精品解析：河南省驻马店市新蔡县第一高级中学2025-2026学年高二下学期7月阶段检测生物试题

新蔡一高2025-2026学年下学期7月月考 高二生物试题 一、单选题(每题2分，共40分) 1. 细胞学说就像一把钥匙，打开了理解生命本质的大门，对生物学的发展产生了深远的影响，为后续的细胞生物学、遗传学、进化论等众多生物学分支学科的发展奠定了理论基石。下列叙述不合理的是（ ） A. 细胞学说主要是由德国科学家施莱登和施旺建立的 B. 细胞学说的建立过程运用了观察法和不完全归纳法 C. 细胞学说揭示了动植物的统一性、多样性和差异性 D. 细胞学说认为动植物都是由细胞和细胞产物构成的 2. 黏菌是一类特殊的真核微生物，主要以土壤中的细菌和酵母菌为食，环境胁迫使黏菌由单细胞聚集形成多细胞聚集体（具有孢子囊结构）。关于黏菌，下列说法错误的是（　　） A. C、H、O、N四种元素含量很高 B. 环状DNA分子存在于拟核中 C. 单细胞生活阶段主要以有丝分裂方式繁殖 D. 吞噬食物需要消耗能量 3. 关于过氧化氢酶的叙述，错误的是（ ） A. 过氧化氢酶可以降低H2O2分解反应所需的活化能 B. 若用过氧化氢酶探究温度对酶活性的影响，应设置不加酶的对照组 C. 持续升高H2O2浓度不一定加快过氧化氢酶的酶促反应速率 D. 过氧化氢酶活性随pH降低而降低，随pH升高而升高 4. “神奇”动物海蛞蝓能选择性保留所摄食藻类中的叶绿体，并用一层膜包裹形成宿主衍生细胞器“盗食体”。“盗食体”内的叶绿体可合成部分光合蛋白，在一段时间内保持光合能力；“盗食体”可利用转运蛋白维持内部环境相对稳定。下列关于“盗食体”内叶绿体的推测，合理的是（　　） A. 编码光合色素蛋白的基因来自海蛞蝓细胞核 B. 需要海蛞蝓细胞为其提供原料进行光合作用 C. 叶绿体外膜与海蛞蝓细胞膜的蛋白结构相同 D. 能够通过分裂实现增殖以维持光合作用能力 5. 下图表示ATP水解过程，其中的水解产物丙能够与神经元表面的特异性受体结合，给大脑传递疲劳信号。下列叙述错误的是（　　） A. ①过程可为细胞生命活动提供能量 B. 甲是 RNA 的基本组成单位 C. 乙由腺嘌呤、核糖和磷酸组成 D. 腺苷有类似于神经递质的作用 6. 在细胞培养液中加入某大分子荧光染料，细胞膜上先出现荧光，一段时间后，胞内逐渐出现多个荧光小泡。下列叙述错误的是（　　） A. 小泡的形成与膜流动性有关 B. 小泡的形成过程无需消耗能量 C. 小泡的运输与细胞骨架相关 D. 小泡的形成速率受温度的影响 7. 被子植物花粉发育过程中，小孢子会发生一次有丝分裂，形成一个营养细胞（未来发育成花粉管）和一个生殖细胞（未来发育成精子），这两个细胞（ ） A. 基因组序列不同 B. 来源不同 C. 染色体数目相同 D. 表达的基因相同 8. 临床上常通过检测血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）的含量（两者均在细胞内发挥作用），辅助诊断肝脏病变，肝脏受损会导致血清中ALT和AST含量升高。下列叙述正确的是（ ） A. ALT和AST催化的底物不同，都在细胞核中合成 B. 酶浓度和底物浓度都会影响ALT和AST的活性 C. 长期饮酒会导致人体血清中ALT和AST的含量升高 D. 样本采集后室温下放置时间过长会使酶活性升高 9. 细胞作为基本的生命系统，其结构复杂而精巧。下列关于细胞的说法，合理的是（ ） A. 细胞膜的基本支架是镶嵌在膜中的各种蛋白质分子 B. 乳酸菌中的细胞骨架锚定并支撑细胞器，与其细胞运动、分裂和分化等生命活动密切相关 C. 叶绿体内堆叠着大量类囊体，有利于二氧化碳在膜上的吸收利用 D. 蓝细菌和支原体都是原核生物，两者所含有的细胞器中都不含有磷脂成分 10. 科研小组以华容芥菜为实验材料，探究光照强度对其光合速率的影响。测得黑暗条件下CO2释放速率为4 μmol·m-2·s-1，光补偿点对应光照强度为a，光饱和点b对应的净光合速率为18μmol·m-2·s-1。下列分析正确的是（ ） A. a点时，芥菜叶肉细胞的光合速率与呼吸速率相等 B. b点时，芥菜植株的总光合速率为18 μmol·m-2·s-1 C. 适当降低环境温度，a点一定会右移，b点净光合速率一定会下降 D. 光照强度大于b后，限制光合速率的环境因素可能有CO2浓度、温度 11. 研究发现，细胞衰老与端粒酶活性、自噬作用和氧化应激水平密切相关。正常体细胞中端粒酶活性较低，细胞衰老时端粒缩短、自噬能力下降，且自由基积累导致生物分子氧化损伤。下列叙述正确的是（ ） A. 衰老细胞内水分减少、色素积累，细胞核的体积减小，代谢速率减慢 B. 提高细胞自噬能力会加速受损蛋白和细胞器积累，促进细胞衰老 C. 端粒酶可延长端粒，体细胞中端粒酶活性越高越利于机体正常的生命活动 D. 自由基若攻击生物膜中的磷脂分子，会产生新的自由基，持续损伤细胞结构 12. 四川主产的浓香型白酒畅销全国。其发酵用的酒曲富含霉菌、酵母菌、细菌等微生物。从酒曲中分离纯化的某些酵母菌可利用其产生的乙醇合成低水溶性的乙酸乙酯，催化该反应的酶也能催化酯分解。下列叙述正确的是（ ） A. 向培养基中加入青霉素，可有效抑制细菌和霉菌的生长 B. 向培养基中添加乙酸乙酯，可根据透明圈筛选产酯酵母 C. 酵母菌被破碎处理成匀浆后，不能催化乙酸乙酯的合成 D. 与无氧相比，有氧条件培养酵母菌能产生更多乙酸乙酯 13. 自然界存在着甲、乙两种降解PET塑料（含碳有机物）的细菌。为筛选这两种细菌，并探究两种细菌的协同降解效果，研究人员进行了相关实验。下列叙述错误的是（　　） A. 为筛选出目的菌，培养基应以PET塑料为唯一碳源 B. 细菌纯培养时，需用涂布器蘸取单个菌落进行涂布 C. 利用显微镜直接计数，可估算出菌悬液中细菌的总数 D. 探究甲、乙降解效果的协同性，至少需设三个实验组 14. 研究人员将调控根尖干细胞微环境的P、W基因过表达系统导入某植物根尖外植体，在无外源激素条件下诱导外植体形成胚状体，并最终发育为完整植株。下列叙述正确的是（　　） A. P、W基因过表达诱导组织形成新植株需经历细胞分化 B. 将流水充分冲洗后的外植体用无菌水反复冲洗进行灭菌 C. 使用无激素培养基时不涉及激素对植物分化的调节作用 D. 导入P、W基因过表达系统使根尖细胞具备了全能性 15. 植物细胞工程技术可用于马铃薯育种，下列分析错误的是（ ） A. 将融合的原生质体在细胞壁形成前转到固体培养基上，以诱导愈伤组织 B. 用优良栽培品种与抗青枯病野生种进行体细胞杂交，以获得抗病新材料 C. 采集四倍体植株的花粉进行组织培养，以获得单倍体植株 D. 利用茎尖进行组织培养，以培育脱毒苗 16. 植物细胞工程在生产实践中有着广泛的应用，技术选择的决策流程如图所示。甲、乙、丙、丁所代表的最适技术依次为（　　） A. 植物细胞培养、快速繁殖、杂交+单倍体育种、体细胞杂交 B. 快速繁殖、植物细胞培养、体细胞杂交、杂交+单倍体育种 C. 快速繁殖、杂交+单倍体育种、植物细胞培养、体细胞杂交 D. 植物细胞培养、体细胞杂交、快速繁殖、杂交+单倍体育种 17. 东北虎是我国的一级保护动物，为扩大东北虎的种群数量，我国科研人员采用体外受精—胚胎移植技术开展人工繁育。关于该技术流程，下列叙述错误的是（ ） A. 胚胎移植前需对受体母虎进行同期发情处理，保证胚胎着床的生理环境 B. 需用促性腺激素对供体母虎进行超数排卵处理，以获得更多的卵母细胞 C. 采集的精子需经获能处理，卵母细胞需培养至MⅡ期，才能完成体外受精 D. 体外受精获得的受精卵培养至胚胎的过程不需要额外提供营养物质 18. 现代生物技术有着巨大的应用前景，但会涉及到生物安全问题。下列叙述错误的是（　　） A. 生殖性克隆人涉及伦理问题，而治疗性克隆不涉及伦理问题 B. 玉米的α-淀粉酶基因与目的基因一起转入植物可防止基因污染 C. 消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面 D. 我国禁止用基因编辑技术对基因进行敲除、插入等，设计“完美试管婴儿” 19. 黑藻是高中生物学实验中常用的材料，下列相关叙述正确的是（ ） A. 黑藻属于低等植物，适合用于观察叶绿体的形态和分布 B. 黑藻叶片是观察植物细胞质壁分离及复原的理想材料之一 C. 可通过测定单位时间内黑藻释放的气泡量来表示实际产生O2的速率 D. 取黑藻茎尖分生区组织制作临时装片，可观察到有丝分裂的动态变化过程 20. 土壤中H2PO4-的浓度通常远低于其在根毛细胞液中的浓度。植物对H2PO4-的吸收主要通过细胞膜上能同时转运H2PO4-和H+的载体蛋白，该过程由H+的跨膜浓度梯度驱动。下列叙述错误的是（ ） A. 该载体蛋白转运H+时，H+不需要与载体蛋白结合 B. 该载体蛋白对H2PO4-的运输属于主动运输 C. 抑制细胞呼吸，根毛细胞吸收H2PO4-的速率会降低 D. 该载体蛋白每次转运H2PO4-都会发生自身构象改变 二、解答题 21. M是植物线粒体膜上转运丙酮酸的蛋白。为探究M蛋白对植物镉耐受性的影响，科研人员利用拟南芥M基因缺失突变体进行了相关研究。 回答下列问题： （1）利用葡萄糖进行有氧呼吸时，丙酮酸是第_________阶段的产物，ATP主要在第___________阶段生成。 （2）无镉胁迫时，M缺失突变体细胞质基质中丙酮酸的含量_________野生型。受到镉胁迫时，拟南芥可通过主动运输将镉排出胞外以缓解毒害，推测此时野生型中有氧呼吸强度会_________。 （3）谷氨酸是植物合成谷胱甘肽的主要原料，在丙酮酸供应不足时也可用于维系有氧呼吸的正常运转，无镉胁迫时，M缺失突变体和野生型的根长无显著差异，而突变体谷胱甘肽含量显著低于野生型，推测造成此现象的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。 （4）拟南芥还可通过谷胱甘肽结合镉以减轻毒害。镉胁迫时，M缺失突变体中谷胱甘肽含量显著高于野生型，结合下图根长数据分析，相较于野生型，此时M缺失突变体根细胞中的ATP生成量__________，其原因是__________________________________________________________________________________。 22. 如图1为动物细胞结构示意图，图2表示物质Q依次在细胞器甲、乙、丙上的合成、加工和分泌某蛋白质的过程。请据图回答： Ⅰ.观察图1，回答相关问题： （1）图1所示是在_____显微镜下看到的动物细胞亚显微结构，该细胞的_____（填结构名称）是代谢活动的中心。 （2）图1动物细胞中不含磷脂的细胞器有_____（填标号）。 Ⅱ.观察图2并结合图1，回答相关问题： （3）图2表示分泌蛋白合成、加工和分泌的过程，甲、乙、丙分别对应图1的______（填标号）。为了研究图2所示蛋白质合成、加工和分泌的生理过程，一般采用的研究方法是______。 （4）下列图1和图2中部分结构和对应的成分，对应错误的是______。 A. 结构5：磷脂、蛋白质、糖类 B. 结构4：RNA、蛋白质 C. 结构甲：核糖核酸、蛋白质 D. 结构丙：具有双层膜结构 23. 铁皮石斛是我国的名贵中药。科研人员为扩大铁皮石斛的种植范围及推动我国盐碱地的开发进行了相关实验，部分结果如图1、2所示。 各组盐浓度： CK组：0mmol/L S1组：50mmol/L S2组：100mmol/L S3组：150mmol/L S4组：200mmol/L 注：CK为对照组 回答下列问题： （1）提取光合色素时，常用___________作为提取试剂；分离光合色素利用了不同色素在___________中溶解度不同的原理，其中溶解度最大、扩散速度最快的色素是___________。 （2）据图1分析，与对照组相比，盐胁迫会导致铁皮石斛叶绿素含量降低，进而使光反应产生的___________减少。据图2分析，低浓度盐胁迫会___________(选填“促进”或“抑制”)Rubisco活性，结合图1、2推测，与其他实验组相比，___________mmol·L⁻¹的盐胁迫下，铁皮石斛生长得更快。 24. 肿瘤细胞表面有受体EGFR，CD3是T细胞表面的标志性抗原。科研人员制备双特异性抗体EGFR/CD3，可招募T细胞定向移至肿瘤细胞，增强其对肿瘤细胞的杀伤力，过程如下图所示。 （1）动物细胞培养：动物细胞培养应提供的气体条件是95%空气和5%CO₂，其中CO₂的作用是___________。注射EGFR进入小鼠体内后，可从小鼠脾脏中获取能产生特异性抗体的细胞B，并用___________酶进行处理分离制备成细胞悬液。细胞B与细胞A融合前，___________(填“需要”或“不需要”)通过原代培养扩大细胞B数量。 （2）第一次筛选：常使用特定的选择培养基(如HAT培养基)，该培养基对未融合的细胞和___________细胞生长具有抑制作用。为了提高异种细胞筛选的成功率，也可以通过红、绿颜色荧光分别标记A、B细胞膜蛋白，再用荧光显微镜观察融合细胞表面的___________现象进行筛选。 （3）第二次筛选：筛选出杂交瘤细胞后，先进行克隆化培养，再利用___________方法，来获得能产生特定抗体的单克隆杂交瘤细胞。 （4）克隆培养：在体外进行杂交瘤细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加动物血清等天然成分。据图分析，抗体是由两条H链和两条L链组成的4条肽链的对称结构，双杂交瘤细胞在理论上会产生多种抗体，原因是___________。 （5）双特异性抗体治疗肿瘤的效果往往优于EGFR抗体和CD3抗体的联合使用，原因是___________。 25. 大刍草具有较强的耐盐碱能力，该性状与M蛋白有关。科学家通过PCR获取和扩增M蛋白基因，如图1所示。将获得的大量M蛋白基因与质粒构建基因表达载体，各部分结构如图2所示。回答下列问题： （1）PCR一般可分为___________三步。据图1分析，PCR过程应选择的引物是___________，引物的作用是___________。 （2）在M蛋白基因两端设计不同黏性末端的目的是___________。质粒中氨苄青霉素抗性基因的作用是___________。 （3）为实现质粒和M蛋白基因的连接，切割质粒时选用限制酶XmaⅠ而不选用限制酶SmaⅠ的原因是___________。为将M蛋白基因连接到质粒上，还需要BglⅡ、DNA连接酶等酶。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 新蔡一高2025-2026学年下学期7月月考 高二生物试题 一、单选题(每题2分，共40分) 1. 细胞学说就像一把钥匙，打开了理解生命本质的大门，对生物学的发展产生了深远的影响，为后续的细胞生物学、遗传学、进化论等众多生物学分支学科的发展奠定了理论基石。下列叙述不合理的是（ ） A. 细胞学说主要是由德国科学家施莱登和施旺建立的 B. 细胞学说的建立过程运用了观察法和不完全归纳法 C. 细胞学说揭示了动植物的统一性、多样性和差异性 D. 细胞学说认为动植物都是由细胞和细胞产物构成的 【答案】C 【解析】 【详解】A、细胞学说主要由德国植物学家施莱登和动物学家施旺共同提出建立，A不符合题意； B、细胞学说建立过程中，科学家通过观察大量动植物的结构，归纳出“动植物都由细胞构成”的结论，运用了观察法和不完全归纳法，B不符合题意； C、细胞学说揭示了动植物结构的统一性，阐明了生物界的统一性，并未揭示动植物的多样性和差异性，C符合题意； D、细胞学说的核心内容之一是：一切动植物都由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成，D不符合题意。 2. 黏菌是一类特殊的真核微生物，主要以土壤中的细菌和酵母菌为食，环境胁迫使黏菌由单细胞聚集形成多细胞聚集体（具有孢子囊结构）。关于黏菌，下列说法错误的是（　　） A. C、H、O、N四种元素含量很高 B. 环状DNA分子存在于拟核中 C. 单细胞生活阶段主要以有丝分裂方式繁殖 D. 吞噬食物需要消耗能量 【答案】B 【解析】 【详解】A、所有具有细胞结构的生物中，C、H、O、N都是含量最高的四种元素，黏菌是有细胞结构的真核生物，因此这四种元素含量很高，A正确； B、黏菌是真核生物，有以核膜为界限的细胞核，不存在原核生物特有的拟核结构，环状DNA存在于拟核是原核生物的特征，B错误； C、真核细胞的体细胞主要的增殖方式为有丝分裂，黏菌单细胞生活阶段为真核细胞，主要以有丝分裂方式进行繁殖，C正确； D、黏菌吞噬食物的方式为胞吞，胞吞过程需要消耗能量，D正确。 3. 关于过氧化氢酶的叙述，错误的是（ ） A. 过氧化氢酶可以降低H2O2分解反应所需的活化能 B. 若用过氧化氢酶探究温度对酶活性的影响，应设置不加酶的对照组 C. 持续升高H2O2浓度不一定加快过氧化氢酶的酶促反应速率 D. 过氧化氢酶活性随pH降低而降低，随pH升高而升高 【答案】D 【解析】 【详解】A、酶的作用机理是降低化学反应所需的活化能，过氧化氢酶催化H2O2分解的本质就是降低该反应的活化能，A正确； B、H2O2本身不稳定，温度升高会加快其自发分解速率，因此探究温度对过氧化氢酶活性的影响时，需要设置不加酶的对照组，排除温度对底物自身分解的干扰，保证实验结果是酶活性差异导致的，B正确； C、酶促反应速率受底物浓度、酶浓度等因素共同影响，当酶的数量达到饱和后，继续升高H2O2浓度，酶促反应速率不再加快，因此持续升高H2O2浓度不一定能加快反应速率，C正确； D、过氧化氢酶的活性存在最适pH：在一定pH范围内，低于最适pH时，随pH升高酶活性升高；高于最适pH时，随pH升高酶活性降低；过酸、过碱都会使酶空间结构被破坏，永久失活，D错误。 4. “神奇”动物海蛞蝓能选择性保留所摄食藻类中的叶绿体，并用一层膜包裹形成宿主衍生细胞器“盗食体”。“盗食体”内的叶绿体可合成部分光合蛋白，在一段时间内保持光合能力；“盗食体”可利用转运蛋白维持内部环境相对稳定。下列关于“盗食体”内叶绿体的推测，合理的是（　　） A. 编码光合色素蛋白的基因来自海蛞蝓细胞核 B. 需要海蛞蝓细胞为其提供原料进行光合作用 C. 叶绿体外膜与海蛞蝓细胞膜的蛋白结构相同 D. 能够通过分裂实现增殖以维持光合作用能力 【答案】B 【解析】 【详解】A、题干明确“盗食体”内的叶绿体来自被摄食的藻类，且叶绿体可自身合成部分光合蛋白，说明编码光合色素蛋白的基因来自藻类叶绿体的DNA，并非海蛞蝓细胞核，A错误； B、叶绿体进行光合作用需要CO2、水、无机盐、ADP、Pi等多种原料，这些原料无法由叶绿体全部自主合成，需要海蛞蝓细胞通过转运蛋白运输到“盗食体”内部供叶绿体使用，B正确； C、叶绿体外膜来源于藻类，海蛞蝓细胞膜来源于动物细胞，二者的来源和功能不同，因此蛋白质结构存在差异，C错误； D、叶绿体在藻类细胞中可分裂增殖，但被包裹进 “盗食体” 后，失去了藻类细胞的调控和分裂相关因子，无法自主分裂增殖，其光合能力只能维持一段时间，D错误。 5. 下图表示ATP水解过程，其中的水解产物丙能够与神经元表面的特异性受体结合，给大脑传递疲劳信号。下列叙述错误的是（　　） A. ①过程可为细胞生命活动提供能量 B. 甲是 RNA 的基本组成单位 C. 乙由腺嘌呤、核糖和磷酸组成 D. 腺苷有类似于神经递质的作用 【答案】B 【解析】 【详解】A、①过程为ATP的水解过程，可为细胞生命活动提供能量，A正确； B、甲是ADP，RNA 的基本组成单位是核糖核苷酸，乙是RNA的单体之一，B错误； C、乙是腺嘌呤核糖核苷酸，由腺嘌呤、核糖和磷酸组成，C正确； D、由题意可知，丙（腺苷）能够与神经元表面的特异性受体结合，给大脑传递疲劳信号，有类似于神经递质的作用，D正确。 6. 在细胞培养液中加入某大分子荧光染料，细胞膜上先出现荧光，一段时间后，胞内逐渐出现多个荧光小泡。下列叙述错误的是（　　） A. 小泡的形成与膜流动性有关 B. 小泡的形成过程无需消耗能量 C. 小泡的运输与细胞骨架相关 D. 小泡的形成速率受温度的影响 【答案】B 【解析】 【详解】A、胞吞过程中细胞膜内陷形成小泡，该过程依赖生物膜的流动性，因此小泡的形成与膜流动性有关，A正确； B、胞吞是细胞主动摄入大分子的过程，需要消耗细胞呼吸释放的能量，B错误； C、细胞骨架具有维持细胞形态、参与细胞内物质运输和囊泡转运的功能，因此小泡的运输与细胞骨架相关，C正确； D、温度会影响细胞膜的流动性，也会通过影响呼吸酶的活性改变能量供应，因此小泡的形成速率受温度的影响，D正确。 7. 被子植物花粉发育过程中，小孢子会发生一次有丝分裂，形成一个营养细胞（未来发育成花粉管）和一个生殖细胞（未来发育成精子），这两个细胞（ ） A. 基因组序列不同 B. 来源不同 C. 染色体数目相同 D. 表达的基因相同 【答案】C 【解析】 【详解】A、营养细胞和生殖细胞是同一个小孢子经有丝分裂产生的，有丝分裂会将亲代细胞的核遗传物质精确复制后平均分配到子细胞中，因此二者核基因组序列完全相同，A错误； B、两个细胞均来源于同一个小孢子的有丝分裂，来源相同，B错误； C、有丝分裂的特征是子细胞的染色体数目与亲代细胞完全一致，因此两个细胞的染色体数目都和小孢子相同，二者染色体数目一致，C正确； D、两个细胞的功能不同，分别发育为花粉管和精子，这是细胞分化的结果，实质是基因的选择性表达，因此二者表达的基因存在明显差异，D错误。 8. 临床上常通过检测血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）的含量（两者均在细胞内发挥作用），辅助诊断肝脏病变，肝脏受损会导致血清中ALT和AST含量升高。下列叙述正确的是（ ） A. ALT和AST催化的底物不同，都在细胞核中合成 B. 酶浓度和底物浓度都会影响ALT和AST的活性 C. 长期饮酒会导致人体血清中ALT和AST的含量升高 D. 样本采集后室温下放置时间过长会使酶活性升高 【答案】C 【解析】 【详解】A、ALT（谷丙转氨酶）和AST（谷草转氨酶）催化的底物不同，但二者都是在核糖体上（细胞质中）合成的，A错误； B、酶的活性是酶本身的固有属性，受温度、pH等因素影响，酶浓度和底物浓度不会影响酶的活性，只会影响酶催化反应的速率，B错误； C、长期饮酒会损伤肝细胞，使细胞内的ALT和AST释放后进入血液，导致血清中两种酶含量升高，C正确； D、样本放置时间过长，尤其是室温下，酶活性会逐渐下降（失活），导致检测结果偏低，D错误。 9. 细胞作为基本的生命系统，其结构复杂而精巧。下列关于细胞的说法，合理的是（ ） A. 细胞膜的基本支架是镶嵌在膜中的各种蛋白质分子 B. 乳酸菌中的细胞骨架锚定并支撑细胞器，与其细胞运动、分裂和分化等生命活动密切相关 C. 叶绿体内堆叠着大量类囊体，有利于二氧化碳在膜上的吸收利用 D. 蓝细菌和支原体都是原核生物，两者所含有的细胞器中都不含有磷脂成分 【答案】D 【解析】 【详解】A、细胞膜的基本支架是磷脂双分子层，蛋白质分子以不同方式结合在磷脂双分子层上，A错误； B、乳酸菌是原核生物，不存在真核细胞特有的细胞骨架结构，且乳酸菌为单细胞生物，不发生细胞分化，B错误； C、类囊体堆叠形成基粒，增大了光反应的膜面积，有利于光能的吸收和转化；二氧化碳的吸收利用属于暗反应过程，发生在叶绿体基质中，C错误； D、蓝细菌和支原体都是原核生物，仅含有核糖体一种细胞器，核糖体无膜结构，不含磷脂成分，D正确。 10. 科研小组以华容芥菜为实验材料，探究光照强度对其光合速率的影响。测得黑暗条件下CO2释放速率为4 μmol·m-2·s-1，光补偿点对应光照强度为a，光饱和点b对应的净光合速率为18μmol·m-2·s-1。下列分析正确的是（ ） A. a点时，芥菜叶肉细胞的光合速率与呼吸速率相等 B. b点时，芥菜植株的总光合速率为18 μmol·m-2·s-1 C. 适当降低环境温度，a点一定会右移，b点净光合速率一定会下降 D. 光照强度大于b后，限制光合速率的环境因素可能有CO2浓度、温度 【答案】D 【解析】 【详解】A、a点为光补偿点，代表整株植物光合速率等于呼吸速率，叶肉细胞光合速率大于呼吸速率，A错误； B、总光合速率=净光合速率+呼吸速率=18+4=22 μmol·m-2·s-1，B错误； C、若原温度高于最适温度，适当降温会使光合速率提升，a点左移，b点净光合速率上升，C错误； D、达到光饱和点后，光照不再是限制因素，CO2浓度、温度等仍可限制光合速率，D正确。 11. 研究发现，细胞衰老与端粒酶活性、自噬作用和氧化应激水平密切相关。正常体细胞中端粒酶活性较低，细胞衰老时端粒缩短、自噬能力下降，且自由基积累导致生物分子氧化损伤。下列叙述正确的是（ ） A. 衰老细胞内水分减少、色素积累，细胞核的体积减小，代谢速率减慢 B. 提高细胞自噬能力会加速受损蛋白和细胞器积累，促进细胞衰老 C. 端粒酶可延长端粒，体细胞中端粒酶活性越高越利于机体正常的生命活动 D. 自由基若攻击生物膜中的磷脂分子，会产生新的自由基，持续损伤细胞结构 【答案】D 【解析】 【详解】A、衰老细胞的细胞核体积增大、核膜内折、色素积累、代谢速率减慢，A错误； B、细胞自噬可降解、清除细胞内受损的蛋白和细胞器，提高细胞自噬能力会减少受损成分的积累，延缓细胞衰老，B错误； C、体细胞中端粒酶活性过高会导致细胞无限增殖，引发细胞癌变，不利于机体正常的生命活动，C错误； D、根据自由基学说，自由基攻击生物膜中的磷脂分子时，反应产物也是新的自由基，新的自由基会继续攻击其他分子，引发连锁反应，持续损伤细胞结构，D正确。 12. 四川主产的浓香型白酒畅销全国。其发酵用的酒曲富含霉菌、酵母菌、细菌等微生物。从酒曲中分离纯化的某些酵母菌可利用其产生的乙醇合成低水溶性的乙酸乙酯，催化该反应的酶也能催化酯分解。下列叙述正确的是（ ） A. 向培养基中加入青霉素，可有效抑制细菌和霉菌的生长 B. 向培养基中添加乙酸乙酯，可根据透明圈筛选产酯酵母 C. 酵母菌被破碎处理成匀浆后，不能催化乙酸乙酯的合成 D. 与无氧相比，有氧条件培养酵母菌能产生更多乙酸乙酯 【答案】B 【解析】 【详解】A、青霉素的作用机理是抑制细菌肽聚糖细胞壁的合成，只能抑制细菌生长；霉菌属于真菌，细胞壁成分为几丁质，青霉素对霉菌无抑制作用，A错误； B、据题干信息可知，乙酸乙酯是低水溶性物质，加入培养基后会使培养基呈浑浊状态；目标酵母菌能产生催化酯合成/分解的酯酶，可分解菌落周围的乙酸乙酯，从而形成透明圈，因此可以根据透明圈筛选出产酯酵母，B正确； C、催化乙酸乙酯合成的是酵母菌产生的酶，酵母菌破碎成匀浆后，酵母菌匀浆中仍含有催化乙酸乙酯合成的相关酶，只要温度、pH等反应条件适宜，依然可以催化反应进行，C错误； D、合成乙酸乙酯的原料是酵母菌产生的乙醇，乙醇是酵母菌无氧呼吸的产物；有氧条件下酵母菌进行有氧呼吸，不产生乙醇，缺少原料无法合成更多乙酸乙酯，D错误。 13. 自然界存在着甲、乙两种降解PET塑料（含碳有机物）的细菌。为筛选这两种细菌，并探究两种细菌的协同降解效果，研究人员进行了相关实验。下列叙述错误的是（　　） A. 为筛选出目的菌，培养基应以PET塑料为唯一碳源 B. 细菌纯培养时，需用涂布器蘸取单个菌落进行涂布 C. 利用显微镜直接计数，可估算出菌悬液中细菌的总数 D. 探究甲、乙降解效果的协同性，至少需设三个实验组 【答案】B 【解析】 【详解】A、以PET为唯一碳源的选择培养基中，只有能分解利用PET的目的菌可以获取碳源存活繁殖，其他微生物无法生长，能实现目的菌的筛选，A正确； B、细菌纯培养时，涂布器的作用是将梯度稀释后的菌悬液均匀涂布在培养基表面；若要利用单个菌落进行纯培养，应使用接种环挑取单个菌落，进行平板划线或接种到液体培养基中，不能用涂布器蘸取单个菌落涂布，B错误； C、使用血细胞计数板可在显微镜下直接统计单位体积菌悬液中的细菌数量（含活菌和死菌），能够估算菌悬液的细菌总数，C正确； D、探究甲、乙的协同降解效果，需要设置单独接种甲、单独接种乙、同时接种甲和乙三个实验组，对比三组的降解效果才可判断是否存在协同作用，因此至少设三个实验组，D正确。 14. 研究人员将调控根尖干细胞微环境的P、W基因过表达系统导入某植物根尖外植体，在无外源激素条件下诱导外植体形成胚状体，并最终发育为完整植株。下列叙述正确的是（　　） A. P、W基因过表达诱导组织形成新植株需经历细胞分化 B. 将流水充分冲洗后的外植体用无菌水反复冲洗进行灭菌 C. 使用无激素培养基时不涉及激素对植物分化的调节作用 D. 导入P、W基因过表达系统使根尖细胞具备了全能性 【答案】A 【解析】 【详解】A、外植体诱导形成胚状体并发育为完整植株的过程，需要经过脱分化和再分化阶段，再分化的本质就是细胞的选择性分化，形成不同的组织和器官，因此该过程必然经历细胞分化，A正确； B、外植体不能灭菌，流水冲洗、无菌水冲洗仅为外植体消毒的部分操作，且外植体消毒还需酒精、次氯酸钠等消毒剂处理，B错误； C、无外源激素的培养基中，植物细胞自身可合成内源激素，仍会通过内源激素调节细胞分化过程，C错误； D、植物体细胞本身就具有全能性（全能性的基础是细胞含有该物种全套遗传物质），导入P、W基因过表达系统只是促进了细胞全能性的表达，D错误。 15. 植物细胞工程技术可用于马铃薯育种，下列分析错误的是（ ） A. 将融合的原生质体在细胞壁形成前转到固体培养基上，以诱导愈伤组织 B. 用优良栽培品种与抗青枯病野生种进行体细胞杂交，以获得抗病新材料 C. 采集四倍体植株的花粉进行组织培养，以获得单倍体植株 D. 利用茎尖进行组织培养，以培育脱毒苗 【答案】A 【解析】 【详解】A、融合的原生质体需要先再生出细胞壁，完成细胞融合的标志后，再转到固体培养基上诱导脱分化形成愈伤组织，细胞壁形成前转移无法正常诱导愈伤组织，A错误； B、体细胞杂交技术可克服远缘杂交不亲和的障碍，将优良栽培品种和抗病野生种的体细胞融合，可培育出同时具备两种优良性状的抗病新材料，B正确； C、单倍体是由配子直接发育而来的个体，花粉是植物的雄配子，无论亲本是几倍体，经花粉组织培养得到的植株都是单倍体，C正确； D、植物茎尖分生区细胞分裂旺盛，几乎不含病毒，利用茎尖进行组织培养可获得脱毒苗，D正确。 16. 植物细胞工程在生产实践中有着广泛的应用，技术选择的决策流程如图所示。甲、乙、丙、丁所代表的最适技术依次为（　　） A. 植物细胞培养、快速繁殖、杂交+单倍体育种、体细胞杂交 B. 快速繁殖、植物细胞培养、体细胞杂交、杂交+单倍体育种 C. 快速繁殖、杂交+单倍体育种、植物细胞培养、体细胞杂交 D. 植物细胞培养、体细胞杂交、快速繁殖、杂交+单倍体育种 【答案】A 【解析】 【详解】甲对应获取代谢物的生产目标，植物细胞培养可通过体外培养植物细胞提取次生代谢产物；乙对应优良性状仅来自单株的植株获取需求，快速繁殖属于无性繁殖，可保持单株优良性状，短时间获得大量遗传特性一致的植株；丙对应优良性状来自亲缘关系近的不同植株，可先通过杂交集中优良性状，再结合单倍体育种快速获得纯合可稳定遗传的品种；丁对应亲本亲缘关系远的情况，体细胞杂交可克服远缘杂交不亲和的障碍，获得整合两个亲本优良性状的杂种植株，B、C、D错误，A正确。 17. 东北虎是我国的一级保护动物，为扩大东北虎的种群数量，我国科研人员采用体外受精—胚胎移植技术开展人工繁育。关于该技术流程，下列叙述错误的是（ ） A. 胚胎移植前需对受体母虎进行同期发情处理，保证胚胎着床的生理环境 B. 需用促性腺激素对供体母虎进行超数排卵处理，以获得更多的卵母细胞 C. 采集的精子需经获能处理，卵母细胞需培养至MⅡ期，才能完成体外受精 D. 体外受精获得的受精卵培养至胚胎的过程不需要额外提供营养物质 【答案】D 【解析】 【详解】A、胚胎移植前对受体母虎进行同期发情处理，可使供体和受体生殖器官的生理变化一致，为移入的胚胎提供相同的生理环境，保证胚胎正常着床，A正确； B、对供体母虎注射促性腺激素可实现超数排卵，从而获得更多卵母细胞，B正确； C、体外受精时，采集的精子必须经过获能处理才具备受精能力，卵母细胞需培养至MⅡ期才具备与精子受精的能力，二者才能完成体外受精，C正确； D、体外受精获得的受精卵需在人工配制的发育培养液中培养才能发育为早期胚胎，培养液中需要添加无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养物质，还需添加血清等天然成分，D错误。 18. 现代生物技术有着巨大的应用前景，但会涉及到生物安全问题。下列叙述错误的是（　　） A. 生殖性克隆人涉及伦理问题，而治疗性克隆不涉及伦理问题 B. 玉米的α-淀粉酶基因与目的基因一起转入植物可防止基因污染 C. 消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面 D. 我国禁止用基因编辑技术对基因进行敲除、插入等，设计“完美试管婴儿” 【答案】A 【解析】 【详解】A、治疗性克隆需要使用人类早期胚胎，涉及胚胎获取、使用等相关伦理问题，并非完全不涉及伦理问题，A错误； B、将玉米的α-淀粉酶基因与目的基因共同转入植物后，可使α-淀粉酶在花粉中特异性表达，水解花粉中的淀粉导致花粉不育，避免目的基因随花粉扩散至近缘物种，可防止基因污染，B正确； C、生物武器具有强致病性、易传播的特点，会严重威胁生物安全，因此消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面，C正确； D、我国明确禁止以生殖为目的对人类胚胎、生殖细胞进行基因编辑操作，设计“完美试管婴儿”属于该类被明令禁止的行为，D正确。 19. 黑藻是高中生物学实验中常用的材料，下列相关叙述正确的是（ ） A. 黑藻属于低等植物，适合用于观察叶绿体的形态和分布 B. 黑藻叶片是观察植物细胞质壁分离及复原的理想材料之一 C. 可通过测定单位时间内黑藻释放的气泡量来表示实际产生O2的速率 D. 取黑藻茎尖分生区组织制作临时装片，可观察到有丝分裂的动态变化过程 【答案】B 【解析】 【详解】A、黑藻属于高等被子植物，并非低等植物，仅因其叶片薄、叶绿体体积大，适合用于观察叶绿体的形态和分布，A错误； B、黑藻叶片的叶肉细胞有大液泡，且细胞质中存在绿色的叶绿体，可作为原生质层的边界参照，能清晰观察到质壁分离及复原现象，是该实验的理想材料之一，B正确； C、单位时间内黑藻释放的气泡量代表净光合释放O2的速率，实际产生O2的速率为总光合速率，等于净光合速率加细胞呼吸消耗O2的速率，二者不相等，C错误； D、制作植物细胞有丝分裂临时装片时，解离步骤已经将细胞杀死并固定在分裂的某一时期，无法观察到有丝分裂的动态变化过程，D错误。 20. 土壤中H2PO4-的浓度通常远低于其在根毛细胞液中的浓度。植物对H2PO4-的吸收主要通过细胞膜上能同时转运H2PO4-和H+的载体蛋白，该过程由H+的跨膜浓度梯度驱动。下列叙述错误的是（ ） A. 该载体蛋白转运H+时，H+不需要与载体蛋白结合 B. 该载体蛋白对H2PO4-的运输属于主动运输 C. 抑制细胞呼吸，根毛细胞吸收H2PO4-的速率会降低 D. 该载体蛋白每次转运H2PO4-都会发生自身构象改变 【答案】A 【解析】 【详解】A、载体蛋白的特点是需要与被转运的离子或分子结合，通过自身构象改变完成转运，因此该载体转运H+时，H+需要与载体蛋白结合，A错误； B、H2PO4-逆浓度梯度进入根毛细胞，该过程依赖H+的跨膜浓度梯度提供动力，属于主动运输，B正确； C、H+的跨膜浓度梯度需要根毛细胞通过消耗细胞呼吸产生的ATP维持，抑制细胞呼吸会导致ATP供应不足，H+浓度梯度无法维持，H2PO4-吸收的动力不足，速率会降低，C正确； D、载体蛋白每次转运对应物质时，都会发生自身构象的改变，完成物质转运后构象恢复，D正确。 二、解答题 21. M是植物线粒体膜上转运丙酮酸的蛋白。为探究M蛋白对植物镉耐受性的影响，科研人员利用拟南芥M基因缺失突变体进行了相关研究。 回答下列问题： （1）利用葡萄糖进行有氧呼吸时，丙酮酸是第_________阶段的产物，ATP主要在第___________阶段生成。 （2）无镉胁迫时，M缺失突变体细胞质基质中丙酮酸的含量_________野生型。受到镉胁迫时，拟南芥可通过主动运输将镉排出胞外以缓解毒害，推测此时野生型中有氧呼吸强度会_________。 （3）谷氨酸是植物合成谷胱甘肽的主要原料，在丙酮酸供应不足时也可用于维系有氧呼吸的正常运转，无镉胁迫时，M缺失突变体和野生型的根长无显著差异，而突变体谷胱甘肽含量显著低于野生型，推测造成此现象的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。 （4）拟南芥还可通过谷胱甘肽结合镉以减轻毒害。镉胁迫时，M缺失突变体中谷胱甘肽含量显著高于野生型，结合下图根长数据分析，相较于野生型，此时M缺失突变体根细胞中的ATP生成量__________，其原因是__________________________________________________________________________________。 【答案】（1） ①. 一 ②. 三 （2） ①. 高于 ②. 增强 （3）M缺失突变体中丙酮酸进入线粒体受阻，细胞质基质中丙酮酸积累，抑制了谷氨酸向谷胱甘肽的合成途径（或谷氨酸更多用于维系有氧呼吸的正常运转，用于合成谷胱甘肽的谷氨酸减少） （4） ①. 减少 ②. M缺失突变体通过谷胱甘肽结合镉消耗大量ATP，且丙酮酸进入线粒体受阻，有氧呼吸减弱，ATP生成减少，主动运输排出镉的ATP供应不足，根生长受抑制更明显 【解析】 【小问1详解】 利用葡萄糖进行有氧呼吸时，第一阶段的产物是丙酮酸（葡萄糖分解为丙酮酸和[H]，释放少量能量）；有氧呼吸的第三阶段（[H]与O2结合生成水）释放的能量最多，因此ATP主要在第三阶段生成。 【小问2详解】 M蛋白是转运丙酮酸进入线粒体的蛋白，M缺失突变体中丙酮酸无法正常进入线粒体，因此细胞质基质中丙酮酸的含量高于野生型；镉胁迫时，野生型需通过主动运输排出镉，主动运输需要消耗ATP，因此有氧呼吸强度会增强（以提供更多ATP）。 【小问3详解】 M缺失突变体中，丙酮酸进入线粒体受阻，有氧呼吸的丙酮酸供应不足；此时谷氨酸更多用于维系有氧呼吸的正常运转（而非合成谷胱甘肽），因此用于合成谷胱甘肽的谷氨酸减少，谷胱甘肽含量显著低于野生型；同时，有氧呼吸的能量供应能满足根生长的需求，因此突变体和野生型的根长无显著差异。 【小问4详解】 相较于野生型，镉胁迫时M缺失突变体细胞中的ATP生成量减少（更低）；原因：M缺失突变体中丙酮酸进入线粒体受阻，有氧呼吸强度降低，ATP生成减少；同时，突变体需合成更多谷胱甘肽结合镉，消耗了大量谷氨酸，可用于维系有氧呼吸的谷氨酸减少，进一步降低有氧呼吸强度，ATP生成量不足，根生长受抑制更明显（根长更短）。 22. 如图1为动物细胞结构示意图，图2表示物质Q依次在细胞器甲、乙、丙上的合成、加工和分泌某蛋白质的过程。请据图回答： Ⅰ.观察图1，回答相关问题： （1）图1所示是在_____显微镜下看到的动物细胞亚显微结构，该细胞的_____（填结构名称）是代谢活动的中心。 （2）图1动物细胞中不含磷脂的细胞器有_____（填标号）。 Ⅱ.观察图2并结合图1，回答相关问题： （3）图2表示分泌蛋白合成、加工和分泌的过程，甲、乙、丙分别对应图1的______（填标号）。为了研究图2所示蛋白质合成、加工和分泌的生理过程，一般采用的研究方法是______。 （4）下列图1和图2中部分结构和对应的成分，对应错误的是______。 A. 结构5：磷脂、蛋白质、糖类 B. 结构4：RNA、蛋白质 C. 结构甲：核糖核酸、蛋白质 D. 结构丙：具有双层膜结构 【答案】（1） ①. 电子 ②. 细胞质（基质） （2）4、6 （3） ①. 4、3、7 ②. 放射性同位素标记法##放射性同位素示踪法 （4）D 【解析】 【小问1详解】 图1细胞能够看到细胞膜、内质网膜、核膜、核糖体等结构，是在电子显微镜下看到的动物细胞亚显微结构，该细胞的细胞质基质是多种代谢活动的中心。 【小问2详解】 图1动物细胞中不含磷脂的细胞器有4核糖体和6中心体。 【小问3详解】 图2表示分泌蛋白合成、加工和分泌的过程。甲、乙、丙 分别是核糖体、内质网、高尔基体，分别对应图1的4、3、7。为了研究图2所示蛋白质合成、加工和分泌的生理过程，一般采用的研究方法是放射性同位素标记（同位素示踪）法。 【小问4详解】 A、图1中的结构5是细胞膜，细胞膜主要由磷脂和蛋白质组成，还含有少量糖类，A正确； B、图1中的结构4是核糖体，核糖体主要由核糖体RNA和蛋白质组成，B正确； C、图2中的结构甲是核糖体，核糖体主要由核糖体RNA（核糖核酸）和蛋白质组成，C正确； D、图2中的丙是高尔基体，高尔基体具有单层膜结构，D错误。 23. 铁皮石斛是我国的名贵中药。科研人员为扩大铁皮石斛的种植范围及推动我国盐碱地的开发进行了相关实验，部分结果如图1、2所示。 各组盐浓度： CK组：0mmol/L S1组：50mmol/L S2组：100mmol/L S3组：150mmol/L S4组：200mmol/L 注：CK为对照组 回答下列问题： （1）提取光合色素时，常用___________作为提取试剂；分离光合色素利用了不同色素在___________中溶解度不同的原理，其中溶解度最大、扩散速度最快的色素是___________。 （2）据图1分析，与对照组相比，盐胁迫会导致铁皮石斛叶绿素含量降低，进而使光反应产生的___________减少。据图2分析，低浓度盐胁迫会___________(选填“促进”或“抑制”)Rubisco活性，结合图1、2推测，与其他实验组相比，___________mmol·L⁻¹的盐胁迫下，铁皮石斛生长得更快。 【答案】（1） ①. 无水乙醇(95%乙醇+无水碳酸钠) ②. 层析液 ③. 胡萝卜素 （2） ①. O2、NADPH、ATP ②. 促进 ③. 50 【解析】 【小问1详解】 光合色素属于脂溶性有机物，易溶于无水乙醇等有机溶剂，因此提取光合色素常用无水乙醇(95%乙醇+无水碳酸钠)作为试剂；分离色素采用纸层析法，原理是不同色素在层析液中的溶解度不同，溶解度越高的色素在滤纸条上扩散速度越快，四种光合色素中胡萝卜素溶解度最大，扩散速度最快。 【小问2详解】 叶绿素可吸收、转化光能用于光反应，叶绿素含量降低会导致光反应速率下降，生成的O2、ATP和NADPH减少；由图2可知，低浓度盐处理的S1组（50mmol/L）Rubisco活性明显高于对照组CK，说明低浓度盐胁迫可促进Rubisco活性；综合两图数据，50mmol/L盐胁迫下，虽叶绿素含量略低于对照组，但Rubisco活性远高于其他实验组，整体光合速率最高，因此铁皮石斛生长更快。 24. 肿瘤细胞表面有受体EGFR，CD3是T细胞表面的标志性抗原。科研人员制备双特异性抗体EGFR/CD3，可招募T细胞定向移至肿瘤细胞，增强其对肿瘤细胞的杀伤力，过程如下图所示。 （1）动物细胞培养：动物细胞培养应提供的气体条件是95%空气和5%CO₂，其中CO₂的作用是___________。注射EGFR进入小鼠体内后，可从小鼠脾脏中获取能产生特异性抗体的细胞B，并用___________酶进行处理分离制备成细胞悬液。细胞B与细胞A融合前，___________(填“需要”或“不需要”)通过原代培养扩大细胞B数量。 （2）第一次筛选：常使用特定的选择培养基(如HAT培养基)，该培养基对未融合的细胞和___________细胞生长具有抑制作用。为了提高异种细胞筛选的成功率，也可以通过红、绿颜色荧光分别标记A、B细胞膜蛋白，再用荧光显微镜观察融合细胞表面的___________现象进行筛选。 （3）第二次筛选：筛选出杂交瘤细胞后，先进行克隆化培养，再利用___________方法，来获得能产生特定抗体的单克隆杂交瘤细胞。 （4）克隆培养：在体外进行杂交瘤细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加动物血清等天然成分。据图分析，抗体是由两条H链和两条L链组成的4条肽链的对称结构，双杂交瘤细胞在理论上会产生多种抗体，原因是___________。 （5）双特异性抗体治疗肿瘤的效果往往优于EGFR抗体和CD3抗体的联合使用，原因是___________。 【答案】（1） ①. 维持培养液的pH ②. 胰蛋白酶##胶原蛋白酶 ③. 不需要 （2） ①. 融合的具有同种核##同种融合 ②. 荧光分布 （3）抗体检测呈阳性##抗原-抗体杂交法##抗体阳性检测 （4）双杂交瘤细胞会表达产生两种H链和两种L链，H链和L链的结合又是随机的，因而产生多种抗体 （5）双特异性抗体同时具备与肿瘤细胞表面EGFR、T细胞表面CD3结合的能力，能直接将T细胞定向招募至肿瘤细胞周围，使T细胞与肿瘤细胞紧密接触，从而增强T细胞对肿瘤细胞的特异性杀伤力 【解析】 【小问1详解】 动物细胞培养需95%空气和5%CO2的混合气体，95%空气提供细胞呼吸所需的O2，5%CO2能维持培养液的pH。脾脏组织中的细胞相互黏连，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分解细胞间的蛋白质，使细胞分散形成细胞悬液。细胞B是已免疫的B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞（细胞A）融合前不需要原代培养扩大数量，直接融合即可满足实验需求。 【小问2详解】 HAT培养基是筛选杂交瘤细胞的常用选择培养基，它能抑制未融合的亲本细胞（细胞A、细胞B）和同种融合细胞（如细胞A与细胞A融合、细胞B与细胞B融合）的生长，仅允许异种融合的杂交瘤细胞存活。若用红、绿荧光分别标记细胞A和细胞B的膜蛋白，异种融合的杂交瘤细胞表面会同时出现红色和绿色荧光（红绿相间），可通过荧光显微镜观察融合细胞表面的荧光分布现象快速筛选出目标融合细胞。 【小问3详解】 第一次筛选得到的杂交瘤细胞可能存在多种，需先进行克隆化培养，获得单一细胞来源的克隆群，保证细胞的纯度。通过抗原-抗体杂交法等抗体阳性检测方法，筛选出能产生特定抗体（抗EGFR抗体或抗CD3抗体）的单克隆杂交瘤细胞，排除产生无关抗体的细胞。 【小问4详解】 双杂交瘤细胞由单克隆杂交瘤细胞与细胞C融合形成，会表达两种不同的H链和两种不同的L链。由于H链和L链的结合是随机的，会形成多种组合，因此理论上会产生多种抗体。 【小问5详解】 双特异性抗体同时具备与肿瘤细胞表面EGFR、T细胞表面CD3结合的能力，能直接将T细胞定向招募至肿瘤细胞周围，使T细胞与肿瘤细胞紧密接触，从而增强T细胞对肿瘤细胞的特异性杀伤力。相比EGFR抗体和CD3抗体联合使用，双特异性抗体的“桥梁作用”更直接、高效，避免了两种抗体单独作用时的靶向性不足问题。 25. 大刍草具有较强的耐盐碱能力，该性状与M蛋白有关。科学家通过PCR获取和扩增M蛋白基因，如图1所示。将获得的大量M蛋白基因与质粒构建基因表达载体，各部分结构如图2所示。回答下列问题： （1）PCR一般可分为___________三步。据图1分析，PCR过程应选择的引物是___________，引物的作用是___________。 （2）在M蛋白基因两端设计不同黏性末端的目的是___________。质粒中氨苄青霉素抗性基因的作用是___________。 （3）为实现质粒和M蛋白基因的连接，切割质粒时选用限制酶XmaⅠ而不选用限制酶SmaⅠ的原因是___________。为将M蛋白基因连接到质粒上，还需要BglⅡ、DNA连接酶等酶。 【答案】（1） ①. 变性、复性(退火)、延伸 ②. 引物Ⅱ和引物Ⅲ ③. 使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸，与模板链结合后启动DNA的复制 （2） ①. 防止M蛋白基因自身环化，保证M蛋白基因在质粒上正向连接 ②. 作为标记基因，筛选出含有重组质粒的受体细胞 （3）Xma Ⅰ酶切出的黏性末端与M蛋白基因一端的黏性末端相同，Sma Ⅰ的酶切末端为平末端，无法与M蛋白基因的黏性末端连接 【解析】 【小问1详解】 PCR是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术，其过程一般可分为变性、复性、延伸三步。DNA分子是由两条链按反向平行方式盘旋成的双螺旋结构，DNA的一条单链具有两个末端，有一个游离的磷酸基团的一端为5′端，另一端有一个羟基（–OH），称作3′端，引物需要与模板链的3'端结合，据此分析据图1可知，PCR过程应选择的引物是Ⅱ、Ⅲ，引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3′ 端开始连接脱氧核苷酸。 【小问2详解】 在M蛋白基因两端设计不同黏性末端，其目的是在构建基因表达载体时，防止M蛋白基因自身环化，保证M蛋白基因在质粒上正向连接。质粒中氨苄青霉素抗性基因属于基因工程中的标记基因，标记基因的作用是筛选出含有重组质粒的受体细胞。 【小问3详解】 分析据图2可知，Bgl Ⅱ酶切出的黏性末端的碱基序列能够与M蛋白基因右侧的黏性末端的碱基序列互补配对，Xma Ⅰ酶切出的黏性末端与M蛋白基因左侧的黏性末端相同，Sma Ⅰ的酶切末端为平末端，无法与M蛋白基因的黏性末端连接。综上分析，为实现质粒和M蛋白基因的高效连接，切割质粒时选用限制酶Xma Ⅰ而不选用限制酶Sma Ⅰ。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $