专题10 发酵工程与细胞工程（专项训练）（3大考向）（黑吉辽蒙专用）2026年高考生物真题题源解密

**基本信息** 以高考真题与模拟题为载体，系统整合发酵工程与细胞工程核心方法，构建“概念辨析-实验流程-情境应用”三阶知识逻辑，强化生命观念与科学探究素养。 **专项设计** |模块|题量/典例|方法提炼|知识逻辑| |----|-----------|----------|----------| |发酵工程|3真题+10模拟|选择/鉴别培养基辨析、纯培养操作流程|从培养基类型（选择/鉴别/通用）到灭菌方法，推导发酵条件控制原理| |动物细胞工程|3真题+7模拟|传代培养操作、细胞特性分析|从原代培养到传代培养，结合端粒学说理解细胞增殖限制| |植物细胞工程|3真题+8模拟|脱分化/再分化条件、激素比例调控|外植体→愈伤组织→植株的培养流程，通过激素比例推导分化方向|

专题10 发酵工程与细胞工程 内容导览 考情概览：解读近年命题思路和内容要求，统计真题考查情况。 2026年真题研析：探寻常考要点，真题分类精讲，归纳串联解题必备知识。 近3年真题精选：分类精选近年真题，把握命题趋势。 名校模拟探源：精选适量名校模拟题，发掘高考命题之源。 命题解读 考向 题目 1.高频考点： 发酵工程、动物细胞工程、植物细胞工程。 2.素养考向 1. 生命观念：运用生物学基本概念和原理，引导学生形成物质与能量观相关的生命观念； 2. 科学思维：通过工程学构想，考查学生基于事实逻辑辨析概念、判断命题正误的演绎推理能力，落实科学思维素养； 3. 社会责任：结合生活或生产实例的情境，引导学生分析发酵工程，细胞工程相关知识的应用、落实社会责任素养； 4. 科学探究：基于人类生产或生活某一需求的相关资料，考查学生对实验设计、结果检测基本逻辑的理解，落实科学探究素养。 考向1 发酵工程 ①2026·黑吉辽蒙卷 ②2025·黑吉辽蒙卷 ③2024·黑吉辽卷 考向2动物细胞工程 ①2026·黑吉辽蒙卷 ②2025·黑吉辽蒙卷 ③2024·黑吉辽卷 考向3 植物细胞工程 ①2026·黑吉辽蒙卷 ②2025·黑吉辽蒙卷 ③2024·黑吉辽卷 2026年高考中，整套试题体现新高考生物“基础覆盖广、情境真实、图表信息密集、实验探究突出”的命题特点。总体难度中等偏上，区分度主要来自图表判读、多选题选项甄别、遗传推理、实验流程补全和规范表达。情境真实多元，贴近生产生活与科学研究；图文表信息密集，突出综合判读能力；重过程推理，强化生物的实验探究能力；实践导向突出，强调生物问题解决。 预测2027年高考，该专题对图表判读与过程推理能力有很大的提升，曲线、路径图、结构图会承载更多信息。 考向一 发酵工程 1. （2026·黑吉辽蒙卷·第18题）某奶酒以牛奶为主要原料，经微生物发酵酿制而成。为提高发酵效率，需筛选具有乳糖利用率高、乙醇产量高等特性的酵母菌菌株。下列叙述正确的是（　　） A．选择培养基应以葡萄糖为唯一碳源 B．选择培养基中可添加抗生素抑制细菌生长 C．制备固体培养基需先高压蒸汽灭菌再倒平板 D．接种后的平板应在37℃恒温培养 【答案】BC 【解析】 命题立意 本题以牛奶酿酒为情境，引导学生利用发酵工程的知识，考查的必备知识为选择培养基、制备培养基的过程、酵母菌培养温度，关键能力为分析、运用知识解决实际问题的能力。 A 错误选项 本实验目的是筛选乳糖利用率高的酵母菌，选择培养基应以乳糖为唯一碳源，才能保证仅能利用乳糖的菌株存活，以葡萄糖为唯一碳源无法达到筛选目的 B 正确选项 抗生素可抑制细菌生长繁殖，酵母菌属于真菌，对抗生素不敏感，因此添加抗生素可排除细菌杂菌的干扰 C 正确选项 制备固体培养基的流程为计算→称量→溶化→调pH→高压蒸汽灭菌→倒平板，先灭菌再倒平板可避免杂菌污染 D 错误选项 酵母菌的最适培养温度约为28℃，37℃是细菌培养的常用温度，不符合酵母菌的培养要求 考向二 动物细胞工程 2.（2026·黑吉辽蒙卷·第11题）人端粒酶催化亚基（hTERT）能维持端粒DNA序列长度。将间充质干细胞分为两组并进行贴壁培养：a组导入空载体；b组导入hTERT基因并持续表达。下列叙述错误的是（　　） A．细胞培养过程中，培养液需要定期更换 B．传代培养时，可用纤维素酶处理使贴壁细胞分散 C．a组细胞端粒DNA序列会随分裂次数增加而逐渐缩短 D．与a组细胞相比，b组细胞可分裂的次数会明显增加 【答案】B 【解析】 命题立意 本题以人端粒酶催化亚基为情境，引导学生利用动物细胞工程的知识，考查的必备知识为传代培养、细胞代谢废物，关键能力为分析、运用知识解决实际问题的能力。 A 正确选项 动物细胞培养过程中，细胞代谢会积累有害代谢产物，同时会消耗营养物质，因此需要定期更换培养液以清除代谢废物、补充营养 B 错误选项 动物细胞没有细胞壁，传代培养时需用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理使贴壁细胞分散 C 正确选项 a组导入空载体，无hTERT表达，不能维持端粒DNA长度，根据端粒学说，细胞每分裂一次端粒DNA就会缩短一截，因此a组细胞端粒DNA序列会随分裂次数增加逐渐缩短 D 正确选项 b组导入hTERT基因且持续表达，可维持端粒DNA序列长度，避免端粒过短导致细胞分裂停止，因此与a组相比，b组细胞可分裂的次数明显增加 考向三 植物细胞工程 3.（2026·黑吉辽蒙卷·第5题）下列关于菊花愈伤组织诱导及培养的叙述，正确的是（　　） A．诱导愈伤组织形成及后期培养，全程需光照 B．为防止植物激素高温失活，培养基可不灭菌 C．用幼嫩的茎段作外植体能诱导形成愈伤组织 D．生长素与细胞分裂素的比例不影响愈伤组织细胞分化方向 【答案】C 【解析】 命题立意 本题以菊花愈伤组织诱导及培养为情境，引导学生利用植物细胞工程的知识，考查的必备知识为植物组织培养、灭菌方法，关键能力为分析、运用知识解决实际问题的能力。 A 错误选项 诱导愈伤组织的脱分化阶段需要避光处理，仅再分化阶段需要光照 B 错误选项 为避免杂菌污染导致培养失败，培养基必须经过灭菌处理，植物激素可在培养基灭菌冷却后添加，不会出现高温失活的问题 C 正确选项 幼嫩茎段的细胞分化程度低，全能性更容易表达，作为外植体可经脱分化过程诱导形成愈伤组织 D 错误选项 生长素与细胞分裂素的比例会调控愈伤组织的分化方向：比例偏高时利于根的分化，比例偏低时利于芽的分化，比例适中时利于愈伤组织的生长 一、微生物培养 选择培养基：加入某种化学物质，抑制不需要的微生物生长，促进所需微生物生长，如以尿素为唯一氮源的培养基可筛选尿素分解菌。 鉴别培养基：加入某种指示剂或化学药品，用于鉴别不同种类的微生物，如伊红美蓝培养基可鉴别大肠杆菌（形成黑色带有金属光泽的菌落）。 通用培养基：含有微生物生长所需的基本营养物质，用于培养多种微生物，如牛肉膏蛋白胨培养基。 二、灭菌的方法 灭菌：是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 消毒和灭菌工作主要包括两个方面：对操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 常用灭菌方法简介： 三、常用纯培养方法 平板划线法：用接种环在固体培养基表面连续划线，将菌种逐步稀释，最终得到单个菌落，适用于微生物的分离和纯化。 稀释涂布平板法：将菌液进行一系列梯度稀释，然后取少量稀释液涂布在固体培养基表面，培养后得到单个菌落，适用于微生物的分离、纯化和计数。 平板划线法基本过程： 四、稀释涂布平板法基本过程 A.梯度稀释：将待测样品用无菌水或生理盐水进行系列梯度稀释（如10⁻¹、10⁻²…10⁻ⁿ），每级稀释需充分混匀。 B.涂布平板：取适宜稀释度的菌悬液（通常0.1-0.2mL）滴加到固体培养基平板表面，用无菌涂布器（经酒精灭菌冷却后）将菌液均匀涂布于整个平板表面。 C.培养：待菌液完全吸收后，将平板倒置（防止冷凝水污染菌落），置于适宜温度（如37℃）的恒温培养箱中培养一定时间（通常18-24h），使单个微生物细胞生长繁殖形成单菌落。 D.计数：选取菌落数在30-300之间的平板，统计菌落数量，按公式“菌落数=平板菌落数×稀释倍数/取样体积”计算样品中微生物浓度。 五、动物细胞培养的完整过程： 取材：取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官（细胞分裂能力强），如小鼠胚胎、幼鼠的肝脏。 分散处理：对新鲜取材的动物组织进行处理，或用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间，将组织分散成单个细胞（避免胰蛋白酶处理时间过长，损伤细胞膜）。 原代培养：将分散的细胞制成细胞悬液，转移到培养瓶中培养。人们通常将分瓶之前的细胞培养，即动物组织经处理后的初次培养称为原代培养。原代培养的细胞一般在10代以内，保持正常的二倍体核型。 传代培养：将分瓶后的细胞培养称为传代培养。在进行传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集；贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集。之后，将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养。 培养条件： 无菌、无毒环境：在体外培养细胞时，需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作。培养液还需要定期更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。 营养条件：将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分。培养动物细胞一般使用液体培养基，也称为培养液。 温度、pH和渗透压：哺乳动物细胞培养的温度多以36.5±0.5℃为宜。多数动物细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。此外，渗透压也是动物细胞培养过程中需要考虑的一个重要环境参数。 气体环境：O₂是细胞代谢所必需的，CO₂的主要作用是维持培养液的pH。将细胞放在含有95%空气和5%CO₂的混合气体的CO₂培养箱中进行培养。 应用：生产生物制品（如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）；作为基因工程的受体细胞（用于重组DNA的表达）；检测有毒物质（通过观察细胞形态和增殖情况判断毒性）；研究细胞生理、病理机制（如癌症的发生机制）。 六、植物组织培养的完整过程： 外植体（离体的植物器官、组织或细胞）→脱分化→愈伤组织（排列疏松、高度液泡化的薄壁细胞团）→再分化→胚状体或丛芽→完整植株。 关键步骤分析： 脱分化：已经分化的细胞失去其特有的结构和功能，转变成未分化的细胞，进而形成不定形的薄壁组织团块。需避光培养，培养基中添加生长素和细胞分裂素。 再分化：愈伤组织重新分化出根、芽等器官。需要光照培养，通过调整生长素和细胞分裂素的比例控制分化方向（生长素比例高促进根的分化，细胞分裂素比例高促进芽的分化）。 实验操作注意事项：全程无菌操作，外植体消毒（70%酒精消毒30s后用无菌水冲洗，再用质量分数为5%次氯酸钠溶液处理30min，最后无菌水冲洗干净），培养基需高压蒸汽灭菌。 地位：是植物体细胞杂交、作物脱毒、单倍体育种等技术的基础。 考向1 发酵工程 1. （2025·黑吉辽蒙卷·第4题）科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素（C22H23ClN2O8）能力强的菌株，旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是（    ） A．以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基 B．逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株 C．配制选择培养基时，需确保pH满足实验要求 D．用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面 【答案】D 【分析】在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 【详解】A、以金霉素为唯一碳源的选择培养基，仅允许能利用金霉素的微生物生长（其他无法利用金霉素的微生物被抑制），符合选择培养基的设计原理，A正确； B、逐步提高金霉素浓度可模拟环境胁迫，筛选出耐受性更强的菌株（类似“驯化”过程），B正确； C、培养基的pH需根据目标微生物的生长需求调整（如细菌通常中性偏碱，真菌偏酸性），是配制培养基的基本要求，C正确； D、稀释涂布平板法需用涂布器将菌液均匀涂布在培养基表面，而接种环用于平板划线法（分离单菌落）。用接种环涂布无法保证菌液均匀，D错误。 2.（2024·黑吉辽卷·第19题）某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，其筛选流程及抗性检测如图。下列操作正确的是（    ） A．在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从感病植株上采集样品 B．将采集的样品充分消毒后，用蒸馏水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测 C．将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落 D．判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小 【答案】CD 【分析】1、获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。 2、稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外，也常用来 统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时，培养 基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活 菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含 有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数为30〜300 的平板进行计数。 【详解】A、题干信息：某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，故在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从未感病植株上采集样品，A错误； B、获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染；将采集的样品充分消毒后，用无菌水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测，B错误； C、题图可知，样品研磨后进行了稀释涂布，可见将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落，C正确； D、题图抗性检测可知，判断内生菌的抗性效果需设置对照组和实验组，对照组不接种内生菌得到病原菌菌斑，实验组接种内生菌得到病原菌菌斑，然后比较对照组和实验组的菌斑大小，实验组病原菌菌斑越小表明内生菌抗性效果越好，D正确。 考向2 动物细胞工程 3.（2025·黑吉辽蒙卷·第19题）下图是制备抗白细胞介素-6（IL-6）单克隆抗体的示意图。下列叙述错误的是（    ） A．步骤①给小鼠注射IL-6后，应从脾中分离筛选T淋巴细胞 B．步骤②在脾组织中加入胃蛋白酶，制成单细胞悬液 C．步骤③加入灭活病毒或PEG诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性 D．步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出了杂交瘤细胞 【答案】ABD 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、步骤①给小鼠注射IL-6后，应从小鼠的脾中获取B淋巴细胞，A错误； B、步骤②需要在组织中加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶，使其成为单细胞，进而制成悬液，B错误； C、步骤③是诱导细胞融合过程，该过程可加入灭活病毒或PEG诱导，细胞融合的过程体现了细胞膜的流动性，C正确； D、步骤④是在选择培养基上筛选得到的杂交瘤细胞，该过程得到的杂交瘤细胞不一定能产生所需抗体，步骤⑤经过克隆化培养和抗体检测筛选出了分泌所需抗体的杂交瘤细胞，D错误。 4．（2024·黑吉辽卷·第14题）从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。下列叙述正确的是（    ） A．传代培养时，培养皿需密封防止污染 B．选取①的细胞进行传代培养比②更合理 C．直接用离心法收集细胞进行传代培养 D．细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关 【答案】D 【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养需要的条件有：①无菌、无毒的环境；②营养；③温度和pH；④气体环境：95%空气+5%CO2；动物细胞培养技术主要应用在：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质等。 【详解】A、传代培养时培养器皿容许内部气体和培养箱中的气体进行交换，A错误； B、选取②的细胞进行传代培养比①更合理，②时细胞增长开始变得缓慢，B错误； C、对于贴壁生长的细胞进行传代培养时，先需要用胰蛋白酶等处理，使之分散为单个细胞，然后再用离心法收集，C错误； D、细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大、细胞间产生接触抑制有关，D正确。 考向3 植物细胞工程 5.（2025·黑吉辽蒙卷·第8题）利用植物组织培养技术获得红豆杉试管苗，有助于解决紫杉醇药源短缺问题。下列叙述正确的是（    ） A．细胞分裂素和生长素的比例会影响愈伤组织的形成 B．培养基先分装到锥形瓶，封口后用干热灭菌法灭菌 C．芽原基细胞由于基因选择性表达，不能用作外植体 D．紫杉醇不能通过细胞产物的工厂化生产来获取，植物组织培养优势明显 【答案】A 【分析】植物组织培养技术：1、过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）。2、原理：植物细胞的全能性。3、条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。4、植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、在植物组织培养中，生长素和细胞分裂素的比例直接影响细胞的分化方向。当二者比例适中时，促进愈伤组织的形成；比例过高时促进生根，比例过低时促进生芽，A正确； B、培养基含大量水分，需用高压蒸汽灭菌法灭菌（121℃，15-30分钟）；干热灭菌法适用于耐高温且干燥的物品（如玻璃器皿），不能用于培养基灭菌，B错误； C、外植体可以是植物的任何活细胞、组织或器官，只要具有全能性。芽原基细胞是分生组织的一部分，全能性高，可作为外植体。基因选择性表达是细胞分化的基础，不影响其作为外植体的能力，C错误； D、细胞产物的工厂化生产正是通过植物组织培养技术实现的，如大量培养红豆杉细胞，从培养液中提取紫杉醇。因此，紫杉醇可通过此方法获取，植物组织培养的优势（如快速增殖、大量生产细胞产物）在此体现，D错误。 6．（2024·黑吉辽卷·第6题）迷迭香酸具有多种药理活性。进行工厂化生产时，先诱导外植体形成愈伤组织，再进行细胞悬浮培养获得迷迭香酸，加入诱导剂茉莉酸甲酯可大幅提高产量。下列叙述错误的是（    ） A．迷迭香顶端幼嫩的茎段适合用作外植体 B．诱导愈伤组织时需加入NAA和脱落酸 C．悬浮培养时需将愈伤组织打散成单个细胞或较小的细胞团 D．茉莉酸甲酯改变了迷迭香次生代谢产物的合成速率 【答案】B 【分析】1、植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 2、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 【详解】A、迷迭香顶端幼嫩的茎段适合用作外植体，生长旺盛，分裂能力较强，A正确； B、诱导愈伤组织时需加入NAA和细胞分裂素，B错误； C、悬浮培养时需将愈伤组织打散成单个细胞或较小的细胞团，获得更多的营养物质和氧气，使得其可以进一步分裂，C正确； D、加入诱导剂茉莉酸甲酯可大幅提高产量，推测茉莉酸甲酯改变了迷迭香次生代谢产物（不是植物生长所必须的）的合成速率，D正确。 1．（2026·辽宁沈阳·模拟预测）谷氨酸棒状杆菌是一种需氧型细菌，常用于工业生产谷氨酸，谷氨酸经过一系列处理能制成味精。下图是以小麦为原料发酵生产味精的工艺流程。下列叙述错误的是（　　） A．对小麦进行糖化处理有助于提高发酵效率 B．图示流程中的两次接种均可使用稀释涂布平板法 C．发酵生产中，在中性和弱碱性条件下有利于谷氨酸的积累 D．发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，需严格控制温度、溶解氧等发酵条件 【答案】B 【详解】A、小麦的主要成分为淀粉，糖化处理可将淀粉分解为谷氨酸棒状杆菌可直接利用的葡萄糖，为微生物提供充足的碳源，有助于提高发酵效率，A正确； B、图示流程中的两次接种均不使用稀释涂布平板法，第1次接种是为了扩大培养获取更多菌种，是液体培养，第2次接种是注入发酵罐用于生产，B错误； C、谷氨酸发酵过程中，若发酵液呈酸性，谷氨酸棒状杆菌容易生成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，中性和弱碱性条件下更有利于谷氨酸的积累，C正确； D、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，谷氨酸棒状杆菌为需氧型细菌，发酵过程需要严格控制温度、溶解氧、pH等发酵条件，保证微生物正常代谢积累产物，D正确。 2．（2026·辽宁·三模）某微生物研究院从东北传统自然发酵酸菜中分离选育出一株高产乳酸的植物乳杆菌HMD-08，优化发酵工艺后，该菌株在10L发酵罐中发酵72h，乳酸产量达18.6g/L，为东北酸菜工业化纯种发酵提供了优良菌种。下列相关叙述错误的是（　　） A．该植物乳杆菌的发酵过程需在严格无氧的条件下进行 B．发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵，需严格控制温度、pH、溶解氧等条件 C．大规模发酵前，需对该菌株进行扩大培养，以获得足量的菌种 D．发酵结束后，可采用过滤、沉淀的方法直接获得高纯度的乳酸产品 【答案】D 【详解】A、植物乳杆菌是厌氧型微生物，通过无氧呼吸产生乳酸，因此发酵过程必须在严格无氧条件下进行，A正确； B、发酵罐内的发酵是发酵工程的中心环节，温度、pH、溶解氧等条件会直接影响微生物的生长繁殖和代谢产物的合成，因此需要严格控制，B正确； C、大规模发酵前对菌株进行扩大培养，目的是获得足量的高活性菌种，保证接种量充足，缩短发酵周期，C正确； D、乳酸是微生物分泌到发酵液中的代谢产物，过滤、沉淀是分离收集菌体的方法，要获得高纯度的乳酸，还需要经过提取、分离纯化的步骤，D错误。 3．（2026·辽宁·模拟预测）下列关于发酵和实验中微生物培养的叙述，正确的是（　　） A．用于生产柠檬酸和腐乳的黑曲霉和毛霉，均属于需氧异养型真核生物 B．为使酵母菌菌种充分吸收营养物质，果酒发酵时需每日开盖搅拌 C．分离尿素分解菌时常用接种环将稀释的菌液均匀地涂布在培养基表面 D．大肠杆菌的纯培养和鉴定时所使用的固体培养基中需添加酚红试剂 【答案】A 【详解】A、黑曲霉是工业发酵生产柠檬酸的常用菌种，其生长代谢需要氧气，属于异养需氧型生物；用于生产腐乳的毛霉代谢类型也是异养需氧型，且黑曲霉和毛霉都属于真菌，是真核生物，A正确； B、酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵产生酒精和二氧化碳，所以果酒发酵时不能开盖搅拌，需要密闭，且开盖搅拌会被杂菌污染，B错误； C、分离尿素分解菌常用涂布器将稀释的菌液均匀地涂布在培养基表面，C错误； D、大肠杆菌的纯培养和鉴定时，使用的固体培养基中需添加伊红—美蓝试剂，伊红—美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌，在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈现深紫色，并带有金属光泽，D错误。 4．（2026·辽宁沈阳·三模）高粱酒以高粱为主要原料，稻壳为辅料，配以大麦或小麦，经传统低温发酵酿制而成，工艺流程如下图所示。下列有关叙述正确的是（    ） A．传统发酵以混合菌种的液体发酵为主，通常是家庭式或作坊式的 B．高粱中的淀粉为酒曲中微生物的生长繁殖提供了碳源和氮源 C．在发酵初期，酵母菌繁殖越快则酒精产量越高 D．蒸粮不仅有助于杀灭部分杂菌，也有利于糖化 【答案】D 【详解】A、传统白酒发酵属于固态发酵（原料为固体的高粱、稻壳等，而非液体培养基），液体发酵是现代工业酿酒（如部分食用酒精生产）的方式，传统家庭 / 作坊式酿酒以固态发酵为核心，A错误； B、淀粉的元素组成是 C、H、O，只能作为碳源，为微生物提供能量和碳骨架。 氮源需要来自原料中的蛋白质（如高粱、大麦 / 小麦中的蛋白质分解产生的氨基酸、铵盐等），B错误； C、酒精是酵母菌无氧呼吸的产物，而酵母菌繁殖（有氧呼吸）会消耗大量葡萄糖，产生的是 CO₂和水，并不产生酒精。 若发酵初期酵母菌繁殖过快，会大量消耗原料中的糖分，反而会减少后续无氧发酵阶段可利用的底物，最终导致酒精产量降低。 实际生产中，会先让酵母菌进行适度有氧呼吸以增加菌体数量，再转入无氧环境进行酒精发酵，C错误； D、高温蒸煮可以杀死原料中大部分的杂菌（如细菌、霉菌孢子），减少杂菌污染，避免发酵失败或产生有害物质。高温蒸煮会使高粱中的淀粉颗粒吸水膨胀、糊化，破坏淀粉的晶体结构，让后续酒曲中的淀粉酶更容易接触并分解淀粉（糖化）为可发酵的糖类，为酵母菌发酵提供底物，D正确。 5．（2026·辽宁朝阳·三模）利用植物秸秆生产酒精的关键步骤包括原料预处理、水解、发酵和蒸馏。预处理后的秸秆中的纤维素和半纤维素需通过水解转化为可发酵的糖(如葡萄糖、木糖)，利用酶解法水解，反应条件温和，催化效率高，且副产物少，但纤维素酶的成本较高。从牛、羊等草食性动物的瘤胃中分离高效降解纤维素的分解菌，可降低上述酶成本较高的问题，实验流程如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．利用植物秸秆生产酒精的发酵阶段，发酵菌有酵母菌 B．①和②过程使用石蜡主要是为目的菌营造无氧环境 C．②过程所用接种工具为涂布器，平板甲上菌落数要求在30-300之间 D．平板乙上，菌落a由降解纤维素效率最高的菌株繁殖而来 【答案】C 【详解】A、植物秸秆水解得到葡萄糖等可发酵糖，酵母菌无氧呼吸可将糖类转化为酒精，因此生产酒精的发酵阶段发酵菌包含酵母菌，A正确； B、牛、羊瘤胃为无氧环境，其中的纤维素分解菌属于厌氧微生物，①②过程使用石蜡可隔绝空气，为目的菌营造无氧环境，B正确； C、②过程若采用平板划线法接种，接种工具为接种环而非涂布器；且菌落数在30~300之间是稀释涂布平板法用于活菌计数的要求，本实验是分离筛选菌株，不需要严格满足该要求，C错误； D、平板乙上，菌落a最小，但降解圈最大，菌落a由降解纤维素效率最高的菌株繁殖而来，D正确。 6．（2026·吉林松原·模拟预测）为分离土壤中高效降解石油的微生物，科研团队设计了3组培养基（成分如表所示），并对菌株生长情况进行检测。已知石油中烃类物质为主要污染物，且微生物对石油的降解能力与菌株生物量呈正相关。下列叙述正确的是（　　） 培养基编号 碳源 氮源 无机盐（含微量元素） 凝固剂 菌株生物量（相对值） Ⅰ 葡萄糖 硝酸铵 适量 琼脂 85 Ⅱ 石油 硝酸铵 适量 琼脂 32 Ⅲ 石油+葡萄糖 硝酸铵 适量 琼脂 68 A．培养基Ⅰ为选择培养基，能筛选出高效降解石油的菌株 B．培养基Ⅱ中的菌株生物量较低的原因是培养基无碳源 C．培养基Ⅲ中添加葡萄糖可能导致菌株对石油的降解效率下降 D．三组培养基均需先进行高压蒸汽灭菌处理后再调节pH 【答案】C 【详解】A、筛选高效降解石油的菌株的选择培养基需要以石油为唯一碳源，培养基Ⅰ的碳源为葡萄糖，可支持所有能利用葡萄糖的微生物生长，不属于选择培养基，无法筛选目标菌株，A错误； B、培养基Ⅱ的碳源为石油，并非无碳源，仅能支持可降解石油的微生物生长，因此菌株生物量较低，B错误； C、葡萄糖是更易被微生物利用的碳源，培养基Ⅲ中添加葡萄糖后，微生物会优先利用葡萄糖，减少对石油的分解利用，可能导致菌株对石油的降解效率下降，C正确； D、培养基制备的正确流程为先调节pH，再进行高压蒸汽灭菌，若灭菌后再调节pH会引入杂菌造成污染，D错误。 7．（2026·吉林长春·模拟预测）如图为微生物的实验室培养的有关操作，下列相关叙述错误的是（　　） A．步骤①中，需将接种环灼烧至变红，以杀灭杂菌 B．步骤②中，将接种环冷却时不宜距酒精灯火焰太远 C．图中接种方法的目的是使菌种逐渐稀释，经培养后获得单菌落 D．接种后应将培养皿倒置培养，培养后可以根据结果进行微生物计数 【答案】D 【详解】A、步骤①为灼烧灭菌操作，将接种环灼烧至变红可彻底杀灭接种环上附着的杂菌，避免杂菌污染待培养的目标微生物，A正确； B、酒精灯火焰旁属于无菌区域，若接种环冷却时距离火焰太远，容易被空气中的杂菌污染，因此冷却操作不宜距酒精灯火焰太远，B正确； C、图中接种方法为平板划线法，通过连续多次划线可使接种的菌种逐渐被稀释，经培养后可获得由单个活菌繁殖形成的单菌落，C正确； D、接种后倒置培养可避免皿盖上的冷凝水滴落到培养基表面造成污染，但平板划线法不能用于微生物计数，微生物计数通常采用稀释涂布平板法，D错误。 8．（2026·吉林·模拟预测）深海中某种赖氨酸缺陷型放线菌能产生安莎霉素，可治疗肺部感染。为此，科研人员用紫外线诱变深海放线菌后，如图选育高产菌株，以提取安莎霉素。下列叙述正确的是（    ） 注：原位影印可确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落 A．培养基①②属于选择培养基，无需添加赖氨酸 B．用接种环蘸取菌液在培养基②上划线进行接种 C．为不破坏培养基③的无菌状态应在灭菌后调节pH D．培养结果是甲菌落不能在③生存，推断甲菌落能产生安莎霉素 【答案】D 【详解】A、该放线菌为赖氨酸缺陷型，自身无法合成赖氨酸。培养1、2需提供赖氨酸以保证菌株生长，故属于完全培养基而非选择培养基，A错误； B、原位影印法无需进行划线操作，B错误； C、配制培养基需先调节pH后灭菌。若灭菌后调节pH，极易引入杂菌破坏无菌状态，C错误； D、甲菌落在③中不能生存，在④中可以生存，说明甲菌落只能生活在含有赖氨酸的培养基中，不能生活在缺赖氨酸的培养基中，即甲菌落是赖氨酸缺陷型放线菌菌落，可以产生安莎霉素，D正确。 9．（2026·黑龙江哈尔滨·模拟预测）发酵饮料格瓦斯通常以面包为基质，由酵母菌和乳酸菌发酵而成，玫瑰果富含Vc．新型玫瑰果格瓦斯加工工艺流程如图。酵母菌产酒精能力与其耐受酒精的能力有关，下列叙述正确的是（　　） A．面包液、糖化液可为菌种生长提供碳源等营养物质 B．发酵早期，需向发酵罐通入无菌空气促进菌种繁殖 C．通过该发酵工程可从微生物细胞中提取单细胞蛋白 D．培养基中添加糖类可筛选出产酒精能力强的酵母菌 【答案】A 【详解】A、面包液、糖化液含有糖类、蛋白质、无机盐、水等成分，可为酵母菌、乳酸菌的生长提供碳源、氮源等所需营养物质，A正确； B、发酵菌种包含乳酸菌，乳酸菌是厌氧型微生物，通入无菌空气会抑制乳酸菌的生长繁殖，不能促进所有发酵菌种繁殖，B错误； C、单细胞蛋白指的是发酵获得的微生物菌体本身，不是从微生物细胞中提取的蛋白质，且该发酵的产品是格瓦斯饮品，不以生产单细胞蛋白为目的，C错误； D、题干说明酵母菌产酒精能力与其耐受酒精的能力有关，因此筛选产酒精能力强的酵母菌需要使用添加高浓度酒精的选择培养基，添加糖类仅能为酵母菌提供碳源，没有筛选作用，D错误。 10．（2026·黑龙江哈尔滨·二模）制作苹果醋的流程：挑选苹果→冲洗、切片，碾碎→加糖→添加菌种甲→苹果酒→添加菌种乙→苹果醋。下列相关叙述正确的是（ ） A．加糖的目的是为菌种提供碳源和氮源 B．菌种乙有线粒体，能进行有氧呼吸 C．用酸性重铬酸钾检测苹果醋发酵效果 D．发酵过程中，发酵液pH下降、温度上升 【答案】D 【详解】A、苹果醋制作过程中加入的糖的元素组成为C、H、O，不含N元素，仅能为菌种提供碳源，无法提供氮源，A错误； B、菌种乙是制作果醋的醋酸菌，属于原核生物，细胞内仅含有核糖体一种细胞器，无线粒体，B错误； C、酸性重铬酸钾是酒精的检测试剂，可与酒精反应呈现灰绿色，无法检测苹果醋的发酵产物醋酸，C错误； D、果酒发酵阶段酵母菌呼吸产生CO2，CO2溶于发酵液形成碳酸使pH下降，果醋发酵阶段醋酸菌代谢产生醋酸，会进一步降低pH，两类微生物的呼吸作用均会释放能量，使发酵液温度上升，D正确。 11．（2026·黑龙江哈尔滨·三模）啤酒生产主要工艺流程如图所示，下列叙述错误的是（    ） A．焙烤的目的是加热杀死种子胚，使细胞中所有物质失去活性 B．发酵用的酵母菌种可利用诱变育种或基因工程育种等方式获得 C．大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成 D．经赤霉素处理的大麦种子无需发芽即可产生α-淀粉酶，简化工艺流程 【答案】A 【详解】A、焙烤的目的是杀死种子胚，终止麦芽生长，但不会让细胞中所有物质失去活性，比如淀粉酶等酶类会保留活性，用于后续糖化过程，A错误； B、发酵用的酵母菌种可以通过诱变育种、基因工程育种等方式选育优良菌种，B正确； C、啤酒发酵的主发酵阶段会完成大部分糖的分解，以及酒精、风味代谢物的生成，后发酵主要是完善风味，C正确； D、赤霉素可以诱导大麦种子产生α-淀粉酶，无需发芽就能获得所需的酶，能简化工艺流程，D正确。 12．（2026·黑龙江大庆·模拟预测）为将尾菜(蔬菜废弃物)转化为优质饲料，研究人员常使用乳酸菌、酵母菌等进行混合发酵。下列叙述正确的是（　　） A．发酵前对尾菜进行高温灭菌处理，主要目的是杀死杂菌并提供发酵所需的最适温度 B．发酵过程中，乳酸菌主要进行有氧呼吸，酵母菌主要进行无氧呼吸 C．若需从发酵液中筛选能高效降解纤维素的菌种，可采用以纤维素为唯一碳源的固体培养基 D．为监测发酵过程中乳酸菌数量的动态变化，可采用平板划线法定期取样并计算菌落数 【答案】C 【详解】A、发酵前对尾菜高温灭菌仅为了杀死杂菌，高温灭菌后温度远高于乳酸菌、酵母菌的发酵最适温度，需要冷却后才能接种菌种，A错误； B、乳酸菌是厌氧型微生物，仅能进行无氧呼吸，B错误； C、以纤维素为唯一碳源的固体培养基，只有能降解纤维素的菌种生长繁殖，其他微生物因缺乏碳源无法存活，可实现筛选目的，C正确； D、平板划线法的功能是分离纯化菌种，无法对微生物进行计数，统计乳酸菌数量应使用稀释涂布平板法，D错误。 13．（2026·黑龙江哈尔滨·三模）发酵工程是指利用微生物的特定功能，规模化生产人类所需产品的综合性生物工程。下列关于发酵工程的说法错误的是（　　） A．获得微生物纯培养物是发酵工程的重要基础 B．单细胞蛋白不仅含有蛋白质，还含有糖类、脂质和维生素 C．发酵工程的中心环节是菌种的选育，性状优良的菌种是获得优良产物的关键 D．在发酵过程中，要随时检测培养液中微生物数量，产物浓度以了解发酵进程 【答案】C 【详解】A、发酵过程若存在杂菌污染会导致产量下降、产物不纯甚至发酵失败，因此获得无杂菌的微生物纯培养物是发酵工程的重要基础，A正确； B、单细胞蛋白指的是微生物菌体本身，作为完整的细胞结构，其成分包含蛋白质、糖类、脂质、维生素等多种物质，并非只含蛋白质，B正确； C、发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵过程，菌种选育是发酵工程的前提步骤，而非中心环节，C错误； D、发酵过程中需要随时检测培养液的微生物数量、产物浓度、pH、溶氧量等指标，以此调整发酵条件、把控发酵进程，D正确。 14．（2026·黑龙江哈尔滨·三模）单倍体育种包括花药离体培养和秋水仙素诱导染色体数目加倍，下列叙述正确的是（    ） A．诱导愈伤组织的过程体现了植物细胞的全能性 B．秋水仙素在有丝分裂后期抑制纺锤体形成 C．接种前用体积分数为70%的酒精对材料灭菌 D．单倍体育种与常规育种相比可以明显缩短育种年限 【答案】D 【详解】A、植物细胞全能性的标志是已分化的细胞发育为完整个体，诱导愈伤组织仅为脱分化过程，未形成完整植株，不能体现细胞全能性，A错误； B、秋水仙素的作用时期是有丝分裂前期，通过抑制前期纺锤体的形成使染色体数目加倍，并非作用于后期，B错误； C、接种前用体积分数70%的酒精对花药进行的是消毒处理，仅能杀灭材料表面的部分微生物；灭菌会彻底杀灭所有微生物（包括芽孢、孢子），同时会杀死活的花药细胞，无法完成后续培养，C错误； D、单倍体育种经秋水仙素诱导染色体加倍后获得的个体均为纯合子，自交后代不会发生性状分离，与常规杂交育种相比可明显缩短育种年限，D正确。 15．（2026·黑龙江哈尔滨·三模）植物的营养繁殖易将所感染的病毒传给后代，导致产量降低、品质变差。利用MS培养基运用植物组织培养技术可以培育出无病毒植株。下列叙述正确的是（　　） A．常用根尖分生组织培养脱毒苗，原因是根尖分生组织病毒含量极低甚至无病毒 B．培养过程中已分化的细胞会转变成未分化细胞，进而形成不定形的薄壁组织团块 C．提高MS培养基中细胞分裂素和生长素的比例有利于诱导生根 D．接种操作须在酒精灯火焰旁进行，培养基、所有器械及外植体都需要灭菌 【答案】B 【详解】A、植物顶端分生区（如茎尖，而非根尖）病毒含量极低甚至不含病毒，因此常用该类材料培养获得脱毒苗，A错误； B、植物组织培养的脱分化阶段，已分化的外植体细胞会失去特有的结构和功能，转变成未分化的细胞，进一步形成排列疏松、无定形状态的薄壁组织团块（愈伤组织），B正确； C、MS培养基中细胞分裂素与生长素的比例影响分化方向，提高该比例有利于诱导生芽，降低该比例（提高生长素占比）才有利于诱导生根，C错误； D、接种操作需在酒精灯火焰旁进行以避免杂菌污染，培养基、培养器械需要灭菌处理，但外植体只能进行消毒，灭菌会杀死外植体细胞导致培养失败，D错误。 16．（2026·黑龙江·模拟预测）最初的诱导多能干细胞（iPS细胞）是用小鼠成纤维细胞直接转化得到的，科学家利用类似方法成功培育出了人类iPS细胞。这一系列成果极大地推动了动物细胞工程在理论和技术上的跨越式发展。下列相关叙述正确的是（　　） A．培育iPS细胞时，一般用胰蛋白酶或胃蛋白酶将动物新鲜组织分散成单个细胞 B．培养iPS细胞的液体培养基中需要添加血清、琼脂等天然成分 C．iPS细胞培养需在含5%CO2的培养箱中进行，以刺激细胞呼吸 D．诱导转化生成iPS细胞的过程中可能发生了基因重组 【答案】D 【详解】A、动物细胞培养的适宜pH为中性偏碱，胃蛋白酶的最适pH为酸性，该环境下胃蛋白酶会失活，因此分散动物组织只能用胰蛋白酶或胶原蛋白酶，不能用胃蛋白酶，A错误； B、琼脂是固体/半固体培养基的凝固剂，液体培养基不需要添加琼脂，且琼脂不属于天然成分，B错误； C、细胞培养时加入5%CO2的作用是维持培养液的pH稳定，并非刺激细胞呼吸，C错误； D、诱导成纤维细胞转化为iPS细胞时，需要将诱导相关的外源基因导入受体细胞，该过程属于人工介导的基因重组，D正确。 17．（2026·黑龙江哈尔滨·二模）黄酮类物质能帮助植物吸引传粉者、抵御紫外线辐射和抵抗病原菌侵染。科研人员研发出植物细胞生物反应器，实现了黄酮类物质的规模化生产。下列叙述正确的是（　　） A．生物反应器合成的黄酮类物质属于初生代谢物 B．该技术的不足之处是受季节、地域的限制 C．植物细胞的全能性是该项技术成功的理论基础 D．为实现细胞增殖与产物合成，需考虑激素的种类和比例 【答案】D 【详解】A、初生代谢物是植物生长发育必需的物质，黄酮类物质不属于植物生长发育必需的物质，属于次生代谢物，A错误； B、植物细胞生物反应器通过离体培养植物细胞生产产物，全程可在人工控制的无菌环境中进行，不受季节、地域的限制，B错误； C、该技术仅需培养细胞获得代谢产物，不需要培育为完整个体或各种细胞，因此该过程没有体现出细胞全能性，C错误； D、植物细胞培养过程中，激素的种类和比例会调控细胞的增殖、分化状态以及代谢产物的合成效率，因此为实现细胞增殖与产物合成，需考虑激素的种类和比例，D正确。 18．（2026·吉林长春·模拟预测）下列应用中不涉及植物组织培养技术的是（　　） A．利用嫁接技术繁育果树 B．草莓脱毒苗的培育 C．单倍体玉米的培育 D．基因工程培育抗除草剂大豆 【答案】A 【详解】A、嫁接是将植物的接穗接到砧木上，依靠二者切口愈合完成繁育，属于营养生殖，未经过离体组织脱分化、再分化等植物组织培养流程，不涉及植物组织培养技术，A正确； B、草莓脱毒苗是取草莓茎尖等分生区（几乎不含病毒）进行离体培养获得完整植株，涉及植物组织培养技术，B错误； C、单倍体玉米的培育需要对玉米花药进行离体培养获得单倍体幼苗，花药离体培养属于植物组织培养的应用，涉及植物组织培养技术，C错误； D、基因工程培育抗除草剂大豆时，将目的基因导入大豆受体细胞后，需通过植物组织培养将单个受体细胞培育为完整转基因植株，涉及植物组织培养技术，D错误。 19．（2026·吉林长春·模拟预测）下列有关动物细胞工程的技术和方法描述正确的是（　　） A．诱导B细胞和瘤细胞融合需经一次筛选获得所需的杂交瘤细胞 B．动物细胞培养液中添加抗生素可以抑制各种微生物的生长 C．正常体细胞培养定期更换培养液也无法使其无限增殖 D．动物细胞核移植的受体细胞通常是去核的卵原细胞 【答案】C 【详解】A、诱导B细胞和瘤细胞融合后，第一次筛选仅能得到杂交瘤细胞，还需第二次筛选获得能分泌目标特异性抗体的杂交瘤细胞，A错误； B、抗生素仅能抑制细菌等原核微生物的生长，无法抑制病毒、真菌等所有类型的微生物，B错误； C、正常动物体细胞存在增殖次数上限（海弗利克极限），遗传物质未发生癌变相关突变的前提下，即便定期更换培养液满足营养需求，也无法突破增殖限制实现无限增殖，C正确； D、动物细胞核移植的受体细胞通常是去核的减数第二次分裂中期（MⅡ期）的卵母细胞，D错误。 20．（2026·辽宁沈阳·三模）紫草宁具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性，是世界上首例药用植物细胞工程产品，生产流程如下图所示，下列相关叙述正确的是（    ） 外植体→愈伤组织→单细胞→高产细胞株→细胞培养物紫草宁 A．紫草宁等次生代谢物是植物基本生命活动所必需的产物 B．外植体形成愈伤组织的过程不涉及基因的选择性表达 C．可用纤维素酶和果胶酶将愈伤组织块中的细胞分散成单个细胞 D．利用植物外植体获得高产细胞株体现了植物细胞的全能性 【答案】C 【详解】A、次生代谢物不是植物基本生命活动所必需的产物，是植物生长到特定阶段产生的，糖类、蛋白质等初生代谢物才是植物基本生命活动必需的，A错误； B、外植体形成愈伤组织的过程是脱分化，该过程存在基因的选择性表达，有特定基因的开启和关闭，B错误； C、植物细胞细胞壁以及细胞间胞间层的主要成分为纤维素和果胶，因此可用纤维素酶和果胶酶分解相关成分，将愈伤组织块中的细胞分散成单个细胞，C正确； D、该过程仅获得高产细胞株，未得到完整植株，细胞全能性的标志是已分化的细胞发育成完整个体或其它各种细胞，因此，不能体现植物细胞的全能性，D错误。 21．（2026·辽宁·模拟预测）植物体内原本发育成气孔的前体细胞，在全能性调控因子LEC2与气孔发育关键因子SPCH协同作用下，可激活生长素合成通路，转变为具有全能性的体细胞胚干细胞。下列叙述错误的是（  ） A．若敲除SPCH基因，则不能通过前体细胞获得体细胞胚 B．利用该体细胞胚干细胞培育完整植株，不需经过脱分化过程 C．上述前体细胞转变成体细胞胚干细胞体现了植物细胞的全能性 D．借助此技术可实现濒危植物的快速繁殖，有利于生物多样性保护 【答案】C 【详解】A、由题干可知，LEC2与SPCH协同作用才能使气孔前体细胞转变为体细胞胚干细胞，若敲除SPCH基因，无法发挥协同作用，则不能通过前体细胞获得体细胞胚，A正确； B、脱分化是指已分化的细胞经过诱导后失去其特有的结构和功能，转变成未分化细胞（愈伤组织）的过程，体细胞胚干细胞本身具有全能性，可直接发育为完整植株，不需要经过脱分化过程，B正确； C、植物细胞全能性的定义是已分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能，题干仅体现前体细胞转变为体细胞胚干细胞，并未发育为完整个体，不能体现植物细胞的全能性，C错误； D、借助该技术可快速获得大量具有全能性的体细胞胚干细胞，进而培育出完整植株，可实现濒危植物的快速繁殖，有利于生物多样性保护，D正确。 22．（2026·辽宁沈阳·模拟预测）显齿蛇葡萄产生的黄酮类化合物可入药。下图为植物细胞工程示意图，下列叙述错误的是（　　） A．过程①对外植体消毒后需用无菌水进行清洗，接种时注意外植体不要倒插 B．过程②的目的是让已分化的细胞失去其特有的结构和功能，形成不定形的薄壁组织团块 C．过程⑤的原理是细胞增殖，目的是提高单个细胞中黄酮类化合物的含量 D．过程⑥加入PEG的目的是诱导原生质体融合，也可用离心法、高Ca2+-高pH融合法 【答案】C 【详解】A、过程①为外植体接种，对外植体消毒后需用无菌水冲洗以去除残留的消毒剂，避免消毒剂损伤外植体；生长素的极性运输是从形态学上端到下端，外植体倒插会影响生根发芽，因此接种时不能倒插，A正确； B、过程②为脱分化，目的是让已分化的细胞失去其特有的结构和功能，形成排列疏松、无定形的薄壁组织团块即愈伤组织，B正确； C、过程⑤为植物细胞培养，原理是细胞增殖，目的是通过增加细胞的总数量来提高黄酮类化合物的总产量，并不会提高单个细胞中黄酮类化合物的含量，C错误； D、过程⑥为原生质体融合，加入PEG是化学诱导方法，除此之外物理法的离心法、化学法的高Ca2+-高pH法也可以诱导原生质体融合，D正确。 23．（2026·辽宁沈阳·三模）三维细胞培养技术，是一种在实验室中以三维结构培养和繁殖活细胞的方法。与传统的二维细胞培养相比，三维细胞培养更接近人体内细胞的自然环境，能够更好地模拟体内细胞的生长和相互作用（如下图所示）。下列叙述错误的是（    ） A．二维细胞培养和三维细胞培养均需在无菌的环境中进行，因此所用培养液和血清均需进行高压蒸汽灭菌 B．三维细胞培养过程中，细胞会因营养物质的缺乏、有害代谢废物的积累、接触抑制等原因而分裂受阻 C．与二维细胞培养相比，三维细胞培养过程中细胞与培养液的接触面积相对更小，不利于营养物质的吸收 D．与二维细胞培养相比，三维细胞培养过程中细胞更容易维持正常的形态和分化功能，常用于构建器官模型 【答案】A 【详解】A、二维和三维细胞培养都需要无菌环境，但血清不能进行高压蒸汽灭菌。血清中含有蛋白质、生长因子等热敏性生物活性物质，高压蒸汽灭菌的高温会破坏这些有效成分，导致血清失效，A错误； B、三维细胞培养中，细胞会聚集形成三维结构：  随着细胞增殖，营养物质会被不断消耗，出现缺乏； 细胞代谢产生的废物会在局部积累，对细胞产生毒性； 细胞密度过高时，会出现接触抑制现象，抑制细胞分裂，B正确； C、二维细胞培养中，细胞是贴壁生长的，所有细胞都直接与培养液接触；而三维细胞培养中，细胞聚集形成立体结构，内部的细胞无法直接接触培养液，整体细胞与培养液的接触面积相对更小，不利于营养物质的吸收，C正确； D、三维细胞培养更接近体内细胞的自然生长环境，细胞能更好地维持正常的形态、极性和分化功能，因此常用于构建器官模型、肿瘤模型，也可用于药物筛选等研究，D正确。 24．（2026·辽宁·模拟预测）植物体细胞杂交技术可克服远缘杂交的不亲和障碍，主要包括原生质体的制备、原生质体的融合、杂种细胞的筛选与植物组织培养等环节。下列叙述错误的是（    ） A．制备原生质体时，可将植物组织置于等渗溶液中 B．可使用PEG诱导法、电融合法诱导原生质体融合 C．该技术培育的杂种植株可稳定表达双亲的全部优良性状 D．植物组织培养时，培养基中激素的比例会影响脱分化和再分化过程 【答案】C 【详解】A、制备原生质体时植物细胞已去除细胞壁，无细胞壁保护的原生质体在低渗溶液中会吸水涨破，高渗溶液中会失水皱缩，置于等渗溶液可维持原生质体的正常形态和生理活性，A正确； B、诱导原生质体融合的方法包括物理法（电融合法、离心法等）和化学法（PEG即聚乙二醇诱导法），B正确； C、杂种植株虽然含有双亲的遗传物质，但基因的表达存在相互调控，且部分基因可能丢失、性状表达还受环境影响，无法稳定表达双亲的全部优良性状，C错误； D、植物组织培养过程中，生长素和细胞分裂素的比例会调控细胞分化方向：比例适中时利于脱分化形成愈伤组织，生长素比例偏高利于根的分化，细胞分裂素比例偏高利于芽的分化，因此激素比例会影响脱分化和再分化过程，D正确。 25．（2026·辽宁·模拟预测）A型流感病毒会引起肺的炎性损伤，中药二氢丹参酮(DHTI)具有一定的治疗作用。PA-X蛋白是A型流感病毒复制所必需的。科研人员制备了抗PA-X蛋白的单克隆抗体，对DHTI与抗PA-X单抗形成的抗体—药物偶联物的应用开展研究。下列叙述正确的是（　　） A．制备抗PA-X单抗时，需先对小鼠进行细胞免疫 B．获得的杂交瘤细胞经克隆化培养即可得到大量抗PA-X单抗 C．制备单抗利用的生物学原理包括细胞核的全能性 D．抗体—药物偶联物通常由抗体、药物和接头三部分组成 【答案】D 【详解】A、制备抗PA-X单抗时，需先将PA-X蛋白作为抗原注射到小鼠体内，使小鼠进行体液免疫，产生能分泌相应抗体的B淋巴细胞，A错误； B、融合得到的细胞分别经过特定选择培养基筛选、克隆化培养和抗体检测，得到产生专一抗体的杂交瘤细胞，再通过体内和体外培养，可得到大量的单克隆抗体，B错误； C、制备单抗利用的生物学原理包括细胞膜的流动性（细胞融合）和细胞增殖（杂交瘤细胞的大量增殖），C错误； D、抗体—药物偶联物通常由抗体、药物和接头三部分组成，抗体能特异性识别并结合靶细胞，药物具有治疗作用，接头连接抗体和药物，D正确。 26．（2026·辽宁·三模）黄酮属于酚类化合物，是多种中药材的主要活性成分，图为两条生产黄酮的技术路径。下列叙述不正确的是（    ） A．黄酮由植物代谢过程中产生，属于次生代谢物 B．外植体需依次使用酒精和次氯酸钠溶液进行消毒处理 C．实施路径二时可将X分散为单个细胞或细胞团进行培养 D．①②③④过程所需培养基质中均需加入蔗糖等能源物质 【答案】D 【详解】A、黄酮属于酚类化合物，是植物代谢产生的、并非植物生长发育必需的次生代谢物，是中药材的活性成分，A正确； B、植物组织培养时对外植体消毒，通常依次使用体积分数70%左右的酒精和次氯酸钠溶液处理，最后用无菌水冲洗残留消毒剂，B正确； C、路径二为细胞培养生产黄酮，X是外植体脱分化形成的愈伤组织，可将其分散为单个细胞或小细胞团进行悬浮培养，通过细胞增殖获得大量细胞后提取黄酮，C正确； D、③过程是脱毒苗培育为完整植株，脱毒苗已经分化出芽、含有叶绿体，可通过光合作用合成有机物，若移栽到室外基质中培养，培养基质不需要额外添加蔗糖等能源物质，因此并非四个过程的培养基质都需要加入蔗糖，D错误。 27．（2026·辽宁沈阳·模拟预测）生物技术的安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述错误的是（　　） A．治疗性克隆和生殖性克隆均需应用到动物细胞培养和动物体细胞核移植技术 B．α-淀粉酶基因可以阻断淀粉储藏使花粉失去活性，从而防止基因污染 C．生物武器包括致病菌类、病毒类和生物毒素类等，具有致病能力强、攻击范围广的特点 D．试管婴儿和设计试管婴儿技术均涉及了体外受精、胚胎移植和遗传学诊断技术 【答案】D 【详解】A、治疗性克隆和生殖性克隆的第一步均是通过动物体细胞核移植技术获得重组细胞，再通过动物细胞培养技术获得早期胚胎，因此二者均需应用这两项技术，A正确； B、α-淀粉酶基因表达后会阻断花粉中淀粉的储藏，使花粉失去活性无法完成传粉，能够避免目的基因随花粉扩散，从而防止基因污染，B正确； C、生物武器的类别包括致病菌类、病毒类、生物毒素类以及基因重组的致病菌等，其致病能力强、传播范围广，危害性大，C正确； D、普通试管婴儿技术是为解决不孕不育问题，仅涉及体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植技术，不需要进行遗传学诊断；只有设计试管婴儿技术需要在胚胎移植前进行遗传学诊断，筛选符合要求的胚胎，二者并非都涉及遗传学诊断技术，D错误。 28．（2026·辽宁朝阳·三模）为分离土壤中能分解尿素的细菌并对其进行计数，某生物兴趣小组进行了如下实验操作。下列叙述错误的是（    ） A．除如图所用操作外，也可以使用平板划线法对分解尿素的细菌进行分离和计数 B．配制培养基时，需先调节pH至中性或弱碱性，后使用干热灭菌箱对其进行灭菌 C．若在培养基上生长的菌落平均数为130，则10g土样中含有的菌数约为1.3×1010个 D．由于在计算菌落数时会选择多个平板计算平均数，因此本实验无需设置对照组 【答案】ABD 【详解】A、图示为稀释涂布平板法，适用于分离和计数。而平板划线法仅用于分离，无法用于计数，A错误； B、培养基配制应先调节pH至中性或弱碱性（培养细菌），再进行灭菌， 灭菌方法应为高压蒸汽灭菌（121℃，15–30 min），而非干热灭菌（适用于玻璃器皿等耐高温干燥物品）；筛选分解尿素的细菌，培养基以尿素作为唯一氮源时因尿素高温易分解，应单独过滤除菌后加入已灭菌培养基，B错误； C、分析可知，菌液稀释了106倍，1g土样中含有的菌数=130/0.1×106  =1.3×109个/mL，则10g土样中含有的菌数约为1.3×1010个，C正确； D、实验中需设置空白对照（未接种的培养基），以判断培养基是否被污染，D错误。 29．（2026·辽宁·三模）火龙果在常温下极易腐败变质产生醋味，可从火龙果上筛选优质醋酸菌种，筛选过程如下图。下列叙述正确的是（　　） A．上述流程中各步骤均可使用液体培养基，以便于振荡分散培养提高菌株的繁殖速率 B．在筛选培养基中加入CaCO3只能允许特定种类的微生物生长，可以起到选择作用 C．测定菌株的醋酸耐受性是为了筛选出在高浓度醋酸条件下仍能保持较强活性的菌株 D．以火龙果为原料产酸时发酵罐内会产生气泡，而以果酒为底物产酸则无气泡产生 【答案】CD 【详解】A、筛选步骤需要用固体培养基，通过稀释涂布平板法分离获得单菌落，A错误； B、筛选培养基中加入CaCO3的作用是鉴别产酸菌落（产酸菌落周围会形成透明圈），属于鉴别培养基，该培养基不能抑制其他微生物生长，不具有选择功能，B错误； C、醋酸发酵过程会积累醋酸，高浓度醋酸会抑制醋酸菌活性，测定醋酸耐受性可筛选出高醋酸浓度下仍保持较强活性的优质菌株，C正确； D、以火龙果为原料时，火龙果富含糖类，醋酸菌分解糖类产醋酸的同时生成CO2，因此有气泡产生，以果酒（乙醇）为底物时，醋酸菌将乙醇氧化为醋酸和水，无气体生成，因此无气泡产生，D正确。 30．（2026·黑龙江哈尔滨·三模）下图为动物细胞培养过程的示意图。下列叙述正确的是（　　） A．步骤①往往选用幼龄动物的组织，是因为其全能性高 B．步骤③是原代培养，细胞会因细胞密度过大、有害代谢物积累等因素停止分裂 C．在使用合成培养基培养动物细胞时，通常需要对加入的血清等天然成分进行灭菌 D．进行传代培养时，贴壁细胞需要用胰蛋白酶处理使之分散，然后再用离心法收集 【答案】BD 【详解】A、步骤①选用幼龄动物组织的原因是其细胞分裂能力强、增殖旺盛，动物细胞培养的目的是获得细胞或细胞产物，不需要体现细胞全能性，且高度分化的动物体细胞全能性受限制，A错误； B、步骤③是分瓶前的初次培养即原代培养，细胞培养过程中会出现接触抑制，同时细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质消耗都会导致细胞停止分裂，B正确； C、血清中含有多种生长因子、蛋白质等活性成分，常规灭菌方法（如高压蒸汽灭菌）会破坏这些活性物质，因此血清通常采用过滤除菌，C错误； D、传代培养时，贴壁生长的细胞需要先用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理，使细胞从培养瓶壁上脱离并分散成单个细胞，之后通过离心法收集细胞再进行分瓶培养，D正确。 31．（2026·吉林长春·模拟预测）若下图表示细胞工程中的某一过程，下列说法正确的是（　　） A．如果A、B分别是白菜和甘蓝的原生质体，可采用离心法促进融合 B．如果A、B分别是优良奶牛的卵细胞和精子，则B细胞一定需要用获能液处理 C．如果进行抗丙肝病毒的单克隆抗体制备，则C细胞能产生抗丙肝病毒的抗体 D．如果进行克隆动物实验，在细胞融合前，A、B之一可用紫外线短时照射进行处理 【答案】AD 【知识点】克隆、动物细胞融合与单克隆抗体的制备、植物体细胞杂交技术、动物的体外受精 【详解】A、植物原生质体融合的物理诱导方法包括离心、振动、电激等，因此离心法可促进白菜和甘蓝的原生质体融合，A正确； B、精子获能包括两种方法：啮齿类等动物精子可用培养法（获能液处理），牛、羊等家畜精子常用化学诱导法（肝素或钙离子载体处理），B错误； C、单克隆抗体制备中融合得到的C细胞有多种类型（B细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞、杂交瘤细胞），且杂交瘤细胞还需经过抗体阳性筛选才能得到可产生抗丙肝病毒抗体的类群，因此C细胞不一定能产生目标抗体，C错误； D、克隆动物实验中需要使用去核的卵母细胞作为受体，可通过紫外线短时照射处理卵母细胞使其细胞核失活，即融合前可对A、B中的卵母细胞进行该处理，D正确。 32．（2026·辽宁沈阳·模拟预测）甲状旁腺激素（PTH）是调节钙、磷代谢的主要激素之一，临床上PTH含量是低钙血症等疾病的重要诊断指标。现有两种抗PTH单克隆抗体A1、B1，科研人员将B1固定在固相载体上作为捕获抗体，用辣根过氧化物酶标记A1，建立定量检测PTH的方法，如图。下列叙述错误的是（　　） A．制备单克隆抗体时用特定的选择培养基筛选，得到的杂交瘤细胞都能产生特异性抗体 B．B1与待测样本中的PTH特异性结合的位点和A1与PTH特异性结合的位点相同 C．据图可知，PTH可使底物发生显色反应，从而通过棕色深浅来测定PTH的含量 D．单克隆抗体不仅可用作诊断试剂定量检测PTH，还可用于运载药物和治疗疾病 【答案】ABC 【详解】A、制备单克隆抗体时，特定选择培养基仅能筛选出杂交瘤细胞，这些杂交瘤细胞不一定都能产生所需的特异性抗体，后续还需进行克隆化培养和抗体阳性检测，才能筛选出能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，A错误； B、由图可知PTH可同时与B1、A1结合，说明二者识别PTH的不同抗原结合位点，若结合位点相同则无法同时结合PTH，B错误； C、根据图示，是酶标记的抗体A1与底物反应，产生棕色产物，通过检测棕色产物来测定PTH的含量，并非PTH直接使底物发生显色反应，C错误； D、单克隆抗体特异性强、灵敏度高，既可作为诊断试剂  定量检测PTH等物质，也可制成“生物导弹”运载药物，还可单独用于相关疾病的治疗，D正确。 33．（2026·辽宁锦州·模拟预测）科研人员利用普通柑橘属不同种植物（2N=18）的原生质体融合技术制备胞质杂种，进而培育品质优良的柑橘杂种植株。下图为获得胞质杂种的三种主要方式。下列叙述错误的是（　　） A．原生质体与原生质层的三个组成部分相同 B．三种融合方式均可用PEG或电刺激促进原生质体融合 C．三种方式获得的胞质杂种均为二倍体，所含DNA数均相同 D．胞质杂种再生细胞壁后，可用植物组织培养技术获得杂种植株 【答案】AC 【详解】A、原生质体是植物细胞去除细胞壁后的全部结构，包括细胞膜、细胞质、细胞核；原生质层是成熟植物细胞的细胞膜、液泡膜以及两层膜之间的细胞质，不包含细胞核和细胞液，二者组成不同，A错误； B、PEG（聚乙二醇）诱导是化学融合法，电刺激是物理融合法，二者都是促进原生质体融合的常用手段，三种融合方式均适用，B正确； C、①中供体核仅被灭活，核DNA仍保留在融合细胞中，核DNA为两个亲本的核DNA之和，属于四倍体；且三种融合方式的细胞质来源有差异，细胞质中的线粒体、叶绿体DNA数量不同，因此总DNA数并不相同，C错误； D、再生细胞壁的胞质杂种细胞具有植物细胞的全能性，可利用植物组织培养技术经脱分化、再分化获得完整杂种植株，D正确。 1 / 11 学科网（北京）股份有限公司 $ 专题10 发酵工程与细胞工程 内容导览 考情概览：解读近年命题思路和内容要求，统计真题考查情况。 2026年真题研析：探寻常考要点，真题分类精讲，归纳串联解题必备知识。 近3年真题精选：分类精选近年真题，把握命题趋势。 名校模拟探源：精选适量名校模拟题，发掘高考命题之源。 命题解读 考向 题目 1.高频考点： 发酵工程、动物细胞工程、植物细胞工程。 2.素养考向 1. 生命观念：运用生物学基本概念和原理，引导学生形成物质与能量观相关的生命观念； 2. 科学思维：通过工程学构想，考查学生基于事实逻辑辨析概念、判断命题正误的演绎推理能力，落实科学思维素养； 3. 社会责任：结合生活或生产实例的情境，引导学生分析发酵工程，细胞工程相关知识的应用、落实社会责任素养； 4. 科学探究：基于人类生产或生活某一需求的相关资料，考查学生对实验设计、结果检测基本逻辑的理解，落实科学探究素养。 考向1 发酵工程 ①2026·黑吉辽蒙卷 ②2025·黑吉辽蒙卷 ③2024·黑吉辽卷 考向2动物细胞工程 ①2026·黑吉辽蒙卷 ②2025·黑吉辽蒙卷 ③2024·黑吉辽卷 考向3 植物细胞工程 ①2026·黑吉辽蒙卷 ②2025·黑吉辽蒙卷 ③2024·黑吉辽卷 2026年高考中，整套试题体现新高考生物“基础覆盖广、情境真实、图表信息密集、实验探究突出”的命题特点。总体难度中等偏上，区分度主要来自图表判读、多选题选项甄别、遗传推理、实验流程补全和规范表达。情境真实多元，贴近生产生活与科学研究；图文表信息密集，突出综合判读能力；重过程推理，强化生物的实验探究能力；实践导向突出，强调生物问题解决。 预测2027年高考，该专题对图表判读与过程推理能力有很大的提升，曲线、路径图、结构图会承载更多信息。 考向一 发酵工程 1. （2026·黑吉辽蒙卷·第18题）某奶酒以牛奶为主要原料，经微生物发酵酿制而成。为提高发酵效率，需筛选具有乳糖利用率高、乙醇产量高等特性的酵母菌菌株。下列叙述正确的是（　　） A．选择培养基应以葡萄糖为唯一碳源 B．选择培养基中可添加抗生素抑制细菌生长 C．制备固体培养基需先高压蒸汽灭菌再倒平板 D．接种后的平板应在37℃恒温培养 命题立意 本题以牛奶酿酒为情境，引导学生利用发酵工程的知识，考查的必备知识为选择培养基、制备培养基的过程、酵母菌培养温度，关键能力为分析、运用知识解决实际问题的能力。 A 错误选项 本实验目的是筛选乳糖利用率高的酵母菌，选择培养基应以乳糖为唯一碳源，才能保证仅能利用乳糖的菌株存活，以葡萄糖为唯一碳源无法达到筛选目的 B 正确选项 抗生素可抑制细菌生长繁殖，酵母菌属于真菌，对抗生素不敏感，因此添加抗生素可排除细菌杂菌的干扰 C 正确选项 制备固体培养基的流程为计算→称量→溶化→调pH→高压蒸汽灭菌→倒平板，先灭菌再倒平板可避免杂菌污染 D 错误选项 酵母菌的最适培养温度约为28℃，37℃是细菌培养的常用温度，不符合酵母菌的培养要求 考向二 动物细胞工程 2.（2026·黑吉辽蒙卷·第11题）人端粒酶催化亚基（hTERT）能维持端粒DNA序列长度。将间充质干细胞分为两组并进行贴壁培养：a组导入空载体；b组导入hTERT基因并持续表达。下列叙述错误的是（　　） A．细胞培养过程中，培养液需要定期更换 B．传代培养时，可用纤维素酶处理使贴壁细胞分散 C．a组细胞端粒DNA序列会随分裂次数增加而逐渐缩短 D．与a组细胞相比，b组细胞可分裂的次数会明显增加 命题立意 本题以人端粒酶催化亚基为情境，引导学生利用动物细胞工程的知识，考查的必备知识为传代培养、细胞代谢废物，关键能力为分析、运用知识解决实际问题的能力。 A 正确选项 动物细胞培养过程中，细胞代谢会积累有害代谢产物，同时会消耗营养物质，因此需要定期更换培养液以清除代谢废物、补充营养 B 错误选项 动物细胞没有细胞壁，传代培养时需用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理使贴壁细胞分散 C 正确选项 a组导入空载体，无hTERT表达，不能维持端粒DNA长度，根据端粒学说，细胞每分裂一次端粒DNA就会缩短一截，因此a组细胞端粒DNA序列会随分裂次数增加逐渐缩短 D 正确选项 b组导入hTERT基因且持续表达，可维持端粒DNA序列长度，避免端粒过短导致细胞分裂停止，因此与a组相比，b组细胞可分裂的次数明显增加 考向三 植物细胞工程 3.（2026·黑吉辽蒙卷·第5题）下列关于菊花愈伤组织诱导及培养的叙述，正确的是（　　） A．诱导愈伤组织形成及后期培养，全程需光照 B．为防止植物激素高温失活，培养基可不灭菌 C．用幼嫩的茎段作外植体能诱导形成愈伤组织 D．生长素与细胞分裂素的比例不影响愈伤组织细胞分化方向 命题立意 本题以菊花愈伤组织诱导及培养为情境，引导学生利用植物细胞工程的知识，考查的必备知识为植物组织培养、灭菌方法，关键能力为分析、运用知识解决实际问题的能力。 A 错误选项 诱导愈伤组织的脱分化阶段需要避光处理，仅再分化阶段需要光照 B 错误选项 为避免杂菌污染导致培养失败，培养基必须经过灭菌处理，植物激素可在培养基灭菌冷却后添加，不会出现高温失活的问题 C 正确选项 幼嫩茎段的细胞分化程度低，全能性更容易表达，作为外植体可经脱分化过程诱导形成愈伤组织 D 错误选项 生长素与细胞分裂素的比例会调控愈伤组织的分化方向：比例偏高时利于根的分化，比例偏低时利于芽的分化，比例适中时利于愈伤组织的生长 一、微生物培养 选择培养基：加入某种化学物质，抑制不需要的微生物生长，促进所需微生物生长，如以尿素为唯一氮源的培养基可筛选尿素分解菌。 鉴别培养基：加入某种指示剂或化学药品，用于鉴别不同种类的微生物，如伊红美蓝培养基可鉴别大肠杆菌（形成黑色带有金属光泽的菌落）。 通用培养基：含有微生物生长所需的基本营养物质，用于培养多种微生物，如牛肉膏蛋白胨培养基。 二、灭菌的方法 灭菌：是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 消毒和灭菌工作主要包括两个方面：对操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 常用灭菌方法简介： 三、常用纯培养方法 平板划线法：用接种环在固体培养基表面连续划线，将菌种逐步稀释，最终得到单个菌落，适用于微生物的分离和纯化。 稀释涂布平板法：将菌液进行一系列梯度稀释，然后取少量稀释液涂布在固体培养基表面，培养后得到单个菌落，适用于微生物的分离、纯化和计数。 平板划线法基本过程： 四、稀释涂布平板法基本过程 A.梯度稀释：将待测样品用无菌水或生理盐水进行系列梯度稀释（如10⁻¹、10⁻²…10⁻ⁿ），每级稀释需充分混匀。 B.涂布平板：取适宜稀释度的菌悬液（通常0.1-0.2mL）滴加到固体培养基平板表面，用无菌涂布器（经酒精灭菌冷却后）将菌液均匀涂布于整个平板表面。 C.培养：待菌液完全吸收后，将平板倒置（防止冷凝水污染菌落），置于适宜温度（如37℃）的恒温培养箱中培养一定时间（通常18-24h），使单个微生物细胞生长繁殖形成单菌落。 D.计数：选取菌落数在30-300之间的平板，统计菌落数量，按公式“菌落数=平板菌落数×稀释倍数/取样体积”计算样品中微生物浓度。 五、动物细胞培养的完整过程： 取材：取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官（细胞分裂能力强），如小鼠胚胎、幼鼠的肝脏。 分散处理：对新鲜取材的动物组织进行处理，或用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间，将组织分散成单个细胞（避免胰蛋白酶处理时间过长，损伤细胞膜）。 原代培养：将分散的细胞制成细胞悬液，转移到培养瓶中培养。人们通常将分瓶之前的细胞培养，即动物组织经处理后的初次培养称为原代培养。原代培养的细胞一般在10代以内，保持正常的二倍体核型。 传代培养：将分瓶后的细胞培养称为传代培养。在进行传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集；贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集。之后，将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养。 培养条件： 无菌、无毒环境：在体外培养细胞时，需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作。培养液还需要定期更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。 营养条件：将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分。培养动物细胞一般使用液体培养基，也称为培养液。 温度、pH和渗透压：哺乳动物细胞培养的温度多以36.5±0.5℃为宜。多数动物细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。此外，渗透压也是动物细胞培养过程中需要考虑的一个重要环境参数。 气体环境：O₂是细胞代谢所必需的，CO₂的主要作用是维持培养液的pH。将细胞放在含有95%空气和5%CO₂的混合气体的CO₂培养箱中进行培养。 应用：生产生物制品（如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）；作为基因工程的受体细胞（用于重组DNA的表达）；检测有毒物质（通过观察细胞形态和增殖情况判断毒性）；研究细胞生理、病理机制（如癌症的发生机制）。 六、植物组织培养的完整过程： 外植体（离体的植物器官、组织或细胞）→脱分化→愈伤组织（排列疏松、高度液泡化的薄壁细胞团）→再分化→胚状体或丛芽→完整植株。 关键步骤分析： 脱分化：已经分化的细胞失去其特有的结构和功能，转变成未分化的细胞，进而形成不定形的薄壁组织团块。需避光培养，培养基中添加生长素和细胞分裂素。 再分化：愈伤组织重新分化出根、芽等器官。需要光照培养，通过调整生长素和细胞分裂素的比例控制分化方向（生长素比例高促进根的分化，细胞分裂素比例高促进芽的分化）。 实验操作注意事项：全程无菌操作，外植体消毒（70%酒精消毒30s后用无菌水冲洗，再用质量分数为5%次氯酸钠溶液处理30min，最后无菌水冲洗干净），培养基需高压蒸汽灭菌。 地位：是植物体细胞杂交、作物脱毒、单倍体育种等技术的基础。 考向1 发酵工程 1. （2025·黑吉辽蒙卷·第4题）科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素（C22H23ClN2O8）能力强的菌株，旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是（    ） A．以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基 B．逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株 C．配制选择培养基时，需确保pH满足实验要求 D．用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面 2.（2024·黑吉辽卷·第19题）某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，其筛选流程及抗性检测如图。下列操作正确的是（    ） A．在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从感病植株上采集样品 B．将采集的样品充分消毒后，用蒸馏水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测 C．将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落 D．判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小 考向2 动物细胞工程 3.（2025·黑吉辽蒙卷·第19题）下图是制备抗白细胞介素-6（IL-6）单克隆抗体的示意图。下列叙述错误的是（    ） A．步骤①给小鼠注射IL-6后，应从脾中分离筛选T淋巴细胞 B．步骤②在脾组织中加入胃蛋白酶，制成单细胞悬液 C．步骤③加入灭活病毒或PEG诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性 D．步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出了杂交瘤细胞 4．（2024·黑吉辽卷·第14题）从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。下列叙述正确的是（    ） A．传代培养时，培养皿需密封防止污染 B．选取①的细胞进行传代培养比②更合理 C．直接用离心法收集细胞进行传代培养 D．细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关 考向3 植物细胞工程 5.（2025·黑吉辽蒙卷·第8题）利用植物组织培养技术获得红豆杉试管苗，有助于解决紫杉醇药源短缺问题。下列叙述正确的是（    ） A．细胞分裂素和生长素的比例会影响愈伤组织的形成 B．培养基先分装到锥形瓶，封口后用干热灭菌法灭菌 C．芽原基细胞由于基因选择性表达，不能用作外植体 D．紫杉醇不能通过细胞产物的工厂化生产来获取，植物组织培养优势明显 6．（2024·黑吉辽卷·第6题）迷迭香酸具有多种药理活性。进行工厂化生产时，先诱导外植体形成愈伤组织，再进行细胞悬浮培养获得迷迭香酸，加入诱导剂茉莉酸甲酯可大幅提高产量。下列叙述错误的是（    ） A．迷迭香顶端幼嫩的茎段适合用作外植体 B．诱导愈伤组织时需加入NAA和脱落酸 C．悬浮培养时需将愈伤组织打散成单个细胞或较小的细胞团 D．茉莉酸甲酯改变了迷迭香次生代谢产物的合成速率 1．（2026·辽宁沈阳·模拟预测）谷氨酸棒状杆菌是一种需氧型细菌，常用于工业生产谷氨酸，谷氨酸经过一系列处理能制成味精。下图是以小麦为原料发酵生产味精的工艺流程。下列叙述错误的是（　　） A．对小麦进行糖化处理有助于提高发酵效率 B．图示流程中的两次接种均可使用稀释涂布平板法 C．发酵生产中，在中性和弱碱性条件下有利于谷氨酸的积累 D．发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，需严格控制温度、溶解氧等发酵条件 2．（2026·辽宁·三模）某微生物研究院从东北传统自然发酵酸菜中分离选育出一株高产乳酸的植物乳杆菌HMD-08，优化发酵工艺后，该菌株在10L发酵罐中发酵72h，乳酸产量达18.6g/L，为东北酸菜工业化纯种发酵提供了优良菌种。下列相关叙述错误的是（　　） A．该植物乳杆菌的发酵过程需在严格无氧的条件下进行 B．发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵，需严格控制温度、pH、溶解氧等条件 C．大规模发酵前，需对该菌株进行扩大培养，以获得足量的菌种 D．发酵结束后，可采用过滤、沉淀的方法直接获得高纯度的乳酸产品 3．（2026·辽宁·模拟预测）下列关于发酵和实验中微生物培养的叙述，正确的是（　　） A．用于生产柠檬酸和腐乳的黑曲霉和毛霉，均属于需氧异养型真核生物 B．为使酵母菌菌种充分吸收营养物质，果酒发酵时需每日开盖搅拌 C．分离尿素分解菌时常用接种环将稀释的菌液均匀地涂布在培养基表面 D．大肠杆菌的纯培养和鉴定时所使用的固体培养基中需添加酚红试剂 4．（2026·辽宁沈阳·三模）高粱酒以高粱为主要原料，稻壳为辅料，配以大麦或小麦，经传统低温发酵酿制而成，工艺流程如下图所示。下列有关叙述正确的是（    ） A．传统发酵以混合菌种的液体发酵为主，通常是家庭式或作坊式的 B．高粱中的淀粉为酒曲中微生物的生长繁殖提供了碳源和氮源 C．在发酵初期，酵母菌繁殖越快则酒精产量越高 D．蒸粮不仅有助于杀灭部分杂菌，也有利于糖化 5．（2026·辽宁朝阳·三模）利用植物秸秆生产酒精的关键步骤包括原料预处理、水解、发酵和蒸馏。预处理后的秸秆中的纤维素和半纤维素需通过水解转化为可发酵的糖(如葡萄糖、木糖)，利用酶解法水解，反应条件温和，催化效率高，且副产物少，但纤维素酶的成本较高。从牛、羊等草食性动物的瘤胃中分离高效降解纤维素的分解菌，可降低上述酶成本较高的问题，实验流程如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．利用植物秸秆生产酒精的发酵阶段，发酵菌有酵母菌 B．①和②过程使用石蜡主要是为目的菌营造无氧环境 C．②过程所用接种工具为涂布器，平板甲上菌落数要求在30-300之间 D．平板乙上，菌落a由降解纤维素效率最高的菌株繁殖而来 6．（2026·吉林松原·模拟预测）为分离土壤中高效降解石油的微生物，科研团队设计了3组培养基（成分如表所示），并对菌株生长情况进行检测。已知石油中烃类物质为主要污染物，且微生物对石油的降解能力与菌株生物量呈正相关。下列叙述正确的是（　　） 培养基编号 碳源 氮源 无机盐（含微量元素） 凝固剂 菌株生物量（相对值） Ⅰ 葡萄糖 硝酸铵 适量 琼脂 85 Ⅱ 石油 硝酸铵 适量 琼脂 32 Ⅲ 石油+葡萄糖 硝酸铵 适量 琼脂 68 A．培养基Ⅰ为选择培养基，能筛选出高效降解石油的菌株 B．培养基Ⅱ中的菌株生物量较低的原因是培养基无碳源 C．培养基Ⅲ中添加葡萄糖可能导致菌株对石油的降解效率下降 D．三组培养基均需先进行高压蒸汽灭菌处理后再调节pH 7．（2026·吉林长春·模拟预测）如图为微生物的实验室培养的有关操作，下列相关叙述错误的是（　　） A．步骤①中，需将接种环灼烧至变红，以杀灭杂菌 B．步骤②中，将接种环冷却时不宜距酒精灯火焰太远 C．图中接种方法的目的是使菌种逐渐稀释，经培养后获得单菌落 D．接种后应将培养皿倒置培养，培养后可以根据结果进行微生物计数 8．（2026·吉林·模拟预测）深海中某种赖氨酸缺陷型放线菌能产生安莎霉素，可治疗肺部感染。为此，科研人员用紫外线诱变深海放线菌后，如图选育高产菌株，以提取安莎霉素。下列叙述正确的是（    ） 注：原位影印可确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落 A．培养基①②属于选择培养基，无需添加赖氨酸 B．用接种环蘸取菌液在培养基②上划线进行接种 C．为不破坏培养基③的无菌状态应在灭菌后调节pH D．培养结果是甲菌落不能在③生存，推断甲菌落能产生安莎霉素 9．（2026·黑龙江哈尔滨·模拟预测）发酵饮料格瓦斯通常以面包为基质，由酵母菌和乳酸菌发酵而成，玫瑰果富含Vc．新型玫瑰果格瓦斯加工工艺流程如图。酵母菌产酒精能力与其耐受酒精的能力有关，下列叙述正确的是（　　） A．面包液、糖化液可为菌种生长提供碳源等营养物质 B．发酵早期，需向发酵罐通入无菌空气促进菌种繁殖 C．通过该发酵工程可从微生物细胞中提取单细胞蛋白 D．培养基中添加糖类可筛选出产酒精能力强的酵母菌 10．（2026·黑龙江哈尔滨·二模）制作苹果醋的流程：挑选苹果→冲洗、切片，碾碎→加糖→添加菌种甲→苹果酒→添加菌种乙→苹果醋。下列相关叙述正确的是（ ） A．加糖的目的是为菌种提供碳源和氮源 B．菌种乙有线粒体，能进行有氧呼吸 C．用酸性重铬酸钾检测苹果醋发酵效果 D．发酵过程中，发酵液pH下降、温度上升 11．（2026·黑龙江哈尔滨·三模）啤酒生产主要工艺流程如图所示，下列叙述错误的是（    ） A．焙烤的目的是加热杀死种子胚，使细胞中所有物质失去活性 B．发酵用的酵母菌种可利用诱变育种或基因工程育种等方式获得 C．大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成 D．经赤霉素处理的大麦种子无需发芽即可产生α-淀粉酶，简化工艺流程 12．（2026·黑龙江大庆·模拟预测）为将尾菜(蔬菜废弃物)转化为优质饲料，研究人员常使用乳酸菌、酵母菌等进行混合发酵。下列叙述正确的是（　　） A．发酵前对尾菜进行高温灭菌处理，主要目的是杀死杂菌并提供发酵所需的最适温度 B．发酵过程中，乳酸菌主要进行有氧呼吸，酵母菌主要进行无氧呼吸 C．若需从发酵液中筛选能高效降解纤维素的菌种，可采用以纤维素为唯一碳源的固体培养基 D．为监测发酵过程中乳酸菌数量的动态变化，可采用平板划线法定期取样并计算菌落数 13．（2026·黑龙江哈尔滨·三模）发酵工程是指利用微生物的特定功能，规模化生产人类所需产品的综合性生物工程。下列关于发酵工程的说法错误的是（　　） A．获得微生物纯培养物是发酵工程的重要基础 B．单细胞蛋白不仅含有蛋白质，还含有糖类、脂质和维生素 C．发酵工程的中心环节是菌种的选育，性状优良的菌种是获得优良产物的关键 D．在发酵过程中，要随时检测培养液中微生物数量，产物浓度以了解发酵进程 14．（2026·黑龙江哈尔滨·三模）单倍体育种包括花药离体培养和秋水仙素诱导染色体数目加倍，下列叙述正确的是（    ） A．诱导愈伤组织的过程体现了植物细胞的全能性 B．秋水仙素在有丝分裂后期抑制纺锤体形成 C．接种前用体积分数为70%的酒精对材料灭菌 D．单倍体育种与常规育种相比可以明显缩短育种年限 15．（2026·黑龙江哈尔滨·三模）植物的营养繁殖易将所感染的病毒传给后代，导致产量降低、品质变差。利用MS培养基运用植物组织培养技术可以培育出无病毒植株。下列叙述正确的是（　　） A．常用根尖分生组织培养脱毒苗，原因是根尖分生组织病毒含量极低甚至无病毒 B．培养过程中已分化的细胞会转变成未分化细胞，进而形成不定形的薄壁组织团块 C．提高MS培养基中细胞分裂素和生长素的比例有利于诱导生根 D．接种操作须在酒精灯火焰旁进行，培养基、所有器械及外植体都需要灭菌 16．（2026·黑龙江·模拟预测）最初的诱导多能干细胞（iPS细胞）是用小鼠成纤维细胞直接转化得到的，科学家利用类似方法成功培育出了人类iPS细胞。这一系列成果极大地推动了动物细胞工程在理论和技术上的跨越式发展。下列相关叙述正确的是（　　） A．培育iPS细胞时，一般用胰蛋白酶或胃蛋白酶将动物新鲜组织分散成单个细胞 B．培养iPS细胞的液体培养基中需要添加血清、琼脂等天然成分 C．iPS细胞培养需在含5%CO2的培养箱中进行，以刺激细胞呼吸 D．诱导转化生成iPS细胞的过程中可能发生了基因重组 17．（2026·黑龙江哈尔滨·二模）黄酮类物质能帮助植物吸引传粉者、抵御紫外线辐射和抵抗病原菌侵染。科研人员研发出植物细胞生物反应器，实现了黄酮类物质的规模化生产。下列叙述正确的是（　　） A．生物反应器合成的黄酮类物质属于初生代谢物 B．该技术的不足之处是受季节、地域的限制 C．植物细胞的全能性是该项技术成功的理论基础 D．为实现细胞增殖与产物合成，需考虑激素的种类和比例 18．（2026·吉林长春·模拟预测）下列应用中不涉及植物组织培养技术的是（　　） A．利用嫁接技术繁育果树 B．草莓脱毒苗的培育 C．单倍体玉米的培育 D．基因工程培育抗除草剂大豆 19．（2026·吉林长春·模拟预测）下列有关动物细胞工程的技术和方法描述正确的是（　　） A．诱导B细胞和瘤细胞融合需经一次筛选获得所需的杂交瘤细胞 B．动物细胞培养液中添加抗生素可以抑制各种微生物的生长 C．正常体细胞培养定期更换培养液也无法使其无限增殖 D．动物细胞核移植的受体细胞通常是去核的卵原细胞 20．（2026·辽宁沈阳·三模）紫草宁具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性，是世界上首例药用植物细胞工程产品，生产流程如下图所示，下列相关叙述正确的是（    ） 外植体→愈伤组织→单细胞→高产细胞株→细胞培养物紫草宁 A．紫草宁等次生代谢物是植物基本生命活动所必需的产物 B．外植体形成愈伤组织的过程不涉及基因的选择性表达 C．可用纤维素酶和果胶酶将愈伤组织块中的细胞分散成单个细胞 D．利用植物外植体获得高产细胞株体现了植物细胞的全能性 21．（2026·辽宁·模拟预测）植物体内原本发育成气孔的前体细胞，在全能性调控因子LEC2与气孔发育关键因子SPCH协同作用下，可激活生长素合成通路，转变为具有全能性的体细胞胚干细胞。下列叙述错误的是（  ） A．若敲除SPCH基因，则不能通过前体细胞获得体细胞胚 B．利用该体细胞胚干细胞培育完整植株，不需经过脱分化过程 C．上述前体细胞转变成体细胞胚干细胞体现了植物细胞的全能性 D．借助此技术可实现濒危植物的快速繁殖，有利于生物多样性保护 22．（2026·辽宁沈阳·模拟预测）显齿蛇葡萄产生的黄酮类化合物可入药。下图为植物细胞工程示意图，下列叙述错误的是（　　） A．过程①对外植体消毒后需用无菌水进行清洗，接种时注意外植体不要倒插 B．过程②的目的是让已分化的细胞失去其特有的结构和功能，形成不定形的薄壁组织团块 C．过程⑤的原理是细胞增殖，目的是提高单个细胞中黄酮类化合物的含量 D．过程⑥加入PEG的目的是诱导原生质体融合，也可用离心法、高Ca2+-高pH融合法 23．（2026·辽宁沈阳·三模）三维细胞培养技术，是一种在实验室中以三维结构培养和繁殖活细胞的方法。与传统的二维细胞培养相比，三维细胞培养更接近人体内细胞的自然环境，能够更好地模拟体内细胞的生长和相互作用（如下图所示）。下列叙述错误的是（    ） A．二维细胞培养和三维细胞培养均需在无菌的环境中进行，因此所用培养液和血清均需进行高压蒸汽灭菌 B．三维细胞培养过程中，细胞会因营养物质的缺乏、有害代谢废物的积累、接触抑制等原因而分裂受阻 C．与二维细胞培养相比，三维细胞培养过程中细胞与培养液的接触面积相对更小，不利于营养物质的吸收 D．与二维细胞培养相比，三维细胞培养过程中细胞更容易维持正常的形态和分化功能，常用于构建器官模型 24．（2026·辽宁·模拟预测）植物体细胞杂交技术可克服远缘杂交的不亲和障碍，主要包括原生质体的制备、原生质体的融合、杂种细胞的筛选与植物组织培养等环节。下列叙述错误的是（    ） A．制备原生质体时，可将植物组织置于等渗溶液中 B．可使用PEG诱导法、电融合法诱导原生质体融合 C．该技术培育的杂种植株可稳定表达双亲的全部优良性状 D．植物组织培养时，培养基中激素的比例会影响脱分化和再分化过程 25．（2026·辽宁·模拟预测）A型流感病毒会引起肺的炎性损伤，中药二氢丹参酮(DHTI)具有一定的治疗作用。PA-X蛋白是A型流感病毒复制所必需的。科研人员制备了抗PA-X蛋白的单克隆抗体，对DHTI与抗PA-X单抗形成的抗体—药物偶联物的应用开展研究。下列叙述正确的是（　　） A．制备抗PA-X单抗时，需先对小鼠进行细胞免疫 B．获得的杂交瘤细胞经克隆化培养即可得到大量抗PA-X单抗 C．制备单抗利用的生物学原理包括细胞核的全能性 D．抗体—药物偶联物通常由抗体、药物和接头三部分组成 26．（2026·辽宁·三模）黄酮属于酚类化合物，是多种中药材的主要活性成分，图为两条生产黄酮的技术路径。下列叙述不正确的是（    ） A．黄酮由植物代谢过程中产生，属于次生代谢物 B．外植体需依次使用酒精和次氯酸钠溶液进行消毒处理 C．实施路径二时可将X分散为单个细胞或细胞团进行培养 D．①②③④过程所需培养基质中均需加入蔗糖等能源物质 27．（2026·辽宁沈阳·模拟预测）生物技术的安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述错误的是（　　） A．治疗性克隆和生殖性克隆均需应用到动物细胞培养和动物体细胞核移植技术 B．α-淀粉酶基因可以阻断淀粉储藏使花粉失去活性，从而防止基因污染 C．生物武器包括致病菌类、病毒类和生物毒素类等，具有致病能力强、攻击范围广的特点 D．试管婴儿和设计试管婴儿技术均涉及了体外受精、胚胎移植和遗传学诊断技术 28．（2026·辽宁朝阳·三模）为分离土壤中能分解尿素的细菌并对其进行计数，某生物兴趣小组进行了如下实验操作。下列叙述错误的是（    ） A．除如图所用操作外，也可以使用平板划线法对分解尿素的细菌进行分离和计数 B．配制培养基时，需先调节pH至中性或弱碱性，后使用干热灭菌箱对其进行灭菌 C．若在培养基上生长的菌落平均数为130，则10g土样中含有的菌数约为1.3×1010个 D．由于在计算菌落数时会选择多个平板计算平均数，因此本实验无需设置对照组 29．（2026·辽宁·三模）火龙果在常温下极易腐败变质产生醋味，可从火龙果上筛选优质醋酸菌种，筛选过程如下图。下列叙述正确的是（　　） A．上述流程中各步骤均可使用液体培养基，以便于振荡分散培养提高菌株的繁殖速率 B．在筛选培养基中加入CaCO3只能允许特定种类的微生物生长，可以起到选择作用 C．测定菌株的醋酸耐受性是为了筛选出在高浓度醋酸条件下仍能保持较强活性的菌株 D．以火龙果为原料产酸时发酵罐内会产生气泡，而以果酒为底物产酸则无气泡产生 30．（2026·黑龙江哈尔滨·三模）下图为动物细胞培养过程的示意图。下列叙述正确的是（　　） A．步骤①往往选用幼龄动物的组织，是因为其全能性高 B．步骤③是原代培养，细胞会因细胞密度过大、有害代谢物积累等因素停止分裂 C．在使用合成培养基培养动物细胞时，通常需要对加入的血清等天然成分进行灭菌 D．进行传代培养时，贴壁细胞需要用胰蛋白酶处理使之分散，然后再用离心法收集 31．（2026·吉林长春·模拟预测）若下图表示细胞工程中的某一过程，下列说法正确的是（　　） A．如果A、B分别是白菜和甘蓝的原生质体，可采用离心法促进融合 B．如果A、B分别是优良奶牛的卵细胞和精子，则B细胞一定需要用获能液处理 C．如果进行抗丙肝病毒的单克隆抗体制备，则C细胞能产生抗丙肝病毒的抗体 D．如果进行克隆动物实验，在细胞融合前，A、B之一可用紫外线短时照射进行处理 32．（2026·辽宁沈阳·模拟预测）甲状旁腺激素（PTH）是调节钙、磷代谢的主要激素之一，临床上PTH含量是低钙血症等疾病的重要诊断指标。现有两种抗PTH单克隆抗体A1、B1，科研人员将B1固定在固相载体上作为捕获抗体，用辣根过氧化物酶标记A1，建立定量检测PTH的方法，如图。下列叙述错误的是（　　） A．制备单克隆抗体时用特定的选择培养基筛选，得到的杂交瘤细胞都能产生特异性抗体 B．B1与待测样本中的PTH特异性结合的位点和A1与PTH特异性结合的位点相同 C．据图可知，PTH可使底物发生显色反应，从而通过棕色深浅来测定PTH的含量 D．单克隆抗体不仅可用作诊断试剂定量检测PTH，还可用于运载药物和治疗疾病 33．（2026·辽宁锦州·模拟预测）科研人员利用普通柑橘属不同种植物（2N=18）的原生质体融合技术制备胞质杂种，进而培育品质优良的柑橘杂种植株。下图为获得胞质杂种的三种主要方式。下列叙述错误的是（　　） A．原生质体与原生质层的三个组成部分相同 B．三种融合方式均可用PEG或电刺激促进原生质体融合 C．三种方式获得的胞质杂种均为二倍体，所含DNA数均相同 D．胞质杂种再生细胞壁后，可用植物组织培养技术获得杂种植株 1 / 11 学科网（北京）股份有限公司 $