精品解析：四川省自贡市蜀光中学2025—2026学年高二下学期期末模拟考试生物试题

蜀光中学高2024级高二下学期期末模拟考试 生物试题 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 一、选择题：共15个小题，每小题3分，共45分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1. 研究发现，人偏肺病毒(hMPV)与肺炎链球菌均可引发秋冬季呼吸道感染，症状均表现为持续咳嗽、胸闷气短等。下列叙述正确的是（　　） A. hMPV的增殖依赖于宿主细胞体现了生命活动离不开细胞 B. hMPV与肺炎链球菌所属生命系统结构层次均为细胞和个体 C. 肺炎链球菌与hMPV的结构差异体现了细胞的多样性 D. 可以利用抑制病毒细胞壁合成的药物治疗hMPV感染 2. 在我国一些地区有端午节吃绿豆糕和粽子的习俗。下列叙述正确的是（　　） A. 绿豆糕中含有人体必需的钾和锌等微量元素 B. 粽子中的淀粉可以被人体细胞直接吸收 C. 绿豆糕中的脂肪在人体内可以转化为葡萄糖 D. 粽子中蛋白质的基本组成单位是核苷酸 3. 下列关于蛋白质及其功能的叙述，错误的是（ ） A. 红细胞内的血红蛋白可以运输血液中的氧 B. 胰岛素可以降低血液中葡萄糖的浓度 C. 体液中的抗体可以与抗原特异性结合 D. Na⁺通道可以维持神经细胞内外Na⁺浓度差 4. 结构与功能相适应是细胞的基本特征。下列说法错误的是（ ） A. 小肠上皮细胞绒毛有利于机体增强对营养物质的吸收 B. 线粒体内膜形成嵴并附着大量酶为能量转化提供场所 C. 磷脂和蛋白质等构成的细胞膜保证物质的选择性运输 D. 染色质高度螺旋形成的染色体有利于遗传信息的转录 5. 线粒体功能障碍可引发多种疾病。通过在靶细胞膜表面表达结合蛋白，可将外源正常线粒体精准移植至靶细胞内，从而有望治疗相关疾病。研究发现，部分外源线粒体可在靶细胞中“存活”，且出现与内源线粒体融合并增殖的现象。下列叙述错误的是（　　） A. 靶细胞可特异性识别外源线粒体，并通过转运蛋白将其移至细胞内 B. 外源线粒体和自身功能障碍的线粒体均有可能被靶细胞溶酶体降解 C. 破坏由蛋白质纤维构成的细胞骨架，对线粒体的融合有影响 D. 线粒体增殖所需的蛋白质大部分由细胞核DNA指导合成 6. 耐寒黄花苜蓿的基因M编码的蛋白M属于水通道蛋白家族，将基因M转入烟草植株可提高其耐寒能力。下列叙述错误的是（　　） A. 细胞内的结合水占比增加可提升植物的耐寒能力 B. 低温时，水分子通过与蛋白M结合转运到细胞外 C. 蛋白M增加了水的运输能力，但不改变水的运输方向 D. 水通道蛋白介导的跨膜运输不是水进出细胞的唯一方式 7. 猕猴桃鲜果储藏条件如下表： 果实含水量/% 温度/℃ O2体积分数/% 湿度/% 约85 1~3 2~4 90~95 下列说法错误的是（　　） A. 高湿度可减少果实水分蒸发以利于果实保鲜 B. 低温抑制酶活性来降低果实细胞的呼吸速率 C. O2含量低可抑制猕猴桃细胞有氧呼吸第三阶段 D. 有氧呼吸消耗水的量大于产生量需要人工补水 8. 肉类在低温下可经过高盐腌制、晾挂、发酵（乳酸菌、酵母菌为主）后延长保存期。下列说法错误的是（　　） A. 高盐腌制提高了细胞外渗透压使细胞脱水 B. 其中微生物大多数属于耐盐或嗜盐微生物 C. 发酵产生的乳酸可抑制杂菌生长强化防腐 D. 乳酸菌、酵母菌发酵过程中均可产生CO2 9. 某同学用苹果制备果醋前欲对果实品质进行检测。下列叙述正确的是（　　） A. 检测果实细菌污染状况时，需将稀释液滴到涂布器上再进行涂布 B. 测定果实淀粉酶活性时，为保持酶活性需在4℃下进行酶促反应 C. 室温下加入斐林试剂测定砖红色沉淀量，以分析果实糖含量 D. 探究果实储存状况时，可用CO2和O2传感器测定果实呼吸速率 10. 兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过组织培养技术获得脱毒苗，操作流程如图。下列叙述正确的是（ ） A. ①为脱分化过程，1号培养基中的愈伤组织是排列规则的薄壁组织团块 B. ②为再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组 C. 百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，可以作为该研究中的外植体 D. 3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值大于1 11. 某种营养缺陷型细菌在完全培养基上能生长，但在基本培养基上需添加组氨酸才能生长。将等量的营养缺陷型菌株涂布到两种培养基上（基本培养基中添加了少量组氨酸供细菌繁殖，但不足以形成菌落），再分别放入含低浓度和高浓度物质M的滤纸片，培养一段时间后菌落的生长情况如图。下列叙述正确的是（ ） A. 固体培养基配制后需要采用干热灭菌法进行灭菌 B. 牛肉膏蛋白胨培养基能用于培养该营养缺陷型细菌 C. 物质M有诱变作用，菌落a中细菌合成蛋白质时不需要组氨酸 D. 物质M有抑制作用，抑菌圈边缘的菌落多数能在基本培养基上生长 12. 动物体细胞核移植技术在畜牧业、医药卫生等领域有着广泛的应用前景。下列叙述错误的是（　　） A. 若卵母细胞去核不完全，可能会导致重构胚细胞中染色体数目改变 B. 胚胎移植前，需要对核移植获得的重构胚进行遗传筛查和性别鉴定 C. 胚胎移植前，需要对受体进行处理，使其生理状态适合胚胎发育 D. 克隆动物的核遗传物质与供体相同，但性状与供体不完全相同 13. 将人类免疫球蛋白(Ig)基因导入小鼠胚胎干细胞后，经核移植技术获得的转基因小鼠可用于制备单克隆抗体。下列叙述正确的是（　　） A. 核移植受体卵母细胞培养成熟的标志是排出第二极体 B. 人Ig基因在小鼠胚胎干细胞不表达是因为未接受抗原刺激 C. 免疫的B淋巴细胞无需克隆化培养即可与小鼠骨髓瘤细胞融合 D. 将选择培养基上存活的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养获得单克隆抗体 14. 抗虫和耐除草剂玉米双抗12-5是我国自主研发的转基因品种。为给监管转基因生物安全提供依据，采用PCR方法进行目的基因监测，反应程序如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 预变性过程可促进模板DNA边解旋边复制 B. 后延伸过程可使目的基因的扩增更加充分 C. 延伸过程无需引物参与即可完成半保留复制 D. 转基因品种经检测含有目的基因后即可上市 15. 生物技术就像一把“双刃剑”，它既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来潜在的危害。下列叙述错误的是（ ） A. 生物武器是用病毒类、干扰素及生化毒剂类等来形成杀伤力 B. 反对设计试管婴儿的原因之一是避免有人滥用此技术选择性设计婴儿 C. 研究转基因农作物时应采取多种方法防止转基因花粉的传播，避免基因污染 D. 干细胞培养应用前景广泛，但也可能面临一些问题，如存在导致肿瘤发生的风险 二、非选择题：共5个小题，共55分。 16. 龙胆花处于低温（16℃）下30min内发生闭合，而转移至正常生长温度（22℃），光照条件下30min内重新开放。花冠近轴表皮细胞的膨压（原生质体对细胞壁的压力）增大能促进龙胆花的开放，水通道蛋白在该过程中发挥了重要作用。其相关机理如图所示。 （1）水分子进出龙胆花花冠近轴表皮细胞主要是指水经过___________进出液泡的过程。据图可知，被激活的GsCPK16能促使水通道蛋白___________，进而使水通道蛋白运输水的能力增强。水通道蛋白运输水能力的改变，体现了细胞膜的_______________功能特性。 （2）实验发现，龙胆花由低温转移至正常生长温度，给予光照的同时向培养液中添加适量的钙螯合剂（可与Ca2+结合形成稳定的络合物），龙胆花重新开放受到抑制。据图推测，光刺激可加速龙胆花重新开放的机理是_________________________________________________。 （3）为了验证上述推测，可在（2）中实验的基础上另设一组相同实验，添加适量的______________，相同条件培养并观察、计时，若龙胆花重新开放时间______________________（填“缩短”、“延长”或“不变”），则说明上述推测是正确的。 17. 强光辐射下植物体吸收的光能过剩，会破坏光合结构导致光合功能下降，CibHLH1基因与高山植物神农香菊应对强光辐射有关，为研究其作用机制，科研小组从神农香菊中克隆出CibHLH1基因，构建转CibHLH1基因烟草株系（B1、B2）和转空载体烟草株系（EV），测定了它们和野生型烟草株系（WT）的叶绿素含量（见下图）以及相关光合参数（见下表）。请回答： 株系 最大净光合速率（μmol·m-2.s-1） 光补偿点（μmol·m-2.s-1） 光饱和点（μmol·m-2.s-1） WT 8.28 12.11 392.17 EV 8.35 11.98 392.1 B1 5.13 24.66 315.85 B2 4.98 23.38 314.69 注：光补偿点指光合作用吸收的CO2量与呼吸作用释放的CO2量相等时的光照强度 光饱和点指光照强度增加到某一数值后光合作用速率不再继续提高时的光照强度 （1）本实验构建烟草株系EV的目的是________。 （2）据表可知，在光照强度22.46μmol·m-2.s-1环境中B1株系________（填“能”或“不能”）正常生长。综合图、表分析，400μmol·m-2.s-1光照强度下，光能利用率更高的两个株系是________，判断依据是________（答出2点即可）。 （3）综上，CibHLH1基因可________（填“减弱”或“增强”）神农香菊对强光辐射的适应能力，此功能是通过________来实现的。 18. 传统纺织业依赖石油基织物和化学染色工艺，导致环境被严重污染。细菌纤维素（BC）是一种由微生物合成的天然高分子材料，被视为石油基织物的环保替代品，但因其呈白色，后续染色工艺可能引入新的污染负担。为解决这一问题，科研人员开发了一种“一锅法”共培养平台，将BC的生物合成与天然色素的生成合二为一，通过微生物共培养实现"边织边染"的彩色BC绿色合成，流程如图所示。回答下列问题： （1）木醋杆菌是一种醋酸菌，对其进行培养时，需提供的气体条件是___________________，经过程①构建了BC高产菌株KXBC，仅通过检测BC合成相关基因的表达量___________（填“能”或“不能”）证明该菌株构建成功。 （2）科研人员对大肠杆菌MG1655菌株进行了一系列改造，过程②敲除了抑制色氨酸合成的相关基因，过程③④用____________处理大肠杆菌细胞，使细胞处于一种________________的生理状态，然后导入脱氧紫罗兰素合成质粒。与对照菌株相比，MGDVIO8菌株的脱氧紫罗兰素产量提高了1.72倍，从代谢角度（不考虑酶）推测其原因可能是____________________________________________________。 （3）菌株KXBC和MGDVIO8在“一锅法”共培养平台中必须克服许多不兼容性，如果同时接种，菌株KXBC、几乎无法生产BC，可采用_____________________________的培养策略以有效缓解菌株间的竞争。 19. 异源器官移植是替代受损或衰竭器官的有效方法。我国科学家通过将红色荧光标记的人诱导多能干细胞（iPSCs）注射到猪胚胎中，成功借助猪胚胎培育出人源性肾脏。为提高iPSCs在猪胚胎中的存活率，研究人员将抗凋亡基因和促增殖基因转入iPSCs，并诱导两者高表达，机制如图1所示。 回答下列问题： （1）iPSCs具有_____________的潜能，在异种器官培育中发挥着关键作用。据图1分析，获得转基因iPSCs细胞后，需将其培养在含______________的培养液中，从而促进抗凋亡蛋白与促增殖蛋白的大量表达。 （2）人源性肾脏的嵌合体胚胎培育过程如图2所示。先将转基因iPSCs注入敲除P基因和M基因的早期胚胎中获得嵌合体胚胎，培养至_____________________期，再移植至代孕母猪体内，移植前需对代孕母猪进行同期发情处理，目的是_________________________________________________。 （3）对胚胎进行解剖观察，观察胚胎中________________________的分布可知iPSCs参与形成嵌合体胚胎的哪些组织器官。结果发现，人细胞绝大部分位于肾脏，而胚胎的其余部分则基本由猪细胞组成，形成该结果的原因是_________________________________________________________。 20. 腐胺是重要的生物多胺，在人体许多生理过程中具有重要作用，但环境中过量的腐胺会危害人体健康。科研人员按照图示原理，利用基因工程技术构建生物传感器来实现腐胺的检测。相关限制酶的识别序列为EcoRⅠ（）、XbaⅠ（）、SpeⅠ（）、PstⅠ（）。回答下列问题： （1）启动子B是______型启动子，当有PuuR蛋白存在时，便不能与______识别结合，导致GFP基因不能表达；当环境中有腐胺时，生物传感器可以发出绿色荧光，原因是______。 （2）构建重组质粒时，用限制酶______处理质粒1、用限制酶______处理质粒2，然后再用DNA连接酶连接。导入大肠杆菌后，在含有腐胺和氨苄青霉素的培养基上能发绿色荧光的______（填“一定”或“不一定”）是含有重组质粒的工程菌，原因是______。 （3）科研人员进一步将工程菌中的重组质粒进行了如下图（局部）所示的优化处理： 与优化前相比，优化后的工程菌检测灵敏度更高、荧光现象更明显，据图推测，荧光现象更明显的原因是______。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 蜀光中学高2024级高二下学期期末模拟考试 生物试题 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 一、选择题：共15个小题，每小题3分，共45分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1. 研究发现，人偏肺病毒(hMPV)与肺炎链球菌均可引发秋冬季呼吸道感染，症状均表现为持续咳嗽、胸闷气短等。下列叙述正确的是（　　） A. hMPV的增殖依赖于宿主细胞体现了生命活动离不开细胞 B. hMPV与肺炎链球菌所属生命系统结构层次均为细胞和个体 C. 肺炎链球菌与hMPV的结构差异体现了细胞的多样性 D. 可以利用抑制病毒细胞壁合成的药物治疗hMPV感染 【答案】A 【解析】 【详解】A、hMPV是病毒，无细胞结构，其增殖需在宿主细胞内完成，依赖宿主细胞的物质和能量，体现了生命活动离不开细胞的基本观点，A正确； B、hMPV（病毒）不属于任何生命系统结构层次（因其无细胞结构），而肺炎链球菌（原核生物）属于细胞层次和个体层次，B错误； C、肺炎链球菌为原核细胞构成的生物，而hMPV无细胞结构，二者结构差异体现的是生物类型的多样性（病毒与非细胞生物、原核生物的差异），并非“细胞的多样性”（细胞多样性指真核、原核细胞等差异），C错误； D、hMPV是病毒，无细胞壁结构，因此抑制细胞壁合成的药物（如青霉素）对其无效，该类药物仅对细菌（如肺炎链球菌）有效，D错误。 故选A。 2. 在我国一些地区有端午节吃绿豆糕和粽子的习俗。下列叙述正确的是（　　） A. 绿豆糕中含有人体必需的钾和锌等微量元素 B. 粽子中的淀粉可以被人体细胞直接吸收 C. 绿豆糕中的脂肪在人体内可以转化为葡萄糖 D. 粽子中蛋白质的基本组成单位是核苷酸 【答案】C 【解析】 【详解】A、钾属于组成细胞的大量元素，A错误； B、淀粉是多糖，属于生物大分子，需要被消化水解为葡萄糖才能被人体细胞吸收，无法直接被细胞吸收，B错误； C、人体内糖类、脂肪、蛋白质三大营养物质可相互转化，脂肪经过代谢过程可以转化为葡萄糖，C正确； D、蛋白质的基本组成单位是氨基酸，核苷酸是核酸的基本组成单位，D错误。 3. 下列关于蛋白质及其功能的叙述，错误的是（ ） A. 红细胞内的血红蛋白可以运输血液中的氧 B. 胰岛素可以降低血液中葡萄糖的浓度 C. 体液中的抗体可以与抗原特异性结合 D. Na⁺通道可以维持神经细胞内外Na⁺浓度差 【答案】D 【解析】 【详解】A、红细胞内的血红蛋白属于具有运输功能的蛋白质，可运输血液中的氧，部分还可运输二氧化碳，A正确； B、胰岛素的化学本质是蛋白质，是人体唯一可以降低血糖的激素，可通过促进组织细胞摄取、利用、储存葡萄糖，降低血液中葡萄糖浓度，B正确； C、抗体的化学本质为免疫球蛋白，属于具有免疫功能的蛋白质，能够与抗原发生特异性结合，C正确； D、Na⁺通道属于通道蛋白，介导Na⁺顺浓度梯度的协助扩散，无法维持Na⁺浓度差；神经细胞内外Na⁺浓度差依靠钠-钾泵的主动运输过程维持，D错误。 4. 结构与功能相适应是细胞的基本特征。下列说法错误的是（ ） A. 小肠上皮细胞绒毛有利于机体增强对营养物质的吸收 B. 线粒体内膜形成嵴并附着大量酶为能量转化提供场所 C. 磷脂和蛋白质等构成的细胞膜保证物质的选择性运输 D. 染色质高度螺旋形成的染色体有利于遗传信息的转录 【答案】D 【解析】 【详解】A、小肠上皮细胞的绒毛可大幅增大细胞膜表面积，膜面积越大，可容纳的转运蛋白等结构越多，能显著提升营养物质的吸收效率，A正确； B、线粒体内膜向内折叠形成嵴，既增大了内膜面积，又为有氧呼吸第三阶段相关的酶提供了附着位点，有氧呼吸第三阶段可完成有机物化学能到ATP中活跃化学能的转化，因此为能量转化提供了场所，B正确； C、细胞膜主要由磷脂和蛋白质构成，磷脂双分子层作为基本支架允许脂溶性物质通过，膜上的转运蛋白可特异性协助特定物质跨膜运输，共同使细胞膜具有选择透过性，保证了物质的选择性运输，C正确； D、转录过程需要DNA解旋暴露模板链，而染色质高度螺旋形成染色体后，DNA被紧密包裹无法解旋，不利于遗传信息的转录，该结构特点的意义是便于细胞分裂时遗传物质的平均分配，D错误。 5. 线粒体功能障碍可引发多种疾病。通过在靶细胞膜表面表达结合蛋白，可将外源正常线粒体精准移植至靶细胞内，从而有望治疗相关疾病。研究发现，部分外源线粒体可在靶细胞中“存活”，且出现与内源线粒体融合并增殖的现象。下列叙述错误的是（　　） A. 靶细胞可特异性识别外源线粒体，并通过转运蛋白将其移至细胞内 B. 外源线粒体和自身功能障碍的线粒体均有可能被靶细胞溶酶体降解 C. 破坏由蛋白质纤维构成的细胞骨架，对线粒体的融合有影响 D. 线粒体增殖所需的蛋白质大部分由细胞核DNA指导合成 【答案】A 【解析】 【详解】A、线粒体属于较大的细胞器，其进入靶细胞的方式为胞吞，依赖细胞膜的流动性，转运蛋白仅能介导小分子、离子等物质的跨膜运输，无法转运线粒体这种结构，A错误； B、溶酶体是细胞的“消化车间”，可以降解衰老、损伤的内源细胞器，也可以清除进入细胞的异物，因此外源线粒体和自身功能障碍的线粒体均可能被溶酶体降解，B正确； C、细胞骨架是由蛋白质纤维构成的网架结构，参与细胞器的运输、定位等生命活动，破坏细胞骨架会影响线粒体的移动，进而对线粒体的融合过程产生影响，C正确； D、线粒体是半自主性细胞器，自身仅含有少量DNA，只能指导合成少量蛋白质，其增殖所需的大部分蛋白质由细胞核DNA指导合成，D正确。 6. 耐寒黄花苜蓿的基因M编码的蛋白M属于水通道蛋白家族，将基因M转入烟草植株可提高其耐寒能力。下列叙述错误的是（　　） A. 细胞内的结合水占比增加可提升植物的耐寒能力 B. 低温时，水分子通过与蛋白M结合转运到细胞外 C. 蛋白M增加了水的运输能力，但不改变水的运输方向 D. 水通道蛋白介导的跨膜运输不是水进出细胞的唯一方式 【答案】B 【解析】 【分析】小分子物质跨膜运输的方式包括自由扩散、协助扩散和主动运输，其中协助扩散和主动运输需要转运蛋白的协助，主动运输需要消耗能量。根据题干信息分析，已知水分子通过细胞膜上的通道蛋白进行跨膜运输，且该过程不需要消耗能量，说明其跨膜运输方式为被动运输中的协助扩散，还可以自由扩散进出细胞。 【详解】A、结合水是与细胞内的其他物质相结合的水，是细胞结构的重要组成成分，细胞内的结合水占比增加可提升植物的耐寒能力，A正确； B、水分子通过细胞膜上的通道蛋白进行跨膜运输时，不与通道蛋白相结合，B错误； C、蛋白M是细胞膜上的水分子通道蛋白，增加了水的运输能力，但不改变水的运输方向，水的运输方向为水的顺浓度梯度，C正确； D、水进出细胞的方式有水通道蛋白介导的协助扩散和自由扩散，D正确。 故选B。 7. 猕猴桃鲜果储藏条件如下表： 果实含水量/% 温度/℃ O2体积分数/% 湿度/% 约85 1~3 2~4 90~95 下列说法错误的是（　　） A. 高湿度可减少果实水分蒸发以利于果实保鲜 B. 低温抑制酶活性来降低果实细胞的呼吸速率 C. O2含量低可抑制猕猴桃细胞有氧呼吸第三阶段 D. 有氧呼吸消耗水的量大于产生量需要人工补水 【答案】D 【解析】 【详解】A、高湿度环境和果实的湿度差小，可减少果实水分蒸发散失，避免果实因失水影响品质，有利于果实保鲜，A正确； B、细胞呼吸依赖呼吸酶的催化，低温可抑制呼吸酶的活性，从而降低果实细胞的呼吸速率，减少有机物的消耗，B正确； C、有氧呼吸第三阶段的反应是前两阶段产生的[H]和O2结合生成水，O2是该阶段的反应物，因此低O2含量可抑制猕猴桃细胞有氧呼吸第三阶段，C正确； D、有氧呼吸的总反应式为C6H12O6+6O2+6H2O6CO2+12H2O+大量能量，可知有氧呼吸过程需要消耗6分子水，产生12分子水，产生水的量大于消耗水的量，且储藏环境已设置适宜湿度，不需要人工补水，D错误。 8. 肉类在低温下可经过高盐腌制、晾挂、发酵（乳酸菌、酵母菌为主）后延长保存期。下列说法错误的是（　　） A. 高盐腌制提高了细胞外渗透压使细胞脱水 B. 其中微生物大多数属于耐盐或嗜盐微生物 C. 发酵产生的乳酸可抑制杂菌生长强化防腐 D. 乳酸菌、酵母菌发酵过程中均可产生CO2 【答案】D 【解析】 【详解】A、高盐腌制时细胞外的盐溶液浓度远高于细胞内液浓度，细胞外渗透压更高，会导致细胞渗透失水，A正确； B、高盐环境会抑制绝大多数不耐盐微生物的生长，能在该环境中存活并参与发酵的微生物大多是耐盐或嗜盐微生物，B正确； C、发酵产生的乳酸会降低环境的pH，多数杂菌不适宜在酸性环境中生长，因此乳酸可抑制杂菌生长，强化防腐效果，C正确； D、乳酸菌是厌氧微生物，无氧呼吸的产物只有乳酸，不产生CO2，仅酵母菌发酵过程可产生CO2，D错误。 9. 某同学用苹果制备果醋前欲对果实品质进行检测。下列叙述正确的是（　　） A. 检测果实细菌污染状况时，需将稀释液滴到涂布器上再进行涂布 B. 测定果实淀粉酶活性时，为保持酶活性需在4℃下进行酶促反应 C. 室温下加入斐林试剂测定砖红色沉淀量，以分析果实糖含量 D. 探究果实储存状况时，可用CO2和O2传感器测定果实呼吸速率 【答案】D 【解析】 【详解】A、采用稀释涂布平板法检测细菌污染时，需先将稀释液滴加到固体培养基表面，再用灼烧冷却后的涂布器将菌液涂布均匀，A错误； B、测定酶活性时，酶促反应应在酶的最适温度下进行，4℃会抑制淀粉酶活性，无法准确测定酶活性，该温度一般用于酶的低温保存，B错误； C、斐林试剂与还原糖反应生成砖红色沉淀需要水浴加热的条件，室温下无法发生显色反应；并且，斐林试剂只能检测还原糖的有无及含量，果实中糖也含有非还原糖，C错误； D、果实细胞呼吸过程会消耗O2、释放CO2，因此可利用CO2和O2传感器测定单位时间内CO2释放量或O2吸收量，进而计算果实呼吸速率，判断果实储存状况，D正确。 10. 兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过组织培养技术获得脱毒苗，操作流程如图。下列叙述正确的是（ ） A. ①为脱分化过程，1号培养基中的愈伤组织是排列规则的薄壁组织团块 B. ②为再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组 C. 百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，可以作为该研究中的外植体 D. 3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值大于1 【答案】C 【解析】 【详解】A、①为脱分化过程，愈伤组织是排列疏松、无规则的高度液泡化薄壁组织团块，A错误； B、②为再分化过程，该过程细胞只进行有丝分裂，基因重组发生在减数分裂过程中，因此分化时不会发生基因重组，B错误； C、植物分生区附近（如茎尖、根尖）细胞分裂旺盛，病毒极少甚至无病毒，因此可作为外植体培养获得脱毒苗，C正确； D、培养基中细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值小于1时有利于诱导根的分化，比值大于1时有利于诱导芽的分化，3号培养基诱导生根，该比值应小于1，D错误。 11. 某种营养缺陷型细菌在完全培养基上能生长，但在基本培养基上需添加组氨酸才能生长。将等量的营养缺陷型菌株涂布到两种培养基上（基本培养基中添加了少量组氨酸供细菌繁殖，但不足以形成菌落），再分别放入含低浓度和高浓度物质M的滤纸片，培养一段时间后菌落的生长情况如图。下列叙述正确的是（ ） A. 固体培养基配制后需要采用干热灭菌法进行灭菌 B. 牛肉膏蛋白胨培养基能用于培养该营养缺陷型细菌 C. 物质M有诱变作用，菌落a中细菌合成蛋白质时不需要组氨酸 D. 物质M有抑制作用，抑菌圈边缘的菌落多数能在基本培养基上生长 【答案】B 【解析】 【详解】A、培养基需要采用湿热灭菌法进行灭菌，A错误； B、牛肉膏蛋白胨培养基中含有微生物生长所需的碳源、氮源（包括组氨酸在内的有机氮源）、磷酸盐和维生素等，属于完全培养基，因此牛肉膏蛋白胨培养基能用于培养该营养缺陷型细菌，B正确； C、已知基本培养基中添加了少量组氨酸供细菌繁殖，但不足以形成菌落，据图示可知，基本培养基上只有滤纸片周围出现了少数的几个菌落a，可推测低浓度的物质M具有诱变作用，使营养缺陷型菌体突变为可自身合成组氨酸的突变体，该突变体可利用自身合成的组氨酸合成蛋白质，并非不需要组氨酸，C错误； D、根据右图可知，含有高浓度M的滤纸片周围缺陷型菌体不能生长形成菌落，说明物质M有抑制作用，即使M有诱变作用，但由于基因突变的频率较低，因此抑菌圈边缘的菌落大多数仍为缺陷型菌体，不能在基本培养基上生长，D错误。 12. 动物体细胞核移植技术在畜牧业、医药卫生等领域有着广泛的应用前景。下列叙述错误的是（　　） A. 若卵母细胞去核不完全，可能会导致重构胚细胞中染色体数目改变 B. 胚胎移植前，需要对核移植获得的重构胚进行遗传筛查和性别鉴定 C. 胚胎移植前，需要对受体进行处理，使其生理状态适合胚胎发育 D. 克隆动物的核遗传物质与供体相同，但性状与供体不完全相同 【答案】B 【解析】 【详解】A、在动物体细胞核移植中，细胞核内染色体来自供体细胞，若卵母细胞去核不完全，残留的卵母细胞核（含染色体）会与供体细胞核融合，因此可能导致重构胚细胞中染色体数目改变，A正确； B、在动物体细胞核移植中，重构胚的遗传物质主要来自供体细胞，而供体细胞来源于已知性别的个体，因此重构胚的性别是确定的，即无需对重构胚进行性别鉴定，B错误； C、在胚胎移植前，通常需要对受体进行同期发情处理，使其生殖器官的生理状态与移植胚胎的发育阶段同步，从而为胚胎提供适宜的着床和发育环境，C正确； D、克隆动物的核DNA全部来自供体细胞，因此核遗传物质与供体相同，但细胞质遗传物质来自卵细胞，而生物的性状是由核遗传物质、细胞质遗传物质以及环境因素共同决定的，因此克隆动物的性状与供体不完全相同，D正确。 13. 将人类免疫球蛋白(Ig)基因导入小鼠胚胎干细胞后，经核移植技术获得的转基因小鼠可用于制备单克隆抗体。下列叙述正确的是（　　） A. 核移植受体卵母细胞培养成熟的标志是排出第二极体 B. 人Ig基因在小鼠胚胎干细胞不表达是因为未接受抗原刺激 C. 免疫的B淋巴细胞无需克隆化培养即可与小鼠骨髓瘤细胞融合 D. 将选择培养基上存活的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养获得单克隆抗体 【答案】C 【解析】 【详解】A、核移植的受体卵母细胞需培养至减数第二次分裂中期，第二极体是卵母细胞完成受精的标志之一，A错误； B、人Ig基因在小鼠胚胎干细胞中不表达是基因选择性表达的结果，胚胎干细胞为未分化细胞，缺乏表达Ig基因的相关调控条件，与是否接受抗原刺激无关，B错误； C、单克隆抗体制备流程中，获取免疫后的B淋巴细胞后，直接即可与骨髓瘤细胞融合；克隆化培养是融合筛选得到杂交瘤细胞之后的步骤，且B淋巴细胞是高度分化的细胞，无法在融合前进行克隆化培养，因此免疫B淋巴细胞无需克隆化培养即可融合，C正确； D、选择培养基上存活的仅为杂交瘤细胞，还未经过抗体阳性检测，不一定能产生所需的特异性抗体，需筛选出可产生目标抗体的杂交瘤细胞后，才能注入小鼠腹腔培养获得单克隆抗体，D错误。 14. 抗虫和耐除草剂玉米双抗12-5是我国自主研发的转基因品种。为给监管转基因生物安全提供依据，采用PCR方法进行目的基因监测，反应程序如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 预变性过程可促进模板DNA边解旋边复制 B. 后延伸过程可使目的基因的扩增更加充分 C. 延伸过程无需引物参与即可完成半保留复制 D. 转基因品种经检测含有目的基因后即可上市 【答案】B 【解析】 【分析】PCR过程为：①变性，当温度上升到90℃以上时，氢键断裂，双链DNA解旋为单链；②复性，当温度降低到50℃左右是，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合；③延伸，温度上升到72℃左右，溶液中的四种脱氧核苷酸，在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。 【详解】A、预变性是使模板DNA充分变性，A错误； B、后延伸过程后延伸是为了让引物延伸完全并让单链产物完全退火形成双链结构，可使目的基因的扩增更加充分，B正确； C、延伸过程需引物参与，C错误； D、转基因品种不只需要检测是否含有目的基因，还要检测是否表达，还有安全性问题，D错误； 故选B。 15. 生物技术就像一把“双刃剑”，它既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来潜在的危害。下列叙述错误的是（ ） A. 生物武器是用病毒类、干扰素及生化毒剂类等来形成杀伤力 B. 反对设计试管婴儿的原因之一是避免有人滥用此技术选择性设计婴儿 C. 研究转基因农作物时应采取多种方法防止转基因花粉的传播，避免基因污染 D. 干细胞培养应用前景广泛，但也可能面临一些问题，如存在导致肿瘤发生的风险 【答案】A 【解析】 【详解】A、生物武器的类型包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等，干扰素是免疫活性物质，不用于生物武器，A错误； B、设计试管婴儿若被滥用，会出现选择性设计婴儿性别等违背伦理的情况，这是反对设计试管婴儿的原因之一，B正确； C、转基因农作物的花粉若传播到近缘野生植物，会造成基因污染，因此研究过程中需采取措施避免花粉传播，C正确； D、干细胞分化程度低，培养过程中若出现异常增殖，存在导致肿瘤发生的风险，D正确。 二、非选择题：共5个小题，共55分。 16. 龙胆花处于低温（16℃）下30min内发生闭合，而转移至正常生长温度（22℃），光照条件下30min内重新开放。花冠近轴表皮细胞的膨压（原生质体对细胞壁的压力）增大能促进龙胆花的开放，水通道蛋白在该过程中发挥了重要作用。其相关机理如图所示。 （1）水分子进出龙胆花花冠近轴表皮细胞主要是指水经过___________进出液泡的过程。据图可知，被激活的GsCPK16能促使水通道蛋白___________，进而使水通道蛋白运输水的能力增强。水通道蛋白运输水能力的改变，体现了细胞膜的_______________功能特性。 （2）实验发现，龙胆花由低温转移至正常生长温度，给予光照的同时向培养液中添加适量的钙螯合剂（可与Ca2+结合形成稳定的络合物），龙胆花重新开放受到抑制。据图推测，光刺激可加速龙胆花重新开放的机理是_________________________________________________。 （3）为了验证上述推测，可在（2）中实验的基础上另设一组相同实验，添加适量的______________，相同条件培养并观察、计时，若龙胆花重新开放时间______________________（填“缩短”、“延长”或“不变”），则说明上述推测是正确的。 【答案】（1） ①. 原生质层 ②. 磷酸化 ③. 选择透过性 （2）光刺激利于细胞吸收Ca2+，激活GsCPK16，促使水通道蛋白磷酸化，花冠近轴表皮细胞吸水增多，膨压增大 （3） ①. Ca2+ ②. 缩短 【解析】 【小问1详解】 龙胆花花冠近轴表皮细胞是成熟的植物细胞，水分子经过原生质层进出细胞，磷酸化会造成蛋白质空间构象发生改变，故蛋白激酶GsCPK16使水通道蛋白磷酸化会引起水通道蛋白构象的改变；水通道蛋白运输水能力的改变，体现了细胞膜具有选择透过性的功能特点。 【小问2详解】 结合图示可知，光照促进Ca2+运输至细胞内，激活蛋白激酶GsCPK16，使水通道蛋白磷酸化，运输水的活性增强，花冠近轴表皮细胞吸水增多，膨压增大，加速龙胆花重新开放。 【小问3详解】 实验目的是证明光照促进Ca2+运输至细胞内，激活蛋白激酶GsCPK16，使水通道蛋白磷酸化，运输水的活性增强，花冠近轴表皮细胞吸水增多，膨压增大，加速龙胆花重新开放，即龙胆花开放的时间与Ca2+浓度相关，所以可在（2）中实验的基础上另设一组相同实验，添加等量的Ca2+，这一组的Ca2+浓度更高，所以重新开放的时间缩短。 17. 强光辐射下植物体吸收的光能过剩，会破坏光合结构导致光合功能下降，CibHLH1基因与高山植物神农香菊应对强光辐射有关，为研究其作用机制，科研小组从神农香菊中克隆出CibHLH1基因，构建转CibHLH1基因烟草株系（B1、B2）和转空载体烟草株系（EV），测定了它们和野生型烟草株系（WT）的叶绿素含量（见下图）以及相关光合参数（见下表）。请回答： 株系 最大净光合速率（μmol·m-2.s-1） 光补偿点（μmol·m-2.s-1） 光饱和点（μmol·m-2.s-1） WT 8.28 12.11 392.17 EV 8.35 11.98 392.1 B1 5.13 24.66 315.85 B2 4.98 23.38 314.69 注：光补偿点指光合作用吸收的CO2量与呼吸作用释放的CO2量相等时的光照强度 光饱和点指光照强度增加到某一数值后光合作用速率不再继续提高时的光照强度 （1）本实验构建烟草株系EV的目的是________。 （2）据表可知，在光照强度22.46μmol·m-2.s-1环境中B1株系________（填“能”或“不能”）正常生长。综合图、表分析，400μmol·m-2.s-1光照强度下，光能利用率更高的两个株系是________，判断依据是________（答出2点即可）。 （3）综上，CibHLH1基因可________（填“减弱”或“增强”）神农香菊对强光辐射的适应能力，此功能是通过________来实现的。 【答案】（1）排除载体本身对实验结果的影响 （2） ①. 不能 ②. WT和EV ③. 与B1、B2相比，WT和EV株系的叶绿素含量更高、光饱和点（最大净光合速率）更高 （3） ①. 增强 ②. 降低叶绿素的含量减少对光能的吸收，从而减轻强光辐射对光合结构的破坏 【解析】 【分析】光补偿点指光合作用吸收的CO2量与呼吸作用释放的CO2量相等时的光照强度，当光照强度高于光补偿点，才能达到植物的光合作用强度大于呼吸作用强度，植物才能正常生长。 【小问1详解】 本实验构建烟草株系EV的目的是排除载体本身对实验结果的影响； 【小问2详解】 光补偿点指光合作用吸收的CO2量与呼吸作用释放的CO2量相等时的光照强度，据表可知，在光照强度22.46μmol·m-2.s-1时，低于B1株系的光补偿点，此时B1株系的光合作用强度小于呼吸作用强度，环境中B1株系不能正常生长； 综合图、表分析，400μmol·m-2.s-1光照强度下，光能利用率更高的两个株系是WT和EV，判断依据是与B1、B2相比，WT和EV株系的叶绿素含量更高、光饱和点（最大净光合速率）更高； 【小问3详解】 综上分析可知，B1、B2的叶绿素含量低于WT和EV，光补偿点高于WT和EV，推测出CibHLH1基因可增强神农香菊对强光辐射的适应能力，此功能是通过降低叶绿素的含量减少对光能的吸收，从而减轻强光辐射对光合结构的破坏来实现的。 18. 传统纺织业依赖石油基织物和化学染色工艺，导致环境被严重污染。细菌纤维素（BC）是一种由微生物合成的天然高分子材料，被视为石油基织物的环保替代品，但因其呈白色，后续染色工艺可能引入新的污染负担。为解决这一问题，科研人员开发了一种“一锅法”共培养平台，将BC的生物合成与天然色素的生成合二为一，通过微生物共培养实现"边织边染"的彩色BC绿色合成，流程如图所示。回答下列问题： （1）木醋杆菌是一种醋酸菌，对其进行培养时，需提供的气体条件是___________________，经过程①构建了BC高产菌株KXBC，仅通过检测BC合成相关基因的表达量___________（填“能”或“不能”）证明该菌株构建成功。 （2）科研人员对大肠杆菌MG1655菌株进行了一系列改造，过程②敲除了抑制色氨酸合成的相关基因，过程③④用____________处理大肠杆菌细胞，使细胞处于一种________________的生理状态，然后导入脱氧紫罗兰素合成质粒。与对照菌株相比，MGDVIO8菌株的脱氧紫罗兰素产量提高了1.72倍，从代谢角度（不考虑酶）推测其原因可能是____________________________________________________。 （3）菌株KXBC和MGDVIO8在“一锅法”共培养平台中必须克服许多不兼容性，如果同时接种，菌株KXBC、几乎无法生产BC，可采用_____________________________的培养策略以有效缓解菌株间的竞争。 【答案】（1） ①. 持续通入无菌氧气（有氧条件） ②. 不能 （2） ①. CaCl2##Ca2+ ②. 能吸收周围环境中的DNA分子 ③. 敲除抑制色氨酸合成的基因后，解除了对色氨酸合成的抑制，色氨酸合成量增加，为脱氧紫罗兰素合成提供了更多原料，因此产量提高 （3）先接种KXBC菌株，生长一段时间后再接种MGDVIO8菌株（顺序接种/先后接种） 【解析】 【小问1详解】 木醋杆菌（醋酸菌）是好氧细菌，培养时需要持续通入无菌氧气（有氧条件），培养细菌时一般需要将培养基pH调至中性或微碱性；BC高产菌株构建成功的核心判断依据是BC实际有效产量，仅检测基因表达量无法确认菌株BC有效产量确实提高，因此不能证明构建成功。 【小问2详解】 科研人员对大肠杆菌MG1655菌株进行了一系列改造，过程②敲除了抑制色氨酸合成的相关基因，过程③④用CaCl2（Ca2+）处理大肠杆菌，使其处于能吸收周围环境中的DNA分子（感受态）状态，然后导入脱氧紫罗兰素合成质粒。与对照菌株相比，改造中敲除抑制色氨酸合成的基因后，解除了对色氨酸合成的抑制，色氨酸合成量增加，为脱氧紫罗兰素合成提供了更多原料，因此产量提高 。 【小问3详解】 菌株KXBC和MGDVIO8在“一锅法”共培养平台中必须克服许多不兼容性，如果同时接种，菌株KXBC、几乎无法生产BC，因为同时接种时两种菌株存在营养竞争，会抑制BC合成，因而可采用先接种KXBC菌株，生长一段时间后再接种MGDVIO8菌株（顺序接种/先后接种）的策略，可有效缓解种间竞争。 19. 异源器官移植是替代受损或衰竭器官的有效方法。我国科学家通过将红色荧光标记的人诱导多能干细胞（iPSCs）注射到猪胚胎中，成功借助猪胚胎培育出人源性肾脏。为提高iPSCs在猪胚胎中的存活率，研究人员将抗凋亡基因和促增殖基因转入iPSCs，并诱导两者高表达，机制如图1所示。 回答下列问题： （1）iPSCs具有_____________的潜能，在异种器官培育中发挥着关键作用。据图1分析，获得转基因iPSCs细胞后，需将其培养在含______________的培养液中，从而促进抗凋亡蛋白与促增殖蛋白的大量表达。 （2）人源性肾脏的嵌合体胚胎培育过程如图2所示。先将转基因iPSCs注入敲除P基因和M基因的早期胚胎中获得嵌合体胚胎，培养至_____________________期，再移植至代孕母猪体内，移植前需对代孕母猪进行同期发情处理，目的是_________________________________________________。 （3）对胚胎进行解剖观察，观察胚胎中________________________的分布可知iPSCs参与形成嵌合体胚胎的哪些组织器官。结果发现，人细胞绝大部分位于肾脏，而胚胎的其余部分则基本由猪细胞组成，形成该结果的原因是_________________________________________________________。 【答案】（1） ①. 分化为多种组织和器官 ②. 四环素 （2） ①. 桑葚胚（或囊胚期） ②. 为胚胎发育提供合适的生理环境 （3） ①. 红色荧光 ②. 人细胞的竞争能力弱于猪细胞，因此其它部位人类细胞无法大量介入；猪胚胎缺乏形成肾脏所需的关键基因，无法形成肾脏，形成空缺，此时人细胞进入，发育形成肾脏 【解析】 【小问1详解】 iPSCs是人诱导多能干细胞，具有分化为多种组织和器官的潜能，在异种器官培育中发挥着关键作用。从图1看出，转录激活蛋白A与四环素结合后被激活再结合到调控区，调控基因的表达，所以获得转基因iPSCs细胞后，需将其培养在含四环素的培养液中，从而促进抗凋亡蛋白与促增殖蛋白的大量表达。 【小问2详解】 人源性肾脏的嵌合体胚胎培育过程如图2所示。先将转基因iPSCs注入敲除P基因和M基因的早期胚胎中获得嵌合体胚胎，胚胎移植需要将嵌合体胚胎培养至桑葚胚或囊胚期再移植至代孕母猪体内，移植前需对代孕母猪进行同期发情处理，该操作的目的是为移入的胚胎提供合适的生理环境，保证胚胎的正常发育。 【小问3详解】 由于iPSCs被红色荧光标记，所以观察胚胎中红色荧光的分布可知iPSCs参与形成嵌合体胚胎的哪些组织器官。由于人细胞的竞争能力弱于猪细胞，因此其它部位人类细胞无法大量介入；猪胚胎缺乏肾脏发育的关键基因P和M，无法形成猪源肾脏，形成空缺，此时人细胞进入，发育形成肾脏，所以人细胞绝大部分位于肾脏，而胚胎的其余部分则基本由猪细胞组成。 20. 腐胺是重要的生物多胺，在人体许多生理过程中具有重要作用，但环境中过量的腐胺会危害人体健康。科研人员按照图示原理，利用基因工程技术构建生物传感器来实现腐胺的检测。相关限制酶的识别序列为EcoRⅠ（）、XbaⅠ（）、SpeⅠ（）、PstⅠ（）。回答下列问题： （1）启动子B是______型启动子，当有PuuR蛋白存在时，便不能与______识别结合，导致GFP基因不能表达；当环境中有腐胺时，生物传感器可以发出绿色荧光，原因是______。 （2）构建重组质粒时，用限制酶______处理质粒1、用限制酶______处理质粒2，然后再用DNA连接酶连接。导入大肠杆菌后，在含有腐胺和氨苄青霉素的培养基上能发绿色荧光的______（填“一定”或“不一定”）是含有重组质粒的工程菌，原因是______。 （3）科研人员进一步将工程菌中的重组质粒进行了如下图（局部）所示的优化处理： 与优化前相比，优化后的工程菌检测灵敏度更高、荧光现象更明显，据图推测，荧光现象更明显的原因是______。 【答案】（1） ①. 诱导 ②. RNA聚合酶 ③. 腐胺与PuuR蛋白结合会解除PuuR蛋白对启动子B的抑制，使GFP基因表达出发荧光的GFP蛋白 （2） ①. EcoRⅠ、SpeⅠ ②. EcoRⅠ、XbaⅠ ③. 不一定 ④. 质粒2导入大肠杆菌也可以发出绿色荧光 （3）腐胺作用下，蛋白C激活的启动子比启动子B激发GFP基因表达的能力更强，使GFP蛋白含量更高 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 分析题图可知，启动子B的表达受到特定物质（腐胺）的诱导，因此启动子B是诱导型启动子，当有PuuR蛋白存在时，它会与启动子B结合，从而阻止RNA聚合酶与启动子B结合，导致GFP基因不能表达。结合题图可知，当环境中有腐胺时，腐胺会与PuuR蛋白结合，解除PuuR蛋白对启动子B的抑制，RNA聚合酶可以结合到启动子B上，启动GFP基因的表达，合成GFP蛋白，GFP蛋白在特定波长的光激发下会发出绿色荧光。 【小问2详解】 分析题图可知，重组质粒是将质粒 1 的 “启动子 A + PuuR 基因 + 终止子”插入质粒2的启动子B和氨苄青霉素抗性基因之间，若要将质粒 1 的 “启动子 A + PuuR 基因 + 终止子”切割下来，需要在启动子A的左边选择限制酶EcoRⅠ或XbaⅠ，在质粒1终止子的右边选择限制酶SpeⅠ或PstⅠ切割，为避免质粒的自身环化和反向连接，故应用双酶切较好，因此质粒2应选择EcoRⅠ、XbaⅠ切割，由于XbaⅠ切割之后形成的黏性末端与SpeⅠ切割之后形成的黏性末端相同，故质粒1应选择EcoRⅠ、SpeⅠ进行切割。结合题图可知，由于重组质粒和质粒2中均有GFP基因，表达后均会发出绿色荧光，因此导入大肠杆菌后，在含有腐胺和氨苄青霉素的培养基上能发绿色荧光的不一定是含有重组质粒的工程菌。 【小问3详解】 优化前：腐胺抑制 PuuR 蛋白→解除对启动子 B 的抑制→启动子 B 直接驱动GFP 基因转录→产生 GFP 蛋白（荧光强度由启动子 B 的直接转录效率决定）；优化后：腐胺抑制 PuuR 蛋白→解除对启动子 B 的抑制→启动子 B 先驱动蛋白 C 基因转录→表达蛋白 C→蛋白 C 激活 “蛋白 C 激活的启动子”→该启动子驱动GFP 基因转录。因此与优化前相比，优化后的工程菌检测灵敏度更高、荧光现象更明显的原因是腐胺作用下，蛋白C激活的启动子比启动子B激发GFP基因表达的能力更强，使GFP蛋白含量更高。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $