （3） ①. 蛋白质工程 ②. 对人体的不良反应减少 【解析】 【小问1详解】 培养骨髓瘤细胞时，需要将所选取的组织细胞分散开，以利于细胞融合，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理离体组织细胞使之分散开，此外还应定期更换培养液，以清除代谢产物，有利于细胞的生长。制备单克隆抗体时，因为细胞的融合过程是随机的，因此融合后需要先用特定的选择性培养基进行筛选，获得杂交瘤细胞；然后对上述细胞进行抗体检测，选取专一抗体检验阳性（或能产生专一抗体）的细胞进行克隆化培养。 【小问2详解】 氨基蝶呤可以阻断细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA的途径，又因为骨髓瘤细胞的DNA合成没有辅助途径，若向经诱导后的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基喋呤能筛选杂交瘤细胞，因为浆细胞不能增殖，骨髓瘤细胞中的DNA合成途径被阻断不能增殖，杂交瘤细胞可通过辅助途径合成DNA，能够增殖，所以可以筛选出杂交瘤细胞。 【小问3详解】 从免疫的角度考虑，对人体来说鼠源抗体为抗原，若利用人的抗体与之嵌合，则排斥作用会减轻，对人体的副作用会减少，因此设计改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠—人嵌合抗体，这属于蛋白质工程的技术范畴。该过程首先需要根据预期的嵌合抗体功能，设计嵌合抗体的结构，然后推测相应的基因片段，最终对基因进行操作，因此该工程又叫做第二代基因工程。经过改造的鼠人嵌合抗体，与鼠源杂交瘤抗体相比较，突出的优点是对人体的不良反应减少。 19. 2018年《细胞》期刊报道，中国科学家率先成功应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆，获得两只克隆小猴——“中中”和“华华”。下图是该项技术的流程图，据图下列问题。 （1）科学家曾成功培育出胚胎细胞克隆猴，但“中中”和“华华”的出生仍然轰动世界，这是因为体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，其原因是_______。 （2）体细胞核移植需借助去核的_______细胞，因其细胞质中含有促进核基因_______的物质。 （3）体外培养胎猴体细胞时，需定期更换培养液的原因是_______。 （4）体细胞克隆猴的另外一个技术难点是胚胎发育率低。研究人员将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入重构胚，可使胚胎的发育率明显提高，推测可能的原因是_______。 （5）若获得的克隆动物与核供体动物性状不完全相同，分析其原因可能是_______（答出一点）。 【答案】（1）体细胞分化程度高，全能性表现困难 （2） ①. 卵母 ②. 重新表达 （3）清除代谢废物，补充营养物质，维持细胞正常代谢 （4）该mRNA能够使细胞表达组蛋白去甲基化酶Kdm4d，进而促进组蛋白去甲基化，使相关基因表达，从而提高胚胎的发育率 （5）卵母细胞质中的遗传物质影响性状；环境因素导致表型差异 【解析】 【分析】克隆动物概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体；用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 【小问1详解】 体细胞分化程度高，表现全能性困难，而胚胎细胞分化程度低，表现全能性容易，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。 【小问2详解】 体细胞核移植需借助去核的卵（母）细胞。卵（母）细胞的细胞质中含有促进核基因重新表达的物质，能激发细胞核的全能性，使重组细胞能发育成完整的个体。 【小问3详解】 在体外培养细胞时，细胞会进行新陈代谢，产生一些代谢废物，如二氧化碳等。定期更换培养液可以清除代谢废物，补充营养物质，维持细胞正常代谢，为细胞提供一个相对稳定的生存环境，有利于细胞的生长和增殖。 【小问4详解】 我国科学家将组蛋白去甲基化酶（Kdm4d）的mRNA注入重构胚，注入Kdm4d的mRNA可表达出Kdm4d，降低组蛋白的甲基化水平，调节相关基因的表达，使其完成细胞分裂和发育进程，提高了胚胎的发育率。 【小问5详解】 若获得的克隆动物与核供体动物性状不完全相同，这可能是因为卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响（或克隆动物有部分遗传物质来自卵母细胞），也可能是环境会对克隆小猴的性状产生影响。 20. 和牛是世界公认的高档肉牛品种，其体型较小，肉质鲜嫩，营养丰富。我国科研人员利用胚胎移植技术，按如图所示流程操作，成功地批量培育了和牛这一优良品种。请回答下列问题： （1）用____________激素处理，可使供体母牛超数排卵，过程①中产生的精子需要进行____________处理后才具有与卵细胞受精的能力。 （2）试管牛的培育需要的工程技术有____________、____________和胚胎移植等。 （3）为培育子代雌性小牛，胚胎移植前须进行性别鉴定，宜取图中____________细胞进行DNA分析。 （4）为提高胚胎利用效率，尽快获得数量较多的子代和牛，采用____________技术对牛胚胎进行处理，产生多个基因型____________（相同、不同）的后代。 【答案】（1） ①. 促性腺 ②. 获能 （2） ①. 体外受精 ②. 早期胚胎培养 （3） 滋养层 （4） ①. 胚胎分割 ②. 相同 【解析】 【小问1详解】 对供体母牛注射促性腺激素是实现超数排卵的常规操作；刚采集的精子没有受精活性，必须经过获能处理后才能和成熟卵细胞完成受精。 【小问2详解】 试管牛属于体外受精动物，首先需要完成精子和卵细胞的体外受精，之后要将受精卵在体外培养到桑椹胚或囊胚阶段（早期胚胎培养），才能进行后续的胚胎移植操作，因此核心技术包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植。 【小问3详解】 囊胚的滋养层细胞将来发育为胎膜、胎盘，不参与胎儿本体的形成，取滋养层细胞做DNA性别鉴定不会损伤发育为胎儿的内细胞团，不会影响胚胎后续发育。 【小问4详解】 胚胎分割技术可将一枚早期胚胎分割成多份，获得多个同卵后代，大幅提高胚胎利用效率；分割得到的所有胚胎均来自同一个受精卵的有丝分裂，遗传物质一致，因此基因型相同。 21. 水蛭素是水蛭唾液腺分泌的一种蛋白质，具有良好的抗凝血作用。已知天然的水蛭素抗凝血活性较低，产量和来源有限。研究发现，若将其第47位天冬酰胺替换成赖氨酸，可以提高其抗凝血活性。某科研团队拟通过不同的生物技术获得活性高、产量大的重组水蛭素。回答下列问题： （1）图1所示运用蛋白质工程技术得到了凝血活性更高的水蛭素，该技术的直接操作对象是____________。 （2）基因工程中常利用PCR获取和扩增目的基因。PCR扩增时，反应体系中需要加入模板、4种dNTP、引物、____________及缓冲液，4种dNTP的作用是____________。 （3）利用基因工程生产水蛭素时，依据图2信息构建基因表达载体，为使水蛭素基因与质粒高效连接，应选用的限制酶是____________。若采用大肠杆菌作为受体细胞，需要在培养基中加入____________以筛选转化成功的工程菌，并选择颜色为____________的大肠杆菌菌落进一步培养。 注：neor为新霉素抗性基因；malcZ的表达产物会使菌落呈蓝色，否则菌落呈白色。 （4）工业生产中，还可利用制备乳腺生物反应器来生产高抗凝血活性的水蛭素，但制备时需将高抗凝血活性的水蛭素基因与乳腺中特异表达的基因的____________等调控元件重组在一起。 【答案】（1）基因 （2） ①. TaqDNA聚合酶（或耐高温的DNA聚合酶） ②. 为PCR提供原料和能量 （3） ①. XmaI和BglII  ②. 新霉素 ③. 白色 （4）启动子 【解析】 【小问1详解】 图1所示运用蛋白质工程得到凝血活性更高的水蛭素，该技术的直接操作对象是基因，因为蛋白质的结构由基因决定，改造基因才能定向改变蛋白质的结构和功能。 【小问2详解】 PCR扩增DNA模拟的是体内DNA复制的过程，反应体系中需要加入DNA作为模板、4种dNTP、引物、TaqDNA聚合酶（催化DNA子链合成）及缓冲液，4种dNTP分别脱掉两个磷酸基团后形成构成DNA的4种基本单位（脱氧核糖核苷酸），而脱掉磷酸基团的过程中释放的能量可为DNA复制提供能量，因此4种dNTP的作用是为PCR提供原料和能量。 【小问3详解】 由图可知，水蛭素基因左端的黏性末端为5＇CCGG3＇，右端的黏性末端为5＇GATC3＇，而限制酶XmaI和BglⅡ切割产生的黏性末端分别与目的基因两端的黏性末端相同，能使目的基因与质粒高效连接，故应选用的限制酶是XmaI和BglⅡ。malcZ的表达产物会使菌落呈蓝色，否则菌落呈白色，由于XmaI和BglII切割质粒时破坏了malcZ基因，所以重组质粒中malcZ基因被破坏，但含有新霉素抗性基因，因而需要在培养基中加入新霉素，并选择颜色为白色的大肠杆菌菌落，进一步培养、检测和鉴定，以选育出能生产改良水蛭素的工程菌株。 【小问4详解】 制备乳腺生物反应器时，需将高抗凝血活性的水蛭素基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起，这样目的基因才能在乳腺细胞中特异性表达。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025—2026学年下学期期末考试 高二生物试卷 一、单选题（本题共12小题，每小题2分，共24分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的） 1. 我国利用传统发酵技术制作腐乳、泡菜的历史悠久，极大丰富了人们的饮食。下列相关叙述不正确的是（ ） A. 家庭制作泡菜和腐乳通常利用天然菌种进行发酵 B. 发酵过程中，原料中有机物的总量和种类会不断减少 C. 制作泡菜时，亚硝酸盐的含量会先上升后下降 D. 制作腐乳时，利用毛霉等微生物产生的蛋白酶 2. 进行土壤中尿素分解菌的选择培养所使用的培养基组分及含量如下表所示。下列叙述错误的是（　　） 组分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 蒸馏水 含量 1.4g 2.1g 0.2g 10.0g 1.0g 15.0g 定容至1000mL A. 由表可知，该培养基属于固体培养基 B. 尿素可以为尿素分解菌提供氮源 C. 将培养基先进行高压蒸汽灭菌再调节pH D. 该培养基上也可能长出不能分解尿素的细菌 3. 苹果醋是以苹果为原料经甲、乙两个阶段发酵而成的，如下图所示。下列说法正确的是（ ） A. 甲阶段的发酵温度低于乙阶段的发酵温度 B. 根据醋酸菌的呼吸作用类型分析，乙阶段需要在无氧条件下完成 C. 过程①在酵母菌细胞的细胞质基质中进行，过程②③在线粒体中进行 D. 无论什么条件下，醋酸菌都可直接将葡萄糖分解为乙酸 4. 菊花的组织培养实现了从茎段到植株的转变。下列说法正确的是（　　） A. 培养基、玻璃器皿和金属器具需进行干热灭菌 B. 诱导愈伤组织的培养基中，生长素与细胞分裂素的质量比大于1 C. 外植体茎段先脱分化形成愈伤组织，再诱导生芽 D. 愈伤组织后续分化培养过程一般不需要光照 5. 2025年，中国科学家首次实现基因编辑猪肝脏并移植到人体内，该供体猪经过基因编辑，敲除猪的GGTA1、B4GALNT2和CMAH基因，并引入人类的CD55、CD46和TBM基因，移植肝脏维持功能长达9天。下列相关叙述错误的是（　　） A. 猪的GGTA1、B4GALNT2和CMAH基因可能是抗原决定基因 B. 培育出的转基因克隆猪器官不会引起免疫排斥反应 C. 猪的内脏构造、大小和血管分布与人的极为相似 D. 与灵长类动物相比较，猪体内隐藏的可导致人类患病的病毒更少 6. 下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，不正确的是（　　） A. ②→③可用Ca2+处理农杆菌，有助于促进重组Ti质粒转入农杆菌细胞中 B. ③→④用农杆菌侵染植物细胞，重组Ti质粒整合到植物细胞的染色体上 C. ④→⑤用植物组织培养技术培养，利用了植物细胞的全能性 D. 培育转基因抗虫植物的最后步骤是对植株进行抗虫性状鉴定 7. 科学家们已通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等。采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是（　　） ①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列 ②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列 ③蓝色荧光蛋白基因的合成 ④表达出蓝色荧光蛋白 A. ①②③④ B. ②①③④ C. ②③①④ D. ④②①③ 8. 下列有关细胞工程的叙述，错误的是（ ） A. 细胞工程应用的是细胞生物学、分子生物学和发育生物学等学科的原理和方法 B. 可以通过在分子水平上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质 C. 根据操作对象的不同，可以分为植物细胞工程和动物细胞工程 D. 细胞工程可以打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 9. 女性甲患有严重的线粒体遗传病，现用线粒体置换技术从其卵母细胞中取得细胞核，植入女性乙的去核卵母细胞中，经体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植，最后生育出健康婴儿。下列说法正确的是（　　） A. 可采用紫外线长时间照射等方法去除女性乙的卵母细胞核 B. 将MⅡ期卵母细胞与获得能量的精子共同培养完成体外受精 C. 卵裂期胚胎总体积不增加，发育到囊胚阶段可进行胚胎移植 D. 线粒体置换技术能完全去除来自女性甲卵母细胞的致病基因 10. 近期我国研究人员利用新型人工诱导多能干细胞，在具有肾脏分化缺陷的猪囊胚时期注射3~5个人源供体细胞，以构建嵌合胚胎，将嵌合胚胎在等比例混合的胚胎培养基和干细胞培养基中培养24小时后，移植入代孕猪，从嵌合猪胎儿可获得人源细胞占比高达70％的肾脏，为人体器官移植供体的来源探索了新途径。下列相关叙述错误的是（　　） A. 多能干细胞具有全能性，可以分化形成完整的个体 B. 构建嵌合胚胎需将人源细胞注入到猪囊胚的内细胞团中 C. 植入嵌合胚胎前的代孕母猪需注射激素进行同期发情处理 D. 通过嵌合胚胎获得的肾源，移植到人体内可减少排斥反应 11. 下列关于生物技术安全性和伦理的叙述，正确的是（ ） A. 生物技术可广泛应用在人类自身基因组改造和新物种创造中 B. 生殖性克隆人破坏了人类遗传多样性的天然属性，不利于人类的生存和进化 C. 鼓励发展基因编辑技术来设计试管婴儿解决不孕问题 D. 转基因食品中的外源基因经过食用后会进入人体细胞并整合到人体的基因组中 12. 生物安全是指国家有效防范和应对危险生物因子及相关因素威胁，生物技术能够稳定健康发展，人民生命健康和生态系统相对处于没有危险和不受威胁的状态，生物领域具备维护国家安全和持续发展的能力。下列说法错误的是（　　） A. 生物武器是指致病菌类和病毒类，其攻击范围广，传播途径多、传播时具有潜伏期 B. 我国禁止生殖性克隆人的实验，对治疗性克隆实验也进行严格审查 C. 在转基因工作中科学家会采取很多方法防止基因污染，如阻断淀粉储藏使花粉失活 D. 为避免可能产生的基因歧视，基因检测机构不能随意泄露基因检测的结果 二、多选题（本题共4个小题，每小题4分，共16分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得4分，选对但不全的得2分，有选错的得0分） 13. 幽门螺杆菌（Hp）可通过手、不洁食物和餐具等途径传染，日常饮食中养成良好的卫生习惯能预防Hp感染。Hp产生的脲酶能催化尿素分解为NH3和CO2，若需检测某人是否感染Hp，可使其服用含有以14C标记的尿素胶囊。下列有关叙述正确的是（　　） A. 若进行实验室培养Hp，则培养基的pH应设置在中性或弱碱性 B. Hp可以分解尿素产生氨中和胃酸，适应胃部的酸性环境 C. 日常饮食中的分餐制和使用公筷可防止Hp交叉传播 D. 服用胶囊后，可通过检测呼出气体是否带有放射性判断其是否感染 14. 现代生物技术广泛应用于农业生产与医药领域。下列叙述正确的有（　　） A. 利用植物组织培养技术繁育脱毒苗，原理是植物细胞的全能性 B. PCR扩增目的基因时，需要解旋酶和热稳定DNA聚合酶共同作用 C. 构建基因表达载体时，限制酶与DNA连接酶均作用于磷酸二酯键 D. 胚胎分割移植可获得遗传物质完全相同的后代，属于无性生殖 15. 控制哺乳动物的性别对畜牧生产具有重要意义，目前常用的方法是通过分离精子技术和胚胎工程技术培育出所需性别的试管动物。下图表示利用上述技术培育试管牛的过程。下列叙述错误的是（　　） A. 试管牛和克隆牛的培育均属于有性生殖，过程①指的是体外受精技术 B. 过程①中，卵细胞膜发生生理反应是阻止多精入卵的最后一道屏障 C. 若想得到2个相同的母牛犊牛，则最好在原肠胚时期进行胚胎分割 D. 胚胎移植前需要对供体和受体进行免疫检查，防止发生免疫排斥反应 16. 干细胞有自我更新能力及分化潜能，小鼠成纤维细胞可被诱导成为iPS细胞，而小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞用于研究。某科研小组采用“胚胎干细胞介导法”将荧光素基因导入纯种灰色小鼠胚胎干细胞（ES细胞）中并整合到染色体上，然后将转基因的ES细胞注射到纯种黄色小鼠囊胚中培育嵌合体小鼠。下列正确的是（ ） A. 荧光素基因可用于检测子代小鼠体内由灰色小鼠胚胎发育的部分 B. iPS细胞也能由已分化的B细胞和T细胞诱导而来，用iPS细胞分化形成的器官组织治疗疾病理论上可以避免免疫排斥 C. 注入ES细胞的囊胚移植前需用激素对受体母鼠进行同期发情处理 D. 割取黄色小鼠囊胚的滋养层细胞做DNA分析或核型分析即可检测嵌合体子代鼠的性别 三、非选择题（本题共5小题，共60分） 17. Ⅰ.淀粉酶在工业生产上应用最早，迄今仍是用途最广、产量最大的酶制剂产品之一。为了提高淀粉酶的生产水平，首先要从土壤中筛选出产淀粉酶的活性菌株。研究人员对所取土样进行产淀粉酶的细菌的分离操作（A组）和计数操作（B组），过程如图Ⅰ。图Ⅱ是一种接种方法示意图。 请回答下列问题： （1）步骤③、④所用培养基的成分，最大的区别是____________种类不同。 （2）步骤④、⑤所用培养基的成分，最大的区别是固体培养基中添加了____________。步骤⑤、⑧接种时需设置未接种培养基做对照，目的是________________________。 （3）图Ⅱ中甲、乙、丙为划线的三个区域，为正确完成整个接种过程，接种环要进行________次灭菌。 Ⅱ.我国十分重视对环境污染的治理，随着生物技术的发展，利用微生物降解污染物成为环境治理的重要方法之一。工业污水中含有的多环芳烃类化合物会造成农田土壤污染，请围绕污染土壤修复的微生物筛选，回答下列问题。 （4）为了获得能降解多环芳烃化合物的菌株，配制的培养基中________是唯一碳源。 （5）在分离纯化过程中，土壤样品需经________后再涂布平板，原因是防止浓度过高，不便于分离菌落。如果分离纯化菌株不是纯培养物，除稀释涂布平板法之外，还可以采用________法进一步分离纯化。 18. 科学家利用单克隆抗体技术，分别获得鼠抗体与人抗体，再将抗体进行改造，生产出效果更好的鼠-人嵌合抗体，用于癌症治疗。下图表示形成鼠-人嵌合抗体的过程。请据图回答： （1）培养骨髓瘤细胞时，需用________处理一段时间，这样组织就会分散成单个细胞；制备单克隆抗体时，先用特定的选择性培养基进行筛选，获得________；然后对上述细胞进行抗体检测，选取________的细胞进行克隆化培养。 （2）在细胞内DNA合成一般有两条途径。主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基喋呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。根据此原理，向经诱导后的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基喋呤，________（填“能”或“不能”）筛选出杂交瘤细胞。 （3）改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠—人嵌合抗体，属于________（生物工程）的范畴。经过改造的鼠—人嵌合抗体，与鼠源杂交瘤抗体相比较，突出的优点是________________（从免疫角度考虑）。 19. 2018年《细胞》期刊报道，中国科学家率先成功应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆，获得两只克隆小猴——“中中”和“华华”。下图是该项技术的流程图，据图下列问题。 （1）科学家曾成功培育出胚胎细胞克隆猴，但“中中”和“华华”的出生仍然轰动世界，这是因为体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，其原因是_______。 （2）体细胞核移植需借助去核的_______细胞，因其细胞质中含有促进核基因_______的物质。 （3）体外培养胎猴体细胞时，需定期更换培养液的原因是_______。 （4）体细胞克隆猴的另外一个技术难点是胚胎发育率低。研究人员将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入重构胚，可使胚胎的发育率明显提高，推测可能的原因是_______。 （5）若获得的克隆动物与核供体动物性状不完全相同，分析其原因可能是_______（答出一点）。 20. 和牛是世界公认的高档肉牛品种，其体型较小，肉质鲜嫩，营养丰富。我国科研人员利用胚胎移植技术，按如图所示流程操作，成功地批量培育了和牛这一优良品种。请回答下列问题： （1）用____________激素处理，可使供体母牛超数排卵，过程①中产生的精子需要进行____________处理后才具有与卵细胞受精的能力。 （2）试管牛的培育需要的工程技术有____________、____________和胚胎移植等。 （3）为培育子代雌性小牛，胚胎移植前须进行性别鉴定，宜取图中____________细胞进行DNA分析。 （4）为提高胚胎利用效率，尽快获得数量较多的子代和牛，采用____________技术对牛胚胎进行处理，产生多个基因型____________（相同、不同）的后代。 21. 水蛭素是水蛭唾液腺分泌的一种蛋白质，具有良好的抗凝血作用。已知天然的水蛭素抗凝血活性较低，产量和来源有限。研究发现，若将其第47位天冬酰胺替换成赖氨酸，可以提高其抗凝血活性。某科研团队拟通过不同的生物技术获得活性高、产量大的重组水蛭素。回答下列问题： （1）图1所示运用蛋白质工程技术得到了凝血活性更高的水蛭素，该技术的直接操作对象是____________。 （2）基因工程中常利用PCR获取和扩增目的基因。PCR扩增时，反应体系中需要加入模板、4种dNTP、引物、____________及缓冲液，4种dNTP的作用是____________。 （3）利用基因工程生产水蛭素时，依据图2信息构建基因表达载体，为使水蛭素基因与质粒高效连接，应选用的限制酶是____________。若采用大肠杆菌作为受体细胞，需要在培养基中加入____________以筛选转化成功的工程菌，并选择颜色为____________的大肠杆菌菌落进一步培养。 注：neor为新霉素抗性基因；malcZ的表达产物会使菌落呈蓝色，否则菌落呈白色。 （4）工业生产中，还可利用制备乳腺生物反应器来生产高抗凝血活性的水蛭素，但制备时需将高抗凝血活性的水蛭素基因与乳腺中特异表达的基因的____________等调控元件重组在一起。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $