河北省秦皇岛市第三中学2025-2026学年高二下学期7月期末考试生物试题

**基本信息** 聚焦微生物培养、细胞工程等核心内容，融入克隆猴、iPS细胞治疗等科研情境，注重实验分析与应用能力考查。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|30题/60分|微生物培养（平板划线法）、植物细胞工程（原生质体融合）、基因工程（限制酶选择）|结合“抗PD-L1单克隆抗体制备”等科研案例，考查科学思维| |解答题|3题/40分|微生物分离计数（透明圈分析）、基因表达载体构建（Ti质粒）|通过“蔗糖浓度对紫杉醇产量影响”等实验数据，强化探究实践能力|

秦皇岛市第三中学2025-2026学年度第二学期 期末考试 高二生物 考试时间：75分钟；命题人：王燕飞 注意事项： 1. 答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息 2. 请将答案正确填写在答题卡上 一、单选题 1. 自生固氮菌是土壤中能独立固定氮气的细菌，现欲配制培养基用于分离土壤中的自生固氮菌，下列属于该培养基应添加的成分是（） A. 牛肉膏 B. 无机盐 C. 蛋白胨 D. 抗生素 2. 某同学欲制作发酵食物，制作过程中通常无需乳酸菌参与发酵的是（） A. 泡菜 B. 啤酒 C. 奶酪 D. 酸奶 3. 下列关于平板划线法纯化微生物的叙述，错误的是（     ） A. 每次划线前，接种环都需要灼烧灭菌 B. 划线结束后，接种环仍需灼烧灭菌 C. 划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连 D. 该方法可用于微生物的分离，但不能用于计数 4. 稀释涂布平板法统计菌落数目时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是（     ） A. 培养基营养不足，细菌无法生长 B. 两个或多个活菌连在一起，只形成一个菌落 C. 细菌在涂布过程中大量死亡 D. 计数时只计数了单个菌落，未计数链状菌落 5. 下列关于传统发酵技术、发酵工程及其应用的叙述，正确的是（     ） A. 微生物的纯培养物就是不含代谢废物的微生物培养物 B. 单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质，可作为微生物饲料 C. 充足但缺乏糖源时，醋酸菌将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸 D. 相比传统发酵技术，发酵工程中废弃物对环境的污染较大、不容易处理 6. 酿酒、酿醋、腌制泡菜是典型的传统发酵技术。下列叙述正确的是（     ） A. 三种发酵技术都利用了微生物的厌氧发酵 B. 三种发酵技术都利用了单一发酵菌种 C. 三种发酵技术的最适温度相同 D. 三种发酵产物的积累都会影响发酵菌种的活性 7. 利用微型繁殖技术扩繁某种兰花时，待愈伤组织诱导出芽后，将芽转入增殖培养基进行扩增培养，以诱导芽的数量增加。下列说法正确的是（     ） A. 扩增培养期间不需要光照 B. 接种时应将芽的形态学上端插入培养基 C. 诱导出的芽在转入增殖培养基时，必须对芽进行消毒处理 D. 为获得试管苗，还需将芽转接到诱导生根的培养基上培养 科学家利用植物体细胞杂交技术，将黑芥（抗病）与花椰菜（感病）的原生质体融合，成功获得 了抗病新种质。下列叙述错误的是（     ） A．利用酶解法去除细胞壁获得原生质体 B．两种原生质体的融合可采用聚乙二醇诱导 C．获得的杂种细胞可直接发育成抗病植株，无需筛选 D．该技术克服远缘杂交不亲和的障碍 9．紫杉醇是红豆杉产生的一种次生代谢物，具有显著的抗癌功效。研究人员开展了悬浮培养红豆杉 细胞合成紫杉醇的工程技术研究，结果如表所示。下列说法错误的是（     ） 蔗糖浓度 （g/L） 20 30 40 50 60 细胞干重 （g/L） 12.5 15.3 18.6 14.2 10.1 紫杉醇产量 （g/L） 8.2 12.7 15.4 10.8 6.5 A．紫杉醇不是红豆杉细胞生长、增殖等生命活动所必需的 B．蔗糖浓度过高可能使培养液渗透压升高，抑制细胞生长 C．利用植物细胞培养技术生产紫杉醇的原理是细胞增殖 D．40g/L蔗糖浓度下，单个红豆杉细胞中紫杉醇含量最高 10．马铃薯是四倍体，研究人员在单倍体育种过程中，通过花药离体培养得到的单倍体马铃薯幼苗 含有的染色体组数为（     ） A．1 B．2 C． D．1或2 11．我国科研人员开发的针对帕金森病治疗的通用型iPS衍生细胞产品已进入临床阶段。相关叙述错 误的是（     ） A．iPS细胞可增殖分化为多种组织细胞类型 B．iPS细胞存在于早期胚胎中，应用时涉及伦理问题 C．该产品移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应 D．将iPS衍生细胞产品用于临床治疗可能存在导致肿瘤发生的风险 12．航天员在天宫课堂展示了体外培养的心肌细胞自律收缩跳动的实验。下列关于动物细胞培养的 叙述，正确的是（     ） A．营养供应充足时，胚胎干细胞传代培养无接触抑制现象 B．体外培养时，成人的肺成纤维细胞传代次数多于儿童的 C．密闭培养环境中，需要通入纯氧以维持心肌细胞的正常代谢 D．动物细胞培养时，玻璃器皿可干热灭菌，血清不能高温灭菌 13．某些肿瘤细胞表面的配体（PD - L1）与细胞毒性T细胞表面的受体（PD - 1）结合，可以传导抑制 性的信号，使细胞毒性T细胞增殖减弱，从而逃避免疫。实验人员欲制备抗PD - L1单克隆抗体，阻 断该信号传递，流程如图所示。下列叙述错误的是（     ） A．P细胞是取自小鼠的骨髓瘤细胞 B. ①和④都需要使用PD - L1作为抗原 C. ②可采用PEG或灭活的病毒进行诱导 D. 只有同种核融合的细胞不能在③中的培养基生长 14. 为研究治疗性克隆能否用于帕金森病的治疗，科研人员利用人帕金森病模型鼠进行如图所验。下列说法错误的是（     ） A. 过程①~⑤利用并体现了动物细胞核的全能性 B. 鼠皮肤细胞在进行①过程前可用灭活的病毒处理 C. 在过程③和④中都体现了基因的选择性表达 D. 受体小鼠应该不需要注射相应的免疫抑制剂 15. 我国科学家突破重重困难，重复多次下图操作过程，获得了两只克隆猴——“中中”和“华华”，先将体细胞核移植技术成功地应用于非人灵长类动物的克隆。下列有关说法正确的是（     ） A. 灭活病毒处理是为了促进体细胞核膜与卵母细胞的细胞膜融合 B. 重构胚的培养需要一定浓度CO₂、适宜的温度和pH等条件 C. 用胎猴的体细胞进行克隆的成功率显著低于成年猴的体细胞 D. 克隆猴“中中”和“华华”的遗传物质和性状表现完全相同 16. 动物细胞核移植技术中，受体细胞通常选用（ ）。 A. 受精卵 B. 去核卵母细胞 C. 体细胞 D. 干细胞 17. 以下关于动物体细胞核移植技术与克隆动物的表述错误的是（） A. 重构胚具有发育成完整个体的能力 B. 激活重构胚常用的方法有电刺激、Ca²⁺载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等 C. 克隆动物的遗传物质全部来自供体细胞 D. 目前获得的许多克隆动物都表现出遗传和生理缺陷，克隆技术仍需改进 18. 为保护濒危哺乳动物甲，科研工作者将甲的近亲物种乙（种群数量多）进行了如图所示的研究下列叙述正确的是（     ） A. 克隆动物的核基因组来源于甲、乙 B. 体外受精需用获能的精子与MⅠ期的卵母细胞受精 C．囊胚①的内细胞团可发育为胎盘、个体 D．滋养层可影响内细胞团的发育 19．下列关于体内受精过程的排序，正确的是（     ） ①受精卵卵裂开始 ②雄原核的形成 ③获能后的精子与卵子相遇并释放多种酶 ④精子穿越卵细胞 膜外的结构 ⑤释放第二极体，雌原核的形成 ⑥两个原核靠近，核膜消失 A．③④②⑤⑥① B．③②④⑤⑥① C．④⑤②③⑥① D．④⑤①②③⑥ 20．如图表示某哺乳动物胚胎的早期发育过程，a～c表示相关过程，I、II、III表示相关时期，下列 相关叙述正确的是（     ） A．过程a表示卵裂，该时期细胞数量和体积不断增加 B．过程b细胞逐渐分化，II分为内胚层、中胚层和外胚层 C．过程c表示孵化，孵化后发育形成III时期表示原肠胚 D．早期胚胎发育过程中滋养层细胞会发育成胎儿的各种组织 21．下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法正确的是（     ） A．①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前精子需要获能 B．②代表早期胚胎培养，该过程中细胞进行有丝分裂，无细胞分化 C．③代表胚胎分割，需均等分割桑椹胚的内细胞团，以免影响胚胎发育 D．为选育出能泌乳的母奶牛，移植前需从胚胎的滋养层部位取样，做DNA分析鉴定性别 22．下列以土豆为材料的实验描述，错误的是（     ） A．土豆DNA溶于酒精后，与二苯胺试剂混合呈蓝色 B．向土豆匀浆中加入一定量的碘液后，溶液会呈蓝色 C．利用土豆匀浆制备的培养基，可用于酵母菌的培养 D．土豆中的过氧化氢酶可用于探究pH对酶活性的影响· 23．如图所示三个DNA片段依次表示EcoRI、BamHI和Sau3AⅠ三种限制酶的识别序列与切割位点 下列有关叙述错误的是（     ） A．三种限制酶切割产生的末端的长度大小相同 B．这三种限制酶切割后形成的都是黏性末端 C.BamHI和Sau3AⅠ切割DNA片段形成的末端不能彼此连接 D. 图中的DNA片段被EcoRⅠ切割后，会增加两个游离的磷酸基团 24. 下图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为 A.DNA连接酶、限制酶、解旋酶 B. 限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶 D. 解旋酶、限制酶、DNA连接酶 25. 利用PCR获得目的基因后，用限制酶EcoRⅠ同时处理目的基因与质粒，拼接后可得到重组基因表达载体，其部分DNA片段如下图所示。下列有关引物的分析正确的是（     ） A. 通过PCR获取目的基因时，所选的引物可为引物2和引物3 B. 检测目的基因是否插入质粒且方向是否正确时，应选用引物1和引物4进行PCR C. 若设计的引物与模板不完全配对，可适当提高PCR复性的温度 D.DNA聚合酶能与引物结合，并从引物的5'端连接脱氧核苷酸 26. 下列关于PCR扩增DNA片段及电泳鉴定的叙述，正确的是（     ） A.PCR反应体系中需要加入解旋酶来解开双链DNA B. 引物与模板链的结合遵循碱基互补配对原则，其长度越长越好 C. 在PCR循环过程中，延伸阶段需要的温度比变性阶段高 D. 琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA时，DNA分子的迁移速度与分子量大小有关 27. 为获取玉米编码蔗糖转运蛋白的基因，提取玉米细胞RNA，获得cDNA后导入基因工程酵母菌细胞（产生的蔗糖酶不能分泌到胞外），利用选择培养基筛选到含有目的基因的酵母菌。下列叙述错误的是（     ） A. 应选取含有蔗糖转运蛋白的组织提取RNA B.RNA通过逆转录形成cDNA C. 选择培养基应以蔗糖为唯一碳源 D. 基因工程酵母菌无水解蔗糖的能力 28. 下列生物技术操作不会达成预期目标的是（     ） A. 将胰岛素基因表达质粒转入酵母菌，筛选获得产胰岛素工程菌 B. 将肠乳糖酶基因导入奶牛乳腺细胞，培育产低乳糖牛乳的奶牛 C. 将体外改造后能识别特定癌细胞的T细胞回输患者，进行癌症治疗 D. 将花青素代谢相关基因导入植物体细胞，获得具有特定花色的植株 29. 利用蛋白质工程对干扰素进行改造，可在一定条件下延长其保存时间。下列叙述错误的是（     ） A. 天然蛋白质合成的过程按照中心法则进行，蛋白质工程与之相反 B. 利用蛋白质工程对干扰素进行改造时，操作对象是干扰素 C. 经改造后的干扰素基因能通过工程菌的繁殖实现遗传 D. 对干扰素的改造遇到的最大难题是干扰素的高级结构十分复杂 30. 近年来，人工智能（AI）技术在蛋白质工程领域的应用取得了显著成果，不仅攻克了长期存在的蛋白质结构预测问题，还成功设计了多种新型功能蛋白，为多个领域带来了潜在的生物活性分子。下列说法正确的是（     ） A. 蛋白质工程需要改造蛋白质分子的所有氨基酸序列 B. 蛋白质工程的目标是改造现有蛋白质或创造新蛋白质 C.AI在蛋白质工程中的应用说明不再需要基因工程水平的操作 D.AI设计的蛋白质功能必然超过自然界中发现的任何蛋白质 二、解答题（除标记外，每空1分） 31.（14分）磷是维持生物体生长发育所必需的元素。植酸磷作为植物或饲料中磷的主要储存形式，由于动植物体内缺少水解植酸磷的植酸酶，不能很好地利用饲料及土壤中的植酸磷，造成了磷的浪费；同时，动物的高磷粪便排入环境，也造成土壤和水体污染，目前，产植酸酶的细菌种类有很多，如图表示科研人员从土壤中分离出植酸酶的A~E5种细菌菌株的操作过程。回答下列问题： （1）本实验用牛肉膏蛋白胨培养基，其中牛肉膏提供的主要营养是            （答出2种即可），培养细菌时需将pH调至            。 （2）常采用            法对培养基进行灭菌，灭菌的培养基需要倒平板的目的一是            （2分），二是避免培养基中的水分过快蒸发。 （3）图中采用的接种方法是            ，为了保证结果准确，一般选择菌落数在            的平板进行计数，统计的菌落数往往比活菌的实际数目            （填“高”或“低”），原因是            （2分）。 （4）经20℃恒温培养箱培养后，培养基中出现分解植酸磷的透明圈，图中透明圈最大的是            ，可挑取该菌落进行纯培养。在家畜饲料添加剂中使用植酸酶还需要考虑的因素有            （答出2点即可），另外添加植酸酶在一定程度上起改善环境的作用，原因是            （2分）。 32.（13分）（一）紫花苜蓿被誉为“牧草之王”，其营养价值位列各种牧草之首，但耐酸性差，青饲易造成家畜臌胀病；百脉根又称“落地苜蓿”，耐酸性强，因富含缩合单宁，饲喂时可防止家畜臌胀病的发生。某研究人员选择紫花苜蓿体细胞（基因型为Aaaa）和百脉根本体细胞（基因型为YYrr），设 计了下列技术路线，以获得抗膜胀病的新型苜蓿。回答下列问题： （1）杂种植株的培育所涉及的原理有            （2分）。植物体细胞杂交技术的研究在            （2分），培育植物新品种等方面，取得了巨大突破（意义）。 （2）①过程常利用的酶是            ；②过程融合后得到的杂种细胞含有            个染色体组。在培养基配制时，加入一定量蔗糖，蔗糖的作用是            （答出1点）。 （二）为降低人类乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC），过程如下图所示。 （3）动物细胞培养时，在培养瓶中动物细胞培养一段时间后停止增殖的原因，除了接触抑制外，还因为            （2分）（答出2点）。 （4）为了刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞，每隔2周用取自            的特定抗原注射小鼠1次，并注射3次。 （5）通过过程②得到的细胞还必须经过过程⑧            （2分）才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，单克隆抗体是ADC中的            （填“a”或“b”）部分。 33.（13分）紫色西红柿经基因编辑后可产生比普通西红柿多9倍的花青素（紫色），紫色花青素降低人类患心脏病、糖尿病的风险。如图是花青素合成酶基因（S）的cDNA（由某种生物发育某时期的mRNA经逆转录产生的互补DNA）和Ti质粒的结构示意图。请结合基因工程相关知识，回答下列问题。 （1）构建基因表达载体时，需用限制酶切割花青素合成酶基因的cDNA和Ti质粒。若要保证目的基因完整插入Ti质粒的T - DNA区域，且后续能正常表达，应选择的限制酶组合是            ，选择依据是                                                            （3分）。 （2）将花青素合成酶基因的cDNA导入Ti质粒时，需借助            酶连接，该酶的作用是                                          （2分）。 （3）基因表达载体中，启动子的作用是            ；标记基因（某抗生素抗性基因）的作用是                                          （2分）。 （4）若要检测花青素合成酶基因是否成功导入受体细胞，常用的技术是                        ；若要检测花青素合成酶基因是否在受体细胞中成功表达，可采用的方法有                        （2分）（答出1种即可）。 学科网（北京）股份有限公司 $ 秦皇岛市第三中学2025-2026学年度第二学期高二生物期末考试参考答案 一、选择题 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 答案 B B C B C D D C D B B D D A B 题号 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 答案 B C D A C D A C D B D D B B B 二、解答题 31.（14分） （1）碳源、氮源（或磷酸盐、维生素，答出2种即可）；中性或微碱性 （2）高压蒸汽灭菌；防止皿盖上的冷凝水滴落进入培养基，造成杂菌污染（2分） （3）稀释涂布平板法；30～300；低；当两个或多个活菌连在一起时，平板上只能观察到一个菌落（2分） （4）D；酶的最适温度、酶的耐酸性（或酶的稳定性、对家畜的安全性、生产成本等，答出2点即可）；植酸酶可提高饲料中植酸磷的利用率，减少动物粪便中磷的排放，降低水体和土壤的磷污染（2分） 32.（13分） （一） （1）细胞膜的流动性、植物细胞的全能性（2分）；克服远缘杂交不亲和的障碍（2分） （2）纤维素酶和果胶酶；6；提供碳源（或调节培养基渗透压，答出1点即可） （二） （3）培养基中的营养物质耗尽、代谢废物积累（或培养液pH改变，答出2点即可）（2分） （4）乳腺癌细胞（或肿瘤细胞/癌细胞） （5）克隆化培养和专一抗体检测（2分）；a 33.（13分） （1）BamH Ⅰ和Sal Ⅰ； ①目的基因两端分别有BamH Ⅰ和Sal Ⅰ的酶切位点，双酶切可获得完整的目的基因，不会破坏基因编码序列；②Ti质粒的T-DNA区域（启动子与终止子之间）含有这两种酶的酶切位点，可将目的基因插入启动子下游，保证正常转录；③两种酶产生不同的黏性末端，可避免目的基因和质粒自身环化、反向连接，保证插入方向正确（3分） （2）DNA连接（T4DNA连接）；催化两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，将目的基因与质粒骨架连接为重组DNA分子（2分） （3）RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动目的基因转录产生mRNA；鉴别受体细胞中是否导入目的基因，筛选出含有目的基因的受体细胞（2分） （4）DNA分子杂交技术（或PCR技术）；抗原-抗体杂交技术（或直接观察番茄果实颜色、检测花青素含量）（2分，答出1种即可） 学科网（北京）股份有限公司 $