精品解析：福建省宁德市2025-2026学年高二下学期7月期末考试生物试题

2025-2026学年第二学期高二年级期末考试 生物学试题 (考试时间：75分钟 满分：100分) 第Ⅰ卷 选择题 本卷共15小题，其中，第1-10小题，每题2分；第11-15小题，每题4分，共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 下列关于细胞内“骨架”的叙述正确的是（　　） A. 细胞骨架仅存在于动物细胞中，对维持细胞形态起重要作用 B. DNA分子中的骨架是由磷酸和脱氧核糖交替连接形成 C. 蛋白质分子中的骨架是由氨基酸残基的侧链组成 D. 细胞膜上的蛋白质分子是固定在磷脂双分子层上 【答案】B 【解析】 【详解】A、细胞骨架存在于所有真核细胞中，并非仅动物细胞才有，可维持细胞形态、参与细胞运动、物质运输等生命活动，A错误； B、DNA分子的基本骨架由磷酸和脱氧核糖交替连接构成，排列在DNA分子外侧，B正确； C、蛋白质分子的骨架是由氨基酸通过肽键连接形成的肽链主链构成，不是氨基酸残基的侧链（R基），C错误； D、细胞膜具有流动性，细胞膜上的大多数蛋白质分子是可以运动的，并非固定在磷脂双分子层上，D错误。 2. 下列有关生态系统的叙述正确的是（　　） A. 生物可以通过一种或多种信息类型进行交流 B. 生态系统中的物质循环、能量流动和信息传递都是沿食物链进行的 C. 建立动物园和植物园，能够更好地对濒危动植物进行就地保护 D. 农业科技化和耕地质量的提升可增大生态足迹，提高生态承载力 【答案】A 【解析】 【详解】A、生态系统的信息类型包括物理信息、化学信息、行为信息，生物进行信息交流时可以利用一种或多种信息类型，例如蜜蜂既可以通过跳圆圈舞（行为信息）传递蜜源位置，也可释放化学信息素传递信号，A正确； B、物质循环是在生物群落与无机环境之间往复循环的，并非仅沿食物链进行，信息传递可发生在生物与生物之间、生物与无机环境之间，也不沿食物链单向流动，仅能量流动是沿食物链（网）单向传递，B错误； C、就地保护是指在原地对被保护的物种或生态系统建立自然保护区等，建立动物园、植物园属于易地保护（迁地保护），不属于就地保护，C错误； D、农业科技化和耕地质量提升可提高单位面积耕地的产出，能够减小生态足迹，同时提高生态承载力，选项中“增大生态足迹”的表述错误，D错误。 3. 图示模型为真核细胞中物质变化的相关过程，X是某种细胞结构。下列叙述错误的是（　　） A. 若a是CO2，b是糖类，则X可消耗ATP B. 若a是氨基酸，b是多肽，则X含有DNA和RNA C. 若a是脱氧核苷酸，b是DNA，则X具有双层膜 D. 若a是核糖核苷酸，b是RNA，则X可能表现为周期性的消失和重建 【答案】B 【解析】 【详解】A、若a是CO2，b是糖类，说明该过程为光合作用的暗反应，X为叶绿体，暗反应阶段需要消耗光反应产生的ATP，A正确； B、若a是氨基酸，b是多肽，说明该过程为氨基酸脱水缩合合成多肽，X为核糖体，核糖体由rRNA和蛋白质组成，不含DNA，B错误； C、若a是脱氧核苷酸，b是DNA，说明该过程为DNA复制，真核细胞中DNA复制的场所是细胞核、线粒体、叶绿体，三者都具有双层膜结构，C正确； D、若a是核糖核苷酸，b是RNA，说明该过程为转录，转录的主要场所是细胞核，细胞核在细胞有丝分裂过程中会周期性消失和重建，D正确。 4. “多营养层次”是一种海水生态养殖新模式。在上层挂绳养殖海带等藻类，在中层挂笼养殖牡蛎等滤食性贝类，在底层设置人工鱼礁，为鱼虾等提供生长、产卵和栖息的场所，养殖龙虾、海参等底栖杂食动物。下列叙述正确的是（　　） A. 生态系统的结构是生产者、消费者、分解者和非生物的物质和能量 B. 鱼类捕食以有机碎屑为食的底栖动物，实现了生态系统物质和能量的循环利用 C. 鱼虾的养殖数量越多，生态系统稳定性越高，经济效益越好 D. “多营养层次”养殖模式充分利用了空间和资源，提高了生态系统能量的利用率 【答案】D 【解析】 【详解】A、生态系统的结构包括生态系统的组成成分（生产者、消费者、分解者、非生物的物质和能量）和营养结构（食物链、食物网）两部分，A错误； B、生态系统中能量流动的特点是单向流动、逐级递减，能量不能循环利用，B错误； C、养殖鱼虾的数量若超过环境容纳量，会破坏生态系统的自我调节能力，导致生态系统稳定性下降，反而降低经济效益，C错误； D、该模式利用群落的垂直结构，充分利用了不同水层的空间和资源，提高了生态系统能量的利用率，D正确。 5. 下列关于生物学实验的部分操作，叙述正确的是（　　） 选项 实验名称 操作方法 A 检测生物组织中的蛋白质 向待测豆浆中加入双缩脲试剂，并水浴加热观察颜色变化 B 小鼠细胞和人细胞融合实验 用同位素标记法标记小鼠细胞和人细胞的膜蛋白 C 观察细胞质的流动 先用低倍镜找到黑藻叶肉细胞，再用高倍镜观察叶绿体随细胞质流动的情况 D 探究土壤微生物的分解作用 对照组的土壤不做处理，实验组的土壤进行干热灭菌 A. A B. B C. C D. D 【答案】C 【解析】 【详解】A、检测生物组织中的蛋白质时，向待测样液加入双缩脲试剂后无需水浴加热，常温下振荡即可观察到紫色反应，A错误； B、小鼠细胞和人细胞融合实验采用的是荧光标记法标记膜蛋白，B错误； C、观察细胞质流动时，先使用低倍镜找到黑藻叶肉细胞，再换用高倍镜，以叶绿体为标志物观察细胞质的流动情况，C正确； D、探究土壤微生物的分解作用时，实验组土壤需进行灭菌处理，将土壤用塑料袋包好，放在60℃恒温箱中处理1h，D错误。 6. 豆豉是我国南方传统调味品，北魏《齐民要术》中已有“作豉法”的详细记载。传统豆豉制作需经“烫豆—沥干—覆盖—发酵—晾晒”等工序，其中覆盖发酵时豆粒表面会迅速长满菌丝，制成品以“豉香浓郁、颗粒油润”为上品。下列叙述正确的是（　　） A. “烫豆”的目的是彻底杀灭大豆表面所有微生物，以获得纯种发酵 B. 覆盖发酵阶段起主要作用的是毛霉，其代谢类型为厌氧异养型 C. 豆豉特有的鲜味主要来源于霉菌分泌的蛋白酶对大豆蛋白质的水解 D. 晾晒使豆豉表面的微生物散失结合水而活性降低，防止发酵过度 【答案】C 【解析】 【详解】A、“烫豆”只能杀死大豆表面的大部分微生物，无法彻底杀灭所有微生物，且传统豆豉发酵属于自然发酵，利用的是环境中的天然微生物，并非纯种发酵，A错误； B、覆盖发酵阶段起主要作用的微生物是毛霉，毛霉的代谢类型为需氧异养型，覆盖的目的主要是保温保湿，B错误； C、大豆的主要成分之一是蛋白质，霉菌分泌的蛋白酶可将大豆中的蛋白质水解为小分子肽和氨基酸，这类物质是豆豉特有鲜味的主要来源，C正确； D、晾晒过程中微生物散失的是自由水，自由水含量降低会使微生物代谢活性下降，进而防止发酵过度，结合水是细胞结构的重要组成成分，不会轻易散失，D错误。 7. 下列关于微生物实验操作叙述错误的是（　　） A. 倒平板需要等待培养基冷却凝固后将培养皿倒置 B. 接种环每次划线前要灼烧，待其冷却后从上次划线的末端开始作下一次划线 C. 平板划线法和稀释涂布平板法都可用于纯化微生物和活菌计数 D. 微量移液器使用完毕后，应调回最大量程 【答案】C 【解析】 【详解】A、倒平板后待培养基冷却凝固，将培养皿倒置可避免皿盖上的冷凝水滴落污染培养基，A正确； B、接种环每次划线前灼烧是为了杀灭残留的菌种，待冷却后再从上一次划线末端划线，可避免高温杀死目的菌，同时逐步稀释菌种以获得单菌落，B正确； C、平板划线法和稀释涂布平板法都可用于微生物的纯化，但平板划线法无法对活菌进行计数，只有稀释涂布平板法可用于活菌计数，C错误； D、微量移液器使用完毕后调回最大量程，可避免内部弹簧长期受压失去弹性，延长移液器使用寿命，D正确。 8. 杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，成为受广大消费者喜欢的绵羊品种。科研人员通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 过程①常以观察到两个极体或雌、雄原核作为受精的标志 B. 为获得数量较多的卵母细胞需对供体和受体进行同期发情处理 C. 经当地普通绵羊分娩的杜泊羊，其遗传特性与供体基本保持一致 D. 胚胎移植技术能充分发挥优良雌性的繁殖潜力，加快良种杜泊羊繁殖 【答案】B 【解析】 【详解】A、受精过程中，当观察到卵细胞膜和透明带的间隙存在两个极体，或观察到雌、雄原核时，可作为卵子受精的标志，A正确； B、为获得数量较多的卵母细胞，需对供体雌性杜泊羊进行超数排卵处理，B错误； C、杜泊羊的遗传物质来自提供卵母细胞和精子的供体杜泊羊，受体当地普通绵羊仅为胚胎发育提供子宫环境，不影响子代遗传特性，因此其遗传特性与供体基本保持一致，C正确； D、胚胎移植技术让优良雌性个体仅需提供胚胎，无需承担妊娠、分娩的过程，可充分发挥优良雌性的繁殖潜力，加快良种杜泊羊的繁殖速度，D正确。 9. 科学家将鼠的肾单位祖细胞（NPC）和输尿管祖细胞（UPC）共培养，构建出具有部分功能的类器官，过程如下图。下列相关叙述错误的是（　　） A. ①过程需在CO2培养箱中进行 B. ①过程通常需在培养基中加入血清 C. ①②过程有细胞分裂也有细胞分化 D. NPC和UPC的子代细胞随机分布 【答案】D 【解析】 【详解】A、动物细胞培养需要放在CO2培养箱中进行，故①过程需在CO2培养箱中进行，A正确； B、研究者对动物细胞培养所需的营养物质尚未研究清楚，故培养动物细胞需要在培养基中加入血清，①过程通常需在培养基中加入血清，B正确； C、动物细胞培养的原理是细胞增殖（有丝分裂），分析题图可知，①②过程有细胞分裂也有细胞分化，C正确； D、题图可知，UPC的子代细胞会自发聚集于中心并分支最终形成集合管，而NPC的子代细胞围绕着集合管的外围分布最终形成了肾单位，可见NPC和UPC的子代细胞不是随机分布而是有规律分布，D错误。 故选D。 10. 科研人员利用植物细胞工程技术生产抗癌药物紫杉醇，流程如下：①获取红豆杉细胞；②将细胞置于人工控制的无菌环境中(如大型发酵罐)，提供适宜的营养和条件，使其大量增殖；③获得次生代谢物紫杉醇。为验证其疗效，研究人员将紫杉醇用于卵巢癌模型鼠的治疗，实验结果如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 过程①→②的核心技术是植物组织培养，包括脱分化和再分化过程 B. 通过优化大型发酵罐内培养基成分和培养条件，可以显著提高紫杉醇的产量 C. 实验结果表明紫杉醇能有效抑制卵巢肿瘤的生长 D. 紫杉醇不是红豆杉基本生命活动所必需的代谢产物 【答案】A 【解析】 【详解】A、过程①→②是通过植物细胞培养获得大量红豆杉细胞以提取紫杉醇，仅需将细胞脱分化为愈伤组织后进行增殖培养，不需要再分化过程，A错误； B、培养基成分、培养条件（温度、pH、溶氧量等）会影响细胞增殖和代谢，优化这些条件可促进细胞增殖和紫杉醇合成，显著提高紫杉醇产量，B正确； C、由图可知，与对照组相比，实验组卵巢肿瘤体积显著更小，说明紫杉醇能有效抑制卵巢肿瘤的生长，C正确； D、紫杉醇是红豆杉的次生代谢产物，次生代谢产物不是植物基本生命活动所必需的代谢产物，D正确。 11. 泛素是一种小分子多肽，在蛋白质降解过程中发挥重要作用。泛素激酶(E1～E3)可激活泛素，并催化泛素第1个氨基酸的羧基与待降解靶蛋白中赖氨酸R基中的氨基脱水缩合，将泛素依次连接到靶蛋白上，蛋白酶体能识别并降解泛素标记的靶蛋白，相关过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 待降解靶蛋白上连接n个泛素分子需脱去n-1个水分子 B. 泛素降解途径可为细胞中新蛋白质的合成提供原料 C. 泛素激酶与蛋白酶功能不同的原因是两者的空间结构不同 D. 泛素充足情况下靶蛋白积累过多，可能是因酶活性不足导致标记或降解过程受阻 【答案】A 【解析】 【详解】A、第一个泛素与靶蛋白结合时会脱去1分子水，后续每连接1个泛素会额外脱去1分子水，因此连接n个泛素分子共需脱去n个水分子，A错误； B、靶蛋白被降解后的产物是氨基酸，氨基酸是蛋白质合成的原料，因此泛素降解途径可为细胞中新蛋白质的合成提供原料，B正确； C、泛素激酶和蛋白酶的本质都是蛋白质，蛋白质的结构决定功能，空间结构不同是二者功能不同的原因之一，C正确； D、泛素充足的情况下，若泛素激酶活性不足会导致靶蛋白的泛素标记过程受阻，若蛋白酶体相关酶活性不足会导致靶蛋白降解过程受阻，都会造成靶蛋白积累过多，D正确。 12. 某质粒中含有的LacZ基因能编码产生β-半乳糖苷酶，该酶可分解X-gal产生蓝色物质，使菌落呈蓝色，否则呈白色。科研人员以图中质粒为载体，采用转基因技术实现动物基因A在大肠杆菌中的高效表达。下列叙述错误的是（　　） A. 用Ca2+处理大肠杆菌以提高转化效率，可增加筛选平板上菌落数 B. 筛选平板中出现白色菌落，说明基因A成功插入LacZ基因使其失活 C. 质粒中含AmpR和LacZ基因，筛选平板中长出的蓝色菌落能表达基因A D. 若筛选平板中仅含氨苄青霉素而不含X-gal，白色菌落可能是含基因A的重组菌株 【答案】C 【解析】 【详解】A、用Ca2+处理大肠杆菌可使其处于感受态，提升吸收外源DNA的能力，提高转化效率，更多成功导入质粒的大肠杆菌可在筛选平板存活，增加菌落数，A正确； B、若基因A成功插入LacZ基因，会导致LacZ基因结构被破坏无法编码β-半乳糖苷酶，不能分解X-gal产生蓝色物质，菌落呈白色，B正确； C、蓝色菌落可产生β-半乳糖苷酶，说明LacZ基因完整、未被插入目的基因，即该菌落中的质粒为空质粒，不含基因A，无法表达基因A，C错误； D、若筛选平板不含X-gal，无论LacZ基因是否被破坏，菌落都不会显蓝色，只要含氨苄青霉素抗性基因的菌株都可存活，因此白色（未显色）菌落可能是导入了重组质粒、含基因A的重组菌株，D正确。 13. 某质粒含有限制酶A、B和C的切割位点，且B酶切点位于A酶切点的正中间如图1.用上述3种酶切割该质粒，酶切产物的凝胶电泳结果如图2，其中泳道①条带是未酶切的质粒，泳道②③④条带为3种单酶切产物，泳道⑤⑥⑦条带为双酶切产物。下列叙述正确的是（　　） A. DNA分子在该凝胶的迁移方向是从电源正极到负极 B. 泳道①和②条带位置有差异，原因是酶切后质粒的碱基数发生了改变 C. 泳道③和④条带分别是A和B的单酶切产物，且A酶切产物长度大于B酶切产物 D. 泳道⑤为A和C的双酶切产物，其最长条带的长度等于另两条条带的长度之和 【答案】D 【解析】 【详解】A、DNA分子带负电，凝胶电泳中DNA会向电源正极移动，图中电源负极在上、正极在下，因此迁移方向是从负极到正极，A错误； B、泳道①是未酶切的环状质粒，泳道②是单酶切后的线状质粒，二者总碱基数相同，条带位置差异是空间构象不同导致迁移速率不同，不是碱基数改变，B错误； C、该质粒上限制酶A有2个切点，且B酶切点在两个A切点的正中间：因此A单酶切会得到2个长度均为质粒总长度1​/2的片段，由于长度相同，电泳只显示1个条带，分子量更小，迁移更远（更靠近正极，位置更靠下），因此泳道③是A的单酶切产物，产物长度为质粒总长度的1/​2；B只有1个切点，单酶切产物长度等于质粒总长度，因此A酶切产物长度小于B酶切产物，C错误； D、A和C双酶切时，A有2个切点将质粒分为两个等长的1/2质粒片段，C仅在其中一个1/2片段内有1个切点，将该片段切为两个小片段，最终得到三个片段：最长的片段为未被C切割的1/2​质粒，长度等于另外两个小片段的长度之和，D正确。 14. 黄河三角洲是河海陆交互作用形成的湿地生态系统，包括河口、浅海、滩涂等天然湿地。据调查输入黄河三角洲河口水域生态系统的总能量远大于总呼吸量，图1为某营养级能量流动的部分示意图，图2为该生态系统的能量流动简图(图中数字为能量数值，单位为t/km2·a)。下列叙述错误的是（　　） A. 输入该生态系统的总能量的数值为5040.6 B. 第二营养级的同化量来源于浮游植物和有机碎屑的摄入 C. 第三、四营养级之间的能量传递效率大约为9.6% D. 该河口水域生态系统还未达到相对稳定状态 【答案】A 【解析】 【详解】A、输入该河口水域生态系统的总能量=生产者（浮游植物）固定的太阳能 + 黄河输入的有机碎屑中的能量（4129 t/km2·a）。浮游植物固定的总能量，不仅包括流入第二营养级的911.6，还包括自身呼吸消耗、流向碎屑的能量，因此总能量远大于4129+911.6=5040.6t/km2·a，A错误； B、由图2可知，第二营养级总同化量1323.1t/km2·a=911.6（来自浮游植物）+411.5（来自有机碎屑），因此其同化量来源于浮游植物和有机碎屑，B正确； C、能量传递效率=（下一营养级同化量÷上一营养级同化量）×100%，第三营养级同化量为195.07t/km2·a，第四营养级同化量为18.76t/km2·a，计算得传递效率=18.76÷195.07≈9.6%，C正确； D、题干明确输入该生态系统的总能量远大于总呼吸量，说明能量在生态系统中不断积累，生物量持续增加，生态系统还未达到相对稳定状态，D正确。 15. 下图为发酵工程中利用水稻、玉米等农业秸秆生产柠檬酸的简要流程图。下列叙述错误的是（　　） A. 优良性状的黑曲霉可从自然界中筛选，也可通过诱变育种或基因工程育种获得 B. 图中发酵罐的3、4处分别是发酵罐冷却水的进入口和空气入口 C. 若突然停止通气，柠檬酸的合成速率会下降，同时菌体生长受到抑制 D. 发酵结束后，对罐内发酵液可采取适当的过滤、沉淀措施获得柠檬酸 【答案】D 【解析】 【详解】A、优良的黑曲霉菌株可从自然界直接筛选，也可通过诱变育种获得突变优良株，或通过基因工程育种定向改造获得目标菌株，A正确； B、发酵罐夹层通冷却水降温，冷却水采用下进上出的方式保证降温效果，因此位置靠下的3是冷却水入口，无菌空气从发酵罐底部通入，可使气泡上升过程中与培养液充分接触，提高溶氧量，因此底部的4是空气入口，B正确； C、黑曲霉是好氧微生物，柠檬酸是其有氧代谢的产物，突然停止通气会导致氧气不足，有氧呼吸受抑制，ATP生成减少，菌体生长因能量供应不足受到抑制，同时柠檬酸合成速率也会下降，C正确； D、柠檬酸是黑曲霉分泌到发酵液中的胞外代谢产物，过滤、沉淀是分离收集微生物菌体的方法，要获得柠檬酸需要用萃取、离子交换等方法进行分离纯化，无法通过过滤、沉淀直接得到柠檬酸，D错误。 第II卷 非选择题 本卷共5小题，共60分 16. 北京奥林匹克森林公园是城市生态修复的典范工程。该公园采用近自然林营建技术，构建乔木—灌木—草本复层群落。该工程兼顾生态保护、市民休憩与碳汇功能，实现城市与自然和谐共生。回答下列问题： （1）公园中乔木的储碳水平是整个公园绿地中储碳的主要部分，乔木在该生态系统中的成分属于__________，其主要功能是__________。 （2）公园营建优先选择油松、国槐、银杏等本土植物，且营造乔木—灌木—草本复层森林结构，提高生物多样性程度，该过程提高了生态系统的__________稳定性，主要遵循了生态工程的__________原理。 （3）公园在为其他生物提供良好的栖息环境、净化水质中发挥着重要作用，同时兼具旅游观赏、陶冶情操的功能，这体现了生物多样性的__________价值。 （4）公园修建道路可能造成某些野生物种的栖息地碎片化，通过建立生态廊道可实现南北两园的连续性，有利于野生物种的延续，其原因是__________。 【答案】（1） ①. 生产者 ②. 通过光合作用将光能转化为化学能，固定CO2合成有机物，为生态系统其他生物提供物质和能量（是生态系统的基石） （2） ①. 抵抗力 ②. 自生、协调 （3） 直接价值和间接 （4） 生态廊道可连通碎片化的栖息地，消除地理隔离，促进不同种群间的基因交流，扩大种群生存空间，降低近亲繁殖风险，维持种群遗传多样性，利于种群延续。 【解析】 【小问1详解】 乔木是可进行光合作用的自养生物，属于生态系统中的生产者；生产者是生态系统的基石，既可以固定太阳能和二氧化碳、实现碳储存，也能为整个生态系统的消费者、分解者提供物质和能量来源。 【小问2详解】 生态系统的抵抗力稳定性与营养结构复杂程度正相关，生物多样性越高、营养结构越复杂，抵抗外界干扰的能力越强，因此抵抗力稳定性提升；优先选择本土物种保证生物与本地环境相适应，符合协调原理；营造复层群落、提高生物多样性可增强生态系统自我调节能力，符合自生原理。 【小问3详解】 提供栖息环境、净化水质属于生物多样性调节生态系统功能的间接价值；旅游观赏、陶冶情操属于对人类有非实用意义的直接价值，题干描述同时体现了两类价值。 【小问4详解】 栖息地碎片化会形成地理隔离，阻碍种群间的基因交流，易引发近亲繁殖、生存资源不足等问题，导致种群衰退；生态廊道可连通碎片化的栖息地，消除地理隔离，促进不同种群间的基因交流，扩大种群生存空间，降低近亲繁殖风险，维持种群遗传多样性，利于种群延续。 17. 研究发现当细胞受到毒性物质Tg刺激时，会引发内质网应激反应。科研人员为揭示内质网应激时线粒体区域翻译受保护的机制，进行了相关实验。下图表示内质网应激期间线粒体区域翻译受保护的部分示意图，回答下列问题： （1）细胞中有各种形态结构不同的细胞器，分离细胞器的方法是__________。内质网和线粒体都是具膜的细胞器，两者膜的主要成分是__________。 （2）图中位于内质网膜上的蛋白质PERK感受到应激信号后通过二聚化和磷酸化被激活。活化的PERK可与翻译起始因子eIF2α结合，使eIF2α磷酸化，进而发现内质网区域的翻译活性下降了73%，而线粒体区域仅下降了27%。蛋白A位于线粒体膜上，能与激活的PERK的特定位点(第680-880位氨基酸)结合，而该位点也是eIF2α与PERK结合的位点。请完善下列保护机制：①____________；②____________； （3）科研人员进行如下实验，对实验结果的预期正确的有__________。 组别 实验对象 处理方法 甲 正常细胞 不做处理 乙 正常细胞 Tg处理 丙 敲除基因A的细胞 Tg处理 A. 乙组细胞中线粒体区域翻译活性高于甲组 B. 与甲组相比，乙组能与蛋白A结合的PERK更多 C. 丙组细胞中eIF2α磷酸化水平高于乙组 D. 若PERK第680～880位氨基酸缺失后，蛋白A不能与其结合 【答案】（1） ①. 差速离心法 ②. 磷脂和蛋白质 （2） ①. 竞争结合激活的PERK的相同结合位点 ②. 磷酸化的eIF2α （3）BCD 【解析】 【小问1详解】 由于不同细胞器的大小、密度（或沉降系数）不同，所以可以利用差速离心法将叶绿体、内质网、线粒体等细胞器分离，细胞膜的成分主要是磷脂和蛋白质，推测内质网膜和线粒体膜的主要成分也是磷脂和蛋白质。 【小问2详解】 据题干信息，蛋白A与eIF2α的结合位点都是激活态PERK的第680-880位氨基酸，因此二者会竞争该结合位点；蛋白A竞争性结合PERK后，eIF2α结合PERK的机会减少，被磷酸化的eIF2α含量降低，而磷酸化eIF2α会抑制翻译，其含量降低后，线粒体翻译的抑制程度降低，翻译得到保护，因此①为竞争结合激活的PERK的相同结合位点，②为磷酸化的eIF2α。 【小问3详解】 A、Tg刺激后线粒体区域翻译活性下降，因此乙组（Tg处理）线粒体翻译活性低于甲组（不处理），A错误； B、乙组经Tg处理，内质网应激激活了更多PERK，因此能与蛋白A结合的PERK数量多于未处理的甲组，B正确； C、丙组敲除基因A，没有蛋白A竞争PERK的结合位点，更多eIF2α可以结合PERK并被磷酸化，因此丙组eIF2α磷酸化水平高于有蛋白A竞争的乙组，C正确； D、蛋白A结合的位点就是PERK的第680~880位氨基酸，该片段缺失后，蛋白A无法完成结合，D正确。  18. 嗜盐单胞菌TD1.0是一种生活在较高盐浓度环境的极端微生物，可利用廉价的乙酸钠高效合成新型可降解生物塑料PHB．回答下列问题： （1）筛选耐高浓度乙酸钠菌株时，需以__________为唯一碳源，从功能上看，该培养基属于__________培养基。 （2）在培养嗜盐单胞菌过程中可以进行不严格的灭菌发酵，原因是__________。 （3）在菌种发酵接种前，需对菌体进行生长测试，其生长曲线如图1，若扩大再生产应选取__________(填字母)期的菌种，理由是__________。 （4）嗜盐单胞菌TD1.0以葡萄糖和乙酸钠为碳源合成PHB的生产途径如图2所示。 注：糖酵解和TCA为有氧呼吸的某个阶段。 嗜盐单胞菌TD1.0在葡萄糖和乙酸钠混合培养时会出现阻遏效应，即先利用葡萄糖，直至耗尽才启动乙酸钠的利用。据图2推测代谢途径__________(填“Ⅰ”或“Ⅱ”或“Ⅲ”或“Ⅳ”)受抑制。为使TD1.0菌株在葡萄糖和乙酸钠混合培养时，能同时利用两者合成PHB，获得较高产量。请提出一个可行的措施__________。 【答案】（1） ①. 乙酸钠 ②. 选择 （2）高盐环境下多数微生物无法正常生长 （3） ①. B ②. 该时期菌种生长旺盛，代谢活力强 （4） ①. Ⅰ   ②. 人工诱变处理TD1.0；基因工程技术定向改造TD1.0；蛋白质工程技术改造TD1.0的酶系统，从中筛选出能同时利用葡萄糖和乙酸钠的菌株（合理答案即给分）  【解析】 【小问1详解】 筛选能利用乙酸钠的菌株，需以乙酸钠作为唯一碳源，不能利用乙酸钠的微生物无法生长；只允许目标微生物存活、抑制其他微生物的培养基属于选择培养基。 【小问2详解】 题干说明嗜盐单胞菌TD1.0生活在较高盐浓度环境，发酵体系高浓度乙酸钠形成高渗透压环境，普通杂菌难以存活，因此无需严格灭菌。 【小问3详解】 图1为典型的微生物生长曲线：A延滞期（适应期），B对数期（指数期）——细胞分裂最快、代谢旺盛、活力强，C稳定期（产量最高，但生长速率下降），D衰亡期。扩大生产（即发酵接种）时，应选对数期（B期）菌种，因为此时菌体代谢旺盛、分裂快、活力强、接种后易快速扩增，缩短发酵周期。 【小问4详解】 葡萄糖存在时，优先走糖酵解生成乙酰-CoA，途径Ⅰ（乙酸钠转化为乙酰-CoA）被抑制，只有葡萄糖耗尽，途径Ⅰ才启动，符合“先利用葡萄糖，再利用乙酸钠”的阻遏效应。可行措施（任选其一）：人工诱变处理TD1.0；基因工程技术定向改造TD1.0；蛋白质工程技术改造TD1.0的酶系统，从中筛选出能同时利用葡萄糖和乙酸钠的菌株（合理答案即给分）。 19. 临床上使用细胞毒素类药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞，但同时也会损伤健康细胞。科研人员为了解决这一问题进行研究，图1为特异性识别肿瘤抗原T的单克隆抗体制备某环节示意图，图2为抗体-药物偶联物(ADC)的作用机制示意图。回答下列问题： （1）图1中Ⅰ细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则Ⅱ细胞表示__________细胞，与人工诱导原生质体融合相比，动物细胞融合特有的方法是__________，该过程依赖于细胞膜的__________。 （2）科研人员利用96孔板培养杂交瘤细胞，并对每个小孔的上清液进行了抗体检测，部分结果如下表： 孔号 1 2 3 4 抗体检测 阴性 阳性 阴性 阳性 分析表中1和3号孔的结果，出现的原因可能是__________。 （3）图2中③、④过程，通过__________(填细胞器)裂解作用，最终释放药物导致细胞凋亡。与传统化疗方法相比，ADC治疗肿瘤的优势是__________。(答出1点即可) 【答案】（1） ①. 已免疫的B淋巴细胞（或浆细胞） ②. 灭活病毒诱导法 ③. 流动性 （2）孔内没有杂交瘤细胞(或孔内的杂交瘤细胞不能产生特异性识别抗原T的抗体)  （3） ①. 溶酶体 ②. 可特异性杀伤肿瘤细胞，减少对健康细胞的损伤，副作用更低 【解析】 【小问1详解】 单克隆抗体制备过程是将骨髓瘤细胞和已免疫的B淋巴细胞（浆细胞）融合，获得既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。动物细胞融合对比植物原生质体融合，特有的诱导方法是灭活病毒诱导法；细胞融合过程依赖细胞膜的流动性完成。 【小问2详解】 抗体检测阴性说明没有检测到特异性识别抗原T的抗体，原因是：该孔中未存活杂交瘤细胞，或是孔内的杂交瘤细胞不能合成、分泌所需的特异性抗体，因此结果为阴性。 【小问3详解】 ADC被肿瘤细胞胞吞进入细胞后，由溶酶体（内含多种水解酶）发挥裂解作用，释放药物。和传统化疗相比，ADC依靠抗体特异性识别肿瘤细胞的抗原，能精准作用于肿瘤细胞，减少了对健康细胞的损伤，特异性更强、副作用更低。 20. LL-37蛋白是一种具有广泛抗菌活性的抗菌肽，在细胞免疫和炎症反应中起重要作用。科研人员为了获得大量纯净的LL-37蛋白进行实验，基本流程如图1，序号①～⑤表示各个环节。 注：位于KanR上的限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ、MunⅠ、XhoⅠ、SalⅠ识别位点之间的距离依次为40 bp、30 bp、90 bp、50 bp。 回答下列问题： （1）制备LL-37蛋白的核心工作是__________。图1过程①需要在__________酶的作用下进行。 （2）为使LL-37基因与P质粒正确连接，在设计PCR引物时可在引物的__________(填“3’”或“5’”)端添加限制酶的识别序列，与a链和b链相结合的引物上添加的分别是限制酶__________的识别序列。用1个LL-37基因为模板获得n个LL-37基因，则PCR过程中消耗的引物总量是__________个。 （3）图1中④过程，受体菌经Ca2+处理后的生理状态是__________。本实验应选用__________(填“具有”或“不具有”)氨苄青霉素抗性的大肠杆菌作为受体菌。 （4）为了检测LL-37基因是否插入到P质粒中，利用目的基因两端添加的限制酶切割待测质粒样品，然后对产物进行电泳，结果如图2.样品__________最可能是插入了LL-37基因的重组质粒。 【答案】（1） ①. 基因表达载体的构建 ②. 逆转录（反转录） （2） ①. 5' ②. Xho Ⅰ、BamH Ⅰ（顺序不可换） ③. 2n-2 （3） ①. 能吸收周围环境中DNA分子（感受态） ②. 不具有 （4）2 【解析】 【小问1详解】 制备LL-37蛋白的核心步骤是构建基因表达载体（即重组质粒），这是基因工程中实现目的基因稳定表达的关键环节。图1中过程①为以RNA为模板合成cDNA的逆转录过程，需依赖逆转录酶催化完成。 【小问2详解】 PCR引物设计时，限制酶识别序列应添加在引物的5'端，以确保3'端与模板链互补配对并正确延伸。根据转录方向（向右），目的基因左侧需连接启动子近端，右侧连接远端。为了避免破坏关键元件且实现定向连接，通常选择BamH I和Xho I这一对组合，质粒上BamH I位于Xho I的上游（靠近启动子），因此与a链（3'端/下游）结合的引物应添加Xho I，与b链（3'端/上游）结合的引物应添加BamH I，以确保基因正向插入且顺序不可互换。若以1个LL-37基因为模板扩增获得n个产物，则PCR过程中消耗的引物总量为2n−2个（因每合成一个新DNA分子需2个引物，初始模板无需引物）。 【小问3详解】 图1中④过程为将重组质粒导入大肠杆菌，受体菌经Ca²⁺处理后进入感受态——即细胞膜通透性增加、能高效吸收外源DNA的生理状态。P质粒上含有氨苄青霉素抗性基因（AmpR）作为标记基因。为了筛选出导入了重组质粒的受体菌，受体菌本身必须不具有氨苄青霉素抗性，只有导入了质粒的细菌才能在含氨苄青霉素的培养基上生存。 【小问4详解】 空载质粒上BamHⅠ与XhoⅠ位点间片段长度为120bp，用XhoⅠ+ BamHⅠ双酶切重组质粒，切出的载体大片段与空载质粒酶切获得的载体大片段长度相近（5900bp）、目的基因小片段为200bp。由电泳图可知，样品2同时出现5900bp的载体条带与200bp左右的目的基因条带，符合重组质粒酶切产物特征，因此样品2最可能插入LL-37基因。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年第二学期高二年级期末考试 生物学试题 (考试时间：75分钟 满分：100分) 第Ⅰ卷 选择题 本卷共15小题，其中，第1-10小题，每题2分；第11-15小题，每题4分，共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 下列关于细胞内“骨架”的叙述正确的是（　　） A. 细胞骨架仅存在于动物细胞中，对维持细胞形态起重要作用 B. DNA分子中的骨架是由磷酸和脱氧核糖交替连接形成 C. 蛋白质分子中的骨架是由氨基酸残基的侧链组成 D. 细胞膜上的蛋白质分子是固定在磷脂双分子层上 2. 下列有关生态系统的叙述正确的是（　　） A. 生物可以通过一种或多种信息类型进行交流 B. 生态系统中的物质循环、能量流动和信息传递都是沿食物链进行的 C. 建立动物园和植物园，能够更好地对濒危动植物进行就地保护 D. 农业科技化和耕地质量的提升可增大生态足迹，提高生态承载力 3. 图示模型为真核细胞中物质变化的相关过程，X是某种细胞结构。下列叙述错误的是（　　） A. 若a是CO2，b是糖类，则X可消耗ATP B. 若a是氨基酸，b是多肽，则X含有DNA和RNA C. 若a是脱氧核苷酸，b是DNA，则X具有双层膜 D. 若a是核糖核苷酸，b是RNA，则X可能表现为周期性的消失和重建 4. “多营养层次”是一种海水生态养殖新模式。在上层挂绳养殖海带等藻类，在中层挂笼养殖牡蛎等滤食性贝类，在底层设置人工鱼礁，为鱼虾等提供生长、产卵和栖息的场所，养殖龙虾、海参等底栖杂食动物。下列叙述正确的是（　　） A. 生态系统的结构是生产者、消费者、分解者和非生物的物质和能量 B. 鱼类捕食以有机碎屑为食的底栖动物，实现了生态系统物质和能量的循环利用 C. 鱼虾的养殖数量越多，生态系统稳定性越高，经济效益越好 D. “多营养层次”养殖模式充分利用了空间和资源，提高了生态系统能量的利用率 5. 下列关于生物学实验的部分操作，叙述正确的是（　　） 选项 实验名称 操作方法 A 检测生物组织中的蛋白质 向待测豆浆中加入双缩脲试剂，并水浴加热观察颜色变化 B 小鼠细胞和人细胞融合实验 用同位素标记法标记小鼠细胞和人细胞的膜蛋白 C 观察细胞质的流动 先用低倍镜找到黑藻叶肉细胞，再用高倍镜观察叶绿体随细胞质流动的情况 D 探究土壤微生物的分解作用 对照组的土壤不做处理，实验组的土壤进行干热灭菌 A. A B. B C. C D. D 6. 豆豉是我国南方传统调味品，北魏《齐民要术》中已有“作豉法”的详细记载。传统豆豉制作需经“烫豆—沥干—覆盖—发酵—晾晒”等工序，其中覆盖发酵时豆粒表面会迅速长满菌丝，制成品以“豉香浓郁、颗粒油润”为上品。下列叙述正确的是（　　） A. “烫豆”的目的是彻底杀灭大豆表面所有微生物，以获得纯种发酵 B. 覆盖发酵阶段起主要作用的是毛霉，其代谢类型为厌氧异养型 C. 豆豉特有的鲜味主要来源于霉菌分泌的蛋白酶对大豆蛋白质的水解 D. 晾晒使豆豉表面的微生物散失结合水而活性降低，防止发酵过度 7. 下列关于微生物实验操作叙述错误的是（　　） A. 倒平板需要等待培养基冷却凝固后将培养皿倒置 B. 接种环每次划线前要灼烧，待其冷却后从上次划线的末端开始作下一次划线 C. 平板划线法和稀释涂布平板法都可用于纯化微生物和活菌计数 D. 微量移液器使用完毕后，应调回最大量程 8. 杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，成为受广大消费者喜欢的绵羊品种。科研人员通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 过程①常以观察到两个极体或雌、雄原核作为受精的标志 B. 为获得数量较多的卵母细胞需对供体和受体进行同期发情处理 C. 经当地普通绵羊分娩的杜泊羊，其遗传特性与供体基本保持一致 D. 胚胎移植技术能充分发挥优良雌性的繁殖潜力，加快良种杜泊羊繁殖 9. 科学家将鼠的肾单位祖细胞（NPC）和输尿管祖细胞（UPC）共培养，构建出具有部分功能的类器官，过程如下图。下列相关叙述错误的是（　　） A. ①过程需在CO2培养箱中进行 B. ①过程通常需在培养基中加入血清 C. ①②过程有细胞分裂也有细胞分化 D. NPC和UPC的子代细胞随机分布 10. 科研人员利用植物细胞工程技术生产抗癌药物紫杉醇，流程如下：①获取红豆杉细胞；②将细胞置于人工控制的无菌环境中(如大型发酵罐)，提供适宜的营养和条件，使其大量增殖；③获得次生代谢物紫杉醇。为验证其疗效，研究人员将紫杉醇用于卵巢癌模型鼠的治疗，实验结果如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 过程①→②的核心技术是植物组织培养，包括脱分化和再分化过程 B. 通过优化大型发酵罐内培养基成分和培养条件，可以显著提高紫杉醇的产量 C. 实验结果表明紫杉醇能有效抑制卵巢肿瘤的生长 D. 紫杉醇不是红豆杉基本生命活动所必需的代谢产物 11. 泛素是一种小分子多肽，在蛋白质降解过程中发挥重要作用。泛素激酶(E1～E3)可激活泛素，并催化泛素第1个氨基酸的羧基与待降解靶蛋白中赖氨酸R基中的氨基脱水缩合，将泛素依次连接到靶蛋白上，蛋白酶体能识别并降解泛素标记的靶蛋白，相关过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 待降解靶蛋白上连接n个泛素分子需脱去n-1个水分子 B. 泛素降解途径可为细胞中新蛋白质的合成提供原料 C. 泛素激酶与蛋白酶功能不同的原因是两者的空间结构不同 D. 泛素充足情况下靶蛋白积累过多，可能是因酶活性不足导致标记或降解过程受阻 12. 某质粒中含有的LacZ基因能编码产生β-半乳糖苷酶，该酶可分解X-gal产生蓝色物质，使菌落呈蓝色，否则呈白色。科研人员以图中质粒为载体，采用转基因技术实现动物基因A在大肠杆菌中的高效表达。下列叙述错误的是（　　） A. 用Ca2+处理大肠杆菌以提高转化效率，可增加筛选平板上菌落数 B. 筛选平板中出现白色菌落，说明基因A成功插入LacZ基因使其失活 C. 质粒中含AmpR和LacZ基因，筛选平板中长出的蓝色菌落能表达基因A D. 若筛选平板中仅含氨苄青霉素而不含X-gal，白色菌落可能是含基因A的重组菌株 13. 某质粒含有限制酶A、B和C的切割位点，且B酶切点位于A酶切点的正中间如图1.用上述3种酶切割该质粒，酶切产物的凝胶电泳结果如图2，其中泳道①条带是未酶切的质粒，泳道②③④条带为3种单酶切产物，泳道⑤⑥⑦条带为双酶切产物。下列叙述正确的是（　　） A. DNA分子在该凝胶的迁移方向是从电源正极到负极 B. 泳道①和②条带位置有差异，原因是酶切后质粒的碱基数发生了改变 C. 泳道③和④条带分别是A和B的单酶切产物，且A酶切产物长度大于B酶切产物 D. 泳道⑤为A和C的双酶切产物，其最长条带的长度等于另两条条带的长度之和 14. 黄河三角洲是河海陆交互作用形成的湿地生态系统，包括河口、浅海、滩涂等天然湿地。据调查输入黄河三角洲河口水域生态系统的总能量远大于总呼吸量，图1为某营养级能量流动的部分示意图，图2为该生态系统的能量流动简图(图中数字为能量数值，单位为t/km2·a)。下列叙述错误的是（　　） A. 输入该生态系统的总能量的数值为5040.6 B. 第二营养级的同化量来源于浮游植物和有机碎屑的摄入 C. 第三、四营养级之间的能量传递效率大约为9.6% D. 该河口水域生态系统还未达到相对稳定状态 15. 下图为发酵工程中利用水稻、玉米等农业秸秆生产柠檬酸的简要流程图。下列叙述错误的是（　　） A. 优良性状的黑曲霉可从自然界中筛选，也可通过诱变育种或基因工程育种获得 B. 图中发酵罐的3、4处分别是发酵罐冷却水的进入口和空气入口 C. 若突然停止通气，柠檬酸的合成速率会下降，同时菌体生长受到抑制 D. 发酵结束后，对罐内发酵液可采取适当的过滤、沉淀措施获得柠檬酸 第II卷 非选择题 本卷共5小题，共60分 16. 北京奥林匹克森林公园是城市生态修复的典范工程。该公园采用近自然林营建技术，构建乔木—灌木—草本复层群落。该工程兼顾生态保护、市民休憩与碳汇功能，实现城市与自然和谐共生。回答下列问题： （1）公园中乔木的储碳水平是整个公园绿地中储碳的主要部分，乔木在该生态系统中的成分属于__________，其主要功能是__________。 （2）公园营建优先选择油松、国槐、银杏等本土植物，且营造乔木—灌木—草本复层森林结构，提高生物多样性程度，该过程提高了生态系统的__________稳定性，主要遵循了生态工程的__________原理。 （3）公园在为其他生物提供良好的栖息环境、净化水质中发挥着重要作用，同时兼具旅游观赏、陶冶情操的功能，这体现了生物多样性的__________价值。 （4）公园修建道路可能造成某些野生物种的栖息地碎片化，通过建立生态廊道可实现南北两园的连续性，有利于野生物种的延续，其原因是__________。 17. 研究发现当细胞受到毒性物质Tg刺激时，会引发内质网应激反应。科研人员为揭示内质网应激时线粒体区域翻译受保护的机制，进行了相关实验。下图表示内质网应激期间线粒体区域翻译受保护的部分示意图，回答下列问题： （1）细胞中有各种形态结构不同的细胞器，分离细胞器的方法是__________。内质网和线粒体都是具膜的细胞器，两者膜的主要成分是__________。 （2）图中位于内质网膜上的蛋白质PERK感受到应激信号后通过二聚化和磷酸化被激活。活化的PERK可与翻译起始因子eIF2α结合，使eIF2α磷酸化，进而发现内质网区域的翻译活性下降了73%，而线粒体区域仅下降了27%。蛋白A位于线粒体膜上，能与激活的PERK的特定位点(第680-880位氨基酸)结合，而该位点也是eIF2α与PERK结合的位点。请完善下列保护机制：①____________；②____________； （3）科研人员进行如下实验，对实验结果的预期正确的有__________。 组别 实验对象 处理方法 甲 正常细胞 不做处理 乙 正常细胞 Tg处理 丙 敲除基因A的细胞 Tg处理 A. 乙组细胞中线粒体区域翻译活性高于甲组 B. 与甲组相比，乙组能与蛋白A结合的PERK更多 C. 丙组细胞中eIF2α磷酸化水平高于乙组 D. 若PERK第680～880位氨基酸缺失后，蛋白A不能与其结合 18. 嗜盐单胞菌TD1.0是一种生活在较高盐浓度环境的极端微生物，可利用廉价的乙酸钠高效合成新型可降解生物塑料PHB．回答下列问题： （1）筛选耐高浓度乙酸钠菌株时，需以__________为唯一碳源，从功能上看，该培养基属于__________培养基。 （2）在培养嗜盐单胞菌过程中可以进行不严格的灭菌发酵，原因是__________。 （3）在菌种发酵接种前，需对菌体进行生长测试，其生长曲线如图1，若扩大再生产应选取__________(填字母)期的菌种，理由是__________。 （4）嗜盐单胞菌TD1.0以葡萄糖和乙酸钠为碳源合成PHB的生产途径如图2所示。 注：糖酵解和TCA为有氧呼吸的某个阶段。 嗜盐单胞菌TD1.0在葡萄糖和乙酸钠混合培养时会出现阻遏效应，即先利用葡萄糖，直至耗尽才启动乙酸钠的利用。据图2推测代谢途径__________(填“Ⅰ”或“Ⅱ”或“Ⅲ”或“Ⅳ”)受抑制。为使TD1.0菌株在葡萄糖和乙酸钠混合培养时，能同时利用两者合成PHB，获得较高产量。请提出一个可行的措施__________。 19. 临床上使用细胞毒素类药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞，但同时也会损伤健康细胞。科研人员为了解决这一问题进行研究，图1为特异性识别肿瘤抗原T的单克隆抗体制备某环节示意图，图2为抗体-药物偶联物(ADC)的作用机制示意图。回答下列问题： （1）图1中Ⅰ细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则Ⅱ细胞表示__________细胞，与人工诱导原生质体融合相比，动物细胞融合特有的方法是__________，该过程依赖于细胞膜的__________。 （2）科研人员利用96孔板培养杂交瘤细胞，并对每个小孔的上清液进行了抗体检测，部分结果如下表： 孔号 1 2 3 4 抗体检测 阴性 阳性 阴性 阳性 分析表中1和3号孔的结果，出现的原因可能是__________。 （3）图2中③、④过程，通过__________(填细胞器)裂解作用，最终释放药物导致细胞凋亡。与传统化疗方法相比，ADC治疗肿瘤的优势是__________。(答出1点即可) 20. LL-37蛋白是一种具有广泛抗菌活性的抗菌肽，在细胞免疫和炎症反应中起重要作用。科研人员为了获得大量纯净的LL-37蛋白进行实验，基本流程如图1，序号①～⑤表示各个环节。 注：位于KanR上的限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ、MunⅠ、XhoⅠ、SalⅠ识别位点之间的距离依次为40 bp、30 bp、90 bp、50 bp。 回答下列问题： （1）制备LL-37蛋白的核心工作是__________。图1过程①需要在__________酶的作用下进行。 （2）为使LL-37基因与P质粒正确连接，在设计PCR引物时可在引物的__________(填“3’”或“5’”)端添加限制酶的识别序列，与a链和b链相结合的引物上添加的分别是限制酶__________的识别序列。用1个LL-37基因为模板获得n个LL-37基因，则PCR过程中消耗的引物总量是__________个。 （3）图1中④过程，受体菌经Ca2+处理后的生理状态是__________。本实验应选用__________(填“具有”或“不具有”)氨苄青霉素抗性的大肠杆菌作为受体菌。 （4）为了检测LL-37基因是否插入到P质粒中，利用目的基因两端添加的限制酶切割待测质粒样品，然后对产物进行电泳，结果如图2.样品__________最可能是插入了LL-37基因的重组质粒。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $