精品解析：北京市朝阳区2025-2026学年高二下学期7月期末考试生物试题

2025～2026学年度第二学期期末检测 高二生物试卷 （考试时间90分钟 满分100分） 第一部分 选择题 本部分共15题，每题2分，共30分。在每题列出的四个选项中，选出最符合题目要求的一项。 1. 关于发酵工程中的无菌技术，下列叙述错误的是（ ） A. 灭菌是指杀死物体内外所有的微生物 B. 接种操作时，需在酒精灯火焰旁进行 C. 培养基进行灭菌前，应先调节pH D. 仅需对实验操作者的双手进行消毒 【答案】D 【解析】 【详解】A、灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，A正确； B、酒精灯火焰周围为无菌区域，接种操作在火焰旁进行可有效避免杂菌污染，B正确； C、若灭菌后再调节pH，调节过程易引入杂菌污染培养基，因此培养基需先调节pH再进行灭菌，C正确； D、发酵工程的无菌技术中不仅需要对实验操作者的双手进行消毒，还需要对培养基、发酵设备、接种工具等进行灭菌处理，D错误。 2. 对土壤中分解尿素的细菌进行分离和计数，相关叙述正确的是（ ） A. 配制以尿素为唯一氮源的培养基 B. 平板划线法可实现微生物的分离与计数 C. 一般选择菌落数大于500的平板进行计数 D. 用显微镜直接计数时，只能统计活菌的数量 【答案】A 【解析】 【详解】A、分离土壤中分解尿素的细菌需要使用选择培养基，以尿素为唯一氮源的培养基中，只有能分解尿素的细菌可利用尿素作为氮源生长，其他微生物因缺乏氮源无法存活，可达到筛选目的，A正确； B、平板划线法仅能用于微生物的分离纯化，无法对微生物进行计数，可同时实现分离与计数的接种方法是稀释涂布平板法，B错误； C、进行菌落计数时，一般选择菌落数为30~300的平板进行计数，菌落数大于500的平板菌落重叠严重，计数误差极大，C错误； D、显微镜直接计数无法区分死菌和活菌，统计结果包含活菌和死菌的总数量，并非只能统计活菌，D错误。 3. 泡菜制作过程中亚硝酸盐含量随发酵时间的变化如下图，相关说法不正确的是（ ） A. 泡菜和果酒的制作均需无氧条件，因为两种发酵的菌种均为厌氧的乳酸菌 B. 泡菜制作是利用环境中天然的乳酸菌进行发酵，无需严格的无菌操作 C. 亚硝酸盐可在消化道中转化为致癌的亚硝胺，食用泡菜时要适量 D. 据图中亚硝酸盐含量动态变化，最好在发酵14天后再食用泡菜 【答案】A 【解析】 【详解】A、泡菜发酵的菌种为厌氧的乳酸菌，但果酒发酵的菌种是酵母菌，酵母菌属于兼性厌氧菌，不是乳酸菌，A错误； B、泡菜制作利用的是蔬菜表面天然存在的乳酸菌，发酵过程中乳酸菌产生的乳酸会营造酸性环境，抑制多数杂菌繁殖，因此无需严格无菌操作，B正确； C、亚硝酸盐在适宜的pH、温度和微生物作用下，可在消化道中转化为致癌的亚硝胺，因此食用泡菜需要适量，C正确； D、由曲线可知，随发酵时间延长，亚硝酸盐含量先升高后降低，发酵14天时亚硝酸盐含量已经降到很低的水平，此时食用更安全，因此最好在发酵14天后再食用泡菜，D正确。 4. 研究人员以牡丹“红霞烂漫”的腋芽为外植体开展探究不同浓度6-BA与NAA组合对腋芽萌发及生长的影响，实验结果如下表。下列说法错误的是（ ） 6-BA浓度（mg/L） NAA浓度（mg/L） 顶芽萌发率（%） 侧芽萌发率（%） 芽体生长状态 0.5 0.05 94.2 76.8 生长速度快 0.5 0.01 90.6 70.5 生长速度中等 0.3 0.03 92.3 48.4 生长速度中等 0.3 0.01 92.0 31.9 生长速度中等 注：6-BA为细胞分裂素类植物生长调节剂，NAA为生长素类调节剂 A. 外植体腋芽的细胞分裂能力强，更易经脱分化和再分化形成新植株 B. 0.3 mg/L6-BA、0.01 mg/LNAA为腋芽萌发及生长的最优激素组合 C. 仅降低NAA浓度会在一定程度上降低腋芽侧芽的萌发能力 D. 愈伤组织后续再分化出根或芽的培养过程需要光照 【答案】B 【解析】 【详解】A、腋芽属于分生组织，细胞分裂能力强，全能性更容易表达，更易经脱分化和再分化形成完整新植株，A正确； B、由表格数据可知，0.5mg/L 6-BA、0.05mg/L NAA的组合下，顶芽、侧芽萌发率最高，芽体生长速度最快，是更优的激素组合，B错误； C、对比相同6-BA浓度的组，NAA浓度降低时，侧芽萌发率均下降，说明仅降低NAA浓度会在一定程度上降低腋芽侧芽的萌发能力，C正确； D、愈伤组织再分化阶段需要光照，用于诱导叶绿素合成，保障分化出的芽可以正常进行光合作用，D正确。 5. 胞质杂种是经原生质体融合获得的特殊细胞或个体，细胞中仅含有其中一个亲本的细胞核，细胞质则来自两个亲本。关于胞质杂种的获取与应用，叙述错误的是（ ） A. 胞质杂种可用于研究细胞质基因组的遗传 B. 需将一个亲本原生质体的细胞核去除或灭活 C. 诱导原生质体融合可使用聚乙二醇（PEG） D. 胞质杂种植株的形成与植物细胞的全能性无关 【答案】D 【解析】 【详解】A、胞质杂种细胞核仅来自单一亲本，核基因一致，细胞质来自两个亲本，可通过性状差异研究细胞质基因组的遗传规律，A正确； B、要获得仅含一个亲本细胞核的胞质杂种，需要提前去除或灭活其中一个亲本原生质体的细胞核，避免融合后出现双核，B正确； C、聚乙二醇（PEG）是诱导原生质体融合的常用化学试剂，C正确； D、胞质杂种细胞需要经过植物组织培养才能发育为完整植株，该过程的原理是植物细胞的全能性，因此胞质杂种植株的形成与细胞全能性有关，D错误。 6. 为探究生长素合成抑制剂PPBo和Kyn对愈伤组织生根和生芽的影响，将愈伤组织置于不同浓度PPBo或Kyn的培养基中培养，统计每个愈伤组织产生的不定芽和不定根的数量，结果如图。 下列相关说法正确的是（ ） A. 愈伤组织经过脱分化形成根和芽 B. 施加100 μM的PPBo，可抑制不定根的形成 C. 随着PPBo浓度升高，每个愈伤组织的不定芽数量增加 D. 用10 μM的PPBo或Kyn处理愈伤组织，产生不定芽的数量相等 【答案】B 【解析】 【详解】A、愈伤组织是外植体经脱分化形成的，愈伤组织形成根和芽的过程属于再分化，A错误； B、与PPBo浓度为0的对照组相比，施加100 μM的PPBo时，不定根数量几乎为0，说明该浓度的PPBo可抑制不定根的形成，B正确； C、由PPBo组的不定芽曲线可知，随着PPBo浓度升高，不定芽数量先增加后减少，C错误； D、10 μM的PPBo处理时不定芽数量约为13，10 μM的Kyn处理时不定芽数量约为6，二者产生不定芽的数量不相等，D错误。 7. 利用中空纤维膜和微凝胶，制备微型动物组织的技术流程，如下图所示。温度降低到20℃后，微凝胶从固态凝胶转变为流动溶胶，原本贴附的单层细胞会整体从纤维膜内壁剥离下来，形成完整的微型动物组织。 下列有关叙述不正确的是（ ） A. 培养过程中需通入95%空气和5%CO2 B. 微凝胶中通常需要加入血清等一些天然成分 C. 图中培养的细胞无细胞贴壁和接触抑制现象 D. 该技术的优势是剥离过程对组织结构损伤小 【答案】C 【解析】 【详解】A、动物细胞培养过程中，通入95%空气可为细胞有氧呼吸提供O2，5%CO2的作用是维持培养液的pH，该操作符合动物细胞培养的气体条件，A正确； B、微凝胶作为动物细胞培养的基质，需要加入血清等天然成分，以提供细胞生长所需的、目前人工培养基尚无法完全模拟的未知营养物质，B正确； C、题干明确说明细胞是贴附在微凝胶上生长的单层细胞，说明培养的细胞存在细胞贴壁现象，且正常动物细胞生长到单层后会出现接触抑制，因此该类细胞有贴壁和接触抑制现象，C错误； D、该技术仅通过降低温度使微凝胶变为溶胶，即可让细胞整体完整剥离，无需使用胰蛋白酶等处理，对组织结构的损伤小，D正确。 8. 将编码抗金黄色葡萄球菌肠毒素B的人源抗体（LXY-Ab）基因，整合到小鼠基因组的ROSA26位点，构建了可稳定表达LXY-Ab的模型小鼠。该模型小鼠的血清、乳汁、唾液中均能检测到有活性的LXY-Ab。下列关于该抗体的叙述，错误的是（ ） A. LXY-Ab的制备依赖B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合 B. ROSA26位点一般不含有小鼠的关键内源基因 C. 驱动LXY-Ab基因表达的启动子不具有组织特异性 D. 该抗体可用于金黄色葡萄球菌感染的检测与治疗 【答案】A 【解析】 【详解】A、题干中的LXY-Ab是通过转基因技术，将抗体基因整合到小鼠基因组后由模型小鼠表达制备的，B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合是单克隆抗体制备的技术路径，与该抗体的制备方式不符，A错误； B、ROSA26是常用的外源基因整合安全位点，若该位点含有小鼠关键内源基因，外源基因插入会破坏关键基因功能导致小鼠生理异常，因此该位点一般不含小鼠关键内源基因，B正确； C、该模型小鼠的血清、乳汁、唾液中均能检测到有活性的LXY-Ab，说明该抗体可在多种组织细胞中表达，因此驱动LXY-Ab基因表达的启动子不具有组织特异性，C正确； D、LXY-Ab是抗金黄色葡萄球菌肠毒素B的特异性抗体，可与对应抗原特异性结合，因此可用于金黄色葡萄球菌感染的检测与治疗，D正确。 9. 胚胎工程包括体外受精、胚胎移植和胚胎分割等技术。下列叙述正确的是（ ） A. 采集到的卵母细胞和精子可直接用于体外受精 B. 胚胎移植时，需移植到同种的、生理状态相同的雌性体内 C. 胚胎分割应选择原肠胚期的胚胎，且需均等分割内细胞团 D. 胚胎移植产生的后代，其遗传性状主要与受体保持一致 【答案】B 【解析】 【详解】A、采集到的卵母细胞需要培养至减数第二次分裂中期才具备受精能力，精子需要经过获能处理才能完成受精，二者均不可直接用于体外受精，A错误； B、胚胎移植时，需将胚胎移植到同种的、生理状态相同的雌性受体内，这是胚胎能够在受体子宫内存活并发育的前提，B正确； C、胚胎分割应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，原肠胚细胞分化程度高，不适合进行胚胎分割；对囊胚进行分割时需要均等分割内细胞团，C错误； D、胚胎移植的胚胎遗传物质来自供体的雌、雄亲本，受体仅为胚胎发育提供营养和场所，不影响后代的遗传性状，后代遗传性状主要与供体保持一致，D错误。 10. 下列有关“DNA的粗提取与鉴定实验”的说法，不正确的是（ ） A. 新鲜洋葱、香蕉、菜花或猪肝均可作为实验材料 B. 选用植物材料提取DNA，需加研磨液研磨 C. 上清液中加入2 mol/L氯化钠溶液使DNA析出 D. 沸水加热条件下，DNA遇二苯胺呈现蓝色 【答案】C 【解析】 【详解】A、新鲜洋葱、香蕉、菜花、猪肝的细胞中均含有核DNA，都可以作为DNA粗提取的实验材料，A正确； B、植物细胞有细胞壁结构，加入研磨液研磨可以破坏细胞结构，使细胞内的DNA释放出来，因此选用植物材料提取DNA时需要加研磨液研磨，B正确； C、DNA在2mol/L的氯化钠溶液中溶解度较高，该操作的作用是溶解DNA；DNA的溶解度在氯化钠浓度为0.14mol/L时最低，此时才会析出，C错误； D、DNA的鉴定原理为：沸水加热条件下，DNA与二苯胺试剂反应呈现蓝色，D正确。 11. 胰蛋白酶在生物医药、细胞培养等领域应用广泛，但存在稳定性差的不足。科研人员将胰蛋白酶第177位的精氨酸去除，使其稳定性显著提高。下列相关叙述错误的是（ ） A. 操作对象为胰蛋白酶相关基因 B. 对胰蛋白酶的改造过程不涉及中心法则 C. 获得新胰蛋白酶的技术属于蛋白质工程 D. 改造后的胰蛋白酶空间结构发生改变 【答案】B 【解析】 【详解】A、该改造属于蛋白质工程范畴，蛋白质工程的操作对象是对应的目的基因，需通过改造基因实现对蛋白质的改造，A正确； B、改造胰蛋白酶的过程中，不仅需要根据预期蛋白质结构反推对应的基因序列，后续还需要经过转录、翻译过程合成改造后的胰蛋白酶，转录、翻译都属于中心法则的内容，因此该过程涉及中心法则，B错误； C、蛋白质工程是以蛋白质的结构规律和功能关系为基础，通过改造或合成基因，对现有蛋白质进行改造或制造新蛋白质的技术，本题对胰蛋白酶的改造属于蛋白质工程，C正确； D、蛋白质的空间结构由氨基酸的种类、数目、排列顺序决定，去除1个精氨酸后胰蛋白酶的氨基酸序列发生改变，其空间结构也会相应改变，D正确。 12. 某实验小组将PETase基因导入大肠杆菌，以构建能降解塑料的工程菌。以下技术使用的先后顺序是（ ） ①PCR技术②抗原—抗体杂交技术③转化技术④筛选培养 A. ①③④② B. ②①③④ C. ③①④② D. ①②③④ 【答案】A 【解析】 【详解】①PCR技术用于扩增获得目的PETase基因，为第一步操作；之后通过③转化技术将携带目的基因的重组表达载体导入大肠杆菌；接下来通过④筛选培养获得成功导入重组载体的大肠杆菌；最后通过②抗原—抗体杂交技术检测目的基因是否成功表达出目标蛋白质，顺序为①③④②，A正确。 13. 限制酶SpeI和XbaI的识别序列及切割位点如图所示，研究者使用这两种酶分别切割目的基因和质粒。 下列说法错误的是（ ） A. SpeI和XbaI的作用部位都是磷酸二酯键 B. SpeI和XbaI切割后产生的黏性末端可通过DNA连接酶连接 C. 若用SpeI和XbaI双酶切质粒，不能有效防止质粒自身环化 D. 目的基因和质粒连接后的序列可以被SpeI或XbaI再次切割 【答案】D 【解析】 【详解】A、限制酶的作用位点都是DNA链中的磷酸二酯键，A正确； B、SpeI和XbaI切割后产生的黏性末端碱基互补，可以通过DNA连接酶连接，B正确； C、SpeI和XbaI双酶切质粒后，质粒两端的黏性末端互补，能够自行配对连接，因此不能有效防止质粒自身环化，C正确； D、目的基因和质粒连接后，连接处的序列变为5'-ACTAGA-3'或5'-TCTAGT-3'，既不符合SpeI的识别序列ACTAGT，也不符合XbaI的识别序列TCTAGA，原酶的识别序列被破坏，不能被SpeI或XbaI再次切割，D错误。 14. 研究者将花青素合成酶基因（FAaNS）导入草莓，获得甜度更高的“红颜草莓”。下图为含FAaNS的DNA片段结构示意图。 下列分析正确的是（ ） A. 将FAaNS导入草莓细胞时，要先用钙离子处理 B. 扩增FAaNS时，以四种核糖核苷酸为原料 C. 用PCR技术鉴定FAaNS时，可使用引物2、3 D. 提取草莓细胞中FAaNS的mRNA，进行个体生物学水平鉴定 【答案】C 【解析】 【详解】A、钙离子处理法仅用于将目的基因导入原核微生物时制备感受态细胞，导入草莓（植物）细胞不需要用钙离子处理草莓细胞，A错误； B、扩增FAaNS属于DNA片段的扩增，采用PCR技术，原料为四种脱氧核糖核苷酸，核糖核苷酸是合成RNA的原料，B错误； C、PCR扩增时DNA子链的延伸方向为5’-3’，引物需要结合在目的基因两端且3'端朝向目的基因内部，引物3延伸方向向右、引物2延伸方向向左，可特异性扩增出FAaNS片段，C正确； D、提取目的基因的mRNA进行检测属于分子水平的鉴定，个体生物学水平鉴定需要观察草莓的甜度等性状是否符合预期，D错误。 15. 世界首例“免疫艾滋病基因编辑婴儿”事件中，研究者利用CRISPR/Cas9技术修改了胚胎的CCR5基因。该婴儿诞生后，相关医学伦理委员会启动了调查。下列有关生物技术的安全问题，错误说法是（ ） A. 将转基因猪的心脏移植给人时，必须进行多方面的安全评估 B. 我国明确禁止任何形式的生殖性克隆人的实验，坚决反对克隆人 C. 通过体外授精培育试管婴儿时，在胚胎移植前需要对胚胎进行性别鉴定 D. 对胚胎的CCR5进行基因编辑可能会影响该基因的正常功能，从而增加患病的风险 【答案】C 【解析】 【详解】A、将转基因猪的心脏移植给人属于异种器官移植和转基因技术的临床应用，存在免疫排斥、转基因安全等潜在风险，必须进行多方面安全评估，A正确； B、我国对克隆技术的管控要求为明确禁止任何形式的生殖性克隆人实验，坚决反对克隆人，仅允许规范开展治疗性克隆相关研究，B正确； C、培育试管婴儿时，仅当存在伴性遗传病筛查等医学需求时，才允许在胚胎移植前进行性别鉴定，我国禁止非医学需要的胚胎性别鉴定，并非所有试管婴儿胚胎移植前都必须做性别鉴定，C错误； D、基因编辑存在脱靶等技术风险，对CCR5基因编辑可能破坏该基因原本的正常生理功能，进而增加其他免疫相关疾病的患病风险，D正确。 第二部分非选择题 本部分共6小题，共70分。 16. 微生物可改良土壤环境并促进植物生长。研究人员在盐碱地水稻根部土壤中筛选获得1株耐盐碱细菌，对其耐盐性、抗病性及促生长能力等进行了研究。 （1）将所采集的土壤制成悬液，__________后分别接种至固体培养基培养。观察菌落的__________等特征，挑取单个菌落进行多次纯化，直至获得单克隆菌株J009。 （2）将J009分别接种在含1%～5%NaCl固体培养基上，28℃培养48 h，观察菌株的生长情况，结果如图1。 以上采用的接种方法是__________。结果显示__________，表明其有一定程度的耐盐特性。 （3）将稻瘟病菌菌饼倒扣接种在LB固体培养基两侧，实验组在菌饼中间接种J009，对照组应接种__________。图2结果表明J009对病原菌生长有抑制作用，判断依据是__________。 （4）采用不同浓度的NaCl溶液添加琼脂来模拟盐胁迫环境。将J009处理组（实验组）和对照组水稻在28℃暗培养7 d后，测定水稻根长、芽长，结果如图3所示。 实验结果表明，__________。 【答案】（1） ①. 梯度(等比)稀释 ②. 形态、颜色、大小 （2） ①. 平板划线法 ②. J009在含1%~5%NaCl的培养基上均有生长 （3） ①. 等量不含J009的培养液或等量无菌水 ②. 实验组出现明显的抑菌带，而对照组未出现 （4）J009有利于盐胁迫下种子根和芽的生长 【解析】 【小问1详解】 从土壤中分离微生物时，土壤悬浮液需要进行梯度(等比)稀释，降低菌体浓度，方便后续获得单菌落。不同微生物形成的菌落形态、颜色、大小存在区别，可依据这些菌落特征初步区分菌种，后续再通过多次纯化得到单克隆菌株。 【小问2详解】 培养基上呈现连续划线的接种痕迹，符合平板划线法的操作特点。梯度NaCl培养基上均能够观察到菌株生长，说明 J009在含1%~5%NaCl的培养基上均有生长，具备一定耐盐特性。 【小问3详解】 实验遵循单一变量原则，实验组中间接种J009，对照组应当施加等量不含J009的培养液或者等量无菌水，排除培养液溶剂等无关变量干扰。对比两组培养结果，实验组菌落两侧出现明显抑菌带，对照组没有抑菌带，说明J009能够抑制病原菌生长。 【小问4详解】 观察图3柱状图，在50、100、150mmol/L不同浓度盐胁迫条件下，添加J009的实验组水稻根长、芽长均高于对照组，由此说明J009有利于盐胁迫下种子根和芽的生长。 17. “绿洲1号”菌草具有很高的饲用、生产及生态价值，应用前景十分广阔，但是难以进行有性繁殖。因此，通过组织培养技术解决苗木紧缺问题尤为重要。为确定“绿洲1号”组织培养的最佳条件，科研人员开展了相关研究。 （1）将洗净的嫩枝，切分成2～3 cm的带节茎段，转入超净工作台，在2%次氯酸钠溶液中处理一定时间，起到__________作用。在茎节膨起处螺旋切割使其出现新创面，然后接种到启动培养基中，30 d后统计污染率与萌发率，结果如下图。 实验结果为：__________。综合以上结果可知，适宜的处理时间为__________。 （2）为确定最利于生根的培养基配方，研究人员进行了相关实验，部分结果如下表。 编号 生根培养基 生根率（%） S1 MS＋NAA0.3 mg/L 72.76 S2 MS＋NAA0.6 mg/L 82.22 S3 MS＋NAA0.9 mg/L 88.89 S4 MS＋IBA4.0 mg/L 92.22 S5 MS＋IBA5.0 mg/L 95.00 S6 MS＋IBA6.0 mg/L 93.89 S7 MS＋IBA5.0 mg/L＋NAA__________mg/L 95.56 S8 MS＋IBA5.0 mg/L＋NAA__________mg/L 96.67 S9 MS＋IBA5.0 mg/L＋NAA__________mg/L 97.22 ①按物理性质分类，植物组织培养所用的培养基属于__________。培养基中除了含有植物组织所需的营养物质外，还需要添加__________以诱导生根。 ②上述实验中，S7、S8、S9的NAA浓度应分别为__________mg/L。结果表明，__________。除了生根率外，还应检测__________，从而更全面地反映诱导效果。 （3）“绿洲1号”菌草的组织培养是将茎节处的休眠芽培养成植株，这种培养方式__________（选择“体现”或“未体现”填写）植物细胞的全能性，其主要优势在于__________。（至少写两点） 【答案】（1） ①. 消毒 ②. 随着次氯酸钠处理时间延长，污染率逐渐降低，萌发率先升高后降低，处理6min时萌发率达到最高 ③. 6min （2） ①. 固体培养基 ②. 植物激素（或生长素类似物） ③. 0.3 、0.6 、0.9 ④. 本实验条件下，IBA诱导生根效果优于NAA，IBA和NAA共同诱导生根效果好于单独使用，MS培养基添加5.0 mg/L IBA和0.9 mg/L NAA时诱导生根效果最好 ⑤. 平均生根数（或平均根长、根生长状况） （3） ①. 未体现 ②. 保持亲本的优良性状；培养周期短，繁殖效率高（操作简便，遗传稳定性好，任意两点即可） 【解析】 【小问1详解】 植物组织培养过程中，需要对外植体进行消毒处理，次氯酸钠的作用是杀死外植体表面的微生物，起到消毒作用。结合曲线可以直接得出实验结果，随着次氯酸钠处理时间延长，污染率逐渐降低，萌发率先升高后降低，处理6min时萌发率达到最高，综合污染率和萌发率两个指标，6min时萌发率最高，污染率已经降到较低水平，因此是适宜处理时间。 【小问2详解】 植物组织培养所用培养基为添加琼脂的固体培养基；除基础营养物质外，还需要添加植物激素（生长素类）调节细胞分裂分化，诱导生根。本实验中NAA的浓度梯度为0.3mg/L，因此S7-S9的NAA按梯度依次为0.3、0.6、0.9mg/L；分析表格数据可得出相应结论，评价生根效果除生根率外，还需要检测根的数量、长度等指标，更全面反映根的生长状态。 【小问3详解】 植物细胞全能性是离体的已分化细胞发育为完整个体才能体现，本实验是利用已经分化形成的休眠芽（植物器官）直接发育为完整植株，因此未体现全能性；该方式属于无性繁殖，优势为保持亲本优良性状、培养周期短繁殖快、操作难度低、遗传稳定性好。 18. 血清4型禽腺病毒（FAdV-4）是家禽肝炎-心包积液综合征（HHS）的主要病原体。接种疫苗是预防HHS的主要手段。 （1）LMH-TB细胞系是由鸡肝癌细胞建立的细胞系，可作为FAdV-4的宿主细胞生产疫苗。该细胞系需在CO2培养箱中进行培养，CO2的主要作用是__________。用__________处理该贴壁生长的细胞系可进行传代，但增殖效率低，限制了疫苗的规模化生产。 （2）为了提高增殖效率，研究者对LMH-TB细胞进行悬浮驯化，获得了LMH-MB1、LMH-MB两种细胞。悬浮驯化过程及相关检测结果如图1所示。 LMH-MB1细胞传至第11代，随后换用无血清培养液继续培养若干代，获得了能在无血清条件下生长且驯化成功的细胞LMH-MB。与含血清阶段相比，无血清培养阶段细胞的相对生长速率__________；继续将LMH-MB1在含血清的培养液中培养，从第11代培养至第18代的目的是__________。 （3）与LMH-TB相比，利用LMH-MB细胞能生产更多病毒。CAR蛋白是FAdV-4病毒侵染宿主细胞的关键受体，研究者检测了该病毒侵染不同细胞后CAR的表达量，结果如图2所示。 据此推测，CAR表达量变化直接导致病毒产量升高。你__________（选择“同意”或“不同意”填写）该推测，理由是__________。 【答案】（1） ①. 维持培养液的pH ②. 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） （2） ①. 升高（增大） ②. 作对照，排除传代次数等无关变量对实验结果的影响，验证无血清培养对细胞相对生长速率的影响 （3） ①. 同意 ②. 图2显示LMH-MB细胞的CAR相对表达量远高于LMH-TB，CAR是FAdV-4侵染宿主细胞的关键受体，CAR表达量升高更有利于病毒侵染宿主细胞，进而使病毒产量升高 【解析】 【小问1详解】 本题考查动物细胞培养的基础知识，动物细胞培养时，CO₂培养箱中CO₂的作用是维持培养液的pH；贴壁生长的动物细胞传代时，需要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理，使细胞分散成单个细胞，便于分瓶传代。 【小问2详解】 分析图1可知，与11代之前含血清培养阶段相比，11代之后换无血清培养的LMH-MB细胞相对生长速率整体更高，因此无血清培养阶段细胞相对生长速率升高；设置“LMH-MB1在含血清培养液中从11代培养至18代”的组别，目的是作为对照，排除传代次数本身等无关变量对实验结果的干扰，确认生长速率的变化是无血清培养导致的。 【小问3详解】 根据题干信息和图2结果，CAR是病毒侵染宿主细胞的关键受体，图2显示驯化后的LMH-MB细胞CAR相对表达量远高于原细胞LMH-TB，更高的CAR表达量更有利于病毒吸附侵染宿主细胞，因此可以直接导致病毒产量升高，该推测符合实验结果，因此同意该推测。 19. 学习以下材料，回答（1）～（4）题。 孤雌胚胎干细胞 大多数雌性哺乳动物中的卵泡储备在出生时就已确定。自身免疫性疾病、年龄增长及放化疗等都会加速卵泡的损耗，从而导致卵巢早衰及不孕。为开辟卵母细胞形成的新途径，研究人员通过激活黑色小鼠的MII期卵母细胞并使其染色体数目加倍，获得了二倍体孤雌胚胎。该胚胎因父源印记缺陷和胎盘功能异常而在妊娠中期停滞发育。研究人员从二倍体孤雌胚胎中分离出孤雌胚胎干细胞（pESCs）。同时，从相同遗传背景的雌性受精胚胎中分离出胚胎干细胞（ESCs），操作流程如下图。 为检测pESCs的分化潜能，将得到的pESCs和ESCs分别显微注射入白色小鼠4-8细胞期胚胎，均能产生黑白毛色相间且具有生殖系传递能力的嵌合体，说明pESCs具有与ESCs相当的分化潜能。 随后，在特定条件下将pESCs诱导分化为原始生殖细胞样细胞（PGCLCs）。为了进一步获得成熟的卵母细胞，研究人员将PGCLCs与12.5天的小鼠胚胎性腺体细胞混合后，移植到去除卵巢雌鼠的肾囊膜下。4周后，移植部位形成了结构完整的“重建卵巢”，且检测发现重建的卵巢能恢复激素分泌。从这些“重建卵巢”中，科学家成功分离出发育至生发泡期（GV期）的卵母细胞。这些卵母细胞经过体外成熟培养和体外受精，成功获得了2-细胞胚胎。最后，将2-细胞胚胎移植到受体母鼠体内，经过正常妊娠，最终获得了健康可育的后代。 已有报道表明受精胚胎来源的胚胎干细胞（ESCs）能分化出卵母细胞，而本次实验首次证明了不需要父源基因组，只从孤雌胚胎干细胞出发，就能获得真正可受精、可产生健康后代的卵母细胞。与ESCs相比，pESCs的伦理争议更小。pESCs的获得为重建卵巢功能与恢复生育能力提供了潜在新策略，为未来再生医学奠定了重要基础。 （1）pESCs和ESCs细胞来自于囊胚的__________，在得到嵌合体的过程中，用到的胚胎工程技术是__________ （2）将从pESCs获得可育后代的过程补充完整__________ （3）根据材料信息，以下说法正确的是__________（多选） A. pESCs的性染色体组成为XX B. 黑白毛色嵌合体的出现，说明pESCs参与了受体胚胎的皮肤及毛发的发育 C. 将嵌合体与白色小鼠交配后，后代中出现黑色小鼠，说明pESCs在嵌合体中能形成功能性卵细胞 D. “重建卵巢”既能恢复激素分泌，又能形成发育成熟的卵母细胞 E. 目前这一技术可直接用于治疗人类卵巢早衰及不孕症。 （4）请结合所学知识及材料信息，解释利用孤雌胚胎干细胞获得功能性卵母细胞的伦理争议更小的原因。__________ 【答案】（1） ①. 内细胞团 ②. 胚胎移植 （2） （3）ABC （4）pESCs来自于在妊娠中期会停滞发育的孤雌胚胎，ESCs只能来自于可正常发育的受精胚胎 【解析】 【小问1详解】 囊胚阶段分为内细胞团和滋养层细胞，胚胎干细胞来源于囊胚的内细胞团，内细胞团细胞具有发育的全能性；将注射了干细胞的4-8细胞期胚胎移植到受体母鼠子宫内发育才能获得嵌合体，该过程核心的胚胎工程技术为胚胎移植。 【小问2详解】 结合材料流程：PGCLCs移植后形成重建卵巢，再从中获得GV期卵母细胞；GV期卵母细胞经体外成熟培养得到成熟卵母细胞（MⅡ期卵母细胞），体外受精需要使用获能处理的精子；胚胎移植前需要对受体母鼠进行同期发情处理，保证受体子宫生理状态适宜胚胎发育，如图：。 【小问3详解】 A、pESCs来源于雌性小鼠MII卵母细胞（染色体含1条X），染色体加倍后性染色体为XX，A正确； B、pESCs来自黑色小鼠，受体胚胎来自白色小鼠，嵌合体出现黑白毛色，说明pESCs参与了受体胚胎皮肤及毛发的发育，B正确； C、黑色是pESCs的遗传性状，后代出现黑色小鼠，说明pESCs在嵌合体中形成了可育的功能性卵细胞，将黑色性状遗传给后代，C正确； D、材料显示重建卵巢仅能产生GV期（生发泡期）未成熟卵母细胞，卵母细胞需要额外体外成熟培养才能发育成熟，重建卵巢无法直接形成成熟卵母细胞，D错误； E、该技术目前仅在小鼠中获得成功，还处于研究阶段，不能直接用于人类疾病的治疗，E错误。 【小问4详解】 pESCs取自孤雌胚胎，这类胚胎因缺乏父源基因组、印记异常，妊娠中期就会发育停滞，无法长成完整个体；ESCs只能取自正常受精胚胎，受精胚胎拥有双亲完整遗传物质，可全程正常发育直至形成个体。二者来源胚胎的发育潜能不同，也是pESCs伦理争议更低的核心原因。 20. 叶绿体分裂异常会严重影响光合作用效率，研究者用诱变剂处理野生型拟南芥种子，筛选到了一株叶绿体分裂异常突变体cpd44，表型分析发现与已报道的ARC6基因突变体相似。为探究cpd44表型是否为ARC6基因突变所致，研究者进行了如下实验。 （1）研究者利用PCR技术分别获得野生型和cpd44的ARC6基因，反应体系中应添加__________酶进行扩增，引物的作用是__________。每个循环要经过变性、__________和延伸。测序发现cpd44的ARC6基因发生了碱基替换。 （2）在构建基因表达载体时为避免发生自连情况影响效率，根据图1信息，扩增野生型ARC6基因所用的引物应添加__________酶切位点。 （3）重组质粒先导入经__________处理的农杆菌，再通过农杆菌转化法转化至__________（野生型/cpd44植物中。 （4）获得的转基因植株可用__________进行个体水平筛选。对存活的植株进行分子水平鉴定，需分别扩增内源和外源ARC6基因的部分片段，若实验结果为__________（请在图2中补充实验结果），同时显微镜观察到该植株叶绿体__________，则说明cpd44的表型确实为ARC6基因突变所致。 【答案】（1） ①. 热稳定DNA聚合（Taq） ②. 使DNA聚合酶从引物的3'端开始延伸DNA链（定位扩增的起始位点，为DNA聚合酶提供结合起点） ③. 复性（退火） （2）BglII和MluI （3） ①. CaCl2（钙离子） ②. cpd44 （4） ①. 适宜浓度的除草剂喷洒 ②. ③. 分裂恢复正常（数目/形态恢复为野生型） 【解析】 【小问1详解】 PCR扩增需要耐高温的热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；引物的作用是结合模板DNA的特定序列，为DNA聚合酶提供延伸起点，使聚合酶从引物3'端开始合成DNA；PCR每个循环依次经过变性、复性（退火）、延伸三步。 【小问2详解】 要避免质粒自连，需要目的基因两端添加不同的酶切位点，且不能破坏目的基因：已知ARC6基因内部已有BamHI位点，若用BamHI会切断目的基因；BglII与BamHI是同尾酶，切割后产生相同的黏性末端，可与质粒上BamHI切开的末端连接，另一端加MluI，两个不同黏性末端可避免质粒和目的基因自连，因此引物添加BglII和MluI位点。 【小问3详解】 将重组质粒导入农杆菌前，需要用CaCl2（钙离子）处理农杆菌，使其成为感受态细胞；本实验目的是验证cpd44的表型是否由ARC6基因突变导致，因此需要将野生型ARC6转入cpd44突变体中，观察表型是否恢复。 【小问4详解】 质粒上的Bar基因为除草剂抗性基因，因此个体水平可以用适宜浓度的除草剂喷洒筛选，存活的植株为转基因植株； 电泳结果逻辑：①野生型只有内源ARC6，无外源，符合图中已有结果；②cpd44只有突变的内源ARC6，无外源，因此内源ARC6泳道的cpd44位置有条带，外源泳道无条带；③转基因cpd44既有内源突变的ARC6，又转入了外源野生型ARC6，因此内源泳道的转基因位置有条带，外源泳道的转基因位置也有条带。电泳结果如图。若cpd44的表型确实是ARC6基因突变导致，转入野生型ARC6后，叶绿体分裂会恢复正常，因此显微镜可观察到叶绿体分裂恢复为野生型的正常状态。 21. Ad5是一种腺病毒，复制型Ad5近年成为肿瘤基因治疗与溶瘤病毒治疗的高效载体。研究者先后设计出三代溶瘤腺病毒OBP-301、OBP-401、OBP-702用于肿瘤治疗。 （1）第一代OBP-301中hTERT-p启动子驱动基因在肿瘤细胞中特异性表达。在病毒复制增殖过程中，E1A、E1B两种蛋白缺一不可且需要特定比例。IRES使一条mRNA按相应比例同时指导E1A、E1B两种蛋白的合成，如图1。 构建溶瘤腺病毒时，将腺病毒的ΔE1启动子替换为hTERT-p启动子，目的是__________。E1A、E1B基因共用启动子可避免__________。 （2）在第二代OBP-401基因组中插入相关元件，使绿色荧光蛋白基因（GFP）在肿瘤细胞中特异性表达。Ad5主要通过宿主细胞表面的受体蛋白CAR进入细胞。研究者将不同载体导入肉瘤细胞并检测荧光强度，结果如图2。 据图分析，与乙组比较，丙组荧光强度高的原因是__________。OBP-401优势是在手术治疗中，便于__________。 （3）在第三代OBP-702中将ΔE3替换为Egr-1-p-p53表达元件，射线照射时，诱导启动子Egr-1-p启动p53基因在肿瘤细胞中表达，如图3。 研究表明OBP-702比OBP-401抑瘤效果更强，结合图中信息写出相应的分子机制__________。 （4）研究表明，DNA甲基化会降低OBP-702的溶瘤效果。为验证DNA甲基化通过调控hTERT启动子活性，从而影响OBP-702的溶瘤效率，进行以下实验。 ①将生理状态一致的骨肉瘤细胞随机分为两组： 甲组：DNA甲基转移酶抑制剂处理（降低甲基化） 乙组：特异性抑制hTERT启动子活性 ②各组感染等量OBP-702，在相同且适宜条件下培养。 ③检测并比较各组溶瘤效率。 改正实验的不足之处。__________ 【答案】（1） ①. 使腺病毒仅在肿瘤细胞中复制，不损伤正常细胞 ②. E1A、E1B表达不同步或E1A、E1B的合成量不为特定比例 （2） ①. CAR 是 Ad5 侵染宿主细胞的关键受体，CAR 过表达会使腺病毒进入细胞增加，导致 GFP 表达量升高 ②. 精准切除荧光标记的肿瘤组织 （3）OBP-702 联合放疗时表达 p53 促进肿瘤细胞凋亡。OBP-702 表达的 E1A 抑制 p21、 MDM2，增强 p53 功能，从而促进肿瘤细胞凋亡 （4）①增加对照：空白对照；DNA 甲基转移酶抑制剂+特异性抑制 hTERT 启动子活性 ②增加检测各组 E1A 和 E1B 表达量并进行比较 【解析】 【小问1详解】 题干说明hTERT-p启动子驱动基因在肿瘤细胞特异性表达，替换原腺病毒ΔE1启动子后，E1A/E1B（病毒复制必需蛋白）只能在肿瘤细胞合成，病毒仅在肿瘤内增殖裂解肿瘤，规避对正常细胞毒性；题干明确说明E1A、E1B发挥功能需要特定比例，IRES使一条mRNA按相应比例同时指导E1A、E1B两种蛋白的合成，共用启动子可避免E1A、E1B表达不同步或E1A、E1B的合成量不为特定比例。 【小问2详解】 CAR 是 Ad5 侵染宿主细胞的关键受体，Ad5需要借助宿主细胞表面CAR才能进入细胞，CAR表达量越高，进入细胞的病毒越多，GFP表达量越高；GFP的荧光可特异性标记肿瘤细胞，手术中便于观察肿瘤范围，实现精准切除。 【小问3详解】 p53是抑癌基因，可促进肿瘤细胞凋亡；OBP-702 联合放疗时表达 p53 促进肿瘤细胞凋亡。OBP-702 表达的 E1A 抑制 p21、 MDM2，增强 p53 功能，从而促进肿瘤细胞凋亡。 【小问4详解】 实验目的是验证"DNA甲基化通过调控hTERT启动子活性影响溶瘤效率"，原分组缺少空白对照和双处理实验组，不符合实验对照原则，补充空白对照和DNA 甲基转移酶抑制剂+特异性抑制 hTERT 启动子活性后才能通过不同组的结果对比验证结论。仅检测终点的溶瘤效率只能得到最终效应结果，无法证明溶瘤效率的改变一定是"hTERT启动子活性改变→E1A/E1B表达改变"导致的，也不能排除DNA甲基化通过其他不依赖hTERT启动子的途径影响溶瘤效率。增加检测各组E1A、E1B表达量可以验证因果关系的中间环节，确认实验假设的调控通路成立，排除其他干扰，让结论更严谨。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025～2026学年度第二学期期末检测 高二生物试卷 （考试时间90分钟 满分100分） 第一部分 选择题 本部分共15题，每题2分，共30分。在每题列出的四个选项中，选出最符合题目要求的一项。 1. 关于发酵工程中的无菌技术，下列叙述错误的是（ ） A. 灭菌是指杀死物体内外所有的微生物 B. 接种操作时，需在酒精灯火焰旁进行 C. 培养基进行灭菌前，应先调节pH D. 仅需对实验操作者的双手进行消毒 2. 对土壤中分解尿素的细菌进行分离和计数，相关叙述正确的是（ ） A. 配制以尿素为唯一氮源的培养基 B. 平板划线法可实现微生物的分离与计数 C. 一般选择菌落数大于500的平板进行计数 D. 用显微镜直接计数时，只能统计活菌的数量 3. 泡菜制作过程中亚硝酸盐含量随发酵时间的变化如下图，相关说法不正确的是（ ） A. 泡菜和果酒的制作均需无氧条件，因为两种发酵的菌种均为厌氧的乳酸菌 B. 泡菜制作是利用环境中天然的乳酸菌进行发酵，无需严格的无菌操作 C. 亚硝酸盐可在消化道中转化为致癌的亚硝胺，食用泡菜时要适量 D. 据图中亚硝酸盐含量动态变化，最好在发酵14天后再食用泡菜 4. 研究人员以牡丹“红霞烂漫”的腋芽为外植体开展探究不同浓度6-BA与NAA组合对腋芽萌发及生长的影响，实验结果如下表。下列说法错误的是（ ） 6-BA浓度（mg/L） NAA浓度（mg/L） 顶芽萌发率（%） 侧芽萌发率（%） 芽体生长状态 0.5 0.05 94.2 76.8 生长速度快 0.5 0.01 90.6 70.5 生长速度中等 0.3 0.03 92.3 48.4 生长速度中等 0.3 0.01 92.0 31.9 生长速度中等 注：6-BA为细胞分裂素类植物生长调节剂，NAA为生长素类调节剂 A. 外植体腋芽的细胞分裂能力强，更易经脱分化和再分化形成新植株 B. 0.3 mg/L6-BA、0.01 mg/LNAA为腋芽萌发及生长的最优激素组合 C. 仅降低NAA浓度会在一定程度上降低腋芽侧芽的萌发能力 D. 愈伤组织后续再分化出根或芽的培养过程需要光照 5. 胞质杂种是经原生质体融合获得的特殊细胞或个体，细胞中仅含有其中一个亲本的细胞核，细胞质则来自两个亲本。关于胞质杂种的获取与应用，叙述错误的是（ ） A. 胞质杂种可用于研究细胞质基因组的遗传 B. 需将一个亲本原生质体的细胞核去除或灭活 C. 诱导原生质体融合可使用聚乙二醇（PEG） D. 胞质杂种植株的形成与植物细胞的全能性无关 6. 为探究生长素合成抑制剂PPBo和Kyn对愈伤组织生根和生芽的影响，将愈伤组织置于不同浓度PPBo或Kyn的培养基中培养，统计每个愈伤组织产生的不定芽和不定根的数量，结果如图。 下列相关说法正确的是（ ） A. 愈伤组织经过脱分化形成根和芽 B. 施加100 μM的PPBo，可抑制不定根的形成 C. 随着PPBo浓度升高，每个愈伤组织的不定芽数量增加 D. 用10 μM的PPBo或Kyn处理愈伤组织，产生不定芽的数量相等 7. 利用中空纤维膜和微凝胶，制备微型动物组织的技术流程，如下图所示。温度降低到20℃后，微凝胶从固态凝胶转变为流动溶胶，原本贴附的单层细胞会整体从纤维膜内壁剥离下来，形成完整的微型动物组织。 下列有关叙述不正确的是（ ） A. 培养过程中需通入95%空气和5%CO2 B. 微凝胶中通常需要加入血清等一些天然成分 C. 图中培养的细胞无细胞贴壁和接触抑制现象 D. 该技术的优势是剥离过程对组织结构损伤小 8. 将编码抗金黄色葡萄球菌肠毒素B的人源抗体（LXY-Ab）基因，整合到小鼠基因组的ROSA26位点，构建了可稳定表达LXY-Ab的模型小鼠。该模型小鼠的血清、乳汁、唾液中均能检测到有活性的LXY-Ab。下列关于该抗体的叙述，错误的是（ ） A. LXY-Ab的制备依赖B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合 B. ROSA26位点一般不含有小鼠的关键内源基因 C. 驱动LXY-Ab基因表达的启动子不具有组织特异性 D. 该抗体可用于金黄色葡萄球菌感染的检测与治疗 9. 胚胎工程包括体外受精、胚胎移植和胚胎分割等技术。下列叙述正确的是（ ） A. 采集到的卵母细胞和精子可直接用于体外受精 B. 胚胎移植时，需移植到同种的、生理状态相同的雌性体内 C. 胚胎分割应选择原肠胚期的胚胎，且需均等分割内细胞团 D. 胚胎移植产生的后代，其遗传性状主要与受体保持一致 10. 下列有关“DNA的粗提取与鉴定实验”的说法，不正确的是（ ） A. 新鲜洋葱、香蕉、菜花或猪肝均可作为实验材料 B. 选用植物材料提取DNA，需加研磨液研磨 C. 上清液中加入2 mol/L氯化钠溶液使DNA析出 D. 沸水加热条件下，DNA遇二苯胺呈现蓝色 11. 胰蛋白酶在生物医药、细胞培养等领域应用广泛，但存在稳定性差的不足。科研人员将胰蛋白酶第177位的精氨酸去除，使其稳定性显著提高。下列相关叙述错误的是（ ） A. 操作对象为胰蛋白酶相关基因 B. 对胰蛋白酶的改造过程不涉及中心法则 C. 获得新胰蛋白酶的技术属于蛋白质工程 D. 改造后的胰蛋白酶空间结构发生改变 12. 某实验小组将PETase基因导入大肠杆菌，以构建能降解塑料的工程菌。以下技术使用的先后顺序是（ ） ①PCR技术②抗原—抗体杂交技术③转化技术④筛选培养 A. ①③④② B. ②①③④ C. ③①④② D. ①②③④ 13. 限制酶SpeI和XbaI的识别序列及切割位点如图所示，研究者使用这两种酶分别切割目的基因和质粒。 下列说法错误的是（ ） A. SpeI和XbaI的作用部位都是磷酸二酯键 B. SpeI和XbaI切割后产生的黏性末端可通过DNA连接酶连接 C. 若用SpeI和XbaI双酶切质粒，不能有效防止质粒自身环化 D. 目的基因和质粒连接后的序列可以被SpeI或XbaI再次切割 14. 研究者将花青素合成酶基因（FAaNS）导入草莓，获得甜度更高的“红颜草莓”。下图为含FAaNS的DNA片段结构示意图。 下列分析正确的是（ ） A. 将FAaNS导入草莓细胞时，要先用钙离子处理 B. 扩增FAaNS时，以四种核糖核苷酸为原料 C. 用PCR技术鉴定FAaNS时，可使用引物2、3 D. 提取草莓细胞中FAaNS的mRNA，进行个体生物学水平鉴定 15. 世界首例“免疫艾滋病基因编辑婴儿”事件中，研究者利用CRISPR/Cas9技术修改了胚胎的CCR5基因。该婴儿诞生后，相关医学伦理委员会启动了调查。下列有关生物技术的安全问题，错误说法是（ ） A. 将转基因猪的心脏移植给人时，必须进行多方面的安全评估 B. 我国明确禁止任何形式的生殖性克隆人的实验，坚决反对克隆人 C. 通过体外授精培育试管婴儿时，在胚胎移植前需要对胚胎进行性别鉴定 D. 对胚胎的CCR5进行基因编辑可能会影响该基因的正常功能，从而增加患病的风险 第二部分非选择题 本部分共6小题，共70分。 16. 微生物可改良土壤环境并促进植物生长。研究人员在盐碱地水稻根部土壤中筛选获得1株耐盐碱细菌，对其耐盐性、抗病性及促生长能力等进行了研究。 （1）将所采集的土壤制成悬液，__________后分别接种至固体培养基培养。观察菌落的__________等特征，挑取单个菌落进行多次纯化，直至获得单克隆菌株J009。 （2）将J009分别接种在含1%～5%NaCl固体培养基上，28℃培养48 h，观察菌株的生长情况，结果如图1。 以上采用的接种方法是__________。结果显示__________，表明其有一定程度的耐盐特性。 （3）将稻瘟病菌菌饼倒扣接种在LB固体培养基两侧，实验组在菌饼中间接种J009，对照组应接种__________。图2结果表明J009对病原菌生长有抑制作用，判断依据是__________。 （4）采用不同浓度的NaCl溶液添加琼脂来模拟盐胁迫环境。将J009处理组（实验组）和对照组水稻在28℃暗培养7 d后，测定水稻根长、芽长，结果如图3所示。 实验结果表明，__________。 17. “绿洲1号”菌草具有很高的饲用、生产及生态价值，应用前景十分广阔，但是难以进行有性繁殖。因此，通过组织培养技术解决苗木紧缺问题尤为重要。为确定“绿洲1号”组织培养的最佳条件，科研人员开展了相关研究。 （1）将洗净的嫩枝，切分成2～3 cm的带节茎段，转入超净工作台，在2%次氯酸钠溶液中处理一定时间，起到__________作用。在茎节膨起处螺旋切割使其出现新创面，然后接种到启动培养基中，30 d后统计污染率与萌发率，结果如下图。 实验结果为：__________。综合以上结果可知，适宜的处理时间为__________。 （2）为确定最利于生根的培养基配方，研究人员进行了相关实验，部分结果如下表。 编号 生根培养基 生根率（%） S1 MS＋NAA0.3 mg/L 72.76 S2 MS＋NAA0.6 mg/L 82.22 S3 MS＋NAA0.9 mg/L 88.89 S4 MS＋IBA4.0 mg/L 92.22 S5 MS＋IBA5.0 mg/L 95.00 S6 MS＋IBA6.0 mg/L 93.89 S7 MS＋IBA5.0 mg/L＋NAA__________mg/L 95.56 S8 MS＋IBA5.0 mg/L＋NAA__________mg/L 96.67 S9 MS＋IBA5.0 mg/L＋NAA__________mg/L 97.22 ①按物理性质分类，植物组织培养所用的培养基属于__________。培养基中除了含有植物组织所需的营养物质外，还需要添加__________以诱导生根。 ②上述实验中，S7、S8、S9的NAA浓度应分别为__________mg/L。结果表明，__________。除了生根率外，还应检测__________，从而更全面地反映诱导效果。 （3）“绿洲1号”菌草的组织培养是将茎节处的休眠芽培养成植株，这种培养方式__________（选择“体现”或“未体现”填写）植物细胞的全能性，其主要优势在于__________。（至少写两点） 18. 血清4型禽腺病毒（FAdV-4）是家禽肝炎-心包积液综合征（HHS）的主要病原体。接种疫苗是预防HHS的主要手段。 （1）LMH-TB细胞系是由鸡肝癌细胞建立的细胞系，可作为FAdV-4的宿主细胞生产疫苗。该细胞系需在CO2培养箱中进行培养，CO2的主要作用是__________。用__________处理该贴壁生长的细胞系可进行传代，但增殖效率低，限制了疫苗的规模化生产。 （2）为了提高增殖效率，研究者对LMH-TB细胞进行悬浮驯化，获得了LMH-MB1、LMH-MB两种细胞。悬浮驯化过程及相关检测结果如图1所示。 LMH-MB1细胞传至第11代，随后换用无血清培养液继续培养若干代，获得了能在无血清条件下生长且驯化成功的细胞LMH-MB。与含血清阶段相比，无血清培养阶段细胞的相对生长速率__________；继续将LMH-MB1在含血清的培养液中培养，从第11代培养至第18代的目的是__________。 （3）与LMH-TB相比，利用LMH-MB细胞能生产更多病毒。CAR蛋白是FAdV-4病毒侵染宿主细胞的关键受体，研究者检测了该病毒侵染不同细胞后CAR的表达量，结果如图2所示。 据此推测，CAR表达量变化直接导致病毒产量升高。你__________（选择“同意”或“不同意”填写）该推测，理由是__________。 19. 学习以下材料，回答（1）～（4）题。 孤雌胚胎干细胞 大多数雌性哺乳动物中的卵泡储备在出生时就已确定。自身免疫性疾病、年龄增长及放化疗等都会加速卵泡的损耗，从而导致卵巢早衰及不孕。为开辟卵母细胞形成的新途径，研究人员通过激活黑色小鼠的MII期卵母细胞并使其染色体数目加倍，获得了二倍体孤雌胚胎。该胚胎因父源印记缺陷和胎盘功能异常而在妊娠中期停滞发育。研究人员从二倍体孤雌胚胎中分离出孤雌胚胎干细胞（pESCs）。同时，从相同遗传背景的雌性受精胚胎中分离出胚胎干细胞（ESCs），操作流程如下图。 为检测pESCs的分化潜能，将得到的pESCs和ESCs分别显微注射入白色小鼠4-8细胞期胚胎，均能产生黑白毛色相间且具有生殖系传递能力的嵌合体，说明pESCs具有与ESCs相当的分化潜能。 随后，在特定条件下将pESCs诱导分化为原始生殖细胞样细胞（PGCLCs）。为了进一步获得成熟的卵母细胞，研究人员将PGCLCs与12.5天的小鼠胚胎性腺体细胞混合后，移植到去除卵巢雌鼠的肾囊膜下。4周后，移植部位形成了结构完整的“重建卵巢”，且检测发现重建的卵巢能恢复激素分泌。从这些“重建卵巢”中，科学家成功分离出发育至生发泡期（GV期）的卵母细胞。这些卵母细胞经过体外成熟培养和体外受精，成功获得了2-细胞胚胎。最后，将2-细胞胚胎移植到受体母鼠体内，经过正常妊娠，最终获得了健康可育的后代。 已有报道表明受精胚胎来源的胚胎干细胞（ESCs）能分化出卵母细胞，而本次实验首次证明了不需要父源基因组，只从孤雌胚胎干细胞出发，就能获得真正可受精、可产生健康后代的卵母细胞。与ESCs相比，pESCs的伦理争议更小。pESCs的获得为重建卵巢功能与恢复生育能力提供了潜在新策略，为未来再生医学奠定了重要基础。 （1）pESCs和ESCs细胞来自于囊胚的__________，在得到嵌合体的过程中，用到的胚胎工程技术是__________ （2）将从pESCs获得可育后代的过程补充完整__________ （3）根据材料信息，以下说法正确的是__________（多选） A. pESCs的性染色体组成为XX B. 黑白毛色嵌合体的出现，说明pESCs参与了受体胚胎的皮肤及毛发的发育 C. 将嵌合体与白色小鼠交配后，后代中出现黑色小鼠，说明pESCs在嵌合体中能形成功能性卵细胞 D. “重建卵巢”既能恢复激素分泌，又能形成发育成熟的卵母细胞 E. 目前这一技术可直接用于治疗人类卵巢早衰及不孕症。 （4）请结合所学知识及材料信息，解释利用孤雌胚胎干细胞获得功能性卵母细胞的伦理争议更小的原因。__________ 20. 叶绿体分裂异常会严重影响光合作用效率，研究者用诱变剂处理野生型拟南芥种子，筛选到了一株叶绿体分裂异常突变体cpd44，表型分析发现与已报道的ARC6基因突变体相似。为探究cpd44表型是否为ARC6基因突变所致，研究者进行了如下实验。 （1）研究者利用PCR技术分别获得野生型和cpd44的ARC6基因，反应体系中应添加__________酶进行扩增，引物的作用是__________。每个循环要经过变性、__________和延伸。测序发现cpd44的ARC6基因发生了碱基替换。 （2）在构建基因表达载体时为避免发生自连情况影响效率，根据图1信息，扩增野生型ARC6基因所用的引物应添加__________酶切位点。 （3）重组质粒先导入经__________处理的农杆菌，再通过农杆菌转化法转化至__________（野生型/cpd44植物中。 （4）获得的转基因植株可用__________进行个体水平筛选。对存活的植株进行分子水平鉴定，需分别扩增内源和外源ARC6基因的部分片段，若实验结果为__________（请在图2中补充实验结果），同时显微镜观察到该植株叶绿体__________，则说明cpd44的表型确实为ARC6基因突变所致。 21. Ad5是一种腺病毒，复制型Ad5近年成为肿瘤基因治疗与溶瘤病毒治疗的高效载体。研究者先后设计出三代溶瘤腺病毒OBP-301、OBP-401、OBP-702用于肿瘤治疗。 （1）第一代OBP-301中hTERT-p启动子驱动基因在肿瘤细胞中特异性表达。在病毒复制增殖过程中，E1A、E1B两种蛋白缺一不可且需要特定比例。IRES使一条mRNA按相应比例同时指导E1A、E1B两种蛋白的合成，如图1。 构建溶瘤腺病毒时，将腺病毒的ΔE1启动子替换为hTERT-p启动子，目的是__________。E1A、E1B基因共用启动子可避免__________。 （2）在第二代OBP-401基因组中插入相关元件，使绿色荧光蛋白基因（GFP）在肿瘤细胞中特异性表达。Ad5主要通过宿主细胞表面的受体蛋白CAR进入细胞。研究者将不同载体导入肉瘤细胞并检测荧光强度，结果如图2。 据图分析，与乙组比较，丙组荧光强度高的原因是__________。OBP-401优势是在手术治疗中，便于__________。 （3）在第三代OBP-702中将ΔE3替换为Egr-1-p-p53表达元件，射线照射时，诱导启动子Egr-1-p启动p53基因在肿瘤细胞中表达，如图3。 研究表明OBP-702比OBP-401抑瘤效果更强，结合图中信息写出相应的分子机制__________。 （4）研究表明，DNA甲基化会降低OBP-702的溶瘤效果。为验证DNA甲基化通过调控hTERT启动子活性，从而影响OBP-702的溶瘤效率，进行以下实验。 ①将生理状态一致的骨肉瘤细胞随机分为两组： 甲组：DNA甲基转移酶抑制剂处理（降低甲基化） 乙组：特异性抑制hTERT启动子活性 ②各组感染等量OBP-702，在相同且适宜条件下培养。 ③检测并比较各组溶瘤效率。 改正实验的不足之处。__________ 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $