精品解析：天津市南开中学2025-2026学年高二下学期7月期末考试生物试题

南开中学2025-2026学年度第二学期质量监测（二） 高二生物学试卷 考试时间：60分钟 本试卷分第I卷（选择题）和第Ⅱ卷两部分，共100分。考试结束后，将答题卡交回。 一、选择题（16题，共48分） 1. 实验是认识生物学现象及规律的重要途径之一。下列有关生物学实验及操作的叙述，正确的是（ ） 选项 实验名称 部分实验操作 A 探究细胞膜中磷脂分子的排布 用丙酮提取人的肝细胞中的脂质，在空气—水界面上铺成单分子层，测得单层分子的面积恰为肝细胞表面积的2倍 B 检测酵母菌细胞呼吸产生了酒精 向酵母菌培养液的滤液中加入溶有重铬酸钾的浓硫酸溶液 C 希尔的离体叶绿体悬浮液实验 向离体叶绿体悬浮液中加入铁盐或其他氧化剂，悬浮液中有H2O和CO2产生 D 探究温度对酶活性的影响实验 使用斐林试剂检测淀粉是否被分解产生还原糖 A. A B. B C. C D. D 2. 下列有关糖类和脂质的叙述，错误的是（ ） A. 葡萄糖、核糖、脱氧核糖是动植物细胞共有的单糖 B. 纤维素、淀粉和几丁质都是植物细胞特有的多糖 C. 人体摄入的淀粉不能直接被细胞吸收利用 D. 细胞中的糖类和脂质可以相互转化，但是二者之间的转化程度不同 3. 芸香糖苷酶能水解芸香糖苷类黄酮化合物生产槲皮素、柚皮素和橙皮素等活性物质，具有重要的应用前景。研究人员比较了芸香糖苷酶I、Ⅱ和Ⅲ的酶学性质，部分结果如表。下列叙述正确的是（　　） 芸香糖苷酶 最适温度(℃) 最适pH I 50 4.0 Ⅱ 70 4.0 Ⅲ 40 6.0 A. 酶I的反应温度升高20℃，其他条件不变，酶I与酶Ⅱ活性一致 B. 三种酶在最适的温度和pH条件下，催化底物的活性相同 C. 三种酶能水解芸香糖苷类黄酮化合物，表明它们具有专一性 D. 三种酶的空间结构会因环境温度和pH的改变而发生变化 4. 丁香酚是一种存在于植物中的天然苯丙素类化合物，可影响人胃壁细胞相关物质的运输，机制如图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 图中H+-K+-ATP酶仅具备蛋白质的催化功能 B. 若抑制线粒体的活动，则胃蛋白酶的分泌会停止 C. 图示H+和K+可通过同一载体运输，说明部分载体不具有特异性 D. 摄入适量的丁香酚可提高人的胃部消化能力 5. 某同学用甲、乙两组图示装置探究酵母菌细胞呼吸方式，甲组a、b、c三个阀门均开启，乙组只开启b、c，相关实验材料和试剂含量均充足。下列叙述错误的是（　　） A. 甲、乙两组均为实验组，两者形成相互对照 B. 两组装置右侧溶液颜色均可由蓝变绿再变黄 C. 取乙组酵母菌培养液加酸性重铬酸钾溶液，若变色说明一定产生了酒精 D. 若要减慢供氧，甲组装置左侧可换为等体积的3.5% FeCl3溶液和H2O2溶液 6. 丙谷二肽常被用作病人术后的必需营养注射液。为降低成本，实现工业化生产，研究人员在体外将聚磷酸激酶（PPK2）构建的ATP再生系统与氨基酸连接酶联用，可以催化丙氨酸和谷氨酰胺合成丙谷二肽。反应原理如图，其中无机聚磷酸盐（Pin）是由多个磷酸基团通过磷酸酐键连接而成的线性聚合物，含有较高的能量。下列叙述不正确的是（　　） A. 丙谷二肽的合成和ATP的合成均是吸能反应 B. 体外ATP再生系统合成ATP所需的能量来源与细胞内ATP的合成相同 C. DNA聚合酶和聚磷酸激酶一样都需要Mg2+激活 D. ATP水解掉两个磷酸基团之后的产物，是组成RNA的基本单位之一 7. 北极柳主要生长于2000～2800米的高山冻原上，是一种耐高寒植物。如图为20℃时北极柳植株光合作用和细胞呼吸过程中气体含量的变化（不考虑横坐标和纵坐标单位的具体表示形式，单位的表示方法相同，制造有机物的量用纵轴的气体量表示），且该植物光合作用和呼吸作用的最适温度分别为15℃和20℃。下列叙述正确的是（ ） A. 若曲线代表释放量，B点时叶肉细胞的释放量大于0 B. 若曲线代表吸收量，据图分析BC段限制光合作用的因素是浓度 C. 若曲线代表吸收量，温度降为15℃后，A点上移，B点右移 D. 若曲线代表释放量，光照强度为8时，植物产生的量为16 8. 细胞内囊泡释放的过程如图所示，囊泡上的V-SNARE蛋白与靶膜上的T-SNARE蛋白结合形成SNARE复合体，将囊泡拉近靶膜，使其与靶膜融合，随后将物质释放至相应位点。下列叙述正确的是（ ） A. 囊泡膜不参与构成生物膜系统 B. 图中的靶膜只能是质膜而不能是细胞器膜 C. 分泌蛋白运输的过程需要细胞骨架的协助 D. 图中T-SNARE与V-SNARE的结合是一个放能过程 9. 下图表示生物工程常用技术的流程，下列叙述错误的是（ ） A. 若上图表示用良种牛体细胞克隆牛的培育流程，要通过细胞培养得到大量的供体细胞1，需将动物组织块分散成单个细胞 B. 若上图表示利用胚胎工程繁殖试管牛的操作流程，若要进一步增大良种牛的繁殖数量可对胚胎4进行分割处理 C. 若上图表示单克隆抗体的制备流程：用来促进细胞1和细胞2融合的灭活病毒，需破坏其抗原结构 D. 若上图表示植物体细胞杂交流程，形成3的过程表示原生质体的融合过程，完成融合的标志是再生新的细胞壁 10. 传统发酵技术是人类利用微生物的智慧结晶，不仅丰富了饮食文化，也为现代发酵工业奠定了基础。相关叙述正确的是（　　） A. 酒精发酵一段时间后，打开瓶盖放出CO2，再拧紧瓶盖 B. 制作酸奶时，可将牛奶巴氏消毒后再接种乳酸菌在恒温箱中进行发酵 C. 泡菜制作过程中，常向水槽中补充水，目的是防止杂菌污染 D. 醋酸菌在缺少糖源和O2时可直接将乙醇转化为乙醛，再转变为乙酸 11. 藤茶（又名显齿蛇葡萄）是藤本植物，在中国作为民间流行的茶叶和传统草药已有1000多年的历史。藤茶提取物（AGE）具有抗炎、保肝、抗病毒、抗肿瘤等作用。通过组织培养可快速繁殖该植物，其具体操作过程如图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A. 取自同一株藤茶的细胞经组织培养获得的植株基因型可能不同 B. 过程③④表示再分化过程，且培养基中均含有生长素和细胞分裂素 C. 过程②获得的愈伤组织分裂能力强，可大量获得AGE，该过程体现了细胞的全能性 D. 经组织培养得到的试管苗需要经过一定的炼苗处理后才能移栽入土 12. PSMA是部分癌细胞高表达的膜蛋白，CD28是T细胞表面受体。双特异性抗体PSMA—CD28同时结合PSMA与CD28后，激活T细胞杀灭癌细胞，如图1所示。图2为双特异性抗体的制备过程部分示意图。下列分析正确的是（　　） A. 双特异性抗体结合T细胞和癌细胞的区域结构相同 B. 杂交瘤细胞XY产生的双特异性抗体PSMA—CD28杀灭癌细胞 C. 从脾脏中分离出产生抗PSMA和抗CD28抗体的B细胞与骨髓瘤细胞融合 D. 第二次筛选时需对杂交瘤细胞的培养液进行充分稀释 13. 下列关于现代生物技术及生物学实验的叙述，正确的是（ ） A. 琼脂糖凝胶电泳实验中，琼脂糖融化后应立即加入核酸染料以免凝胶凝固导致染料分布不均 B. DNA粗提取实验中，常利用DNA不溶于酒精的原理，来初步分离DNA与蛋白质 C. DNA粗提取实验中，因猪血获取方便，所以常用于提取DNA的材料也包括猪的成熟红细胞 D. 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白 14. 下列关于培养技术及应用的叙述，错误的是（　　） A. 若只接种无菌水的培养基出现菌落可证明该培养基已被污染 B. 细胞产物的工厂化生产很难提高单个红豆杉细胞中紫杉醇的含量 C. 原代培养的动物细胞必须用胰蛋白酶处理后，再收集进行分瓶培养才能继续增殖 D. 将特定基因或特定蛋白导入已分化的B细胞，可将其诱导形成iPS细胞用于疾病研究 阅读下列材料，完成下面小题。 科研人员通过切割pET-SEA质粒上SEA基因和终止子之间的部分序列，将猪流行性腹泻病毒的S基因插入，以构建pET-SEA-S重组质粒，并在大肠杆菌中高效表达SEA-S融合蛋白。 15. 目的基因导入受体细胞后，可用PCR技术筛选出成功导入pET-SEA-S融合表达质粒的细菌。下列各项所列引物用来进行筛选最合适的是（　　） A. 引物1和引物4 B. 引物3和引物4 C. 引物1和引物5 D. 引物2和引物5 16. 选择HPaⅠ酶和BamHⅠ酶对pET-SEA-S进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，电泳结果如图甲所示。若蛋白质中氨基酸残基的平均相对分子质量约为0.12kDa，将表达的SEA-S融合蛋白进行凝胶电泳，图乙中显示的条带应是（　　） A. Ⅰ B. Ⅱ C. Ⅲ D. Ⅳ 二、非选择题（4题，共52分） 17. 图1为几种物质跨膜方式示意图，其中I~IV表示细胞膜上的相关结构或物质，a~e表示不同的跨膜运输。图2为物质进出小肠上皮细胞的示意图。请据图回答下列问题： （1）图1中，Ⅰ表示的是细胞膜上的___________，它只容许与自身结合部位相适应的分子或离子通过，而且每次转运时都会发生___________的改变。Ⅲ___________(填写名称)与细胞表面的识别、细胞间信息传递等功能有密切关系。 （2）据图2可知，K+进入小肠上皮细胞和葡萄糖排出小肠上皮细胞的跨膜运输方式分别对应图1中的___________(填图中字母)所示的运输。影响图1中c这种物质跨膜运输方式速率的主要因素有___________和___________。 （3）图2中，小肠上皮细胞通过②同时运输Na+和K+，可以维持细胞内Na+___________(填“高浓度”或“低浓度”)状态。⑤为多肽进入小肠上皮细胞，该过程需要膜上___________的参与，更离不开膜上磷脂双分子层的流动性。 （4）人在饮酒时，酒精进入胃黏膜上皮细胞的跨膜运输方式与下列曲线相符合的是___________。 18. 图1是某植物的光合作用和细胞呼吸过程示意图。利用图2所示装置，在相同条件下分别将绿色植物E、F的叶片制成大小相同的“圆叶”，抽出空气，进行光合作用速率测定。图3是利用图2装置测得的数据绘制成的坐标图。据图回答下列问题： （1）图1中，①过程发生的场所是叶绿体的___________，可以为②过程提供___________，进行③过程的场所是___________。 （2）光合作用过程中若突然停止CO2供应，则短时间内C3的含量将___________(填“增加”、“减少”或“不变”)。 （3）光照强度为1klx，图2装置中放置植物E叶片进行测定时，液滴向___________移动，原因是___________。 （4）光照强度为6klx时，E植物叶片的O2释放量___________(填“大于”、“等于”或“小于”)F植物叶片，图2装置中E植物叶片比F植物叶片浮到液面所需时间___________。 （5）农业生产上为提高粮食产量，除控制好图3中的外界因素外，还需要适宜的___________和___________。 19. 植物甲抗旱性、抗病性强；植物乙分蘖能力强，结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如图所示。回答下列问题： （1）在自然条件下，植物甲和植物乙进行有性杂交不能产生后代，原因是两者之间存在__________。 （2）取植物甲和植物乙充分展开的嫩叶片，用酒精和次氯酸钠溶液对其进行________（填“消毒”或“灭菌”），每次处理后用_______冲洗叶片，去除残留于叶片上的药剂。 （3）过程①通过酶解法去除细胞壁获取原生质体，其中的混合酶液含有的酶是____________________。 （4）从杂种细胞培育成植物丙的过程称为____________________技术，其原理是____________________。 （5）科研人员对杂种植株丙是否同时具有植物甲和植物乙的优良性状进行了个体水平的鉴定。若获得的杂种植株丙在田间表现出抗旱性和抗病性，但分蘖能力却明显减弱，则从遗传物质的角度分析，可能的原因是________（答出1点）。 20. 天津独流老醋历史悠久、独具风味，其生产工艺流程如下图。 （1）在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度，这是因为酶_____。 （2）在酒精发酵阶段，需添加酵母菌。在操作过程中，发酵罐先通气，后密闭。通气能提高_____的数量，有利于密闭时获得更多的酒精产物。 （3）在醋酸发酵阶段，独流老醋采用独特的分层固体发酵法，发酵30天。工艺如下。 ①发酵过程中，定期取样测定醋酸杆菌密度变化，趋势如右图。据图分析，与颠倒前相比，B层醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是_____。 ②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中，发酵缸中_____层醋醅有利于乳酸菌繁殖，积累乳酸。 ③成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少，主要原因是发酵后期营养物质消耗等环境因素的变化，加剧了不同种类乳酸菌的_____，淘汰了部分乳酸菌种类。 21. 科学研究表明t-PA蛋白能降解血栓，是脑血栓患者的特效药，但其促进血栓溶解的特异性不高，若将t-PA蛋白第84位的半胱氨酸换成丝氨酸（密码子是UCU），获得改良的tPA蛋白，其溶解血栓的效率明显提升。图1和图2为改造t-PA蛋白基因及构建表达载体的过程。 （1）在PCR技术中高温变性的目的是________________________，图1中重叠延伸时________（填“是”或“否"）需要引物。 （2）t-PA蛋白第84位的半胱氨酸对应的基因模板链碱基序列是ACA，图1中黑点表示突变位点的碱基，若要得到改良t-PA蛋白，则引物b中该位点的碱基是________。 （3）若图1得到的改良t-PA蛋白基因非模板链序列为5'-TGAACGCTA…（中间序列）…GTCGACTCG-3'。为了便于将扩增后的基因和质粒pCLY11成功构建成重组质粒，请结合图2，写出用于PCR3扩增的一对引物的碱基序列：5'________________________3'和5'________________________3'（要求：至少写出10个碱基），PCR的产物一般通过________________来鉴定。 （4）运用乳房生物反应器可以从转基因牛的乳汁中获得t-PA改良蛋白，具体流程如图3。 过程②运用的具体方法为___________；④过程前需取___________（填部位）的细胞进行性别鉴定。若改用膀胱生物反应器在尿液中获得t-PA改良蛋白，在构建基因表达载体时，需要添加______________________的启动子。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 南开中学2025-2026学年度第二学期质量监测（二） 高二生物学试卷 考试时间：60分钟 本试卷分第I卷（选择题）和第Ⅱ卷两部分，共100分。考试结束后，将答题卡交回。 一、选择题（16题，共48分） 1. 实验是认识生物学现象及规律的重要途径之一。下列有关生物学实验及操作的叙述，正确的是（ ） 选项 实验名称 部分实验操作 A 探究细胞膜中磷脂分子的排布 用丙酮提取人的肝细胞中的脂质，在空气—水界面上铺成单分子层，测得单层分子的面积恰为肝细胞表面积的2倍 B 检测酵母菌细胞呼吸产生了酒精 向酵母菌培养液的滤液中加入溶有重铬酸钾的浓硫酸溶液 C 希尔的离体叶绿体悬浮液实验 向离体叶绿体悬浮液中加入铁盐或其他氧化剂，悬浮液中有H2O和CO2产生 D 探究温度对酶活性的影响实验 使用斐林试剂检测淀粉是否被分解产生还原糖 A. A B. B C. C D. D 【答案】B 【解析】 【详解】A、人的肝细胞含有核膜和多种细胞器膜，提取的脂质除细胞膜的磷脂外，还包含核膜、细胞器膜中的脂质，因此脂质单分子层面积会大于肝细胞表面积的2倍，A错误； B、酒精在酸性条件下可与重铬酸钾发生灰绿色显色反应，检测酵母菌呼吸产生的酒精时，需向滤液中加入溶有重铬酸钾的浓硫酸溶液，B正确； C、希尔反应是离体叶绿体在光照、有氧化剂存在的条件下，分解水释放氧气的反应，反应过程不需要CO₂，也不会产生CO₂，C错误； D、斐林试剂检测还原糖需要50~65℃水浴加热，会改变实验的自变量（预设温度），干扰实验结果，因此探究温度对酶活性的影响实验不能用斐林试剂检测，D错误。 2. 下列有关糖类和脂质的叙述，错误的是（ ） A. 葡萄糖、核糖、脱氧核糖是动植物细胞共有的单糖 B. 纤维素、淀粉和几丁质都是植物细胞特有的多糖 C. 人体摄入的淀粉不能直接被细胞吸收利用 D. 细胞中的糖类和脂质可以相互转化，但是二者之间的转化程度不同 【答案】B 【解析】 【详解】A、葡萄糖是细胞生命活动的主要能源物质，核糖、脱氧核糖分别是RNA、DNA的组成成分，三者在动植物细胞中普遍存在，A正确； B、纤维素、淀粉是植物细胞特有的多糖，但几丁质存在于甲壳类动物和昆虫的外骨骼、真菌细胞壁中，不属于植物细胞特有的多糖，B错误； C、淀粉是生物大分子，人体摄入的淀粉需要经消化分解为葡萄糖后才能被细胞吸收利用，不能直接被细胞吸收，C正确； D、细胞中的糖类和脂质可以相互转化，糖类可大量转化为脂肪，但脂肪不能大量转化为糖类，二者转化程度存在明显差异，D正确。 3. 芸香糖苷酶能水解芸香糖苷类黄酮化合物生产槲皮素、柚皮素和橙皮素等活性物质，具有重要的应用前景。研究人员比较了芸香糖苷酶I、Ⅱ和Ⅲ的酶学性质，部分结果如表。下列叙述正确的是（　　） 芸香糖苷酶 最适温度(℃) 最适pH I 50 4.0 Ⅱ 70 4.0 Ⅲ 40 6.0 A. 酶I的反应温度升高20℃，其他条件不变，酶I与酶Ⅱ活性一致 B. 三种酶在最适的温度和pH条件下，催化底物的活性相同 C. 三种酶能水解芸香糖苷类黄酮化合物，表明它们具有专一性 D. 三种酶的空间结构会因环境温度和pH的改变而发生变化 【答案】D 【解析】 【详解】A、酶的活性受温度影响，在最适温度前，随温度升高酶活性增强；超过最适温度，随温度升高酶活性下降。酶I的最适温度为50℃，升高20℃至70℃时，超过其最适温度，酶活性会因高温变性而下降；而酶Ⅱ的最适温度为70℃，此时活性最高。两者活性不可能一致，A错误； B、最适条件仅表明此时酶活性最高，但不同酶在最适条件下的催化效率（即酶活性）可能因酶的种类和结构差异而不同，B错误； C、酶的专一性是指一种酶只能催化一种或一类化学反应。三种酶均能水解同一类底物（芸香糖苷类黄酮化合物），体现的是酶的催化作用具有共性，而非专一性（专一性强调对特定底物的催化），C错误； D、酶的活性受温度和pH的影响，温度和pH的变化会影响酶的空间结构，进而影响酶的活性。当环境温度或pH偏离最适条件时，酶的空间结构可能发生改变，甚至导致酶变性失活，D正确。 故选D。 4. 丁香酚是一种存在于植物中的天然苯丙素类化合物，可影响人胃壁细胞相关物质的运输，机制如图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 图中H+-K+-ATP酶仅具备蛋白质的催化功能 B. 若抑制线粒体的活动，则胃蛋白酶的分泌会停止 C. 图示H+和K+可通过同一载体运输，说明部分载体不具有特异性 D. 摄入适量的丁香酚可提高人的胃部消化能力 【答案】D 【解析】 【详解】A、图中H+-K+-ATP酶体现出的蛋白质的功能为催化和运输，A错误； B、若抑制线粒体的活动，则胃蛋白酶可能会通过消耗细胞质基质中呼吸作用产生的ATP继续分泌，B错误； C、H+-K+-ATP酶只运输H+和K+，说明载体具有特异性，C错误； D、由图可知，丁香酚能促进H+的分泌，使胃液酸性增强，而胃蛋白酶在酸性条件下活性更高，所以摄入适量的丁香酚可提高人的胃部消化能力，D正确。 故选D。 5. 某同学用甲、乙两组图示装置探究酵母菌细胞呼吸方式，甲组a、b、c三个阀门均开启，乙组只开启b、c，相关实验材料和试剂含量均充足。下列叙述错误的是（　　） A. 甲、乙两组均为实验组，两者形成相互对照 B. 两组装置右侧溶液颜色均可由蓝变绿再变黄 C. 取乙组酵母菌培养液加酸性重铬酸钾溶液，若变色说明一定产生了酒精 D. 若要减慢供氧，甲组装置左侧可换为等体积的3.5% FeCl3溶液和H2O2溶液 【答案】C 【解析】 【详解】A、本实验探究在有氧和无氧条件下酵母菌细胞呼吸的情况，为对比实验，因此甲、乙两组均为实验组，形成相互对照，A正确； B、酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸均有CO2生成，溴麝香草酚蓝溶液可以检测是否产生CO2，因此无论装置左阀是否打开，右边溶液中均发生由蓝变绿再变黄的颜色变化，B正确； C、本实验中酵母菌培养液中的葡萄糖是足量的，由于葡萄糖也能与酸性重铬酸钾发生颜色反应，因此取培养液与酸性重铬酸钾溶液反应，若变色不能说明产生酒精，C错误； D、肝脏研磨液中含有H2O2酶，其催化效率高于FeCl3溶液，因此左边注射器换为等体积的3.5%FeCl3和H2O2溶液放氧气会更缓慢，D正确。 6. 丙谷二肽常被用作病人术后的必需营养注射液。为降低成本，实现工业化生产，研究人员在体外将聚磷酸激酶（PPK2）构建的ATP再生系统与氨基酸连接酶联用，可以催化丙氨酸和谷氨酰胺合成丙谷二肽。反应原理如图，其中无机聚磷酸盐（Pin）是由多个磷酸基团通过磷酸酐键连接而成的线性聚合物，含有较高的能量。下列叙述不正确的是（　　） A. 丙谷二肽的合成和ATP的合成均是吸能反应 B. 体外ATP再生系统合成ATP所需的能量来源与细胞内ATP的合成相同 C. DNA聚合酶和聚磷酸激酶一样都需要Mg2+激活 D. ATP水解掉两个磷酸基团之后的产物，是组成RNA的基本单位之一 【答案】B 【解析】 【详解】A、从图中反应原理来看，丙氨酸和谷氨酰胺合成丙谷二肽需要消耗ATP，说明是吸能反应，ATP的合成是将无机物聚磷酸盐（Pin）中的能量储存到ATP中，也是吸能反应，A正确； B、细胞内ATP的合成能量来源主要是呼吸作用（有机物氧化分解释放能量）和光合作用（光能转化） ，而体外ATP再生系统合成ATP的能量来自无机聚磷酸盐（Pin）中磷酸酐键断裂释放的能量，二者能量来源不同，B错误； C、已知聚磷酸激酶（PPK2）需要Mg2+激活，在许多生化反应中，Mg2+常作为一些酶的激活剂，DNA聚合酶在催化DNA合成时也需要Mg2+激活，C正确； D、ATP的结构简式为A-P～P～P，水解掉两个磷酸基团后得到A-P，即腺嘌呤核糖核苷酸，它是组成RNA的基本单位之一，D正确。 故选B。 7. 北极柳主要生长于2000～2800米的高山冻原上，是一种耐高寒植物。如图为20℃时北极柳植株光合作用和细胞呼吸过程中气体含量的变化（不考虑横坐标和纵坐标单位的具体表示形式，单位的表示方法相同，制造有机物的量用纵轴的气体量表示），且该植物光合作用和呼吸作用的最适温度分别为15℃和20℃。下列叙述正确的是（ ） A. 若曲线代表释放量，B点时叶肉细胞的释放量大于0 B. 若曲线代表吸收量，据图分析BC段限制光合作用的因素是浓度 C. 若曲线代表吸收量，温度降为15℃后，A点上移，B点右移 D. 若曲线代表释放量，光照强度为8时，植物产生的量为16 【答案】A 【解析】 【详解】A、图示曲线为北极柳植株的光合作用、呼吸作用过程中相关气体含量变化曲线，B点时整个植株O2释放量为0，但叶肉细胞的光合作用大于其自身的呼吸作用，故叶肉细胞的O2释放量大于0，A正确； B、BC段随光照强度增大，CO2的吸收量也在增大，所以BC段限制光合作用的因素是光照强度，B错误； C、图示为在呼吸作用最适温度测得的曲线，温度降为15℃后，呼吸作用降低，光合作用增强。故A点上移，B点左移，C错误； D、植物产生的O2量指总光合作用，其值为净光合作用+呼吸作用，故为8+4=12，D错误。 故选A。 8. 细胞内囊泡释放的过程如图所示，囊泡上的V-SNARE蛋白与靶膜上的T-SNARE蛋白结合形成SNARE复合体，将囊泡拉近靶膜，使其与靶膜融合，随后将物质释放至相应位点。下列叙述正确的是（ ） A. 囊泡膜不参与构成生物膜系统 B. 图中的靶膜只能是质膜而不能是细胞器膜 C. 分泌蛋白运输的过程需要细胞骨架的协助 D. 图中T-SNARE与V-SNARE的结合是一个放能过程 【答案】C 【解析】 【详解】A、生物膜系统由细胞膜、细胞器膜、核膜以及细胞内的囊泡膜等结构共同构成，囊泡膜属于生物膜系统的组分，A错误； B、靶膜既可以是质膜，也可以是细胞器膜，例如内质网形成的囊泡可与高尔基体膜融合，此时高尔基体膜即为靶膜，B错误； C、细胞骨架是由蛋白质纤维组成的网架结构，可参与细胞内物质运输、囊泡移动等生命活动，分泌蛋白运输过程中囊泡的移动需要细胞骨架的协助，C正确； D、由图可知，结合过程中GTP水解为GDP并释放能量，说明T-SNARE与V-SNARE的结合是需要消耗能量的吸能过程，并非放能过程，D错误。 9. 下图表示生物工程常用技术的流程，下列叙述错误的是（ ） A. 若上图表示用良种牛体细胞克隆牛的培育流程，要通过细胞培养得到大量的供体细胞1，需将动物组织块分散成单个细胞 B. 若上图表示利用胚胎工程繁殖试管牛的操作流程，若要进一步增大良种牛的繁殖数量可对胚胎4进行分割处理 C. 若上图表示单克隆抗体的制备流程：用来促进细胞1和细胞2融合的灭活病毒，需破坏其抗原结构 D. 若上图表示植物体细胞杂交流程，形成3的过程表示原生质体的融合过程，完成融合的标志是再生新的细胞壁 【答案】C 【解析】 【详解】A、动物细胞培养时，需先用胰蛋白酶等将动物组织块分散为单个细胞，解除接触抑制，才能获得大量供体细胞，A正确； B、试管牛培育流程中，胚胎4为早期胚胎，对其进行胚胎分割可获得多个基因型相同的胚胎，进一步增大良种牛的繁殖数量，B正确； C、灭活病毒诱导动物细胞融合的原理是保留病毒的抗原结构，使其可以介导细胞膜融合，仅破坏病毒的感染性，若破坏其抗原结构则无法促进细胞融合，C错误； D、植物体细胞杂交流程中，3是融合的原生质体，原生质体完成融合的标志是再生出新的细胞壁，D正确。 10. 传统发酵技术是人类利用微生物的智慧结晶，不仅丰富了饮食文化，也为现代发酵工业奠定了基础。相关叙述正确的是（　　） A. 酒精发酵一段时间后，打开瓶盖放出CO2，再拧紧瓶盖 B. 制作酸奶时，可将牛奶巴氏消毒后再接种乳酸菌在恒温箱中进行发酵 C. 泡菜制作过程中，常向水槽中补充水，目的是防止杂菌污染 D. 醋酸菌在缺少糖源和O2时可直接将乙醇转化为乙醛，再转变为乙酸 【答案】B 【解析】 【详解】A、酒精发酵依赖酵母菌的无氧呼吸，若打开瓶盖释放CO₂，会使杂菌和氧气进入发酵瓶，杂菌会污染发酵液，氧气会抑制酵母菌的无氧呼吸，正确操作应为拧松瓶盖放气，A错误； B、制作酸奶时，对牛奶进行巴氏消毒可杀死杂菌且不会破坏牛奶的营养成分，之后接种乳酸菌，在恒温箱中进行厌氧发酵即可产生乳酸制成酸奶，B正确； C、泡菜制作时向水槽补水的主要目的是营造坛内的无氧环境，满足乳酸菌厌氧代谢的需求，不是主要为了防止杂菌污染，C错误； D、醋酸菌是好氧型微生物，代谢全程需要氧气，缺少O₂时醋酸菌无法存活，仅在氧气充足、缺少糖源的条件下，醋酸菌才能将乙醇转化为乙醛，再转变为乙酸，D错误。 故选B。 11. 藤茶（又名显齿蛇葡萄）是藤本植物，在中国作为民间流行的茶叶和传统草药已有1000多年的历史。藤茶提取物（AGE）具有抗炎、保肝、抗病毒、抗肿瘤等作用。通过组织培养可快速繁殖该植物，其具体操作过程如图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A. 取自同一株藤茶的细胞经组织培养获得的植株基因型可能不同 B. 过程③④表示再分化过程，且培养基中均含有生长素和细胞分裂素 C. 过程②获得的愈伤组织分裂能力强，可大量获得AGE，该过程体现了细胞的全能性 D. 经组织培养得到的试管苗需要经过一定的炼苗处理后才能移栽入土 【答案】C 【解析】 【详解】A、若取自同一株藤茶的细胞包含体细胞和生殖细胞（如花粉），或培养过程中发生基因突变、染色体变异等可遗传变异，经组织培养获得的植株基因型可能不同，A正确； B、过程③诱导生芽、④诱导生根都属于愈伤组织再分化的过程，植物组织培养的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素，通过调整二者的比例可诱导不同的分化方向，B正确； C、细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性，过程②仅得到愈伤组织，未发育为完整植株或分化成其他各种细胞，所以没有体现细胞的全能性，C错误； D、试管苗长期生长在无菌、高湿度、弱光照的人工培养环境中，对外界自然环境的适应能力差，经过炼苗处理后再移栽可提高成活率，D正确。 12. PSMA是部分癌细胞高表达的膜蛋白，CD28是T细胞表面受体。双特异性抗体PSMA—CD28同时结合PSMA与CD28后，激活T细胞杀灭癌细胞，如图1所示。图2为双特异性抗体的制备过程部分示意图。下列分析正确的是（　　） A. 双特异性抗体结合T细胞和癌细胞的区域结构相同 B. 杂交瘤细胞XY产生的双特异性抗体PSMA—CD28杀灭癌细胞 C. 从脾脏中分离出产生抗PSMA和抗CD28抗体的B细胞与骨髓瘤细胞融合 D. 第二次筛选时需对杂交瘤细胞的培养液进行充分稀释 【答案】D 【解析】 【详解】A、双特异性抗体PSMA—CD28需同时结合癌细胞表面的PSMA和T细胞表面的CD28两种不同抗原，因此结合这两种细胞的区域（抗原结合位点）结构必然不同，A错误； B、根据题干和图1可知，该双特异性抗体的作用是桥接癌细胞和T细胞，通过结合CD28激活T细胞，由活化的T细胞发挥细胞免疫功能杀灭癌细胞，而非抗体直接杀灭，B错误； C、从脾脏中分离的B细胞具有“单抗”特性：某一个B细胞只能产生抗PSMA抗体，或只能产生抗CD28抗体，无法直接分离出“同时产生两种抗体”的B细胞。制备双特异性抗体的杂交瘤细胞，需通过后续的细胞融合与筛选，将分别产生两种抗体的杂交瘤细胞（或B细胞）进一步融合获得，C错误； D、对杂交瘤细胞的培养液进行充分稀释，可使细胞分散成单个存在，再接种到培养板中培养，最终筛选出由单个细胞增殖形成、能分泌目标抗体的单克隆细胞株，D正确。 故选D。 13. 下列关于现代生物技术及生物学实验的叙述，正确的是（ ） A. 琼脂糖凝胶电泳实验中，琼脂糖融化后应立即加入核酸染料以免凝胶凝固导致染料分布不均 B. DNA粗提取实验中，常利用DNA不溶于酒精的原理，来初步分离DNA与蛋白质 C. DNA粗提取实验中，因猪血获取方便，所以常用于提取DNA的材料也包括猪的成熟红细胞 D. 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白 【答案】B 【解析】 【详解】A、琼脂糖凝胶电泳实验中，琼脂糖融化后需要冷却至60℃左右再加入核酸染料，立即加入时温度过高会破坏染料活性，影响染色效果，A错误； B、DNA粗提取实验中，DNA不溶于酒精，而蛋白质等杂质可溶于酒精，因此加入冷却的酒精可使DNA析出，实现DNA和蛋白质的初步分离，B正确； C、猪是哺乳动物，其成熟红细胞没有细胞核和细胞器，几乎不含DNA，不能作为提取DNA的实验材料，C错误； D、单细胞蛋白指的是微生物菌体本身，并不是从微生物细胞中提取的产物，D错误。 14. 下列关于培养技术及应用的叙述，错误的是（　　） A. 若只接种无菌水的培养基出现菌落可证明该培养基已被污染 B. 细胞产物的工厂化生产很难提高单个红豆杉细胞中紫杉醇的含量 C. 原代培养的动物细胞必须用胰蛋白酶处理后，再收集进行分瓶培养才能继续增殖 D. 将特定基因或特定蛋白导入已分化的B细胞，可将其诱导形成iPS细胞用于疾病研究 【答案】C 【解析】 【详解】A、检测所配制的酵母菌固体培养基是否被污染，需要拿一个空白平板接种无菌水，若接种无菌水的平板上有菌落生成，说明培养基灭菌不彻底或被污染，A正确； B、紫杉醇为植物细胞产生的次生代谢产物，单个细胞产生紫杉醇含量的多少由基因决定，细胞产物的工厂化生产主要是利用细胞增殖原理，提高紫杉醇的含量，促进细胞生长的培养条件并不能提高单个红豆杉细胞中紫杉醇的含量，B正确； C、在动物细胞培养中，悬浮培养的细胞不需要使用胰蛋白酶处理，直接用离心法收集即可，C错误； D、将特定基因或相应蛋白导入已分化的B细胞，可诱导B细胞形成诱导多能干细胞（iPS细胞），该技术可用于镰状细胞贫血、阿尔茨海默症等疾病的研究，D正确。 阅读下列材料，完成下面小题。 科研人员通过切割pET-SEA质粒上SEA基因和终止子之间的部分序列，将猪流行性腹泻病毒的S基因插入，以构建pET-SEA-S重组质粒，并在大肠杆菌中高效表达SEA-S融合蛋白。 15. 目的基因导入受体细胞后，可用PCR技术筛选出成功导入pET-SEA-S融合表达质粒的细菌。下列各项所列引物用来进行筛选最合适的是（　　） A. 引物1和引物4 B. 引物3和引物4 C. 引物1和引物5 D. 引物2和引物5 16. 选择HPaⅠ酶和BamHⅠ酶对pET-SEA-S进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，电泳结果如图甲所示。若蛋白质中氨基酸残基的平均相对分子质量约为0.12kDa，将表达的SEA-S融合蛋白进行凝胶电泳，图乙中显示的条带应是（　　） A. Ⅰ B. Ⅱ C. Ⅲ D. Ⅳ 【答案】15. A 16. B 【解析】 【分析】PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，利用的原理是DNA复制，需要条件有模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶），过程包括：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。 【15题详解】 据题干信息可知，需要用PCR技术筛选出含有pET-SEA-S融合表达质粒的细菌，即扩增出的DNA片段含有SEA基因和S基因，故选引物1和引物4，A正确，BCD错误。 故选A。 【16题详解】 选择HPaⅠ酶和BamHⅠ酶对pET-SEA-S进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，电泳结果如图甲所示，1200bp（大约）和5100bp（大约）两个片段，SEA和S基因融合片段小，故为大小1200bp，1bp表示一个碱基对，经转录翻译后，氨基酸个数为400个，若蛋白质中氨基酸残基的平均相对分子质量约为0.12kDa，则该蛋白质的分子量为400×0.12=48kDa，故对应图乙中的条带Ⅱ，B正确，ACD错误。 故选B。 二、非选择题（4题，共52分） 17. 图1为几种物质跨膜方式示意图，其中I~IV表示细胞膜上的相关结构或物质，a~e表示不同的跨膜运输。图2为物质进出小肠上皮细胞的示意图。请据图回答下列问题： （1）图1中，Ⅰ表示的是细胞膜上的___________，它只容许与自身结合部位相适应的分子或离子通过，而且每次转运时都会发生___________的改变。Ⅲ___________(填写名称)与细胞表面的识别、细胞间信息传递等功能有密切关系。 （2）据图2可知，K+进入小肠上皮细胞和葡萄糖排出小肠上皮细胞的跨膜运输方式分别对应图1中的___________(填图中字母)所示的运输。影响图1中c这种物质跨膜运输方式速率的主要因素有___________和___________。 （3）图2中，小肠上皮细胞通过②同时运输Na+和K+，可以维持细胞内Na+___________(填“高浓度”或“低浓度”)状态。⑤为多肽进入小肠上皮细胞，该过程需要膜上___________的参与，更离不开膜上磷脂双分子层的流动性。 （4）人在饮酒时，酒精进入胃黏膜上皮细胞的跨膜运输方式与下列曲线相符合的是___________。 【答案】（1） ①. 载体蛋白 ②. 自身构象 ③. 糖被 （2） ①. a、d ②. 膜内外物质浓度梯度的大小 ③. 通道蛋白的数量 （3） ①. 低浓度 ②. 蛋白质 （4）AC 【解析】 【小问1详解】 图1中，Ⅰ参与主动运输，表示载体蛋白，转运时会发生自身构象的改变。Ⅲ糖被可以参与形成糖蛋白、糖脂，与细胞表面的识别、细胞间信息传递等功能有密切关系。 【小问2详解】 图1中，根据Ⅲ糖被的位置可知，上侧为细胞外侧，下侧为细胞内，由图2可知，K+进入小肠上皮细胞为逆浓度梯度的主动运输，对应图1的a；葡萄糖排出小肠上皮细胞为顺浓度梯度的协助扩散，对应图1的d。图1中c为通过通道蛋白的协助扩散，受膜内外物质浓度梯度的大小和通道蛋白的数量的影响。 【小问3详解】 图2中，小肠上皮细胞通过②主动运输同时运输Na+（运出）和K+（运入），可以维持细胞内Na+低浓度状态，维持细胞内外的浓度差。⑤为多肽通过胞吞进入细胞，需要蛋白质的参与。 【小问4详解】 酒精进入小肠黏膜细胞的方式为自由扩散，运输速率与物质浓度呈正相关，与氧气浓度无关，对应AC。 18. 图1是某植物的光合作用和细胞呼吸过程示意图。利用图2所示装置，在相同条件下分别将绿色植物E、F的叶片制成大小相同的“圆叶”，抽出空气，进行光合作用速率测定。图3是利用图2装置测得的数据绘制成的坐标图。据图回答下列问题： （1）图1中，①过程发生的场所是叶绿体的___________，可以为②过程提供___________，进行③过程的场所是___________。 （2）光合作用过程中若突然停止CO2供应，则短时间内C3的含量将___________(填“增加”、“减少”或“不变”)。 （3）光照强度为1klx，图2装置中放置植物E叶片进行测定时，液滴向___________移动，原因是___________。 （4）光照强度为6klx时，E植物叶片的O2释放量___________(填“大于”、“等于”或“小于”)F植物叶片，图2装置中E植物叶片比F植物叶片浮到液面所需时间___________。 （5）农业生产上为提高粮食产量，除控制好图3中的外界因素外，还需要适宜的___________和___________。 【答案】（1） ①. 类囊体薄膜(或基粒) ②. NADPH(或还原型辅酶Ⅱ)、ATP ③. 线粒体内膜 （2）减少 （3） ①. 左 ②. 光照强度为1klx，植物E叶片O2释放量小于0，需要从容器中吸收氧气，装置内气压减小，液滴向左移动 （4） ①. 大于 ②. 短 （5） ①. 温度 ②. CO2浓度 【解析】 【小问1详解】 图1中①是光合作用的光反应阶段，场所是叶绿体的类囊体薄膜；光反应为②暗反应提供ATP和NADPH（还原氢）；③是有氧呼吸第三阶段，发生场所为线粒体内膜。 【小问2详解】 突然停止CO2供应， CO2固定生成C3的过程停止，而短时间内C3的还原过程仍正常进行，因此C3含量减少。 【小问3详解】 图3中CO2释放量代表净光合速率，光照强度为1klx时，植物E的净光合速率小于0，即呼吸速率大于光合速率：装置中CO2缓冲液维持CO2浓度稳定，呼吸消耗O2后装置内气体减少、压强下降，因此液滴向左移动。 【小问4详解】 光照强度为6klx时，从图3可知，E叶片的O2释放量大于F叶片；E叶片产氧更快，圆叶片积累氧气获得浮力更快，因此浮到液面所需时间更短。 【小问5详解】 图3探究的外界因素是光照强度，影响光合作用的其他外界因素还有温度（影响酶活性）、CO2 浓度，农业生产需要提供适宜的温度和CO2浓度提高产量。 19. 植物甲抗旱性、抗病性强；植物乙分蘖能力强，结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如图所示。回答下列问题： （1）在自然条件下，植物甲和植物乙进行有性杂交不能产生后代，原因是两者之间存在__________。 （2）取植物甲和植物乙充分展开的嫩叶片，用酒精和次氯酸钠溶液对其进行________（填“消毒”或“灭菌”），每次处理后用_______冲洗叶片，去除残留于叶片上的药剂。 （3）过程①通过酶解法去除细胞壁获取原生质体，其中的混合酶液含有的酶是____________________。 （4）从杂种细胞培育成植物丙的过程称为____________________技术，其原理是____________________。 （5）科研人员对杂种植株丙是否同时具有植物甲和植物乙的优良性状进行了个体水平的鉴定。若获得的杂种植株丙在田间表现出抗旱性和抗病性，但分蘖能力却明显减弱，则从遗传物质的角度分析，可能的原因是________（答出1点）。 【答案】（1）生殖隔离 （2） ①. 消毒     ②. 无菌水 （3）纤维素酶、果胶酶 （4） ①. 植物组织培养 ②. 植物细胞的全能性 （5）植物乙控制分蘖能力的基因在融合过程中丢失（或染色体片段缺失、基因沉默、杂种植株核型不稳定等） 【解析】 【小问1详解】 在自然条件下，植物甲和植物乙进行有性杂交之所以不能产生后代，其原因在于植物甲和植物乙之间存在生殖隔离。 【小问2详解】 取植物甲和植物乙充分展开的嫩叶片，用酒精和次氯酸钠溶液对其进行消毒处理，每次处理后需要用无菌水冲洗叶片，去除残留于叶片上的药剂。 【小问3详解】 植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，过程①通过酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除甲和乙的细胞壁获得原生质体，所以其中的混合酶液含有的酶是纤维素酶和果胶酶。 【小问4详解】 将杂种细胞培育为完整植株，依赖植物组织培养技术，该技术的原理是：植物细胞的全能性。 【小问5详解】 杂种植株丙具有的抗旱性和抗病性是植物甲特点，而分蘖能力强是植物乙的特点，杂种植株丙分蘖能力明显减弱，从遗传物质的角度分析，其可能是由于：植物乙控制分蘖能力的基因在融合过程中丢失（或染色体片段缺失、基因沉默、杂种植株核型不稳定等）。 20. 天津独流老醋历史悠久、独具风味，其生产工艺流程如下图。 （1）在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度，这是因为酶_____。 （2）在酒精发酵阶段，需添加酵母菌。在操作过程中，发酵罐先通气，后密闭。通气能提高_____的数量，有利于密闭时获得更多的酒精产物。 （3）在醋酸发酵阶段，独流老醋采用独特的分层固体发酵法，发酵30天。工艺如下。 ①发酵过程中，定期取样测定醋酸杆菌密度变化，趋势如右图。据图分析，与颠倒前相比，B层醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是_____。 ②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中，发酵缸中_____层醋醅有利于乳酸菌繁殖，积累乳酸。 ③成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少，主要原因是发酵后期营养物质消耗等环境因素的变化，加剧了不同种类乳酸菌的_____，淘汰了部分乳酸菌种类。 【答案】（1）在最适温度条件下催化能力最强 （2）酵母菌 （3） ①. 氧气、营养物质、pH ②. 颠倒前的B层和颠倒后的A（或不翻动，或下） ③. 种间竞争（或竞争） 【解析】 【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型；果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【小问1详解】 在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度，原因是酶在最适温度条件下催化能力最强。 【小问2详解】 通气阶段可促进酵母菌的有氧呼吸，为酵母菌的繁殖提供能量，从而增加酵母菌数量，有利于密闭时获得更多的酒精产物。 【小问3详解】 ①A、B层颠倒后，B层醋酸杆菌获得的氧气较为充足，环境中的营养物质和pH也影响其种群密度。 ②乳酸菌为厌氧菌，颠倒前的B层和颠倒后的A层有利于乳酸菌的繁殖。 ③发酵后期营养物质消耗等环境因素的变化，加剧了不同种类乳酸菌的竞争，淘汰了部分乳酸菌种类使成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少。 21. 科学研究表明t-PA蛋白能降解血栓，是脑血栓患者的特效药，但其促进血栓溶解的特异性不高，若将t-PA蛋白第84位的半胱氨酸换成丝氨酸（密码子是UCU），获得改良的tPA蛋白，其溶解血栓的效率明显提升。图1和图2为改造t-PA蛋白基因及构建表达载体的过程。 （1）在PCR技术中高温变性的目的是________________________，图1中重叠延伸时________（填“是”或“否"）需要引物。 （2）t-PA蛋白第84位的半胱氨酸对应的基因模板链碱基序列是ACA，图1中黑点表示突变位点的碱基，若要得到改良t-PA蛋白，则引物b中该位点的碱基是________。 （3）若图1得到的改良t-PA蛋白基因非模板链序列为5'-TGAACGCTA…（中间序列）…GTCGACTCG-3'。为了便于将扩增后的基因和质粒pCLY11成功构建成重组质粒，请结合图2，写出用于PCR3扩增的一对引物的碱基序列：5'________________________3'和5'________________________3'（要求：至少写出10个碱基），PCR的产物一般通过________________来鉴定。 （4）运用乳房生物反应器可以从转基因牛的乳汁中获得t-PA改良蛋白，具体流程如图3。 过程②运用的具体方法为___________；④过程前需取___________（填部位）的细胞进行性别鉴定。若改用膀胱生物反应器在尿液中获得t-PA改良蛋白，在构建基因表达载体时，需要添加______________________的启动子。 【答案】（1） ①. （1）使双链 DNA 解旋为单链 ②. 否 （2）TCT （3） ①. GCTAGCTGAA ②. GCTAGCCGAG ③. 琼脂糖凝胶电泳 （4） ①. 显微注射法 ②. 囊胚滋养层 ③. 膀胱上皮蛋白基因 【解析】 【小问1详解】 PCR 高温变性步骤会升高温度破坏 DNA 双链之间的氢键，使双链 DNA 解旋分开成为两条单链；图中重叠延伸依靠两段 PCR 产物自身互补序列配对拼接，不需要额外引物来启动子链合成。 【小问2详解】 丝氨酸密码子为 UCU，密码子由模板链转录而来，可推出模板链对应碱基序列为 AGA；引物 b 与模板链互补配对，所以该位点引物 b 碱基为 TCT。 【小问3详解】 由图可知，质粒可用限制酶为 NheⅠ，其识别序列是 5'-GCTAGC-3'，该酶切位点要添加在引物 5' 端最外侧，上游引物直接顺着非模板链正向序列书写，在 5' 端先加上 NheⅠ 酶切位点 GCTAGC，再接基因前端碱基 TGAA，组合得到 10 个碱基的上游引物 5'-GCTAGCTGAA-3'，下游引物需要先对非模板链末端序列反向互补，非模板链末端片段 GTCGACTCG 互补后序列为CGAG...，在其 5' 端添加酶切位点GCTAGC，构成10个碱基的下游引物 5'-GCTAGCCGAG-3'。 PCR 扩增结束后，一般采用琼脂糖凝胶电泳技术对扩增产物进行分离与鉴定。 【小问4详解】 将目的基因导入动物受精卵细胞的标准方法是显微注射法；胚胎移植操作前对囊胚做性别鉴定时，选取囊胚滋养层细胞取样检测，避免损伤内细胞团；膀胱生物反应器需要目的基因只在膀胱上皮细胞中特异性转录翻译，因此表达载体必须接入膀胱上皮蛋白基因的启动子，实现组织特异性表达。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $