内容正文:
2025~2026学年度第二学期期末练习
高二生物学
考生须知
1.本试卷共9页,共两部分,21道小题,满分100分,考试时间90分钟。
2.在试卷和答题卡上准确填写学校、班级、姓名和准考证号。
3.试题答案一律填涂或书写在答题卡上,在试卷上作答无效。
4.在答题卡上,选择题用2B铅笔作答,其他试题用黑色字迹签字笔作答。
第一部分选择题(共30分)
本部分共15小题,每小题2分,共30分。在每小题列出的四个选项中,选出最符合题目要求的一项。
1. 对比传统的家庭果酒制作过程与利用啤酒酵母工业化生产啤酒过程,二者均需要( )
A. 选育产酒精量高的菌种 B. 进行严格灭菌和密封
C. 定期排出装置中的气体 D. 监测pH和溶氧等条件
【答案】C
【解析】
【详解】A、传统家庭果酒制作的菌种为葡萄皮表面附着的野生酵母菌,无需专门选育高产菌种,工业化啤酒生产需要选育优良菌种,A错误;
B、传统家庭果酒制作不需要严格灭菌,发酵液的缺氧、酸性环境可抑制绝大多数杂菌繁殖,严格灭菌反而会杀死野生酵母菌种,B错误;
C、酵母菌无氧呼吸产生酒精的同时会生成CO₂,两类生产过程都需要定期排出装置内的CO₂,避免装置内压强过大发生爆裂,C正确;
D、传统家庭果酒制作操作简单,无需专门监测pH、溶氧等参数,工业化生产为保证产品品质和产量需要监测相关条件,D错误。
2. 菘蓝(俗称板蓝根)和青菜是十字花科不同种的植物。我国科学家利用体细胞杂交技术,成功培育出含有抗病毒成分的“板蓝根青菜”。下列叙述正确的是( )
A. 制备原生质体需要使用溶菌酶
B. 常用灭活的病毒诱导原生质体融合
C. 两种原生质体的细胞膜发生融合表明原生质体融合成功
D. 利用植物细胞培养技术有助于该抗病毒成分的工厂化生产
【答案】D
【解析】
【详解】A、植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶,制备原生质体需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,溶菌酶的作用是分解细菌的肽聚糖细胞壁,不能用于制备植物原生质体,A错误;
B、灭活的病毒是诱导动物细胞融合的特有方法,植物原生质体融合常用物理法(离心、电激等)或化学法(聚乙二醇诱导),B错误;
C、原生质体融合成功的标志是杂种细胞再生出细胞壁,仅细胞膜融合不能代表原生质体融合成功,C错误;
D、利用植物细胞培养技术可大规模培养杂种细胞,从细胞代谢产物中提取抗病毒成分,有助于实现该成分的工厂化生产,D正确。
3. 抗A蛋白单克隆抗体可用于非洲猪瘟的早期诊断,其制备流程如下:蛋白A→免疫小鼠→细胞融合→筛选→克隆化培养→抗体检测→大规模生产。下列叙述错误的是( )
A. 制备过程需利用动物细胞培养技术,体现了动物细胞的全能性
B. 需用蛋白A对小鼠进行多次免疫
C. 从免疫小鼠体内获取B淋巴细胞并与培养的骨髓瘤细胞融合
D. 能在选择培养基上长期存活的为杂交瘤细胞
【答案】A
【解析】
【详解】A、动物细胞培养原理是细胞增殖,不能体现动物细胞的全能性,A错误;
B、用蛋白A对小鼠进行多次免疫,为了得到能产生特定抗体的B淋巴细胞,B正确;
C、单克隆抗体制备过程中,需从免疫小鼠体内获取已免疫的B淋巴细胞,与能无限增殖的骨髓瘤细胞融合,以获得兼具分泌抗体、无限增殖能力的杂交瘤细胞,C正确;
D、选择培养基可筛选掉未融合的亲本细胞、同种细胞融合的细胞,只有杂交瘤细胞能在选择培养基上长期存活,D正确。
4. 研究人员欲通过胚胎工程的方法拯救濒危的野生单峰骆驼,进行了如图所示研究,下列说法正确的是( )
A. 为使A超数排卵,可在其饲料中添加适量的促性腺激素
B. 为提高胚胎利用率,可采用体外受精等无性繁殖技术
C. 卵裂期胚胎的总体积不增加,但有机物总量减少
D. 受体C一定为生存能力强、生产能力强的野生单峰骆驼
【答案】C
【解析】
【详解】A、促性腺激素的化学本质是蛋白质,若添加在饲料中饲喂,会被动物消化道中的蛋白酶分解而失去作用,因此需通过注射法给药,A错误;
B、体外受精过程经过了两性生殖细胞的结合,属于有性繁殖技术,不属于无性繁殖,B错误;
C、卵裂期胚胎被透明带包裹,总体积不增加甚至略有减小,该阶段胚胎无法从外界获取营养,细胞呼吸会不断消耗有机物,因此有机物总量减少,C正确;
D、受体C的作用是为胚胎发育提供孕育的生理环境,仅需要是健康、与供体同期发情的同种雌性单峰骆驼即可,不需要是野生单峰骆驼,D错误。
5. 关于“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验说法错误的是( )
A. DNA的粗提取利用了DNA溶于酒精而某些蛋白质不溶于酒精的原理
B. 在鉴定DNA的操作过程中,DNA的双螺旋结构会发生改变
C. PCR时需添加4种脱氧核苷酸混合液、引物及相关的酶等
D. 电泳中,凝胶载样缓冲液中的指示剂用于判断DNA样品的电泳迁移距离
【答案】A
【解析】
【详解】A、DNA粗提取的原理是DNA不溶于酒精,而部分蛋白质可溶于酒精,利用该原理可实现DNA和蛋白质的进一步分离,A错误;
B、DNA鉴定时需将样品与二苯胺试剂混合后沸水浴加热,高温会使DNA双螺旋解开,空间结构发生改变,B正确;
C、PCR扩增DNA片段的反应体系包含4种脱氧核苷酸、引物、耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)、模板DNA等,C正确;
D、凝胶载样缓冲液中的指示剂迁移速率通常快于待测DNA片段,可通过指示剂的迁移位置判断DNA样品的电泳迁移距离,D正确。
6. 研究人员通过基因工程将抗玉米螟基因cry1Ab13和抗除草剂基因Bar一起转入玉米中以提升其抗虫和抗除草剂的能力,过程如下图。相关叙述错误的是( )
A. 需在步骤①获取的cry1Ab13基因两端添加BamH Ⅰ识别序列
B. 步骤②应将cry1Ab13基因插入表达载体的启动子1和终止子1之间
C. 步骤③时应先用Ca2+处理农杆菌,使它处于能吸收周围环境中DNA的生理状态
D. 步骤⑤为再分化,通过喷除草剂筛选出的个体均能稳定遗传抗虫性状
【答案】D
【解析】
【详解】A、构建重组表达载体时需要用同种限制酶切割目的基因和载体,使二者产生相同的黏性末端以便连接,图示表达载体上的可用酶切位点为,因此需在获取的基因两端添加识别序列,A正确;
B、启动子是RNA聚合酶识别结合的位点,可启动基因的转录,终止子可终止转录,目的基因只有插入启动子和终止子之间才能正常表达,因此基因应插入启动子1和终止子1之间,B正确;
C、 将重组表达载体导入农杆菌时,需用处理农杆菌,使其处于感受态,易于吸收周围环境中的DNA分子,C正确;
D、步骤⑤是愈伤组织再分化形成完整植株的过程:喷除草剂仅能筛选出含有抗除草剂基因的个体,无法保证抗虫基因也成功导入并表达;即使抗虫基因成功整合到染色体上,通常仅整合到一对同源染色体的一条上,相当于杂合子,有性生殖时会发生性状分离,无法稳定遗传抗虫性状,D错误。
7. 为防止基因污染,下列措施错误的是( )
A. 转基因生物需进行严格的隔离种植
B. 基因工程废弃物需进行无害化处理
C. 转基因农作物的繁殖体不需要处理
D. 可采用雄性不育系培育转基因植物
【答案】C
【解析】
【详解】A、对转基因生物进行严格的隔离种植,可阻断转基因生物与野生近缘物种的基因交流,避免外源基因扩散,能有效防止基因污染,A正确;
B、基因工程废弃物可能携带含有外源基因的生物材料,进行无害化处理可避免这些材料进入自然环境引发基因污染,B正确;
C、转基因农作物的繁殖体(如种子、花粉等)如果不进行处理随意扩散,很容易将外源基因传递给其他同种或近缘物种,引发基因污染,因此必须对其进行严格管控处理,C错误;
D、雄性不育系无法产生可育花粉,可避免通过花粉传播外源基因,是防止基因污染的有效措施,D正确。
8. PET-CT是一种使用示踪剂的影像学检查方法。所用示踪剂由细胞能量代谢的主要能源物质改造而来,进入细胞后不易被代谢,可以反映细胞摄取能源物质的量。由此可知,这种示踪剂是一种改造过的( )
A. 无机盐 B. 葡萄糖 C. 氨基酸 D. 脂质
【答案】B
【解析】
【分析】主要的能源物质:糖类;主要的储能物质:脂肪。
【详解】A、无机盐不能提供能量,A错误;
B、主要能源物质是糖类,根据题干信息,所用示踪剂由细胞能量代谢的主要能源物质改造而来,这种示踪剂是一种改造过的葡萄糖,B正确;
C、蛋白质是生命活动的主要承担者,而蛋白质的基本单位是氨基酸,C错误;
D、脂质包括脂肪、固醇和磷脂,其中脂肪是主要的储能物质,D错误。
故选B。
9. 脑钠肽(BNP)是临床诊断心力衰竭的重要血清标志物,主要由心室肌细胞合成并分泌。当心室负荷增加或心肌受损时,BNP基因表达上调,BNP被释放入血。下列相关叙述正确的是( )
A. BNP在核糖体上合成后即具有生物活性
B. 心室肌细胞分泌BNP时依赖载体蛋白协助
C. 心力衰竭患者的血清中BNP含量高于健康人的
D. BNP基因只存在于心室肌细胞中
【答案】C
【解析】
【详解】A、BNP属于分泌蛋白,核糖体上仅能合成多肽链,多肽链需要经过内质网、高尔基体的加工修饰后才具备生物活性,A错误;
B、心室肌细胞分泌BNP的方式为胞吐,该过程依赖细胞膜的流动性,不需要载体蛋白协助,B错误;
C、题意显示,心室负荷增加或心肌受损时,BNP基因表达上调、释放入血的量增加,心力衰竭患者存在心室负荷升高、心肌受损的情况,因此其血清中BNP含量高于健康人,C正确;
D、人体所有体细胞均由受精卵经有丝分裂产生,核基因完全一致,BNP基因存在于几乎所有人体体细胞中,仅在心室肌细胞中选择性表达,D错误。
10. 用核酸分子特异性染料处理小鼠iPS细胞,不能被标记的细胞结构是( )
A. 细胞核 B. 溶酶体 C. 线粒体 D. 核糖体
【答案】B
【解析】
【详解】A、细胞核中含有DNA和RNA两类核酸,可与核酸特异性染料结合被标记,A不符合题意;
B、溶酶体是单层膜包被的细胞器,内含多种水解酶,不含核酸,不能被该染料标记,B符合题意;
C、线粒体中含有少量DNA和RNA,可与核酸特异性染料结合被标记,C不符合题意;
D、核糖体由rRNA和蛋白质组成,rRNA属于核酸,可与核酸特异性染料结合被标记,D不符合题意。
11. 高浓度的氯离子(Cl-)会对植物根系造成Cl-胁迫和毒害。如图所示,ABA可调控根系细胞膜上离子转运蛋白的表达与活性,以应对逆境胁迫。下列叙述正确的是( )
A. 转运蛋白甲和转运蛋白乙均转运Cl-,故两者结构与功能相同
B. 若植物根系细胞膜上ABA受体缺失,细胞内Cl-浓度将升高
C. Cl-胁迫诱导ABA合成,ABA反过来抑制Cl-内流,属于负反馈调节
D. 转运蛋白乙不需要内质网和高尔基体的加工
【答案】B
【解析】
【详解】A、细胞的结构决定功能,转运蛋白甲负责将Cl⁻运入细胞,乙负责将Cl⁻运出细胞,二者功能不同,空间结构也不相同,A错误;
B、ABA结合受体后,会促进转运蛋白乙的基因表达,进而促进Cl⁻排出细胞;若ABA受体缺失,该促进作用无法进行,Cl⁻排出减少,同时Cl⁻仍持续通过甲进入细胞,因此细胞内Cl⁻浓度会升高,B正确;
C、从图中可知,ABA的作用是与受体结合后促进相关基因的表达,进而促进Cl⁻外流,而非抑制Cl⁻内流,C错误;
D、转运蛋白乙是细胞膜上的膜蛋白,经核糖体合成后需要内质网和高尔基体的加工、运输,D错误。
12. 茶树鲜叶中的茶多酚经多酚氧化酶催化生成红色物质。若将茶树鲜叶进行高温快炒,可使叶片保持绿色。该操作使叶片保持绿色的原因是( )
A. 生物膜被破坏
B. 葡萄糖初步分解受抑制
C. 细胞含水量降低
D. 多酚氧化酶失活
【答案】D
【解析】
【详解】高温快炒的高温环境会破坏多酚氧化酶的空间结构,使多酚氧化酶失活,无法催化茶多酚生成红色物质,因此叶片能保持绿色,D正确,ABC错误。
13. 某研究团队将招募的一批健康受试者均分为两组,分别进行3 min低强度运动和高强度运动,运动开始后血浆中的乳酸浓度变化如图所示。下列叙述正确的是( )
A. 骨骼肌细胞产生CO2的场所是细胞质基质和线粒体基质
B. 低强度运动血浆乳酸水平升高是骨骼肌细胞有氧呼吸的结果
C. 结果表明高强度运动所需ATP主要来自细胞无氧呼吸
D. 两种强度运动后,血浆乳酸水平的变化均不会影响血浆pH的相对稳定
【答案】D
【解析】
【详解】A、骨骼肌细胞无氧呼吸的产物为乳酸,不产生CO2,仅有氧呼吸第二阶段在线粒体基质中产生CO2,因此骨骼肌细胞产生CO2的场所只有线粒体基质,A错误;
B、乳酸是细胞无氧呼吸的产物,有氧呼吸不产生乳酸,低强度运动血浆乳酸水平升高是部分骨骼肌细胞进行无氧呼吸的结果,B错误;
C、无论运动强度高低,细胞所需ATP主要都来自有氧呼吸,无氧呼吸仅能提供少量能量,C错误;
D、两种强度运动后,血浆乳酸浓度下降并逐渐恢复到正常范围,均不影响血浆pH的相对稳定,D正确。
14. 下图是某高等植物叶绿体中光合作用过程的示意图,①、②表示生理过程,I、Ⅱ表示化合物。下列叙述正确的是( )
A. 过程②只在黑暗条件下才能进行
B. 过程②为过程①提供某些物质
C. Ⅰ和Ⅱ分别是NADH和ATP
D. 过程①发生在叶绿体基质中
【答案】B
【解析】
【详解】A、过程②代表的是暗反应阶段,有光、无光都可以进行,A错误;
B、过程①光反应可以为过程②暗反应提供ATP和[H](NADPH),B正确;
C、由图可知,化合物Ⅰ和Ⅱ分别代表ATP和[H](NADPH),C错误;
D、①代表的是光反应阶段,场所是叶绿体的类囊体薄膜,D错误。
15. 某同学以大蒜根尖为材料进行实验,获得如下不同的细胞分裂图像。下列叙述错误的是( )
A. 该实验流程是解离→漂洗→染色→制片
B. ③④时期染色体数:核DNA数=1:2
C. 图中各细胞所处时期的先后顺序②③①⑤④
D. 视野中处于②时期的细胞数量比其他时期的多
【答案】B
【解析】
【详解】A、观察大蒜根尖细胞有丝分裂的实验流程为解离(使细胞相互分离开来)→漂洗(洗去多余的解离液,防止解离过度)→染色(给染色体染色)→制片(其中压片使细胞分散开来),A正确;
B、③为有丝分裂前期,每条染色体含有2条姐妹染色单体、2个核DNA分子,染色体数:核DNA数=1:2;④为有丝分裂末期,着丝粒已经分裂,每条染色体仅含有1个核DNA分子,染色体数:核DNA数=1:1,B错误;
C、②为有丝分裂间期,③为有丝分裂前期,①为有丝分裂中期,⑤为有丝分裂后期,④为有丝分裂末期。图中各细胞所对应顺序为②③①⑤④,C正确;
D、细胞周期中间期占比最长,因此视野中处于②间期的细胞数量远多于分裂期细胞,D正确。
第二部分非选择题,本部分共6题,共70分
16. 阿卡波糖是治疗Ⅱ型糖尿病的药物,它是绝大多数生物不能利用的低聚糖,但能抑制淀粉酶等的活性。部分患者长期使用后出现耐药现象,推测与肠道微生物有关。
(1)为筛选能降解阿卡波糖的肠道菌株,培养基中应添加阿卡波糖,为微生物生长提供____________,配制好的培养基经____________处理后方可用于接种。
(2)为寻找影响阿卡波糖疗效的肠道微生物,研究人员收集耐药患者的粪便样本,进行图1实验。经过图中①~⑤的步骤实现对目的菌株的____________,⑥采用____________法接种以分离获得单个菌落,筛选后鉴定出能降解阿卡波糖的菌种TD1。
(3)为研究TD1对阿卡波糖治疗Ⅱ型糖尿病疗效的影响,研究人员将Ⅱ型糖尿病模型小鼠分为4组,用图2所示的溶液进行灌胃15天,每天1次。第15天同时用淀粉溶液对4组小鼠灌胃,结果如图2所示。
①第2组血糖增量显著低于第1组,表明( )。
②综合以上信息解释第4组血糖增量显著高于第2组的原因( )。
(4)基于上述研究结果提出一条缓解阿卡波糖耐药性的研究方向______________________。
【答案】(1) ①. 碳源 ②. 高压蒸汽灭菌
(2) ①. 浓度增加 ②. 稀释涂布平板
(3) ①. 阿卡波糖能降低血糖增量##阿卡波糖可抑制淀粉酶活性,减少淀粉分解,从而降低血糖 ②. TD1能降解阿卡波糖,降低了阿卡波糖抑制淀粉酶活性的能力,使淀粉分解增加,血糖升高
(4)筛选能竞争性抑制TD1降解阿卡波糖的物质、改造阿卡波糖结构使其不易被TD1降解等
【解析】
【小问1详解】
筛选能降解阿卡波糖的肠道菌株时,培养基中添加的阿卡波糖属于含碳有机物,可为微生物生长提供碳源,为避免杂菌污染,配制好的培养基需经高压蒸汽灭菌处理后,才能用于接种。
【小问2详解】
图1逐步提高阿卡波糖浓度,可筛选出能降解阿卡波糖的目的菌株,同时让目的菌株数量增加,该过程实现目的菌株的浓度增加,由图示可知分离获得单个菌落,采用的接种方法为稀释涂布平板法。
【小问3详解】
①第1组仅用缓冲液处理,第2组用阿卡波糖处理,第2组血糖增量显著低于第1组,说明阿卡波糖能降低血糖增量(或阿卡波糖可抑制淀粉酶活性,减少淀粉分解,从而降低血糖)。
②第4组同时使用阿卡波糖和TD1,血糖增量显著高于第2组(仅用阿卡波糖),原因是TD1能降解阿卡波糖,降低了阿卡波糖抑制淀粉酶活性的能力,使淀粉分解增加,血糖升高。
【小问4详解】
基于“TD1降解阿卡波糖导致耐药”的研究结果,可筛选能竞争性抑制TD1降解阿卡波糖的物质;改造阿卡波糖结构,使其不易被TD1降解。
17. 学习以下材料,回答问题(1)~(4)。
基因打靶技术
基因打靶(又称基因敲除)是基于同源重组原理的基因修饰技术,可定向敲除生物体内特定基因,用于研究基因功能、构建疾病动物模型。该技术常以小鼠胚胎干细胞(ES细胞)为载体。ES细胞具有全能性,可参与胚胎发育,分化为各种组织器官。
基因打靶的技术流程如下:先构建打靶质粒,质粒上包含与靶基因两侧同源的DNA序列(A′~B′),并插入筛选标记基因。再将打靶质粒导入小鼠ES细胞后,质粒同源序列可与ES细胞基因组上A~B区域(含目的基因)发生同源重组,使标记基因替换目的基因,实现定点敲除(如下图所示)。一般情况下,同源重组效率低,还可能发生非同源随机整合。可采用双标记方法进行筛选。整合了阳性标记基因的细胞可在选择培养基中存活;随机整合了阴性标记基因的细胞会自动死亡。
将敲除成功的ES细胞注入囊胚内,植入代孕母鼠子宫,最终获得基因敲除嵌合体小鼠。
(1)将打靶质粒导入小鼠ES细胞的方法是____________,基因敲除后的ES细胞注入正常小鼠的囊胚腔后存在于囊胚的____________,将来发育成小鼠的各种组织。
(2)动物精原细胞减数分裂过程存在类似于同源重组的现象,该现象发生在____________期。
(3)利用双标记基因进行筛选时,阳性和阴性标记基因均只位于基因组DNA上时才能表达。请利用以下标记基因完成筛选方案。
a.新霉素抗性基因
b.疱疹病毒胸苷激酶基因(其表达产物可使无毒的丙氧鸟苷转变为有毒的核苷酸)
c.荧光标记基因
在设计打靶质粒时,应以____________(填字母)作为阳性标记基因,___________(填字母)作为阴性标记基因。
(4)通过基因打靶技术获得敲除目的基因序列的ES细胞,将其导入囊胚后,再利用____________技术获得模型小鼠。
【答案】(1) ①. 显微注射法 ②. 内细胞团 (2)减数分裂Ⅰ前
(3) ①. a ②. b
(4)胚胎移植
【解析】
【小问1详解】
将打靶质粒导入小鼠ES细胞(动物细胞)的常用方法是显微注射法。内细胞团的细胞具有发育的全能性,将来发育成小鼠的各种组织,所以基因敲除后的ES细胞注入正常小鼠的囊胚腔后存在于囊胚的内细胞团。
【小问2详解】
动物精原细胞减数分裂过程,同源染色体的非姐妹染色单体之间的互换属于类似同源重组的现象,该现象发生在减数分裂Ⅰ前期。
【小问3详解】
新霉素抗性基因(a)可使细胞获得对新霉素的抗性,能用于筛选成功导入打靶质粒且发生预期同源重组(目的基因被阳性标记基因替换)的细胞,所以在设计打靶质粒时,应以a作为阳性标记基因。阴性标记基因的作用是随机整合该基因的细胞会自动死亡。疱疹病毒胸苷激酶基因(b)的表达产物可使无毒的丙氧鸟苷转变为有毒核苷酸,导致细胞死亡,符合阴性标记基因的功能,因此选b作为阴性标记基因。
【小问4详解】
将导入了敲除目的基因ES细胞的囊胚,植入代孕母鼠子宫内,使其发育为完整个体的技术是胚胎移植技术。
18. 白头翁是临床常用中药,具有抗菌、抗炎等药理作用。白头翁皂苷(B4)是从其根茎中分离出来的活性物质。探究B4的跨膜转运机制有助于理解B4的作用机理。
(1)细胞膜是控制物质进出细胞的门户,这体现了细胞膜具有______________性。研究者以人胚肾细胞为研究对象,用不同浓度B4处理细胞1小时,测定胞内B4含量(以每mg胞内蛋白中B4的量为标定)的变化,结果如图1。结果表明,B4进入细胞的转运方式以被动运输为主,理由是______________。
(2)用浓度为30μg·mL-1的B4处理细胞不同时间,记录胞内B4含量,结果如图2。而无细胞的含B4的培养液中B4含量不随时间增加而明显变化。对图2中B4含量在1小时达到峰值后下降的原因,提出三种假设,其中不合理的是______________。
假设1:B4被细胞排出
假设2:B4不稳定,易发生自身降解
假设3:B4被细胞代谢为其他物质
(3)细胞膜上存在药物转运蛋白OC、OA和P,其中OC、OA为摄入型转运蛋白,P为外排型转运蛋白。为探究胞内B4含量下降的原因,研究者继续进行实验。
①分别用OC抑制剂、OA抑制剂和P抑制剂处理人胚肾细胞,检测B4处理后的人胚肾细胞内B4含量的变化,发现仅使用OC抑制剂处理组与对照组有显著差异,且胞内B4含量显著低于对照组。综上可以确定B4进入细胞的方式是________。请在下图中画出上述研究所得的结论______。
②为了进一步确定胞内B4含量下降并非由于细胞对其外排所引起,还应补充的实验是______(思路)。
【答案】(1) ①. 选择透过 ②. 胞内B4含量与B4浓度呈正相关(胞内B4含量随B4浓度增加而上升)
(2)假设2 (3) ①. 协助扩散 ②. ③. 将含有B4的细胞放在不含B4的培养液中,一段时间后检测培养液中是否出现B4
【解析】
【分析】自由扩散不需要转运蛋白参与,不消耗能量,协助扩散需要转运蛋白,不消耗能量,主动运输需要载体蛋白,需要消耗能量。
【小问1详解】
细胞膜是控制物质进出细胞的门户,这体现了细胞膜具有选择透过性。由图1可知,胞内B4含量与B4浓度呈正相关(胞内B4含量随B4浓度增加而上升),所以B4进入细胞的转运方式以被动运输为主。
【小问2详解】
用浓度为30μg·mL-1的B4处理细胞不同时间,记录胞内B4含量,图2中B4含量在1小时达到峰值后下降。假设1中B4被细胞排出,因为细胞具有一定的物质转运功能,有可能将进入细胞的B4排出,从而导致胞内B4含量下降,该假设合理;假设2中B4不稳定,易发生自身降解,这会导致有细胞和无细胞存在时,B4含量均会降低,而题干描述无细胞的含B4的培养液中B4含量不随时间增加而明显变化,该假设不合理;假设3中B4被细胞代谢为其他物质,细胞内存在各种代谢途径,可能将B4代谢为其他物质,导致胞内B4含量下降,该假设合理,所以不合理的是假设2。
【小问3详解】
①分别用OC抑制剂、OA抑制剂和P抑制剂处理人胚肾细胞,检测B4处理后的人胚肾细胞内B4含量的变化,发现仅使用OC抑制剂处理组与对照组有显著差异,且胞内B4含量显著低于对照组,说明B4进入细胞主要依赖OC转运蛋白,即B4进入细胞的方式是协助扩散(依赖OC转运蛋白的协助扩散),对应的图形如图所示。
②为了进一步确定胞内B4含量下降并非由于细胞对其外排所引起,应补充的实验思路是:将含有B4的细胞放在不含B4的培养液中,一段时间后检测培养液中是否出现B4,如果培养液中没有出现B4,则说明胞内B4含量下降不是由于细胞外排引起的。
19. 研究发现,拟南芥的H基因突变体在22℃下生长与野生型无差别,而30℃下生长则叶片呈白色。
(1)30℃下生长时,拟南芥的H基因突变体由于____________无法正常合成,而导致植物对____________的吸收、传递和转化受阻。
(2)研究发现,H基因突变导致H蛋白异常。研究人员提取野生型和突变体的叶片蛋白检测H蛋白含量,结果如图1所示。
特异性检测H蛋白的方法为____________;图1结果表明H蛋白是一种仅在温度升高时表达的热应激蛋白,依据为____________。
(3)研究人员继续检测H蛋白在叶绿体内的分布,结果如图2所示。
注:D1蛋白为类囊体特异性蛋白质,R蛋白为叶绿体基质特异性蛋白质
①下列有关该实验的叙述正确的是____________。
a.应提取H基因突变体植株叶片中的相关蛋白
b.本实验需保证各泳道的蛋白上样量均保持一致
c.D1蛋白和R蛋白的检测结果表明叶绿体基质蛋白和类囊体蛋白充分分离
d.D1蛋白和R蛋白的检测结果可作为H蛋白检测反应的对照
e.H蛋白检测结果中1、2、3泳道条带大小差异主要由操作误差造成
②图2结果说明____________。
(4)进一步研究发现H蛋白可以调控叶绿体基因编码的RNA聚合酶的活性。综合上述研究,推测H基因突变体在30℃条件下生长时叶片呈白色的原因________________________。
【答案】(1) ①. 叶绿素 ②. 光能
(2) ①. 抗原-抗体杂交法 ②. 22℃时,野生型和H基因突变体均无H蛋白,30℃时,仅野生型有H蛋白
(3) ①. bcd ②. H蛋白主要分布在叶绿体的类囊体上
(4)H基因突变导致H蛋白30℃时不表达(H蛋白失活),叶绿体中RNA聚合酶活性降低,影响类囊体上光合色素合成相关基因转录,使光合色素合成受阻
【解析】
【小问1详解】
30℃下H基因突变体叶片呈白色,说明叶绿素合成受阻,叶绿素是植物捕获光能的关键物质,因此叶绿素无法正常合成,植物对光能的吸收、传递和转化受阻。
【小问2详解】
检测特定蛋白质的方法为抗原-抗体杂交法(利用抗体与抗原的特异性结合)。分析图1,22℃时,野生型和H基因突变体均无H蛋白条带,30℃时,仅野生型出现H蛋白条带,突变体无,因此表明H蛋白是一种仅在温度升高时表达的热应激蛋白。
【小问3详解】
①a、实验需检测H蛋白在叶绿体内的分布,应提取野生型植株叶片的相关蛋白(突变体无正常H蛋白),a错误;
b、为保证实验结果的可靠性,各泳道蛋白上样量需一致,b正确;
c、D1蛋白(类囊体特异性蛋白)仅在泳道3出现,R蛋白(叶绿体基质特异性蛋白)仅在泳道2出现,说明叶绿体基质蛋白和类囊体蛋白充分分离,c正确;
d、D1蛋白和R蛋白作为类囊体、叶绿体基质的特异性标记,可作为H蛋白检测的对照,d正确;
e、H蛋白在泳道1(叶绿体蛋白)、3(类囊体蛋白)有明显条带,泳道2(叶绿体基质蛋白)条带弱,说明H蛋白主要分布在类囊体,并非操作误差,e错误。
②图2中,H蛋白在泳道1(叶绿体蛋白)和泳道3(类囊体蛋白)有明显条带,泳道2(叶绿体基质蛋白)条带极弱,说明H蛋白主要分布在叶绿体的类囊体上。
【小问4详解】
H蛋白是一种热应激蛋白(温度升高时表达),调控叶绿体基因编码的RNA聚合酶的活性。RNA聚合酶的功能是催化基因转录成mRNA,进而翻译出相关的蛋白质,据此推测,H基因突变体在30℃时叶子呈白色的原因是H基因突变导致H蛋白30℃时不表达(H蛋白失活),叶绿体中RNA聚合酶活性降低,影响类囊体上光合色素合成相关基因转录,使光合色素合成受阻。
20. 科研团队通过基因工程构建一种工程菌,以监测残留在生物组织或环境中的四环素水平。其监测原理如图1所示,天然大肠杆菌不具备图1中所示基因。
(1)在基因工程中,大肠杆菌作为受体菌的优势有____________(答出两点)。
(2)据图1分析,环境中四环素水平升高时,该种大肠杆菌工程菌的荧光____________,其原理是____________。
(3)若获得上述工程菌,需构建重组质粒,图2是两个DNA片段、质粒及其上的限制酶的识别序列分布情况;其中质粒上的Ampr代表青霉素抗性基因,ori表示复制原点。下表是相关限制酶的识别序列与切割位点。
限制酶
EcoR Ⅰ
Xba Ⅰ
Spe Ⅰ
BamH Ⅰ
识别序列及切割位点
5′-G↓AATTC-3′
3′-CTTAA↑G-5′
5′-T↓CTAGA-3′
3′-AGATC↑T-5′
5′-A↓CTAGT-3′
3′-TGATC↑A-5′
5′-G↓GATCC-3′
3′-CCTAG↑G-5′
结合图表信息,在答题卡的相应区域补充完成最终构建成功的重组质粒示意图____________。
(4)从个体水平,可通过观察____________来鉴定大肠杆菌工程菌是否构建成功。
(5)为提高对环境中四环素水平监测的有效性,研究人员将GFP的第65位丝氨酸变成苏氨酸后,增强了绿色荧光稳定性和强度,该项技术属于____________工程的范畴。
【答案】(1)繁殖快、易培养、遗传物质相对较少
(2) ①. 增强 ②. 四环素可解除TetR蛋白对GFP基因表达的抑制作用,并使大肠杆菌工程菌的GFP蛋白表达量随四环素水平的增加而增加
(3) (4)观察环境中四环素浓度变化是否能引起大肠杆菌工程菌荧光强度的相应改变
(5)蛋白质
【解析】
【小问1详解】
大肠杆菌是原核单细胞生物,作为基因工程受体菌的典型优势是繁殖快、培养条件简单、遗传物质少,便于操作。
【小问2详解】
环境中四环素水平越高,抑制TetR蛋白作用越强,解除TetR蛋白对启动子2的抑制作用的能力越强,GFP基因表达能力越强,荧光就会增强。因此,该种四环素检测方法的原理可表述为:四环素可解除TetR蛋白对GFP基因表达的抑制作用,并使大肠杆菌工程菌的GFP蛋白表达量随四环素水平的增加而增加。
【小问3详解】
据图2可知,DNA片段1两端的限制酶识别序列分别对应XbaI和EcoRⅠ,而DNA片段2两端的限制酶识别序列对应SpeI和BamHⅠ,若要让两个DNA片段连接在一起,需要经酶切后获得相同的黏性末端。据表格可知,XbaI和SpeI酶切能获得相同的黏性末端,拼接后启动子1和启动子2是反向连接的,两个片段经连接后的序列既不能被SpeⅠ酶切,也不能被XbaI酶切,重组质粒为环状,结构如下: 保留质粒原有Amp^r(青霉素抗性基因)和ori(复制原点),在EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ位点之间插入目的片段,顺序为:EcoR Ⅰ → TetR基因 → 启动子1 → XbaⅠ-SpeⅠ连接位点 → 启动子2 → GFP基因 → BamH Ⅰ,最终构建成功的重组质粒如图:。
【小问4详解】
大肠杆菌工程菌构建的目的是监测残留在生物组织或环境中的四环素水平,因此构建成功的标志就是四环素浓度变化能引起大肠杆菌工程菌荧光强度的相应改变,该操作属于个体生物学鉴定。
【小问5详解】
为提高对环境中四环素水平监测的有效性,研究人员将GFP的第65位丝氨酸变成苏氨酸后,增强了绿色荧光稳定性和强度。该技术通过改造基因,对现有蛋白质的氨基酸序列进行定向改造,改良蛋白质功能,属于蛋白质工程的范畴。
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2025~2026学年度第二学期期末练习
高二生物学
考生须知
1.本试卷共9页,共两部分,21道小题,满分100分,考试时间90分钟。
2.在试卷和答题卡上准确填写学校、班级、姓名和准考证号。
3.试题答案一律填涂或书写在答题卡上,在试卷上作答无效。
4.在答题卡上,选择题用2B铅笔作答,其他试题用黑色字迹签字笔作答。
第一部分选择题(共30分)
本部分共15小题,每小题2分,共30分。在每小题列出的四个选项中,选出最符合题目要求的一项。
1. 对比传统的家庭果酒制作过程与利用啤酒酵母工业化生产啤酒过程,二者均需要( )
A. 选育产酒精量高的菌种 B. 进行严格灭菌和密封
C. 定期排出装置中的气体 D. 监测pH和溶氧等条件
2. 菘蓝(俗称板蓝根)和青菜是十字花科不同种的植物。我国科学家利用体细胞杂交技术,成功培育出含有抗病毒成分的“板蓝根青菜”。下列叙述正确的是( )
A. 制备原生质体需要使用溶菌酶
B. 常用灭活的病毒诱导原生质体融合
C. 两种原生质体的细胞膜发生融合表明原生质体融合成功
D. 利用植物细胞培养技术有助于该抗病毒成分的工厂化生产
3. 抗A蛋白单克隆抗体可用于非洲猪瘟的早期诊断,其制备流程如下:蛋白A→免疫小鼠→细胞融合→筛选→克隆化培养→抗体检测→大规模生产。下列叙述错误的是( )
A. 制备过程需利用动物细胞培养技术,体现了动物细胞的全能性
B. 需用蛋白A对小鼠进行多次免疫
C. 从免疫小鼠体内获取B淋巴细胞并与培养的骨髓瘤细胞融合
D. 能在选择培养基上长期存活的为杂交瘤细胞
4. 研究人员欲通过胚胎工程的方法拯救濒危的野生单峰骆驼,进行了如图所示研究,下列说法正确的是( )
A. 为使A超数排卵,可在其饲料中添加适量的促性腺激素
B. 为提高胚胎利用率,可采用体外受精等无性繁殖技术
C. 卵裂期胚胎的总体积不增加,但有机物总量减少
D. 受体C一定为生存能力强、生产能力强的野生单峰骆驼
5. 关于“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验说法错误的是( )
A. DNA的粗提取利用了DNA溶于酒精而某些蛋白质不溶于酒精的原理
B. 在鉴定DNA的操作过程中,DNA的双螺旋结构会发生改变
C. PCR时需添加4种脱氧核苷酸混合液、引物及相关的酶等
D. 电泳中,凝胶载样缓冲液中的指示剂用于判断DNA样品的电泳迁移距离
6. 研究人员通过基因工程将抗玉米螟基因cry1Ab13和抗除草剂基因Bar一起转入玉米中以提升其抗虫和抗除草剂的能力,过程如下图。相关叙述错误的是( )
A. 需在步骤①获取的cry1Ab13基因两端添加BamH Ⅰ识别序列
B. 步骤②应将cry1Ab13基因插入表达载体的启动子1和终止子1之间
C. 步骤③时应先用Ca2+处理农杆菌,使它处于能吸收周围环境中DNA的生理状态
D. 步骤⑤为再分化,通过喷除草剂筛选出的个体均能稳定遗传抗虫性状
7. 为防止基因污染,下列措施错误的是( )
A. 转基因生物需进行严格的隔离种植
B. 基因工程废弃物需进行无害化处理
C. 转基因农作物的繁殖体不需要处理
D. 可采用雄性不育系培育转基因植物
8. PET-CT是一种使用示踪剂的影像学检查方法。所用示踪剂由细胞能量代谢的主要能源物质改造而来,进入细胞后不易被代谢,可以反映细胞摄取能源物质的量。由此可知,这种示踪剂是一种改造过的( )
A. 无机盐 B. 葡萄糖 C. 氨基酸 D. 脂质
9. 脑钠肽(BNP)是临床诊断心力衰竭的重要血清标志物,主要由心室肌细胞合成并分泌。当心室负荷增加或心肌受损时,BNP基因表达上调,BNP被释放入血。下列相关叙述正确的是( )
A. BNP在核糖体上合成后即具有生物活性
B. 心室肌细胞分泌BNP时依赖载体蛋白协助
C. 心力衰竭患者的血清中BNP含量高于健康人的
D. BNP基因只存在于心室肌细胞中
10. 用核酸分子特异性染料处理小鼠iPS细胞,不能被标记的细胞结构是( )
A. 细胞核 B. 溶酶体 C. 线粒体 D. 核糖体
11. 高浓度的氯离子(Cl-)会对植物根系造成Cl-胁迫和毒害。如图所示,ABA可调控根系细胞膜上离子转运蛋白的表达与活性,以应对逆境胁迫。下列叙述正确的是( )
A. 转运蛋白甲和转运蛋白乙均转运Cl-,故两者结构与功能相同
B. 若植物根系细胞膜上ABA受体缺失,细胞内Cl-浓度将升高
C. Cl-胁迫诱导ABA合成,ABA反过来抑制Cl-内流,属于负反馈调节
D. 转运蛋白乙不需要内质网和高尔基体的加工
12. 茶树鲜叶中的茶多酚经多酚氧化酶催化生成红色物质。若将茶树鲜叶进行高温快炒,可使叶片保持绿色。该操作使叶片保持绿色的原因是( )
A. 生物膜被破坏
B. 葡萄糖初步分解受抑制
C. 细胞含水量降低
D. 多酚氧化酶失活
13. 某研究团队将招募的一批健康受试者均分为两组,分别进行3 min低强度运动和高强度运动,运动开始后血浆中的乳酸浓度变化如图所示。下列叙述正确的是( )
A. 骨骼肌细胞产生CO2的场所是细胞质基质和线粒体基质
B. 低强度运动血浆乳酸水平升高是骨骼肌细胞有氧呼吸的结果
C. 结果表明高强度运动所需ATP主要来自细胞无氧呼吸
D. 两种强度运动后,血浆乳酸水平的变化均不会影响血浆pH的相对稳定
14. 下图是某高等植物叶绿体中光合作用过程的示意图,①、②表示生理过程,I、Ⅱ表示化合物。下列叙述正确的是( )
A. 过程②只在黑暗条件下才能进行
B. 过程②为过程①提供某些物质
C. Ⅰ和Ⅱ分别是NADH和ATP
D. 过程①发生在叶绿体基质中
15. 某同学以大蒜根尖为材料进行实验,获得如下不同的细胞分裂图像。下列叙述错误的是( )
A. 该实验流程是解离→漂洗→染色→制片
B. ③④时期染色体数:核DNA数=1:2
C. 图中各细胞所处时期的先后顺序②③①⑤④
D. 视野中处于②时期的细胞数量比其他时期的多
第二部分非选择题,本部分共6题,共70分
16. 阿卡波糖是治疗Ⅱ型糖尿病的药物,它是绝大多数生物不能利用的低聚糖,但能抑制淀粉酶等的活性。部分患者长期使用后出现耐药现象,推测与肠道微生物有关。
(1)为筛选能降解阿卡波糖的肠道菌株,培养基中应添加阿卡波糖,为微生物生长提供____________,配制好的培养基经____________处理后方可用于接种。
(2)为寻找影响阿卡波糖疗效的肠道微生物,研究人员收集耐药患者的粪便样本,进行图1实验。经过图中①~⑤的步骤实现对目的菌株的____________,⑥采用____________法接种以分离获得单个菌落,筛选后鉴定出能降解阿卡波糖的菌种TD1。
(3)为研究TD1对阿卡波糖治疗Ⅱ型糖尿病疗效的影响,研究人员将Ⅱ型糖尿病模型小鼠分为4组,用图2所示的溶液进行灌胃15天,每天1次。第15天同时用淀粉溶液对4组小鼠灌胃,结果如图2所示。
①第2组血糖增量显著低于第1组,表明( )。
②综合以上信息解释第4组血糖增量显著高于第2组的原因( )。
(4)基于上述研究结果提出一条缓解阿卡波糖耐药性的研究方向______________________。
17. 学习以下材料,回答问题(1)~(4)。
基因打靶技术
基因打靶(又称基因敲除)是基于同源重组原理的基因修饰技术,可定向敲除生物体内特定基因,用于研究基因功能、构建疾病动物模型。该技术常以小鼠胚胎干细胞(ES细胞)为载体。ES细胞具有全能性,可参与胚胎发育,分化为各种组织器官。
基因打靶的技术流程如下:先构建打靶质粒,质粒上包含与靶基因两侧同源的DNA序列(A′~B′),并插入筛选标记基因。再将打靶质粒导入小鼠ES细胞后,质粒同源序列可与ES细胞基因组上A~B区域(含目的基因)发生同源重组,使标记基因替换目的基因,实现定点敲除(如下图所示)。一般情况下,同源重组效率低,还可能发生非同源随机整合。可采用双标记方法进行筛选。整合了阳性标记基因的细胞可在选择培养基中存活;随机整合了阴性标记基因的细胞会自动死亡。
将敲除成功的ES细胞注入囊胚内,植入代孕母鼠子宫,最终获得基因敲除嵌合体小鼠。
(1)将打靶质粒导入小鼠ES细胞的方法是____________,基因敲除后的ES细胞注入正常小鼠的囊胚腔后存在于囊胚的____________,将来发育成小鼠的各种组织。
(2)动物精原细胞减数分裂过程存在类似于同源重组的现象,该现象发生在____________期。
(3)利用双标记基因进行筛选时,阳性和阴性标记基因均只位于基因组DNA上时才能表达。请利用以下标记基因完成筛选方案。
a.新霉素抗性基因
b.疱疹病毒胸苷激酶基因(其表达产物可使无毒的丙氧鸟苷转变为有毒的核苷酸)
c.荧光标记基因
在设计打靶质粒时,应以____________(填字母)作为阳性标记基因,___________(填字母)作为阴性标记基因。
(4)通过基因打靶技术获得敲除目的基因序列的ES细胞,将其导入囊胚后,再利用____________技术获得模型小鼠。
18. 白头翁是临床常用中药,具有抗菌、抗炎等药理作用。白头翁皂苷(B4)是从其根茎中分离出来的活性物质。探究B4的跨膜转运机制有助于理解B4的作用机理。
(1)细胞膜是控制物质进出细胞的门户,这体现了细胞膜具有______________性。研究者以人胚肾细胞为研究对象,用不同浓度B4处理细胞1小时,测定胞内B4含量(以每mg胞内蛋白中B4的量为标定)的变化,结果如图1。结果表明,B4进入细胞的转运方式以被动运输为主,理由是______________。
(2)用浓度为30μg·mL-1的B4处理细胞不同时间,记录胞内B4含量,结果如图2。而无细胞的含B4的培养液中B4含量不随时间增加而明显变化。对图2中B4含量在1小时达到峰值后下降的原因,提出三种假设,其中不合理的是______________。
假设1:B4被细胞排出
假设2:B4不稳定,易发生自身降解
假设3:B4被细胞代谢为其他物质
(3)细胞膜上存在药物转运蛋白OC、OA和P,其中OC、OA为摄入型转运蛋白,P为外排型转运蛋白。为探究胞内B4含量下降的原因,研究者继续进行实验。
①分别用OC抑制剂、OA抑制剂和P抑制剂处理人胚肾细胞,检测B4处理后的人胚肾细胞内B4含量的变化,发现仅使用OC抑制剂处理组与对照组有显著差异,且胞内B4含量显著低于对照组。综上可以确定B4进入细胞的方式是________。请在下图中画出上述研究所得的结论______。
②为了进一步确定胞内B4含量下降并非由于细胞对其外排所引起,还应补充的实验是______(思路)。
19. 研究发现,拟南芥的H基因突变体在22℃下生长与野生型无差别,而30℃下生长则叶片呈白色。
(1)30℃下生长时,拟南芥的H基因突变体由于____________无法正常合成,而导致植物对____________的吸收、传递和转化受阻。
(2)研究发现,H基因突变导致H蛋白异常。研究人员提取野生型和突变体的叶片蛋白检测H蛋白含量,结果如图1所示。
特异性检测H蛋白的方法为____________;图1结果表明H蛋白是一种仅在温度升高时表达的热应激蛋白,依据为____________。
(3)研究人员继续检测H蛋白在叶绿体内的分布,结果如图2所示。
注:D1蛋白为类囊体特异性蛋白质,R蛋白为叶绿体基质特异性蛋白质
①下列有关该实验的叙述正确的是____________。
a.应提取H基因突变体植株叶片中的相关蛋白
b.本实验需保证各泳道的蛋白上样量均保持一致
c.D1蛋白和R蛋白的检测结果表明叶绿体基质蛋白和类囊体蛋白充分分离
d.D1蛋白和R蛋白的检测结果可作为H蛋白检测反应的对照
e.H蛋白检测结果中1、2、3泳道条带大小差异主要由操作误差造成
②图2结果说明____________。
(4)进一步研究发现H蛋白可以调控叶绿体基因编码的RNA聚合酶的活性。综合上述研究,推测H基因突变体在30℃条件下生长时叶片呈白色的原因________________________。
20. 科研团队通过基因工程构建一种工程菌,以监测残留在生物组织或环境中的四环素水平。其监测原理如图1所示,天然大肠杆菌不具备图1中所示基因。
(1)在基因工程中,大肠杆菌作为受体菌的优势有____________(答出两点)。
(2)据图1分析,环境中四环素水平升高时,该种大肠杆菌工程菌的荧光____________,其原理是____________。
(3)若获得上述工程菌,需构建重组质粒,图2是两个DNA片段、质粒及其上的限制酶的识别序列分布情况;其中质粒上的Ampr代表青霉素抗性基因,ori表示复制原点。下表是相关限制酶的识别序列与切割位点。
限制酶
EcoR Ⅰ
Xba Ⅰ
Spe Ⅰ
BamH Ⅰ
识别序列及切割位点
5′-G↓AATTC-3′
3′-CTTAA↑G-5′
5′-T↓CTAGA-3′
3′-AGATC↑T-5′
5′-A↓CTAGT-3′
3′-TGATC↑A-5′
5′-G↓GATCC-3′
3′-CCTAG↑G-5′
结合图表信息,在答题卡的相应区域补充完成最终构建成功的重组质粒示意图____________。
(4)从个体水平,可通过观察____________来鉴定大肠杆菌工程菌是否构建成功。
(5)为提高对环境中四环素水平监测的有效性,研究人员将GFP的第65位丝氨酸变成苏氨酸后,增强了绿色荧光稳定性和强度,该项技术属于____________工程的范畴。
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