精品解析:甘肃省陇南市康县部分学校2025-2026学年高二下学期7月期末考试生物试题
2026-07-15
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2份
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资源信息
| 学段 | 高中 |
| 学科 | 生物学 |
| 教材版本 | - |
| 年级 | 高二 |
| 章节 | - |
| 类型 | 试卷 |
| 知识点 | - |
| 使用场景 | 同步教学-期末 |
| 学年 | 2026-2027 |
| 地区(省份) | 甘肃省 |
| 地区(市) | 陇南市 |
| 地区(区县) | 康县 |
| 文件格式 | ZIP |
| 文件大小 | 2.14 MB |
| 发布时间 | 2026-07-15 |
| 更新时间 | 2026-07-15 |
| 作者 | 匿名 |
| 品牌系列 | - |
| 审核时间 | 2026-07-15 |
| 下载链接 | https://m.zxxk.com/soft/58821263.html |
| 价格 | 4.00储值(1储值=1元) |
| 来源 | 学科网 |
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内容正文:
绝密★启用前
2026年康县第一中学、康县第二中学、康县永兴中学
高二下学期期末考试(生物)试卷
注意事项:
1.答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息
2.请将答案正确填写在答题卡上
第I卷(选择题)
一、单选题
1. 将外源基因导入受体细胞的过程中需要使用载体,下列有关载体的叙述错误的是( )
A. 载体应对宿主细胞无伤害,以免影响宿主细胞的正常生命活动
B. 载体应具有一个至多个限制酶切割位点,以便于目的基因的插入
C. 基因工程中被用作载体的质粒都是在天然质粒的基础上改造的
D. 将外源基因送入受体细胞的载体可以是切割DNA分子的酶
【答案】D
【解析】
【详解】A、载体需和目的基因一起进入宿主细胞并与其共存,因此载体应对宿主细胞无伤害,以免影响宿主细胞的正常生命活动,A正确;
B、载体应具有一个至多个限制酶切割位点,以便与目的基因拼接形成重组载体,B正确;
C、天然的质粒往往存在不足,基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的,C正确;
D、切割DNA分子的酶为限制酶,是基因工程的工具之一,但不是运载体,D错误。
故选D。
2. 用A和B两种限制酶同时或分别处理某DNA分子,酶切位点及酶切产物的电泳结果如图甲、乙所示。下列叙述错误的是( )
A. 图甲中X代表的碱基对数为4500,Y是限制酶A的酶切位点
B. 单独使用限制酶B切割该DNA分子,可得到两种不同长度的DNA片段
C. 图中DNA片段经酶A和酶B同时处理后,新增3个末端
D. 若将该线性DNA改为环状质粒,用A、B两种酶同时切割可获得3个DNA片段
【答案】C
【解析】
【详解】A、X 的长度 = 总长度(8000+2000 )- 3500 - 1500 - 500 = 4500 bp;限制酶B可将DNA分子切成长度分别为8000和2000的片段,故限制酶B切割后对应②的电泳结果,①为限制酶A切割的结果,故Y 是限制酶 A 的酶切位点,A正确;
B、单独用限制酶 B 切割,从图乙②的条带(8000 和 2000),可知得到两种长度的片段,B正确;
C、线性 DNA 分子用酶 A 和酶 B 同时处理,有 3 个酶切位点(甲图中 A、B、Y),会被切成 4 段,每切一次增加 2 个末端,共新增末端数 = 3×2 = 6 个,不是 3 个,C错误;
D、若改为环状质粒,A、B 两种酶共有 3 个酶切位点,同时切割会产生 3 个 DNA 片段,D正确。
3. 人血清白蛋白(HSA)是血浆蛋白的主要成分,具有维持血浆渗透压和进行物质运输的功能。科学家利用转基因技术获得转HSA基因的大肠杆菌,通过发酵工程,实现HSA的大量生产,如图表示HSA基因。下列关于PCR扩增HSA基因的叙述,错误的是( )
A. PCR过程每次循环分为3步,其中温度最低的一步是第二步
B. 应选择引物Ⅰ和引物Ⅵ扩增出HSA基因并用于表达载体的构建
C. 在PCR反应缓冲液中加入Mg2+的作用是激活耐高温的DNA聚合酶
D. 用PCR方法检测大肠杆菌是否导入HSA基因,预变性使DNA充分变性,利于引物更好地和模板结合
【答案】B
【解析】
【详解】A、PCR每次循环分为变性(90~95℃)、复性(退火,55~60℃)、延伸(70~75℃)三步,其中第二步复性的温度最低,A正确;
B、DNA聚合酶只能从引物的3'端延伸子链,引物的延伸方向需朝向目的基因内部。题图中DNA上链为5'→3'(左到右),下链为3'→5'(左到右),引物结合在模板链的3'端,使子链从5'→3'延伸,扩增出HSA基因并用于表达载体的构建,应选择引物Ⅱ和引物Ⅲ,B错误;
C、PCR反应缓冲液中的Mg2+是耐高温DNA聚合酶(Taq酶)的激活剂,能够维持酶的催化活性,C正确;
D、用PCR检测大肠杆菌是否导入HSA基因时,预变性可使模板DNA充分解旋为单链,有利于后续退火阶段引物和模板链互补结合,D正确。
4. 新一代人工智能(AI)模型ESM3首次实现了对蛋白质序列、结构和功能的统一推理,使蛋白质工程取得了极大的进展。下列叙述错误的是( )
A. AI可通过基因序列预测蛋白质的空间结构
B. AI可基于已有的科研数据构建结构与功能相匹配的蛋白质模型
C. AI与蛋白质工程结合,可以设计自然界不存在的新蛋白质
D. AI设计的蛋白质通常在细胞外合成,不需要对基因进行操作
【答案】D
【解析】
【详解】A、蛋白质的氨基酸序列由基因的碱基序列决定,而氨基酸序列是蛋白质空间结构形成的基础,因此AI可通过分析基因序列预测蛋白质的空间结构,A正确;
B、AI可对已积累的大量蛋白质结构、功能相关的科研数据进行学习、分析,从而构建出结构与功能相匹配的蛋白质模型,B正确;
C、蛋白质工程的实质是通过基因修饰或基因合成改造现有蛋白质或制造新蛋白质,与AI结合可提升设计效率,能够设计出自然界不存在的新蛋白质,C正确;
D、蛋白质的合成需要以对应基因作为模板,无论是在细胞内合成还是体外合成,都需要先获得设计的蛋白质对应的目的基因,必须对基因进行操作,D错误。
5. “筛选”是生物技术与工程中重要的环节。下列叙述正确的是( )
A. 诱导植物原生质体融合时,观察是否再生细胞壁可筛选异种融合细胞
B. 用选择培养基筛选微生物,对照组不接种微生物,实验组接种微生物
C. 在试管婴儿技术中,需取滋养层细胞进行性别鉴定来筛选所需的胚胎
D. 制备单克隆抗体时,需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞
【答案】D
【解析】
【详解】A、活的未融合原生质体、同种融合原生质体、异种融合原生质体都可以再生出细胞壁,仅观察细胞壁再生无法区分异种融合细胞,A错误;
B、验证选择培养基的筛选作用时,对照组需要将微生物接种到完全培养基中,和选择培养基的菌落数做对比,不接种微生物的空白对照仅用于检验培养基是否被杂菌污染,B错误;
C、仅当需要规避伴性遗传病等有性别筛选需求时,才会在试管婴儿操作中取滋养层细胞做性别鉴定,性别鉴定不是试管婴儿的必需步骤,C错误;
D、制备单克隆抗体时,通过抗原-抗体杂交技术筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,该技术属于分子水平的检测方法,D正确。
6. 在太空环境中进行动物细胞培养实验,是空间生物学和医学研究的重要部分。在微重力环境中,组织细胞可以均匀悬浮,在三维方向自由生长,不会因为密度的不同导致沉降速度不同,从而影响彼此间的接触与沟通,故细胞有望在空间生长出三维、立体的离体细胞或组织器官。下列叙述正确的是( )
A. 在太空中可将肝细胞或离体的花药培养成一个完整个体
B. 在太空中进行动物细胞培养时,接触抑制现象会减弱
C. 在太空中培养动物细胞无需将动物组织中的细胞分散成单个细胞
D. 在太空中进行动物细胞培养时,需要对动物组织进行灭菌处理且培养液要定期更换
【答案】B
【解析】
【分析】动物细胞培养所需的条件:(1)无菌、无毒的环境:①消毒、灭菌;②添加一定量的抗生素;③定期更换培养液,以清除代谢废物;(2)营养物质:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,还需加入血清、血浆等天然物质;(3)温度和pH:哺乳动物多以36.5℃为宜,最适pH为7.2-7.4;(4)气体环境:95%空气(细胞代谢必需的)和5%的CO2(维持培养液的pH)。
【详解】A、由于动物细胞的全能性受限,无论在太空还是地面,都无法将肝细胞培养成一个完整的个体,A错误;
B、据题干信息可知,在微重力环境中,组织细胞可以均匀悬浮,在太空中进行动物细胞培养时接触抑制现象会减弱,B正确;
C、在太空中进行动物细胞培养也需要将动物组织中的细胞设法分散成单个细胞,C错误;
D、对动物组织不能进行灭菌处理,否则会杀死动物细胞,D错误。
故选B。
7. 下列有关培养基和培养液的叙述,错误的是( )
A. 动物细胞培养液和动物胚胎早期培养液中都需要加入动物血清,以满足特殊营养需求
B. 进行动物细胞培养时,培养液中可以添加一定量的抗生素,以保证无病毒环境
C. 植物组织培养培养基和动物细胞培养培养基的物理性质不同
D. 杂交瘤细胞常用的培养方法有体外培养和体内培养,体外培养在液体培养基中进行
【答案】B
【解析】
【分析】1、生长素和细胞分裂素能促进细胞分裂分化,在培养的不同时期对两者的比例会有不同要求,在再分化过程中,生长素高,促进根的分化,细胞分裂素比例高,促进芽的分化,因此是不可缺少的特殊添加物。
2、动物细胞培养的条件:(1)无菌、无毒的环境:①消毒、灭菌;②添加一定量的抗生素;③定期更换培养液,以清除代谢废物;(2)营养物质:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,还需加入血清、血浆等天然物质;(3)温度和PH;(4)气体环境:95%空气(细胞代谢必需的)和5%的CO2(维持培养液的pH)。
【详解】A、血清中含有促进细胞生长和分裂的特殊营养成分,所以动物细胞培养液和动物胚胎早期培养液中都需要加入动物血清,以满足特殊营养需求,A正确;
B、抗生素可抑制细菌生长,不能抑制病毒的繁殖,进行动物细胞培养时,培养液中可以添加一定量的抗生素,目的是防止细菌污染,B错误;
C、植物组织培养的培养基和动物细胞培养的培养基的物理性质不同,前者为固体培养基,后者为液体培养基,C正确;
D、杂交瘤细胞常用的培养方法有体内培养和体外培养两种,前者是在小鼠腹腔内培养,后者在液体培养基中培养,D正确。
故选B。
8. 爱德华兹因体外受精技术获得2010年诺贝尔生理学或医学奖,被誉为“试管婴儿之父”。下列相关说法错误的是( )
A. 收集的精子需诱导获能后才能用于体外受精
B. 采集来的初级卵母细胞可以直接用于体外受精
C. 早期胚胎植入子宫后需对母体进行妊娠检查
D. 试管婴儿技术解决了某些不孕夫妇的生育问题
【答案】B
【解析】
【分析】受精是精子与卵子结合形成合子(即受精卵)的过程,包括受精前的准备阶段和受精阶段。在自然条件下,哺乳动物的受精在输卵管内完成。
【详解】A、收集的精子需诱导获能后才能与成熟的卵细胞体外受精,A正确;
B、采集来的初级卵母细胞需要进一步成熟后,才能用于体外受精,B错误;
C、早期胚胎植入子宫后需对母体进行妊娠检查,以便确认胚胎成功着床,C正确;
D、试管婴儿技术通过体外受精,解决了某些不孕夫妇的生育问题,D正确。
故选B。
9. 采用机械方法将早期胚胎分割后移植,可以获得同卵双胎或多胎。下列相关叙述正确的是( )
A. 目前利用胚胎分割技术,同卵双胎较同卵多胎成功率更高
B. 胚胎分割时,应选取原肠胚并将其均等分割后在体外培养
C. 利用胚胎分割技术可以获得两个基因型不同的胚胎
D. 分割后的胚胎进行移植前可取透明带进行性别鉴定
【答案】A
【解析】
【分析】1、胚胎分割的特点:来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质,胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。
2、进行胚胎分割时,应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚。对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
【详解】A、利用胚胎分割技术,分割次数越多,分割后胚胎成活的概率越小。目前,仍以二分胚胎的分割和移植效率最高,A正确;
B、胚胎分割时需将囊胚阶段的内细胞团进行均等分割,B错误;
C、来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质,因此利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎,C错误;
D、胚胎移植前,通常取滋养层细胞进行性别鉴定,D错误。
故A。
10. 生物技术在农业、医学和环境保护等领域具有广泛应用,但同时也带来了一些伦理和安全问题。下列叙述正确的是( )
A. 基因编辑技术可用于疾病预防领域研究和设计完美婴儿
B. 若转基因植物的外源基因来源于自然界,则不会存在安全问题
C. 只要有证据证明转基因产品不安全,就应禁止转基因技术的研究
D. 可利用胚胎干细胞技术获取人体组织细胞或器官,作为器官移植供体
【答案】D
【解析】
【分析】转基因生物的安全性问题:食物安全(滞后效应、过敏源、营养成分改变)、生物安全(对生物多样性的影响)、环境安全(对生态系统稳定性的影响)。
【详解】A、基因编辑技术可用于疾病预防领域研究,但不能用于设计完美婴儿,A错误;
B、转基因植物的外源基因来源于自然界,也可能存在安全问题,B错误;
C、转基因技术是中性的,不应被禁止,C错误;
D、可利用胚胎干细胞技术获取人体组织细胞或器官作为器官移植供体,D正确。
故选D。
11. 科学家用AI工具预测并证实:在不改变终止密码子UGA上游7个密码子所编码氨基酸前提下,将第三位碱基统一替换为A或U,UGA终止功能会被抑制,可继续参与翻译。下列叙述错误的是( )
A. 密码子是指mRNA上决定1个氨基酸的3个相邻碱基
B. 密码子改变但编码氨基酸不变,体现了密码子的简并性
C. UGA功能被抑制,但产生的多肽链不会发生改变
D. 该AI工具有助于加快遗传病相关基因治疗方案的设计
【答案】C
【解析】
【详解】A、密码子为mRNA上决定1个氨基酸的3个相邻碱基,终止密码子属于不编码氨基酸的特殊密码子,A正确;
B、密码子的简并性指一种氨基酸可对应多种密码子,因此密码子改变但编码氨基酸不变,体现了密码子的简并性,B正确;
C、UGA原本是终止密码子,翻译遇到UGA时肽链合成终止;其终止功能被抑制后,翻译会继续进行直至遇到下一个终止密码子,产生的多肽链会比原肽链更长,发生改变,C错误;
D、部分遗传病由于提前出现终止密码子,合成截短的异常蛋白导致,该AI工具可抑制终止密码子的终止功能,帮助合成完整的正常蛋白,有助于加快遗传病相关基因治疗方案的设计,D正确。
12. 下列关于细胞分化和全能性的说法,正确的是( )
A. 细胞分化是一种持久性的变化,分化后的细胞失去了分裂能力
B. 细胞分化的程度越高,遗传物质的变化越大
C. 细胞分化导致基因的选择性表达,细胞种类增多
D. 胚胎干细胞能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型,这是细胞全能性的体现
【答案】D
【解析】
【详解】A、细胞分化是持久性的变化,但并非所有分化后的细胞都失去分裂能力,例如造血干细胞属于分化程度较低的细胞,仍保留分裂和分化能力,A错误;
B、细胞分化的实质是基因的选择性表达,分化过程中细胞的遗传物质不会发生改变,B错误;
C、基因的选择性表达是细胞分化的原因,细胞分化是基因选择性表达的结果,选项逻辑因果倒置,C错误;
D、细胞全能性指细胞经分裂和分化后,仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能,胚胎干细胞能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型,体现了细胞全能性,D正确。
13. 下列关于生物武器的说法,错误的是( )
A. 生物武器具有致病能力强,攻击范围广的特点
B. 彻底销毁生物武器是全世界爱好和平的人民的共同期望
C. 生物武器的种类包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类和毒品类等
D. 生物武器可通过吸入、误食、接触带菌物品、被带菌昆虫叮咬等侵入人体
【答案】C
【解析】
【详解】A、生物武器的致病成分多为高致病性的微生物或生化毒剂,具有致病能力强、攻击范围广的特点,A正确;
B、生物武器危害性极大且违背人道主义原则,彻底销毁生物武器是全世界爱好和平的人民的共同期望,B正确;
C、生物武器的种类包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类、基因重组的致病菌等,毒品类不属于生物武器范畴,C错误;
D、生物武器的传播侵入途径较多,可通过吸入、误食、接触带菌物品、被带菌昆虫叮咬等方式侵入人体,D正确。
14. 科学家利用基因编辑技术,定向删除猪胚胎中控制特定器官发育的关键基因,使胚胎无法自主形成该器官。然后选取患者的体细胞通过诱导形成iPS细胞,并将人类iPS细胞注入已处理的猪的囊胚中形成人——动物嵌合体胚胎。将该嵌合胚胎导入受体猪的子宫中,通过控制发育进程可获得相应的器官。该项技术可为器官移植提供潜在供体。下列叙述或推测正确的是( )
A. 嵌合胚胎的获得运用了核移植技术
B. 应该将iPS细胞注入猪囊胚的滋养层中
C. 通过该技术获得的器官可能含有人和猪的基因
D. 该技术没有冲击现有的伦理道德,可大力推广
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中,并使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术。
【详解】A、核移植技术是将体细胞核移入去核卵母细胞,而嵌合胚胎是将人类iPS细胞注入猪囊胚,未涉及核移植,A错误;
B、应该将人类PS细胞注入猪囊胚的内细胞团中,而不是滋养层中,B错误;
C、由于是将人类PS细胞注入猪囊胚形成嵌合胚胎,所以通过该技术获得的器官可能含有人和猪的基因,C正确;
D、人一动物嵌合体胚胎技术涉及人类细胞 和动物胚胎的结合,必然会存在社会伦理道德问题,不能大力推广,D错误。
故选C。
15. 关于"琼脂糖凝胶电泳"实验,下列叙述正确的是( )
A. 根据待分离DNA片段的大小,需用无菌水配制0.8%~1.2%的琼脂糖溶液
B. 向琼脂糖溶液中加入适量的核酸染料后,需在沸水浴内加热至琼脂糖熔化
C. 将PCR产物和电泳缓冲液混合后,需用微量移液器将混合液缓慢注入加样孔
D. 待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时,需及时断电并取出凝胶置于紫外灯下观察
【答案】D
【解析】
【分析】PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关,凝胶中的DNA分子通过染色,可以在波长为300 nm的紫外灯下被检测出来。
【详解】A、配制琼脂糖溶液时,应该用缓冲液而不是无菌水来配制,这样才能维持合适的离子强度和pH等条件,保证电泳效果,A错误;
B、应该是先将琼脂糖加入缓冲液中,在沸水浴或微波炉中加热至琼脂糖熔化,冷却至50 - 60℃左右时再加入适量的核酸染料,而不是先加染料再加热熔化琼脂糖,B错误;
C、PCR产物和上样缓冲液混合,而不是和电泳缓冲液混合,然后用微量移液器将混合液缓慢注入加样孔,C错误;
D、待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时,及时断电并取出凝胶置于紫外灯下观察,这样可以清晰地观察到DNA条带的位置和情况,D正确。
故选D。
16. 党的二十大指出,我们要坚持绿水青山就是金山银山的理念,在废弃矿山生态治理工作的推进下,目前很多历史遗留矿山披绿焕颜。下列叙述错误的是( )
A. 人工制造表土是矿区废弃地植被恢复工程的前提
B. 矿区废弃地的植被恢复需要土壤微生物群落的重建
C. 修复后,植物多样性提高,丰富了动物栖息环境,促进了群落的演替
D. 修复后,生物群落能实现自我更新和维持,体现了生态工程的协调原理
【答案】D
【解析】
【详解】A、矿区废弃地土壤结构破坏严重,人工制造表土可提供植物生长的基质和养分,是植被恢复的基础条件,A正确;
B、土壤微生物参与有机质分解、养分循环等过程,其群落重建对土壤功能恢复和植物营养供应至关重要,B正确;
C、植物多样性增加可改善微环境,为动物提供食物和栖息地,加速群落结构与功能的恢复,推动群落演替进程,C正确;
D、修复后生物群落实现自我更新和维持,体现了生态系统通过生物组分自我调节维持稳定性的能力,符合自生原理,D错误。
故选D。
第II卷(非选择题)
二、解答题
17. 某种RNA病毒的抗原性和感染性与其表面的S蛋白(刺突糖蛋白)密切相关,现利用基因工程的方法生产相关疫苗。图甲为构建S蛋白基因表达载体的过程,图乙为重组质粒被相关酶切后的电泳结果。请回答下列问题:
(1)①过程所使用的酶为______,PCR技术中复性的目的是______。
(2)PCR过程经过4次循环,消耗的引物的数量是______个。
(3)构建好的重组质粒长度共2000bp,用限制酶HindⅢ及限制酶HindⅢ和BamHⅠ分别对重组质粒进行切割并电泳,结果如图乙所示,可推测BamHⅠ在重组质粒上有______个酶切位点。为使S蛋白基因在受体细胞中高效表达,需要将S蛋白基因插入重组质粒的______之间。
(4)腺病毒载体疫苗是将S蛋白基因插入到改造后的腺病毒基因组中,该疫苗进入人体后,S蛋白基因利用人体细胞的蛋白质表达系统指导S蛋白的合成,其过程是______(用文字和箭头表示)。
【答案】(1) ①. 逆转录酶 ②. 低温下,引物能与相应互补DNA序列结合(引物通过碱基互补配对与单链DNA结合)
(2)30 (3) ①. 3 ②. 启动子和终止子
(4)S蛋白基因mRNAS蛋白
【解析】
【分析】题意分析,图甲中①是逆转录过程,②是经过复制形成双链 cDNA ,③是将 S 蛋白基因和质粒结合形成基因表达载体,图乙是用限制酶切割后形成的电泳图。
【小问1详解】
①过程为逆转录过程,该过程所使用的酶为逆转录酶,PCR技术中复性的目的是在低温下,使引物能与相应互补DNA序列结合,为后续子链延伸做准备。
【小问2详解】
PCR过程经过4次循环,即复制4次,则形成的子代DNA的数目为24=16个,每个DNA分子有两条链,且只有原来的模板链不带有引物,其他的子链均需要引物,因此,该过程中消耗的引物的数量是16×2-2=30个。
【小问3详解】
构建好的重组质粒长度共2000bp,用限制酶HindⅢ及限制酶HindⅢ和BamHⅠ分别对重组质粒进行切割并电泳,根据图乙所示,HindⅢ在质粒上有三个酶切位点,进而出现了200、400和1400的片段,而两种酶同时切割后出现的片段为200、420和560片段,且420+420+560=1400,因而推测在质粒中距离较远的HindⅢ识别序列中有两个BamHⅠ的酶切位点,又知电泳结果中没有400片段,因而可推测在该片段中间存在一个BamHⅠ酶切位点,因此,在重组质粒上有3个BamHⅠ酶切位点。为使S蛋白基因在受体细胞中高效表达,需要将S蛋白基因插入重组质粒的启动子和终止子之间,进而可以调控该基因的表达。
【小问4详解】
腺病毒载体疫苗是将S蛋白基因插入到改造后的腺病毒基因组中,该疫苗进入人体后,S蛋白基因利用人体细胞的蛋白质表达系统指导S蛋白的合成,基因指导蛋白质合成过程包括转录和翻译两个步骤,可以表示为:S蛋白基因 mRNA S蛋白。
18. 为降低人类乳腺癌治疗药物的副作用,科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上,构建抗体一药物偶联物(ADC),过程如图1所示。
(1)动物细胞培养时,可以用___________酶处理动物组织,得到分散的组织细胞,培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质。在培养瓶中动物细胞培养一段时间后停止增殖的原因是___________(至少回答两点)。
(2)为了刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞,每隔2周用取自___________的特定抗原注射小鼠1次,共注射3次。最后一次免疫后第3天,取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合,常用的生物诱导剂是___________。
(3)通过过程②得到的细胞还必须经过过程③克隆化培养和___________才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行体外培养的方式进行扩大培养。体外培养时,首先应保证其处于___________的环境,除了适宜的营养物质、温度等条件外,还需要控制气体条件是___________与5%CO2的混合气体,此外在使用合成培养基时通常还需加入血清。
(4)单克隆抗体的优点是___________。单克隆抗体是ADC中的___________(填“a”或“b”)部分。
【答案】(1) ①. 胰蛋白(或胶原蛋白)(或胰蛋白酶、胶原蛋白) ②. 细胞密度过大、培养液中营养物质缺乏、有害代谢产物积累
(2) ①. 人的乳腺癌细胞 ②. 灭活的病毒
(3) ①. 抗体检测 ②. 无菌、无毒 ③. 95%空气
(4) ①. 能准确地识别抗原的细微差异,与特定的抗原发生特异性结合,并且可以大量制备(或特异性强、灵敏度高、可大量制备) ②. a
【解析】
【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞,杂交瘤细胞既能产生抗体,又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。
【小问1详解】
动物细胞培养时,可以用胰蛋白(或胶原蛋白)酶处理动物组织,得到分散的组织细胞,获得单细胞悬液,为了保证细胞正常生命活动,培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质。在培养瓶中动物细胞培养一段时间后停止增殖,即出现接触抑制,其原因是细胞密度过大、培养液中营养物质缺乏、有害代谢产物积累,进而导致生长停止。
【小问2详解】
为了刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞,每隔2周用取自人的乳腺癌细胞的特定抗原注射小鼠1次,共注射3次。最后一次免疫后第3天,取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合,常用的生物诱导剂是灭活的病毒,该方法是诱导动物细胞融合特有的方法。
【小问3详解】
通过过程②得到的细胞还必须经过过程③克隆化培养和抗体检测才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞,此时获得的杂交瘤细胞既能大量增殖,又能产生足够数量的特定抗体。杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行体外培养的方式进行扩大培养。体外培养时,首先应保证其处于无菌、无毒的环境,否则会受到杂菌污染,除了适宜的营养物质、温度等条件外,还需要控制气体条件是95%空气与5%CO2的混合气体,其中二氧化碳的作用是维持培养液的pH,此外在使用合成培养基时通常还需加入血清,以保证动物细胞所需要的各种营养。
【小问4详解】
单克隆抗体由于纯度高,因而表现出的典型优点是特异性强、灵敏度高,由于杂交瘤细胞可以无限增殖,因此单克隆抗体具有可大量制备的优点;ADC药物是利用单克隆抗体的导向作用,起到定向作用到癌细胞的作用,其对应图中的a部分。
19. Ⅰ.狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉,其生产的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限,难以满足市场化需求。因此,目前一般通过植物细胞工程手段进行培养,具体过程如图所示,其中的数字序号代表处理或生理过程,请回答下列问题:
(1)狼爪瓦松植株乙、丙、丁的获得都利用了_____技术,该技术的原理是_____,启动②③的关键激素是_____。经过⑥生产黄酮类化合物利用了_____技术。
(2)①选择幼嫩的叶用于接种的原因是_____。⑤原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇,请从细胞吸水与失水的角度分析原因:_____。
Ⅱ.科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株,为了便于杂种细胞的筛选和鉴定,科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质,其培育过程如图所示。据图回答下列问题:
(3)为获得原生质体,过程①需要利用_____处理两种植物细胞。两种植物细胞的原生质体融合成功的依据是_____。
(4)写出促进原生质体融合的方法_____(写出两个)。
(5)细胞融合完成后,融合细胞的细胞膜表面的荧光颜色可能是_____。
(6)已知番茄细胞内有12对同源染色体,马铃薯细胞内共48条染色体,则在“番茄—马铃薯”细胞分裂过程中最多可以观察到_____条染色体。
【答案】(1) ①. 植物组织培养 ②. 植物细胞的全能性 ③. 生长素和细胞分裂素 ④. 植物细胞培养
(2) ①. 幼嫩叶片细胞分化程度低,分裂能力强,更容易诱导脱分化形成愈伤组织 ②. 维持培养液的渗透压,防止原生质体吸水涨破,保持原生质体正常形态
(3) ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 杂种原生质体再生出细胞壁
(4)聚乙二醇(PEG)诱导、高Ca2+-高pH、电融合
(5)只显红色、只显绿色、同时显红色和绿色 (6)144
【解析】
【小问1详解】
题图中乙、丙、丁都是由离体植物细胞培育得到的完整植株,均利用植物组织培养技术,该技术的原理是植物细胞的全能性(已分化植物细胞仍具有发育成完整个体的潜能);脱分化、再分化过程的关键调控激素是生长素和细胞分裂素;若仅需要获取细胞代谢产物(黄酮类化合物),无需培养为完整植株,利用植物细胞培养技术培养愈伤组织细胞即可获得产物。
【小问2详解】
选择幼嫩叶片作为接种材料,是因为幼嫩组织分化程度低、分裂能力强,更容易诱导脱分化形成愈伤组织;原生质体没有细胞壁,甘露醇可以维持培养液渗透压,避免原生质体吸水涨破,维持原生质体正常形态。
【小问3详解】
植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,因此去除细胞壁获得原生质体需要用纤维素酶和果胶酶处理;原生质体融合成功的标志是杂种原生质体重新再生出细胞壁。
【小问4详解】
诱导原生质体融合的常用方法包括物理法(离心、振动、电激)、化学法(聚乙二醇PEG诱导、高Ca2+-高pH),任写两个即可。
【小问5详解】
番茄原生质体膜蛋白被红色荧光标记,马铃薯被绿色荧光标记,融合后融合细胞有三种类型:两个番茄原生质体融合(仅红色)、两个马铃薯原生质体融合(仅绿色)、番茄和马铃薯原生质体融合(同时有红、绿色)。
【小问6详解】
染色体数量计算:番茄12对同源染色体共24条,马铃薯含48条,因此杂种细胞共有24+48=72条染色体;细胞有丝分裂后期着丝粒分裂,染色体数目加倍,因此分裂过程中最多可以观察到72×2=144条染色体。
20. 某植物的转录因子基因(CtWR11)可能具有调控植物脂肪酸、油脂的合成与积累的功能,科研人员通过PCR获得CtWR11基因,并通过烟草遗传转化对其功能进行研究。图甲为实验过程中使用的Ti质粒图谱及T-DNA结构,图乙为不同限制酶的酶切序列和CtWR11的结构及转录方向。
(1)为了将CtWR11编码序列与图甲中的Ti质粒正确连接,构建引物F和引物R时应在5′端分别添加_______(填限制酶种类)的识别序列,通过酶切和连接后可获得连接产物。
(2)CtWR11转录的模板链的序列为:5′-TTAGCCT………TACCGACAT-3′,请写出引物R的前10位碱基序列:5′-____________-3′。
(3)通过________法将CtWR11编码序列导入烟草细胞,利用含_______的培养基对烟草细胞进行初步筛选,再通过________技术获得转基因烟草植株。可以通过________等技术从分子水平上检测烟草细胞的染色体DNA上是否插入了CtWR11编码序列。
(4)科研人员测定野生型烟草(WT)和转基因烟草中CtWR11的相对表达量、脂肪酸合成基因的相对表达量和种子含油量,结果见图丙。据图丙分析,转基因烟草种子含油量增加的可能原因是_____________。
【答案】(1)SacⅠ和PstⅠ
(2)CTGCAGTTAG
(3) ①. 农杆菌转化 ②. 除草剂 ③. 植物组织培养 ④. PCR
(4)CtWR11的过量表达促进了脂肪酸合成相关基因的表达,进而促进了油脂的合成
【解析】
【小问1详解】
由图甲中T - DNA结构可知,在启动子2和终止子之间有多个限制酶酶切位点,为保证CtWR11编码序列能正确插入且不破坏其他重要元件,同时考虑到限制酶切割后的黏性末端能正确连接,结合图乙中CtWR11的结构及转录方向,应在引物F和引物R的5'端分别添加SacⅠ和Pst Ⅰ的识别序列(Kpn Ⅰ会破坏目的基因,Bal Ⅰ的另一识别位点,位于T-DNA之外,会破坏Ti质粒)。这样切割后产生的黏性末端可以正确连接,构建基因表达载体。
【小问2详解】
已知CtWR11转录的模板链的序列为:5'-TTAGCCT……TACCGACAT - 3',转录是从DNA模板链的3'端向5'端进行,而引物R与模板链的3'端互补配对,所以引物R的前10位碱基序列与模板链从3'端开始的前10个碱基互补。需要在5'端添加限制酶PstⅠ的识别序列,所以引物R的前10位碱基序列为5'-CTGCAGTTAG - 3'。
【小问3详解】
将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法,本题中将CtWR11编码序列导入烟草细胞也可通过农杆菌转化法。因为Ti质粒上的T-DNA可转移并整合到植物细胞的染色体DNA上,从而将目的基因导入受体细胞;由图甲可知,Ti质粒上含有bar代表的除草剂抗性基因,所以利用含除草剂的培养基对烟草细胞进行初步筛选,能够在该培养基上存活的细胞可能含有重组Ti质粒,即可能导入了CtWR11编码序列;将导入目的基因的烟草细胞培养成完整的转基因烟草植株,需要通过植物组织培养技术,利用植物细胞的全能性,将单个细胞培养成完整植株;可采用PCR技术从分子水平上检测烟草细胞的染色体DNA上是否插入了CtWR11编码序列。
【小问4详解】
据图丙分析,转基因烟草中CtWR11的相对表达量高于野生型烟草,同时脂肪酸合成基因的相对表达量也高于野生型烟草,而种子含油量转基因烟草也高于野生型烟草。所以转基因烟草种子含油量增加的可能原因是CtWR11的过量表达促进了脂肪酸合成相关基因的表达,进而促进了油脂的合成,最终导致种子含油量增加。
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高二下学期期末考试(生物)试卷
注意事项:
1.答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息
2.请将答案正确填写在答题卡上
第I卷(选择题)
一、单选题
1. 将外源基因导入受体细胞的过程中需要使用载体,下列有关载体的叙述错误的是( )
A. 载体应对宿主细胞无伤害,以免影响宿主细胞的正常生命活动
B. 载体应具有一个至多个限制酶切割位点,以便于目的基因的插入
C. 基因工程中被用作载体的质粒都是在天然质粒的基础上改造的
D. 将外源基因送入受体细胞的载体可以是切割DNA分子的酶
2. 用A和B两种限制酶同时或分别处理某DNA分子,酶切位点及酶切产物的电泳结果如图甲、乙所示。下列叙述错误的是( )
A. 图甲中X代表的碱基对数为4500,Y是限制酶A的酶切位点
B. 单独使用限制酶B切割该DNA分子,可得到两种不同长度的DNA片段
C. 图中DNA片段经酶A和酶B同时处理后,新增3个末端
D. 若将该线性DNA改为环状质粒,用A、B两种酶同时切割可获得3个DNA片段
3. 人血清白蛋白(HSA)是血浆蛋白的主要成分,具有维持血浆渗透压和进行物质运输的功能。科学家利用转基因技术获得转HSA基因的大肠杆菌,通过发酵工程,实现HSA的大量生产,如图表示HSA基因。下列关于PCR扩增HSA基因的叙述,错误的是( )
A. PCR过程每次循环分为3步,其中温度最低的一步是第二步
B. 应选择引物Ⅰ和引物Ⅵ扩增出HSA基因并用于表达载体的构建
C. 在PCR反应缓冲液中加入Mg2+的作用是激活耐高温的DNA聚合酶
D. 用PCR方法检测大肠杆菌是否导入HSA基因,预变性使DNA充分变性,利于引物更好地和模板结合
4. 新一代人工智能(AI)模型ESM3首次实现了对蛋白质序列、结构和功能的统一推理,使蛋白质工程取得了极大的进展。下列叙述错误的是( )
A. AI可通过基因序列预测蛋白质的空间结构
B. AI可基于已有的科研数据构建结构与功能相匹配的蛋白质模型
C. AI与蛋白质工程结合,可以设计自然界不存在的新蛋白质
D. AI设计的蛋白质通常在细胞外合成,不需要对基因进行操作
5. “筛选”是生物技术与工程中重要的环节。下列叙述正确的是( )
A. 诱导植物原生质体融合时,观察是否再生细胞壁可筛选异种融合细胞
B. 用选择培养基筛选微生物,对照组不接种微生物,实验组接种微生物
C. 在试管婴儿技术中,需取滋养层细胞进行性别鉴定来筛选所需的胚胎
D. 制备单克隆抗体时,需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞
6. 在太空环境中进行动物细胞培养实验,是空间生物学和医学研究的重要部分。在微重力环境中,组织细胞可以均匀悬浮,在三维方向自由生长,不会因为密度的不同导致沉降速度不同,从而影响彼此间的接触与沟通,故细胞有望在空间生长出三维、立体的离体细胞或组织器官。下列叙述正确的是( )
A. 在太空中可将肝细胞或离体的花药培养成一个完整个体
B. 在太空中进行动物细胞培养时,接触抑制现象会减弱
C. 在太空中培养动物细胞无需将动物组织中的细胞分散成单个细胞
D. 在太空中进行动物细胞培养时,需要对动物组织进行灭菌处理且培养液要定期更换
7. 下列有关培养基和培养液的叙述,错误的是( )
A. 动物细胞培养液和动物胚胎早期培养液中都需要加入动物血清,以满足特殊营养需求
B. 进行动物细胞培养时,培养液中可以添加一定量的抗生素,以保证无病毒环境
C. 植物组织培养培养基和动物细胞培养培养基的物理性质不同
D. 杂交瘤细胞常用的培养方法有体外培养和体内培养,体外培养在液体培养基中进行
8. 爱德华兹因体外受精技术获得2010年诺贝尔生理学或医学奖,被誉为“试管婴儿之父”。下列相关说法错误的是( )
A. 收集的精子需诱导获能后才能用于体外受精
B. 采集来的初级卵母细胞可以直接用于体外受精
C. 早期胚胎植入子宫后需对母体进行妊娠检查
D. 试管婴儿技术解决了某些不孕夫妇的生育问题
9. 采用机械方法将早期胚胎分割后移植,可以获得同卵双胎或多胎。下列相关叙述正确的是( )
A. 目前利用胚胎分割技术,同卵双胎较同卵多胎成功率更高
B. 胚胎分割时,应选取原肠胚并将其均等分割后在体外培养
C. 利用胚胎分割技术可以获得两个基因型不同的胚胎
D. 分割后的胚胎进行移植前可取透明带进行性别鉴定
10. 生物技术在农业、医学和环境保护等领域具有广泛应用,但同时也带来了一些伦理和安全问题。下列叙述正确的是( )
A. 基因编辑技术可用于疾病预防领域研究和设计完美婴儿
B. 若转基因植物的外源基因来源于自然界,则不会存在安全问题
C. 只要有证据证明转基因产品不安全,就应禁止转基因技术的研究
D. 可利用胚胎干细胞技术获取人体组织细胞或器官,作为器官移植供体
11. 科学家用AI工具预测并证实:在不改变终止密码子UGA上游7个密码子所编码氨基酸前提下,将第三位碱基统一替换为A或U,UGA终止功能会被抑制,可继续参与翻译。下列叙述错误的是( )
A. 密码子是指mRNA上决定1个氨基酸的3个相邻碱基
B. 密码子改变但编码氨基酸不变,体现了密码子的简并性
C. UGA功能被抑制,但产生的多肽链不会发生改变
D. 该AI工具有助于加快遗传病相关基因治疗方案的设计
12. 下列关于细胞分化和全能性的说法,正确的是( )
A. 细胞分化是一种持久性的变化,分化后的细胞失去了分裂能力
B. 细胞分化的程度越高,遗传物质的变化越大
C. 细胞分化导致基因的选择性表达,细胞种类增多
D. 胚胎干细胞能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型,这是细胞全能性的体现
13. 下列关于生物武器的说法,错误的是( )
A. 生物武器具有致病能力强,攻击范围广的特点
B. 彻底销毁生物武器是全世界爱好和平的人民的共同期望
C. 生物武器的种类包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类和毒品类等
D. 生物武器可通过吸入、误食、接触带菌物品、被带菌昆虫叮咬等侵入人体
14. 科学家利用基因编辑技术,定向删除猪胚胎中控制特定器官发育的关键基因,使胚胎无法自主形成该器官。然后选取患者的体细胞通过诱导形成iPS细胞,并将人类iPS细胞注入已处理的猪的囊胚中形成人——动物嵌合体胚胎。将该嵌合胚胎导入受体猪的子宫中,通过控制发育进程可获得相应的器官。该项技术可为器官移植提供潜在供体。下列叙述或推测正确的是( )
A. 嵌合胚胎的获得运用了核移植技术
B. 应该将iPS细胞注入猪囊胚的滋养层中
C. 通过该技术获得的器官可能含有人和猪的基因
D. 该技术没有冲击现有的伦理道德,可大力推广
15. 关于"琼脂糖凝胶电泳"实验,下列叙述正确的是( )
A. 根据待分离DNA片段的大小,需用无菌水配制0.8%~1.2%的琼脂糖溶液
B. 向琼脂糖溶液中加入适量的核酸染料后,需在沸水浴内加热至琼脂糖熔化
C. 将PCR产物和电泳缓冲液混合后,需用微量移液器将混合液缓慢注入加样孔
D. 待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时,需及时断电并取出凝胶置于紫外灯下观察
16. 党的二十大指出,我们要坚持绿水青山就是金山银山的理念,在废弃矿山生态治理工作的推进下,目前很多历史遗留矿山披绿焕颜。下列叙述错误的是( )
A. 人工制造表土是矿区废弃地植被恢复工程的前提
B. 矿区废弃地的植被恢复需要土壤微生物群落的重建
C. 修复后,植物多样性提高,丰富了动物栖息环境,促进了群落的演替
D. 修复后,生物群落能实现自我更新和维持,体现了生态工程的协调原理
第II卷(非选择题)
二、解答题
17. 某种RNA病毒的抗原性和感染性与其表面的S蛋白(刺突糖蛋白)密切相关,现利用基因工程的方法生产相关疫苗。图甲为构建S蛋白基因表达载体的过程,图乙为重组质粒被相关酶切后的电泳结果。请回答下列问题:
(1)①过程所使用的酶为______,PCR技术中复性的目的是______。
(2)PCR过程经过4次循环,消耗的引物的数量是______个。
(3)构建好的重组质粒长度共2000bp,用限制酶HindⅢ及限制酶HindⅢ和BamHⅠ分别对重组质粒进行切割并电泳,结果如图乙所示,可推测BamHⅠ在重组质粒上有______个酶切位点。为使S蛋白基因在受体细胞中高效表达,需要将S蛋白基因插入重组质粒的______之间。
(4)腺病毒载体疫苗是将S蛋白基因插入到改造后的腺病毒基因组中,该疫苗进入人体后,S蛋白基因利用人体细胞的蛋白质表达系统指导S蛋白的合成,其过程是______(用文字和箭头表示)。
18. 为降低人类乳腺癌治疗药物的副作用,科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上,构建抗体一药物偶联物(ADC),过程如图1所示。
(1)动物细胞培养时,可以用___________酶处理动物组织,得到分散的组织细胞,培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质。在培养瓶中动物细胞培养一段时间后停止增殖的原因是___________(至少回答两点)。
(2)为了刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞,每隔2周用取自___________的特定抗原注射小鼠1次,共注射3次。最后一次免疫后第3天,取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合,常用的生物诱导剂是___________。
(3)通过过程②得到的细胞还必须经过过程③克隆化培养和___________才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行体外培养的方式进行扩大培养。体外培养时,首先应保证其处于___________的环境,除了适宜的营养物质、温度等条件外,还需要控制气体条件是___________与5%CO2的混合气体,此外在使用合成培养基时通常还需加入血清。
(4)单克隆抗体的优点是___________。单克隆抗体是ADC中的___________(填“a”或“b”)部分。
19. Ⅰ.狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉,其生产的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限,难以满足市场化需求。因此,目前一般通过植物细胞工程手段进行培养,具体过程如图所示,其中的数字序号代表处理或生理过程,请回答下列问题:
(1)狼爪瓦松植株乙、丙、丁的获得都利用了_____技术,该技术的原理是_____,启动②③的关键激素是_____。经过⑥生产黄酮类化合物利用了_____技术。
(2)①选择幼嫩的叶用于接种的原因是_____。⑤原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇,请从细胞吸水与失水的角度分析原因:_____。
Ⅱ.科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株,为了便于杂种细胞的筛选和鉴定,科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质,其培育过程如图所示。据图回答下列问题:
(3)为获得原生质体,过程①需要利用_____处理两种植物细胞。两种植物细胞的原生质体融合成功的依据是_____。
(4)写出促进原生质体融合的方法_____(写出两个)。
(5)细胞融合完成后,融合细胞的细胞膜表面的荧光颜色可能是_____。
(6)已知番茄细胞内有12对同源染色体,马铃薯细胞内共48条染色体,则在“番茄—马铃薯”细胞分裂过程中最多可以观察到_____条染色体。
20. 某植物的转录因子基因(CtWR11)可能具有调控植物脂肪酸、油脂的合成与积累的功能,科研人员通过PCR获得CtWR11基因,并通过烟草遗传转化对其功能进行研究。图甲为实验过程中使用的Ti质粒图谱及T-DNA结构,图乙为不同限制酶的酶切序列和CtWR11的结构及转录方向。
(1)为了将CtWR11编码序列与图甲中的Ti质粒正确连接,构建引物F和引物R时应在5′端分别添加_______(填限制酶种类)的识别序列,通过酶切和连接后可获得连接产物。
(2)CtWR11转录的模板链的序列为:5′-TTAGCCT………TACCGACAT-3′,请写出引物R的前10位碱基序列:5′-____________-3′。
(3)通过________法将CtWR11编码序列导入烟草细胞,利用含_______的培养基对烟草细胞进行初步筛选,再通过________技术获得转基因烟草植株。可以通过________等技术从分子水平上检测烟草细胞的染色体DNA上是否插入了CtWR11编码序列。
(4)科研人员测定野生型烟草(WT)和转基因烟草中CtWR11的相对表达量、脂肪酸合成基因的相对表达量和种子含油量,结果见图丙。据图丙分析,转基因烟草种子含油量增加的可能原因是_____________。
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