湖南省常德市汉寿县第一中学2025-2026学年高二下学期6月阶段检测生物试题

**基本信息** 试卷以抗菌肽基因工程、染料废水处理等科技前沿及“姜撞奶”等生活实践为情境，覆盖细胞结构、代谢调节、遗传进化等核心知识，通过实验设计与数据分析考查科学思维和探究实践能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|12题/24分|液泡功能、光合作用、单克隆抗体|结合“姜撞奶”考查酶特性，体现结构与功能观| |多选题|4题/16分|噬藻体实验、根生长信号转导|通过搅拌离心实验分析，培养逻辑推理能力| |解答题|2题/26分|抗菌肽载体构建、微生物筛选|综合PCR技术与毒性蛋白筛选，考查工程实践能力| |实验题|3题/34分|叶面施肥、DA-6作用、表观遗传|设计遮光与DA-6对照实验，强化实验变量分析与结论推导|

湖南省常德市汉寿县第一中学2025-2026学年 高二下学期6月阶段检测生物试题 一、单选题（共24分） 1．（本题2分）纳他霉素是链霉菌产生的一种真菌抑制剂。为解决发酵过程中链霉菌耐酸性差、产量低的问题，研究者尝试利用如下过程选育高产且耐低pH的菌株。相关叙述正确的是（　　） A．过程①用盐酸和酒精混合液去除链霉菌细胞壁 B．多轮的融合筛选都应在低pH平板中培养 C．融合菌株中可能发生了染色体片段的交换与重组 D．目标菌株可直接用于纳他霉素的工业发酵生产 2．（本题2分）肉毒梭菌产生的肉毒类毒素是一种致病性极高的神经麻痹毒素，是由两条链盘曲折叠形成的生物大分子，如图是肉毒类毒素的局部结构简式，下列有关叙述正确的是（    ） A．上图所示的片段含4个肽键，由5种氨基酸组成 B．氨基酸形成肽时，脱去的水中的H全部来自-NH2 C．肉毒类毒素分子中至少含有一个游离的氨基和羧基 D．失活后的肉毒类毒素遇检测蛋白质的试剂不会变色 3．（本题2分）不同植物细胞内液泡大小、形状、颜色存在差异。液泡膜上具有多种酶和转运蛋白，液泡中贮存着多种细胞代谢产物和多种酸性水解酶，糖类、无机盐等物质的浓度往往很高。液泡还能吸收细胞质基质中某些有毒物质，避免细胞中毒。液泡可来自内质网、高尔基体或细胞膜。下列关于液泡的叙述，错误的是（    ） A．液泡中的蛋白质可能由粗面内质网上的核糖体合成 B．液泡在植物细胞中有可能具有类似于溶酶体的作用 C．液泡膜由两层磷脂分子层构成，属于细胞的生物膜系统 D．取洋葱根尖分生区制片染色后能观察到中央大液泡 4．（本题2分）骨关节炎是一种难以治愈的常见疾病，研究发现患者软骨细胞膜上的Na⁺通道蛋白明显多于正常人，从而影响NCX载体对Ca2⁺的运输，导致细胞Ca2⁺内流增多（异常积累），据图分析，下列叙述错误的是（　　） 注：NCX载体可协同转运Na⁺和Ca2⁺ A．Ca2⁺进入细胞不需要消耗能量 B．患者软骨细胞的Ca2⁺内流增多 C．运输Na⁺时，Na⁺通道和NCX载体均需与Na⁺结合 D．Na⁺通道比NCX载体更适合作为研究药物的靶点 5．（本题2分）关于生物实验中“对照”及“变量”的相关叙述，正确的是（　　） ①探究光照强度对光合作用强度的影响，相同浓度的NaHCO3溶液属于无关变量，同一时间圆形叶片浮起数量属于因变量 ②在探究温度对酶活性影响的实验中，可以用H2O2和新鲜的肝脏提取液进行实验 ③观察紫色洋葱鳞片叶外表皮发生质壁分离并复原实验中，滴加蔗糖和清水，属于自变量，原生质层位置为因变量，该实验不存在对照 ④探究温度对淀粉酶活性影响实验中，无关变量有淀粉酶的浓度、加入的溶液量、pH等，因变量是不同温度条件下酶的活性 A．①② B．②③ C．③④ D．①④ 6．（本题2分）将向日葵叶片置于含已知浓度12CO2和14CO2的密闭透明小室中，并依次进行光照和黑暗处理，叶片对两种CO2的吸收无明显差异。测定小室中12CO2浓度和14C放射性强度，计算得到比活度（14C放射性强度/12CO2浓度），结果如图。下列说法错误的是（　　） A．光照开始后叶绿体中出现的放射性物质有14C3、14C5、糖类等 B．光照时，产生ATP的细胞器为叶绿体和线粒体 C．6~8min内，叶片细胞固定12CO2的量接近于零 D．转入黑暗后，比活度降低是由于12CO2被快速释放 7．（本题2分）“姜撞奶”是一种传统美食，以牛奶为原料，利用生姜中的生姜蛋白酶，使牛奶凝固成形。其口感香醇爽滑，甜中带有姜汁辛辣味，风味奇特，名扬珠江三角洲地区。下列叙述错误的是（　　） A．组成生姜蛋白酶的单体是氨基酸或脱氧核苷酸 B．温度、pH、姜汁的用量会影响姜汁凝乳的效果 C．将生姜磨成姜汁有利于释放生姜细胞中的生姜蛋白酶 D．生姜蛋白酶不能水解所有蛋白质与其底物特异性有关 8．（本题2分）甘蓝型油菜是全球第二大油料作物，科研人员以四倍体甘蓝型油菜和菘蓝（俗称板蓝根）为材料，采用多种途径尝试培育不同品种，培育途径如图所示，其中①～⑥表示过程。下列有关叙述错误的是（    ） A．方法甲利用了基因重组的原理，可以集中双亲的优良性状 B．方法乙是单倍体育种，该过程中植株B是单倍体，且可育 C．上述植株中，属于四倍体的只有植株A、C D．方法丙和丁均利用了植物细胞的全能性和染色体数目变异的原理 9．（本题2分）A型塞内卡病毒（SVA）会导致猪患水疱传染病，症状与猪口蹄疫等传染病非常相似。已知SVA核衣壳上的主要蛋白质VP1可作为该病毒诊断蛋白。研究人员以小鼠为对象，利用单克隆抗体技术获得了与VP1结合位点不同的两种单克隆抗体2E10和3E4。为进一步快速精确检测出该病毒，研究人员利用以上两种单克隆抗体制作出快速检测试纸条，如下图所示。结合垫处含有过量胶体金标记的2E10，可向右扩散，当胶体金颗粒聚集时才会出现可见条带，检测线、质控线处包埋固定的抗体依次是3E4和山羊抗鼠IgG（可特异性结合各种鼠源抗体）。下列相关叙述正确的是（　　）    A．制备单克隆抗体过程中第二次筛选的目的是获得融合的杂交瘤细胞 B．3E4和山羊抗鼠IgG与VP1-2E10复合物的结合位点相同 C．病毒检测阴性的结果为检测线和质控线均无条带出现 D．病毒检测阳性的结果为检测线和质控线处均出现条带 10．（本题2分）下列关于利用胚胎工程培育优质奶牛的叙述，正确的是（    ） A．从雄性奶牛中采集到的成熟精子遇到卵子即可进入卵子内 B．在体外完成受精后的受精卵，将其植入子宫即可完成着床 C．随着卵裂的进行，卵裂球细胞的体积变小，卵裂球的体积和有机物总量显著增加 D．进行胚胎移植时不需要考虑受体对外来胚胎发生免疫排斥反应 11．（本题2分）科研人员欲利用密闭玻璃容器探究光照强度对某植物光合作用速率的影响，甲乙两图是在温度、浓度均恒定且适宜的条件下测得的相关曲线。下列相关叙述正确的是（　　） A．图甲中，若将浓度为0.03%突然改变为1%，则曲线与X轴的交点B向右移动 B．乙图中给予植物光照的时间共有14小时 C．图乙曲线中有光照且光照强度一定保持不变的区段是AB段、CD段和EF段 D．图丙可以用来测定某光照强度下的净光合速率 12．（本题2分）如图是“DNA的粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图,下列相关叙述错误的是（    ） A．图1中的溶液a和图2中的溶液b的成分不同，溶液b是 2 mol·L-1的NaCl溶液 B．图1所示操作的原理是DNA能溶于酒精，而某些蛋白质等杂质不溶于酒精 C．图2所示实验的结果是试管1不变蓝，试管2变蓝色 D．图2所示实验中设置试管1的目的是作为对照实验 二、多选题（共16分） 13．（本题4分）噬藻体是一种通过直接侵染使蓝细菌裂解的病毒，科研人员进行了如下实验以探究噬藻体的遗传物质是蛋白质还是DNA：标记噬藻体→噬藻体与蓝细菌混合培养→搅拌、离心→检测放射性。下列说法正确的是（    ） A．标记噬藻体需要在分别含35S、32P的两种培养基中直接培养 B．噬藻体利用蓝细菌提供的脱氧核苷酸和氨基酸为原料，合成子代噬藻体 C．用35S标记噬藻体，搅拌不充分会导致离心后离心管沉积物中的放射性增强 D．32P标记的噬藻体和蓝细菌混合培养时间过长，会导致上清液中放射性偏高 14．（本题4分）水稻OsCRW1蛋白缺失突变体的根部感应重力能力下降，在水中出现卷曲生长。图1为水稻根卷曲生长的调控过程。图2为机械阻力影响该突变体根生长的实验结果。下列叙述错误的是（    ） A．根可将重力信号转变成运输生长素的信号，从而调节根的生长 B．机械阻力可通过减弱胞质钙信号来降低根尖中ROS含量 C．野生型水稻中OsCRW1蛋白通过促进信号转导过程使根向地生长 D．根的向地生长是基因表达调控、激素调节和环境因素调节共同作用的结果 15．（本题4分）同域物种形成是指新物种从同一地域祖先物种未经地理隔离进化而来。斜口裸鲤和花斑裸鲤是生活在逊木措湖的两种裸鲤，原属同一物种，是研究同域物种形成的理想模型。在生殖期，裸鲤会释放性外激素吸引异性前来交配。调查发现，这两种鱼的嗅觉基因差异很大，这是导致它们分化为不同物种的关键。下列分析错误的是（    ） A．斜口裸鲤和花斑裸鲤的形成没有经过隔离 B．裸鲤释放的性外激素会引发异性裸鲤嗅觉基因发生突变 C．同一地域的斜口裸鲤和花斑裸鲤所含的全部基因构成了一个基因库 D．斜口裸鲤和花斑裸鲤对性外激素识别的差异，阻碍了两种鱼的基因交流 16．（本题4分）T4溶菌酶在温度较高时易失去活性。科学家对编码T4溶菌酶的基因进行了改造，使其表达的T4溶菌酶中第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，从而增加二硫键的数量，提高T4溶菌酶的耐热性。下列相关叙述错误的是（    ） A．为获得耐高温的T4溶菌酶需先设计其空间结构，选择合适位点更换氨基酸 B．通过此项研究改造后获得的性状不能遗传给后代 C．此项研究中可利用基因的定点诱变技术对指导T4溶菌酶蛋白合成的RNA进行碱基替换 D．T4溶菌酶的改造属于蛋白质工程，自然界中的酶都可通过蛋白质工程进行改造 三、解答题（共26分） 17．（本题14分）抗菌肽具有抗菌谱广、不易产生耐药性等优点，有望成为抗生素替代品。下图1为构建拟穴青蟹抗菌肽（scy）和大黄鱼抗菌肽（hepc）共表达载体的部分示意图。ccdB 基因编码毒性蛋白，会导致细胞死亡。请据图回答问题： (1)为构建融合基因Scy-hepc需要进行PCR 扩增，反应体系中需加入模板、缓冲液（含Mg2+）、引物、_____等。PCR1和PCR2在反应程序上最主要的区别是_____。融合基因构建过程中发生的变异类型属于_____。 (2)为鉴定PCR产物需进行电泳检测，根据检测结果，对含有单一目的片段的凝胶进行切割，目的是对 DNA进行_____并回收，便于后续测序。 (3)构建基因表达载体过程中需使用BP和LR 重组酶，相当于传统酶切构建法中的_____酶。与传统酶切中使用两种限制酶切割目的相同，重组前还需在 Scy序列的上游添加attBl序列,在hepc序列下游添加attB2序列的目的是_____。载体PMDC85中_____作为标记基因，可快速筛选转化成功的农杆菌。 (4)将重组植物表达载体导入用_____处理的农杆菌，转化小球藻。转化前需用_____酶对小球藻进行处理获得原生质体。可通过观察_____初步检测融合基因是否成功表达。若要进一步确定表达的蛋白为Scy-hepc 可采用_____技术检测。 (5)将鉴定阳性的小球藻和野生型小球藻总蛋白提取液分别加入嗜水气单胞菌和金黄色葡萄球菌的培养基，结果如图2所示。通过比较_____可知重组融合蛋白对两种菌都有一定的抑制效果。 18．（本题12分）染料废水是一种难处理的工业废水。研究发现，活性污泥中能筛选出对蓝色的2BLN染料废水具有高效脱色能力的菌株，它们通过降解具有生物毒性的分散蓝2BLN而降低废水危害，图1表示目标菌株GN—1的筛选和脱色试验流程，图2表示GN—1菌株接种量对脱色效果影响的实验结果。 (1)向含分散蓝2BLN的LB固体培养基中进行接种后，培养结果如图1所示，在菌落①至④中，目标菌株GN—1应从菌落（选出一个最优）_________中挑取。 (2)无菌技术是防止纯种微生物被其他微生物污染，且自身也不污染操作环境的技术。以下过程需要使用无菌技术的是_________。 A．接种 B．富集培养 C．分离、纯化 (3)根据图2所示结果，综合考虑脱色效果（6d脱色率达90%以上为合格）和经济效益，GN—1菌株的最佳接种量为_________%。 四、实验题（共34分） 19．（本题10分）中国是世界上花生油的最大消费国。为研究叶面施肥对花生光合作用的影响，科研人员配制适宜浓度的氮肥（尿素），磷肥（过磷酸钙），钾肥（硫酸钾）和硼肥（硼酸），在花生不同的生育时期分别对叶面喷施不同种类的肥料，测定各组花生各项光合作用的指标。如图是测得的部分数据（花针期：从开花到鸡头状幼果出现的时期；荚果期：从幼果至饱果形成时期）。回答下列问题：      (1)检测生物组织中的脂肪实验通常用花生子叶做生物材料，实验过程中用_________对花生子叶切片进行染色，一段时间后再用50%酒精溶液， 目的是__________。 (2)用_________试剂提取花生绿叶中的色素，由图1数据可知，最好在_________（生育时期）给叶面喷施肥料，能有效提高植株叶绿素含量。 (3)对照组（CK）花生植株叶面的处理应为________，该实验的无关变量有_____________（答出一点即可）。 (4)根据上述实验数据，该实验的结论是：_________。 20．（本题12分）二烷氨基乙醇羧酸酯（DA-6）是一种新型的植物生长调节剂。某科研小组研究了DA-6对不同光照强度下草莓光合作用的影响，对其相关指标进行了测定，结果如表所示。 组别 处理 光合速率 [mmol/（m2·s）] 气孔导度 [mmol/（m2·s）] Rubisco活性 [μmol/（m2·s）] ① 不遮光+清水 10.1 0.16 38.2 ② 不遮光+DA-6 15.2 0.24 42.1 ③ 遮光+清水 8.3 0.15 25.3 ④ 遮光+DA-6 15.4 0.23 35.7 （注：气孔导度表示气孔张开的程度；Rubisco是暗反应中CO2固定的关键酶；丙二醛是膜脂过氧化产物，其含量与生物膜受损程度呈正相关） (1)草莓叶肉细胞中CO2被固定的场所是________，光反应产生的NADPH可为C3的还原提供________。 (2)夏季晴朗的白天正午时分，植物出现“光合午休”现象的原因是________。该实验中，气孔导度________（填“是”或“不是”）遮光条件下光合速率下降的主要限制因素，其判断依据是________________。 (3)DA-6处理可提高不同光照强度下草莓叶片的光合速率，根据实验数据推测，DA-6可能是通过________，从而提高草莓叶片光合作用的暗反应速率。 21．（本题12分）为了研究大鼠幼崽性格形成的机制，研究人员选取“负责任”母鼠（善于舔舐和清洁幼崽）和“不负责任”母鼠（不善于舔舐和清洁幼崽）进行亲子抚养实验，观察幼崽成年后对轻微社交刺激的反应，结果发现，“负责任”母鼠抚养的幼鼠成年后，遇到刺激表现为安静、放松；而“不负责任”母鼠抚养的幼鼠成年后，遇到刺激表现为敏感、紧张。 回答下列问题： (1)本实验的自变量是______，根据实验结果可得出的结论是______。 (2)为进一步研究大鼠幼崽成年后的性格特点是天生的，还是与抚养的母鼠有关，研究人员又进行了两组实验，实验分组及结果如下表所示。 组别 大鼠幼崽来源 母鼠的抚养方式 幼崽成年后性格特点 1 “负责任”母鼠的幼崽 交由“不负责任”母鼠抚养 ______ 2 “不负责任”母鼠的幼崽 ______ 安静、放松 ①对组别2的大鼠幼崽进行的实验处理是______，实验结果表明：大鼠幼崽成年后性格特点与其生母无关，而与______有关，因此可推测第1组大鼠幼崽成年后的性格特点为______。 ②为了使实验更加严谨，还应设置对照实验，应如何设置？ Ⅰ：大鼠幼崽来源______； Ⅱ：母鼠的抚养方式______。 预期结果为______。 (3)进一步研究发现，大鼠幼崽的性格发育与大脑海马区皮质醇受体基因的表达水平有关，皮质醇受体基因的高表达能抑制应激反应的强度，使大鼠保持安静、放松的状态。DNA甲基转移酶能使基因的甲基化水平升高，从而抑制基因的表达。上述实验中各组大鼠幼崽海马区皮质醇受体基因的碱基序列相同，由于母鼠抚养方式的差异造成成年后性格特点不同的现象称为______。幼崽敏感、紧张的性格形成是由于“不负责任”母鼠抚养的幼崽因为缺乏关爱使体内DNA甲基转移酶的活性______，导致海马区皮质醇受体基因处于______状态，使皮质醇受体基因的表达受到______，从而使幼崽成年后性格特点表现出敏感、紧张。 试卷第1页，共3页 试卷第1页，共3页 学科网（北京）股份有限公司 参考答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 B A D C D C A C D D 题号 11 12 13 14 15 16 答案 B B BCD BC ABC BCD 1．B 【详解】A、链霉菌是原核生物，细胞壁主要成分为肽聚糖，盐酸和酒精混合液（解离液）用于植物细胞解离，不能去除原核生物细胞壁，制备原生质体需用溶菌酶处理，A错误； B、第一轮融合筛选的目标是获得产量高于A且耐低pH的融合菌株B、C，第二轮筛选是为了获得产量高于B、C且耐低pH的融合菌株D、E，所以这两轮筛选都需要在低pH平板中培养，才能筛选出耐低pH的菌株，B正确； C、链霉菌是原核生物，细胞内没有染色体，只有裸露的DNA，因此融合菌株中不会发生染色体片段的交换与重组，C错误； D、目标菌株需经发酵条件优化、安全性检测等进一步鉴定，不能直接用于工业发酵生产，需确保产量稳定、无有害代谢产物等，D错误。 2．A 【详解】A、据图分析，上图所示的片段含4个肽键，根据氨基酸的不同，在于R基的不同，上图所示的片段由5种氨基酸组成，A正确； B、氨基酸形成肽时，脱去的水中的H来自-NH2和-COOH，B错误； C、肉毒类毒素是由两条链盘曲折叠形成的生物大分子，肉毒类毒素分子中至少含有两个游离的氨基和羧基，C错误； D、失活后的肉毒类毒素遇检测蛋白质的试剂仍然会发生反应，因为有肽键存在，D错误。 故选A。 3．D 【分析】液泡是单层膜的细胞器。它由液泡膜和细胞液组成，其中细胞液容易和细胞外液和细胞内液混淆，其中主要成分是水。不同种类细胞的液泡中含有不同的物质，如无机盐、糖类、色素、脂类、蛋白质、酶、生物碱等。 【详解】A、由题意推测液泡中的蛋白质其合成过程类似于分泌蛋白，需经过内质网和高尔基体的加工、修饰和运输，A正确； B、液泡中含有多种水解酶，功能类似溶酶体，B正确； C、液泡膜为单层膜，由两层磷脂分子层构成，属于细胞的生物膜系统，C正确； D、洋葱根尖处为分生区，此处细胞无中央大液泡，D错误。 故选D。 4．C 【详解】A、由图可知，Na+通过Na+通道蛋白进入细胞，属于协助扩散，说明细胞内Na+浓度低，所以NCX载体将Na+逆浓度排出胞外，属于主动运输，需要利用Ca2+产生的电化学势能提供能量，据此可推出Ca2+进细胞是协助扩散，不需要消耗能量，A正确； B、因为患者软骨细胞膜上Na+通道蛋白增多，会使Na+内流增多，胞内Na+会积累，NCX载体会将胞内过多的Na+逆浓度排出胞外，需要利用Ca2+产生的电化学势能提供能量，所以使得Ca2+内流增多，B正确； C、Na+通过通道蛋白时，不需要与通道蛋白结合，C错误； D、因为患者是Na+通道蛋白明显多于正常人从而引发疾病，所以与NCX载体相比，Na+通道更适合作为研究药物的靶点，D正确。 故选C。 5．D 【分析】设计实验方案时，要遵循单一变量原则，要求只能有一个变量，这样才能保证实验结果是由所确定的实验变量引起的，其他因素均处于相同且适宜状态，这样便于排除因其他因素的存在而影响、干扰实验结果的可能。 【详解】①探究光照强度对光合作用强度的影响,光照强度属于自变量,同一时间圆形叶片浮起数量属于因变量,相同浓度的NaHCO3溶液属于无关变量，①正确； ②在探究温度对酶活性影响的实验中,自变量是温度,因变量是酶活性,不能用H2O2和新鲜的肝脏提取液进行实验,因为H2O2在加热条件下分解也会加快，②错误； ③观察紫色洋葱鳞片叶外表皮发生质壁分离及复原实验中,滴加蔗糖和清水,属于自变量,原生质层位置为因变量，该实验不需要设置对照,存在自身前后对照，③错误； ④探究温度对淀粉酶活性影响实验中,自变量是温度,因变量是酶活性,无关变量有淀粉酶的浓度、加入的溶液量、pH等，④正确。 综上①④正确，ABC错误，D正确。 故选D。 6．C 【详解】A、光照情况下，向日葵进行光合作用，吸收的14CO2与C5反应形成三碳化合物，即光照开始后，叶绿体中放射性首先出现在三碳化合物中，然后通过C3的还原形成C5和糖类，所以光照开始后叶绿体中出现的放射性物质有14C3、14C5、糖类等，A正确； B、光照时，叶绿体通过光反应产生ATP，线粒体通过有氧呼吸产生ATP，除此之外细胞质基质中也产生ATP,B正确； C、6～8 min内，小室内12CO2浓度几乎不变，说明光合作用吸收12CO2和呼吸作用释放12CO2量相等，但是比活度下降，说明光合作用吸收的14CO2比呼吸释放的14CO2多，所以这个时期总光合速率大于总呼吸速率，叶片细胞固定12CO2的量大于零，C错误； D、转入黑暗后，叶片只进行呼吸作用，释放12CO2，比活度降低是由于12CO2被快速释放，D正确。 7．A 【分析】酶需要适宜的温度和pH值，在最适条件下，酶的催化活性是最高的，低温可以抑制酶的活性，随着温度升高，酶的活性可以逐渐恢复，高温、过酸、过碱可以使酶的空间结构发生改变，使酶永久性的失活。 【详解】A、生姜蛋白酶的化学本质是蛋白质，其单体是氨基酸，A错误； B、酶的活性受温度、pH等因素影响，姜汁用量会影响生姜蛋白酶的量，进而影响姜汁凝乳的效果，B正确； C、将生姜磨成姜汁有利于释放生姜细胞中的生姜蛋白酶，C正确； D、酶具有专一性，即一种酶只能催化一种或一类化学反应，不同蛋白质的结构不同，生姜蛋白酶并不能水解所有蛋白质与其底物特异性有关，D正确。 故选A。 8．C 【详解】A、方法甲是杂交育种过程，利用了基因重组的原理，可以集中双亲的优良性状，A正确； B、方法乙是单倍体育种，包括花药离体培养和人工诱导染色体加倍的过程。花药离体培养获得的植株B含两个染色体组，是可育的单倍体，B正确； C、植株A是有性生殖产生的四倍体，植株B是单倍体，植株C是单倍体育种获得的四倍体，植株D是植物组织培养技术获得的四倍体，植株E是多倍体育种获得的八倍体，植株G是植物体细胞杂交技术获得的异源六倍体，因此属于四倍体植物的有植株A、C、D，C错误； D、植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，过程3和6利用了植物组织培养技术，方法丙获得的植株E是八倍体，方法丁获得的植株G是六倍体。所以方法丙和丁均利用了植物细胞的全能性和染色体数目变异的原理，D正确。 9．D 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、制备单克隆抗体过程中第一次筛选的目的是获得融合的杂交瘤细胞，A错误； B、抗原具有多种抗原决定簇，3E4和山羊抗鼠IgG与VP1-2E10复合物的结合位点不相同，B错误； C、病毒检测阴性的结果应为检测线无条带，质控线有条带，C错误； D、如果样本中含有病毒抗原，就会首先被结合垫上的胶体金标记抗体2E10结合，形成“病毒抗原—金标抗体”复合物，并继续向试纸末端流动。在检测线（T线）上又被能识别此抗原的另一种抗体3E4捕获，形成“金标抗体—病毒抗原—T线抗体”复合物”。推测试纸上发生待检测病毒的抗原与抗体结合的区域是结合垫、检测线（T线）。由于样品中VP1蛋白与金标2E10结合，向右扩散又与检测线处的3E4结合产生条带，过量的2E10与质控线处的山羊抗鼠IgG结合产生条带，因此病毒检测阳性的结果为检测线和质控线处均出现条带，D正确。 故选D。 10．D 【分析】1、体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精； 2、胚胎发育过程： （1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加； （2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎； （3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔； （4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。 【详解】A、从雄性奶牛中采集到的成熟精子还需要获能才能与卵子受精，A错误； B、在体外完成受精后的受精卵，需要发育到桑椹胚或囊胚阶段才能胚胎移植入子宫，B错误； C、随着卵裂的进行，卵裂球细胞的体积变小，卵裂球的体积不变甚至减少，有机物总量减少，C错误； D、受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体的存活提供了可能，这是胎移植的生理学基础之一，D正确。 故选D。 11．B 【详解】A、曲线与X轴的交点B表示在该光照强度下，植物光合作用速率和呼吸作用速率相等。将二氧化碳浓度升高，则植物光合作用强度升高。若光合作用速率还要与呼吸作用速率相等，则要降低光照强度来降低光合作用速率，因此交点B向左移动，A错误； B、由图甲可知，该植物在实验条件下的呼吸强度为2。由图乙可知，AB段对应纵坐标为-1，GH对应纵坐标为-2，说明AB时间段内有光合作用，GH时间段内只有呼吸作用，所以，从A点开始进行光合作用，G点时光合作用消失，共有14小时光照时间，B正确； C、乙图中EF段O2释放速率不变，说明光合速率不变，但光照强度可能改变（如达到光饱和点后，光照强度再增加光合速率也不变），因此不能确定光照强度保持不变，C错误； D、图丙中NaOH溶液吸收CO2，会导致植物因缺乏CO2而不能进行光合作用，无法测定净光合作用，应将烧杯中的NaOH换成NaHCO3溶液或CO2缓冲液，D错误。 故选B。 12．B 【分析】1、DNA的溶解性： （1）DNA和蛋白质等其它成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。 （2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA和蛋白质进一步分离。 2、DNA的析出与鉴定： ①将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液，静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分。 ②取两支20ml的试管，各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。 【详解】AB、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，所以图1中溶液a成分为酒精溶液，其中用玻璃棒卷起的丝状物为粗提取的DNA，DNA在2mol/L的NaCl溶液中溶解度较大，可用二苯胺沸水浴鉴定DNA，将丝状物DNA溶解于2mol/L的NaCl溶液，故溶液b是2mol/L的NaCl溶液，A正确，B错误； CD、溶液b是2mol/L的NaCl溶液，图2试管1的作用是证明2mol/L的NaCl 溶液遇二苯胺不会出现蓝色，故设置试管1的目的是作为空白对照，试管2将丝状物DNA溶解于2mol/L的NaCl溶液，加入二苯胺试剂，沸水浴冷却后呈蓝色，因此图2所示实验的结果是试管1不变蓝，试管2变蓝色，CD正确。 故选B。 13．BCD 【分析】T2噬菌体是一种专性寄生在大肠杆菌体内的病毒，不能直接用培养基培养。若要标记T2噬菌体，需要先用含放射性的培养基标记大肠杆菌，然后用噬菌体侵染被标记的大肠杆菌获得被标记的噬菌体。 【详解】A、噬藻体属于病毒，因此若要标记噬藻体，需要先用含放射性物质的培养基标记蓝细菌，然后用噬藻体侵染被标记的蓝细菌得到被标记的噬藻体，A错误； B、侵染蓝细菌的噬藻体利用蓝细菌提供的脱氧核苷酸和氨基酸为原料，合成子代噬藻体，B正确； C、用35S标记噬藻体，搅拌的目的是使吸附在蓝细菌上的噬藻体蛋白质外壳与蓝细菌分离，若搅拌不充分，部分噬藻体外壳仍吸附在蓝细菌表面，离心后沉淀物放射性增强，上清液的放射性降低，C正确； D、32P标记的噬藻体和蓝细菌混合培养时间过长，会因子代噬藻体释放导致上清液中放射性偏高，D正确。 故选BCD。 14．BC 【详解】A、根可以通过重力感应将重力信号转化为运输生长素的信号，从而调节根的生长（如根的向地性），这是植物感受重力并调节生长的基本机制，A正确； B、由图2可知，有机械阻力（b组）时根卷曲程度减轻，结合图1中信号转导过程，可推测机械阻力是通过增强胞质钙信号来降低根尖中ROS含量，而不是减弱，B错误； C、图 1 显示，野生型水稻中 OsCRW1 蛋白会促进胞质 Ca²⁺信号的产生，进而引发根冠脱落和根系弯曲；而题干中说明 “OsCRW1 蛋白缺失突变体根部感应重力能力下降，在水中出现卷曲生长”，说明野生型的 OsCRW1 蛋白是通过促进胞质Ca2+信号来抑制信号转导，从而降低根尖中ROS含量，维持根的正常向地生长，C错误； D、根的向地生长是基因表达调控（如 OsCRW1 基因）、激素调节（如生长素）和环境因素（如重力、机械阻力）共同作用的结果，D正确。 故选BC。 15．ABC 【分析】生殖隔离是指不同种群之间在自然条件下不能交配，或者即使能交配也不能产生后代或不能产生可育性后代。 【详解】A、由题意可知，斜口裸鲤和花斑裸鲤的形成没有经过地理隔离，但经过了生殖隔离，A错误； B、基因突变本身就存在，不是性外激素引发的，B错误； C、种群中所有个体含有的全部基因称为该种群的基因库，同一地域的斜口裸鲤和花斑裸鲤是2个不同的种群，故同一地域的斜口裸鲤和花斑裸鲤所含的全部基因构成了2个基因库，C错误； D、斜口裸鲤和花斑裸鲤对性外激素识别的差异，影响了交配对象的选择，进而阻碍了两种鱼的基因交流，D正确。 故选ABC。 16．BCD 【分析】题意分析，科学家利用蛋白质工程技术，通过对编码T4溶菌酶的基因进行改造，从而改造了 T4溶菌酶的结构，提高了T4溶菌酶的耐热性。蛋白质工程的基本途径是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找出相对应的脱氧核苷酸序列（基因）。 【详解】A、科学家对编码T4溶菌酶的基因进行了改造，使其表达的T4溶菌酶中第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸从而增加二硫键的数量，而T4溶菌酶的化学本质是蛋白质。可见，为获得耐高温的T4溶菌酶，需先设计其空间结构，选择合适位点更换氨基酸，A正确； B、此项研究是通过改造编码T4溶菌酶的基因而实现了对T4溶菌酶的结构进行改造，因此改造后获得的性状能遗传给后代，B错误； C、此项研究成功地将T4溶菌酶中第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，可利用基因的定点诱变技术对指导T4溶菌酶蛋白合成的DNA上的相应基因进行碱基替换，C错误； D、T4溶菌酶的改造属于蛋白质工程，在自然界中，绝大多数酶是蛋白质，少数酶是RNA，蛋白质工程只能用于改造蛋白质类酶，D错误。 故选BCD。 17．(1) dNTP(脱氧核苷酸)和耐高温DNA聚合酶 复性温度不同（或延伸时间不同） 基因突变 (2)纯化(或提纯) (3) 限制酶和 DNA 连接酶 使融合基因(目的基因)定向插入载体 ccdB/ccdB 基因 (4) Ca2+（CaCl2） 纤维素酶和果胶酶 小球藻细胞内是否出现绿色荧光 抗原-抗体杂交 (5)抑菌圈的大小 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成； （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，标记基因便于目的基因的筛选； （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法； （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因或目的基因是否转录出了mRNA——PCR技术；②检测目的基因是否翻译出蛋白质——抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】（1）PCR反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行，需提供DNA模板，分别与两条模板链结合的2种引物，4种脱氧核苷酸和耐高温的DNA聚合酶；同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。PCR1和PCR2两个反应体系中的引物和模板不同，所以在反应程序上最主要的区别是复性温度不同或延伸时间不同。融合基因构建过程中发生的变异类型属于基因突变。 （2）为鉴定PCR产物需进行电泳检测，根据检测结果，对含有单一目的片段的凝胶进行切割，目的是对DNA进行提纯并回收，便于后续测序。 （3）由图可知，融合基因Scy-hepc与载体1在BP重组酶的作用下构建了载体2，载体2和植物表达载体PMDC85在LR重组酶的作用下构建了PMDC85-Scy-hepc，该过程使用的BP和LR 重组酶，相当于传统酶切构建法中的限制酶和 DNA 连接酶。与传统酶切中使用两种限制酶切割目的相同，重组前还需在Scy序列的上游添加attBl序列,在hepc序列下游添加attB2序列，目的是使融合基因和载体1中含有同源序列，便于融合基因定向插入载体。ccdB基因编码毒性蛋白，会导致细胞死亡，因此，在载体PMDC85中ccdB基因作为标记基因，可快速筛选转化成功的农杆菌。 （4）将目的基因导入农杆菌时，可用Ca2+处理农杆菌，使其处于容易吸收周围DNA分子的状态。转化前需用纤维素酶和果胶酶酶对小球藻进行处理获得原生质体。PMDC85-Scy-hepc中含有GFP，相当于标记基因，因此，可通过观察小球藻细胞内是否出现绿色荧光初步检测融合基因是否成功表达。在基因工程中若要检测目的基因是否表达成功，在分子水平上可用抗原-抗体杂交技术检测。 （5）由图2可知，嗜水气单胞菌和金黄色葡萄球菌的培养基上，加入鉴定阳性小球藻总蛋白提取液后都出现了明显的抑菌圈，说明重组融合蛋白对两种菌都有一定的抑制效果。 18．(1)③ (2)ABC (3)15% 【分析】获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。消毒和灭菌工作主要包括两个方面：对操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒等；灭菌方法有湿热灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌等。 【详解】（1）透明圈越大说明该菌落中的菌株分散2BLN的能力越强，故应该选取菌落③。 （2）ABC、获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染，接种、微生物的培养、分离纯化的过程都涉及无菌技术，因此接种、富集培养和分离、纯化过程都需要使用无菌技术，即ABC正确，故选ABC。 （3）根据图2，6d脱色率达90%以上为合格，15%和20%效果几乎相同且最佳，以节约的原则考虑，最佳接种量为15%。 19．(1) 苏丹Ⅲ染液 洗去浮色 (2) 无水乙醇 花针期 (3) 喷施等量的蒸馏水 叶面施肥的浓度 (4)在花针期，对叶面喷施适宜浓度的磷肥和硼肥能够显著增强花生光合作用 【分析】1、生物学探究实验中，人为控制的变量称为自变量，随着自变量的改变而改变的变量称为因变量，对实验结构有影响的其他变量称为无关变量。 2、绿叶中色素的提取和分离实验，提取色素时需要加入无水乙醇（溶解色素）、SiO2（使研磨更充分）和碳酸钙（防止色素被破坏）；分离色素时采用纸层析法，原理是色素在层析液中的溶解度不同，随着层析液扩散的速度不同，最后的结果是观察到四条色素带，从上到下依次是胡萝卜素（橙黄色）、叶黄素（黄色）、叶绿素a（蓝绿色）、叶绿素b（黄绿色）。 【详解】（1）脂肪鉴定实验过程中用苏丹Ⅲ染液对花生子叶切片染色，原理是脂肪被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色。在实验过程中需要用到体积分数为50%的酒精溶液，目的是洗去浮色。 （2）绿叶中的色素不溶于水，易溶于有机溶剂，可用无水乙醇提取花生绿叶中的色素，分析题图1可知，在花针期给叶面喷施肥料，能有效提高植株叶绿素含量。 （3）实验设计应遵循对照原则和控制单一变量原则，故对照组（CK）花生植株叶面的处理应为喷施等量的蒸馏水，该实验的无关变量有叶面施肥的浓度等，无关变量应保持相同且适宜。 （4）本实验目的是研究叶面施肥对花生植株光合作用的影响，分析题图实验数据可知，在花针期，对叶面喷施适宜浓度的磷肥和硼肥能够增加花生叶片叶绿素含量，使其对光能的吸收、传递和转化能力增强，进而显著增强花生光合作用。 20．(1) 叶绿体基质 氢（还原剂）和能量 (2) 夏季晴朗的白天由于温度太高，气孔导度减小，二氧化碳的吸收减少，光合速率减弱 不是 遮光条件下气孔导度略微减小(基本不变)，但Rubisco活性显著降低 (3)增大气孔导度增加CO2吸收量(速率)；提高Rubisco活性，提高CO2固定能力 【分析】本实验的目的是研究DA-6对不同光照强度下草莓光合作用的影响，实验自变量是是否遮光、是否DA-6处理，检测指标是气孔导度和Rubisco活性、光合速率。 【详解】（1）草莓叶肉细胞中CO2固定为暗反应过程，暗反应发生的场所是叶绿体基质。暗反应需要光反应提供ATP和NADPH，光反应产生的NADPH可为C3的还原提供氢和能量。 （2）夏季晴朗的白天正午时分，植物出现“光合午休”现象的原因是夏季晴朗的白天由于温度太高，气孔导度减小，二氧化碳的吸收减少，光合速率减弱。该实验中，气孔导度不是遮光条件下光合速率下降的主要限制因素，其判断依据是①③对比，②④对比，气孔导度只是略微下降，而Rubisco活性下降明显。因此遮光条件下光合速率下降的主要限制因素是Rubisco活性。 （3）①和②对比，③和④对比，DA-6处理后，气孔导度增大，Rubisco活性增大，说明DA-6可能是通过增大气孔导度增加CO2吸收量(速率)；提高Rubisco活性，提高CO2固定能力，从而提高草莓叶片光合作用的暗反应速率。 21．(1) 大鼠幼崽来源、母鼠的抚养方式 母鼠的抚养方式不同会导致其幼崽成年后的性格差异 (2) 交由“负责任”母鼠抚养 母鼠的抚养方式 敏感、紧张 将来自同一窝、生理状态一致的第三方大鼠幼崽 分别交由“负责任”和“不负责任”母鼠抚养 交由“负责任”和“不负责任”母鼠抚养的同一窝、生理状态一致的第三方大鼠幼崽分别表现为安静、放松和敏感、紧张。 (3) 表观遗传 升高(或增强) 甲基化 抑制 【分析】根据题意可知，本实验的目的为探究大鼠幼崽来源和母鼠的抚养方式对大鼠幼崽性格形成的影响。实验的自变量是大鼠幼崽来源和母鼠的抚养方式，因变量是大鼠幼崽性格特点。 【详解】（1）根据题意可知，实验的自变量是大鼠幼崽来源和母鼠的抚养方式。 “负责任”母鼠抚养的幼鼠成年后，遇到刺激表现为安静、放松；而“不负责任”母鼠抚养的幼鼠成年后，遇到刺激表现为敏感、紧张，推出母鼠的抚养方式不同会导致其幼崽成年后的性格差异。 （2）组别1中实验处理是将大鼠幼崽交由“不负责任”母鼠抚养，则组别2中实验处理应是将大鼠幼崽交由“负责任”母鼠抚养，实验结果表明：大鼠幼崽成年后性格特点与其生母无关，则影响大鼠幼崽成年后的性格特点的因素为母鼠的抚养方式，推导出第1组大鼠幼崽成年后的性格特点为敏感、紧张。 在对照实验中，遵循单一变量原则，为了使得实验更严谨，可设置对照实验，取同一窝、生理状态一致的第三方大鼠幼崽，分别交由“负责任”和“不负责任”母鼠抚养，若交由“负责任”和“不负责任”母鼠抚养的同一窝、生理状态一致的第三方大鼠幼崽分别表现为安静、放松和敏感、紧张，则进一步验证大鼠幼崽成年后性格特点与其生母无关，而与母鼠的抚养方式有关。 （3）生物体基因的碱基序列保持不变，但基因表达和表型发生可遗传变化的现象，叫作表观遗传。上述实验中各组大鼠幼崽海马区皮质醇受体基因的碱基序列相同，由于母鼠抚养方式的差异造成成年后性格特点不同，符合表观遗传。 根据题意，皮质醇受体基因的表达受到DNA甲基转移酶活性的影响，“不负责任”母鼠抚养的幼崽因为缺乏关爱使体内DNA甲基转移酶活性增强，DNA甲基转移酶能使基因的甲基化水平升高，从而抑制皮质醇受体基因的表达，则大鼠幼崽成成年后性格应激反应的强度无法受到抑制，表现为敏感、紧张。 答案第1页，共2页 答案第1页，共2页 学科网（北京）股份有限公司 $