黑龙江省佳木斯市第二中学2025-2026学年高二下学期期中考试生物试题

**基本信息** 聚焦生物技术实践与现代生物科技，以传统发酵、微生物培养、基因工程等真实情境为载体，通过实验探究与综合应用考查生命观念、科学思维及探究实践能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单项选择|15/30|传统发酵（泡菜制作）、微生物培养（选择培养基）、基因工程（PCR技术）|基础概念与情境结合，如石油降解菌筛选考查选择培养基原理| |不定项选择|5/15|细胞融合（原生质体培养）、单克隆抗体制备、蛋白质工程|综合辨析，如克隆猴培育涉及细胞全能性与胚胎工程| |非选择题|5/55|尿素分解菌分离（培养基灭菌、活菌计数）、植物体细胞杂交（原生质体融合）、转基因番茄培育（限制酶选择）|实验流程完整，如21题从培养基配制到菌落鉴定，体现科学探究全过程|

2025-2026学年度第二学期期中考试 高二生物 第I卷 (共45分) 一、单项选择题(本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中， 只有一项符合题目要求) 1．我国劳动人民很早就开始了传统发酵食品的制作。下列关于传统发酵食品制作的叙述，正确的是（　　） A．腌制泡菜时，应对蔬菜进行严格的灭菌处理，以防止杂菌的污染 B．腐乳制作过程中，豆腐中的蛋白质被分解成小分子的肽和氨基酸 C．在葡萄酒的制作过程中，应对葡萄进行多次反复冲洗。这样才可以洗的彻底 D．果酒发酵的适宜温度是30~35°C，果醋发酵的适宜温度是18~30°C 2．为从被石油污染的土壤中分离出石油降解菌，研究人员利用无机盐、琼脂和石油配制培养基，成功筛选到目标菌株。下列相关叙述正确的是（　　） A．该培养基中石油作为唯一碳源，是一种选择培养基 B．该石油降解菌的降解能力可通过对琼脂的分解来体现 C．从未被污染的土壤中更容易分离到石油降解菌 D．该石油降解菌属于生产者，能将石油转化为无机物 3．下列关于发酵工程的说法正确的是（    ） A．啤酒的工业化产生中，需要灭菌来延长它的保存期 B．单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质，常用作微生物饲料等 C．谷氨酸的发酵需要在中性和弱碱性条件下进行 D．发酵结束后，采用提取分离纯化等方法将菌体分离 4．下列关于微生物培养技术的叙述，正确的是（    ） A．培养基中一定不能缺少碳源、氮源、水和无机盐 B．为了统计活菌数和死菌数的总和，可采用稀释涂布平板法 C．分离分解尿素的细菌时，所选用的培养基要以尿素为唯一氮源 D．用平板培养细菌时一般需要将平板倒置 5．树莓果实营养丰富，应用组织培养技术可以在短时间内获得大量优质种苗，实现树莓的工厂化生产。如图为应用组织培养技术培育树莓幼苗的流程图，下列叙述错误的是（　　） A．为避免杂菌污染，外植体需用酒精和盐酸进行消毒 B．过程①③不需要光照，过程②需要光照 C．该过程成功的根本原因是外植体细胞中含有控制树莓生长发育的全套遗传信息 D．A为愈伤组织，在适当条件下给予适当光照，其能进行光合作用 6．如图表示利用植物体细胞杂交技术获得“番茄-马铃薯”杂种植株的过程，相关说法正确的是（　　） A．用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体 B．生长素与细胞分裂素比值低时，有利于愈伤组织的形成 C．原生质体表面既有红色荧光又有绿色荧光，说明是融合的番茄-马铃薯原生质体 D．植物体细胞杂交是指两种植物细胞融合为杂种细胞的过程 7．下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述，正确的是（　　） A．同期发情处理和超数排卵处理的是同一个体 B．高等哺乳动物受精作用和卵裂过程发生于输卵管，卵裂期细胞数量不断增多，但胚胎总体积不增加 C．将目的基因导入鲤鱼体细胞后经体外培养获得早期胚胎，再进行胚胎移植 D．囊胚进一步扩大，导致滋养层破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫做孵化 8．“筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列叙述正确的是（　　） ①对土壤中分解尿素的细菌进行分离和计数，用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，检测选择培养基是否有筛选作用 ②单克隆抗体制备过程中，完成细胞融合后筛选出的是针对目标抗原的抗体检验为阳性的杂交瘤细胞 ③统计活菌数目时，选择菌落数30-300的平板进行计数，计数结果偏小 ④以尿素为唯一氮源的培养基，可筛选出能合成纤维素酶的微生物 A．②③ B．①③ C．③④ D．①② 9．下列有关动物细胞培养的表述，正确的是（　　） A．动物细胞只能贴壁生长，不能进行悬浮培养 B．培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性 C．动物细胞培养中，含5% CO2的培养箱用来调控pH和温度 D．动物细胞培养过程中，首先要用胃蛋白酶处理相关组织，使它分散成单个细胞 10．下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。下列相关叙述正确的是（　　） A．④的染色体上若含抗虫基因，代表抗虫植株培育成功 B．④→⑤经过了脱分化和再分化的过程 C．限制酶和DNA连接酶分别催化磷酸二酯键的水解和形成 D．可用PCR技术在体外快速扩增抗虫蛋白基因 11．下列关于基因工程的说法正确的是（　　） A．携带目的基因的重组质粒只有整合到宿主细胞的染色体DNA上才会随后者的复制而复制 B．将某药用蛋白基因导入乳腺细胞中，获得乳腺生物反应器 C．质粒上的抗生素合成基因常作为标记基因供重组DNA的鉴定和选择 D．利用农杆菌转化法将目的基因插入T-DNA上进而整合到受体细胞的DNA中，其实质是基因重组 12．幽门螺杆菌（Hp）感染会引发胃炎、消化性溃疡等多种疾病。研究人员将 Hp的Ipp20基因作为目的基因，用限制酶Xho Ⅰ和 Xba Ⅰ切割，通过基因工程制备相应的疫苗，质粒及操作步骤如图所示。下列相关叙述错误的是（　　） A．Ipp20基因整合到大肠杆菌的DNA 中属于基因重组 B．基因表达载体导入之前，可用 Mg2+处理大肠杆菌 C．培养基A中添加了氯霉素，培养基B中添加了潮霉素 D．能用来生产 Hp疫苗的大肠杆菌在菌落1、2、4和6中 13．为培育抗除草剂的转基因大豆，科研人员从抗除草剂菌株中获取抗除草剂基因（目的基因），通过基因工程技术构建重组表达载体，导入大豆体细胞后培育成完整植株。下列关于该基因工程操作程序的叙述正确的是（　　） A．将目的基因导入大豆体细胞的常用方法是农杆菌转化法，该方法也可用于部分单子叶植物 B．导入重组DNA的受体细胞一定能成功表达出目的基因产物 C．获取目的基因时，可通过PCR技术扩增，该过程需要解旋酶解开DNA双链 D． 目的基因的检测与鉴定中，可采用抗原一抗体杂交杂交技术来检测目的基因是否转录出mRNA 14．关于DNA片段的扩增及电泳鉴定的实验，下列叙述正确的是（　　） A.琼脂糖凝胶中的DNA分子可在紫外灯下被检测出来 B.PCR实验中的移液器、枪头、缓冲液等在使用前必须高压灭菌 C.凝胶电泳中，带电分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象有关 D.琼脂糖凝胶电泳分离DNA和纸层析法分离色素的原理相同，使用的介质不同 15． 下列关于生物武器的说法，错误的是( ) A.生物武器包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类等 B.彻底销毁生物武器是全世界爱好和平人民的共同期望 C.利用炭疽杆菌制成的生物武器，具有传染性强、致死率高的特点 D. 中美两国发布联合声明，重申在一般情况下不发展、不生产、不储存生物武器 二、不定项选择(本题共5小题，每题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分) 16．苹果醋酿造工艺流程如图所示，下列相关叙述正确的是（　　） A．酒精发酵在无氧条件下进行，醋酸发酵在有敛条件下进行 B．当O2、糖源都充足时，醋酸菌可将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转变为乙酸 C．.醋酸菌的遗传物质是DNA,主要存在于拟核中，其基因遗传不遵循孟德尔遗传定律 D．酒精发酵和醋酸发酵过程都是吸能反应 17．体细胞克隆猴的培育流程如图所示，为提高胚胎的发育和妊娠率，用组蛋白去甲基化酶（Kdm4d）的mRNA和组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA处理重构胚。下列叙述不正确的是（　　） A.用灭活的病毒短暂处理体细胞，是为了诱导细胞融合 B.组蛋白去甲基化和增加乙酰化有利于重构胚的发育 C.克隆猴的成功培育体现了动物细胞具有全能性 D.克隆小猴的遗传性状由图中的胎猴以及环境共同决定 18．水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。研究人员发现，用赖氨酸替换水蛭素第47位的天冬酰胺，可以提高它的抗凝血活性。下列叙述正确的是（    ） A．在这项替换研究中，目前可行的直接操作对象是氨基酸 B．对水蛭素的天冬酰胺进行替换后，水蛭素的空间结构不会发生变化 C．改造后抗凝血活性提高的水蛭素更能满足人们的需求 D．蛋白质工程与中心法则的信息流动方向一致，即DNA→mRNA→蛋白质 19．科研人员欲利用单细胞克隆技术制备针对新型病毒抗原（Ⅴ蛋白）的单克隆抗体，用于治疗由新型病毒引发的疾病，制备流程如图所示。下列相关叙述错误的是（　　） A．图中①为骨髓瘤细胞，将其与B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞 B．体外培养经Ⅴ蛋白免疫后的单个B淋巴细胞可以获得大量针对Ⅴ蛋白的单克隆抗体 C．筛选的目标杂交瘤细胞可置于含95%空气和5%CO2的环境中进行培养 D．动物细胞培养时为了保证“无菌无毒”,需要在培养基中添加抗生素和干扰素 20．基因工程技术给人类生产、生活和医疗带来巨大的影响。下列有关说法不正确的是（　　） A.含目的基因的DNA借助花粉管通道进入胚囊，后续不需要利用楂物组织培养技术 B.用作载体的质粒来源于原核细胞且经过人工改造 C.将药用蛋白基因与乳腺中特异性表达的启动子重组在一起，导入受精卵中可获得乳腺 生物反应器 D.生产转基因农作物时，需防止转基因花粉的传播，避免基因污染 第II卷(共55分) 三、非选择题(共5道题，共55分) 21．(每空1分，共12分)某兴趣小组试图从土壤中分离能分解尿素的细菌，回答下列问题： (1)某同学配制以下的培养基成分：葡萄糖10.0g、蛋白胨5.0g、KH2PO41.4g 、 Na2HPO42.1g、尿素1.0g、琼脂15.0g、H2O（定容至1L）。分析培养基的成分，根据物理性质可知此培养基属于___________培养基，将配制好的培养基采用_____灭菌后，在酒精灯火焰附近倒平板，培养基冷却凝固后，将培养皿倒过来放置的原因是______________。 (2))为分离得到单菌落，可采用___________法或稀释涂布平板法接种土壤稀释液。其 中，可用于活菌计数的是______________法，计数时通常选择菌落数在_________之间 的平板，计数结果往往比实际活菌数偏_________(填“高”或“低”),原因是_______________。 (3) 为鉴定分离出的细菌是否为分解尿素的细菌，可在培养基中加入________指示剂，若培养基___________则说明该细菌能分解尿素。 (4) 实验结束后，使用过的培养基必须经过_______处理后再丢弃，防止________________ 22．(除标注外，每空1分，共1 1分)土地盐渍化制约农作物的生长，影响农作物的产量。我国科学家用普通小麦与耐盐偃麦草进行体细胞杂交获得耐盐小麦新品种“山融3号”，培育过程如图所示（序号代表结构）。 (1)植物体细胞杂交之前需要用____酶去除细胞壁获得原生质体。除图中所示方法外还可用____（物理法）促进原生质体融合，此过程涉及的原理是____。(2分)植物细胞融合成功的标志是____(2分) (2)①经过____过程形成愈伤组织，由愈伤组织到②过程应降低培养基中____（填激素）的比例有利于促进根的形成，此过程还需要光照处理，其作用是____。 (3)与传统杂交育种相比，植物体细胞杂交育种的优点是____。(2分) 23．(每空1分，共11分)如图为利用生物技术生产单克隆抗体和经体外受精培育优质奶牛的过程。请回答下列问题： (1) 图I中，细胞A的形成过程中常用的诱导因素有_____、电融合等。直接产生的A细胞可能有3种，经选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和______，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，可在____或____进行培养。 (2) 图Ⅱ中，卵子需培养至_______期才能与获能的精子完成受精，当精子触及卵 细胞膜的瞬间，卵细胞外的____会发生生理反应，防止后来的精子进入卵细胞。 若要获得多头基因型相同的优质牛；可在胚胎发育至囊胚阶段时进行_____操作时需将______均等分割，以免影响胚胎发育。 (3)胚胎移植前，需对受体母牛进行_______处理，使供体和受体的生理状态一致， 为胚胎着床提供相同的生理环境。胚胎移植的生理学基础之一是：早期胚胎形成后，在 一定时间内处于____状态，为胚胎收集提供了可能。 24．(除标注外，每空1分，共10分)花青素对人体健康有多种益处，但普通番茄中花青素含量极低。金鱼草中的D基因编码一种转录因子，能够激活植物花青素合成途径。科学家通过基因工程技术，将D基因导入普通番茄，成功获得了果肉呈紫色的高营养价值番茄。下图为D基因和质粒上标出的酶切位点及相关基因。请结合图示及所学知识，回答下列问题： (1) D基因的基本组成单位是________，启动子位于该基因“上游”，有________酶结合的位点，控制转录的开始。在用PCR技术扩增D基因时在反应缓冲液中一般要添加________以便激活DNA聚合酶，设计引物序列的主要依据是________。 (2)由图可知，应选用图中限制酶________(2分)分别切割D基因和质粒，以防D基因和质粒自身环化和反向连接。 (3)将重组质粒导入________后，利用该微生物感染番茄外植体。筛选时，应先选择含________的培养基进行培养，再用影印培养法接种到含________的培养基筛选成功转化的微生物。 (4)为检测D基因是否成功导入番茄细胞，可用PCR技术进行DNA扩增，扩增产物通过________凝胶电泳鉴定。 25．(每空1分，共11分)畜牧养殖是我国的重要支柱产业，研究人员培育转基因牛，用以生产人血清白蛋白牛乳，下图是主要的实验流程，请回答下列问题： (1)①过程需要用到的工具酶有______。其中，作为“分子缝合针”的工具酶连接形成的是______（化学键名称）。 (2)下图中EcoRⅠ切割形成的末端称为______，SmaⅠ切割形成的末端称为______，______（填写酶的具体名称）可分别连接两种末端。 (3)过程②利用的技术是______，在生物体内时，精子与卵细胞在________受精，为筛选出具有优良性状的母牛，胚胎移植前应取______鉴定胚胎的性别，保留性 染色体组成为______的胚胎进行⑤操作。若要获得更多胚胎，可采用______技术，该技术需要的主要仪器设备为______。 第1页，共2页 第1页，共2页 学科网（北京）股份有限公司 $ 《2025-2026学年度第二学期期中考试》参考答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 B A C D A C B B B D 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 D A A C D AC AC C ABD AB 21．(1) 固体 高压蒸汽灭菌 防止培养基皿盖上的冷凝水珠掉入培养基造成二次污染（有利于培养基表面水分的挥发） (2) 平板划线；稀释涂布平板；30～300；低；当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 (3) 酚红；变红 (4) 灭菌；菌种扩散污染环境 22．(1) 纤维素酶和果胶酶 用离心法、电融合法 细胞膜具有一定的流动性 杂种细胞再生出细胞壁 (2) 脱分化 细胞分裂素/生长素 诱导芽和根等营养器官的形成 (3)克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍 23．(1) PEG（聚乙二醇）、灭活的病毒、电激；抗体检测；体外培养液；小鼠腹腔 (2) MⅡ中；透明带；胚胎分割；内细胞团 (3) 同期发情；游离 24．(1) 脱氧核苷酸；RNA 聚合；Mg2+；D 基因两端的部分核苷酸序列 (2)BamH Ⅰ和Hind Ⅲ (3) 农杆菌 四环素 潮霉素 (4)琼脂糖 25．(1) 限制酶、DNA连接酶 磷酸二酯键 (2) 黏性末端 平末端 T4DNA连接酶（或E.coliDNA连接酶） (3) 体外受精 输卵管 滋养层细胞；XX；胚胎分割；体视显微镜 学科网（北京）股份有限公司 $