精品解析：陕西省西安高新第一中学2025-2026学年高二下学期期末考试生物试卷

2027届高二生物试题 一、选择题（单选，共25小题，每题2分，共50分） 1. 下列关于物质跨膜运输的叙述，正确的是（ ） A. 葡萄糖分子进入所有真核细胞的方式均相同 B. 载体蛋白在物质转运过程中空间结构会发生改变 C. 甘油进出细胞取决于细胞内外的浓度差和相应载体的数量 D. 主动转运使膜内外物质浓度趋于一致，维持了细胞的正常代谢 2. 某兴趣小组利用幼嫩的黑藻叶片先后完成了“观察叶绿体和胞质流动”和“质壁分离”实验（图示如下）。下列叙述正确的是（　　） A. 图甲可观察到叶绿体绕细胞核运动 B. 图乙可观察到③的颜色比图甲深 C. 图乙中①②的分离与①的功能特性有关 D. 图甲的细胞体积明显大于图乙 3. 某科研小组将生理状态相同的植物根尖成熟区细胞分别置于2mol·L-1乙二醇溶液（A组）和2mol·L-1蔗糖溶液（B组）中，测得原生质体相对体积变化如图所示。相关叙述正确的是（　　） A. 0-120s两组细胞的原生质体均渗透失水 B. 0-120s水的运输方式A组为自由扩散，B组为协助扩散 C. 120s后A组乙二醇开始进入细胞使原生质体体积增加 D. 120s后B组细胞不再进行水分子的跨膜运输 4. 下图甲表示细胞内某种物质的合成和转运过程，图乙表示胰岛素合成和分泌过程中的细胞膜、内质网膜和高尔基体膜的面积变化。下列有关叙述错误的是（　　） A. 图甲的C物质是蛋白质，结构A是核糖体，C物质形成的方式是脱水缩合 B. 若G是合成D物质的原料，则G物质所经过的结构依次是细胞膜→内质网→高尔基体→细胞膜 C. 图乙中①②③分别表示内质网膜、高尔基体膜、细胞膜 D. 属于图甲C类物质的是呼吸酶、线粒体膜的组成蛋白和血红蛋白 5. 盐碱地中含大量的NaCl、Na2CO3等钠盐，会威胁海水稻的生存，同时一些病原菌也会感染水稻植株，影响其正常生长。如图为海水稻抵抗逆境的生理过程示意图。下列叙述错误的是（　　） A. H2O可以通过自由扩散和协助扩散两种方式进入海水稻细胞 B. 海水稻细胞通过胞吐方式分泌抗菌蛋白抵御病原菌的侵染 C. 液泡逆浓度梯度吸收Na+增大细胞液的浓度以适应高浓度环境 D. H+以协助扩散的方式从细胞质基质运入液泡或运出细胞 6. 月季花色深浅受花瓣中花青素含量影响，研究发现适度低温可提升浅色品种月季花青素合成酶的活性。相关叙述错误的是（　　） A. 低温使浅色品种月季花瓣颜色变浅 B. 温度影响花青素合成酶的空间结构 C. 花青素合成酶降低花青素合成反应的活化能 D. 月季花色是基因和环境共同作用的结果 7. 肌肉收缩是粗肌丝和细肌丝之间的相对滑动导致的，肌球蛋白位于粗肌丝内，其头部具有一个结合ATP的位点（如下图）。细肌丝中存在肌球蛋白的结合位点，肌球蛋白与细肌丝结合并引起细肌丝滑动，然后肌球蛋白又回到原来的状态。下列叙述不正确的是（ ） A. 肌球蛋白与ATP结合后，其空间结构发生改变 B. 肌球蛋白具有催化ATP水解的特性 C. 不同条件下肌肉收缩都需要线粒体的参与 D. ATP驱动肌肉运动，实现“化学能→机械能”转换 8. 在生物体内能量的转换和传递中，ATP是一种关键的物质，其分子结构式如图1所示（①~⑤表示组成ATP的相关化学基团）。图2表示ATP与ADP的相互转化图解。下列相关叙述正确的是（　　） A. 图1中的②是脱氧核糖，脱去①和⑤后的名称是腺嘌呤脱氧核苷酸 B. 图1中③与④之间的化学键和④与⑤之间的化学键稳定性相同 C. 图2中的能量Q1可能是化学能或光能，能量Q2可用于各项生命活动 D. 图2中的酶1和酶2分别是ATP水解酶和ATP合成酶 9. Y蛋白主要存在于肿瘤细胞线粒体的内外膜间隙，可与丙酮酸转运蛋白相互作用，抑制丙酮酸进入线粒体。相关叙述正确的是（ ） A. 丙酮酸转运蛋白主要分布于线粒体基质 B. 丙酮酸可在肿瘤的细胞质基质中转化为乳酸 C. 推测肿瘤细胞主要依靠有氧呼吸第三阶段供能 D. 敲除Y基因的肿瘤细胞耗氧速率明显降低 10. 某兴趣小组发现樱桃受到机械损伤后容易腐烂，查阅相关资料后推测樱桃腐烂可能与机械损伤引起樱桃有氧呼吸速率升高有关。图1表示樱桃的细胞呼吸过程，A~E表示物质，①~④表示过程。为验证机械损伤能引起樱桃有氧呼吸速率升高，设计实验装置如图2所示，忽略外界环境因素影响。下列叙述正确的是（　　） A. 图1表示樱桃的细胞呼吸过程，A代表水，B代表二氧化碳，D代表氧气，E代表乳酸 B. 图1中①过程发生的场所是细胞质基质，③过程发生的场所是线粒体内膜 C. 图2中放入NaOH溶液的作用是吸收樱桃呼吸作用产生的二氧化碳 D. 与放入损伤的樱桃相比，若图2装置中放入完整未损伤的樱桃，则有色液滴向左移动更快 11. 细胞呼吸原理广泛应用于生产实践中。下表中措施与对应的目的不恰当的是（ ） 选项 应用 措施 目的 A 种子贮存 晒干 降低自由水含量，降低细胞呼吸 B 乳酸菌制作酸奶 通气 加快乳酸菌繁殖，有利于乳酸发酵 C 水果保鲜 零上低温 降低酶的活性，降低细胞呼吸 D 栽种庄稼 疏松土壤 促进根有氧呼吸，利于吸收矿质离子 A. A B. B C. C D. D 12. 下图为人体细胞呼吸的部分过程。DNP（2，4-二硝基苯酚）是20世纪30年代曾广泛使用的减肥药，它是一种脂溶性小分子，可在膜中自由移动，作为H⁺转运体破坏膜两侧H⁺浓度差。下列说法不正确的是（ ） A. 图示生理过程为有氧呼吸第三阶段 B. 图中NADH来自线粒体基质 C. DNP有严重副作用，可能伴有高热、高乳酸血症等 D. ATP合成动力为跨线粒体内膜的H⁺浓度梯度 13. 中国科学家通过液滴微流控技术将天然的叶绿体内类囊体膜与CETCH循环体系(含Ccr等多种酶)共同封装到了液滴中构建出了一个“半天然半合成系统”，该系统能连续将CO2转化为乙醇酸，进而实现人工合成淀粉，如图所示。以下说法正确的是（ ） A. 通常使用密度梯度离心法从菠菜叶肉细胞中分离出叶绿体 B. 光照越强，CETCH循环的速率就越快 C. 据图分析B溶液是水溶液，CETCH循环相当于光合作用中的暗反应阶段 D. 在与植物光合作用固定的CO2量相等的情况下，该反应体系糖类的积累量高于植物 14. D1蛋白参与光反应，强光下易损伤，D1的合成及修复效率是维持光合速率的关键。下列叙述正确的是（　　） A. D1受损降低光反应ATP生成速率 B. 新合成的D1在叶绿体基质中发挥作用 C. D1修复速率直接影响CO2与C5的结合过程 D. 抑制D1基因的表达有利于植物对强光的适应 15. 发菜是一种生长在干旱地区的陆生蓝藻。如图是不同NaCl浓度对某种发菜光合速率和呼吸速率的影响曲线。下列描述错误的是 A. 此种发菜在测定的NaCl浓度范围内均可正常生长 B. 发菜细胞中无叶绿体，但含有能吸收光能的色素 C. 此种发菜生长的最适NaCl浓度为615mol/L D. 随NaCl浓度升高，发菜光合速率和呼吸速率的变化趋势不同 16. 自然发酵法酿造酱油时，先将浸泡的大豆蒸煮、冷却后与面粉混合，铺摊在空气流通处，使米曲霉等霉菌大量生长繁殖（制曲）。制曲后，混合质量分数20%的盐水制成酱醅，置于大缸内，在太阳下曝晒，定期翻酱。发酵结束后，收集液体经灭菌、分装制成酱油。下列叙述错误的是（　　） A. 参与酿造酱油的米曲霉等霉菌是需氧型微生物 B. 大豆、面粉为酿造酱油的微生物提供碳源、氮源 C. 抑制酱醅中的有害微生物主要依靠阳光中紫外线 D. 自然环境中的多种微生物赋予酱油特殊的风味 17. 下图表示培养和纯化酵母菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是（ ） A. 步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置 B. 步骤②为防止污染，接种环灼烧灭菌后应快速挑取菌落 C. 步骤③划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落 D. 步骤④在恒温培养箱培养后，可用于对酵母菌进行计数 18. 为实现多肉植物的规模化生产，科研人员开展了如下研究。相关叙述正确的是（ ） A. 过程①宜选择成熟叶片，分别用次氯酸钠和70%的酒精浸泡30s B. 过程②应避光培养，防止愈伤组织分化成筛管、维管等 C. 过程③应配制2种培养基，其主要目的是满足不同阶段试管苗对营养的需求 D. 过程④应在珍珠岩基质中添加适量蔗糖，为幼苗生长提供碳源 19. 科学家利用仙台病毒诱导A、B两种动物细胞进行融合，之后进行细胞培养。已知A、B两种细胞各自的生活环境（如下表所示），且融合细胞只能在选择培养基Ⅱ上生长，下列叙述错误的是（　　） A细胞 只能在选择培养基Ⅰ上生长，生长环境的pH为4～6 B细胞 只能在选择培养基Ⅱ上生长，生长环境的pH为7～8 A. 可用PEG融合法和电融合法诱导动物细胞融合 B. 选择培养基Ⅱ上存活下来并生长的细胞就是融合细胞 C. 将融合后的细胞置于CO2培养箱以维持培养液的 D. A、B两种动物细胞融合体现了细胞膜具有一定的流动性 20. 如图为制备抗HPV16型和HPV18型E6、E7蛋白的混合单克隆抗体的流程示意图。下列相关叙述正确的是（　　） A. 给新西兰兔注射HPV16型和HPV18型E6、E7蛋白，目的是促进浆细胞产生抗体 B. 过程①是从新西兰兔中分离产生特定抗体的浆细胞，通过过程②完成细胞的融合 C. 过程③需用特定的选择培养基筛选b细胞，获得的c细胞既能无限增殖又能产生抗体 D. 过程④需进行克隆化培养和抗体检测，可获得能同时产生四种特异性抗体的目标杂交瘤细胞 21. 利用PCR可以在体外进行DNA片段扩增，下列叙述错误的是（ ） A. 通过改变体系中的温度，控制PCR的反应进程 B. PCR是酶促反应，需加入解旋酶和DNA-聚合酶 C. 通过引物的设计可以做到选择性扩增DNA片段 D. 根据DNA分子的大小和构象，通过电泳鉴定产物 22. 用XhoI和SalI两种限制性内切核酸酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是（ ） A. 如图中两种酶识别的核苷酸序列不同 B. 如图中酶切产物可用于构建重组DNA分子 C. 泳道①中是用SalI处理得到的酶切产物 D. 限制酶既可切割双链DNA也可以切割单链DNA 23. 蛋白质工程是合成生物学的重要分支，其核心目标是优化蛋白质以在特定条件下发挥其最佳功能。近年来，机器学习（ML）在蛋白质发现中展现出巨大潜力，已被广泛应用于蛋白质结构预测、结构重建和反向折叠等任务中。下图为蛋白质工程的流程，下列叙述错误的是（ ） A. 机器学习（ML）在蛋白质工程应用的设想中，实现难度最大的是过程④ B. 实施蛋白质工程的前提条件是了解蛋白质结构与功能的关系 C. 通过机器学习（ML）得到的蛋白质还需进行功能检测实验才可以投入生产 D. 蛋白质工程不需要对基因进行操作，直接对蛋白质进行加工改造 24. 研究人员选择分别在20℃、-20℃条件下保存的花菜、辣椒和蒜黄作为实验材料，进行“DNA的粗提取与鉴定”实验，部分实验步骤和DNA鉴定结果如图1、图2所示。下列说法正确的是（ ） A. 该实验常利用DNA在酒精中溶解度较大的特性来提取DNA B. “DNA的粗提取与鉴定”实验需要在无菌条件下进行 C. 图1中，过滤后DNA主要存在于沉淀中，需用2mol/L NaCl溶液重新溶解 D. 图2中，低温时蓝色深度更高，原因可能是低温抑制了酶的活性，DNA降解速率更慢 25. 法律和法规是规范生物技术研究，防止生物技术滥用的有力武器。下列叙述与我国相关法规不符的是（ ） A. 用农业转基因生物加工制成的产品需提供标识 B. 不得将体外受精获得的人类胚胎植入人体生殖系统 C. 在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器 D. 禁止非医学需要的胎儿性别鉴定和选择性别人工终止妊娠 二、非选择题（共5小题，共50分） 26. 强光会导致光合速率降低影响水稻产量，我国科学家利用基因工程在叶绿体中表达特定酶，优化代谢途径，成功实现增产。 （1）光合作用暗反应中，CO2在R酶的作用下与C5结合，该过程称作_____。生成的C3接受ATP和NADPH释放的能量，并被______还原，随后，一部分C3经一系列反应转化为糖类。 （2）R酶对CO2和O2均具有亲和力，R酶催化的反应方向取决于细胞中CO2/O2比值。如图1所示，当比值高时，主要进行暗反应；比值降低时，R酶催化C5与O2结合加强，在叶绿体、过氧化物酶体、线粒体中发生一系列反应，即光呼吸。 ①请分析图1，选填以下字母，解释夏季强光导致水稻减产的原因________；________；________；________。 A.CO2/O2比值下降 B.暗反应减弱 C.碳原子流失 D.光呼吸加剧 ②此外，氮原子流失也是造成水稻减产的原因之一。图1中的S酶位于叶绿体基质。光呼吸途径产生的NH3可能经气孔散失，或________，导致氮同化效率低。 （3）科学家将编码G酶、C酶、B酶、T酶的外源基因转入水稻叶绿体基因组，构建了光呼吸支路，如图2。请结合图1、图2，判断光呼吸支路能否减少碳、氮的流失，说明理由________________________。 27. 儿茶素（C）是从茶叶中提取的一种天然多酚类化合物，有一定的抗菌作用，但作用较弱。研究人员用稀土离子Yb3+对儿茶素（C）进行化学修饰，形成配合物Yb3+-C，并探究其抗菌效果和机理。 （1）细菌的细胞膜以__________为基本支架，儿茶素（C）与细胞膜的亲和力强，可以穿过细胞膜。稀土离子Yb3+可与细菌内的某些酶发生竞争性结合而降低酶的活性，也可水解磷酸二酯键进而损伤细菌的遗传物质__________。但稀土离子与细胞的亲和力较弱，难以到达作用靶点，影响了其抗菌活性。 （2）为了确定配合物中Yb3+：C的最佳摩尔比，研究人员利用________方法将金黄色葡萄球菌接种到培养基上，培养基的成分应包括________、水、无机盐等。待培养基布满菌落后，用不同摩尔比的Yb3+-C配合物处理滤纸片，将其置于培养基中一段时间后，比较滤纸片周围____________的直径。 （3）将金黄色葡萄球菌制成菌悬液，分别加入等量的C、Yb3+和最佳摩尔比的Yb3+-C，测定24h内金黄色葡萄球菌存活数量变化（A600值越大，细菌数量越多），结果见下表。 0h 2h 4h 8h 16h 24h 对照组 0.40 0.40 0.38 0.35 0.35 0.35 C处理 0.40 0.12 0.13 0.07 0.02 0.01 Yb3+处理 0.40 0.14 0.11 0.04 0.02 0.01 Yb3+-C处理 0.40 0.02 0.01 0.01 0.01 0.01 由此得出的结论是___________。 （4）为探究配合物Yb3+-C的抗菌机理，研究人利用透射电镜观察了各组金黄色葡萄球菌细胞内的超微结构，结果如下图。结果显示： （a）未加抗菌剂：细菌菌体较小，其细胞质分布均匀； （b）C处理：细胞壁和细胞膜等结构不光滑，略显粗糙； （c）Yb3+处理：细胞质出现较明显的固缩及空泡化现象； （d）Yb3+-C处理：细胞壁及细胞膜等结构发生破裂，细胞质出现了严重的固缩及空泡化现象。 由此可见，儿茶素（C）和Yb3+作用的主要位点分别是___________、___________，推测Yb3+-C具有更强抗菌作用的机理是________。 28. 清水紫花苜蓿被誉为“牧草之王”，但易造成家畜胀病；里奥百脉根因富含缩合单宁，饲喂时可防止家畜胀病的发生。某研究人员设计了下列技术路线，以期获得抗胀病的新型苜蓿。 （1）剪取清水紫花苜蓿、里奥百脉根无菌苗的下胚轴及子叶作为外植体，接种到培养基中，形成愈伤组织，将两种材料的愈伤组织用________酶处理，获得原生质体。 （2）为了提高原生质体的产量，保证实验的成功率，还需考虑酶液的渗透压、酶解时间等因素。分别检测上述两个因素对原生质体产量的影响，结果如图1和图2.甘露醇能维持稳定的渗透压，由图1可知，酶解时宜选用的甘露醇浓度为________，由图2可知，最适宜的酶解时间为________。 （3）科研人员分别加入IOA和R-6G处理后诱导原生质体融合，如图3.诱导原生质体融合的方法除了使用聚乙二醇外，还可以利用的化学方法是________。步骤①仅有杂种原生质体可持续分裂形成再生细胞团，原因是________。 （4）步骤②到步骤③需要更换新的培养基，原因之一是培养基中________是影响植物细胞分裂、分化的关键因素。 （5）获得抗胀病的新型苜蓿品种利用的生物技术是________，该技术在打破生殖隔离，实现________，培育植物新品种等方面展示出独特优势。 29. 动物体细胞核移植（SCNT）的成功率主要取决于体细胞重编程（即供体细胞删除原有的表观遗传模式，重新获得发育全能性）的效率。BRGI是动物体内一种与体细胞重编程有关的基因。为探究BRGI基因过表达对猪核移植早期胚胎发育及相关基因表达的影响，研究者将体外构建的BRGI重组质粒导入胎猪皮肤成纤维细胞中，并完成体细胞核移植，过程如图a所示。 回答下列问题： （1）为获得大量供体细胞，研究者将剪碎的胎猪皮肤组织用______酶处理，分散成单个皮肤成纤维细胞后，转入培养液中，并置于_____的气体环境中进行培养。 （2）用于SCNT的卵母细胞需在体外培养至_____期，去核后与胎猪皮肤成纤维细胞融合形成重构胚，利用电刺激激活重构胚的目的是_______。 （3）研究者设置三组不同处理的胎猪皮肤成纤维细胞作为供体细胞进行SCNT实验。其中阴性对照组的处理是将空质粒导入供体细胞，作用是______；空白对照组的处理是______。 （4）利用三组不同处理的供体细胞完成SCNT实验后，研究者分别统计4-细胞率、8-细胞率和囊胚率见下表。 组别 4-细胞率（%） 8-细胞率（%） 囊胚率（%） 空白对照组 66.14 47.76 20.83* 阴性对照组 65.55 49.53 19.85* 实验组 63.37 50.28 27.33* 注：带*号表示同列数据在统计学上具有显著性差异，不带*号则说明没有显著性差异。 由表中结果得到的实验结论是：______。 （5）NANOG、SOX2属于囊胚多能性基因，对维持内细胞团的多能性具有重要作用。研究者进一步检测NANOG、SOX2基因在3组实验下囊胚阶段的表达水平，结果如图b所示，由此可说明供体细胞过表达BRG1对囊胚的影响机制是______。 30. 科研人员将A基因和B基因利用重叠延伸PCR技术构建A-B融合基因，从而培育出优良性状的转基因花生植株。融合基因构建过程如图1所示，所用Ti质粒各结构组分如图2所示。回答下列问题。 （1）利用重叠延伸PCR技术进行基因融合时，________（填“能”或“不能”）将图1中PCR1和PCR2放入同一个反应体系中进行，原因是________。在杂交链延伸成等长的融合基因时，________（填“需要”或“不需要”）添加引物，原因是________。 （2）为保证A-B融合基因正确插入质粒，利用PCR扩增融合基因时需要在引物________（从图1中选择）的5'端分别添加限制酶________（从图2中选择）的识别序列。 （3）据图2分析筛选转化细胞的过程：第一次在培养基中添加________筛选导入重组Ti质粒的农杆菌菌株，第二次在培养基中添加________筛选染色体DNA上整合T-DNA的花生愈伤组织细胞。此方法筛选出的花生细胞中，A-B融合基因不一定表达的理由________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2027届高二生物试题 一、选择题（单选，共25小题，每题2分，共50分） 1. 下列关于物质跨膜运输的叙述，正确的是（ ） A. 葡萄糖分子进入所有真核细胞的方式均相同 B. 载体蛋白在物质转运过程中空间结构会发生改变 C. 甘油进出细胞取决于细胞内外的浓度差和相应载体的数量 D. 主动转运使膜内外物质浓度趋于一致，维持了细胞的正常代谢 【答案】B 【解析】 【分析】1、红细胞吸收葡萄糖属于协助扩散，而其他细胞吸收葡萄糖属于主动运输。 2、甘油进出细胞的方式是自由扩散，动力是浓度差。 【详解】A、葡萄糖分子进入红细胞是协助扩散，进入其他细胞一般是主动运输，A错误； B、载体蛋白具有将被运载物从低浓度区域转运到高浓度区域的能力它们拥有能与被运载物结合的特异的受体结构域，该结构域对被运载物有较强的亲和性，在被运载物结合之后载体蛋白会将被运载物与之固定，然后通过改变其空间结构使得结合了被运载物的结构域向生物膜另一侧打开，B正确； C、甘油进出细胞的方式是自由扩散，与载体无关，C错误； D、主动运输可逆浓度梯度进行，使细胞内外物质浓度差进一步加大，满足了细胞对营养物质的摄取需要，D错误。 故选 B。 2. 某兴趣小组利用幼嫩的黑藻叶片先后完成了“观察叶绿体和胞质流动”和“质壁分离”实验（图示如下）。下列叙述正确的是（　　） A. 图甲可观察到叶绿体绕细胞核运动 B. 图乙可观察到③的颜色比图甲深 C. 图乙中①②的分离与①的功能特性有关 D. 图甲的细胞体积明显大于图乙 【答案】C 【解析】 【分析】植物细胞的吸水和失水主要取决于细胞周围水溶液的浓度和植物细胞细胞液的浓度的大小，当周围水溶液的浓度小于细胞液的浓度时，细胞就吸水；当周围水溶液的浓度大于细胞液的浓度时，细胞就失水。 【详解】A、黑藻叶肉细胞中叶绿体分布在细胞质中，细胞核被细胞质基质和细胞器包围，在图甲中无法直接观察到叶绿体绕细胞核运动，A错误； B、图乙中细胞发生质壁分离，液泡失水，细胞液浓度增大，由于黑藻液泡呈无色，前后颜色无明显差别，B错误； C、细胞膜能控制物质进出细胞，是选择透过性膜，①与②的分离为质壁分离，与①细胞膜的选择透过性有关，即与①的功能特性有关，C正确； D、图甲是正常细胞，图乙是发生质壁分离的细胞，细胞体积变化不大，因为细胞壁的伸缩性较小，D错误。 故选C。 3. 某科研小组将生理状态相同的植物根尖成熟区细胞分别置于2mol·L-1乙二醇溶液（A组）和2mol·L-1蔗糖溶液（B组）中，测得原生质体相对体积变化如图所示。相关叙述正确的是（　　） A. 0-120s两组细胞的原生质体均渗透失水 B. 0-120s水的运输方式A组为自由扩散，B组为协助扩散 C. 120s后A组乙二醇开始进入细胞使原生质体体积增加 D. 120s后B组细胞不再进行水分子的跨膜运输 【答案】A 【解析】 【详解】A、0~120s内，两组原生质体相对体积都在减小，说明两组细胞均发生渗透失水，A正确； B、水分子跨膜运输的方式都是自由扩散和通过水通道蛋白进行协助扩散，与所处溶液种类无关，B错误； C、乙二醇是小分子，可以自由透过细胞膜，从接触溶液开始就逐渐进入细胞，并非120s后才开始进入，C错误； D、120s后B组原生质体体积稳定，此时水分子进出细胞达到动态平衡，并非停止跨膜运输，D错误。 4. 下图甲表示细胞内某种物质的合成和转运过程，图乙表示胰岛素合成和分泌过程中的细胞膜、内质网膜和高尔基体膜的面积变化。下列有关叙述错误的是（　　） A. 图甲的C物质是蛋白质，结构A是核糖体，C物质形成的方式是脱水缩合 B. 若G是合成D物质的原料，则G物质所经过的结构依次是细胞膜→内质网→高尔基体→细胞膜 C. 图乙中①②③分别表示内质网膜、高尔基体膜、细胞膜 D. 属于图甲C类物质的是呼吸酶、线粒体膜的组成蛋白和血红蛋白 【答案】B 【解析】 【详解】A、图甲中的C物质是蛋白质，结构A是核糖体，C蛋白质物质形成的方式是脱水缩合，A正确； B、若G是合成D物质的原料，则G物质为氨基酸，所经过的结构依次是细胞膜→核糖体→内质网→高尔基体→细胞膜，B错误； C、由图示可知，①在胰岛素分泌前后表现为膜面积减少，因而为内质网，②的膜面积在胰岛素分泌前后膜面积不变，因而表示的是高尔基体膜，③发生的变化是膜面积变大，因而表示细胞膜，C正确； D、图甲中的C物质没有分泌到细胞外，表示胞内蛋白，如呼吸酶、线粒体膜的组成蛋白和血红蛋白，D正确。 5. 盐碱地中含大量的NaCl、Na2CO3等钠盐，会威胁海水稻的生存，同时一些病原菌也会感染水稻植株，影响其正常生长。如图为海水稻抵抗逆境的生理过程示意图。下列叙述错误的是（　　） A. H2O可以通过自由扩散和协助扩散两种方式进入海水稻细胞 B. 海水稻细胞通过胞吐方式分泌抗菌蛋白抵御病原菌的侵染 C. 液泡逆浓度梯度吸收Na+增大细胞液的浓度以适应高浓度环境 D. H+以协助扩散的方式从细胞质基质运入液泡或运出细胞 【答案】D 【解析】 【详解】A、结合图示可知，水进出细胞的方式有自由扩散（不需要载体和能量）和协助扩散（需要转运蛋白、不需要能量），A正确； B、抗菌蛋白是大分子物质，图中海水稻细胞可形成囊泡运输抗菌蛋白，通过胞吐方式分泌，B正确； C、图中液泡吸收Na+是逆浓度梯度进行的，即从低浓度向高浓度的运输，增大细胞液的浓度以适应高浓度环境，防止其在高浓度的环境下失水，C正确； D、图中液泡内和细胞膜外的pH≈5.5，细胞质基质pH≈7.5，因此H+从细胞质基质运入液泡和运出细胞是逆浓度梯度，需要消耗能量，方式为主动运输，D错误。 故选D。 6. 月季花色深浅受花瓣中花青素含量影响，研究发现适度低温可提升浅色品种月季花青素合成酶的活性。相关叙述错误的是（　　） A. 低温使浅色品种月季花瓣颜色变浅 B. 温度影响花青素合成酶的空间结构 C. 花青素合成酶降低花青素合成反应的活化能 D. 月季花色是基因和环境共同作用的结果 【答案】A 【解析】 【详解】A、适度低温提升浅色品种月季花青素合成酶的活性，会促进花青素合成，使花瓣中花青素含量升高，花色变深而非变浅，A错误； B、温度会影响酶的空间结构：高温会破坏酶的空间结构使酶永久失活，低温会使酶的空间结构更稳定、活性被抑制，适度温度下酶的空间结构适宜、催化活性更高，B正确； C、酶的作用机理是降低化学反应的活化能，花青素合成酶作为生物催化剂，可降低花青素合成反应的活化能，C正确； D、月季花色由控制色素合成的相关基因决定，同时受温度等环境因素的影响，因此是基因和环境共同作用的结果，D正确。 7. 肌肉收缩是粗肌丝和细肌丝之间的相对滑动导致的，肌球蛋白位于粗肌丝内，其头部具有一个结合ATP的位点（如下图）。细肌丝中存在肌球蛋白的结合位点，肌球蛋白与细肌丝结合并引起细肌丝滑动，然后肌球蛋白又回到原来的状态。下列叙述不正确的是（ ） A. 肌球蛋白与ATP结合后，其空间结构发生改变 B. 肌球蛋白具有催化ATP水解的特性 C. 不同条件下肌肉收缩都需要线粒体的参与 D. ATP驱动肌肉运动，实现“化学能→机械能”转换 【答案】C 【解析】 【分析】根据题意和图示分析可知，图中肌球蛋白与ATP结合后，其空间结构发生改变，并使ATP水解释放能量，用于肌球蛋白与细肌丝结合并引起细肌丝滑动，然后肌球蛋白又回到原来的状态。此过程中肌球蛋白可以看作是催化ATP水解的一种酶。ATP是直接能源物质，其合成时，能量来自光合作用或细胞呼吸作用。 【详解】AB、根据题意和图示分析可知，图中肌球蛋白与ATP结合后，其空间结构发生改变，并使ATP水解释放能量，此过程中肌球蛋白可以看作是催化ATP水解的一种酶，AB正确； C、不同条件下肌肉收缩都需要ATP的参与，但是ATP可以来自细胞呼吸的第一阶段发生的场所细胞质基质，也可以来自有氧呼吸的二、三阶段发生的场所线粒体，C错误； D、ATP是直接能源物质，ATP驱动肌肉运动，通过ATP水解释放化学能，转化为肌肉运动中的机械能，从而实现“化学能→机械能”转换，D正确。 故选C。 8. 在生物体内能量的转换和传递中，ATP是一种关键的物质，其分子结构式如图1所示（①~⑤表示组成ATP的相关化学基团）。图2表示ATP与ADP的相互转化图解。下列相关叙述正确的是（　　） A. 图1中的②是脱氧核糖，脱去①和⑤后的名称是腺嘌呤脱氧核苷酸 B. 图1中③与④之间的化学键和④与⑤之间的化学键稳定性相同 C. 图2中的能量Q1可能是化学能或光能，能量Q2可用于各项生命活动 D. 图2中的酶1和酶2分别是ATP水解酶和ATP合成酶 【答案】C 【解析】 【详解】A、图1中的②是核糖，脱去④和⑤后的名称是腺嘌呤核糖核苷酸，A错误； B、④与⑤之间的化学键稳定性低于③与④之间的化学键，B错误； C、合成ATP需要的能量Q1可来自光合作用和呼吸作用，所以能量Q1可能是化学能或光能，能量Q2可用于各项生命活动，C正确； D、图2中的酶1催化ATP的合成，为ATP合成酶，酶2催化ATP的水解，为ATP水解酶，D错误。 故选C。 9. Y蛋白主要存在于肿瘤细胞线粒体的内外膜间隙，可与丙酮酸转运蛋白相互作用，抑制丙酮酸进入线粒体。相关叙述正确的是（ ） A. 丙酮酸转运蛋白主要分布于线粒体基质 B. 丙酮酸可在肿瘤的细胞质基质中转化为乳酸 C. 推测肿瘤细胞主要依靠有氧呼吸第三阶段供能 D. 敲除Y基因的肿瘤细胞耗氧速率明显降低 【答案】B 【解析】 【分析】高等植物的细胞呼吸可以分为有氧呼吸和无氧呼吸两类，有氧呼吸分为三个阶段，分别为葡萄糖在细胞质基质分解为丙酮酸和[H]，丙酮酸在线粒体基质分解为二氧化碳和[H]，氧气和[H]在线粒体内膜上生成水三个过程。而无氧呼吸是在没有氧气的条件下，第一阶段产生的丙酮酸在细胞质基质被分解为酒精和二氧化碳。 【详解】A、丙酮酸转运蛋白的作用是将丙酮酸从细胞质基质转运至线粒体基质，其位于​​线粒体内膜​​，而非线粒体基质中，A错误； B、Y蛋白抑制丙酮酸进入线粒体，导致丙酮酸无法参与线粒体内的有氧呼吸（如柠檬酸循环）。此时，肿瘤细胞通过​​无氧呼吸​​（糖酵解）在细胞质基质中将丙酮酸转化为乳酸，以维持能量供应，B正确； C、有氧呼吸第三阶段（氧化磷酸化）依赖前两阶段的产物（如NADH和FADH₂）。若丙酮酸无法进入线粒体，则柠檬酸循环无法进行，第三阶段反应物不足，肿瘤细胞主要依赖​​糖酵解​​（无氧呼吸）供能，而非有氧呼吸第三阶段，C错误； D、敲除Y基因后，Y蛋白的抑制作用解除，丙酮酸可正常进入线粒体参与有氧呼吸，线粒体耗氧速率应​​升高​​而非降低，D错误。 故选C。 10. 某兴趣小组发现樱桃受到机械损伤后容易腐烂，查阅相关资料后推测樱桃腐烂可能与机械损伤引起樱桃有氧呼吸速率升高有关。图1表示樱桃的细胞呼吸过程，A~E表示物质，①~④表示过程。为验证机械损伤能引起樱桃有氧呼吸速率升高，设计实验装置如图2所示，忽略外界环境因素影响。下列叙述正确的是（　　） A. 图1表示樱桃的细胞呼吸过程，A代表水，B代表二氧化碳，D代表氧气，E代表乳酸 B. 图1中①过程发生的场所是细胞质基质，③过程发生的场所是线粒体内膜 C. 图2中放入NaOH溶液的作用是吸收樱桃呼吸作用产生的二氧化碳 D. 与放入损伤的樱桃相比，若图2装置中放入完整未损伤的樱桃，则有色液滴向左移动更快 【答案】C 【解析】 【详解】A、分析图1，①过程是有氧呼吸（或无氧呼吸）的第一阶段，②过程是无氧呼吸的第二阶段，③过程是有氧呼吸的第二阶段，④过程是有氧呼吸的第三阶段，A是水，B是二氧化碳，C是NADH/[H]，D是氧气，E是酒精，A错误； B、图1中①过程为有氧呼吸第一阶段，发生的场所是细胞质基质；③过程为有氧呼吸第二阶段，发生的场所是线粒体基质，B错误； C、图2中放入NaOH溶液的作用是吸收樱桃呼吸作用产生的二氧化碳，这样装置中气体体积变化仅由氧气量的变化引起，C正确； D、机械损伤能引起樱桃有氧呼吸速率升高，与放入损伤的樱桃相比，若图2装置中放入完整未损伤的樱桃，则有色液滴向左移动更慢，D错误。 11. 细胞呼吸原理广泛应用于生产实践中。下表中措施与对应的目的不恰当的是（ ） 选项 应用 措施 目的 A 种子贮存 晒干 降低自由水含量，降低细胞呼吸 B 乳酸菌制作酸奶 通气 加快乳酸菌繁殖，有利于乳酸发酵 C 水果保鲜 零上低温 降低酶的活性，降低细胞呼吸 D 栽种庄稼 疏松土壤 促进根有氧呼吸，利于吸收矿质离子 A. A B. B C. C D. D 【答案】B 【解析】 【分析】水在细胞中有两种形式：结合水和自由水。 结合水是构成细胞结构的重要成分。 自由水具有以下作用： 为细胞提供液体环境、参与化学反应、运输营养物质与代谢废物、是细胞内良好的溶剂。 【详解】A、粮油种子的贮藏，必须降低自由水含量，使种子处于风干状态，从而使呼吸作用降至最低，以减少有机物的消耗，A正确； B、乳酸菌是严格厌氧的微生物，所以整个过程要严格密封，B正确； C、水果保鲜的目的既要保持水分，又要降低呼吸作用，所以低温是最好的方法，但温度不能太低，适于零上低温保存，C错误； D、植物根对矿质元素的吸收过程是一个主动运输过程，需要能量和载体蛋白，植物生长过程中的松土，可以提高土壤中氧气的含量，有利于根细胞的有氧呼吸作用，从而为根吸收矿质离子提供更多的能量，D正确。 故选C。 【点睛】 12. 下图为人体细胞呼吸的部分过程。DNP（2，4-二硝基苯酚）是20世纪30年代曾广泛使用的减肥药，它是一种脂溶性小分子，可在膜中自由移动，作为H⁺转运体破坏膜两侧H⁺浓度差。下列说法不正确的是（ ） A. 图示生理过程为有氧呼吸第三阶段 B. 图中NADH来自线粒体基质 C. DNP有严重副作用，可能伴有高热、高乳酸血症等 D. ATP合成动力为跨线粒体内膜的H⁺浓度梯度 【答案】B 【解析】 【分析】1、有氧呼吸第一阶段场所为细胞质基质，利用葡萄糖生成丙酮酸、还原氢和少量能量；第二阶段发生在线粒体基质，利用丙酮酸和水生成还原氢和少量能量；第三阶段在线粒体内膜，前两阶段产生的还原氢和氧气生成水，释放大量能量。 2、有氧呼吸分为三个阶段，图中展示了有氧呼吸第三阶段的电子传递链和ATP合成过程。在有氧呼吸第三阶段，NADH与氧气结合生成水，同时释放大量能量，一部分能量用于合成ATP。通过Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ的作用，即电子传递链中一系列酶和载体的作用，将氢离子（H+）从线粒体基质泵到线粒体内外膜间隙，增大了线粒体内膜两侧的H+浓度差。H+顺浓度通过V（ATP合成酶）时，膜两侧H+浓度差形成的势能转化为ATP中的化学能，用于ADP和Pi合成ATP。 【详解】A、有氧呼吸分为三个阶段，图中展示了有氧呼吸第三阶段的电子传递链和ATP合成过程。在有氧呼吸第三阶段，NADH与氧气结合生成水，同时释放大量能量，一部分能量用于合成ATP，A正确； B、第三阶段参与反应的NADH来自第一阶段细胞质基质和第二阶段线粒体基质，B错误； C、根据题意和图示可知，DNP作为H⁺转运体破坏膜两侧H⁺浓度差，使H+不经ATP合成酶V回流，导致线粒体内膜两侧H+浓度差形成的势能无法用于合成ATP，使ATP合成减少，大量能量以热能形式散失，进而导致机体高热；DNP使机体ATP合成减少，导致无氧呼吸加强以弥补ATP的不足，进而导致乳酸积累，形成高乳酸血症，C正确； D、图中通过Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ的作用，即电子传递链中一系列酶和载体的作用，将氢离子（H+）从线粒体基质泵到线粒体内外膜间隙，增大了线粒体内膜两侧的H+浓度差。H+顺浓度通过V（ATP合成酶）时，膜两侧H+浓度差形成的势能转化为ATP中的化学能，用于ADP和Pi合成ATP，D正确。 故选B。 13. 中国科学家通过液滴微流控技术将天然的叶绿体内类囊体膜与CETCH循环体系(含Ccr等多种酶)共同封装到了液滴中构建出了一个“半天然半合成系统”，该系统能连续将CO2转化为乙醇酸，进而实现人工合成淀粉，如图所示。以下说法正确的是（ ） A. 通常使用密度梯度离心法从菠菜叶肉细胞中分离出叶绿体 B. 光照越强，CETCH循环的速率就越快 C. 据图分析B溶液是水溶液，CETCH循环相当于光合作用中的暗反应阶段 D. 在与植物光合作用固定的CO2量相等的情况下，该反应体系糖类的积累量高于植物 【答案】D 【解析】 【分析】光合作用的光反应阶段包括水的光解产生NADPH与氧气，以及ATP的形成；光合作用的暗反应阶段（场所是叶绿体的基质中）包括CO2被C5固定形成C3，C3在光反应提供的ATP和NADPH的作用下还原生成糖类等有机物。 【详解】A、分离细胞器常用的方法是差速离心法，而密度梯度离心法主要用于分离核酸、蛋白质等生物大分子，所以不能使用密度梯度离心法从菠菜叶肉细胞中分离出叶绿体，A错误； B、在一定范围内光照越强，光合作用强度越强，因而可推测CETCH循环的速率也会加快，但不会一直加快，B错误； C、由图可知，A溶液中进行光反应产生ATP、NADPH等，进而利用光反应的产物将CO₂转化为乙醇酸，磷脂分子尾部朝向B溶液，则B溶液是脂溶性的，CETCH循环相当于光合作用中的暗反应阶段，C错误； D、植物进行光合作用时，会有一部分糖类用于细胞呼吸等消耗，而该反应体系没有细胞呼吸等消耗糖类的过程，所以在与植物光合作用固定的CO₂量相等的情况下，该反应体系糖类的积累量高于植物，D正确。 故选D。 14. D1蛋白参与光反应，强光下易损伤，D1的合成及修复效率是维持光合速率的关键。下列叙述正确的是（　　） A. D1受损降低光反应ATP生成速率 B. 新合成的D1在叶绿体基质中发挥作用 C. D1修复速率直接影响CO2与C5的结合过程 D. 抑制D1基因的表达有利于植物对强光的适应 【答案】A 【解析】 【详解】A、D1蛋白参与光反应，光反应的产物包括ATP，D1受损会导致光反应效率下降，因此会降低光反应ATP的生成速率，A正确； B、光反应的场所是叶绿体类囊体薄膜，因此参与光反应的D1蛋白应在类囊体薄膜上发挥作用，而非叶绿体基质（暗反应场所），B错误； C、CO2与C5的结合属于暗反应的CO2固定阶段，该过程本身不需要光反应产物的参与，D1修复速率通过影响光反应产生的ATP和NADPH的量，进而影响C3还原和C5再生，间接影响CO2固定过程，C错误； D、抑制D1基因的表达会导致D1蛋白合成量减少，强光下D1受损后无法及时修复，会抑制光反应、降低光合速率，不利于植物适应强光环境，D错误。 15. 发菜是一种生长在干旱地区的陆生蓝藻。如图是不同NaCl浓度对某种发菜光合速率和呼吸速率的影响曲线。下列描述错误的是 A. 此种发菜在测定的NaCl浓度范围内均可正常生长 B. 发菜细胞中无叶绿体，但含有能吸收光能的色素 C. 此种发菜生长的最适NaCl浓度为615mol/L D. 随NaCl浓度升高，发菜光合速率和呼吸速率的变化趋势不同 【答案】A 【解析】 【分析】据图分析：该实验的自变量是氯化钠的浓度，因变量是某种发菜光合速率和呼吸速率，实验表明在一定的范围内随着氯化钠的浓度升高，发菜的真光合速率、净光合速率和呼吸速率都有所提高，超过一定浓度真光合速率和净光合速率均下降，呼吸速率缓慢提高并基本稳定。 【详解】A.由图可知，此种发菜在测定的NaCl浓度范围较高时净光合速率<0，不能正常生长，A错误； B. 发菜是蓝藻的一种，属于原核生物，体内无叶绿体，但有能吸收光能的色素，B正确； C. 图中氯化钠浓度在615mol/L时净光合速率最大，故发菜生长的最适NaCl浓度为615mol/L，C正确； D.随NaCl浓度升高，发菜光合速率和呼吸速率的变化趋势不同，D正确。 故选A。 16. 自然发酵法酿造酱油时，先将浸泡的大豆蒸煮、冷却后与面粉混合，铺摊在空气流通处，使米曲霉等霉菌大量生长繁殖（制曲）。制曲后，混合质量分数20%的盐水制成酱醅，置于大缸内，在太阳下曝晒，定期翻酱。发酵结束后，收集液体经灭菌、分装制成酱油。下列叙述错误的是（　　） A. 参与酿造酱油的米曲霉等霉菌是需氧型微生物 B. 大豆、面粉为酿造酱油的微生物提供碳源、氮源 C. 抑制酱醅中的有害微生物主要依靠阳光中紫外线 D. 自然环境中的多种微生物赋予酱油特殊的风味 【答案】C 【解析】 【详解】A、制曲阶段将原料铺摊在空气流通的环境，保证氧气充足，说明参与酿造的米曲霉等霉菌是需氧型微生物，A正确； B、大豆富含蛋白质，可为微生物提供氮源、碳源，面粉富含淀粉，可为微生物提供碳源，二者能为发酵微生物提供所需的营养物质，B正确； C、酱醅中添加了质量分数20%的高浓度盐水，高渗环境会导致有害微生物失水死亡，是抑制有害微生物的主要因素；紫外线穿透力极弱，仅能杀灭表层少量微生物，不是主要抑菌因素，C错误； D、自然发酵为非纯种发酵，自然环境中的多种微生物共同参与发酵，不同微生物的代谢产物存在差异，共同赋予酱油特殊的风味，D正确。 17. 下图表示培养和纯化酵母菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是（ ） A. 步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置 B. 步骤②为防止污染，接种环灼烧灭菌后应快速挑取菌落 C. 步骤③划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落 D. 步骤④在恒温培养箱培养后，可用于对酵母菌进行计数 【答案】C 【解析】 【分析】根据题意和图示分析可知：①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养。 【详解】A、步骤①倒平板操作时，倒好后应待平板冷却凝固后再将平板倒过来放置，A错误； B、灼烧后的接种环需在火焰旁冷却后再沾取菌液进行平板划线，B错误； C、步骤③通过连续划线，使接种物逐渐稀释分布在培养基的表面，在数次划线后培养，可分离到一个细胞繁殖而来的单个菌落，C正确； D、平板划线法接种的培养基上，由于起始段菌体密集，所以无法对其计数，D错误。 故选C。 18. 为实现多肉植物的规模化生产，科研人员开展了如下研究。相关叙述正确的是（ ） A. 过程①宜选择成熟叶片，分别用次氯酸钠和70%的酒精浸泡30s B. 过程②应避光培养，防止愈伤组织分化成筛管、维管等 C. 过程③应配制2种培养基，其主要目的是满足不同阶段试管苗对营养的需求 D. 过程④应在珍珠岩基质中添加适量蔗糖，为幼苗生长提供碳源 【答案】B 【解析】 【分析】植物组织培养操作流程： ①外植体的选择和处理：从具有本品种典型特征、生长健壮、无病虫害的植株上获取生长速度快、性状基本稳定的部位，作为外植体（从植物体上分离出的器官或组织的片段），将流水充分冲洗后的外植体用酒精消毒30s，然后立即用无菌水清洗2~3次；再用次氯酸钠溶液处理30min后，立即用无菌水清洗2~3次。用无菌滤纸吸去表面的水分，用解剖刀将外植体切成0.5~1cm长的小段。 ②愈伤组织的诱导与培养：在酒精灯火焰旁，将外植体的~插入诱导愈伤组织的培养基中。将接种了外植体的锥形瓶或植物组织培养瓶置于18~22℃的培养箱中培养。定期观察和记录愈伤组织的生长情况。 ③芽、根的诱导与培养：将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽的培养基上。长出芽后，再将其转接到诱导生根的培养基上，进一步诱导形成试管苗。 ④炼苗移植：将试管苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，壮苗后再移栽入土。 【详解】A、过程①选取幼嫩叶片，应该在70%的酒精浸泡30s后，立即取出，在无菌水清洗2~3次，再用次氯酸钠溶液处理30min后，立即用无菌水清洗2~3次，A错误； B、愈伤组织是高度液泡化，不定形的薄壁组织团块，过程②诱导愈伤组织期间一般不需要光照，为了防止愈伤组织分化成筛管、维管等，应避光培养，B正确； C、过程③应配制2种培养基，其主要目的是满足不同阶段试管苗对特定激素的需求，生长素/细胞分裂素比值高有利于根的分化、抑制芽的形成，生长素/细胞分裂素比值低有利于芽的分化、抑制根的形成，C错误； D、过程④将试管苗移植到消过毒的珍珠岩基质中，是为了试管苗适应外界环境，再移栽到土壤中。试管苗能进行光合作用合成有机物，不需要在珍珠岩基质中添加适量蔗糖作为碳源，D错误。 故选B。 19. 科学家利用仙台病毒诱导A、B两种动物细胞进行融合，之后进行细胞培养。已知A、B两种细胞各自的生活环境（如下表所示），且融合细胞只能在选择培养基Ⅱ上生长，下列叙述错误的是（　　） A细胞 只能在选择培养基Ⅰ上生长，生长环境的pH为4～6 B细胞 只能在选择培养基Ⅱ上生长，生长环境的pH为7～8 A. 可用PEG融合法和电融合法诱导动物细胞融合 B. 选择培养基Ⅱ上存活下来并生长的细胞就是融合细胞 C. 将融合后的细胞置于CO2培养箱以维持培养液的 D. A、B两种动物细胞融合体现了细胞膜具有一定的流动性 【答案】B 【解析】 【分析】诱导动物细胞融合的方法包括物理法、化学法（聚乙二醇等）和生物法（灭活的病毒）。 【详解】A、可用PEG融合法和电融合法、灭活病毒诱导法，诱导动物细胞融合，A正确； B、虽然融合细胞只能在选择培养基Ⅱ上生长，但在选择培养基Ⅱ上存活下来并生长的细胞不一定都是融合细胞，有可能存在B细胞（因为B细胞原本就能在选择培养基Ⅱ上生长），B错误； C、将融合后的细胞置于CO2培养箱以维持培养液的pH，C正确； D、A、B两种动物细胞融合，体现了细胞膜具有流动性，D正确。 故选B。 20. 如图为制备抗HPV16型和HPV18型E6、E7蛋白的混合单克隆抗体的流程示意图。下列相关叙述正确的是（　　） A. 给新西兰兔注射HPV16型和HPV18型E6、E7蛋白，目的是促进浆细胞产生抗体 B. 过程①是从新西兰兔中分离产生特定抗体的浆细胞，通过过程②完成细胞的融合 C. 过程③需用特定的选择培养基筛选b细胞，获得的c细胞既能无限增殖又能产生抗体 D. 过程④需进行克隆化培养和抗体检测，可获得能同时产生四种特异性抗体的目标杂交瘤细胞 【答案】C 【解析】 【详解】A、给新西兰兔进行免疫，注射HPV16型和HPV18型E6、E7蛋白，可刺激兔的免疫系统产生能分泌对应抗体的B淋巴细胞，并不是促进浆细胞产生抗体，A错误； B、过程1是从新西兰兔的脾脏中分离已免疫的B淋巴细胞，不是产生特定抗体的浆细胞，B错误； C、过程3是用选择培养基筛选b细胞，其中含有未融合的以及融合的同种核的细胞，筛选出的c细胞为杂交瘤细胞，该细胞兼具骨髓瘤细胞无限增殖的特点和B淋巴细胞产生抗体的能力，C正确； D、过程4需进行克隆化培养和抗体检测，最终获得的是分别针对四种蛋白：HPV16型E6、HPV16型E7、HPV18型E6、HPV18型E7的单一特异性杂交瘤细胞，而不是能同时产生四种抗体的杂交瘤细胞，D错误。 21. 利用PCR可以在体外进行DNA片段扩增，下列叙述错误的是（ ） A. 通过改变体系中的温度，控制PCR的反应进程 B. PCR是酶促反应，需加入解旋酶和DNA-聚合酶 C. 通过引物的设计可以做到选择性扩增DNA片段 D. 根据DNA分子的大小和构象，通过电泳鉴定产物 【答案】B 【解析】 【分析】PCR原理：在高温作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的；实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程；DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。 【详解】A、PCR反应中，每次循环一般分为变性（超过90℃）、复性（50℃左右）和延伸（72℃左右），所以通过改变体系中的温度，控制PCR的反应进程，A正确； B、PCR是酶促反应，需加入耐高温的DNA聚合酶，不需要加解旋酶，B错误； C、PCR技术可在生物体外复制特定的DNA片段，其中“特定DNA片段”是指两引物之间的DNA序列，所以通过引物的设计可以做到选择性扩增DNA片段，C正确； D、DNA分子在凝胶中的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象有关，故根据DNA分子的大小和构象，通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定产物，D正确。 故选B。 22. 用XhoI和SalI两种限制性内切核酸酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是（ ） A. 如图中两种酶识别的核苷酸序列不同 B. 如图中酶切产物可用于构建重组DNA分子 C. 泳道①中是用SalI处理得到的酶切产物 D. 限制酶既可切割双链DNA也可以切割单链DNA 【答案】D 【解析】 【分析】DNA一般是双螺旋结构；限制酶可以识别特定的脱氧核苷酸序列，并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割。 【详解】A、限制酶识别特定的脱氧核苷酸序列，不同的限制酶能识别不同的核苷酸序列，由电泳图可知XhoI和SalI两种酶分别切割时，识别的序列不同，A正确； B、同种限制酶切割出的DNA片段，具有黏性末端，再用DNA连接酶进行连接，可以构成重组DNA，B正确， C、SalⅠ将DNA片段切成4段，XhoⅠ将DNA片段切成3段，根据电泳结果可知泳道①为SalI，泳道②为XhoI，C正确； D、限制酶切割双链DNA，不能切割单链DNA或RNA，D错误。 故选D。 23. 蛋白质工程是合成生物学的重要分支，其核心目标是优化蛋白质以在特定条件下发挥其最佳功能。近年来，机器学习（ML）在蛋白质发现中展现出巨大潜力，已被广泛应用于蛋白质结构预测、结构重建和反向折叠等任务中。下图为蛋白质工程的流程，下列叙述错误的是（ ） A. 机器学习（ML）在蛋白质工程应用的设想中，实现难度最大的是过程④ B. 实施蛋白质工程的前提条件是了解蛋白质结构与功能的关系 C. 通过机器学习（ML）得到的蛋白质还需进行功能检测实验才可以投入生产 D. 蛋白质工程不需要对基因进行操作，直接对蛋白质进行加工改造 【答案】D 【解析】 【分析】1、蛋白质工程：指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。 2、蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因），之后按照基因工程的一般步骤进行。 【详解】A、蛋白质工程是从预期蛋白质功能开始的，根据人类对蛋白质的功能需求设计蛋白质的高级结构（过程④）是最难实现的，A正确； B、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，因此实施蛋白质工程的前提条件是了解蛋白质结构和功能的关系，B正确； C、通过机器学习（ML）得到的蛋白质还需要进行进一步的功能检测实验才可以投入生产，以确保该蛋白质可以发挥预期的功能，C正确； D、蛋白质工程是将控制蛋白质的基因进行修饰改造或合成新的基因，然后运用基因工程合成新的蛋白质，所以蛋白质工程需要对基因进行操作，D错误。 故选D。 24. 研究人员选择分别在20℃、-20℃条件下保存的花菜、辣椒和蒜黄作为实验材料，进行“DNA的粗提取与鉴定”实验，部分实验步骤和DNA鉴定结果如图1、图2所示。下列说法正确的是（ ） A. 该实验常利用DNA在酒精中溶解度较大的特性来提取DNA B. “DNA的粗提取与鉴定”实验需要在无菌条件下进行 C. 图1中，过滤后DNA主要存在于沉淀中，需用2mol/L NaCl溶液重新溶解 D. 图2中，低温时蓝色深度更高，原因可能是低温抑制了酶的活性，DNA降解速率更慢 【答案】D 【解析】 【详解】A、该实验提取DNA的原理是DNA不溶于酒精，而蛋白质等杂质可溶于酒精，利用该特性使DNA析出，A错误； B、“DNA的粗提取与鉴定”实验不需要无菌条件，B错误； C、研磨破碎细胞后，DNA释放后溶解在研磨液中，过滤后DNA主要存在于滤液中，C错误； D、二苯胺鉴定DNA时，蓝色深浅与DNA含量正相关；低温会抑制降解DNA的酶的活性，DNA降解速率更慢，最终提取得到的DNA更多，因此蓝色深度更高，D正确。 25. 法律和法规是规范生物技术研究，防止生物技术滥用的有力武器。下列叙述与我国相关法规不符的是（ ） A. 用农业转基因生物加工制成的产品需提供标识 B. 不得将体外受精获得的人类胚胎植入人体生殖系统 C. 在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器 D. 禁止非医学需要的胎儿性别鉴定和选择性别人工终止妊娠 【答案】B 【解析】 【分析】转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）.对待转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。 【详解】A、用农业转基因生物加工制成的产品需提供标识，以确保消费者的知情权，A正确； B、生产试管婴儿需要将体外受精获得的人类胚胎植入人体生殖系统，B错误； C、生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等，我国已申明在任何情况下，不发展、不生产、不储存生物武器，C正确； D、禁止非医学需要的胎儿性别鉴定和选择性别人工终止妊娠，以避免引发伦理问题等，D正确。 故选B。 二、非选择题（共5小题，共50分） 26. 强光会导致光合速率降低影响水稻产量，我国科学家利用基因工程在叶绿体中表达特定酶，优化代谢途径，成功实现增产。 （1）光合作用暗反应中，CO2在R酶的作用下与C5结合，该过程称作_____。生成的C3接受ATP和NADPH释放的能量，并被______还原，随后，一部分C3经一系列反应转化为糖类。 （2）R酶对CO2和O2均具有亲和力，R酶催化的反应方向取决于细胞中CO2/O2比值。如图1所示，当比值高时，主要进行暗反应；比值降低时，R酶催化C5与O2结合加强，在叶绿体、过氧化物酶体、线粒体中发生一系列反应，即光呼吸。 ①请分析图1，选填以下字母，解释夏季强光导致水稻减产的原因________；________；________；________。 A.CO2/O2比值下降 B.暗反应减弱 C.碳原子流失 D.光呼吸加剧 ②此外，氮原子流失也是造成水稻减产的原因之一。图1中的S酶位于叶绿体基质。光呼吸途径产生的NH3可能经气孔散失，或________，导致氮同化效率低。 （3）科学家将编码G酶、C酶、B酶、T酶的外源基因转入水稻叶绿体基因组，构建了光呼吸支路，如图2。请结合图1、图2，判断光呼吸支路能否减少碳、氮的流失，说明理由________________________。 【答案】（1） ①. CO2的固定 ②. NADPH （2） ①. B ②. A ③. D ④. C ⑤. 运至叶绿体才能被同化 （3）能，因为该支路使光呼吸生成的C2在叶绿体中转化成糖，不产生CO2，减少碳流失；同时在叶绿体中产生NH3可迅速被同化，减少氮流失。 【解析】 【小问1详解】 光合作用暗反应过程：CO2​与C5​结合生成C3​的过程称为CO2​的固定；固定生成的C3​接受ATP和NADPH的能量后，被NADPH还原，再进一步转化为糖类和再生C5​。 【小问2详解】 ①夏季强光高温下，为降低蒸腾作用，水稻部分气孔关闭，两条路径导致减产：路径1：气孔关闭→CO2​供应不足→暗反应减弱（Ⅰ对应B）→光合速率下降→减产；路径2：气孔关闭→细胞内CO2​减少、O2​积累→CO2​/O2​比值下降（Ⅱ对应A）→R酶催化光呼吸加剧（Ⅲ对应D）→光呼吸导致碳原子以CO2​形式流失（Ⅳ对应C）→光合原料减少，减产。 ②根据“图1中的S酶位于叶绿体基质”可知，光呼吸产生的NH3​除了经气孔散失，或者运至叶绿体才能被S酶同化，导致氮同化效率降低。 【小问3详解】 对比原光呼吸（碳、氮最终排出细胞散失），人工构建的光呼吸支路全程在叶绿体内完成：使光呼吸生成的C2转化为C3​，进而转化为糖，减少碳流失；产生的NH3​留在叶绿体内，可被S酶迅速同化利用，减少氮流失，因此可以减少碳、氮的流失。 27. 儿茶素（C）是从茶叶中提取的一种天然多酚类化合物，有一定的抗菌作用，但作用较弱。研究人员用稀土离子Yb3+对儿茶素（C）进行化学修饰，形成配合物Yb3+-C，并探究其抗菌效果和机理。 （1）细菌的细胞膜以__________为基本支架，儿茶素（C）与细胞膜的亲和力强，可以穿过细胞膜。稀土离子Yb3+可与细菌内的某些酶发生竞争性结合而降低酶的活性，也可水解磷酸二酯键进而损伤细菌的遗传物质__________。但稀土离子与细胞的亲和力较弱，难以到达作用靶点，影响了其抗菌活性。 （2）为了确定配合物中Yb3+：C的最佳摩尔比，研究人员利用________方法将金黄色葡萄球菌接种到培养基上，培养基的成分应包括________、水、无机盐等。待培养基布满菌落后，用不同摩尔比的Yb3+-C配合物处理滤纸片，将其置于培养基中一段时间后，比较滤纸片周围____________的直径。 （3）将金黄色葡萄球菌制成菌悬液，分别加入等量的C、Yb3+和最佳摩尔比的Yb3+-C，测定24h内金黄色葡萄球菌存活数量变化（A600值越大，细菌数量越多），结果见下表。 0h 2h 4h 8h 16h 24h 对照组 0.40 0.40 0.38 0.35 0.35 0.35 C处理 0.40 0.12 0.13 0.07 0.02 0.01 Yb3+处理 0.40 0.14 0.11 0.04 0.02 0.01 Yb3+-C处理 0.40 0.02 0.01 0.01 0.01 0.01 由此得出的结论是___________。 （4）为探究配合物Yb3+-C的抗菌机理，研究人利用透射电镜观察了各组金黄色葡萄球菌细胞内的超微结构，结果如下图。结果显示： （a）未加抗菌剂：细菌菌体较小，其细胞质分布均匀； （b）C处理：细胞壁和细胞膜等结构不光滑，略显粗糙； （c）Yb3+处理：细胞质出现较明显的固缩及空泡化现象； （d）Yb3+-C处理：细胞壁及细胞膜等结构发生破裂，细胞质出现了严重的固缩及空泡化现象。 由此可见，儿茶素（C）和Yb3+作用的主要位点分别是___________、___________，推测Yb3+-C具有更强抗菌作用的机理是________。 【答案】（1） ①. 磷脂双分子层 ②. DNA （2） ①. 稀释涂布平板 ②. 碳源、氮源 ③. 透明圈##抑菌圈 （3）与C、Yb3+相比， Yb3+-C能有效缩短杀菌时间、杀菌效果更好 （4） ①. 细胞壁和细胞膜 ②. 细胞质 ③. 儿茶素作用于细胞表面，使Yb3+ 更容易进入细胞内，破坏细胞结构，导致细胞死亡 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【小问1详解】 细胞膜的基本支架是磷脂双分子层，细菌的遗传物质是DNA。 【小问2详解】 微生物的培养基的基本成分包括碳源、氮源、水和无机盐，为了使金黄色葡萄球菌在平板上均匀分布，便于后续实验，应该用稀释涂布平板法将金黄色葡萄球菌接种到培养基上，由于配合物Yb3+-C有抗菌的作用，所以在含Yb3+-C的滤纸片周围不会有细菌生长，所以会形成透明圈，测定透明圈的直径可以比较抗菌效果，透明圈直径越大，抗菌效果越好。 【小问3详解】 分析表格中的数据，在相同的时间内，单独用C和Yb3+处理其A600值都比用Yb3+-C处理的值大，说明细菌数目多，特别是在2h时更加明显，由此得出结论与C、Yb3+相比，Yb3+-C能有效缩短杀菌时间、杀菌效果更好。 【小问4详解】 根据b信息用C处理细胞壁和细胞膜等结构不光滑，略显粗糙，说明C作用于细胞壁和细胞膜，根据c信息Yb3+ 处理：细胞质出现较明显的固缩及空泡化现象，说明其作用于细胞质，用Yb3+ -C处理，由于C改变了膜的通透性，所以Yb3+能够更快的进入细胞，破坏细胞结构，导致细胞死亡。 28. 清水紫花苜蓿被誉为“牧草之王”，但易造成家畜胀病；里奥百脉根因富含缩合单宁，饲喂时可防止家畜胀病的发生。某研究人员设计了下列技术路线，以期获得抗胀病的新型苜蓿。 （1）剪取清水紫花苜蓿、里奥百脉根无菌苗的下胚轴及子叶作为外植体，接种到培养基中，形成愈伤组织，将两种材料的愈伤组织用________酶处理，获得原生质体。 （2）为了提高原生质体的产量，保证实验的成功率，还需考虑酶液的渗透压、酶解时间等因素。分别检测上述两个因素对原生质体产量的影响，结果如图1和图2.甘露醇能维持稳定的渗透压，由图1可知，酶解时宜选用的甘露醇浓度为________，由图2可知，最适宜的酶解时间为________。 （3）科研人员分别加入IOA和R-6G处理后诱导原生质体融合，如图3.诱导原生质体融合的方法除了使用聚乙二醇外，还可以利用的化学方法是________。步骤①仅有杂种原生质体可持续分裂形成再生细胞团，原因是________。 （4）步骤②到步骤③需要更换新的培养基，原因之一是培养基中________是影响植物细胞分裂、分化的关键因素。 （5）获得抗胀病的新型苜蓿品种利用的生物技术是________，该技术在打破生殖隔离，实现________，培育植物新品种等方面展示出独特优势。 【答案】（1）纤维素酶和果胶酶  （2） ①. 0.55mol·L-1 ②. 清水紫花苜蓿酶解为10h，里奥百脉根酶解为12h  （3） ①. 高Ca2+-高pH融合 ②. 杂种原生质体生理互补，细胞呼吸正常，能正常分裂；而未融合或同种融合原生质体会在细胞呼吸不同阶段受到抑制，从而无法正常分裂 （4）生长素和细胞分裂素的比例和浓度 （5） ①. 植物体细胞杂交技术 ②. 远缘杂交 【解析】 【小问1详解】 剪取清水紫花苜蓿、里奥百脉根无菌苗的下胚轴及子叶作为外植体，接种到培养基中，形成愈伤组织，将两种材料的愈伤组织用纤维素酶和果胶酶处理，获得原生质体，该操作的依据是植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶。 【小问2详解】 由图1可知，随着甘露醇浓度的升高，清水紫花苜蓿、里奥百脉根原生质体产量越高，在甘露醇浓度为0.55mol/L，清水紫花苜蓿和里奥百脉根原生质体产量最高，甘露醇浓度超过0.55mol/L，清水紫花苜蓿、里奥百脉根原生质体产量不再升高，据此可知，酶解时宜选用的甘露醇浓度为0.55mol·L-1，该浓度条件下，原生质体的产量最大，由图2可知，清水紫花苜蓿酶解为10h，里奥百脉根酶解为12h分别可以达到最大值，即二者最适宜的酶解时间分别为10小时和12小时。 【小问3详解】 科研人员分别加入IOA和R-6G钝化后诱导原生质体融合，如图3，诱导原生质体融合的方法除了使用聚乙二醇外，还可以利用的化学方法是高Ca2+-高pH融合。步骤①仅有杂种原生质体可持续分裂形成再生细胞团，因为只有杂种原生质体生理互补，细胞呼吸正常，能正常分裂；而未融合或同种融合原生质体会在细胞呼吸不同阶段受到抑制，从而无法正常分裂。 【小问4详解】 步骤②到步骤③需要更换新的培养基，因为培养基中生长素和细胞分裂素的比例和浓度是影响植物细胞分裂、分化的关键因素，因而需要通过调整培养基中生长素和细胞分裂素的比例和浓度得到相应的培养物。 【小问5详解】 获得抗胀病的新型苜蓿品种利用的生物技术是植物体细胞杂交技术，该技术的原理是植物细胞的全能性和细胞膜的流动性，该技术的优势是可打破生殖隔离，实现远缘杂交，克服了远缘杂交不亲和的障碍。 29. 动物体细胞核移植（SCNT）的成功率主要取决于体细胞重编程（即供体细胞删除原有的表观遗传模式，重新获得发育全能性）的效率。BRGI是动物体内一种与体细胞重编程有关的基因。为探究BRGI基因过表达对猪核移植早期胚胎发育及相关基因表达的影响，研究者将体外构建的BRGI重组质粒导入胎猪皮肤成纤维细胞中，并完成体细胞核移植，过程如图a所示。 回答下列问题： （1）为获得大量供体细胞，研究者将剪碎的胎猪皮肤组织用______酶处理，分散成单个皮肤成纤维细胞后，转入培养液中，并置于_____的气体环境中进行培养。 （2）用于SCNT的卵母细胞需在体外培养至_____期，去核后与胎猪皮肤成纤维细胞融合形成重构胚，利用电刺激激活重构胚的目的是_______。 （3）研究者设置三组不同处理的胎猪皮肤成纤维细胞作为供体细胞进行SCNT实验。其中阴性对照组的处理是将空质粒导入供体细胞，作用是______；空白对照组的处理是______。 （4）利用三组不同处理的供体细胞完成SCNT实验后，研究者分别统计4-细胞率、8-细胞率和囊胚率见下表。 组别 4-细胞率（%） 8-细胞率（%） 囊胚率（%） 空白对照组 66.14 47.76 20.83* 阴性对照组 65.55 49.53 19.85* 实验组 63.37 50.28 27.33* 注：带*号表示同列数据在统计学上具有显著性差异，不带*号则说明没有显著性差异。 由表中结果得到的实验结论是：______。 （5）NANOG、SOX2属于囊胚多能性基因，对维持内细胞团的多能性具有重要作用。研究者进一步检测NANOG、SOX2基因在3组实验下囊胚阶段的表达水平，结果如图b所示，由此可说明供体细胞过表达BRG1对囊胚的影响机制是______。 【答案】（1） ①. 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 ②. 95%空气和5%CO2 （2） ①. MⅡ ②. 促使重构胚完成细胞分裂和发育进程 （3） ①. 排除质粒对重构胚发育的影响 ②. 未做任何处理的胎猪皮肤成纤维细胞 （4）供体细胞过表达BRG1能够显著提高猪核移植囊胚的发育率 （5）供体细胞过表达BRG1能通过促进NANOG、SOX2基因的表达，进而提高猪核移植囊胚发育率 【解析】 【分析】分散动物细胞用的是胰蛋白酶或胶原蛋白酶分解组织细胞之间的蛋白质，培养细胞需要的气体环境是95%空气和5%CO2，二氧化碳的作用是维持培养液的pH。 【小问1详解】 分散动物细胞用的是胰蛋白酶或胶原蛋白酶，培养细胞的气体环境是95%空气和5%CO2。 【小问2详解】 卵母细胞需要在体外进行成熟培养，培养至MⅡ期，电刺激激活重构胚的目的是促使重构胚完成细胞分裂和发育进程。 【小问3详解】 加入空质粒的目的是排除质粒对重构胚发育的影响，空白对照组的处理是未做任何处理的胎猪皮肤成纤维细胞，使实验结果根据有说服力。 【小问4详解】 根据表格中的数据发现实验组的4-细胞率和8-细胞率和对照组无明显差异，但是实验组的囊胚率显著高于对照组，说明供体细胞过表达BRG1能够显著提高猪核移植囊胚的发育率。 【小问5详解】 通过图b分子，实验组中NANOG、SOX2基因的mRNA的相对水平明显高于对照组，说明供体细胞过表达BRG1能通过促进NANOG、SOX2基因的表达，进而提高猪核移植囊胚发育率。 30. 科研人员将A基因和B基因利用重叠延伸PCR技术构建A-B融合基因，从而培育出优良性状的转基因花生植株。融合基因构建过程如图1所示，所用Ti质粒各结构组分如图2所示。回答下列问题。 （1）利用重叠延伸PCR技术进行基因融合时，________（填“能”或“不能”）将图1中PCR1和PCR2放入同一个反应体系中进行，原因是________。在杂交链延伸成等长的融合基因时，________（填“需要”或“不需要”）添加引物，原因是________。 （2）为保证A-B融合基因正确插入质粒，利用PCR扩增融合基因时需要在引物________（从图1中选择）的5'端分别添加限制酶________（从图2中选择）的识别序列。 （3）据图2分析筛选转化细胞的过程：第一次在培养基中添加________筛选导入重组Ti质粒的农杆菌菌株，第二次在培养基中添加________筛选染色体DNA上整合T-DNA的花生愈伤组织细胞。此方法筛选出的花生细胞中，A-B融合基因不一定表达的理由________。 【答案】（1） ①. 不能    ②. 引物②和③间有互补序列，将PCR1和PCR2放入同一个反应体系中进行会影响PCR1和PCR2的进行 ③. 不需要 ④. 两条 DNA 的交错部分即可作为其延伸的引物 （2） ①. ①和④ ②. BglⅡ和 NcoⅠ  （3） ①. 庆大霉素 ②. 潮霉素 ③. 基因选择性表达      【解析】 【小问1详解】 由于引物②和③间有互补序列，故不能将图1中PCR1和PCR2放入同一个反应体系中进行。在杂交链延伸成等长的融合基因时不需要额外添加引物，因为两条DNA的交错部分即可作为其延伸的引物。 【小问2详解】 由于PCR扩增融合基因的方向是子链的5'→3'，故选择的是引物①和④，又因为AB融合基因转录方向为从右到左，故引物①该添加限制酶Bgl II的识别序列，引物④该添加限制酶 Nco I的识别序列。 【小问3详解】 Ti质粒上的潮霉素抗性基因由真核特异性启动子驱动，仅能在真核细胞中表达，在原核农杆菌中不表达，第一次是筛选导入重组Ti质粒的农杆菌菌株，故需要在培养基中添加庆大霉素，第二次筛选染色体DNA上整合T- DNA的花生愈伤组织细胞，由于只有T-DNA可以转移整合，故第二次需要在培养基上添加潮霉素。筛选出的花生细胞中，由于基因的选择性表达，故A-B融合基因不一定表达。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $