黑龙江省佳木斯市第十一中学2025-2026学年高二下学期期中考试生物试题

**基本信息** 高二生物期中试卷聚焦微生物培养、细胞工程、基因工程核心内容，非选择题结合海洋塑料降解菌筛选、紫罗兰-油菜原生质体融合等科技情境，突出科学思维与探究实践。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单项选择|20/40|传统发酵（泡菜制作）、微生物培养（平板划线）、基因工程工具（限制酶）|基础考点与现代科技结合，如红酸汤发酵工程对比传统技术| |不定项选择|5/15|植物组织培养（愈伤组织）、胚胎工程（胚胎分割）|多选项设计考查知识辨析，如iPS细胞与胚胎干细胞特性比较| |非选择题|4/45|微生物筛选计数（海洋塑料降解菌）、细胞融合（杂种植物培育）、单克隆抗体制备、基因工程（玉米赖氨酸改良）|情境真实且具探究性，如通过PCR扩增R基因及农杆菌转化考查实验操作|

2025-2026学年度下学期期中考试 高二生物试卷 一、单项选择题(本题共20小题，每小题2分，共40分) 1．传统发酵食品的制作需要各种各样的微生物。下列说法错误的是（　　） A．腌制泡菜利用了乳酸菌的乳酸发酵 B．制作腐乳有多种微生物参与，其中起主要作用的是曲霉 C．制作果酒利用了酵母菌在无氧条件下产生酒精 D．制作果醋利用了醋酸菌在有氧条件下产生乙酸 2．实验小组对酿酒酵母菌进行平板划线的纯培养操作，下列有关叙述正确的是（    ） A．将配制好的马铃薯琼脂培养基放入干热灭菌箱内灭菌 B．在酒精灯火焰附近，将培养皿盖完全打开后倒入培养基 C．从第一次划线的末端开始到第二次划线结束，即完成接种 D．将接种后的平板和未接种的平板倒置，放入恒温培养箱中培养 3．下列有关微生物的分离、培养及计数的叙述，正确的是（    ） A．用液体培养基培养目的菌比固体培养基更容易获得单菌落 B．液体培养基和固体培养基都能用干热灭菌法和湿热灭菌法灭菌 C．未接种的空白平板上长出菌落可能是培养基灭菌不彻底造成的 D．用稀释涂布平板法进行微生物计数时，结果往往比实际值偏高 4．红酸汤是苗族人民的传统食品，其主要是利用乳酸菌发酵。2025年1月，中国农业科学院开发出了适合规模化生产的菌种，利用发酵工程使产品品质更加稳定安全。红酸汤制作传统发酵流程如下，下列关于红酸汤的传统发酵和发酵工程的相关叙述正确的是（　　）    A．装坛时不装满的原因是为了促进微生物繁殖 B．传统发酵技术和发酵工程的发酵设备都需要严格的灭菌 C．传统发酵技术和发酵工程的菌种都可以来自天然存在的菌种 D．进行发酵工程生产时排出的废弃物，对环境无污染 5．紫罗兰的抗虫性强，它的种子富含亚麻酸。为了让油菜具有紫罗兰的优良性状，科研人员进行了如图所示实验。下列叙述错误的是（　　） A．制备原生质体需将植物组织切块用纤维素酶、果胶酶处理 B．细胞融合依赖生物膜的流动性，杂种细胞长出细胞壁标志着融合成功 C．由愈伤组织到杂种植株培养过程中，细胞分裂素含量高于生长素有利于诱导生根 D．获得杂种植株后，可借助病虫感染实验进行新性状表达的鉴定 6．植物细胞工程在农业、医药工业等方面有着广泛的应用，相关叙述正确的是（    ） A．快速繁殖铁皮石斛的过程中，可以改良植物的遗传特性 B．利用植物顶端分生组织培养的脱毒苗具有抗病毒的特点 C．利用花药离体培养获得的玉米幼苗，可直接获得稳定遗传的个体 D．细胞产物的工厂化生产是利用植物细胞培养技术获得次生代谢物 7．下图为动物细胞培养的基本过程，以下叙述正确的是（　　） A．a、b、c、d瓶中的pH一般需要调到酸性条件，以维持细胞生存 B．将组织用胰蛋白酶处理去掉细胞膜上的糖被，制成b瓶中的细胞悬液 C．c、d瓶中的培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、抗生素和动物血清等营养 D．动物细胞培养所用的培养基的成分与植物的不同，但都有有机物 8．将抗癌药物与特异性识别肺癌细胞的单克隆抗体连接，单克隆抗体可精准携带药物靶向杀伤肺癌细胞，减少对正常细胞的损伤。利用小鼠生产该单克隆抗体，需给小鼠注射（    ） A．抗肺癌细胞的抗体 B．肺癌细胞的抗原 C．抗癌药物 D．正常肺部组织细胞 9．我国首次成功克隆了雪域高原濒危的樟木牛和阿沛甲咂牛。下列关于利用体细胞核移植技术进行克隆的叙述，正确的是（    ） A．培养核供体细胞前，需用胰蛋白酶将细胞膜蛋白消化以获得分散的细胞 B．重组细胞和重组胚胎都要放在纯 CO₂的培养箱中培养 C．重组细胞必需培养至原肠胚再进行胚胎移植 D．移植后重组胚胎的发育受代孕母牛的激素影响 10．下图为受精作用及胚胎发育示意图，a、b代表两个发育时期，下列叙述不正确的是（   ） A．①过程发生同源染色体分离 B．②过程通过有丝分裂增殖 C．a时期可分离得到胚胎干细胞 D．②→④细胞分化程度逐渐增大 11．为增加产奶量高的奶牛数量，进行了“试管牛”培育，过程如图。下列叙述正确的是（　　） A．“试管牛”培育的原理是成体的体细胞具有全能性 B．需对良种母牛和良种公牛进行同期发情处理 C．精子采集后不能进行体外培养，应尽快用于体外受精 D．可取囊胚期的滋养层细胞进行性别鉴定 12．下列有关重组DNA技术所需的三种基本工具的描述，正确的是（　　） A．限制性内切核酸酶均能特异性地识别6个核苷酸序列 B．限制酶切割DNA分子一次可断开2个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团 C．有些DNA连接酶既能连接双链DNA片段互补的黏性末端，又能连接双链DNA片段的平末端，从而恢复断开的氢键 D．质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因，便于重组DNA分子的筛选 13．下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（    ） A．若以新鲜洋葱为实验材料，则研磨液过滤后保留沉淀 B．实验过程中加入预冷酒精溶液的作用是纯化DNA C．提取的DNA可溶解在2mol/L的NaCl溶液中 D．二苯胺试剂鉴定DNA时需沸水浴加热冷却后再观察颜色变化 14．下列关于PCR扩增DNA片段及电泳鉴定的叙述，错误的是（    ） A．在凝胶中DNA分子的迁移速率主要和DNA分子的大小、构象等有关 B．耐高温的DNA聚合酶只能从引物的5′端开始连接脱氧核苷酸 C．反应过程中的每一轮循环依次包括变性、复性、延伸三步 D．PCR扩增产物一般可通过琼脂糖凝胶电泳来进行鉴定 15．科学家将含有人溶菌酶基因的表达载体注射到鸡胚细胞中获得转基因鸡，人溶菌酶基因能在鸡的输卵管细胞中特异性表达，最终在鸡蛋中收集人溶菌酶。该过程的核心步骤是（    ） A．获取人溶菌酶基因 B．将人溶菌酶基因导入受体细胞 C．基因表达载体的构建 D．人溶菌酶基因的检测和鉴定 16．基因工程自20世纪70年代兴起后，在农牧业、医药卫生和食品工业等方面得到了飞速的发展。下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（　　） A．将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组，可增加乳汁中乳糖含量 B．作为乳腺生物反应器的动物体内只有乳腺细胞能表达目的基因 C．将牛凝乳酶导入黑曲霉中，再通过工业发酵可生产凝乳酶 D．喷施除草剂后，杂草被杀死而抗除草剂玉米会受到损伤 17．基于 AI（人工智能）的蛋白质设计方法可通过现有蛋白质数据库及机器深度“学习算法”来预测新型蛋白质的结构和功能。下列叙述错误的是（    ） A．AI 预测新型蛋白质的结构和功能依据的原理是中心法则 B．AI 可帮助人们深入了解蛋白质分子结构和功能的关系 C．获得 AI 设计的蛋白质，可通过改造或合成基因来实现 D．AI 可帮助人们高效地设计出自然界没有的蛋白质 18．幼嫩的菊花茎段经过植物组织培养过程可以获得完整的植株，下列有关此过程的叙述，错误的是（    ） A．植物激素在此过程中起调节作用 B．形成的愈伤组织细胞具有细胞的全能性 C．若发生杂菌污染则难以获得目的植株 D．此过程中不会发生细胞的增殖和分化 19．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中，关于倒平板的描述正确的是（    ） ①等培养基冷却至40℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板 ②将皿盖与皿底分开，皿盖先单独倒置在桌面上，再将培养基倒入皿底 ③拔出锥形瓶棉塞后，使锥形瓶瓶口迅速通过火焰 ④配置好的培养基要进行干热灭菌 ⑤将锥形瓶中培养基倒入培养皿，立即盖上皿盖 ⑥等待平板冷却5～10s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上 A．①②③④ B．③⑤⑥ C．③⑤ D．①②④⑥ 20．下图为经过体外受精和胚胎分割、移植培育优质奶牛的过程。下列叙述错误的是（    ） A．体外受精过程中会发生雌雄原核核膜消失现象 B．胚胎移植前需要对受体母牛进行同期发情处理 C．胚胎分割可看作动物无性繁殖或克隆方法之一 D．将①均等分割成8等份的成活率与图示的相同 二、不定项选择题(本题共5小题，每小题3分，共15分，错选不得分，选不全得1分 ) 21．下图表示培养和纯化酵母菌的部分操作步骤。有关叙述不正确的是（    ） A．步骤①操作时，倒好平板后应立即将其倒置，防止冷凝水落在培养基上造成污染 B．步骤②接种环和试管口应先在火焰上灼烧，接种环冷却后再放入试管中蘸取菌液 C．步骤③除第一次划线外，以后每一次划线的起点都是上一次划线的末端 D．步骤④划线结束后在皿盖上标注菌种及接种日期等信息，再放在恒温培养箱中培养 22．紫草富含一种红色的次生代谢产物——紫草宁，具有抗菌、消炎的功效。科研人员利用紫草新生的营养芽经过脱分化获得愈伤组织，再使用液体培养基进行细胞悬浮培养，以获得大量紫草宁。下列有关叙述错误的是（　　） A．对紫草新生的营养芽进行高温灭菌后可用作外植体 B．愈伤组织由具不同结构和功能的一团薄壁细胞组成 C．为获得愈伤组织，培养时需要加入细胞融合诱导剂 D．通过植物细胞培养来生产紫草宁可以不受季节限制 23．如图表示利用治疗性克隆和iPS细胞（诱导多能干细胞）培养技术获得组织器官，并应用于人类疾病治疗的过程。下列有关叙述正确的是（    ） A．卵母细胞常用显微操作去核，胚胎干细胞分离通常需要用胰蛋白酶处理 B．重组细胞的发育需要电刺激等方法激活 C．iPS细胞和胚胎干细胞都有组织特异性 D．两种技术均能解决供体器官的短缺和器官移植出现的排异反应 24．和牛是世界公认的高档肉牛品种，下图是通过胚胎工程培育试管和牛的过程，下列叙述正确的是（    ） A．试管和牛需要在体外受精，在试管中发育成熟，它的产生属于有性生殖 B．试管和牛所采用的技术中包含核移植技术、早期胚胎培养和胚胞移植等 C．为了获得更多的卵母细胞，需用促性腺激素对雌性和牛进行处理 D．从和牛的输卵管冲出的卵子，往往可直接与获能的精子进行体外受精 25．如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径，下列有关叙述正确的是（　　） A．将含目的基因的重组质粒导入植物受体细胞可用农杆菌转化法 B．扩增目的基因时，利用耐高温的DNA连接酶从引物a和引物b起始延伸子链 C．接受人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞不是乳腺细胞 D．基因表达载体的组成一般包括目的基因、标记基因、启动子、终止子、复制原点等 三、非选择题(本题共4小题，共45分) 26．海洋塑料垃圾污染治理与陆地上的白色污染治理不同，受海洋环境限制，人们几乎无法通过传统打捞方式对这些细小的塑料微粒进行广泛收集和处理。开发和使用能在海洋环境中能自行降解的塑料制品替代难降解的塑料制品，是目前公认的解决这一问题唯一有效的途径。这类可降解塑料堆肥需要在微生物作用下发生水解，并且环境中的温度等条件需要满足一定的要求才能快速降解。与陆地环境相比，海洋环境以富含水、高盐、高压、低温、流动和营养稀少为特征。请根据材料回答下列问题： (1)为筛选出能在海洋环境中高效分解纤维素类可降解塑料的微生物，科学家们需要从_____________中提取微生物并在实验室扩大培养，以供筛选。用于筛选和纯化该类微生物的培养基从功能上讲属于________培养基。 (2)扩大培养过程中需要对微生物进行计数，取0.1mL稀释度为104的稀释液涂布，用固体培养基对其培养，每隔24小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止_________________。最后统计的三个平板，菌落数分别是200、180、220，则10g样品中微生物的数量为_______个。该统计结果低于实际活菌值，这是因为___________________________。 27．紫罗兰花色丰富、抗虫性强、种子油富含亚麻酸。为了让油菜具有紫罗兰的诸多优良性状，科研工作者进行了如图1所示实验。回答下列问题： (1)实验人员使用纤维素酶和果胶酶处理紫罗兰下胚轴细胞和油菜下胚轴细胞，其目的是_______。 (2)除了图1中的PEG融合法，还可以采用_______（答出2种方法）等诱导紫罗兰原生质体和油菜原生质体融合。 (3)融合的杂种细胞通过_______过程形成愈伤组织，继续进行培养能够培育出紫罗兰—油菜杂种植物，主要利用的原理是_______。 (4)图2中A、B、C是不同的培养结果，图中_______（填字母）结果在培养过程中一般不需要适当的光照处理。 (5)上述通过植物细胞工程培育紫罗兰—油菜杂种植物的技术的优势体现在_______，培育植物新品种等方面。 28．如图所示为N蛋白胞外段单克隆抗体制备的流程，回答下列问题。 (1)用N蛋白胞外段作为抗原对小鼠进行免疫后，取小鼠脾组织用_____处理，制成细胞悬液，在适宜环境中培养时需要定期更换培养液，目的是_____，在培养的过程中发现大部分B淋巴细胞贴附于瓶壁表面，这样的现象称为_____。 (2)将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，用选择培养基对融合后的细胞进行筛选，获得_____，再将其接种到96孔板上进行克隆化培养和抗体检测，筛选出_____的杂交瘤细胞。 29．赖氨酸是人体细胞不能合成的必需氨基酸。科学家把某种必需氨基酸含量多的蛋白质编码基因（R）导入玉米中，使玉米中赖氨酸的含量提高30%。据下图回答下列问题。 (1)利用PCR技术扩增R基因时，需要在一定的缓冲液中才能进行，其中需要加入酶和激活该酶所需的__________。为了特异性扩增R基因序列，需根据__________设计特异性引物。 (2)在构建基因表达载体时，若为了避免R基因和质粒的自连或反向连接，提高重组效率，应该选择的限制酶是__________。 (3)随着转化方法的突破，农杆菌侵染玉米这种单子叶植物也取得了成功。科研人员从新鲜的玉米叶片上取下的圆形小片与农杆菌共培养，当农杆菌侵染玉米细胞后，能将__________上的T-DNA转移到被侵染的细胞，并且将其整合到__________。 (4)检测R基因是否表达的方法是__________。 (5)在基因工程中若要培养转基因小鼠，将基因表达载体导入受体细胞常用的方法是__________，常用的受体细胞是__________。 第1页，共2页 第1页，共2页 学科网（北京）股份有限公司 $ 《2025-2026学年度下学期期中考试》参考答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 B D C C C D D B D A 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 D B A B C B A D C D 题号 21 22 23 24 25 答案 AD ABC ABD CD ACD 1．B 【详解】A、腌制泡菜利用乳酸菌进行无氧发酵产生乳酸，该过程属于乳酸发酵，A正确； B、腐乳制作中起主要作用的微生物是毛霉，B错误； C、果酒制作依赖酵母菌的无氧呼吸（酒精发酵），将葡萄糖转化为乙醇和CO₂，C正确； D、果醋制作需醋酸菌在有氧条件下产生乙酸，属于需氧发酵，D正确。 故选B。 2．D 【分析】平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面，其操作步骤是：（1）将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红；（2）在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞；（3）将菌种试管口通过火焰达到消灭试管口杂菌的目的；（4）将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种；（5）将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞；（6）将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划3 ~ 5条平行线，盖上皿盖，不要划破培养基；（7）灼烧接种环，冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线，重复上述过程，完成三、四、五区域内划线，注意不要将第五区的划线与第一区划线相连；（8）将平板倒置放在培养箱中培养。 【详解】A、将配制好的马铃薯琼脂培养基放入高压蒸汽灭菌锅内进行灭菌，A错误； B、在酒精灯火焰附近，将培养皿盖打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基倒入培养皿，B错误； C、从第一次划线的末端开始第二次划线，重复该操作，一般做第三、四、五次划线，以便于得到单菌落，C错误； D、将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入恒温培养箱中进行培养，其中设置空平板的目的是检验培养基灭菌是否合格，D正确。 故选D。 3．C 【分析】液体培养基一般用湿热灭菌法，干热灭菌法因温度高可能破坏液体培养基；固体培养基可用干热和湿热灭菌法。 【详解】A、用液体培养基培养目的菌难以在培养基表面形成菌落，A错误； B、培养基通常用湿热灭菌法灭菌，不用干热灭菌法灭菌，B错误； C、未接种的空白平板上长出菌落可能是培养基灭菌不彻底造成的，C正确； D、用稀释涂布平板法进行微生物计数时，由于相邻的两个或多个活菌会共同形成一个菌落，结果往往比实际值低，D错误。 故选C。 4．C 【分析】发酵过程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面。 【详解】A、传统红酸汤发酵主要是乳酸菌厌氧发酵，装坛不装满是为了防止溢出，A错误； B、传统发酵技术不需要严格的灭菌，B错误； C、传统发酵技术和发酵工程的菌种都可以来自天然存在的菌种，除此之外发酵工程的菌种来源还可以是诱变育种或基因工程雨中获得，C正确； D、发酵工程生产时排出的废弃物对环境污染小，D错误。 故选C。 5．C 【分析】由题图信息分析可知，图示为植物体细胞杂交过程，首先去壁获得原生质体，其次诱导原生质体融合形成杂种细胞，最后由植物组织培养技术将杂种细胞培育成杂种植株。 【详解】A、制备原生质体时，需用纤维素酶和果胶酶处理植物组织切块，去除细胞壁，A正确； B、细胞融合依赖于生物膜的流动性，原生质体融合成功的标志是杂种细胞长出细胞壁，B正确； C、由愈伤组织到杂种植株培养过程中，诱导生芽时细胞分裂素与生长素的比例较高，而诱导生根时两者比例较低，C错误； D、获得杂种植株后，可借助病虫感染实验进行新性状表达的鉴定，D正确。 故选C。 6．D 【分析】植物组织培养：是快速繁殖植物的技术，原理是植物细胞的全能性。在快速繁殖过程中，遗传物质一般不发生改变，不能改良植物的遗传特性。 【详解】A、快速繁殖铁皮石斛的过程属于无性繁殖，无性繁殖能保持母本的优良性状，不会改良植物的遗传特性。因为遗传物质在无性繁殖过程中基本保持不变，没有基因的重新组合等改变遗传特性的因素，A错误； B、利用植物顶端分生组织培养的脱毒苗，是因为顶端分生组织病毒极少甚至无病毒，但脱毒苗本身并不具有抗病毒的特性，它只是去除了原本植株体内的病毒，而不是获得了抗病毒的能力，B错误； C、利用花药离体培养获得的玉米幼苗是单倍体，单倍体植株长得弱小，而且高度不育，不能直接获得稳定遗传的个体，需要经过人工诱导染色体加倍后才能得到可稳定遗传的个体，C错误； D、细胞产物的工厂化生产就是利用植物细胞培养技术，将植物细胞在体外培养，通过控制培养条件等，使细胞产生次生代谢物，然后进行提取等操作实现工厂化生产，D正确。 故选D。 7．D 【分析】动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。一般来说，动物细胞培养需要满足的条件有：营养；无菌、无毒的环境；适宜的温度、pH和渗透压；气体环境。 【详解】A、多数动物细胞生存的适宜pH为7.2～7.4，因此 a、b、c、d瓶中的pH一般需要调到7.2～7.4之间，以维持细胞生存，A错误； B、将剪碎的组织用胰蛋白酶处理一段时间，去掉组织细胞间隙中的弹性纤维等蛋白质，使其分散成单个细胞，制成b瓶中的细胞悬液，B错误； C、c、d瓶中的培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等营养，C错误； D、动物细胞与植物细胞对营养的需求存在差异，因此动物细胞培养所用的培养基的成分与植物的不同，但都有有机物，D正确。 故选D。 8．B 【详解】制备单克隆抗体时需要向实验动物注射肿瘤细胞表面的抗原，以刺激动物体内产生免疫的B淋巴细胞，为杂交瘤细胞的获取提供条件，ACD不符合题意，B符合题意。 故选B。 9．D 【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。 哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。由于动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。 【详解】A、培养核供体细胞前，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间，将组织分散为单个细胞。处理时间不宜过长，以免损伤细胞，A错误； B、动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。在进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，并将它们置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养，B错误； C、重组细胞培养至桑葚胚或囊胚再进行胚胎移植，C错误； D、移植后重组胚胎的发育在代孕母牛子宫中进行，受代孕母牛的激素影响，D正确。 故选D。 10．A 【分析】胚胎发育的过程：受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚→幼体。在囊胚时细胞初步分化为内细胞团和滋养层。 【详解】A、同源染色体分离发生在减数分裂，①过程是受精作用。A错误； B、②是受精卵的增殖，受精卵是体细胞通过有丝分裂增殖。B正确； C、a是囊胚，其内细胞团可以分离得到胚胎干细胞。C正确； D、桑椹胚没有细胞分化，囊胚有初步的细胞分化，原肠胚进一步分化。D正确。 故选A。 11．D 【详解】A、试管牛培育的核心技术是体外受精和胚胎移植，其原理是有性生殖过程中基因的重组，A错误； B、受体母牛需与供体母牛同期发情处理，以保证胚胎移植后正常发育，B错误； C、精子采集后，需在体外进行获能处理，才能在体外完成受精过程，C错误； D、胚胎移植前，可取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定，滋养层细胞未来形成胎膜和胎盘，这样既不影响内细胞团发育又不会损伤胚胎，D正确。 故选D。 12．B 【详解】A、大多数限制性内切核酸酶识别6个核苷酸序列，也有部分限制酶识别4个、5个或8个核苷酸序列，并非所有限制酶都识别6个核苷酸序列，A错误； B、DNA为双链结构，限制酶切割一个识别位点时，会分别断裂两条DNA单链上的1个磷酸二酯键，共断开2个磷酸二酯键，每个磷酸二酯键断裂会产生1个游离的磷酸基团，因此共产生2个游离的磷酸基团，B正确； C、DNA连接酶的作用是连接双链DNA片段之间的磷酸二酯键，氢键可通过碱基互补配对自动形成，不需要酶催化；C错误； D、质粒的标记基因通常是抗生素抗性基因，而非抗生素合成基因，可通过含相应抗生素的选择培养基筛选出导入重组DNA的受体细胞，D错误。 13．A 【分析】DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理，可以初步分离DNA与蛋白质。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2 mol/L的NaCl溶液。在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。 【详解】A、以新鲜洋葱为实验材料，研磨液过滤后保留滤液，A错误； B、DNA不溶于酒精溶液，但某些蛋白质溶于酒精，实验过程中加入预冷酒精溶液的作用是纯化DNA，B正确； C、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2 mol/L的NaCl溶液，C正确； D、DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热，冷却后呈蓝色，因此二苯胺试剂鉴定DNA时需沸水浴加热冷却后再观察颜色变化，D正确。 故选A。 14．B 【分析】PCR扩增：目的基因DNA受热变性后解为单链，引物与单链相应互补序列结合；然后以单链DNA为模板，在DNA聚合酶作用下进行延伸，如此循环多次。 【详解】A、在凝胶中DNA分子的迁移速率主要和DNA分子的大小、构象等有关，一般DNA分子越大，迁移越慢，A正确； B、耐高温的DNA聚合酶只能从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸，B错误； C、反应过程中的每一轮循环依次包括变性（将双链DNA解聚为单链）、复性（引物与模板链结合）、延伸（合成新的DNA链）三步，C正确； D、PCR扩增产物一般可通过琼脂糖凝胶电泳来进行鉴定，根据不同DNA分子迁移的结果进行鉴别，D正确。 故选B。 15．C 【分析】基因工程的主要四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。基因工程的核心工作就是让目的基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代，即需要构建基因表达载体。 【详解】A、获取人溶菌酶基因可以从基因库中进行筛选，不属于基因工程的核心步骤，A错误； B、构建好的基因表达载体需要通过一定的方法才能进入受体细胞，不属于基因工程的核心步骤，B错误； C、构建基因表达载体是为了让目的基因在受体细胞内稳定存在并遗传，同时能够表达和发挥作用，是基因工程的核心工作，C正确； D、人溶菌酶基因的检测和鉴定是检查转基因鸡是否成功的一步，D错误。 故选C。 16．B 【详解】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【点睛】A、将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组，可降低乳汁中乳糖含量，A错误； B、作为乳腺生物反应器的动物体内所有细胞都含有目的基因，但是只有乳腺细胞才能表达目的基因，B正确； C、将牛凝乳酶基因导入黑曲霉中，再通过工业发酵可生产凝乳酶，C错误； D、抗除草剂玉米含有抗性基因，则喷施除草剂后，杂草被杀死而抗除草剂玉米不会受到损伤，D错误； 故选B。 17．A 【分析】蛋白质的结构与其功能密切相关，结构决定功能是生物学的核心原则之一。蛋白质的结构具有多层次性（一级、二级、三级、四级结构），每一层结构的变化都会影响其功能，甚至导致功能异常。 【详解】A、AI预测蛋白质结构和功能主要基于机器学习算法和已有数据库，而非中心法则。中心法则描述遗传信息的传递，并未直接涉及蛋白质结构预测的原理，A错误； B、AI通过分析大量数据，可揭示蛋白质结构与功能间的关联，帮助深入理解二者关系，B正确； C、蛋白质由基因控制合成，通过基因改造或人工合成基因可实现AI设计的蛋白质表达，C正确； D、AI能利用算法生成非天然存在的蛋白质结构，提高设计效率，D正确。 故选A。 18．D 【分析】植物组织培养过程中，离体的细胞在激素调控下经历脱分化和再分化，形成完整植株。 【详解】A、植物激素（如生长素和细胞分裂素）调节脱分化和再分化过程，A正确； B、愈伤组织细胞仍保留全能性，能通过再分化发育为植株，B正确； C、杂菌污染会争夺营养并抑制植物细胞生长，导致培养失败，C正确； D、脱分化需细胞增殖形成愈伤组织，再分化需细胞分化为根、芽等结构，D错误。 故选D。 19．C 【分析】倒平板操作的步骤：（1)将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞；（2）右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰；（3）用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的血盖；（4）等待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使盖在下、皿底在上，这样可以防止皿盖上的水分滴到培养基上造成培养基的污染。 【详解】①培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，防止杂菌污染，①错误； ②倒平板时，灭过菌的培养皿放在酒精灯火焰旁，不能将皿盖先单独倒置在桌面上，而是将培养皿打开一个缝隙，将培养基倒入皿底，将皿盖单独倒置在桌面上会造成杂菌污染，②错误； ③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰，高温防止杂菌污染，③正确； ④方法不对，配置好的培养基要进行高压蒸汽灭菌，④错误； ⑤倒平板时，灭过菌的培养皿在酒精灯火焰旁，左手将培养皿打开一个缝隙，右手将培养基倒入皿底，左手立即盖上皿盖，⑤正确； ⑥等待平板冷却5～10分钟，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，⑥错误。 故选C。 20．D 【详解】A、体外受精过程中，精子和卵子受精时，会发生雌雄原核的融合，在此过程中核膜会消失，A正确； B、胚胎移植前需要对受体母牛进行同期发情处理，使受体母牛的生理状态与供体母牛相同，有利于胚胎的着床和发育，B正确； C、胚胎分割时由于这些个体来自同一个受精卵，遗传物质完全相同，可看作动物无性繁殖或克隆方法之一，C正确； D、胚胎分割时，分割的份数越多，胚胎的成活率越低，将①均等分割成8等份，其成活率比分割成2等份的低，D错误。 21．AD 【分析】题图分析：①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养。 【详解】A、倒完平板后立即盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，A错误； B、步骤②接种环和试管口应先在火焰上灼烧，接种环冷却后再放入试管中蘸取菌液，以免接种环温度过高，杀死菌种，B正确； C、步骤③多个方向划线，除第一次划线外，以后每一次划线的起点都是上一次划线的末端，C正确； D、步骤④划线结束后在皿盖底部标注菌种及接种日期等信息，再放在恒温培养箱中培养，D错误。 故选AD。 22．ABC 【分析】1、植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 2、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 【详解】A、植物组织培养过程中需要对外植体就行消毒就可以，外植体承受不了灭菌的条件（如温度），A错误； B、愈伤组织是有已分化的细胞经过脱分化，即失去其特有的结构和功能，转变成未分化的细胞，进而形成不定形的薄壁组织团块，B错误； C、愈伤组织的获得需要一定的营养条件，需要激素诱导，需要无菌环境，不需要细胞融合诱导剂，植物体细胞杂交、动物细胞融合才需要细胞融合诱导剂，C错误； D、细胞产物的工厂化生产在实验室中进行，不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制，D正确。 故选ABC。 23．ABD 【分析】胚胎干细胞是存在于早期胚胎中具有分化为成年动物体任何一种类型的细胞。 【详解】A、卵母细胞去核常采用显微操作法，将动物组织处理为单个细胞，可利用胰蛋白酶或胶原蛋白酶，A正确； B、重组细胞需要电刺激或乙醇等方法激活，才能完成细胞分裂和发育进程，体外胚胎发育的气体条件与动物细胞培养类似，需要5%的CO2维持培养液的pH，B正确； C、iPS细胞和胚胎干细胞都具有发育为成年动物体内的任何一种类型细胞的能力，不具有组织特异性，C错误； D、两种技术均利用病人自身的细胞，故得到的组织器官移入病人体内，不会引起免疫排斥反应，同时解决了供体器官短缺的问题，D正确。 故选ABD。 24．CD 【分析】1、体外受精技术主要包括:卵母细胞的采集、精子的获取和体外受精等步骤。2、精子的获取:①大型动物使用假阴道法;②体型小、易控制的用手握法;③野生或经济动物用电刺激法。 【详解】A、试管和牛需要在体外受精，早期胚胎在试管中发育，后胚胎移植形成试管动物，经历过受精作用属于有性生殖，A错误； B、试管和牛所采用的技术中包含早期胚胎培养和胚胞移植等，不含核移植技术，克隆技术应用核移植技术，B错误； C、胚胎工程中，常用促性腺激素对雌性和牛进行处理，进行超数排卵，C正确； D、从输卵管中冲出的卵子已经成熟，可直接与获能的精子完成体外受精，D正确。 故选CD。 25．ACD 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、将含目的基因的重组质粒导入植物受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和花粉管通道法，A正确； B、利用PCR技术扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶延伸子链，B错误； C、接受人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞是受精卵，因为受精卵的全能性最高，C正确； D、一个基因表达载体的组成除了目的基因外，还需具备启动子、终止子（两者控制基因转录的开始和结束）、复制原点、标记基因等，D正确。 故选ACD。 26．(1) 富含纤维素环境 选择 (2) 因培养时间不足而遗漏菌落的数目 2.0×108 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 【分析】1、从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。筛选目的菌的培养基应该是选择培养基，培养基制作完成后进行灭菌处理，所有操作应该确保无菌操作。 2、常用的固体培养基上的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。 3、培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。 【详解】（1）该种微生物能高效分解纤维素类可降解塑料，富含纤维素环境中该微生物含量较多，故需要从富含纤维素环境中提取微生物并在实验室扩大培养，以供筛选。用于筛选和纯化该类微生物的培养基属于选择培养基。 （2）对微生物进行计数时，每隔24小时统计一次固定培养基上的菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。计算微生物的数量应取三个平板的平均值，10g样品中微生物的数量为 (200+180+220)÷3÷0.1×104×10=2.0×108个。该统计结果低于实际活菌值。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 27．(1)利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，形成原生质体 (2)电融合法、离心法、高Ca2+-高pH融合法 (3) 脱分化 植物细胞的全能性 (4)A (5)打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 【分析】由图可知，科学家通过植物体细胞杂交技术实现让油菜具有紫罗兰的诸多优良性状，原理是细胞膜具有一定的流动性和植物细胞的全能性。 【详解】（1）植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，利用纤维素酶和果胶酶可以去除细胞壁，形成原生质体。 （2）诱导植物原生质体融合的方法有物理法和化学法，物理法包括电融合法、离心法，化学法包括PEG融合法、高Ca2+-高pH融合法 （3）①离体的植物组织通过脱分化形成愈伤组织。 ②杂种细胞发育成完整个体利用的是植物组织培养技术，原理是植物细胞的全能性。 （4）脱分化不需要光照，再分化需要光照。 （5）植物体细胞杂交技术使得具有生殖隔离的两种植物得以基因交流，所以打破了生殖隔离，实现了远缘杂交育种。 28．(1) 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害 细胞贴壁 (2) 杂交瘤细胞 足够数量能产生N蛋白胞外段抗体 【详解】（1）获取经过免疫的小鼠脾组织细胞需要分散为单个细胞才能培养，该过程要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理；培养过程中为了清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，故需要定期更换培养液；在培养的过程中发现大部分B淋巴细胞贴附于瓶壁表面，这样的现象称为贴壁生长（细胞贴壁）。 （2）诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，可用特定的选择培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，再将其接种到96孔板上进行克隆化培养和抗体检测，筛选出足够数量能产生N蛋白胞外段抗体的杂交瘤细胞，进行体内或体外培养，最终分离得到所需的单克隆抗体。 29．(1) Mg2+ R基因两端的碱基序列 (2)PstⅠ、EcoRⅠ (3) Ti质粒 玉米细胞染色体DNA (4)抗原-抗体杂交 (5) 显微注射法 受精卵 【分析】基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程的工具有限制酶、DNA连接酶、基因的载体。基因工程的基本操作程序：（1）目的基因的获取。（2）基因表达载体的构建。（3）将目的基因导入受体细胞。（4）目的基因的检测和鉴定。 【详解】（1）PCR技术需要加入耐热的DNA聚合酶，激活该酶需要Mg2+。为了将R基因从DNA序列中扩增出来，需要根据R基因两端的特定碱基序列合成引物，从而将两个引物之间的R基因扩增出来。 （2）构建基因表达载体时，需要用限制酶切割质粒和目的基因，然后用DNA连接酶连接目的基因和质粒。为了避免R基因和质粒的自连或反向连接，应选择两种不同的限制酶去切割质粒和目的基因。图中T-DNA区域只有PstⅠ、EcoRⅠ两种限制酶切口，而R基因左边可被PstⅠ切割、右边可被EcoRⅠ切割，所以可以选择PstⅠ、EcoRⅠ两种限制酶。 （3）农杆菌转化法进行时，农杆菌要将Ti质粒上的T-DNA转移到被侵染的细胞，并且将其整合到玉米的染色体DNA上。 （4）检测R基因是否表达，需要检测R基因控制的蛋白质是否合成，可以用抗原-抗体杂交技术，观察是否产生杂交带。 （5）进行转基因动物操作时，需要用显微注射技术将目的基因转入受体细胞，为了发育出转基因小鼠，应选择受精卵作为受体细胞。 答案第1页，共2页 答案第1页，共2页 学科网（北京）股份有限公司 $