精品解析：湖南长沙市周南中学2025-2026学年高二下学期期末考试生物试题

湖南长沙市周南中学2025-2026学年高二下学期期末考试生物试题 一、选择题（本题共12小题，每小题2分，共24分。每小题只有一个选项符合题目要求。） 1. 细胞作为基本的生命系统，其结构复杂而精巧。下列关于细胞的说法，合理的是（ ） A. 细胞膜的基本支架是镶嵌在膜中的各种蛋白质分子 B. 乳酸菌可将丙酮酸在线粒体中转化为多种次生代谢物 C. 叶绿体内堆叠着大量类囊体，有利于二氧化碳在膜上的吸收利用 D. 蓝细菌和支原体都是原核生物，两者所含有的细胞器中都不含有磷脂成分 2. 2025年国民营养健康指导委员会发布了“健康饮食、合理膳食”核心信息，倡导增加蔬菜水果，全谷物和水产品三类食品摄入，下列叙述错误的是（ ） A. 蔬菜中的纤维素和谷物中富含的淀粉是人体重要的糖类来源 B. 海藻类食物中富含的碘是构成甲状腺激素的重要元素 C. 蔬菜水果中的类胡萝卜素等抗氧化物质可减少细胞中的自由基而延缓细胞衰老 D. “合理膳食”可以保证通过食物获取机体所需的必需氨基酸 3. 下列有关实验操作和相关物质检测的叙述正确的是（　　） A. 用斐林试剂检测血液中的葡萄糖时，需要加热后才能呈现砖红色 B. 将染色后的洋葱根尖置于载玻片上，滴清水并盖上盖玻片即可观察染色体 C. 苏丹Ⅲ染液可与花生子叶中的脂肪结合，通过化学反应形成橘黄色 D. 橙色的酸性重铬酸钾溶液可与酒精或葡萄糖发生反应，变成灰绿色 4. 长沙臭豆腐以其“闻起来臭，吃起来香”的特点而闻名。其独特风味部分源于豆腐在发酵过程中，蛋白质被微生物分解产生的硫化物、胺类等物质。下列关于蛋白质的叙述，错误的是（　　） A. 豆腐富含蛋白质，其基本单位是氨基酸 B. 臭豆腐发酵过程中，卤水中微生物的代谢使蛋白质变性是肽键断裂引起的 C. 人体细胞中含量最多的有机物是蛋白质，它是生命活动的主要承担者 D. 蛋白质的多样性取决于氨基酸的种类、数目、排列顺序以及肽链的盘曲、折叠方式 5. 将马铃薯块茎细胞置于一定浓度的X溶液中，测得细胞液渗透压与X溶液渗透压的比值变化如图所示。下列有关叙述正确的是（　　） A. t1时，水分子不进出花瓣细胞 B. X溶液中的溶质不能被马铃薯块茎细胞吸收 C. t2时，细胞的吸水能力小于t0时 D. t0~t2时，细胞先发生质壁分离，后自动复原 6. 关于酶和ATP，下列叙述正确的是（ ） A. 溶酶体合成和储存多种水解酶，是细胞的“消化车间” B. 细胞代谢能有条不紊地进行，与酶的专一性密切相关 C. 正常人在饥饿时，体内ATP和ADP无法维持动态平衡 D. ATP水解时释放的能量可用于葡萄糖的协助扩散 7. 人类利用微生物发酵制作食品已经有几千年的历史，下列相关叙述正确的是（ ） A. 酵母菌、毛霉、曲霉等多种微生物参与了腐乳的制作 B. 家庭制作果醋时，发酵液表面产生的菌膜由乳酸菌形成 C. 家庭制作酸奶时，加入少量抗生素可以避免杂菌污染 D. 制作果酒过程中，定时拧松瓶盖为酵母菌发酵提供O2 8. 抗生素是某些微生物产生的能杀死或抑制其他微生物生长的化学物质。下图表示从土壤中筛选某种抗生素产生菌的过程，相关叙述正确的是（ ） A. 无透明圈产生的菌株一定不能产生抗生素 B. 平板上长出的菌落属于同一种微生物 C. 接种测试菌3时，接种环可能在灼烧后未完全冷却 D. 测试菌2、5对该筛选出的菌产生的抗生素抗性强 9. 疟疾是一种严重危害人类健康的红细胞寄生虫病，可用氯喹治疗。疟原虫pfcrt基因编码的蛋白在第76位发生了赖氨酸到苏氨酸的改变，从而获得了对氯喹的抗性。研究人员设计了F1、F2、R1和R2等4种备选引物用于扩增目的基因片段，如图1所示。为选出正确和有效的引物，以疟原虫基因组DNA为模板进行PCR，产物的电泳结果如图2所示。下列叙述错误的是（ ） A. F1、F2、R1和R2等4种备选引物是根据pfcrt基因序列设计的 B. 在PCR反应体系中需加入一定量的Mg2+，以激活Taq DNA聚合酶 C. 疟原虫对氯喹产生抗性的实质是pfcrt基因的A—T被替换为C—G所致 D. 由图2电泳结果可知，能用于特异性扩增pfcrt基因的引物为F1、R1、R2 10. 我国自主研发的全球首款“异体通用型”药品，含人异体诱导多能干细胞（iPS）再生的脊髓神经祖细胞注射液，可改善脊髓损伤患者的运动功能。该药研发过程不涉及（　　） A. 胚胎干细胞的伦理争议 B. 细胞的原代和传代培养 C. 给药后免疫排斥的监测 D. 调控基因的选择性表达 11. 关于“DNA粗提取与鉴定”、“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述中，正确的是（ ） A. 将洋葱用研磨液研磨、过滤后，滤液放置静置几分钟后，DNA存在于沉淀物中 B. 鉴定DNA时，需先将DNA溶解于95%酒精溶液，再加入二苯胺并进行沸水浴加热 C. 琼脂糖溶液混合的凝胶载样缓冲液与DNA分子结合，便于在紫光灯下观察 D. 若目的基因片段较大，则应配制浓度相对较低的凝胶 12. 重构胚激活的终极目标是要使处于MⅡ期的卵母细胞恢复分裂周期。由于持续高水平的成熟促进因子（MPF）和细胞静止因子（CSF）的存在，MⅡ期的卵母细胞不能进入末期。研究表明，任何能够让细胞质中Ca2+水平升高的机制都可以激活重构胚。下列错误的是（ ） A. 在核移植过程中通过电融合法可使供体细胞与去核卵母细胞融合，形成重构胚 B. 自然受精过程中，精子入卵可能促进了Ca2+内流，升高了细胞质中Ca2+水平 C. 蛋白酶合成抑制剂能抑制MPF和CSF的合成，故可通过蛋白酶合成抑制剂使重构胚保持休眠 D. 通过核移植产生重构胚发育形成的个体不利于物种多样性的形成，但在畜牧业领域有广泛应用 二、选择题（本题共4小题，每小题4分，共16分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得4分，选对但不全的得2分，有选错的得0分。） 13. 米根霉常用于发酵工程，主要利用它分泌的淀粉糖化酶将淀粉糖化，其细胞内部分代谢过程如下图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 过程④⑤产生的ATP可用于米根霉细胞吸收无机盐 B. 仅通过检测CO2的释放量来计算米根霉分解葡萄糖的量 C. 图中X是[H]，米根霉进行有氧呼吸时，①②过程均能产生[H] D. 米根霉将淀粉糖化形成葡萄糖，有利于葡萄糖进入线粒体被彻底氧化分解 14. 如图表示蔗糖分子进入筛管细胞和库细胞的部分机制，L为运输蔗糖分子和H+的转运蛋白。下列叙述错误的是（　　） A. 向筛管细胞外运输H+时，L的空间结构会发生可逆性改变 B. L与M结构具有差异的根本原因是基因的选择性表达 C. 蔗糖分子进入筛管细胞的过程不消耗ATP，属于被动运输 D. 筛管细胞通过自由扩散的方式将蔗糖分子输送到库细胞 15. 为提高葡萄酒品质，某校师生利用如图所示技术流程，筛选出发酵速度快、具有较强酒精耐受力的优良酿酒酵母(无法利用赖氨酸)，其能在WL 培养基上形成奶油状略带绿色、球形的菌落。下列相关说法错误的是（ ） 注：YPD培养基和 WL 培养基是酵母菌培养常用培养基，其中WL培养基舍有指示剂溴甲酚绿。 A. Ⅲ属于选择培养基，依据其上生长的菌落特征，可挑选出优良酵母菌种 B. 进行酒精耐受力检测时，需重新制备添加不同浓度酒精的YPD培养基 C. 从Ⅲ中挑取菌种接种到Ⅳ上培养，若能生长，则可判定为优良酿酒酵母 D. Ⅰ、Ⅱ均为液体培养基，图中重复操作是为了提升酿酒酵母的酒精发酵能力 16. 多克隆位点（MCS），是含多个限制性酶切位点的一段非常短的DNA序列（酶切位点之间的距离只有几个碱基，其大小忽略不计）。将一段编码序列（CDS）插入到一个载体上，将该载体命名为pVN2024。如图A所示，将CDS插入到载体的SacⅡ位点，该位点位于lacZ基因的MCS区，CDS内部有一个PstⅠ的酶切位点（距离CDS最末端碱基的0.8kb处）。为确认CDS的大小和插入方向，科研人员用不同的限制酶切割重组质粒并进行电泳，结果如图B。下列叙述正确的是（ ） （A图为载体示意图，方框内表示载体中限制酶识别位点）；（B图为不同限制酶切割产物的电泳示意图，M为标准电泳条带） A. SpeⅠ酶切可用于判断CDS插入的方向 B. CDS插入时方向与lacZ基因的方向不同 C. CDS长度为2.6kb，在距一端0.5kb处有一个EcoRⅠ识别位点 D. 若重组质粒同时用EcoRⅠ和SpeⅠ酶切，电泳能检测到5个不同条带 三、非选择题 17. 线粒体是真核细胞的重要细胞器。当线粒体受损时，细胞通过清理受损的线粒体来维持细胞内的稳态，我国科研人员对此开展研究。完成下列问题： （1）科研人员研究发现，受损的线粒体可通过“线粒体自噬”及时被清理，“线粒体自噬”属于细胞自噬的一种，在一定条件下，受损的线粒体会被内质网包裹形成吞噬泡，吞噬泡与__________（填细胞器）融合形成自噬体，最终被清除；该细胞器的功能是__________。 （2）科研人员推测受损线粒体还可通过进入迁移体（细胞器在迁移中形成的一种囊泡结构）而被释放到细胞外，即“线粒体胞吐”。为此，科研人员利用绿色荧光标记迁移体，红色荧光标记线粒体，用药物C处理细胞使线粒体受损，若观察到__________，则可初步验证上述推测。 （3）为研究受损线粒体进入迁移体的机制，科研人员进一步实验。 ①真核细胞内的__________锚定并支撑着细胞器，不仅与细胞运动、分裂、分化有关，还与____________________（答出2点）等生命活动密切相关。 ②为研究K蛋白在线粒体胞吐中的作用，对用红色荧光标记了线粒体的细胞进行相应操作，检测迁移体中的红色荧光，操作及结果如图（备注：K基因能控制K蛋白的合成）。 图结果表明，K蛋白的功能是__________。 18. 受损伤的马铃薯细胞内酚氧化酶（PPO）和底物（酚类物质）直接接触，引起马铃薯的褐变。图1表示两种抑制剂对PPO的酶促反应速率的影响曲线图（其他条件均为最适条件），图2表示不同抑制剂降低酶活力的两个模型图。请回答下列问题： （1）酶的化学本质____________，PPO的作用机理是____________。 （2）图1所示实验的自变量有____________，结合图2分析，图1中抑制剂Ⅰ的作用机理属于____________（选填“模型A”或“模型B”），若抑制剂的量不变，提高抑制剂Ⅱ作用下的酶促反应速率的措施为____________。 （3）某兴趣小组为探究温度对PPO活性的影响，实验小组进行如下实验： ①PPO粗提液的提取是在____________（选填“低温”或“高温”）条件下将新鲜马铃薯用蒸馏水洗净、去皮，取20 g样品放入含50 mL磷酸缓冲液（pH值为5.5）的研钵中，同时加入少量石英砂，研磨、离心，上清液即为PPO粗提液。其中加缓冲液的目的是____________。 ②不同温度下PPO活性的测定（反应底物充足；实验结果中“+”越多，褐色越深。） 步骤顺序 试管1 试管2 试管3 试管4 试管5 试管6 试管7 试管8 PPO粗提液 2mL 2mL 2mL 2mL 酚类底物 2mL 2mL 2mL 2mL 温度预处理（5min） 0℃ 15℃ 30℃ 45℃ 反应 混合振荡 混合振荡 混合振荡 混合振荡 保温时间 5min 5min 5min 5min 记录结果 + ++++ ++++ ++ 为进一步探究PPO最适温度，应在____________范围内设置温度梯度。 19. 玉露是极具观赏性的景天科十二卷属多肉植物，长期适应弱光阴生环境。科研人员探究遮光胁迫对玉露光合作用的影响，设置自然光照组（正常绿叶）、持续遮光12d组（诱导叶片黄化）两组对照实验，分别测定叶片总叶绿素含量、净光合速率、呼吸速率、PSⅡ最大光化学效率（Fv/Fm，可直接反映叶绿体光反应结构与功能的完整性），实验结果如下表。回答下列问题： 实验组别 总叶绿素含量 （mg·g-1） 净光合速率 （umolCO2·m-2·s-1） 呼吸速率 （umolCO2·m-2·s-1） Fv/Fm（PSⅡ最大光化学效率） 自然光照组（正常绿叶） 1.15 2.91 1.82 0.819 遮光12d组（黄化叶片） 0.22 0.54 1.79 0.382 （1）玉露的光合色素分布在____________（填结构），为分析玉露的色素种类，可用____________法分离黄化苗和正常植株中的光合色素，在此方法提取过程中需用____________（试剂）提取色素，其原理是____________。 （2）黄化叶片组的叶绿素含量明显低于正常组，据表格分析，叶绿素减少的原因是____________。 （3）玉露属于兼性CAM植物，存在CAM补偿，其机制如下图，据图分析，在此机制下，白天玉露光合作用中的CO2来源为____________。除了上述原因外，推测黄化玉露的光合速率下降的原因还有____________影响白天碳反应进而影响光合速率。由此机制推测玉露适合生长在____________的环境。 20. 埃博拉病毒（EBOV）是一种极其危险且罕见的病毒，其引起的埃博拉出血热是世界上最致命的病毒性出血热之一。NP蛋白在EBOV的复制中具有重要作用，也是检测EBOV的重要靶蛋白。研究人员从EBOV中分离出NP蛋白，并用于制备抗EBOV单克隆抗体，相关实验流程如图1所示。请回答下列问题： （1）在培养骨髓瘤细胞时，所用培养液中常需要添加血清，原因是________。图1中给小鼠注射NP蛋白的目的是________。 （2）利用抗EBOV单克隆抗体检测血浆中EBOV含量的原理如图2所示。为判断某人是否感染了EBOV，研究人员进行了两组检测。先将抗EBOV单克隆抗体固定在支持物上，甲组向检测体系中同时添加一定量该人的血液和适量酶标记的NP蛋白；乙组向检测体系中只添加等量酶标记的NP蛋白。保温一段时间后洗涤，再向甲、乙两组检测体系中添加a，最后比较b。 ①甲组向检测体系中添加一定量该人血液的同时，还需加入适量酶标记的NP蛋白，目的是________。 ②请将上述步骤补充完整：a．________。b．________。 ③预期结果和结论：________。 21. 白桦是我国东北地区重要的绿化树种，土壤盐渍化严重制约其生长，而BpMYB5 基因是调控白桦耐盐性的关键基因。为验证该基因的耐盐功能，研究人员利用无缝克隆技术，将BpMYB5 基因与绿色荧光蛋白(eGFP)基因融合，构建了pBI121-BpMYB5-eGFP 过表达载体，开展相关实验研究。 注：KanR 为卡那霉素抗性基因，TetR 为四环素抗性基因。 （1）①过程是利用PCR 技术将质粒线性化，进行PCR扩增质粒时，需要质粒、引物、______、含 Mg²⁺的缓冲液和耐高温的 DNA 聚合酶；该过程中引物应选择_____。 （2）为确保BpMYB5 基因与eGFP 基因融合后能成功构建融合基因，并表达出完整的融合蛋白，在引物设计时，应去除 。 A. BpMYB5 基因中编码起始密码子的序列 B. BpMYB5 基因中编码终止密码子的序列 C. eGFP 基因中编码起始密码子的序列 D. eGFP 基因中编码终止密码子的序列 （3）已知相关基因的编码链(与模板链互补的DNA链)的部分序列如下表所示(AUG为起始密码子，UAG、UAA、UGA 为终止密码子)。为实现二者的无缝克隆且保证融合蛋白的正常表达，图中引物R₁ 的设计至关重要，该引物的碱基序列应为5'—_______—3'。 BpMYB5 基因序列 5'—AATGCCTAGT……GTGTTTTAGCAT-3' eGFP 基因序列 5'—CATGTCCAGC……AACCCATAACCA-3' （4）实验人员将重组的pBI121 - BpMYB5 - eGFP载体(Ti 质粒)通过______法侵染经消毒后的白桦种子，为筛选出成功导入重组质粒的白桦种子，培养基上需要添加______。 （5）将筛选得到的转基因种子经培养可获得转基因白桦植株，通过观察_____以了解 BpMYB5 基因的表达水平和表达部位。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 湖南长沙市周南中学2025-2026学年高二下学期期末考试生物试题 一、选择题（本题共12小题，每小题2分，共24分。每小题只有一个选项符合题目要求。） 1. 细胞作为基本的生命系统，其结构复杂而精巧。下列关于细胞的说法，合理的是（ ） A. 细胞膜的基本支架是镶嵌在膜中的各种蛋白质分子 B. 乳酸菌可将丙酮酸在线粒体中转化为多种次生代谢物 C. 叶绿体内堆叠着大量类囊体，有利于二氧化碳在膜上的吸收利用 D. 蓝细菌和支原体都是原核生物，两者所含有的细胞器中都不含有磷脂成分 【答案】D 【解析】 【详解】A、细胞膜的基本支架是磷脂双分子层，蛋白质仅为镶嵌、贯穿或覆盖在磷脂双分子层上的成分，A错误； B、乳酸菌是原核生物，无线粒体，B错误； C、类囊体堆叠的意义是增大光反应的膜面积，二氧化碳的吸收利用属于暗反应过程，场所为叶绿体基质，不在类囊体膜上进行，C错误； D、蓝细菌和支原体都属于原核生物，原核生物仅含有核糖体一种无膜结构的细胞器，磷脂是生物膜的组成成分，无膜结构的核糖体不含磷脂，D正确。 2. 2025年国民营养健康指导委员会发布了“健康饮食、合理膳食”核心信息，倡导增加蔬菜水果，全谷物和水产品三类食品摄入，下列叙述错误的是（ ） A. 蔬菜中的纤维素和谷物中富含的淀粉是人体重要的糖类来源 B. 海藻类食物中富含的碘是构成甲状腺激素的重要元素 C. 蔬菜水果中的类胡萝卜素等抗氧化物质可减少细胞中的自由基而延缓细胞衰老 D. “合理膳食”可以保证通过食物获取机体所需的必需氨基酸 【答案】A 【解析】 【详解】A、人体不存在分解纤维素的酶，纤维素无法被人体消化吸收，不能为人体提供糖类，不属于人体的糖类来源，A错误； B、碘是合成甲状腺激素的必需元素，海藻类食物中碘含量丰富，可作为碘的重要摄入来源，B正确； C、根据细胞衰老的自由基学说，自由基会攻击细胞内的生物分子加速细胞衰老，类胡萝卜素等抗氧化物质可清除自由基，减少自由基对细胞的损伤，起到延缓衰老的作用，C正确； D、必需氨基酸是人体细胞无法合成、必须从食物中获取的氨基酸，合理膳食可通过搭配不同种类的食物，保证机体摄入全部种类的必需氨基酸，D正确。 3. 下列有关实验操作和相关物质检测的叙述正确的是（　　） A. 用斐林试剂检测血液中的葡萄糖时，需要加热后才能呈现砖红色 B. 将染色后的洋葱根尖置于载玻片上，滴清水并盖上盖玻片即可观察染色体 C. 苏丹Ⅲ染液可与花生子叶中的脂肪结合，通过化学反应形成橘黄色 D. 橙色的酸性重铬酸钾溶液可与酒精或葡萄糖发生反应，变成灰绿色 【答案】D 【解析】 【详解】A、血液本身为红色，不宜用于检测还原糖，A错误； B、染色后的洋葱根尖制片时，滴清水盖上盖玻片后还需进行压片操作，使细胞充分分散避免重叠，才能清晰观察到染色体，仅滴清水盖盖玻片无法正常观察，B错误； C、苏丹Ⅲ是脂溶性染料，可通过物理染色，脂肪呈现橘黄色，该过程没有发生化学反应，C错误； D、橙色的酸性重铬酸钾溶液可与酒精发生氧化还原反应变为灰绿色，葡萄糖也能与其发生该显色反应，D正确。 4. 长沙臭豆腐以其“闻起来臭，吃起来香”的特点而闻名。其独特风味部分源于豆腐在发酵过程中，蛋白质被微生物分解产生的硫化物、胺类等物质。下列关于蛋白质的叙述，错误的是（　　） A. 豆腐富含蛋白质，其基本单位是氨基酸 B. 臭豆腐发酵过程中，卤水中微生物的代谢使蛋白质变性是肽键断裂引起的 C. 人体细胞中含量最多的有机物是蛋白质，它是生命活动的主要承担者 D. 蛋白质的多样性取决于氨基酸的种类、数目、排列顺序以及肽链的盘曲、折叠方式 【答案】B 【解析】 【详解】A、蛋白质的基本组成单位是氨基酸，A正确； B、蛋白质变性的实质是蛋白质的空间结构被破坏，肽键并没有断裂，发酵过程中微生物分解蛋白质时才会断裂肽键，B错误； C、人体细胞中含量最多的有机物是蛋白质，蛋白质具备催化、运输、免疫、调节等多种功能，是生命活动的主要承担者，C正确； D、蛋白质的结构多样性由四方面决定：氨基酸的种类、数目、排列顺序，以及肽链的盘曲、折叠方式和形成的空间结构，D正确。 5. 将马铃薯块茎细胞置于一定浓度的X溶液中，测得细胞液渗透压与X溶液渗透压的比值变化如图所示。下列有关叙述正确的是（　　） A. t1时，水分子不进出花瓣细胞 B. X溶液中的溶质不能被马铃薯块茎细胞吸收 C. t2时，细胞的吸水能力小于t0时 D. t0~t2时，细胞先发生质壁分离，后自动复原 【答案】D 【解析】 【详解】A、t1时比值为1，此时水分子进出细胞处于动态平衡，并非不进出细胞，A错误； B、t1后比值持续上升至大于1，说明细胞液渗透压不断升高，是X溶液的溶质进入细胞导致的，因此溶质可被细胞吸收，B错误； C、细胞吸水能力与细胞液渗透压呈正相关，t2时细胞液渗透压远高于t0时，因此t2时细胞吸水能力大于t0时，C错误； D、t0~t1阶段比值小于1，细胞失水发生质壁分离；t1~t2阶段比值大于1，细胞吸水，质壁分离自动复原，因此该过程细胞先发生质壁分离后自动复原，D正确。 6. 关于酶和ATP，下列叙述正确的是（ ） A. 溶酶体合成和储存多种水解酶，是细胞的“消化车间” B. 细胞代谢能有条不紊地进行，与酶的专一性密切相关 C. 正常人在饥饿时，体内ATP和ADP无法维持动态平衡 D. ATP水解时释放的能量可用于葡萄糖的协助扩散 【答案】B 【解析】 【详解】A、溶酶体是细胞的“消化车间”，可储存多种水解酶，但水解酶的化学本质为蛋白质，在核糖体中合成，溶酶体不具备合成水解酶的功能，A错误； B、酶具有专一性，一种酶只能催化一种或一类化学反应，细胞内不同代谢反应由对应的特异性酶催化，因此酶的专一性保证了细胞代谢能够有条不紊地进行，B正确； C、正常人体内ATP和ADP的相互转化时刻快速进行，无论是否处于饥饿状态，二者都能维持动态平衡，保障细胞的能量供应，C错误； D、协助扩散属于被动运输，顺浓度梯度进行，不需要消耗能量，D错误。 7. 人类利用微生物发酵制作食品已经有几千年的历史，下列相关叙述正确的是（ ） A. 酵母菌、毛霉、曲霉等多种微生物参与了腐乳的制作 B. 家庭制作果醋时，发酵液表面产生的菌膜由乳酸菌形成 C. 家庭制作酸奶时，加入少量抗生素可以避免杂菌污染 D. 制作果酒过程中，定时拧松瓶盖为酵母菌发酵提供O2 【答案】A 【解析】 【详解】A、腐乳制作中，毛霉起主要作用，其分泌的蛋白酶和脂肪酶分解豆腐中的大分子物质。此外，酵母菌和曲霉等微生物在前期也可能参与发酵，共同促进腐乳风味形成，A正确； B、果醋制作利用的是醋酸菌（需氧型），发酵液表面的菌膜由醋酸菌大量繁殖形成，而非乳酸菌（用于酸奶和泡菜，且为厌氧型），B错误； C、抗生素会抑制或杀死乳酸菌（细菌），导致酸奶发酵失败。家庭制作酸奶通常通过高温灭菌原料和密闭环境控制杂菌，C错误； D、果酒制作中，酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵。定时拧松瓶盖的目的是排出产生的CO₂，防止容器爆裂，而非提供O₂（无氧发酵不需要O₂），D错误。 故选A。 8. 抗生素是某些微生物产生的能杀死或抑制其他微生物生长的化学物质。下图表示从土壤中筛选某种抗生素产生菌的过程，相关叙述正确的是（ ） A. 无透明圈产生的菌株一定不能产生抗生素 B. 平板上长出的菌落属于同一种微生物 C. 接种测试菌3时，接种环可能在灼烧后未完全冷却 D. 测试菌2、5对该筛选出的菌产生的抗生素抗性强 【答案】D 【解析】 【详解】A、没有透明圈产生的菌株产生的抗生素可能不对S菌起作用，不能说明一定不能产生抗生素，A错误； B、平板上长出的菌落未必属于同一种微生物，因为它们对指示菌S的表现不同，B错误； C、接种测试菌3，发现离能产生透明圈菌株的距离较远，说明可能是产生的抗生素抑制了测试菌3的生长，若是灼烧后未完全冷却，则不会长成菌落3，C错误； D、测试菌2和5距离产生透明圈菌株的距离近，说明测试菌2、5对该菌产生的抗生素具有抗性，D正确。 9. 疟疾是一种严重危害人类健康的红细胞寄生虫病，可用氯喹治疗。疟原虫pfcrt基因编码的蛋白在第76位发生了赖氨酸到苏氨酸的改变，从而获得了对氯喹的抗性。研究人员设计了F1、F2、R1和R2等4种备选引物用于扩增目的基因片段，如图1所示。为选出正确和有效的引物，以疟原虫基因组DNA为模板进行PCR，产物的电泳结果如图2所示。下列叙述错误的是（ ） A. F1、F2、R1和R2等4种备选引物是根据pfcrt基因序列设计的 B. 在PCR反应体系中需加入一定量的Mg2+，以激活Taq DNA聚合酶 C. 疟原虫对氯喹产生抗性的实质是pfcrt基因的A—T被替换为C—G所致 D. 由图2电泳结果可知，能用于特异性扩增pfcrt基因的引物为F1、R1、R2 【答案】D 【解析】 【分析】PCR过程为：变性，当温度上升到90℃以上时，氢键断裂，双链DNA解旋为单链。复性，当温度降低到50℃左右是，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。延伸，温度上升到72℃左右，溶液中的四种脱氧核苷酸，在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。 【详解】A、引物需根据目的基因的碱基序列进行设计，本研究中pfcrt基因为目的基因，A正确； B、Mg2+是Taq DNA聚合酶的激活剂，B正确； C、疟原虫pfcrt基因编码的蛋白，在第76位发生了赖氨酸到苏氨酸的改变，实质是pfcrt基因发生了基因突变，即碱基对A-T被替换为C-G所致，C正确； D、根据图2结果显示可知，F1-R1引物只扩增出一个条带，说明能够用于特异性扩增目的基因片段，F1-R2引物扩增条带有三条，说明其不能用于特异性扩增目的基因片段，F1-R1能扩增目的基因1条带，F2-R1无法扩增出目的基因条带，说明F2为无效引物，没有扩增功能，无法使用，F1-R1引物只扩增出一个目的基因条带，F1-R2引物扩增出三条条带，说明R2引物无法特异性扩增目的基因条带，D错误。 故选D。 10. 我国自主研发的全球首款“异体通用型”药品，含人异体诱导多能干细胞（iPS）再生的脊髓神经祖细胞注射液，可改善脊髓损伤患者的运动功能。该药研发过程不涉及（　　） A. 胚胎干细胞的伦理争议 B. 细胞的原代和传代培养 C. 给药后免疫排斥的监测 D. 调控基因的选择性表达 【答案】A 【解析】 【详解】A、iPS细胞是通过对成熟体细胞诱导重编程得到的多能干细胞，无需破坏胚胎获取，因此研发过程不涉及胚胎干细胞相关的伦理争议，A符合题意； B、获取足量的iPS细胞及诱导其分化为脊髓神经祖细胞的过程，需要通过原代培养、传代培养完成细胞扩增，涉及该操作，B不符合题意； C、该药品为异体来源的细胞制剂，研发阶段需要监测给药后的免疫排斥反应，以验证其安全性，涉及该操作，C不符合题意； D、iPS细胞分化为脊髓神经祖细胞的实质是基因的选择性表达，研发过程需要定向调控相关基因的表达才能获得目标细胞，涉及该操作，D不符合题意。 故选A。 11. 关于“DNA粗提取与鉴定”、“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述中，正确的是（ ） A. 将洋葱用研磨液研磨、过滤后，滤液放置静置几分钟后，DNA存在于沉淀物中 B. 鉴定DNA时，需先将DNA溶解于95%酒精溶液，再加入二苯胺并进行沸水浴加热 C. 琼脂糖溶液混合的凝胶载样缓冲液与DNA分子结合，便于在紫光灯下观察 D. 若目的基因片段较大，则应配制浓度相对较低的凝胶 【答案】D 【解析】 【详解】A、洋葱经研磨液研磨、过滤后，DNA溶解在滤液中，4℃静置时沉淀的是细胞碎片等杂质，DNA存在于上清液中，A错误； B、DNA不溶于95%冷酒精，鉴定DNA时需先将DNA溶解在2mol/L的NaCl溶液中，再加入二苯胺试剂进行沸水浴加热，B错误； C、凝胶载样缓冲液的作用是增加样品密度使其沉入加样孔、通过指示剂指示电泳进度，能与DNA结合便于紫光灯下观察的是溴化乙锭等荧光染料，C错误； D、琼脂糖凝胶的浓度越低，孔径越大，更易让较大的DNA片段迁移，因此目的基因片段较大时应配制浓度相对较低的凝胶，D正确。 12. 重构胚激活的终极目标是要使处于MⅡ期的卵母细胞恢复分裂周期。由于持续高水平的成熟促进因子（MPF）和细胞静止因子（CSF）的存在，MⅡ期的卵母细胞不能进入末期。研究表明，任何能够让细胞质中Ca2+水平升高的机制都可以激活重构胚。下列错误的是（ ） A. 在核移植过程中通过电融合法可使供体细胞与去核卵母细胞融合，形成重构胚 B. 自然受精过程中，精子入卵可能促进了Ca2+内流，升高了细胞质中Ca2+水平 C. 蛋白酶合成抑制剂能抑制MPF和CSF的合成，故可通过蛋白酶合成抑制剂使重构胚保持休眠 D. 通过核移植产生重构胚发育形成的个体不利于物种多样性的形成，但在畜牧业领域有广泛应用 【答案】C 【解析】 【详解】A、动物体细胞核移植过程中，电融合法是诱导供体细胞与去核卵母细胞融合的常用方法，二者融合后可形成重构胚，A正确； B、自然受精时精子入卵会激活MⅡ期卵母细胞使其恢复分裂，结合题干“升高细胞质中Ca2+水平的机制都可以激活重构胚”的信息，可推测精子入卵促进了Ca2+内流，升高了细胞质中Ca2+水平，B正确； C、高水平的MPF和CSF会阻止MⅡ期卵母细胞进入末期，使用蛋白酶合成抑制剂抑制二者的合成后，二者含量下降，会解除对细胞分裂的抑制，促进重构胚激活，而非使其保持休眠，C错误； D、核移植属于无性繁殖，获得的个体遗传物质与供核个体高度一致，不利于物种多样性的形成，但可用于畜牧业快速繁育优良畜种、制备转基因动物等，应用广泛，D正确。 二、选择题（本题共4小题，每小题4分，共16分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得4分，选对但不全的得2分，有选错的得0分。） 13. 米根霉常用于发酵工程，主要利用它分泌的淀粉糖化酶将淀粉糖化，其细胞内部分代谢过程如下图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 过程④⑤产生的ATP可用于米根霉细胞吸收无机盐 B. 仅通过检测CO2的释放量来计算米根霉分解葡萄糖的量 C. 图中X是[H]，米根霉进行有氧呼吸时，①②过程均能产生[H] D. 米根霉将淀粉糖化形成葡萄糖，有利于葡萄糖进入线粒体被彻底氧化分解 【答案】ABD 【解析】 【详解】A、过程④⑤是无氧呼吸的第二阶段，该阶段不释放能量，无ATP生成，细胞吸收无机盐所需ATP来自有氧呼吸各阶段或无氧呼吸第一阶段，A错误； B、米根霉有氧呼吸、产酒精的无氧呼吸均会释放CO₂，而产乳酸的无氧呼吸不释放CO₂，仅检测CO₂释放量无法统计产乳酸途径消耗的葡萄糖量，因此无法计算米根霉分解葡萄糖的总量，B错误； C、图中X是[H]，有氧呼吸的①过程（第一阶段）和②过程（第二阶段）均可产生[H]，这些[H]会在有氧呼吸第三阶段与O₂结合生成水，C正确； D、葡萄糖无法进入线粒体，葡萄糖首先在细胞质基质中分解为丙酮酸，之后丙酮酸进入线粒体被彻底氧化分解，D错误。 14. 如图表示蔗糖分子进入筛管细胞和库细胞的部分机制，L为运输蔗糖分子和H+的转运蛋白。下列叙述错误的是（　　） A. 向筛管细胞外运输H+时，L的空间结构会发生可逆性改变 B. L与M结构具有差异的根本原因是基因的选择性表达 C. 蔗糖分子进入筛管细胞的过程不消耗ATP，属于被动运输 D. 筛管细胞通过自由扩散的方式将蔗糖分子输送到库细胞 【答案】BCD 【解析】 【详解】A、向筛管细胞外运输H+时，消耗ATP，属于主动运输，需要转运蛋白L的参与，转运蛋白L的空间构象会发生可逆性改变，A正确； B、L与M是筛管细胞中两种不同的转运蛋白，都是由筛管细胞内的基因表达生成，L与M结构具有差异的根本原因是两个蛋白质的基因不同，B错误； C、蔗糖分子进入筛管细胞消耗H+浓度差形成的势能，属于主动运输，C错误； D、筛管细胞与库细胞之间通过胞间连丝传递蔗糖分子，胞间连丝是细胞间的通道，蔗糖通过胞间连丝的运输属于胞间运输，并非自由扩散（自由扩散是物质直接穿过磷脂双分子层的跨膜运输），D错误。 故选BCD。 15. 为提高葡萄酒品质，某校师生利用如图所示技术流程，筛选出发酵速度快、具有较强酒精耐受力的优良酿酒酵母(无法利用赖氨酸)，其能在WL 培养基上形成奶油状略带绿色、球形的菌落。下列相关说法错误的是（ ） 注：YPD培养基和 WL 培养基是酵母菌培养常用培养基，其中WL培养基舍有指示剂溴甲酚绿。 A. Ⅲ属于选择培养基，依据其上生长的菌落特征，可挑选出优良酵母菌种 B. 进行酒精耐受力检测时，需重新制备添加不同浓度酒精的YPD培养基 C. 从Ⅲ中挑取菌种接种到Ⅳ上培养，若能生长，则可判定为优良酿酒酵母 D. Ⅰ、Ⅱ均为液体培养基，图中重复操作是为了提升酿酒酵母的酒精发酵能力 【答案】ACD 【解析】 【详解】A、WL培养基Ⅲ含有指示剂溴甲酚绿，且优良酿酒酵母能在其上形成奶油状略带绿色、球形的菌落，属于鉴别培养基，而非选择培养基，A错误； B、进行酒精耐受力检测时，需要重新制备添加不同浓度酒精的 YPD培养基，以此来筛选出酒精耐受力强的酵母菌，B正确； C、优良酿酒酵母无法利用赖氨酸，而培养基Ⅳ是以赖氨酸为唯一氮源的培养基，因此优良酿酒酵母无法在Ⅳ上生长，C错误； D、YPD培养基Ⅰ一般为固体培养基，YPD培养基Ⅱ为液体培养基；重复操作是为了筛选出更符合要求的酵母菌，而不是直接提升其酒精发酵能力，D错误。 16. 多克隆位点（MCS），是含多个限制性酶切位点的一段非常短的DNA序列（酶切位点之间的距离只有几个碱基，其大小忽略不计）。将一段编码序列（CDS）插入到一个载体上，将该载体命名为pVN2024。如图A所示，将CDS插入到载体的SacⅡ位点，该位点位于lacZ基因的MCS区，CDS内部有一个PstⅠ的酶切位点（距离CDS最末端碱基的0.8kb处）。为确认CDS的大小和插入方向，科研人员用不同的限制酶切割重组质粒并进行电泳，结果如图B。下列叙述正确的是（ ） （A图为载体示意图，方框内表示载体中限制酶识别位点）；（B图为不同限制酶切割产物的电泳示意图，M为标准电泳条带） A. SpeⅠ酶切可用于判断CDS插入的方向 B. CDS插入时方向与lacZ基因的方向不同 C. CDS长度为2.6kb，在距一端0.5kb处有一个EcoRⅠ识别位点 D. 若重组质粒同时用EcoRⅠ和SpeⅠ酶切，电泳能检测到5个不同条带 【答案】BC 【解析】 【详解】A、由图可知，载体长度3.0Kb，再看图B，可知CDS长度为2.1+0.5=2.6。而Spe I酶切后产生的两个片段为4.3kb和1.3kb，由此只能推出CDS上有1个Spe I酶切位点，再检查MCS发现在Sac Ⅱ下面还有一个Spe I酶切位点（CDS基因末端），1.3正好是2.6的一半，说明Spe I酶切位点位于CDS的正中间位置，所以正插或反插结果一样，不能判断CDS插入的方向，A错误； B、CDS的终止子上游0.8kb处有一个Pst Ⅰ的酶切位点，分析图B可知，Spe I酶切割后产生了0.8kb的片段，分析图A可知，Pst I的酶切位点位于CDS终止子的位置，则与lacZ基因的方向相比，CDS插入时方向不同，B正确； C、线性空载体为3.0kb，MCS上有两个EcoR I位点，EcoR I酶切后产生3.0kb、2.1kb、0.5kb共3个片段，说明CDS长度为2.6kb，在距一端0.5kb处有一个EcoR I识别位点，C正确； D、由图B可知，重组质粒上有3个EcoR I位点，1个Spe Ⅰ位点，该重组质粒为一个环状质粒，若重组质粒同时用EcoR Ⅰ和Spe Ⅰ酶切，电泳能检测到4个不同条带，D错误。 三、非选择题 17. 线粒体是真核细胞的重要细胞器。当线粒体受损时，细胞通过清理受损的线粒体来维持细胞内的稳态，我国科研人员对此开展研究。完成下列问题： （1）科研人员研究发现，受损的线粒体可通过“线粒体自噬”及时被清理，“线粒体自噬”属于细胞自噬的一种，在一定条件下，受损的线粒体会被内质网包裹形成吞噬泡，吞噬泡与__________（填细胞器）融合形成自噬体，最终被清除；该细胞器的功能是__________。 （2）科研人员推测受损线粒体还可通过进入迁移体（细胞器在迁移中形成的一种囊泡结构）而被释放到细胞外，即“线粒体胞吐”。为此，科研人员利用绿色荧光标记迁移体，红色荧光标记线粒体，用药物C处理细胞使线粒体受损，若观察到__________，则可初步验证上述推测。 （3）为研究受损线粒体进入迁移体的机制，科研人员进一步实验。 ①真核细胞内的__________锚定并支撑着细胞器，不仅与细胞运动、分裂、分化有关，还与____________________（答出2点）等生命活动密切相关。 ②为研究K蛋白在线粒体胞吐中的作用，对用红色荧光标记了线粒体的细胞进行相应操作，检测迁移体中的红色荧光，操作及结果如图（备注：K基因能控制K蛋白的合成）。 图结果表明，K蛋白的功能是__________。 【答案】（1） ①. 溶酶体 ②. 能分解衰老、损伤的细胞器，吞噬并杀死侵入细胞的病毒或细菌 （2）（在迁移体中）红绿荧光重叠  （3） ①. 细胞骨架 ②. 物质运输、能量转化、信息传递、基因表达等生命活动密切相关 ③. 在线粒体受损时促进线粒体胞吐 【解析】 【小问1详解】 科研人员研究发现，受损的线粒体可通过“线粒体自噬”及时被清理，“线粒体自噬”属于细胞自噬的一种，在一定条件下，受损的线粒体会被内质网包裹形成吞噬泡，吞噬泡与溶酶体融合形成自噬体，最终被清除。溶酶体的功能是分解衰老、损伤的细胞器，吞噬并杀死侵入细胞的病毒或细菌，是细胞中的消化车间。 【小问2详解】 科研人员利用绿色荧光标记迁移体，红色荧光标记线粒体，用药物C处理细胞使线粒体受损，若观察到迁移体中同时出现绿色荧光和红色荧光也就是红绿荧光重叠，则可初步验证上述“线粒体胞吐”的推测。因为绿色荧光标记迁移体，红色荧光标记线粒体，如果在迁移体中同时检测到两种荧光，就说明受损的线粒体进入了迁移体，从而支持了受损线粒体通过进入迁移体而被释放到细胞外的推测。 【小问3详解】 ①真核细胞内的细胞骨架锚定并支撑着细胞器，不仅与细胞运动、分裂、分化有关，还与物质运输、能量转化、信息传递、基因表达等生命活动密切相关，细胞骨架是由蛋白质纤维组成的网架结构； ②分析题图可知，未敲除K基因并用药物C处理时，荧光相对值大，而敲除该基因并用药物C处理时，相对值小，说明K蛋白的作用是在线粒体受损时促进线粒体胞吐。 18. 受损伤的马铃薯细胞内酚氧化酶（PPO）和底物（酚类物质）直接接触，引起马铃薯的褐变。图1表示两种抑制剂对PPO的酶促反应速率的影响曲线图（其他条件均为最适条件），图2表示不同抑制剂降低酶活力的两个模型图。请回答下列问题： （1）酶的化学本质____________，PPO的作用机理是____________。 （2）图1所示实验的自变量有____________，结合图2分析，图1中抑制剂Ⅰ的作用机理属于____________（选填“模型A”或“模型B”），若抑制剂的量不变，提高抑制剂Ⅱ作用下的酶促反应速率的措施为____________。 （3）某兴趣小组为探究温度对PPO活性的影响，实验小组进行如下实验： ①PPO粗提液的提取是在____________（选填“低温”或“高温”）条件下将新鲜马铃薯用蒸馏水洗净、去皮，取20 g样品放入含50 mL磷酸缓冲液（pH值为5.5）的研钵中，同时加入少量石英砂，研磨、离心，上清液即为PPO粗提液。其中加缓冲液的目的是____________。 ②不同温度下PPO活性的测定（反应底物充足；实验结果中“+”越多，褐色越深。） 步骤顺序 试管1 试管2 试管3 试管4 试管5 试管6 试管7 试管8 PPO粗提液 2mL 2mL 2mL 2mL 酚类底物 2mL 2mL 2mL 2mL 温度预处理（5min） 0℃ 15℃ 30℃ 45℃ 反应 混合振荡 混合振荡 混合振荡 混合振荡 保温时间 5min 5min 5min 5min 记录结果 + ++++ ++++ ++ 为进一步探究PPO最适温度，应在____________范围内设置温度梯度。 【答案】（1） ①. 大多数酶是蛋白质，少数是RNA ②. 降低化学反应的活化能 （2） ①. 底物浓度、抑制剂的种类 ②. 模型A ③. 增加酶的数量 （3） ①. 低温 ②. 保持PPO的活性 ③. 【解析】 【小问1详解】 绝大多数酶的本质是蛋白质，少量是RNA，PPO（酚氧化酶）的作用机理是降低化学反应的活化能。   【小问2详解】 由图可知，图1所示实验的自变量有底物浓度、抑制剂的种类。模型A中抑制剂通过与底物竞争酶的活性部位，导致酶促反应速率降低，此时再增加底物的浓度，酶促反应速率会提高；模型B中抑制剂通过与酶结合改变了酶活性部位的空间结构，使底物不能与酶结合，从而导致酶促反应速率降低，此时再增加底物的浓度，酶促反应速率也不会提高。因此，图1中抑制剂I的作用机理属于模型A。若抑制剂的量不变，提高抑制剂II作用下的酶促反应速率的措施为增加酶的数量。 【小问3详解】 ①PPO在高温下有可能失活，PPO粗提液的提取是在低温条件下进行。过酸、过碱都会使酶的空间结构被破坏，使酶失活，研磨时加缓冲液研磨的目的是维持pH，保持PPO的活性。 ②15℃和30℃温度条件，PPO具有相同的活性，故该酶的最适温度位于15℃～30℃之间，故在15℃～30℃范围内设置温度梯度，可以进一步探究酶的最适温度。 19. 玉露是极具观赏性的景天科十二卷属多肉植物，长期适应弱光阴生环境。科研人员探究遮光胁迫对玉露光合作用的影响，设置自然光照组（正常绿叶）、持续遮光12d组（诱导叶片黄化）两组对照实验，分别测定叶片总叶绿素含量、净光合速率、呼吸速率、PSⅡ最大光化学效率（Fv/Fm，可直接反映叶绿体光反应结构与功能的完整性），实验结果如下表。回答下列问题： 实验组别 总叶绿素含量 （mg·g-1） 净光合速率 （umolCO2·m-2·s-1） 呼吸速率 （umolCO2·m-2·s-1） Fv/Fm（PSⅡ最大光化学效率） 自然光照组（正常绿叶） 1.15 2.91 1.82 0.819 遮光12d组（黄化叶片） 0.22 0.54 1.79 0.382 （1）玉露的光合色素分布在____________（填结构），为分析玉露的色素种类，可用____________法分离黄化苗和正常植株中的光合色素，在此方法提取过程中需用____________（试剂）提取色素，其原理是____________。 （2）黄化叶片组的叶绿素含量明显低于正常组，据表格分析，叶绿素减少的原因是____________。 （3）玉露属于兼性CAM植物，存在CAM补偿，其机制如下图，据图分析，在此机制下，白天玉露光合作用中的CO2来源为____________。除了上述原因外，推测黄化玉露的光合速率下降的原因还有____________影响白天碳反应进而影响光合速率。由此机制推测玉露适合生长在____________的环境。 【答案】（1） ①. 类囊体薄膜 ②. 纸层析 ③. 无水乙醇 ④. 光合色素易溶于有机溶剂##光合色素为脂溶性（色素） （2）叶绿体结构损伤（破坏）##叶绿体光反应结构和功能的完整性下降##类囊体结构破坏 （3） ①. 细胞呼吸和苹果酸分解 ②. 叶绿素含量下降，光反应产生的ATP、NADPH减少，苹果酸生成减少，导致分解产生的CO2减少 ③. 干旱##高温 【解析】 【小问1详解】 光合色素的分布场所是叶绿体的类囊体薄膜，分离不同光合色素利用色素在层析液中溶解度不同的原理，常用纸层析法，提取色素利用色素易溶于有机溶剂、不溶于水的特性，使用无水乙醇（有机溶剂）提取。 【小问2详解】 结合题干信息，Fv/Fm可反映光反应结构的完整性，表格中遮光组Fv/Fm远低于自然光照组，说明持续遮光叶绿体光反应结构和功能的完整性下降，导致叶绿素分解增加、合成受阻，叶绿素含量下降。 【小问3详解】 根据CAM机制图，玉露夜间将CO2固定为苹果酸储存在液泡中，白天苹果酸分解，释放CO2供给卡尔文循环，因此白天CO2来源除细胞呼吸外，还有液泡中苹果酸分解释放的CO2。黄化玉露除叶绿素减少导致光反应产生的ATP、NADPH不足外，持续遮光条件下植株整体代谢减弱，夜间固定储存的CO2减少，即苹果酸生成减少，白天暗反应可利用的CO2供应不足，进一步导致光合速率下降；玉露本身长期适应弱光环境，且CAM途径可减少蒸腾作用失水，因此适合生长在弱光干旱的环境中。 20. 埃博拉病毒（EBOV）是一种极其危险且罕见的病毒，其引起的埃博拉出血热是世界上最致命的病毒性出血热之一。NP蛋白在EBOV的复制中具有重要作用，也是检测EBOV的重要靶蛋白。研究人员从EBOV中分离出NP蛋白，并用于制备抗EBOV单克隆抗体，相关实验流程如图1所示。请回答下列问题： （1）在培养骨髓瘤细胞时，所用培养液中常需要添加血清，原因是________。图1中给小鼠注射NP蛋白的目的是________。 （2）利用抗EBOV单克隆抗体检测血浆中EBOV含量的原理如图2所示。为判断某人是否感染了EBOV，研究人员进行了两组检测。先将抗EBOV单克隆抗体固定在支持物上，甲组向检测体系中同时添加一定量该人的血液和适量酶标记的NP蛋白；乙组向检测体系中只添加等量酶标记的NP蛋白。保温一段时间后洗涤，再向甲、乙两组检测体系中添加a，最后比较b。 ①甲组向检测体系中添加一定量该人血液的同时，还需加入适量酶标记的NP蛋白，目的是________。 ②请将上述步骤补充完整：a．________。b．________。 ③预期结果和结论：________。 【答案】（1） ①. 提供细胞生长所需的营养物质（如生长因子）和激素 ②. 诱导小鼠产生针对NP蛋白的特异性B淋巴细胞 （2） ①. 作为竞争性抗原，与患者血液中的NP蛋白（若存在）竞争结合固定在支持物上的抗体 ②. 添加酶反应的底物（如白色底物） ③. 检测并比较甲、乙两组的蓝色的显色强度 ④. 若甲组蓝色的显色强度显著低于乙组，说明患者血液中含有NP蛋白（感染EBOV）；若甲、乙两组蓝色的显色强度无显著差异，说明患者未感染EBOV 【解析】 【分析】本实验通过竞争性ELISA法检测EBOV感染。 血清作用：提供细胞培养所需的生长因子。 免疫小鼠：获取特异性B细胞以制备单克隆抗体。 检测原理：利用抗原-抗体竞争结合及酶标记信号放大，定量分析NP蛋白存在与否。 关键点在于竞争结合的逻辑和对照组的设置，确保检测结果的准确性和特异性。 【小问1详解】 动物细胞培养时，血清提供必需的营养成分和生长因子，弥补合成培养基的不足，确保细胞正常生长。通过免疫小鼠，其脾脏中会产生能分泌抗NP蛋白抗体的B细胞，这是制备单克隆抗体的关键步骤，所以图1中给小鼠注射NP蛋白。 【小问2详解】 ①根据题意信息可知，若血液中存在EBOV的NP蛋白，会与酶标记的NP蛋白竞争结合抗体位点，减少酶标记物的结合量，降低检测信号，所以加入适量酶标记的NP蛋白作为竞争性抗原，与患者血液中的NP蛋白（若存在）竞争结合固定在支持物上的抗体，从而通过信号变化判断感染情况。 ②根据图示反应原理，待测抗原中的目标抗原和酶标记抗原竞争结合固相抗体，标记抗原的酶可催化白色底物变为蓝色产物。所以a.可以向甲、乙两组检测体系中添加添加酶反应的底物（如白色底物），b．最后检测并比较甲、乙两组的蓝色的显色强度。 ③如果如果血液中NP蛋白的含量越少，酶标记抗原和抗体结合得越多，酶催化生成的蓝色产物就越多，检测体系蓝色就越深。预期结果和结论：若甲组蓝色的强度显著低于乙组，说明患者血液中含有NP蛋白较多（感染EBOV）；若甲、乙两组蓝色的显色强度无显著差异，说明患者未感染EBOV。 21. 白桦是我国东北地区重要的绿化树种，土壤盐渍化严重制约其生长，而BpMYB5 基因是调控白桦耐盐性的关键基因。为验证该基因的耐盐功能，研究人员利用无缝克隆技术，将BpMYB5 基因与绿色荧光蛋白(eGFP)基因融合，构建了pBI121-BpMYB5-eGFP 过表达载体，开展相关实验研究。 注：KanR 为卡那霉素抗性基因，TetR 为四环素抗性基因。 （1）①过程是利用PCR 技术将质粒线性化，进行PCR扩增质粒时，需要质粒、引物、______、含 Mg²⁺的缓冲液和耐高温的 DNA 聚合酶；该过程中引物应选择_____。 （2）为确保BpMYB5 基因与eGFP 基因融合后能成功构建融合基因，并表达出完整的融合蛋白，在引物设计时，应去除 。 A. BpMYB5 基因中编码起始密码子的序列 B. BpMYB5 基因中编码终止密码子的序列 C. eGFP 基因中编码起始密码子的序列 D. eGFP 基因中编码终止密码子的序列 （3）已知相关基因的编码链(与模板链互补的DNA链)的部分序列如下表所示(AUG为起始密码子，UAG、UAA、UGA 为终止密码子)。为实现二者的无缝克隆且保证融合蛋白的正常表达，图中引物R₁ 的设计至关重要，该引物的碱基序列应为5'—_______—3'。 BpMYB5 基因序列 5'—AATGCCTAGT……GTGTTTTAGCAT-3' eGFP 基因序列 5'—CATGTCCAGC……AACCCATAACCA-3' （4）实验人员将重组的pBI121 - BpMYB5 - eGFP载体(Ti 质粒)通过______法侵染经消毒后的白桦种子，为筛选出成功导入重组质粒的白桦种子，培养基上需要添加______。 （5）将筛选得到的转基因种子经培养可获得转基因白桦植株，通过观察_____以了解 BpMYB5 基因的表达水平和表达部位。 【答案】（1） ①. 四种脱氧核苷酸/dNTP ②. 引物2和引物3 （2）B （3）GCTGGACATAAACAC （4） ①. 农杆菌转化 ②. 卡那霉素 （5）绿色荧光强度和分布 【解析】 【小问1详解】 PCR扩增的原料为四种脱氧核苷酸（dATP、dTTP、dCTP、dGTP，统称四种dNTP），此外还需要模板（质粒）、引物、含Mg²+的缓冲液和耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）；①过程为质粒的线性化，需要扩增质粒上启动子到终止子的片段，结合图示引物位置，引物2和引物3可与质粒的互补链结合，沿5'→3'方向扩增出目标线性化质粒，引物1和4则用于扩增目的基因，因此该过程选引物2和3。 【小问2详解】 要使BpMYB5基因与eGFP基因融合后表达出完整的融合蛋白，需保证两个基因的编码序列连续翻译，无提前终止的情况： A、融合蛋白的翻译从BpMYB5基因的起始密码子开始，因此需保留BpMYB5的起始密码子序列，A错误； B、若保留BpMYB5基因的终止密码子，翻译会在BpMYB5基因末端提前终止，无法合成包含eGFP的完整融合蛋白，因此需去除该序列，B正确； C、 eGFP基因作为融合的下游基因，其起始密码子无需保留（翻译从上游BpMYB5的起始密码子开始），但这是基因融合的天然结果，并非引物设计时需主动去除的序列，C错误； D、融合基因的翻译需在eGFP基因的终止密码子处结束，因此需保留eGFP的终止密码子序列，D错误。 【小问3详解】 无缝克隆的核心是让目的基因与线性化载体的末端存在互补序列，实现无酶连接；同时需保证融合基因翻译连续，结合题干序列分析：题中 BpMYB5 基因的3'端TAG对应终止密码子 UAG，那前一位密码子应该是 TTT所对应的UUU，按照融合蛋白能够正常表达的思路，下一个密码子应该是eGFP 基因5'端的ATG所对应的起始密码子AUG。eGFP 基因的5'端序列为CATGTCCAGC，在设计引物时，去掉eGFP 基因5'端的C，该序列需与 BpMYB5的3'端互补衔接，作为无缝克隆的同源序列；引物R₁为 BpMYB5 基因的下游引物，需包含eGFP 编码链的5'端互补序列和 BpMYB5 编码链的3'端互补序列，最终序列为5'-GCTGGACATAAACAC-3'。 【小问4详解】 题干中明确将重组质粒导入农杆菌，再通过农杆菌转化法侵染白桦种子(植物受体细胞)，该方法是植物基因工程中最常用的转化方法，利用农杆菌的 Ti质粒将T-DNA上的目的基因整合到植物细胞的染色体DNA上；重组质粒上的 KanR(卡那霉素抗性基因)为标记基因，四环素抗性基因(TetR)未被整合到重组质粒的T-DNA上，因此为筛选出成功导入重组质粒的白桦种子，需在培养基中添加卡那霉素，未导入重组质粒的细胞无卡那霉素抗性，会被抑制生长，仅有导入的细胞能存活。 【小问5详解】 实验中将 BpMYB5 基因与eGFP(绿色荧光蛋白)基因融合构建表达载体，绿色荧光蛋白可作为报告基因；绿色荧光的强度与融合蛋白的合成量呈正相关，反映BpMYB5 基因的表达水平(荧光越强，基因表达量越高)；绿色荧光的分布对应融合蛋白的分布位置，反映BpMYB5 基因的表达部位(如根、茎、叶的荧光分布，说明基因在该部位表达)。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $