精品解析：江西省南昌市东湖区南昌中学2025-2026学年高二下学期7月期末考试生物试题

2025~2026学年度第二学期南昌中学三经路校区期末考试 高二生物 （考试时间：75分钟；试卷满分：100分） 一、选择题：本题共12个小题，每小题3分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1. 东北辣白菜是传统发酵食品，制作时常加入苹果、梨、大蒜、生姜等辅料，入坛中密封发酵。下列叙述正确的是（　　） A. 装坛前，需对苹果、梨、大蒜、生姜等辅料进行消毒灭菌 B. 发酵过程中，乳酸菌产生的乳酸和少量CO2使pH降低 C. 若发酵坛密封不严，会导致乳酸菌繁殖过快致使辣白菜酸度过高 D. 发酵后期，乳酸含量积累到一定程度会反过来抑制乳酸菌的活性 2. ε-聚赖氨酸（ε-PL）是一种优良的天然食品防腐剂。ε-PL能抑制多种微生物的活性，且在人体内可被分解为赖氨酸。从土壤中分离出能分泌ε-PL的微生物的流程如图所示。ε-PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。下列叙述正确的是（ ） A. 土样、培养基和接种工具等均需要严格灭菌处理，以防止杂菌污染 B. 步骤Ⅰ、Ⅲ的接种方法分别是涂布平板法、平板划线法 C. 步骤Ⅲ中应挑选菌落③接种到固体培养基表面培养，进一步筛选出目的菌株 D. 若要从丁培养基中收集ε-PL，则采用过滤、沉淀等方法将菌体分离提纯干燥 3. 乳糖需经乳糖酶分解才能被人体吸收利用。缺少乳糖酶的人摄入乳糖后，易出现腹泻。科研人员筛选生产乳糖酶优良菌种的过程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 对微生物进行纯培养的步骤一般为配制培养基、接种、灭菌、分离和培养 B. 菌落直径与蓝色圈直径之比越小，菌落中微生物产生乳糖酶的能力越强 C. 图中②接种方法只适合用于筛选微生物，不适合对微生物进行计数 D. 乳糖酶属于优良菌种生产的单细胞蛋白，可以有效去除牛奶中的乳糖 4. 从红豆杉树皮中提取出的紫杉醇是治疗某些癌症的特效药。研究人员构建了转紫杉醇合成关键酶（Bapt）基因的红豆杉细胞，通过悬浮培养获得了高纯度的紫杉醇，主要流程如下图。下列叙述错误的是（ ） A. 利用PCR技术获取Bapt基因时，应选用引物2和引物3 B. 构建基因表达载体时，宜选用EcoR Ⅰ和Sac Ⅰ酶切 C. 需先用Ca2+处理农杆菌细胞，再将基因表达载体导入 D. 利用添加氨苄青霉素的培养基可初步筛选导入质粒的农杆菌 5. 铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一。以铁皮石斛新生营养芽为材料，培养拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验如图所示。下列说法不正确的是（ ） A. 铁皮石斛产生的生物碱属于其次生代谢物 B. 过程①诱导新生营养芽变成PLBs的关键是适宜的植物激素和营养条件 C. 过程②培养高产细胞系应选择细胞数量/生物碱产量比值大的PLBs D. PLBs重量、光照等因素均会影响生物碱的产量 6. iPS细胞在人类疾病治疗方面有广阔的应用前景，用iPS细胞治疗镰状细胞贫血的过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. ①过程往往需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理获得的组织 B. ②过程需用Ca2+处理体细胞，以利于其吸收特定的DNA分子 C. ③④过程需在含一定CO2的环境中进行，以维持培养液的pH D. 用iPS细胞治疗镰状细胞贫血理论上不会发生免疫排斥反应 7. 髓系细胞触发受体2（TREM2）是一种免疫抑制受体，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。TREM2抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。如图为TREM2单克隆抗体的制备流程图。下列叙述正确的是（　　） A. 制备单克隆抗体过程中需对细胞进行至少三次筛选 B. 经步骤②诱导融合后的细胞都能分泌TREM2抗体 C. 诱导动物细胞融合不同于诱导植物细胞融合的方法是灭活病毒诱导 D. TREM2单克隆抗体具有准确识别抗原细微差异又可无限增殖的特点 8. 研究发现，采用2次克隆来制备转基因克隆动物，无论在重构胚的融合率、发育率还是移植受体妊娠率方面均明显高于传统的体细胞核移植。如图为2次克隆的简易流程图。下列有关叙述正确的是（ ） A. 胎羊X、Y的性状均完全取决于甲羊的遗传物质 B. 制备供体细胞前可用胰蛋白酶消化胎羊的组织 C. 胎羊Y细胞中线粒体DNA只来源于丙羊 D. 2次克隆的重构胚融合成功率高是因为胎羊细胞的分化程度高 9. Noxa是一种促凋亡蛋白。为构建表达Noxa的工程菌，现利用PCR技术将Noxa基因连接在ClyA基因的下游，构建ClyA-Noxa融合基因，并插入P载体。两个基因及四条引物如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 为方便构建融合基因，R1和F2引物设计时需要引入一定长度的互补序列 B. 为保证插入P载体的准确性，F1和R2引物设计时应引入不同的酶切位点 C. 为高效准确构建含ClyA-Noxa融合基因的表达载体，需至少使用4种限制酶 D. 为筛选成功转化后的工程菌，可以使用F1和R2的引物组合进行PCR鉴定 10. 治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 核移植过程中需对卵母细胞去核，这里的核是指纺锤体—染色体复合物 B. 将图中获得的组织器官移植给个体A，则基本不会发生免疫排斥反应 C. 体细胞在体外培养时需要提供适量CO2，作为体液因子调节呼吸运动 D. 治疗性克隆过程不产生独立生存的新个体，不存在任何伦理道德问题 11. 研究人员用花椰菜（BB，2n=18）根与黑芥（CC，2n=16）叶片分别制备原生质体，经PEG诱导融合形成杂种细胞，进一步培养获得再生植株，其中的植株N经鉴定有33条染色体。下列叙述正确的是（ ） A. 两个原生质体融合形成的细胞即为杂种细胞 B. 再生植株N的形成证明杂种细胞仍具有全能性 C. 花椰菜和黑芥的原生质体能融合，证明两种植物间不存在生殖隔离 D. 植株N的染色体都不能正常联会配对，无法产生可育配子 12. 下列关于生物工程和技术的表述正确的是（ ） A. 发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，发酵罐内要严格控制温度、PH和溶解氧等发酵条件 B. 胚胎移植中，供体和受体相当于双亲中的父本和母本 C. PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定，需要加指示剂且要在紫外灯下观察 D. 用PCR技术扩增目的基因时，为保证准确复制需要提前知道基因的全部序列 二、选择题：本题共4个小题，每小题4分，共16分。每小题有2项或2项以上选项符合题目要求，全部选对得4分，少选2分，选错0分。 13. 以下生物学实验的部分操作过程，错误的是（ ） 选项 实验名称 实验操作 A 酵母菌的纯培养 倒平板后将培养基放入高压蒸汽锅内灭菌 B 菊花的组织培养 将生长良好的愈伤组织先转接到诱导生根的培养基，长根后再转接到诱导生芽的培养基 C DNA的粗提取与鉴定 将丝状物放入2mol/L NaCl溶液再加二苯胺试剂，沸水浴中加热可观察到溶液变蓝 D DNA片段的扩增及电泳鉴定 PCR实验使用的微量离心管等在使用前不需灭菌 A. A B. B C. C D. D 14. 胰岛素用于治疗糖尿病，但胰岛素注射后易在皮下堆积，需较长时间才能进入血液，进入血液后又易被分解，因此治疗效果受到影响。下图是新的速效胰岛素的生产过程，有关叙述错误的是（ ） A. 新的胰岛素的产生是依据基因工程原理完成的 B. 新的胰岛素生产过程中不涉及中心法则 C. 新的胰岛素产生过程中最困难的一步是由胰岛素分子结构推测氨基酸序列 D. 若用大肠杆菌生产新的胰岛素，常用Ca2＋处理大肠杆菌 15. 下表列出了几种限制酶的识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点，下列叙述错误的是（ ） 限制酶 BamHⅠ HindⅢ EcoRⅠ SmaⅠ 识别序列及切割位点 A. 一个图1所示的质粒分子经SmaI切割前后，分别含有0个和4个游离的磷酸基团 B. 若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越高 C. 用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，可以使用SmaⅠ切割 D. 使用EcoRⅠ限制酶同时处理质粒、外源DNA可防止质粒和外源DNA发生自身环化 16. 利用膀胱生物反应器生产人血清白蛋白，基本流程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 操作②是对早期胚胎进行移植，移植前需对受体母猪进行超数排卵处理 B. 膀胱生物反应器不受性别及发育限制，产量一定高于乳腺生物反应器 C. 若操作①和操作②成功，则操作③就能从尿液中检测到人血清白蛋白 D. 操作①使用膀胱中特异表达基因的启动子可避免对其他组织产生影响 二、非选择题（4小题，共48分） 17. 一次性口罩主要成分是由C、H两种元素组成的聚丙烯纤维。研究人员欲从合适的土壤样品中筛选出能高效降解一次性口罩的细菌，设计了如图1所示的流程。请回答下列问题： （1）选择土壤样品时最好选择一次性口罩腐烂程度_______的土壤用于分离目标菌株。 （2）图1中“甲”指的是_______，目的是提高聚丙烯纤维降解菌的比例和密度，此过程使用的培养基中应以_______（填化合物名称）为唯一碳源。 （3）将分离纯化得到的不同菌种分别接种到鉴别培养基上，鉴别培养基中加入了能与聚丙烯纤维结合的显色染色剂。设不同菌种的菌落面积为s，菌落周围透明圈的面积为S，选择S/s的比值_______的菌落，就是能高效降解一次性口罩的目的菌群。 （4）欲估算某土壤样品中有多少能高效降解一次性口罩的目的菌，接种平板时应用_______法。根据图2操作能计算出1g该土壤中约有_______个高效降解一次性口罩的目的菌。该结果有可能比实际活菌数要少，原因是______________。 18. 科学家利用植物体细胞杂交技术，将番茄叶片细胞制成的原生质体和马铃薯块茎细胞制成的原生质体融合，成功地培育出了“番茄—马铃薯”杂种植株，如图1所示，其中①~⑤表示过程，a~f表示细胞、组织或植株。育种工作者还利用番茄进行了如图2所示的三组实验。据图回答下列问题： （1）图1的过程③成功的标志是___________；过程④⑤形成f需要经过___________________过程。培养基中激素___________________的浓度会影响植物细胞的发育方向。 （2）图1培育杂种植株的过程主要应用的原理是___________________；图2培育植物体B的育种方法Ⅱ称为___________。 （3）番茄是二倍体；体细胞中共24条染色体，马铃薯是四倍体，体细胞中共48条染色体。图2中幼苗A、幼苗B、植物体A、植物体B、植物体C的叶肉细胞中，染色体数目不是24的是___________。 19. 防御素是一类富含二硫键的阳离子型多肽，广泛分布于真菌、植物与动物中，是生物免疫系统中的重要调节分子。β-防御素是一种由H基因编码的抗菌肽，抑菌谱广。长春生物科技研究所通过构建重组酵母菌进行发酵，获得了β-防御素。回答下列问题： （1）为获得β﹣防御素基因，研究者利用致病细菌的脂多糖（LPS）刺激结肠癌细胞株提高β﹣防御素的表达量，经过逆转录后，作为模板进行PCR扩增。PCR产物常采用_______来鉴定，鉴定后进行测序。测序结果与______数据库中的公开数据进行比较，进而得到正确的β﹣防御素基因。 （2）本实验选用毕赤酵母表达载体pPIC9K（如图），扩增目的基因时设计的1对引物为P1（5′ATCGAATTCATGGGAAGTCATAAACACATTAGA3′）和P2（5′TATAGCGGCCGCCTATTTCTTTCTTCGGCAGCAT3′）。 ①本实验中引物的作用是__________； ②部分限制酶识别序列及切点如下表，结合图中限制酶切点与引物，推测本实验酶切时选用的两种限制酶是________，采用双酶切法的优势是_________（答出2点即可）。 限制酶 识别序列及酶切位点 BglⅠ 5′…A↓GATCT…3′ EcoRⅠ 5′…G↓AATTC…3′ SnaBⅠ 5′…TAC↓GTA…3′ SacⅠ 5′…GAGAT↓C…3′ AurⅠ 5′…C↓CTAGC…3′ SalⅠ 5′…G↓TCGAC…3′ NotⅠ 5′…GC↓GGCCGC…3′ （3）毕赤酵母表达系统发酵结束后，采取适当的______措施来获得产品。 20. 呕吐毒素（DON）是一种由多种镰刀菌产生的真菌蛋白，常见于被污染的谷物和谷物制品中。摄入被DON污染的食物后，人们可能会出现恶心、呕吐、腹泻等症状，严重时甚至可能导致死亡。同时，DON还会对动物的生长、繁殖和免疫功能产生负面影响，给养殖业带来巨大损失。近年来，单克隆抗体技术在DON的检测中展现出巨大的潜力和优势，DON单克隆抗体制备流程如图1所示。回答下列问题： （1）B细胞和骨髓瘤细胞通过①过程进行融合，如果只考虑两两融合，形成的融合细胞共有_______种类型。第一次筛选时所用的培养基为选择培养基，能在这种培养基上生长的细胞是_______。 （2）②过程为第二次筛选，所用的培养板为96孔培养板，将筛选的显阳性的细胞通过③过程进行扩大培养，进而获取单克隆抗体。获取单克隆抗体时，如果是体内培养，可以从小鼠的腹水中获取，如果是体外培养，获取的途径是_______。与常规的血清抗体相比，单克隆抗体所具备的优点是_______。 （3）实验人员将等量的纯化DON蛋白分别注射到甲、乙、丙、丁4只小鼠体内，经过二次免疫后测定小鼠DON抗体的免疫效果，以便筛选出制备DON单克隆抗体时用于细胞融合的供体小鼠。甲、乙、丙、丁4只小鼠的血清抗体半抑制浓度（IC50）和血清抗体相对浓度如图2所示。制备DON单克隆抗体时，最适合作为细胞融合的供体小鼠是_______，依据是_______。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025~2026学年度第二学期南昌中学三经路校区期末考试 高二生物 （考试时间：75分钟；试卷满分：100分） 一、选择题：本题共12个小题，每小题3分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1. 东北辣白菜是传统发酵食品，制作时常加入苹果、梨、大蒜、生姜等辅料，入坛中密封发酵。下列叙述正确的是（　　） A. 装坛前，需对苹果、梨、大蒜、生姜等辅料进行消毒灭菌 B. 发酵过程中，乳酸菌产生的乳酸和少量CO2使pH降低 C. 若发酵坛密封不严，会导致乳酸菌繁殖过快致使辣白菜酸度过高 D. 发酵后期，乳酸含量积累到一定程度会反过来抑制乳酸菌的活性 【答案】D 【解析】 【详解】A、辣白菜发酵依赖辅料表面附着的天然乳酸菌，若对辅料消毒灭菌会杀死目的菌种，导致发酵无法正常进行，A错误； B、乳酸菌为严格厌氧细菌，无氧呼吸仅产生乳酸，不生成CO₂，发酵过程pH降低是乳酸积累导致的，B错误； C、乳酸菌是厌氧微生物，密封不严会使氧气进入，抑制乳酸菌的无氧呼吸，导致乳酸菌繁殖减慢，不会造成酸度过高，还可能引发杂菌污染，C错误； D、发酵后期乳酸不断积累，发酵液pH持续下降，当pH超出乳酸菌适宜生存范围时，会反过来抑制乳酸菌的活性，D正确。 2. ε-聚赖氨酸（ε-PL）是一种优良的天然食品防腐剂。ε-PL能抑制多种微生物的活性，且在人体内可被分解为赖氨酸。从土壤中分离出能分泌ε-PL的微生物的流程如图所示。ε-PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。下列叙述正确的是（ ） A. 土样、培养基和接种工具等均需要严格灭菌处理，以防止杂菌污染 B. 步骤Ⅰ、Ⅲ的接种方法分别是涂布平板法、平板划线法 C. 步骤Ⅲ中应挑选菌落③接种到固体培养基表面培养，进一步筛选出目的菌株 D. 若要从丁培养基中收集ε-PL，则采用过滤、沉淀等方法将菌体分离提纯干燥 【答案】B 【解析】 【详解】A、土样中含有目的菌株，不能灭菌，否则会杀死目的菌株，A错误； B、步骤Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ的接种方法分别是涂布平板法（先稀释后涂布）、平板划线法（用接种环接种），B正确； C、ε-PL可使亚甲基蓝褪色，故能分泌ε-PL的微生物周围会形成透明圈，透明圈直径越大，分泌ε-PL的量越多，故步骤Ⅲ应挑选菌落①接种到固体培养基表面培养，进一步筛选出目的菌株，C错误； D、产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取，ε-PL是目的菌分泌到胞外的代谢产物，丁培养基是液体发酵培养基，要收集ε-PL，不需要对菌体提纯干燥，D错误。 3. 乳糖需经乳糖酶分解才能被人体吸收利用。缺少乳糖酶的人摄入乳糖后，易出现腹泻。科研人员筛选生产乳糖酶优良菌种的过程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 对微生物进行纯培养的步骤一般为配制培养基、接种、灭菌、分离和培养 B. 菌落直径与蓝色圈直径之比越小，菌落中微生物产生乳糖酶的能力越强 C. 图中②接种方法只适合用于筛选微生物，不适合对微生物进行计数 D. 乳糖酶属于优良菌种生产的单细胞蛋白，可以有效去除牛奶中的乳糖 【答案】B 【解析】 【详解】A、微生物纯培养的正确步骤为配制培养基、灭菌、接种、分离和培养，选项将灭菌置于接种之后，操作顺序错误，A错误； B、乳糖酶可将无色的X-gal分解为蓝色产物，菌株产乳糖酶能力越强，相同时间内分解的X-gal越多，蓝色圈直径越大，因此菌落直径与蓝色圈直径的比值越小，说明该菌株产乳糖酶的能力越强，B正确； C、图中②经过稀释后接种到固体培养基，接种方法为稀释涂布平板法，该方法既可以用于筛选微生物，也可以用于活菌计数，C错误； D、单细胞蛋白指的是微生物菌体本身，乳糖酶是微生物合成的酶类代谢产物，不属于单细胞蛋白，D错误。 4. 从红豆杉树皮中提取出的紫杉醇是治疗某些癌症的特效药。研究人员构建了转紫杉醇合成关键酶（Bapt）基因的红豆杉细胞，通过悬浮培养获得了高纯度的紫杉醇，主要流程如下图。下列叙述错误的是（ ） A. 利用PCR技术获取Bapt基因时，应选用引物2和引物3 B. 构建基因表达载体时，宜选用EcoR Ⅰ和Sac Ⅰ酶切 C. 需先用Ca2+处理农杆菌细胞，再将基因表达载体导入 D. 利用添加氨苄青霉素的培养基可初步筛选导入质粒的农杆菌 【答案】B 【解析】 【详解】A、PCR扩增目的基因时，DNA聚合酶只能从引物的3' 端延伸子链，故利用PCR技术获取Bapt基因时，应选用引物2和引物3，A正确； B、构建基因表达载体时，若选用EcoR I和Sac I酶切，会导致GFP基因被切除，无法作为后续筛选标记，因此不宜选用这两种酶，B错误； C、将重组质粒导入农杆菌时，需先用Ca2+处理农杆菌使其处于感受态，再将基因表达载体导入，C正确； D、Ti质粒上含氨苄青霉素抗性基因，该基因可作为标记基因，能初步筛选出导入了质粒（含重组质粒与空质粒）的农杆菌，未导入质粒的农杆菌无法存活，因此可完成初步筛选，D正确。 5. 铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一。以铁皮石斛新生营养芽为材料，培养拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验如图所示。下列说法不正确的是（ ） A. 铁皮石斛产生的生物碱属于其次生代谢物 B. 过程①诱导新生营养芽变成PLBs的关键是适宜的植物激素和营养条件 C. 过程②培养高产细胞系应选择细胞数量/生物碱产量比值大的PLBs D. PLBs重量、光照等因素均会影响生物碱的产量 【答案】C 【解析】 【详解】A、植物细胞的次生代谢物含量很低，从植物组织提取会大量破坏植物资源，有些产物又不能或难以通过化学合成途径得到，因此人们期望利用植物细胞培养来获得目标产物，铁皮石斛产生的生物碱属于其次生代谢物，A正确； B、过程①是新生营养芽脱分化形成类似愈伤组织的PLBs的过程，植物组织培养中脱分化的关键是适宜的植物激素（生长素和细胞分裂素的比例）和营养条件，B正确； C、培养高产细胞系时，应该选择生物碱产量/细胞数量比值大的PLBs，因为我们的目的是获得高产生物碱的细胞系，生物碱产量/细胞数量比值大意味着单位细胞数量产生的生物碱多，更符合高产的要求，C错误； D、由曲线图可知，光照条件下PLBs重量和生物碱含量均高于黑暗条件，且生物碱产量和PLBs重量正相关，因此PLBs重量、光照等因素均会影响生物碱的产量，D正确。 6. iPS细胞在人类疾病治疗方面有广阔的应用前景，用iPS细胞治疗镰状细胞贫血的过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. ①过程往往需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理获得的组织 B. ②过程需用Ca2+处理体细胞，以利于其吸收特定的DNA分子 C. ③④过程需在含一定CO2的环境中进行，以维持培养液的pH D. 用iPS细胞治疗镰状细胞贫血理论上不会发生免疫排斥反应 【答案】B 【解析】 【详解】A、欲将动物组织制成细胞悬液，形成单细胞，需要用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等进行处理，A正确； B、②过程为将目的基因导入动物细胞，可采用显微注射法，将目的基因导入大肠杆菌细胞才采用Ca2+处理法，B错误； C、③④过程为动物细胞培养的过程，动物细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pH，C正确； D、iPS 细胞一般是将来源于患者自身的细胞诱导形成的，移植回病人体内，理论上可避免免疫排斥反应，D正确。 故选B。 7. 髓系细胞触发受体2（TREM2）是一种免疫抑制受体，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。TREM2抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。如图为TREM2单克隆抗体的制备流程图。下列叙述正确的是（　　） A. 制备单克隆抗体过程中需对细胞进行至少三次筛选 B. 经步骤②诱导融合后的细胞都能分泌TREM2抗体 C. 诱导动物细胞融合不同于诱导植物细胞融合的方法是灭活病毒诱导 D. TREM2单克隆抗体具有准确识别抗原细微差异又可无限增殖的特点 【答案】C 【解析】 【详解】A、单克隆抗体制备中至少需要两次筛选：第一次用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，A错误； B、诱导融合后会得到未融合细胞、同种细胞融合细胞、杂交瘤细胞等多种细胞，只有筛选后得到的特定杂交瘤细胞才能分泌TREM2抗体，B错误： C、诱导植物原生质体融合的方法为物理法、化学法，灭活病毒诱导是动物细胞融合特有的方法，这是二者的区别，C正确； D、无限增殖是杂交瘤细胞的特点，单克隆抗体是蛋白质，不具备增殖能力，D错误。 8. 研究发现，采用2次克隆来制备转基因克隆动物，无论在重构胚的融合率、发育率还是移植受体妊娠率方面均明显高于传统的体细胞核移植。如图为2次克隆的简易流程图。下列有关叙述正确的是（ ） A. 胎羊X、Y的性状均完全取决于甲羊的遗传物质 B. 制备供体细胞前可用胰蛋白酶消化胎羊的组织 C. 胎羊Y细胞中线粒体DNA只来源于丙羊 D. 2次克隆的重构胚融合成功率高是因为胎羊细胞的分化程度高 【答案】B 【解析】 【分析】1、动物细胞核移植：是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成一个新的个体。用核移植方法得到的动物称为克隆动物。 2、动物体细胞核移植技术的应用：①加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育；②保护濒危物种，增大存活数量；③生产珍贵的医用蛋白；④作为异种移植的供体；⑤用于组织器官的移植等。 【详解】A、胎羊X的细胞质由乙羊提供，胎羊Y的细胞质由丙羊提供，细胞质中含有部分遗传物质，因此胎羊X、Y的性状均主要取决于甲羊的遗传物质，也和乙、丙羊有关，A错误； B、制备供体细胞前可用胰蛋白酶消化胎羊的组织，胰蛋白酶的作用是消化动物细胞之间的胶原纤维，从而得到单个细胞，B正确； C、胎羊Y的形成是将胎羊X的体细胞注射到丙羊去核的卵母细胞中，因此胎羊Y细胞中线粒体DNA来源于丙羊和胎羊X，C错误； D、2次克隆的重构胚融合成功率高是因为胎羊细胞的分化程度低，细胞核的全能性相对容易表达，D错误。 故选B。 9. Noxa是一种促凋亡蛋白。为构建表达Noxa的工程菌，现利用PCR技术将Noxa基因连接在ClyA基因的下游，构建ClyA-Noxa融合基因，并插入P载体。两个基因及四条引物如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 为方便构建融合基因，R1和F2引物设计时需要引入一定长度的互补序列 B. 为保证插入P载体的准确性，F1和R2引物设计时应引入不同的酶切位点 C. 为高效准确构建含ClyA-Noxa融合基因的表达载体，需至少使用4种限制酶 D. 为筛选成功转化后的工程菌，可以使用F1和R2的引物组合进行PCR鉴定 【答案】C 【解析】 【详解】A、利用重叠PCR构建融合基因时，ClyA的下游引物R1和Noxa的上游引物F2设计互补序列后，两个基因的PCR产物可通过互补序列拼接，进而得到完整的ClyA-Noxa融合基因，A正确； B、在融合基因的两端引物F1（上游）和R2（下游）引入不同的酶切位点，酶切后融合基因的两端黏性末端不同，可保证融合基因定向正确插入载体，B正确； C、仅需在融合基因的两端引入2种不同的酶切位点，用这2种限制酶分别切割融合基因和载体，即可完成表达载体构建，不需要至少4种限制酶，C错误； D、若工程菌成功转入融合基因，F1（结合ClyA上游）和R2（结合Noxa下游）的引物组合可以扩增出对应大小的融合基因条带，若未成功转化则无法扩增出目的条带，因此可用于鉴定，D正确。 10. 治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 核移植过程中需对卵母细胞去核，这里的核是指纺锤体—染色体复合物 B. 将图中获得的组织器官移植给个体A，则基本不会发生免疫排斥反应 C. 体细胞在体外培养时需要提供适量CO2，作为体液因子调节呼吸运动 D. 治疗性克隆过程不产生独立生存的新个体，不存在任何伦理道德问题 【答案】A 【解析】 【分析】生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体。治疗性克隆是指将患者的细胞诱导成特定的细胞、组织和器官，用它们来修复或替代受损的细胞、组织和器官，从而达到治疗疾病的目的。 【详解】A、核移植过程中需对处于减数分裂Ⅱ中期的卵母细胞去核，这里的“核”其实是纺锤体—染色体复合物，A正确； B、图中的个体A、B分别为提供细胞质的个体、提供细胞核的个体，个体B的细胞核遗传物质和组织器官的细胞核遗传物质相同，理论上将图中获得的组织器官移植给个体B，则基本不会发生免疫排斥反应，B错误； C、体细胞在体外培养时需要提供适量CO2，CO2的主要作用是维持培养液的pH，C错误； D、治疗性克隆也会面临伦理问题，我国对对治疗性克隆进行有效监控和严格审查，D错误。 故选A。 11. 研究人员用花椰菜（BB，2n=18）根与黑芥（CC，2n=16）叶片分别制备原生质体，经PEG诱导融合形成杂种细胞，进一步培养获得再生植株，其中的植株N经鉴定有33条染色体。下列叙述正确的是（ ） A. 两个原生质体融合形成的细胞即为杂种细胞 B. 再生植株N的形成证明杂种细胞仍具有全能性 C. 花椰菜和黑芥的原生质体能融合，证明两种植物间不存在生殖隔离 D. 植株N的染色体都不能正常联会配对，无法产生可育配子 【答案】B 【解析】 【详解】A、原生质体融合过程中会出现同种原生质体融合、异种原生质体融合等多种融合产物，只有不同物种的原生质体融合得到的细胞才是杂种细胞，A错误； B、细胞全能性是指已分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能，杂种细胞经培养最终形成完整的再生植株N，可证明杂种细胞具有全能性，B正确； C、生殖隔离是自然状态下物种间不能交配、或交配后不能产生可育后代的现象，原生质体融合是人工诱导的细胞工程技术，不能证明两种植物不存在生殖隔离，C错误； D、植株N含花椰菜的2个染色体组（BB）和黑芥的2个染色体组（CC，仅缺失1条），其中BB组的同源染色体、CC组剩余的同源染色体均可正常联会，并非所有染色体都不能联会，也有可能产生可育配子，D错误。 12. 下列关于生物工程和技术的表述正确的是（ ） A. 发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，发酵罐内要严格控制温度、PH和溶解氧等发酵条件 B. 胚胎移植中，供体和受体相当于双亲中的父本和母本 C. PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定，需要加指示剂且要在紫外灯下观察 D. 用PCR技术扩增目的基因时，为保证准确复制需要提前知道基因的全部序列 【答案】A 【解析】 【分析】发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的 配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面。 【详解】A、发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，还要及时添加必需的营养组分，发酵罐内要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件，A正确； B、胚胎移植中，供体雄性个体和供体雌性个体相当于双亲中的父本和母本，受体并没有为其提供遗传物质，B错误； C、琼脂糖凝胶电泳中的缓冲液中含指示剂，这些指示剂因为含有颜色，并且在电泳时的迁移速度比DNA快，所以可以用于指示不同目的的条带DNA在电泳过程中的位置，防止DNA跑出胶外。凝胶中的DNA分子通过核酸染料染色，可以在波长为300 nm的紫外灯下被检测出来，C错误； D、用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列，只需要知道一段已知目的基因的核苷酸序列，从而根据这段序列合成引物，D错误。 故选A。 二、选择题：本题共4个小题，每小题4分，共16分。每小题有2项或2项以上选项符合题目要求，全部选对得4分，少选2分，选错0分。 13. 以下生物学实验的部分操作过程，错误的是（ ） 选项 实验名称 实验操作 A 酵母菌的纯培养 倒平板后将培养基放入高压蒸汽锅内灭菌 B 菊花的组织培养 将生长良好的愈伤组织先转接到诱导生根的培养基，长根后再转接到诱导生芽的培养基 C DNA的粗提取与鉴定 将丝状物放入2mol/L NaCl溶液再加二苯胺试剂，沸水浴中加热可观察到溶液变蓝 D DNA片段的扩增及电泳鉴定 PCR实验使用的微量离心管等在使用前不需灭菌 A. A B. B C. C D. D 【答案】ABD 【解析】 【详解】A、酵母菌纯培养的过程分为以下几步：①制备培养基；②灭菌：将配制好的培养基放入高压蒸汽灭菌锅中灭菌，将培养皿放入干热灭菌箱内灭菌；③倒平板；④接种和分离酵母菌；⑤培养酵母菌。应在倒平板前将培养基放入高压蒸汽锅内灭菌，A错误； B、植物组织培养过程中，获得愈伤组织后，需要先转接到诱导生芽的培养基，长芽后再转接到诱导生根的培养基，B错误； C、DNA粗提取后，对DNA进行鉴定的操作是：将含有DNA的丝状物溶解在2mol/L的NaCl溶液中，搅拌使其充分溶解后，加入4mL的二苯胺试剂，沸水中加热5min，溶液变成蓝色，从而鉴定DNA的存在，C正确； D、在DNA片段的扩增及电泳鉴定实验中，为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头等在使用前必须进行高压灭菌处理，D错误。 14. 胰岛素用于治疗糖尿病，但胰岛素注射后易在皮下堆积，需较长时间才能进入血液，进入血液后又易被分解，因此治疗效果受到影响。下图是新的速效胰岛素的生产过程，有关叙述错误的是（ ） A. 新的胰岛素的产生是依据基因工程原理完成的 B. 新的胰岛素生产过程中不涉及中心法则 C. 新的胰岛素产生过程中最困难的一步是由胰岛素分子结构推测氨基酸序列 D. 若用大肠杆菌生产新的胰岛素，常用Ca2＋处理大肠杆菌 【答案】ABC 【解析】 【分析】蛋白质工程的过程：预期的蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相对应的脱氧核糖核苷酸序列（DNA）→基因工程。 【详解】A、新的胰岛素的产生是依据蛋白质工程原理完成的，A错误 ； B、新的胰岛素生产过程中涉及转录、翻译的过程，其涉及中心法则，B错误； C、新的胰岛素产生过程中最困难的一步是由设计新的胰岛素分子的空间结构，C错误； D、把目的基因导入大肠杆菌，常用Ca2＋处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞，利于重组质粒的进入，D正确。 故选ABC。 15. 下表列出了几种限制酶的识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点，下列叙述错误的是（ ） 限制酶 BamHⅠ HindⅢ EcoRⅠ SmaⅠ 识别序列及切割位点 A. 一个图1所示的质粒分子经SmaI切割前后，分别含有0个和4个游离的磷酸基团 B. 若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越高 C. 用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，可以使用SmaⅠ切割 D. 使用EcoRⅠ限制酶同时处理质粒、外源DNA可防止质粒和外源DNA发生自身环化 【答案】ACD 【解析】 【详解】A、质粒分子是环状的DNA分子，没有切割之前不含游离的磷酸基团，经SmaⅠ切割前后，形成2个黏性末端，含有2个游离的磷酸基团，A错误； B、C和G之间含有3个氢键，A和T之间含有2个氢键，所以C和G含量越多，DNA分子热稳定性越高；SmaⅠ酶的识别序列的C和G含量较高，所以对图中质粒进行改造时，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越高，B正确； C、因为质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因都含有SmaⅠ的切割位点，用SmaⅠ会破质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因，C错误； D、为防止酶切后单个含目的基因的DNA片段和质粒自身连接成环状，最好用BamHⅠ和HindⅢ同时切割质粒和外源DNA，不能使用EcoRⅠ，D错误。 故选ACD。 16. 利用膀胱生物反应器生产人血清白蛋白，基本流程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 操作②是对早期胚胎进行移植，移植前需对受体母猪进行超数排卵处理 B. 膀胱生物反应器不受性别及发育限制，产量一定高于乳腺生物反应器 C. 若操作①和操作②成功，则操作③就能从尿液中检测到人血清白蛋白 D. 操作①使用膀胱中特异表达基因的启动子可避免对其他组织产生影响 【答案】ABC 【解析】 【详解】A、操作②是胚胎移植，移植前需要对受体母猪进行同期发情处理，目的是让供体和受体的生理状态一致，为胚胎着床提供相同的生理环境；而超数排卵处理是针对供体母猪的，用来获得更多的卵母细胞，A错误； B、膀胱生物反应器确实不受性别及发育阶段限制，相比乳腺生物反应器只能在雌性成体动物泌乳期发挥作用有优势，而产量会受到基因表达效率、个体健康状况等多种因素影响，不能直接判定膀胱生物反应器产量更高，B错误； C、操作①是将目的基因导入受精卵，操作②是胚胎移植获得转基因个体，但只有当目的基因在膀胱上皮细胞成功表达时，才能从尿液中检测到人血清白蛋白，仅仅操作①②成功不代表目的基因一定在特定组织顺利表达，C错误； D、操作①使用膀胱中特异表达基因的启动子，能够驱动目的基因只在膀胱组织中表达，避免在其他组织中表达产生不必要的影响，这是利用特异性启动子实现基因定向表达的典型应用，D正确。 二、非选择题（4小题，共48分） 17. 一次性口罩主要成分是由C、H两种元素组成的聚丙烯纤维。研究人员欲从合适的土壤样品中筛选出能高效降解一次性口罩的细菌，设计了如图1所示的流程。请回答下列问题： （1）选择土壤样品时最好选择一次性口罩腐烂程度_______的土壤用于分离目标菌株。 （2）图1中“甲”指的是_______，目的是提高聚丙烯纤维降解菌的比例和密度，此过程使用的培养基中应以_______（填化合物名称）为唯一碳源。 （3）将分离纯化得到的不同菌种分别接种到鉴别培养基上，鉴别培养基中加入了能与聚丙烯纤维结合的显色染色剂。设不同菌种的菌落面积为s，菌落周围透明圈的面积为S，选择S/s的比值_______的菌落，就是能高效降解一次性口罩的目的菌群。 （4）欲估算某土壤样品中有多少能高效降解一次性口罩的目的菌，接种平板时应用_______法。根据图2操作能计算出1g该土壤中约有_______个高效降解一次性口罩的目的菌。该结果有可能比实际活菌数要少，原因是______________。 【答案】（1）大 （2） ①. 选择培养（或扩大培养、富集培养） ②. 聚丙烯纤维 （3）大 （4） ①. 稀释涂布平板 ②. 6.8×107 ③. 当两个或多个细菌连在一起时，平板上只能观察到一个菌落 【解析】 【小问1详解】 据题意可知，本实验目的是筛选出能高效降解一次性口罩的细菌，应从富含该微生物的环境中进行筛选，故选择土壤样品时最好选择一次性口罩腐烂程度大的土壤用于分离目标菌株。 【小问2详解】 从目的用途看，为了提高聚丙烯纤维降解菌的比例和密度，图中“甲”指的是选择培养（或扩大培养、富集培养）；本实验目的是筛选出能高效降解一次性口罩的细菌，一次性口罩主要成分是由C、H两种元素组成的聚丙烯纤维，故在选择培养时培养基中应以聚丙烯纤维为唯一碳源。 【小问3详解】 由于目的是筛选高效降解一次性口罩的微生物，故最适合作为选择土壤样品的指标是一次性口罩的腐烂程度，设不同菌种的菌落面积为s，菌落周围透明圈的面积为S，选择S/s的比值大的菌落，就是能高效降解一次性口罩的目的菌群。 【小问4详解】 微生物的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，其中能够用于计数的是稀释涂布平板法；计数时应选择菌落数在30-300之间的进行统计，据图可知，符合要求的菌落数有62、68、74，平均数为（62＋68＋74）/3=68，且共稀释了105倍，算出1g该土壤中约有68/0.1×105=6.8×107个；由于用稀释涂布平板法进行计数时，当两个或多个细菌连在一起时，平板上只能观察到一个菌落，故结果有可能比实际活菌数要少。 18. 科学家利用植物体细胞杂交技术，将番茄叶片细胞制成的原生质体和马铃薯块茎细胞制成的原生质体融合，成功地培育出了“番茄—马铃薯”杂种植株，如图1所示，其中①~⑤表示过程，a~f表示细胞、组织或植株。育种工作者还利用番茄进行了如图2所示的三组实验。据图回答下列问题： （1）图1的过程③成功的标志是___________；过程④⑤形成f需要经过___________________过程。培养基中激素___________________的浓度会影响植物细胞的发育方向。 （2）图1培育杂种植株的过程主要应用的原理是___________________；图2培育植物体B的育种方法Ⅱ称为___________。 （3）番茄是二倍体；体细胞中共24条染色体，马铃薯是四倍体，体细胞中共48条染色体。图2中幼苗A、幼苗B、植物体A、植物体B、植物体C的叶肉细胞中，染色体数目不是24的是___________。 【答案】（1） ①. 再生出细胞壁 ②. 脱分化、再分化 ③. 生长素、细胞分裂素 （2） ①. 植物细胞的全能性、细胞膜具有（一定的）流动性 ②. 单倍体育种 （3）幼苗B 【解析】 【小问1详解】 过程③是原生质体融合后再生壁过程，其成功的标志是再生出细胞壁，意味着新的杂种细胞结构完整。过程④形成愈伤组织需要经过脱分化过程，即将已分化的细胞失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程；愈伤组织形成f（胚状体等结构）需要经过再分化过程，即愈伤组织在一定条件下分化形成各种组织和器官。培养基中生长素和细胞分裂素的浓度会影响植物细胞的发育方向，不同浓度比例可诱导细胞脱分化、再分化以及根或芽的分化等。 【小问2详解】 图1培育杂种植株的过程应用的原理一是植物细胞的全能性，即已分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；二是细胞膜具有一定的流动性，这是原生质体能够融合的基础。 图2中培育植物体B的育种方法Ⅱ是单倍体育种，通过花药离体培养得到单倍体植株，再经过秋水仙素等处理使染色体加倍得到纯合植株。 【小问3详解】 图2的幼苗A和植物体A，都是有丝分裂来的，染色体数目与番茄韧皮部细胞一致，都是24条；幼苗B是花粉有丝分裂发育而来，染色体数目只有番茄体细胞的一半（12条），随后用秋水仙素处理，染色体数目加倍，所以植物体B染色体数是24条；植物体C是两个花粉融合后培养而来，所以体细胞中含有24条染色体。 19. 防御素是一类富含二硫键的阳离子型多肽，广泛分布于真菌、植物与动物中，是生物免疫系统中的重要调节分子。β-防御素是一种由H基因编码的抗菌肽，抑菌谱广。长春生物科技研究所通过构建重组酵母菌进行发酵，获得了β-防御素。回答下列问题： （1）为获得β﹣防御素基因，研究者利用致病细菌的脂多糖（LPS）刺激结肠癌细胞株提高β﹣防御素的表达量，经过逆转录后，作为模板进行PCR扩增。PCR产物常采用_______来鉴定，鉴定后进行测序。测序结果与______数据库中的公开数据进行比较，进而得到正确的β﹣防御素基因。 （2）本实验选用毕赤酵母表达载体pPIC9K（如图），扩增目的基因时设计的1对引物为P1（5′ATCGAATTCATGGGAAGTCATAAACACATTAGA3′）和P2（5′TATAGCGGCCGCCTATTTCTTTCTTCGGCAGCAT3′）。 ①本实验中引物的作用是__________； ②部分限制酶识别序列及切点如下表，结合图中限制酶切点与引物，推测本实验酶切时选用的两种限制酶是________，采用双酶切法的优势是_________（答出2点即可）。 限制酶 识别序列及酶切位点 BglⅠ 5′…A↓GATCT…3′ EcoRⅠ 5′…G↓AATTC…3′ SnaBⅠ 5′…TAC↓GTA…3′ SacⅠ 5′…GAGAT↓C…3′ AurⅠ 5′…C↓CTAGC…3′ SalⅠ 5′…G↓TCGAC…3′ NotⅠ 5′…GC↓GGCCGC…3′ （3）毕赤酵母表达系统发酵结束后，采取适当的______措施来获得产品。 【答案】（1） ①. 琼脂糖凝胶电泳 ②. GenBank （2） ①. 使TaqDNA聚合酶从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸且在5'端引入限制酶切位点 ②. EcoRⅠ和NotⅠ ③. 防止载体或目的基因自身环化，防止目的基因与载体反向连接 （3）提取、分离和纯化 【解析】 【小问1详解】 PCR产物常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定；测序结果与GenBank数据库中的公开数据进行比较。 【小问2详解】 ①扩增目的基因时，需要一对引物，引物的作用是使TaqDNA聚合酶从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸，并在5'端引入限制酶切位点。 ②分析题意，扩增目的基因时设计的1对引物为P1（5'ATCGAATTCATGGGAAGTCATAAACACATTAGA3'）和P2（5'TATAGCGGCCGCCTATTTCTTTCTTCGGCAGCAT3'），引物需要与模板的3'端结合，用于延伸子链，据图可知，引物P1中5'→3'有-GAATTC-序列，P2中5'→3'有-GCGGCCGC-序列，据此推测本实验中采用的一对限制酶是EcoRⅠ、NotⅠ；采用双酶切法的优势是避免目的基因和载体自身环化，目的基因和载体基因反向连接（确保目的基因和载体正确连接）。 【小问3详解】 β-防御素是毕赤酵母表达系统发酵的代谢产物，所以发酵结束后，采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。 20. 呕吐毒素（DON）是一种由多种镰刀菌产生的真菌蛋白，常见于被污染的谷物和谷物制品中。摄入被DON污染的食物后，人们可能会出现恶心、呕吐、腹泻等症状，严重时甚至可能导致死亡。同时，DON还会对动物的生长、繁殖和免疫功能产生负面影响，给养殖业带来巨大损失。近年来，单克隆抗体技术在DON的检测中展现出巨大的潜力和优势，DON单克隆抗体制备流程如图1所示。回答下列问题： （1）B细胞和骨髓瘤细胞通过①过程进行融合，如果只考虑两两融合，形成的融合细胞共有_______种类型。第一次筛选时所用的培养基为选择培养基，能在这种培养基上生长的细胞是_______。 （2）②过程为第二次筛选，所用的培养板为96孔培养板，将筛选的显阳性的细胞通过③过程进行扩大培养，进而获取单克隆抗体。获取单克隆抗体时，如果是体内培养，可以从小鼠的腹水中获取，如果是体外培养，获取的途径是_______。与常规的血清抗体相比，单克隆抗体所具备的优点是_______。 （3）实验人员将等量的纯化DON蛋白分别注射到甲、乙、丙、丁4只小鼠体内，经过二次免疫后测定小鼠DON抗体的免疫效果，以便筛选出制备DON单克隆抗体时用于细胞融合的供体小鼠。甲、乙、丙、丁4只小鼠的血清抗体半抑制浓度（IC50）和血清抗体相对浓度如图2所示。制备DON单克隆抗体时，最适合作为细胞融合的供体小鼠是_______，依据是_______。 【答案】（1） ①. 3 ②. 杂交瘤细胞（B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞） （2） ①. 从细胞培养液中获取 ②. 能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备 （3） ①. 丁 ②. 丁的血清抗体相对浓度较高，且IC50最低，即抗体灵敏度最高 【解析】 【小问1详解】 B细胞和骨髓瘤细胞通过①过程进行融合，如果只考虑两两融合，形成的融合细胞共有3种类型，即B细胞与B细胞融合细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合细胞、B细胞与骨髓瘤细胞融合细胞（杂交瘤细胞）；第一次筛选时所用的培养基为选择培养基，B细胞和瘤细胞以及融合的具有同核的细胞均不能正常生存，故能在这种培养基上生长的细胞是杂交瘤细胞（B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞）。 【小问2详解】 如果是体外培养，获取的途径是从细胞培养液中获取抗体；单克隆抗体所具备的优点是能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备。 【小问3详解】 结合图2可知，制备DON单克隆抗体时，最适合作为细胞融合的供体小鼠是丁，依据是丁的血清抗体相对浓度较高，且IC50最低，即抗体灵敏度最高。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $