黑龙江省哈尔滨师范大学附属中学2025-2026学年高二下期末考试生物试题

**基本信息** 哈尔滨师大附中高二期末生物试卷以SARS-CoV-2、线粒体移植等真实情境为载体，通过基础判断、实验分析、综合探究题，梯度考查细胞结构、代谢调控及生物技术应用，凸显生命观念与科学思维。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选|15题/30分|病毒结构、物质运输、酶活性调节|结合SARS-CoV-2结构图考查生命观念，如第1题遗传物质判断| |多选|5题/15分|细胞分泌途径、呼吸酶功能|以ERGIC细胞器为情境，考查科学思维，如第16题分泌途径分析| |非选择|5题/55分|内质网应激、光合呼吸实验、基因工程|25题融合EGFP与LfcinB基因设计，体现探究实践，考查生物技术操作与分析|

哈尔滨师范大学附属中学2025-2026学年度下学期高二期末考试 生物学试题 一、选择题（本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题 目要求的。) 1.SARS-CoV-2的广泛传播曾给人类带来巨大的灾难。如图为 脂质膜 SARS-CoV-2的结构图。下列有关叙述正确的是() 核蛋白壳 A.SARS-CoV-2离开细胞后会立即死亡 包 刺突 B.SARS-CoV-2的遗传信息储存在RNA中 C.SARS-CoV-2的结构简单，只含有核糖体 D.图中结构是在光学显微镜下观察得到的 正义单链RNA 2.研究人员在深海热液喷口发现了一种新型嗜热细菌，并对其细胞内的主要化学成分进行了分析。结 果如下表所示： 化合物 元素组成 功能 甲 C、H、O、N、P 遗传物质 乙 C、H、O、N, 有的含有S等 生命活动的主要承担者 丙 C、H、0,其比例通常为1：2：1 重要的能源物质 C、H、O,还含有P甚至N 构成细胞结构 请根据以上信息分析，下列说法错误的是( A.化合物丙可参与组成该菌的细胞壁，且可被果胶酶催化分解 B.化合物丁可组成细胞膜的结构成分 C.化合物甲在该菌的拟核中高效、有序地完成复制 D.化合物乙的多样性可能与其单体的种类、数量、排列顺序有关 3.新合成的肽链易被氧化，从而影响后续折叠。伴侣蛋白GroEL及其辅因子GroES能帮助细胞内己被 氧化的多肽链进行折叠，CoX是一种在此过程中与GroEL结合的蛋白质。如图为大肠杆菌中某多肽链 的折叠过程，下列叙述错误的是() 已被氧化 SH 的多肽链 GroES CnoX ◆S-OH CnoX GroEL 折鑫的 A.GroS与GroEL的结合引发CnoX的释放和多肽链的折叠 B.CnoX与多肽链形成二硫键，能修正多肽链的氧化 C.多肽链折叠后的空间结构与氨基酸的特定排列顺序有关 D.该多肽链的折叠需要内质网和高尔基体的参与 4.线粒体功能障碍可引发多种疾病。通过在靶细胞膜表面表达结合蛋白，可将外源正常线粒体精准移 植至靶细胞内，从而有望治疗相关疾病。研究发现，部分外源线粒体可在靶细胞中”存活”，且出现与内 源线粒体融合并增殖的现象。下列叙述错误的是() A.靶细胞可特异性识别外源线粒体，并通过转运蛋白将其移至细胞内 B.外源线粒体和自身功能障碍的线粒体均有可能被靶细胞溶酶体降解 C.破坏由蛋白质纤维构成的细胞骨架，对线粒体的融合有影响 D.线粒体增殖所需的蛋白质大部分由细胞核DNA指导合成 5.染料Z是一种能与蛋白质上的氨基特异性结合的小分子荧光染料。该染料不能透过细胞膜且对细胞 无毒性。下列说法错误的是() A.染料Z和苏丹Ⅲ都属于脂溶性染料 B.染料Z和甲紫都可以将染色体染色 C.染料Z和台盼蓝都可以用于鉴别动物细胞是否死亡 D.染料Z和标记膜蛋白的红、绿荧光染料都可用于探究细胞膜的流动性 6.蛋白分泌是细胞间信息传递的重要方式，大多数分泌蛋白是通过内质网一高尔基体途径(ER-Golgi) 分泌的。研究表明，细胞中还存在着一类不依赖ER-Go1gi分泌的蛋白质，它们以非经典分泌途径(USP) 分泌到细胞外发挥功能。下列叙述错误的是() A.细胞间的信息传递离不开由蛋白质纤维构成的细胞骨架的作用 B.可用放射性同位素N标记氨基酸来研究某分泌蛋白的分泌途径 C.在ER-Go1gi分泌途径中，高尔基体具有重要的交通枢纽作用 D.USP作为ER-Golgi的有效补充，利于细胞内蛋白质稳态的维持 7.某研究小组将生理状态一致的紫色鸭跖草叶片下表皮细胞均分为两组，分别置于葡萄糖和麦芽糖溶 液中进行实验，结果如图所示。己知植物细胞不能直接吸收麦芽糖，下列叙述错误的是() 7 图 ✉漫04… N 甲 0 时间 注：原生质体相对体积=当前原生质体体积/初始原生质体体积 A.甲组对应麦芽糖溶液，乙组对应葡萄糖溶液，二者的初始物质的量浓度可能相同 B.图中M、N两点对应的同一细胞的细胞液浓度大小为M=N C.若将甲组处理后的细胞置于清水中，原生质体相对体积可恢复至1，说明细胞保持活性 D.一定范围内适当提高实验温度，曲线甲的下降速率会加快，曲线乙的回升阶段会提前 8.如图为小肠上皮细胞吸收和转运单糖的示意图。下列相关叙述正确的是() 肠腔 、 GLUT-5 SGLT-1 。 器 小肠上 ATP 皮细胞 ADP+Pi 。葡萄糖 ↓GLUT-2 ·Nat ▲果糖 到毛细血管 A.肠腔中的葡萄糖通过SGLT-1进入细胞的方式属于协助扩散 B.果糖通过GLUT-5进入细胞的过程需要消耗ATP C.葡萄糖通过GLUT-2运出细胞时，是顺浓度梯度进行 D.降低细胞外Na浓度会促进SGLT-1对葡萄糖的转运 9.在进行“比较过氧化氢在不同条件下分解”的实验时，编号为①-④的4支试管中分别加入2mLH,0 溶液，不同实验处理及结果如下图。下列关于该实验的分析，正确的是( 2滴FeCl3溶液2滴肝脏研磨液 点燃的 卫生香 2mL过氧 气泡 化氢溶液 ① ② ④ 常温 90℃ 常温 常温 A.该实验的自变量是温度，因变量是气泡的数量 B.该实验无法探究温度对酶活性的影响 C.①与②对照，说明加热可降低化学反应活化能 D.②与④对照，说明过氧化氢酶具有高效性 10.图为细胞代谢关键酶PykA的别构调节机制：酶具有活性中心+别构调节位点，底物结合活性中心 启动催化，代谢终产物可特异性结合别构位点，使酶发生构象改变、永久失活，实现代谢反馈调控。 列叙述正确的是() 活性状态 别构位点 活性状态：活性中心开放，抑制状态：终产物结 底物结合 合别构位点，酶构象 扭曲，活性中心关闭 A.终产物与底物竞争酶的活性中心，属于竞争性抑制 B.该反馈抑制机制可避免代谢产物过量积累，节约物质能量 C.别构抑制剂结合酶后，不会改变酶的空间结构 D.底物达到饱和浓度后，终产物的抑制作用会完全消失 ew 11.剧烈运动过程中，骨骼肌细胞有氧呼吸供能占比随运动时间变化趋势如图。下列叙述错误的是( 80 60 40 20 78.6 0 0 120240360 480 运动时间(s) A.60s时，肌细胞的无氧呼吸产生乳酸 B.78.6s时，有氧呼吸与无氧呼吸消耗葡萄糖量相等 C.肌细胞水解ATP生成的ADP可循环利用 D.运动后期，供氧增加促进了线粒体内反应物的彻底氧化 12.油菜和水稻均为我国重要的农作物。科研工作者在温度、水分均适宜的条件下，测得两种农作物光 合速率与呼吸速率的比值(P/R)随光照强度变化的曲线如下图所示。下列相关叙述错误的是() P/RA 水稻 3 油菜 2 0 a 6 d光照强度 A.据图可推测油菜在弱光条件下能更高效地利用光能进行光合作用 B.光照强度为a时，油菜叶肉细胞产生ATP的场所是线粒体和叶绿体 C.在光照强度为c的条件下每日光照12小时，水稻能正常生长 D.光照强度大于d时，限制水稻P/R值增大的主要外界因素可能是CO,浓度 13.研究人员以山楂为原料，先接种酵母菌，发酵96小时再接种老陈醋的醋醅（含醋酸菌）进行发酵， 酿造山楂醋。如图为发酵液中酒精含量和总酸含量随发酵时间变化的曲线。下列相关分析不正确的是 8 5 6 a04 4 3 卖2 的1 0 0 24487296 24487296120 时间(h) 时间(h) A.发酵024小时酵母菌进行了有氧呼吸 B.发酵096小时总酸含量上升是由于醋酸菌代谢产生酸类物质 C.96小时后应将发酵温度适度调高 D.发酵过程中有机物的能量有一部分留在发酵产品中 14.黄连素是一种异喹啉类生物碱，属于植物次生代谢物，在抗菌、抗炎等方面有显著效果。下图为利 用植物组织培养相关技术生产黄连素的主要过程，相关叙述错误的是() ② ③ 外 愈 胚状体 试管苗 ① 植 伤 组 体 ④ 织 细胞悬液 高产细胞系 素 A.植物组织培养的过程中常用体积分数70%的酒精、质量分数5%次氯酸钠溶液对外植体进行消毒 B.为了防止实验过程中因杂菌对实验的不良影响，通常需要在实验前对外植体灭菌处理后再通过 ①脱分化形成愈伤组织 2 C.过程②为再分化，再分化时需调整培养基中生长素和细胞分裂素的比例；最后生产的产物黄连 素不是细胞基本生命活动所必需的 D.过程④高产细胞系产黄连素的速度和产量均优于过程③试管苗 15.为探究编码酪氨酸酶的T基因对狗毛色的影响，有人通过如图所示过程获得了两只小狗。下列叙述 正确的是() 卵子 成纤维 细胞乙 胚胎3小狗乙 精子 敲除T基因、 受精卵 胚胎1H 成纤维 细胞甲 胚胎2小狗甲 卵子 卵子 A.采集卵子后立即与获能的精子受精，可有效提高受精率 B.将胚胎1培养至桑葚胚期，取成纤维细胞完成后续实验 C.用蛋白酶合成抑制剂激活重构胚，可获得胚胎2和胚胎3 D.利用现代生物技术获得的两只小狗毛色和性别可能都不一样 二、选择题（本小题共5个小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或者多 项是符合题目要求的，全部选对得3分，选对但选不全得1分，选错得0分) 16.近年来发现一种新的细胞器：内质网高尔基体中间体(ERGIC),ERGIC不仅是参与调控内质网一高 尔基体经典分泌途径的核心细胞器，同时也是非经典分泌途径的枢纽，分泌过程如图所示。EGIC53和 TED是ERGIC膜上的两种关键蛋白，ERGIC53可识别糖基化蛋白（糖基化是糖分子与蛋白质、脂质等生 物大分子结合的过程)；TMED能够调控多种非经典分泌蛋白离开ERGIC.。有关叙述正确的是() 细胞膜 经典分泌途径 非经典分泌途径 自噬体纣 分泌途径到 ERGIC TMED 寡聚体 ERGIC53 TMED TMED A.经典分泌途径和非经典分泌途径所需要的能量全部由线粒体提供 B.可用差速离心法分离出ERGIC C.内质网可能使蛋白质糖基化 D.能否运输非经典分泌的蛋白取决于ERGIC膜上TMED的变化 17.ATP可将蛋白质磷酸化，磷酸化的蛋白质会改变形状做功，从而推动细胞内系列反应的进行（机理 如下图所示)。下列叙述正确的是( 反应物 M ATP 蛋白质 ATP推动细胞做功 A.主动运输过程中，载体蛋白中的能量先增加后减少 B.ATP推动蛋白质做功的过程，存在吸能反应过程 C.ATP水解过程中，末端磷酸基团具有较高的转移势能 D.磷酸化的蛋白质做功，失去的能量主要用于再生ATP 18,乳酸脱氢酶(ADH)和乙醇脱氢酶(LDH)能催化不同类型的无氧呼吸。低氧胁迫处理玉米第3天，研究 人员发现玉米品系A根系中ADH活性显著提高，LDH活性变化不显著，而玉米品系B根系中LDH活性显 著提高，ADH活性变化不显著。下列叙述错误的有() A.ADH和LDH都能为丙酮酸的分解提供活化能 B.ADH和LDH催化丙酮酸分解时，利用[H的能量生成少量ATP C.低氧胁迫下，玉米品系A体内可能出现的呼吸产物有酒精、乳酸、CO,等 D.可通过酸性重铬酸钾溶液是否变为橙色鉴定玉米品系B是否产生酒精 19.在某地区种植的冬小麦，其叶片经常出现黄化而患黄化病。甲同学认为这是土壤中缺磷引起的，乙 同学认为这是土壤中缺镁引起的。为判断哪个观点正确，丙同学利用三组长势相同的冬小麦幼苗完成了 下列实验。下列叙述错误的是( 组别 培养液 实验处理 观察指标 ① 全素培养液 ② 缺磷培养液 相同且适宜条件下培育相同的一段时间 幼苗的生长发育状况 ③ 缺镁培养液 A.该实验的自变量是培养液中磷、镁的有无及幼苗的生长发育状况 B.组别①是对照组，组别②③都是实验组 C.若②组幼苗出现黄化，①③组正常，则说明黄化病是由缺磷引起的 D.若①组正常，②③两组幼苗都出现黄化，则说明黄化病是由磷和镁共同缺乏引起的 20.双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前 常用杂交一杂交瘤的方法来制备。其制备过程如下图所示：据图分析，下列相关叙述正确的是() 抗原A 抗原B 抗原A 抗原B 抗体A 双特异 抗体B 性抗体 细胞A 细胞B 双特异性抗体 ② 1③ 细胞C ⑤ 单克隆 ④ 单克隆 杂交瘤细胞 杂交一杂交瘤细胞 A.细胞B和细胞C是从己免疫小鼠的骨髓中取出的多种B淋巴细胞 B.过程②④均需要采用抗原-抗体杂交技术 C.过程⑤既可在体内培养也可在体外培养 D.与传统的单克隆抗体相比，双特异性抗体可能在免疫治疗方面有更广阔的应用前景 三、非选择题（本题共5个小题，共55分） 21.(10分)内质网是真核细胞中由膜围成的连续的管道系统，与细胞中多种物质的形成有关。 错误折叠蛋白 Bit 活化 剪接 R Ca2+通道 HacI mRNA 成熟的HacI mRNA HacI蛋白 Bip基因 图1 图2 (1)粗面内质网是蛋白质等大分子物质的合成、加工场所和运输通道。当错误折叠蛋白在内质网腔内积 聚时，会引发内质网应激(ES)。正常状态下，内质网上的膜蛋白处于失活状态。当错误折叠蛋白引发 ERS时，IRE1就会被活化。活化的IRE1一方面可促进HacI蛋白的合成，该蛋白通过 (选填“促进”或“抑制”)Bip基因的表达，使错误折叠蛋白在Bip的协助下运出内质网。另一方面， 活化的IRE1还可通过切割RNA影响核糖体的装配，进而减少 的合成以缓解ERS。 (2)光面内质网是磷脂的合成场所，新合成的磷脂通过多种方式转移到其他结构中。研究发现，在内质 网膜与线粒体外膜之间，通过多种蛋白质相互作用形成接触位点(MAMs),如图2所示。当破坏MAMs中 的某蛋白时，磷脂会在MAMs的内质网侧积累，这说明线粒体获得磷脂的关键结构是。若在内质网 与高尔基体之间没有类似MAMs的结构，推测内质网合成的磷脂转运到高尔基体的方式最可能是 (3)内质网是细胞的“钙库”，己知一定浓度的Ca可以提高有氧呼吸酶的活性。当ES发生时，线粒体 有助于内质网恢复稳态，分析其机理是 22.(10分)芽殖酵母属于单细胞真核生物。为寻找调控蛋白分泌的相关基因，科学家以酸性磷酸酶(P 酶)为指标，筛选酵母蛋白分泌突变株并进行了研究。 (1)酵母细胞中合成的分泌蛋白一般通过 作用分泌到细胞膜外。 (2)用化学诱变剂处理，在酵母中筛选出蛋白分泌异常的突变株(sec1)。无磷酸盐培养液可促进酵母P 酶的分泌，分泌到胞外的P酶活性可反映P酶的量。将酵母置于无磷酸盐培养液中，对sc1和野生型 的胞外P酶检测结果如下图。据图可知，24℃时sec1和野生型胞外P酶随时间而增加。转入37℃后， sec1胞外P酶呈现 的趋势，表现出分泌缺陷表型，表明sec1是一种温度敏感型突变株。 ①24C培养 ②转入37C培养 的每70厂③转回24℃，同时加入蛋白合成抑制剂 60 野生型 50 兰 secl 20 10 ② ③ 0 23456 时间h) (3)37℃培养1h后电镜观察发现，与野生型相比，sec1中由高尔基体形成的分泌泡在细胞质中大量积 累。由此推测野生型Sec1基因的功能是促进 的融合。 (4)由37℃转回24℃并加入蛋白合成抑制剂后，sec1胞外P酶重新增加。对该实验现象的合理解释是 (⑤)现已得到许多温度敏感型的蛋白分泌突变株。若要进一步确定某突变株的突变基因在37℃条件下影 响蛋白分泌的哪一阶段，可作为鉴定指标的是：突变体 A.蛋白分泌受阻，在细胞内积累 B.与蛋白分泌相关的胞内结构的形态、数量发生改变 C.细胞分裂停止，逐渐死亡 23.(12分)某兴趣小组发现樱桃受机械损伤后会加速腐烂，推测这一现象与损伤导致的樱桃有氧呼吸 速率增大有关。基于这一假设，他们绘制了樱桃细胞呼吸过程的图解如图1，表示了物质A至E及呼吸 途径①至④。为验证该假设，设计了如图2实验装置，并对比了未受损伤与机械损伤的樱桃在有氧环境 下的呼吸速率。回答下列问题： 葡萄糖 有色液滴 p-活塞 ① 橡皮塞 容器刻度管 E+B 丙酮酸 ② 消毒的 鲜樱桃 20%NaOH溶液 图1 图2 (1)图1中，物质A代表一， 它是细胞呼吸的重要产物之一。过程②发生在樱桃细胞的 中。 (2)图2装置中，可通过测定 的消耗量来评估樱桃的有氧呼吸速率。 (3)如果实验结果显示，与完整未损伤的樱桃相比，受损伤的樱桃在图2装置中引起的有色液滴移动速 度更快，则表明樱桃的机械损伤会 其有氧呼吸速率。本实验设计依据的原理是有氧呼吸速率 的高低可以通过 来间接反映。 (4)ATP合酶（利用电化学势能催化AP的合成）是线粒体内膜上的重要结构，为确定ATP合酶的功能， 研究人员进行了线粒体膜重建实验，过程如下，请完成下表。 实验目的 简易操作步骤 分离内膜包裹的基质 利用渗透作用的原理，使线粒体的外膜先吸水涨破，经离心后取沉淀物。 用超声波处理使线粒体破裂，破裂的线粒体内膜能够自封闭成内膜小泡， 获取内膜小泡 其上结合有① 0 用脲处理使内膜上附着的酶颗粒脱落，将处理后的样品离心后，分别收集沉 ② 淀和上清液。 加入pH缓冲液，光滑型小泡和ATP合酶颗粒均不能合成ATP;将分离的酶 鉴定ATP合酶的功能 颗粒与内膜小泡重新结合，小泡具有ATP合成的能力。 上述实验结果表明，ATP合酶正常发挥功能需附着在线粒体内膜上，若其脱离了内膜则无法合成，推测 原因是 24.(11分)水稻生长需依次经过抽穗期、灌浆期、乳熟期、蜡熟期等时期。下图是水稻叶肉细胞光合 作用和呼吸作用部分过程示意图。 ① ② NADPH CO H2O-- 6H12O [H] ③ ④ 下表是水稻的早衰型品种和持绿型品种在相应实验条件下测得的光合作用指标。 生长时 光补偿点(umol-m2.s-1) 光饱和点(molm2.s1) 最大净光合速率C02(molm2.s1) 期 品种甲 品种乙 品种甲 品种乙 品种甲 品种乙 抽穗期 63 46 1936 2000 23.13 26.98 蜡熟期 75 72 1732 1365 19.17 12.63 (1)上图中④过程发生的场所是 ①一④过程中能产生ATP的有 (2)进入蜡熟期后，早衰型品种出现籽叶皆黄”现象，而持绿型品种出现“叶青籽黄的现象。用这个时期 的两个品系叶片进行色素提取和分离实验，根据上表数据分析，在滤纸条上，由上到下第三条色素带较 宽的是品系。（填“甲”或“乙）。 (3)科学家从水稻叶肉细胞中分离出类囊体用磷脂分子包裹形成下图1所示的“油包水液滴”结构，在其中 加入足量NADP+、ADP等物质，并对该结构采取明暗交替处理，一段时间内检测此结构内产生NADPH 的量，结果如下图2所示，说明“油包水液滴”内的人工光反应系统构建成功。原因是在明期类囊体上发 生 产生并积累NADPH,在暗期NADPH的含量保持稳定其原因是 明暗 0. 14.0 0. 12.0 10 ▣光下0增加量 a 0 ■黑暗中0，消耗量 0. 油外膜 012243648 60 时间（分钟) 七4温度 图1 图2 图3 (④)进一步将相关酶等物质加入“油包水液滴”内，通入充足的 作为原料，形成化学反应循环。 用该体系A组明暗(1秒光照，1秒黑暗)交替进行了60分钟，B组持续进行了30分钟光照，测定有 机物含量，则A组 (填><”或=”)B组。由暗转明期，C3含量会 (⑤)将四组相同的水稻培养在密闭的装置中，控制不同的温度条件，若12小时光照，12小时黑暗，依据 图3的数据，t1~t4比较， 温度更适于水稻生长。 25.(12分)牛乳铁蛋白肽(LfcinB)是由25个氨基酸组成的小分子抗菌肽，具有广谱抗菌活性，但 其分子量小（约4kDa),常规电泳难以检测。为提高表达效率和便于纯化，科研人员将增强型绿色荧光 蛋白基因(EGFP)与LfcinB基因融合，并在两个基因之间设计了甲酸裂解位点（融合蛋白可在酸性条 件下特异性断裂)。重组质粒pPIC9K-EGFP-LfcinB的构建过程如图1所示，图2为重组酵母在甲醇诱导 过程中的生长曲线。请回答下列问题： A链（编码链） 引物2 3 B链（模板链） 3EGPP基因工3 引物1 PAOXI 25 PAOXI BamH I 20 Amp EcoR I pPIC9K 15 LfcinB 8 10 Amp pPIC9K 5 AOXI 0 061224364860728496108 诱导时间6 Kan 图1 图2 注：EGFP:增强型绿色荧光蛋白；P:甲醇诱导型启动子；T:终止子； Amp:氨苄青霉素抗性基因；Kan:卡那霉素抗性基因；Ori:复制原点。 (1)图1中，为获得EGFP基因片段并保证其与质粒pPIC9K正确连接，设计引物时需在引物1和引物2 的 端分别添加限制酶 和 的识别序列。质粒上的Amp和Kan基 因的作用是 (2)将重组质粒线性化（切成线状）后转入毕赤酵母GS115.已知毕赤酵母GS115为组氨酸缺陷型菌株（自 身无法合成组氨酸)，而重组质粒上带有组氨酸合成相关基因。转化后需在 (填“含组氨 酸”或“不含组氨酸”)的培养基上筛选阳性克隆，理由是 (3)由图2可知，重组酵母在甲醇诱导下，048h细胞密度迅速增加，48h后增速减缓，84h左右达到最 大密度。甲醇在此实验中的作用是 ;若在488nm激发光下观察到酵母细胞发出绿色荧光， 说明 (4)融合蛋白EGFP-LfcinB在酵母细胞内表达后，需对酵母细胞进行 处理，以释放融合蛋 白。纯化后的融合蛋白用 处理，目的是切除EGFP标签，获得单独的LfcinB蛋白。 哈尔滨师范大学附属中学2025-2026学年度下学期高二期末考试 生物学试题参考答案 一、选择题（每小题2分，共30分） 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 B A D A A B B C B B 题号 11 12 13 14 15 答案 B B B B C 二、选择题（每小题3分，共15分） 16 17 18 19 20 BCD ABC ABD AD BCD 三、非选择题（55分） 21．（10分，每空2分） (1) 促进 错误折叠蛋白 (2) MAMs中的某蛋白 以囊泡的形式转运 (3)内质网中的Ca2+通过MAMs中的Ca2+通道进入线粒体，提高了有氧呼吸酶的活性。线粒体的有氧呼吸增强，为错误折叠蛋白的运输提供能量，从而使内质网腔内的错误折叠蛋白减少，有利于内质网恢复稳 22．（10分，每空2分） (1)胞吐 (2)先上升后下降 (3)分泌泡与细胞膜 (4)积累在分泌泡中的P酶分泌到细胞外 (5)B 23． （12分，除标注外，每空1分） (1) 水（H2O） 细胞质基质 (2)氧气（O2） (3) 提高（或加快）（2分） 有色液滴的移动情况 (4) ①ATP合酶（2分） ②将ATP合酶与内膜小泡分离（2分） 无法在膜两侧形成ATP合成所需的H+浓度梯度（或电化学势能）（2分） 24．（11分，除标注外，每空1分） (1) 细胞质基质和线粒体基质 ①③④ (2) 甲（2分） (3) 光反应 NADPH没有生成也没有消耗（2分） (4) CO2 > 减少 (5) t3 25．（12分，除标注外，每空1分） (1) 5´ BamHⅠ EcoRⅠ 作为标记基因，用于筛选含有重组质粒的细胞 (2)不含组氨酸 只有成功导入重组质粒的酵母细胞才能获得组氨酸合成基因，从而在不含组氨酸的培养基上生长，未转化的细胞则无法生长（2分） (3)诱导目的基因表达 EGFP-LfcinB融合蛋白已在酵母细胞内成功表达（2分） (4) 裂解（或破壁） 甲酸 答案第1页，共2页 答案第1页，共2页 学科网（北京）股份有限公司 $B4正面 ■ 哈尔滨师范大学附属中学2025-2026学年度下学期高二期末考试生物学答题卡 ■ 贴条码区域 姓名: 班级: 考号: ■ ■ 一、单项选择题： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 [ A ] [ A ] [ A ] [ A ] [ A ] [ A ] [ A ] [ A ] [ A ] [ A ] [ A ] [ A ] [ A ] [ A ] [ A ] [ B ] [ B ] [ B ] [ B ] [ B ] [ B ] [ B ] [ B ] [ B ] [ B ] [ B ] [ B ] [ B ] [ B ] [ B ] [ C ] [ C ] [ C ] [ C ] [ C ] [ C ] [ C ] [ C ] [ C ] [ C ] [ C ] [ C ] [ C ] [ C ] [ C ] [ D ] [ D ] [ D ] [ D ] [ D ] [ D ] [ D ] [ D ] [ D ] [ D ] [ D ] [ D ] [ D ] [ D ] [ D ] 二、不定项选择题： 16 17 18 19 20 [ A ] [ A ] [ A ] [ A ] [ A ] [ B ] [ B ] [ B ] [ B ] [ B ] [ C ] [ C ] [ C ] [ C ] [ C ] [ D ] [ D ] [ D ] [ D ] [ D ] ■ 请在各题的答案区域内作答，超出黑色边框区域的答案无效！ 请在各题的答案区域内作答，超出黑色边框区域的答案无效！ ■ 1 2024 HSDFZ （3） 21.（10分） （1） 23.（12分） （1） （3） （4） （1） （3） （2） （2） 22.（10分） 注意事项 1、考生必须在本页“条码粘贴区”贴好自己的条形 码，并用0.5毫米的黑色签字笔填写好姓名和班 级，否则影响考试成绩； 2、选择题必须用2B铅笔填涂；非选择题必须用0.5 毫米的黑色签字笔答题，超出黑色边框区域的答 案无效；并请注意题号顺序； 3、保持卷面清洁，不要折叠，弄破； 4、选择题填涂样例：正确：▅ 错误：[√] [×] [／] [▂] （2） 24.（11分） （1） （2） （3） ① 25.（12分） （1） （2） （3） （4） （4） （5） ② 原因是 （4） （续上一空） （5） B4反面 ■ ■ 请在各题的答案区域内作答，超出黑色边框区域的答案无效！ 请在各题的答案区域内作答，超出黑色边框区域的答案无效！ 请在各题的答案区域内作答，超出黑色边框区域的答案无效！ 请在各题的答案区域内作答，超出黑色边框区域的答案无效！ ■ 2 ■ HSDFZ $ 哈尔滨师范大学附属中学2025-2026学年度下学期高二期末考试 生物学试题 一、选择题（本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。） 1．SARS-CoV-2的广泛传播曾给人类带来巨大的灾难。如图为 SARS-CoV-2的结构图。下列有关叙述正确的是（　　） A．SARS-CoV-2离开细胞后会立即死亡 B．SARS-CoV-2的遗传信息储存在RNA中 C．SARS-CoV-2的结构简单，只含有核糖体 D．图中结构是在光学显微镜下观察得到的 化合物 元素组成 功能 甲 C、H、O、N、P 遗传物质 乙 C、H、O、N，有的含有S等 生命活动的主要承担者 丙 C、H、O，其比例通常为1：2：1 重要的能源物质 丁 C、H、O，还含有P甚至N 构成细胞结构 2．研究人员在深海热液喷口发现了一种新型嗜热细菌，并对其细胞内的主要化学成分进行了分析。结果如下表所示： 请根据以上信息分析，下列说法错误的是（　　） A．化合物丙可参与组成该菌的细胞壁，且可被果胶酶催化分解 B．化合物丁可组成细胞膜的结构成分 C．化合物甲在该菌的拟核中高效、有序地完成复制 D．化合物乙的多样性可能与其单体的种类、数量、排列顺序有关 3．新合成的肽链易被氧化，从而影响后续折叠。伴侣蛋白GroEL及其辅因子GroES能帮助细胞内已被氧化的多肽链进行折叠，CnoX是一种在此过程中与GroEL结合的蛋白质。如图为大肠杆菌中某多肽链的折叠过程，下列叙述错误的是（  ） A．GroES与GroEL的结合引发CnoX的释放和多肽链的折叠 B．CnoX与多肽链形成二硫键，能修正多肽链的氧化 C．多肽链折叠后的空间结构与氨基酸的特定排列顺序有关 D．该多肽链的折叠需要内质网和高尔基体的参与 4．线粒体功能障碍可引发多种疾病。通过在靶细胞膜表面表达结合蛋白，可将外源正常线粒体精准移植至靶细胞内，从而有望治疗相关疾病。研究发现，部分外源线粒体可在靶细胞中"存活"，且出现与内源线粒体融合并增殖的现象。下列叙述错误的是（  ） A．靶细胞可特异性识别外源线粒体，并通过转运蛋白将其移至细胞内 B．外源线粒体和自身功能障碍的线粒体均有可能被靶细胞溶酶体降解 C．破坏由蛋白质纤维构成的细胞骨架，对线粒体的融合有影响 D．线粒体增殖所需的蛋白质大部分由细胞核DNA指导合成 5．染料Z是一种能与蛋白质上的氨基特异性结合的小分子荧光染料。该染料不能透过细胞膜且对细胞无毒性。下列说法错误的是（　　） A．染料Z和苏丹Ⅲ都属于脂溶性染料 B．染料Z和甲紫都可以将染色体染色 C．染料Z和台盼蓝都可以用于鉴别动物细胞是否死亡 D．染料Z和标记膜蛋白的红、绿荧光染料都可用于探究细胞膜的流动性 6．蛋白分泌是细胞间信息传递的重要方式，大多数分泌蛋白是通过内质网—高尔基体途径（ER-Golgi）分泌的。研究表明，细胞中还存在着一类不依赖ER-Golgi分泌的蛋白质，它们以非经典分泌途径（USP）分泌到细胞外发挥功能。下列叙述错误的是（　　） A．细胞间的信息传递离不开由蛋白质纤维构成的细胞骨架的作用 B．可用放射性同位素15N标记氨基酸来研究某分泌蛋白的分泌途径 C．在ER-Golgi分泌途径中，高尔基体具有重要的交通枢纽作用 D．USP作为ER-Golgi的有效补充,利于细胞内蛋白质稳态的维持 7．某研究小组将生理状态一致的紫色鸭跖草叶片下表皮细胞均分为两组，分别置于葡萄糖和麦芽糖溶液中进行实验，结果如图所示。已知植物细胞不能直接吸收麦芽糖，下列叙述错误的是（  ） 注：原生质体相对体积=当前原生质体体积/初始原生质体体积 A．甲组对应麦芽糖溶液，乙组对应葡萄糖溶液，二者的初始物质的量浓度可能相同 B．图中M、N两点对应的同一细胞的细胞液浓度大小为M=N C．若将甲组处理后的细胞置于清水中，原生质体相对体积可恢复至1，说明细胞保持活性 D．一定范围内适当提高实验温度，曲线甲的下降速率会加快，曲线乙的回升阶段会提前 8．如图为小肠上皮细胞吸收和转运单糖的示意图。下列相关叙述正确的是（  ） A．肠腔中的葡萄糖通过SGLT-1进入细胞的方式属于协助扩散 B．果糖通过GLUT-5进入细胞的过程需要消耗ATP C．葡萄糖通过GLUT-2运出细胞时，是顺浓度梯度进行 D．降低细胞外Na+浓度会促进SGLT-1对葡萄糖的转运 9．在进行“比较过氧化氢在不同条件下分解”的实验时，编号为①-④的4支试管中分别加入2 mLH2O2溶液，不同实验处理及结果如下图。下列关于该实验的分析，正确的是（  ） A．该实验的自变量是温度，因变量是气泡的数量 B．该实验无法探究温度对酶活性的影响 C．①与②对照，说明加热可降低化学反应活化能 D．②与④对照，说明过氧化氢酶具有高效性 10．图为细胞代谢关键酶 PykA的别构调节机制：酶具有活性中心+别构调节位点，底物结合活性中心启动催化，代谢终产物可特异性结合别构位点，使酶发生构象改变、永久失活，实现代谢反馈调控。下列叙述正确的是（　　） A．终产物与底物竞争酶的活性中心，属于竞争性抑制 B．该反馈抑制机制可避免代谢产物过量积累，节约物质能量 C．别构抑制剂结合酶后，不会改变酶的空间结构 D．底物达到饱和浓度后，终产物的抑制作用会完全消失 11．剧烈运动过程中，骨骼肌细胞有氧呼吸供能占比随运动时间变化趋势如图。下列叙述错误的是（　　） A．60 s时，肌细胞的无氧呼吸产生乳酸 B．78.6 s时，有氧呼吸与无氧呼吸消耗葡萄糖量相等 C．肌细胞水解ATP生成的ADP可循环利用 D．运动后期，供氧增加促进了线粒体内反应物的彻底氧化 12．油菜和水稻均为我国重要的农作物。科研工作者在温度、水分均适宜的条件下，测得两种农作物光合速率与呼吸速率的比值（P/R）随光照强度变化的曲线如下图所示。下列相关叙述错误的是（　　） A．据图可推测油菜在弱光条件下能更高效地利用光能进行光合作用 B．光照强度为a时，油菜叶肉细胞产生ATP的场所是线粒体和叶绿体 C．在光照强度为c的条件下每日光照12小时，水稻能正常生长 D．光照强度大于d时，限制水稻P/R值增大的主要外界因素可能是CO2浓度 13．研究人员以山楂为原料，先接种酵母菌，发酵96小时再接种老陈醋的醋醅（含醋酸菌）进行发酵，酿造山楂醋。如图为发酵液中酒精含量和总酸含量随发酵时间变化的曲线。下列相关分析不正确的是（　　） A．发酵0~24小时酵母菌进行了有氧呼吸 B．发酵0~96小时总酸含量上升是由于醋酸菌代谢产生酸类物质 C．96小时后应将发酵温度适度调高 D．发酵过程中有机物的能量有一部分留在发酵产品中 14．黄连素是一种异喹啉类生物碱，属于植物次生代谢物，在抗菌、抗炎等方面有显著效果。下图为利用植物组织培养相关技术生产黄连素的主要过程，相关叙述错误的是（  ） A．植物组织培养的过程中常用体积分数70%的酒精、质量分数5%次氯酸钠溶液对外植体进行消毒 B．为了防止实验过程中因杂菌对实验的不良影响，通常需要在实验前对外植体灭菌处理后再通过①脱分化形成愈伤组织 C．过程②为再分化，再分化时需调整培养基中生长素和细胞分裂素的比例；最后生产的产物黄连素不是细胞基本生命活动所必需的 D．过程④高产细胞系产黄连素的速度和产量均优于过程③试管苗 15．为探究编码酪氨酸酶的T基因对狗毛色的影响，有人通过如图所示过程获得了两只小狗。下列叙述正确的是（  ） A．采集卵子后立即与获能的精子受精，可有效提高受精率 B．将胚胎1培养至桑葚胚期，取成纤维细胞完成后续实验 C．用蛋白酶合成抑制剂激活重构胚，可获得胚胎2和胚胎3 D．利用现代生物技术获得的两只小狗毛色和性别可能都不一样 二、选择题（本小题共5个小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或者多项是符合题目要求的，全部选对得3分，选对但选不全得1分，选错得0分） 16．近年来发现一种新的细胞器：内质网高尔基体中间体（ERGIC），ERGIC不仅是参与调控内质网—高尔基体经典分泌途径的核心细胞器，同时也是非经典分泌途径的枢纽，分泌过程如图所示。ERGIC53和TMED是ERGIC膜上的两种关键蛋白，ERGIC53可识别糖基化蛋白（糖基化是糖分子与蛋白质、脂质等生物大分子结合的过程）；TMED能够调控多种非经典分泌蛋白离开ERGIC。有关叙述正确的是（　　） A．经典分泌途径和非经典分泌途径所需要的能量全部由线粒体提供 B．可用差速离心法分离出ERGIC C．内质网可能使蛋白质糖基化 D．能否运输非经典分泌的蛋白取决于ERGIC膜上TMED的变化 17．ATP可将蛋白质磷酸化，磷酸化的蛋白质会改变形状做功，从而推动细胞内系列反应的进行(机理如下图所示)。下列叙述正确的是（　　） A．主动运输过程中，载体蛋白中的能量先增加后减少 B．ATP推动蛋白质做功的过程，存在吸能反应过程 C．ATP水解过程中，末端磷酸基团具有较高的转移势能 D．磷酸化的蛋白质做功，失去的能量主要用于再生ATP 18．乳酸脱氢酶(ADH)和乙醇脱氢酶(LDH)能催化不同类型的无氧呼吸。低氧胁迫处理玉米第3天，研究人员发现玉米品系A根系中ADH活性显著提高，LDH活性变化不显著，而玉米品系B根系中LDH活性显著提高，ADH活性变化不显著。下列叙述错误的有（　　） A．ADH和LDH都能为丙酮酸的分解提供活化能 B．ADH和LDH催化丙酮酸分解时，利用[H]的能量生成少量ATP C．低氧胁迫下，玉米品系A体内可能出现的呼吸产物有酒精、乳酸、CO2等 D．可通过酸性重铬酸钾溶液是否变为橙色鉴定玉米品系B是否产生酒精 19．在某地区种植的冬小麦，其叶片经常出现黄化而患黄化病。甲同学认为这是土壤中缺磷引起的，乙同学认为这是土壤中缺镁引起的。为判断哪个观点正确，丙同学利用三组长势相同的冬小麦幼苗完成了下列实验。下列叙述错误的是（　　） 组别 培养液 实验处理 观察指标 ① 全素培养液 相同且适宜条件下培育相同的一段时间 幼苗的生长发育状况 ② 缺磷培养液 ③ 缺镁培养液 A．该实验的自变量是培养液中磷、镁的有无及幼苗的生长发育状况 B．组别①是对照组，组别②③都是实验组 C．若②组幼苗出现黄化，①③组正常，则说明黄化病是由缺磷引起的 D．若①组正常，②③两组幼苗都出现黄化，则说明黄化病是由磷和镁共同缺乏引起的 20．双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前常用杂交—杂交瘤的方法来制备。其制备过程如下图所示：据图分析，下列相关叙述正确的是（   ） 抗原A 抗原B 细胞A A．细胞B和细胞C是从已免疫小鼠的骨髓中取出的多种B淋巴细胞 B．过程②④均需要采用抗原-抗体杂交技术 C．过程⑤既可在体内培养也可在体外培养 D．与传统的单克隆抗体相比，双特异性抗体可能在免疫治疗方面有更广阔的应用前景 三、非选择题（本题共5个小题，共55分） 21．（10分）内质网是真核细胞中由膜围成的连续的管道系统，与细胞中多种物质的形成有关。 (1)粗面内质网是蛋白质等大分子物质的合成、加工场所和运输通道。当错误折叠蛋白在内质网腔内积聚时，会引发内质网应激（ERS）。正常状态下，内质网上的膜蛋白处于失活状态。当错误折叠蛋白引发ERS时，IRE1就会被活化。活化的IRE1一方面可促进Hac Ⅰ蛋白的合成，该蛋白通过 （选填“促进”或“抑制”）Bip基因的表达，使错误折叠蛋白在Bip的协助下运出内质网。另一方面，活化的IRE1还可通过切割rRNA影响核糖体的装配，进而减少 的合成以缓解ERS。 (2)光面内质网是磷脂的合成场所，新合成的磷脂通过多种方式转移到其他结构中。研究发现，在内质网膜与线粒体外膜之间，通过多种蛋白质相互作用形成接触位点（MAMs），如图2所示。当破坏MAMs中的某蛋白时，磷脂会在MAMs的内质网侧积累，这说明线粒体获得磷脂的关键结构是_____。若在内质网与高尔基体之间没有类似MAMs的结构，推测内质网合成的磷脂转运到高尔基体的方式最可能是_____。 (3)内质网是细胞的“钙库”，已知一定浓度的Ca2+可以提高有氧呼吸酶的活性。当ERS发生时，线粒体有助于内质网恢复稳态，分析其机理是 。 22．（10分）芽殖酵母属于单细胞真核生物。为寻找调控蛋白分泌的相关基因，科学家以酸性磷酸酶（P酶）为指标，筛选酵母蛋白分泌突变株并进行了研究。 (1)酵母细胞中合成的分泌蛋白一般通过______________作用分泌到细胞膜外。 (2)用化学诱变剂处理，在酵母中筛选出蛋白分泌异常的突变株（sec1）。无磷酸盐培养液可促进酵母P酶的分泌，分泌到胞外的P酶活性可反映P酶的量。将酵母置于无磷酸盐培养液中，对sec1和野生型的胞外P酶检测结果如下图。据图可知，24℃时sec1和野生型胞外P酶随时间而增加。转入37℃后，sec1胞外P酶呈现________的趋势，表现出分泌缺陷表型，表明sec1是一种温度敏感型突变株。 (3)37℃培养1h后电镜观察发现，与野生型相比，sec1中由高尔基体形成的分泌泡在细胞质中大量积累。由此推测野生型Sec1基因的功能是促进______________的融合。 (4)由37℃转回24℃并加入蛋白合成抑制剂后，sec1胞外P酶重新增加。对该实验现象的合理解释是_____________。 (5)现已得到许多温度敏感型的蛋白分泌突变株。若要进一步确定某突变株的突变基因在37℃条件下影响蛋白分泌的哪一阶段，可作为鉴定指标的是：突变体______________。 A．蛋白分泌受阻，在细胞内积累 B．与蛋白分泌相关的胞内结构的形态、数量发生改变 C．细胞分裂停止，逐渐死亡 23．（12分）某兴趣小组发现樱桃受机械损伤后会加速腐烂，推测这一现象与损伤导致的樱桃有氧呼吸速率增大有关。基于这一假设，他们绘制了樱桃细胞呼吸过程的图解如图1，表示了物质A至E及呼吸途径①至④。为验证该假设，设计了如图2实验装置，并对比了未受损伤与机械损伤的樱桃在有氧环境下的呼吸速率。回答下列问题： (1)图1中，物质A代表____，它是细胞呼吸的重要产物之一。过程②发生在樱桃细胞的________中。 (2)图2装置中，可通过测定_________的消耗量来评估樱桃的有氧呼吸速率。 (3)如果实验结果显示，与完整未损伤的樱桃相比，受损伤的樱桃在图2装置中引起的有色液滴移动速度更快，则表明樱桃的机械损伤会__________其有氧呼吸速率。本实验设计依据的原理是有氧呼吸速率的高低可以通过___________来间接反映。 (4)ATP合酶（利用电化学势能催化ATP的合成）是线粒体内膜上的重要结构，为确定ATP合酶的功能，研究人员进行了线粒体膜重建实验，过程如下，请完成下表。 实验目的 简易操作步骤 分离内膜包裹的基质 利用渗透作用的原理，使线粒体的外膜先吸水涨破，经离心后取沉淀物。 获取内膜小泡 用超声波处理使线粒体破裂，破裂的线粒体内膜能够自封闭成内膜小泡， 其上结合有①___________。 ②____________ 用脲处理使内膜上附着的酶颗粒脱落，将处理后的样品离心后，分别收集沉 淀和上清液。 鉴定ATP合酶的功能 加入pH缓冲液，光滑型小泡和ATP合酶颗粒均不能合成ATP；将分离的酶 颗粒与内膜小泡重新结合，小泡具有ATP合成的能力。 上述实验结果表明，ATP合酶正常发挥功能需附着在线粒体内膜上，若其脱离了内膜则无法合成，推测原因是 。 24．（11分）水稻生长需依次经过抽穗期、灌浆期、乳熟期、蜡熟期等时期。下图是水稻叶肉细胞光合作用和呼吸作用部分过程示意图。 下表是水稻的早衰型品种和持绿型品种在相应实验条件下测得的光合作用指标。 生长时期 光补偿点（μmol·m-2·s-1） 光饱和点（μmol·m-2·s-1） 最大净光合速率CO2（μmol·m-2·s-1） 品种甲 品种乙 品种甲 品种乙 品种甲 品种乙 抽穗期 63 46 1936 2000 23.13 26.98 蜡熟期 75 72 1732 1365 19.17 12.63 (1) 上图中④过程发生的场所是 。①—④过程中能产生ATP的有______。 (2)进入蜡熟期后，早衰型品种出现“籽叶皆黄”现象，而持绿型品种出现“叶青籽黄”的现象。用这个时期的两个品系叶片进行色素提取和分离实验，根据上表数据分析，在滤纸条上，由上到下第三条色素带较宽的是品系______。（填“甲”或“乙”）。 (3)科学家从水稻叶肉细胞中分离出类囊体用磷脂分子包裹形成下图1所示的“油包水液滴”结构，在其中加入足量NADP+、ADP等物质，并对该结构采取明暗交替处理，一段时间内检测此结构内产生NADPH的量，结果如下图2所示，说明“油包水液滴”内的人工光反应系统构建成功。原因是在明期类囊体上发生______产生并积累NADPH，在暗期NADPH的含量保持稳定其原因是 。 (4)进一步将相关酶等物质加入“油包水液滴”内，通入充足的 作为原料，形成化学反应循环。用该体系A组明暗（1秒光照，1秒黑暗）交替进行了60分钟，B组持续进行了30分钟光照，测定有机物含量，则A组______（填“>”“<”或“=”）B组。由暗转明期，C3含量会______。 (5)将四组相同的水稻培养在密闭的装置中，控制不同的温度条件，若12小时光照，12小时黑暗，依据图3的数据，t₁～t4比较，______温度更适于水稻生长。 25．（12分）牛乳铁蛋白肽（LfcinB）是由25个氨基酸组成的小分子抗菌肽，具有广谱抗菌活性，但其分子量小（约4kDa），常规电泳难以检测。为提高表达效率和便于纯化，科研人员将增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP）与LfcinB基因融合，并在两个基因之间设计了甲酸裂解位点（融合蛋白可在酸性条件下特异性断裂）。重组质粒pPIC9K-EGFP-LfcinB的构建过程如图1所示，图2为重组酵母在甲醇诱导过程中的生长曲线。请回答下列问题： 注：EGFP：增强型绿色荧光蛋白；PAOX1：甲醇诱导型启动子；TAOX1：终止子； AmpR：氨苄青霉素抗性基因；KanR：卡那霉素抗性基因；Ori：复制原点。 (1)图1中，为获得基因片段并保证其与质粒pPIC9K正确连接，设计引物时需在引物1和引物2的____________端分别添加限制酶____________和____________的识别序列。质粒上的AmpR和KanR基因的作用是____________。 (2)将重组质粒线性化（切成线状）后转入毕赤酵母GS115.已知毕赤酵母为组氨酸缺陷型菌株（自身无法合成组氨酸），而重组质粒上带有组氨酸合成相关基因。转化后需在____________（填“含组氨酸”或“不含组氨酸”）的培养基上筛选阳性克隆，理由是____________。 (3)由图2可知，重组酵母在甲醇诱导下，0~48h细胞密度迅速增加，48h后增速减缓，84h左右达到最大密度。甲醇在此实验中的作用是____________；若在488nm激发光下观察到酵母细胞发出绿色荧光，说明____________。 (4)融合蛋白EGFP-LfcinB在酵母细胞内表达后，需对酵母细胞进行____________处理，以释放融合蛋白。纯化后的融合蛋白用____________处理，目的是切除EGFP标签，获得单独的LfcinB蛋白。 2 1 学科网（北京）股份有限公司 $