精品解析：河北省石家庄市部分学校2025—2026学年高二下学期7月期末考试生物试题

7月高二期末巩固训练生物 注意事项：1.考试时间为75分钟，满分100分。 2.全部答案在答题卡上完成，答在本试卷上无效。 一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 德国科学家施莱登和施旺建立的“细胞学说”，是自然科学史上的一座丰碑。下列关于“细胞学说”的说法，正确的是（ ） A. 细胞学说使生物学研究由器官、组织水平进入分子水平 B. 施莱登和施旺提出一切生物都由细胞发育而来 C. 细胞学说打破了植物学和动物学的壁垒，阐明了生物界的多样性 D. 魏尔肖指出“细胞通过分裂产生新细胞”，是对细胞学说的重要修正 2. 无花果是世界上最古老的栽培果树之一。无花果果实中含有多种营养成分，具有促进排便、增强消化功能、保护心血管等功效。下列关于构成无花果细胞的元素的叙述错误的是（ ） A. 组成无花果细胞的元素在无机自然界中都能找到 B. 碳是构成细胞的最基本元素，生物大分子及其单体均以碳链为基本骨架 C. 无花果中含有丰富的微量元素，如锰、锌、钙、铁等 D. 氮元素缺乏会影响植物光合作用的进行 3. 农谚有云：“庄稼一枝花，全靠肥当家”，“上粪不浇水，庄稼噘着嘴”。体现了合理施肥和灌溉是农作物高产、稳产的重要保障。下列相关叙述正确的是（ ） A. 水是非极性分子，因此水是细胞内良好的溶剂 B. 适量施用农家肥有利于植物吸收有机物提升产量 C. 既能影响DNA聚合酶的活性，又能调节细胞液的渗透压 D. 磷在细胞内以磷酸基团的形式存在于核酸、磷脂等有机化合物中 4. 下图是细胞核的亚显微结构模型图，下列叙述正确的是（ ） A. 题图展示的细胞核亚显微结构模型图属于物理模型 B. ①具有选择性，是蛋白质、DNA等大分子物质进出细胞核的通道 C. ②是由两层磷脂分子组成，有利于实现核内环境的相对稳定 D. ⑤是细胞遗传和代谢的控制中心，一般数量越多代谢越旺盛 5. 作为系统的边界，细胞膜在细胞的生命活动中具有重要作用。下列关于细胞膜结构和功能叙述正确的是（ ） A. 同位素标记的固醇类物质可以穿过细胞膜，表明细胞膜含有胆固醇 B. 蛋白质在细胞膜中不均匀分布，与磷脂双分子层共同构成细胞膜的基本支架 C. 细胞间信息交流不一定依赖细胞膜表面的受体蛋白完成 D. 功能越复杂的细胞膜，蛋白质与脂质的种类与数量就越多 6. 下图是显微镜下观察到的洋葱鳞片叶外表皮细胞图像。下列叙述正确的是（ ） A. 此时细胞液浓度小于外界溶液浓度 B. 观察时应全程使用低倍镜，无需使用高倍镜 C. 植物细胞在失水过程中，细胞液渗透压下降，细胞壁压力也有所降低 D. 当细胞吸水膨胀到最大时，植物细胞的细胞液渗透压等于外界溶液 7. 细胞是一个开放的系统，每时每刻都与环境进行着物质交换，细胞膜能对进出细胞的物质进行选择。图中①~⑤表示物质通过细胞膜的转运方式。下列有关叙述错误的是（ ） A. 水分子可通过方式①③进入细胞，其中多数水分子以③方式进入 B. 物质通过方式②进行跨膜运输时不需要与通道蛋白结合 C. 方式④能量可以驱动载体蛋白空间结构发生改变 D. 嵌入囊泡内的药物A属于水溶性分子，囊泡能将其送至特定的细胞 8. 下列关于传统发酵食品制作的叙述，错误的是（ ） A. 家庭制作果酒、泡菜和腐乳时，对于原材料一般不需要严格灭菌 B. 制作泡菜和腐乳时，一般会加入“老汤”，其作用是加速发酵 C. 在无氧条件下，酵母菌可以产生酒精，醋酸菌则不能产生醋酸 D. 酵母菌的繁殖速率越快，发酵产物酒精的产率越高 9. 实验室常通过配制特定培养基完成微生物的分离与培养，下列叙述正确的是（ ） A. 可利用平板划线法或稀释涂布平板法对微生物进行扩大培养 B. 培养微生物所用的培养基中都必须含有水、无机盐、碳源和氮源等基本营养成分 C. 微生物培养基中都需添加一定量的抗生素以防止杂菌污染 D. 为防止杂菌污染，培养基需先完成灭菌操作后再倒平板 10. 下列关于植物组织培养技术的叙述，正确的是（ ） A. 诱导愈伤组织的培养基中，生长素用量与细胞分裂素用量的比值大于1 B. 获得愈伤组织的过程为脱分化，该过程与细胞中基因的选择性表达有关 C. 脱分化过程中需要提供充足的光照 D. 再分化形成幼苗的过程中不需要激素的调节 11. “红富士”苹果（二倍体）和“金冠”苹果（二倍体）是优良的栽培品种，研究人员设计实验进行体细胞杂交，以培育兼具两种优良性状的苹果新品种，实验流程如图所示。下列有关叙述错误的是（ ） A. 酶解是为了去除细胞壁，为了避免杂菌污染，该操作应在无菌水中进行 B. 可用PEG诱导植物细胞融合，再生出细胞壁是融合成功的标志 C. 培育杂种植株的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 D. 可依据细胞中叶绿体的分布情况，初步筛选出杂种细胞 12. 下列关于基因工程所需基本工具的叙述，正确的是（ ） A. DNA连接酶能识别特定的核苷酸序列 B. “分子运输车”是载体，最常用的质粒都是在天然质粒的基础上经过人工改造的 C. 质粒是只存在于细菌细胞质中能自主复制的大型环状单链DNA分子 D. 用限制酶酶切获得一个外源基因时得到两个切口，有2个磷酸二酯键被断开 13. 下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验和“琼脂糖凝胶电泳”实验的叙述，正确的是（ ） A. 鸡血、猪血和新鲜洋葱等都适合作为实验材料来提取DNA B. 用预冷的体积分数为95%的酒精能初步分离DNA与蛋白质 C. 电泳时，DNA分子片段越大，在凝胶中迁移的速率越快 D. 凝胶载样缓冲液中加入的核酸染料能与DNA分子结合，便于在紫外灯下观察 二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合要求，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 14. 国家卫健委提出“三减三健”（减盐、减油、减糖，健康口腔、健康体重、健康骨骼）的全民健康生活方式专项行动，旨在降低慢性病发病风险。下列说法错误的是（ ） A. 减盐可降低细胞外液Na⁺浓度，从而维持细胞正常的形态与功能 B. 人体肝细胞中的糖原和皮下脂肪均为含C、H、O的生物大分子 C. 脂肪含量较高，可导致发胖，日常饮食中应避免摄入含脂肪类食物 D. 运动有助于减肥，因为运动促进脂肪大量转化为糖类提供能量 15. 脂滴是源于内质网的一种泡状结构，该结构能不断收集细胞中的脂肪酸，机体营养匮乏时，脂滴可进入溶酶体被降解。下列相关推测不合理的是（ ） A. 用差速离心法分离细胞器时，较低离心速率下大的颗粒悬浮在上清液中 B. 内质网对蛋白质进行初步加工，是囊泡运输过程中的交通枢纽 C. 脂滴具有和内质网完全相同的膜结构 D. 溶酶体中参与脂滴降解的水解酶需经高尔基体分类包装 16. CD47是一种在多种细胞中广泛表达的跨膜糖蛋白，能够与巨噬细胞膜上的受体结合，并抑制其吞噬作用。结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6－5倍。科研人员尝试合成抗CD47的单克隆抗体，并进一步探究其对巨噬细胞吞噬作用的影响。过程如下图所示，下列分析错误的是（ ） 注：吞噬指数越大，代表吞噬能力越强。 A. 首先多次向小鼠注射CD47，从骨髓中得到B细胞，诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 B. 可用灭活病毒诱导②过程两种细胞融合，可利用选择培养基筛选出能产生抗CD47单克隆抗体的杂交瘤细胞 C. 杂交瘤细胞既能在小鼠腹腔内培养，也能在体外培养液中培养 D. 吞噬指数增大的原因是抗CD47单克隆抗体与巨噬细胞结合，能直接增强其吞噬作用 17. 羊奶的脂肪颗粒体积为牛奶的三分之一，更利于人体吸收，其维生素及微量元素含量明显高于牛奶。欲利用胚胎工程技术加快高产奶的萨能山羊的繁殖，下列说法错误的是（ ） A. 培养采集到的相关细胞时，应置于95％O2和5％CO2的混合气体中培养 B. 为使萨能母羊超数排卵，可在其饲料中添加适量的促性腺激素 C. 通过核移植和体外受精技术获得的胚胎，均需选用滋养层细胞进行性别鉴定 D. 进行胚胎移植前不需要对代孕羊进行免疫检查 18. 如图表示某目的基因的部分碱基序列和利用PCR扩增该目的基因时设计的引物。下列有关叙述错误的是（ ） A. PCR过程中，耐高温的DNA聚合酶需先与启动子结合，继而从引物的3′端延伸子链 B. 扩增该目的基因时应选择引物2和引物3组合 C. 5次循环后理论上需要消耗31对引物 D. PCR扩增时适当降低复性温度可减少非特异性条带 三、非选择题：本题共5小题，共59分。 19. 血红蛋白是一种由血红素和珠蛋白组成的结合蛋白。每个血红蛋白分子由1个珠蛋白和4个血红素（血红素中心为1个铁原子）组成。每个珠蛋白有4条肽链，即2条α链、2条β链。每条α链由141个氨基酸构成，每条β链由146个氨基酸构成。回答下列问题： （1）1个血红蛋白分子中，至少含有____________个游离的氨基和____________个肽键。人体缺铁会使血红蛋白含量偏低，说明无机盐有____________的作用。 （2）若组成两种蛋白质的氨基酸种类、数目和排列顺序完全相同，但功能不同的原因是____________。 （3）若每条α链含有丙氨酸5个，分别位于第26、71、72、99、141位（如下图所示）。肽酶E专门水解丙氨酸氨基端的肽键。肽酶E完全作用于1条α链后，产生的多肽中氢原子数比α链____________（填“多”或“少”）____________个。 （4）甲同学为验证酒精能使蛋白质变性，选择以血红蛋白为材料，利用双缩脲试剂进行检测，乙同学认为方案不合理，推测原因是________________________________________________________________________。 20. 溶酶体是细胞内的一种细胞器，内含多种水解酶，能消化和分解细胞内外的物质，对维持细胞正常的代谢起重要作用。溶酶体酶的合成和成熟是一个复杂而精确的过程，如图所示。回答下列问题： （1）动物细胞中不含磷脂的细胞器有____________。 （2）为了研究蛋白质的合成与分泌过程，常采用____________法。内质网膜出芽形成的囊泡包裹着蛋白质通过____________（细胞结构）定向运输到高尔基体。 （3）依据分解的底物不同，溶酶体可分为自噬性溶酶体和异噬性溶酶体，异噬性溶酶体分解的底物一般为侵入细胞的异物和病原体颗粒，自噬性溶酶体分解的底物主要为____________。 （4）包涵体细胞病（Ⅰ－celldisease）是一种罕见的遗传病。患者的成纤维细胞在显微镜下充满巨大的包涵体（内含未被消化的糖脂和糖蛋白）。检测发现，患者细胞的溶酶体内酸性水解酶含量极低，几乎缺失；但患者血液中这些酶的含量却异常偏高，且活性正常。Ⅰ－cell病患者血液中水解酶含量高而溶酶体内缺失，这说明患者的溶酶体酶____________（填“能够”或“不能”）正常合成。结合图示M6P的作用，推测包涵体细胞病最可能的原因是____________。M6P受体还有少量存在质膜上，其意义是____________。 21. 葡萄糖在生物学领域具有重要地位，是细胞生命活动所需要的主要能源物质和新陈代谢的中间产物。下图为肾小管上皮细胞吸收葡萄糖等物质的示意图。回答下列问题： （1）细胞膜具有选择透过性的主要结构基础是____________________________________。 （2）图中钠钾泵的作用是____________。葡萄糖进出肾小管上皮细胞的方式____________（填“相同”或“不相同”），新生儿小肠上皮细胞通过消耗ATP，可以直接吸收母乳中的免疫球蛋白，该物质被吸收的方式是____________。 （3）肾小管上皮细胞从原尿中重吸收Na⁺的方式是____________。该物质运输方式的运输速率主要取决于____________和____________。 （4）为判断A、B两种小分子物质的跨膜运输方式，科研人员分别用呼吸抑制剂、载体蛋白抑制剂处理细胞，检测运输速率变化，结果为：呼吸抑制剂仅显著降低物质B的运输速率，载体蛋白抑制剂可显著降低A、B的运输速率，则物质A的跨膜运输方式为____________，物质B的跨膜运输方式为____________。 22. 尿素是一种高浓度氮肥，通过土壤中某些细菌分解为氨后，被植物吸收利用。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下： KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 蛋白胨 葡萄糖 尿素 琼脂 1.4g 2.1g 0.2g 1.0g 10.0g 1.0g 15.0g （1）配制好的培养基需____________灭菌。通常在实验室培养细菌时，一般需要将培养基的pH调至____________。培养基中添加KH2PO4和Na2HPO4的作用是____________（答出2点）。 （2）该同学____________（填“能”或“不能”）分离出土壤中分解尿素的细菌，原因是______________________________。 （3）接种操作都应在酒精灯火焰附近进行，目的是____________。该同学从田中取10g土壤，加90mL____________制成菌液，将1mL菌液分别稀释10倍和100倍，各在3个平板上接种（每个平板的接种量为0.1mL），经适当培养后，2组平板上的菌落数分别为75、77、76和22、27、25.该同学需要用____________法进行接种，据此可得出10g土壤的活菌数为____________个。 （4）土壤中还存在能利用空气中氮气作为氮源的固氮菌（如根瘤菌），某同学欲探究平板上分离得到的某单菌落是否为固氮菌，实验思路为：__________________________________________。 23. THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中THP9基因转录的方向为从左往右。回答以下问题： EcoRⅠ BamHⅠ KpnⅠ MfeⅠ HindⅢ （1）基因工程的核心步骤是____________________________。 （2）质粒载体中启动子的作用是____________________。载体中的标记基因是____________。 （3）表格中EcoRⅠ和________能产生相同的黏性末端。构建基因表达载体时，用________切割质粒，用________切割目的基因。 （4）分子水平检测中，可通过____________技术检测THP9基因是否整合到玉米基因组或是否转录出mRNA；为了检测转基因玉米新品种的培育是否成功，还需要检测________________________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 7月高二期末巩固训练生物 注意事项：1.考试时间为75分钟，满分100分。 2.全部答案在答题卡上完成，答在本试卷上无效。 一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 德国科学家施莱登和施旺建立的“细胞学说”，是自然科学史上的一座丰碑。下列关于“细胞学说”的说法，正确的是（ ） A. 细胞学说使生物学研究由器官、组织水平进入分子水平 B. 施莱登和施旺提出一切生物都由细胞发育而来 C. 细胞学说打破了植物学和动物学的壁垒，阐明了生物界的多样性 D. 魏尔肖指出“细胞通过分裂产生新细胞”，是对细胞学说的重要修正 【答案】D 【解析】 【详解】A、细胞学说使生物学研究从器官、组织水平进入细胞水平，A错误； B、施莱登和施旺提出的是一切动植物都由细胞发育而来，不包括病毒，病毒没有细胞结构，B错误； C、细胞学说指出一切动植物都由细胞发育而来，打破了植物学和动物学的壁垒，阐明的是生物界的统一性，并非生物界的多样性，C错误； D、魏尔肖提出的“细胞通过分裂产生新细胞”，修正了细胞学说中“新细胞从老细胞中产生”的表述，是对细胞学说的重要补充和完善，D正确。 2. 无花果是世界上最古老的栽培果树之一。无花果果实中含有多种营养成分，具有促进排便、增强消化功能、保护心血管等功效。下列关于构成无花果细胞的元素的叙述错误的是（ ） A. 组成无花果细胞的元素在无机自然界中都能找到 B. 碳是构成细胞的最基本元素，生物大分子及其单体均以碳链为基本骨架 C. 无花果中含有丰富的微量元素，如锰、锌、钙、铁等 D. 氮元素缺乏会影响植物光合作用的进行 【答案】C 【解析】 【详解】A、生物界与非生物界具有统一性，组成无花果细胞的所有元素在无机自然界中均存在，A正确； B、碳是构成细胞的最基本元素，多糖、蛋白质、核酸等生物大分子及其单体都以碳链为基本骨架，B正确； C、钙属于大量元素（占生物体总重量万分之一以上），锰、锌、铁属于微量元素，C错误； D、叶绿素、光合作用相关酶的合成都需要氮元素，氮元素缺乏会导致叶绿素、光合酶合成不足，进而影响光合作用速率，D正确。 3. 农谚有云：“庄稼一枝花，全靠肥当家”，“上粪不浇水，庄稼噘着嘴”。体现了合理施肥和灌溉是农作物高产、稳产的重要保障。下列相关叙述正确的是（ ） A. 水是非极性分子，因此水是细胞内良好的溶剂 B. 适量施用农家肥有利于植物吸收有机物提升产量 C. 既能影响DNA聚合酶的活性，又能调节细胞液的渗透压 D. 磷在细胞内以磷酸基团的形式存在于核酸、磷脂等有机化合物中 【答案】D 【解析】 【详解】A、水分子是极性分子，易与带正电荷或负电荷的分子或离子结合，因此水是细胞内良好的溶剂，A错误； B、植物通过主动运输吸收矿质元素（无机盐离子），不能直接吸收有机物。农家肥需经微生物分解为无机物（如矿质离子）才能被植物利用，B错误； C、DNA聚合酶的活性依赖Mg2+激活，C错误； D、磷在细胞内以磷酸基团的形式存在于有机化合物（如核酸、ATP、磷脂等）中，D正确。 4. 下图是细胞核的亚显微结构模型图，下列叙述正确的是（ ） A. 题图展示的细胞核亚显微结构模型图属于物理模型 B. ①具有选择性，是蛋白质、DNA等大分子物质进出细胞核的通道 C. ②是由两层磷脂分子组成，有利于实现核内环境的相对稳定 D. ⑤是细胞遗传和代谢的控制中心，一般数量越多代谢越旺盛 【答案】A 【解析】 【详解】A、物理模型是人为对认识对象构建的简化概括性结构，结构模型图属于物理模型，A正确； B、核孔具有选择透过性，是蛋白质、RNA等大分子进出细胞核的通道，细胞核内的DNA不能通过核孔出细胞核，B错误； C、核膜属于双层膜结构，每层生物膜由2层磷脂分子构成，因此核膜共含有4层磷脂分子，C错误； D、⑤是核仁，功能是与rRNA的合成和核糖体的形成有关，细胞遗传和代谢的控制中心是细胞核，D错误。 5. 作为系统的边界，细胞膜在细胞的生命活动中具有重要作用。下列关于细胞膜结构和功能叙述正确的是（ ） A. 同位素标记的固醇类物质可以穿过细胞膜，表明细胞膜含有胆固醇 B. 蛋白质在细胞膜中不均匀分布，与磷脂双分子层共同构成细胞膜的基本支架 C. 细胞间信息交流不一定依赖细胞膜表面的受体蛋白完成 D. 功能越复杂的细胞膜，蛋白质与脂质的种类与数量就越多 【答案】C 【解析】 【详解】A、固醇类物质能穿过细胞膜，是因为细胞膜的基本支架是磷脂双分子层，根据“相似相溶”原理，固醇类（脂质）易通过，不能据此表明细胞膜含有胆固醇，A错误； B、磷脂双分子层构成细胞膜的基本支架，B错误； C、细胞间信息交流不都依赖细胞膜表面的受体蛋白，例如高等植物细胞可通过胞间连丝直接进行信息交流，性激素等固醇类激素的受体位于细胞内，C正确； D、蛋白质是生命活动的主要承担者，功能越复杂的细胞膜，蛋白质的种类和数量越多，脂质的种类和数量不会随细胞膜功能复杂程度升高而明显增加，D错误。 6. 下图是显微镜下观察到的洋葱鳞片叶外表皮细胞图像。下列叙述正确的是（ ） A. 此时细胞液浓度小于外界溶液浓度 B. 观察时应全程使用低倍镜，无需使用高倍镜 C. 植物细胞在失水过程中，细胞液渗透压下降，细胞壁压力也有所降低 D. 当细胞吸水膨胀到最大时，植物细胞的细胞液渗透压等于外界溶液 【答案】B 【解析】 【详解】A、由于不知道该细胞是正在继续发生质壁分离还是复原，还是达到了动态平衡，因此不能确定此时细胞液浓度与外界溶液浓度的关系，细胞液浓度大于、小于或等于外界溶液浓度都有可能，A错误； B、在观察紫色洋葱鳞片叶外表皮的吸水和失水过程中，前后三次用到了低倍镜，没有切换到高倍镜，B正确； C、植物细胞失水过程中，细胞液中水分减少，溶质浓度升高，细胞液渗透压升高，C错误； D、当细胞吸水膨胀到最大时，细胞壁产生的向内压力抵消了部分渗透吸水的动力，此时细胞液渗透压可能大于外界溶液渗透压，D错误。 7. 细胞是一个开放的系统，每时每刻都与环境进行着物质交换，细胞膜能对进出细胞的物质进行选择。图中①~⑤表示物质通过细胞膜的转运方式。下列有关叙述错误的是（ ） A. 水分子可通过方式①③进入细胞，其中多数水分子以③方式进入 B. 物质通过方式②进行跨膜运输时不需要与通道蛋白结合 C. 方式④能量可以驱动载体蛋白空间结构发生改变 D. 嵌入囊泡内的药物A属于水溶性分子，囊泡能将其送至特定的细胞 【答案】A 【解析】 【详解】A、水分子的跨膜运输有两种方式：自由扩散（①）：直接穿过磷脂双分子层，效率低。协助扩散（②）：通过细胞膜上的水通道蛋白进出，效率高，是绝大多数水分子的运输方式，A错误； B、物质通过通道蛋白进行跨膜运输时不需要与通道蛋白结合，B正确； C、方式④为主动运输，主动运输需要消耗能量，能量可驱动载体蛋白空间结构发生改变，C正确； D、脂质体囊泡的内部是亲水的空腔，适合包裹水溶性药物A；囊泡表面的信号分子可以与特定细胞的受体结合，实现靶向递送，D正确。 8. 下列关于传统发酵食品制作的叙述，错误的是（ ） A. 家庭制作果酒、泡菜和腐乳时，对于原材料一般不需要严格灭菌 B. 制作泡菜和腐乳时，一般会加入“老汤”，其作用是加速发酵 C. 在无氧条件下，酵母菌可以产生酒精，醋酸菌则不能产生醋酸 D. 酵母菌的繁殖速率越快，发酵产物酒精的产率越高 【答案】D 【解析】 【详解】A、家庭制作果酒、泡菜和腐乳时所需菌种均来自原材料中天然存在的微生物，不必对原材料进行严格灭菌，A正确； B、“老汤”中含有发酵所需的菌种，制作泡菜和腐乳时，利用“老汤”会加速发酵的进程，B正确； C、无氧条件下酵母菌可通过无氧呼吸产生酒精；醋酸菌为严格好氧菌，无氧条件下无法生存，不能产生醋酸，C正确； D、有氧条件下酵母菌大量繁殖，无氧条件下才通过无氧呼吸产生酒精，酵母菌繁殖速率快时有氧条件占优势，酒精产率反而较低，D错误。 9. 实验室常通过配制特定培养基完成微生物的分离与培养，下列叙述正确的是（ ） A. 可利用平板划线法或稀释涂布平板法对微生物进行扩大培养 B. 培养微生物所用的培养基中都必须含有水、无机盐、碳源和氮源等基本营养成分 C. 微生物培养基中都需添加一定量的抗生素以防止杂菌污染 D. 为防止杂菌污染，培养基需先完成灭菌操作后再倒平板 【答案】D 【解析】 【详解】A、平板划线法和稀释涂布平板法的作用是分离纯化菌种或对菌种计数，扩大培养需要使用液体培养基，上述两种方法不能用于微生物的扩大培养，A错误； B、并非所有微生物培养基都必须含有碳源、氮源，例如培养自生固氮菌的培养基无需额外添加氮源，培养自养微生物的培养基无需添加有机碳源，B错误； C、培养无抗生素抗性的微生物时不能添加抗生素，因此并不是所有微生物培养基都需要添加抗生素，C错误； D、培养基需先完成灭菌操作后再倒平板，若倒好平板后再灭菌会导致琼脂熔化、破坏培养基成分，不符合无菌操作逻辑，D正确。 10. 下列关于植物组织培养技术的叙述，正确的是（ ） A. 诱导愈伤组织的培养基中，生长素用量与细胞分裂素用量的比值大于1 B. 获得愈伤组织的过程为脱分化，该过程与细胞中基因的选择性表达有关 C. 脱分化过程中需要提供充足的光照 D. 再分化形成幼苗的过程中不需要激素的调节 【答案】B 【解析】 【详解】A、诱导愈伤组织时，生长素用量与细胞分裂素用量的比值适中，当二者比值大于1时更有利于诱导生根，而非愈伤组织形成，A错误； B、获得愈伤组织的过程为脱分化，即已分化的细胞恢复分裂能力的过程，该过程本质是基因的选择性表达，B正确； C、脱分化过程需要避光，光照会抑制愈伤组织的形成，C错误； D、再分化形成幼苗的过程需要生长素和细胞分裂素的调节，两种激素的比例会影响根或芽的分化，D错误。 11. “红富士”苹果（二倍体）和“金冠”苹果（二倍体）是优良的栽培品种，研究人员设计实验进行体细胞杂交，以培育兼具两种优良性状的苹果新品种，实验流程如图所示。下列有关叙述错误的是（ ） A. 酶解是为了去除细胞壁，为了避免杂菌污染，该操作应在无菌水中进行 B. 可用PEG诱导植物细胞融合，再生出细胞壁是融合成功的标志 C. 培育杂种植株的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 D. 可依据细胞中叶绿体的分布情况，初步筛选出杂种细胞 【答案】A 【解析】 【详解】A、若在无菌水中进行酶处理，原生质体可能会因渗透作用而吸水涨破，该操作应在等渗或略高渗的溶液中进行，A错误； B、PEG（聚乙二醇）是诱导植物原生质体融合的常用化学诱导剂，融合后的原生质体成功再生出细胞壁是细胞融合完成的标志，B正确； C、培育杂种植株包含原生质体融合、植物组织培养两个核心环节，原生质体融合的原理是细胞膜的流动性，植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，C正确； D、“红富士”叶肉细胞的原生质体含有叶绿体，“金冠”根尖细胞的原生质体无叶绿体，可通过观察细胞中是否存在叶绿体初步筛选杂种细胞，D正确。 12. 下列关于基因工程所需基本工具的叙述，正确的是（ ） A. DNA连接酶能识别特定的核苷酸序列 B. “分子运输车”是载体，最常用的质粒都是在天然质粒的基础上经过人工改造的 C. 质粒是只存在于细菌细胞质中能自主复制的大型环状单链DNA分子 D. 用限制酶酶切获得一个外源基因时得到两个切口，有2个磷酸二酯键被断开 【答案】B 【解析】 【详解】A、DNA连接酶负责催化DNA片段之间磷酸二酯键的形成，不具有识别特定核苷酸序列的作用，A错误； B、基因工程中载体负责将目的基因运送至受体细胞，被称为“分子运输车”，最常用的载体是质粒，天然质粒通常无法直接满足作为载体需要的多个限制酶酶切位点、标记基因等要求，因此真正用作载体的质粒都是在天然质粒的基础上经过人工改造的，B正确； C、质粒是广泛存在于细菌、酵母菌等生物细胞中的小型环状双链DNA分子，C错误； D、限制酶切割DNA双链时，1个切口会断开2个磷酸二酯键（两条链各1个），获得1个外源基因需要2个切口，共断开4个磷酸二酯键，D错误。 13. 下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验和“琼脂糖凝胶电泳”实验的叙述，正确的是（ ） A. 鸡血、猪血和新鲜洋葱等都适合作为实验材料来提取DNA B. 用预冷的体积分数为95%的酒精能初步分离DNA与蛋白质 C. 电泳时，DNA分子片段越大，在凝胶中迁移的速率越快 D. 凝胶载样缓冲液中加入的核酸染料能与DNA分子结合，便于在紫外灯下观察 【答案】B 【解析】 【详解】A、猪是哺乳动物，其成熟红细胞无细胞核和众多细胞器，几乎不含DNA，因此猪血不适合作为该实验的材料，A错误； B、DNA不溶于酒精，而蛋白质等杂质可溶于预冷的体积分数为95%的酒精，因此用该试剂可析出DNA，实现DNA与蛋白质的初步分离，B正确； C、电泳时，DNA分子片段越大，在凝胶中迁移的速率越慢，因为凝胶对大分子DNA的阻碍作用更大，C错误； D、凝胶载样缓冲液中的指示剂，只是为了指示电泳进度；加入的琼脂糖溶液中的核酸染料可以与DNA分子结合，最终在紫外灯下被检测出来，D错误。 二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合要求，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 14. 国家卫健委提出“三减三健”（减盐、减油、减糖，健康口腔、健康体重、健康骨骼）的全民健康生活方式专项行动，旨在降低慢性病发病风险。下列说法错误的是（ ） A. 减盐可降低细胞外液Na⁺浓度，从而维持细胞正常的形态与功能 B. 人体肝细胞中的糖原和皮下脂肪均为含C、H、O的生物大分子 C. 脂肪含量较高，可导致发胖，日常饮食中应避免摄入含脂肪类食物 D. 运动有助于减肥，因为运动促进脂肪大量转化为糖类提供能量 【答案】BCD 【解析】 【详解】A、减盐可降低细胞外液Na+浓度与渗透压，避免细胞过度失水，从而维持细胞正常的形态与功能，A正确； B、糖原属于多糖，是仅含C、H、O的生物大分子，但脂肪相对分子质量较小，不属于生物大分子，B错误； C、脂肪是细胞内良好的储能物质，应适量摄入，而不是避免摄入，C错误； D、糖类可以大量转化为脂肪，但脂肪不能大量转化为糖类，运动减肥的原理是运动过程能量消耗增多，促使脂肪直接氧化分解供能，而非大量转化为糖类，D错误。 15. 脂滴是源于内质网的一种泡状结构，该结构能不断收集细胞中的脂肪酸，机体营养匮乏时，脂滴可进入溶酶体被降解。下列相关推测不合理的是（ ） A. 用差速离心法分离细胞器时，较低离心速率下大的颗粒悬浮在上清液中 B. 内质网对蛋白质进行初步加工，是囊泡运输过程中的交通枢纽 C. 脂滴具有和内质网完全相同的膜结构 D. 溶酶体中参与脂滴降解的水解酶需经高尔基体分类包装 【答案】ABC 【解析】 【详解】A、差速离心法分离细胞器的原理是通过逐步提高离心速率分离不同大小的颗粒，较低离心速率下，质量更大的大颗粒会先沉降进入沉淀物中，小颗粒悬浮于上清液，A错误； B、囊泡运输过程中的交通枢纽是高尔基体，B错误； C、脂滴来源于内质网，但通常只有单层磷脂分子，而内质网具有双层磷脂分子，脂滴并不具有与内质网完全相同的膜结构，C错误； D、溶酶体中的水解酶在核糖体合成、内质网加工后，需经高尔基体分类包装，再转运至溶酶体中，D正确。 16. CD47是一种在多种细胞中广泛表达的跨膜糖蛋白，能够与巨噬细胞膜上的受体结合，并抑制其吞噬作用。结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6－5倍。科研人员尝试合成抗CD47的单克隆抗体，并进一步探究其对巨噬细胞吞噬作用的影响。过程如下图所示，下列分析错误的是（ ） 注：吞噬指数越大，代表吞噬能力越强。 A. 首先多次向小鼠注射CD47，从骨髓中得到B细胞，诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 B. 可用灭活病毒诱导②过程两种细胞融合，可利用选择培养基筛选出能产生抗CD47单克隆抗体的杂交瘤细胞 C. 杂交瘤细胞既能在小鼠腹腔内培养，也能在体外培养液中培养 D. 吞噬指数增大的原因是抗CD47单克隆抗体与巨噬细胞结合，能直接增强其吞噬作用 【答案】ABD 【解析】 【详解】A、给小鼠注射CD47进行免疫后，已免疫的能分泌特异性抗体的B淋巴细胞需从小鼠脾脏中获取，而非从骨髓中获取，A错误； B、②是动物细胞（B淋巴细胞和骨髓瘤细胞）融合过程，灭活病毒是动物细胞融合常用的诱导方法，单克隆抗体制备中，选择培养基的作用是筛选出杂交瘤细胞；筛选能产生特异性抗CD47抗体的杂交瘤细胞需用克隆化培养和抗体检测，B错误； C、杂交瘤细胞的培养有两种方式，既可注入小鼠腹腔内增殖，从腹水中提取单克隆抗体，也可在体外培养液中培养，从培养液中提取抗体，C正确； D、CD47是肿瘤细胞表面的糖蛋白，抗CD47单克隆抗体的作用是结合肿瘤细胞表面的CD47，阻断CD47对巨噬细胞吞噬作用的抑制，D错误。 17. 羊奶的脂肪颗粒体积为牛奶的三分之一，更利于人体吸收，其维生素及微量元素含量明显高于牛奶。欲利用胚胎工程技术加快高产奶的萨能山羊的繁殖，下列说法错误的是（ ） A. 培养采集到的相关细胞时，应置于95％O2和5％CO2的混合气体中培养 B. 为使萨能母羊超数排卵，可在其饲料中添加适量的促性腺激素 C. 通过核移植和体外受精技术获得的胚胎，均需选用滋养层细胞进行性别鉴定 D. 进行胚胎移植前不需要对代孕羊进行免疫检查 【答案】ABC 【解析】 【详解】A、动物细胞培养的气体环境为95%空气和5%CO2，A错误； B、促性腺激素的化学本质为蛋白质，若添加到饲料中口服，会被动物消化道内的蛋白酶分解失活，无法发挥作用，超数排卵需通过注射方式补充促性腺激素，B错误； C、通过核移植技术获得的胚胎不需要进行性别鉴定，C错误； D、胚胎移植的生理学基础之一是代孕受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，因此移植前不需要进行免疫检查，D正确。 18. 如图表示某目的基因的部分碱基序列和利用PCR扩增该目的基因时设计的引物。下列有关叙述错误的是（ ） A. PCR过程中，耐高温的DNA聚合酶需先与启动子结合，继而从引物的3′端延伸子链 B. 扩增该目的基因时应选择引物2和引物3组合 C. 5次循环后理论上需要消耗31对引物 D. PCR扩增时适当降低复性温度可减少非特异性条带 【答案】AD 【解析】 【详解】A、PCR过程中，目的基因DNA受热变性后解为单链，引物与单链相应互补序列结合；然后以单链DNA为模板，在DNA聚合酶作用下从引物的3’端延伸子链；启动子是RNA聚合酶的结合位点不是DNA聚合酶的结合位点，A错误； B、PCR中引物需分别结合两条模板链的3’端，引物2结合a链的3’端，引物3结合b链的3’端，二者可扩增目的基因，B正确； C、PCR扩增n次后共得到2n个DNA分子，除初始模板的2条母链外，每条新合成的子链都需要1个引物；5次循环后新合成子链总数为2×25-2=62条，即需要62个引物，共31对，C正确； D、复性温度决定引物和模板结合的严谨性，适当升高复性温度可减少引物与非互补序列的结合，降低非特异性条带；适当降低复性温度会增加引物与非特异性片段结合的概率，使非特异性条带增多，D错误。 三、非选择题：本题共5小题，共59分。 19. 血红蛋白是一种由血红素和珠蛋白组成的结合蛋白。每个血红蛋白分子由1个珠蛋白和4个血红素（血红素中心为1个铁原子）组成。每个珠蛋白有4条肽链，即2条α链、2条β链。每条α链由141个氨基酸构成，每条β链由146个氨基酸构成。回答下列问题： （1）1个血红蛋白分子中，至少含有____________个游离的氨基和____________个肽键。人体缺铁会使血红蛋白含量偏低，说明无机盐有____________的作用。 （2）若组成两种蛋白质的氨基酸种类、数目和排列顺序完全相同，但功能不同的原因是____________。 （3）若每条α链含有丙氨酸5个，分别位于第26、71、72、99、141位（如下图所示）。肽酶E专门水解丙氨酸氨基端的肽键。肽酶E完全作用于1条α链后，产生的多肽中氢原子数比α链____________（填“多”或“少”）____________个。 （4）甲同学为验证酒精能使蛋白质变性，选择以血红蛋白为材料，利用双缩脲试剂进行检测，乙同学认为方案不合理，推测原因是________________________________________________________________________。 【答案】（1） ①. 4 ②. 570 ③. 组成细胞中重要化合物 （2）肽链盘曲、折叠的方式不同及其形成蛋白质的空间结构不同 （3） ①. 少 ②. 4 （4）血红蛋白因含有血红素呈现红色，会对实验现象产生干扰，且变性与否，蛋白质都和双缩脲试剂反应 【解析】 【小问1详解】 一条肽链至少含有1个游离氨基，血红蛋白共4条肽链，因此至少含4个游离氨基。肽键数=氨基酸总数-肽链数，总氨基酸数为2×141+2×146=574，因此肽键数=574-4=570。铁是血红蛋白的组成成分，说明无机盐是构成细胞内某些复杂化合物的重要组成成分。 【小问2详解】 蛋白质结构多样性决定功能多样性，当氨基酸种类、数目、排列顺序都相同时，会因为肽链盘曲、折叠的方式不同及其形成蛋白质的空间结构不同，导致功能不同。 【小问3详解】 肽酶E水解1个肽键消耗1分子水，每分子水增加2个氢原子；共5个丙氨酸，每个丙氨酸水解氨基端的1个肽键，共水解5个肽键，共增加5×2=10个氢原子。产生的多肽不包含这71号和141号丙氨酸，每个丙氨酸含7个氢原子，共失去2×7=14个氢原子，总差值为10-14=-4，因此氢原子数比原α链少4个。 【小问4详解】 双缩脲试剂的检测原理是与肽键发生紫色反应，酒精使蛋白质变性仅改变蛋白质空间结构，不会破坏肽键，无论血红蛋白是否变性都能与双缩脲试剂反应出现紫色，无法得出结论，同时血红蛋白因含有血红素呈现红色，会对实验现象产生干扰。 20. 溶酶体是细胞内的一种细胞器，内含多种水解酶，能消化和分解细胞内外的物质，对维持细胞正常的代谢起重要作用。溶酶体酶的合成和成熟是一个复杂而精确的过程，如图所示。回答下列问题： （1）动物细胞中不含磷脂的细胞器有____________。 （2）为了研究蛋白质的合成与分泌过程，常采用____________法。内质网膜出芽形成的囊泡包裹着蛋白质通过____________（细胞结构）定向运输到高尔基体。 （3）依据分解的底物不同，溶酶体可分为自噬性溶酶体和异噬性溶酶体，异噬性溶酶体分解的底物一般为侵入细胞的异物和病原体颗粒，自噬性溶酶体分解的底物主要为____________。 （4）包涵体细胞病（Ⅰ－celldisease）是一种罕见的遗传病。患者的成纤维细胞在显微镜下充满巨大的包涵体（内含未被消化的糖脂和糖蛋白）。检测发现，患者细胞的溶酶体内酸性水解酶含量极低，几乎缺失；但患者血液中这些酶的含量却异常偏高，且活性正常。Ⅰ－cell病患者血液中水解酶含量高而溶酶体内缺失，这说明患者的溶酶体酶____________（填“能够”或“不能”）正常合成。结合图示M6P的作用，推测包涵体细胞病最可能的原因是____________。M6P受体还有少量存在质膜上，其意义是____________。 【答案】（1）核糖体和中心体 （2） ①. 同位素标记 ②. 细胞骨架 （3）细胞自身衰老、损伤的细胞器 （4） ①. 能够 ②. 高尔基体无法给溶酶体酶加上M6P标签，导致酶被错误地分泌到细胞外 ③. 回收偶尔（错误）分泌到细胞外的磷酸化的溶酶体酶 【解析】 【小问1详解】 磷脂是生物膜的核心组成成分，动物细胞中核糖体和中心体都无膜结构，因此不含磷脂。 【小问2详解】 研究蛋白质的合成与分泌路径，通常用放射性同位素标记氨基酸追踪去向，该方法是同位素标记法；细胞骨架是细胞内的蛋白质纤维网架结构，可作为囊泡运输的轨道，驱动囊泡定向运输。 【小问3详解】 异噬性溶酶体降解外来异物/病原体，自噬性溶酶体负责降解细胞自身衰老、损伤的细胞器等细胞自身的组分，是细胞更新自身结构的过程。 【小问4详解】 患者血液中水解酶活性正常，说明患者能够正常合成溶酶体酶；从图示过程可知，正常情况下溶酶体酶带有M6P标记，被高尔基体的M6P受体识别后，才会分选转运到溶酶体，若识别过程异常，溶酶体酶会被错误胞吐到细胞外，进入血液，结合图示M6P的作用，推测包涵体细胞病最可能的原因是高尔基体无法给溶酶体酶加上M6P标签，导致酶被错误地分泌到细胞外，因此溶酶体中缺失该酶。质膜上的M6P受体可以结合血液中游离的溶酶体酶，回收偶尔（错误）分泌到细胞外的磷酸化的溶酶体酶，通过胞吞回收这些酶运回细胞，一定程度补充溶酶体的酶含量。 21. 葡萄糖在生物学领域具有重要地位，是细胞生命活动所需要的主要能源物质和新陈代谢的中间产物。下图为肾小管上皮细胞吸收葡萄糖等物质的示意图。回答下列问题： （1）细胞膜具有选择透过性的主要结构基础是____________________________________。 （2）图中钠钾泵的作用是____________。葡萄糖进出肾小管上皮细胞的方式____________（填“相同”或“不相同”），新生儿小肠上皮细胞通过消耗ATP，可以直接吸收母乳中的免疫球蛋白，该物质被吸收的方式是____________。 （3）肾小管上皮细胞从原尿中重吸收Na⁺的方式是____________。该物质运输方式的运输速率主要取决于____________和____________。 （4）为判断A、B两种小分子物质的跨膜运输方式，科研人员分别用呼吸抑制剂、载体蛋白抑制剂处理细胞，检测运输速率变化，结果为：呼吸抑制剂仅显著降低物质B的运输速率，载体蛋白抑制剂可显著降低A、B的运输速率，则物质A的跨膜运输方式为____________，物质B的跨膜运输方式为____________。 【答案】（1）细胞膜上转运蛋白的种类和数量或转运蛋白空间结构的变化 （2） ①. 催化ATP水解、运输K⁺和Na⁺ ②. 不相同 ③. 胞吞 （3） ①. 协助扩散 ②. 膜内外Na⁺浓度差 ③. 膜上Na⁺载体蛋白的数量 （4） ①. 协助扩散 ②. 主动运输 【解析】 【小问1详解】 细胞膜的选择透过性对物质运输具有选择性，这种选择性主要由细胞膜上转运蛋白的种类和数量或转运蛋白空间结构的变化决定，因此是选择透过性的主要结构基础。 【小问2详解】 从图中可知，钠钾泵既可以结合转运Na⁺、K⁺，维持细胞内外钠钾浓度梯度，同时可以催化ATP水解释放能量，供物质运输使用，因此作用是催化ATP水解、运输K⁺和Na⁺。葡萄糖进入肾小管上皮细胞为逆浓度梯度的主动运输，运出细胞为顺浓度梯度的协助扩散，因此进出方式不相同。免疫球蛋白是大分子蛋白质，消耗ATP进入细胞的方式为胞吞。 【小问3详解】 钠钾泵持续将细胞内Na⁺泵出，使肾小管上皮细胞内Na⁺浓度低于原尿，原尿中的Na⁺顺浓度梯度进入细胞，需要载体协助、不消耗ATP，属于协助扩散，协助扩散的运输速率主要取决于膜内外Na⁺浓度差和膜上Na⁺载体蛋白的数量。 【小问4详解】 呼吸抑制剂抑制能量产生，仅降低B的速率说明B运输需要能量，A不需要能量；载体蛋白抑制剂同时降低A、B的速率，说明二者都需要载体蛋白。因此A为需要载体不需要能量的协助扩散，B为需要载体和能量的主动运输。 22. 尿素是一种高浓度氮肥，通过土壤中某些细菌分解为氨后，被植物吸收利用。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下： KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 蛋白胨 葡萄糖 尿素 琼脂 1.4g 2.1g 0.2g 1.0g 10.0g 1.0g 15.0g （1）配制好的培养基需____________灭菌。通常在实验室培养细菌时，一般需要将培养基的pH调至____________。培养基中添加KH2PO4和Na2HPO4的作用是____________（答出2点）。 （2）该同学____________（填“能”或“不能”）分离出土壤中分解尿素的细菌，原因是______________________________。 （3）接种操作都应在酒精灯火焰附近进行，目的是____________。该同学从田中取10g土壤，加90mL____________制成菌液，将1mL菌液分别稀释10倍和100倍，各在3个平板上接种（每个平板的接种量为0.1mL），经适当培养后，2组平板上的菌落数分别为75、77、76和22、27、25.该同学需要用____________法进行接种，据此可得出10g土壤的活菌数为____________个。 （4）土壤中还存在能利用空气中氮气作为氮源的固氮菌（如根瘤菌），某同学欲探究平板上分离得到的某单菌落是否为固氮菌，实验思路为：__________________________________________。 【答案】（1） ①. 高压蒸汽##湿热 ②. 中性或弱碱性 ③. 为细菌生长提供无机盐、维持培养基的pH、维持渗透压平衡 （2） ①. 不能 ②. 尿素不是唯一氮源 （3） ①. 防止杂菌污染 ②. 无菌水 ③. 稀释涂布平板法 ④. 7.6×105 （4）将平板上分离得到的细菌接种到无氮源的培养基上培养一段时间后，观察是否出现菌落 【解析】 【小问1详解】 培养基常规灭菌方法为高压蒸汽灭菌；培养细菌时通常将pH调至中性或微碱性；培养基中KH2PO4和Na2HPO4一方面可以为微生物生长提供P、K等无机盐，另一方面可维持培养基的pH、维持渗透压平衡。 【小问2详解】 分离分解尿素的细菌需要以尿素为唯一氮源的选择培养基，该培养基含有蛋白胨，蛋白胨可提供氮源，尿素不是唯一氮源，不能分解尿素的细菌也可以生长，因此无法筛选出目的菌。 【小问3详解】 酒精灯火焰附近为无菌区域，接种在此操作可避免空气中杂菌污染；制备土壤菌悬液需要用无菌水防止杂菌污染；统计活菌数目采用稀释涂布平板法接种；计数时选择菌落数在30~300之间的平板，本题稀释10倍组平均菌落数为76（符合要求），稀释100倍组平均25（小于30，舍去），经计算：每克土壤样品中的活菌数为76÷0.1×102=7.6×104个，因此10g土壤总活菌数=7.6×104×10=7.6×105个。 【小问4详解】 固氮菌可以利用空气中的氮气作为氮源，因此可在无氮培养基上生长，普通微生物不能，因此可将平板上分离得到的细菌接种到无氮源的培养基上培养一段时间后，观察是否出现菌落。 23. THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中THP9基因转录的方向为从左往右。回答以下问题： EcoRⅠ BamHⅠ KpnⅠ MfeⅠ HindⅢ （1）基因工程的核心步骤是____________________________。 （2）质粒载体中启动子的作用是____________________。载体中的标记基因是____________。 （3）表格中EcoRⅠ和________能产生相同的黏性末端。构建基因表达载体时，用________切割质粒，用________切割目的基因。 （4）分子水平检测中，可通过____________技术检测THP9基因是否整合到玉米基因组或是否转录出mRNA；为了检测转基因玉米新品种的培育是否成功，还需要检测________________________。 【答案】（1）基因表达载体的构建 （2） ①. 作为RNA聚合酶识别和结合部位，驱动基因转录出mRNA ②. 氨苄青霉素抗性基因 （3） ①. MfeⅠ ②. MfeⅠ、HindⅢ ③. EcoRⅠ、HindⅢ （4） ①. PCR ②. 蛋白质含量 【解析】 【小问1详解】 基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，这是基因工程操作的核心知识点。 【小问2详解】 启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，作用是驱动目的基因转录产生mRNA；从图示质粒可直接看出，质粒的标记基因为氨苄青霉素抗性基因，用于筛选含目的基因的受体细胞。 【小问3详解】 分析限制酶切割后的黏性末端：EcoRⅠ切割后产生的突出黏性末端为-AATT-，MfeⅠ切割后产生的突出黏性末端也为-AATT-，因此二者可产生相同的黏性末端。 构建基因表达载体时，需要避免破坏质粒的启动子、终止子、标记基因（氨苄青霉素抗性基因），同时要保证目的基因（THP9）按正确方向插入到质粒的启动子和终止子之间。EcoRⅠ有两个酶切位点，BamHⅠ能破坏启动子，KpnⅠ会导致反向连接，所以可以用MfeⅠ、HindⅢ切割质粒。MfeⅠ破坏THP9基因，EcoRⅠ和MfeⅠ有相同的黏性末端，所以可以用EcoRⅠ切割，便于和质粒连接，所以用EcoRⅠ、HindⅢ切割目的基因。 【小问4详解】 分子水平检测中，可通过PCR技术对目的基因组进行扩增，或者mRNA利用反转录得到cDNA。对该产物进行PCR扩增，使用只匹配 THP9 基因两端的特异性引物进行扩增， 电泳后若出现和目的基因长度一致的条带，证明细胞内存在该基因，即成功导入。本实验的目的是获得高蛋白转基因玉米，因此最终需要检测转基因玉米的蛋白质含量是否提高，判断培育是否成功。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $