第65卷 农业微生物培养 、保藏技术《农业生物技术》安徽省分类考试和对口招生《农林牧渔类（种植）考纲百套卷》（原卷版+解析版）

编写说明：安徽省《农林牧渔类（种植）考纲百套卷》，依据《安徽省普通高校对口招生农林牧渔类专业课考试纲要》编写。每门课程均分三层训练：基础层（具象化支架）拆解考点为微目标，紧扣考纲 “掌握”“理解” 要求编写考点训练卷；巩固层（关联性支架）强化知识交叉与场景关联，按考纲专题编专题训练卷；应用层（引导性支架）聚焦真题突破，结合知识模块与教材编写课程综合卷。 本试卷是第65卷考点训练卷，按《农业生物技术》范围和要求编写。具体内容为:平板培养技术；固体基料培养技术；摇瓶培养技术；发酵罐液体深层培养技术；微生物常见的保藏方法。 安徽省《农林牧渔类（种植）考纲百套卷》 第65卷 《农业生物技术》 农业微生物培养 、保藏技术 考点训练卷 考试时间60分钟 满分100分 班级 姓名 学号 成绩 一、单项选择题（本大题共15小题，每题2分，共30分） 1.（ ）的平板接种常使用划线和涂布的方法。 A.细菌和丝状真菌 B.细菌和单细胞微生物 C.丝状真菌和单细胞微生物 D.丝状真菌和产孢微生物 2.微生物培养温度一般在37℃的是( )。 A.细菌 B.真菌 C.人体微生物 D.食用菌 3.工业生产中往往为了避免杂菌污染，常选育耐高温菌种，培养温度常在（ ）左右。 A．37 ℃ B．40 ℃ C．45 ℃ D．60 ℃ 4.平板技术培养真菌需要培养( )时间 。 A.24 h B.1～2 d C.2～3 d D.3～4 d 5.农业微生物培养完成收集后保藏温度一般是（ ）。 A.0 ℃ B.4 ℃ C.6 ℃ D.10 ℃ 6. 摇瓶培养技术中,真菌为（ ），200～300 r/min振荡培养。 A.28℃ B.30℃ C.32 D.35 ℃ 7.固体基料培养技术中，基料接种时将基料灭菌后，再接入（ ）基料量的菌种。 A.5% B.10% C.20% D.30% 8.平板培养微生物技术操作顺序是 ( )。 A.斜面菌种 → 接种 → 活化 → 培养 → 收获 B.斜面菌种 → 接种 → 培养 → 活化 → 收获 C.斜面菌种 → 活化 → 接种 → 培养 → 收获 D.斜面菌种 → 活化 → 培养 → 接种 → 收获 9.下列有关摇瓶培养技术的注意事项叙述不正确的是（ ）。 A.细菌和单细胞微生物的菌悬液浓度要求必须大于108,最好1010 B.产孢微生物的孢子液浓度要求必须大于106,最好108 C.对于以菌丝为主的种子,取生长旺盛的种子，按1:20体积分数进行接种 D.培养时一定注意防止杂菌污染，保证培养环境洁净 10.固体基料培养中，固体基料发酵的温度控制以（ ）温度为准。 A.基料中心 B.基料表层 C.环境 D.瓶壁 11.发酵罐液体深层培养技术整个培养过程都要维持发酵罐的罐内正压， 一般为（ ） MPa。 A.0.01 B.0.05 C.0.1 D.0.5 12.采用斜面冰箱(4℃)保藏霉菌，保存有效时间为（ ）。 A.1个月 B.2～8个月 C.3个月 D.6个月 13.能适用于病毒的保藏方法是（ ）。 A.斜面室温保藏 B.冷冻干燥保藏 C.固体曲 D.载体保藏法 14.固体曲保藏菌种的方法主要适用于（ ）。 A.产生大量孢子的霉菌 B.各类微生物 C.芽孢杆菌 D.放线菌 15.微生物保藏方法中保存有效时间最长的是（ ）。 A.斜面室温保藏 B.液氮保藏法 C.砂土管保藏 D.载体保藏法 二、多项选择题（本大题共4小题，每题3分，共12分） 16.平板培养（ ）常用点种接种方法。 A.丝状真菌 B.细菌 C.产孢微生物 D.单细胞微生物 17.固体基料培养技术中，基料可以是（　 　）。 A.麸皮 B.锯末 C.马铃薯块 D.蔗糖 18.发酵罐液体深层培养技术中，发酵与控制过程中正确的操作有（ ） A.增加温度 B.控pH C.减少通气量 D.控转速 19.微生物菌种保藏的条件是（ ） A.低温 B.高温 C.干燥 D.缺氧 三、填空题（本大题共12个空，每空2分，共24分） 20.固体培养基灭菌后倒入无菌培养皿中凝固之后制成 。 21.固体基料培养技术中，基料接种时先将基料加热灭菌消毒，加热的温度为 ℃,时间是 。 22.一般情况下，细菌平板培养一般在 ℃下，培养 小时左右能长出可见菌落。 23. 农业微生物培养时一定注意 ，保证培养环境洁净。 24.发酵罐接种一般在 保护下接种，接种量一般为10%,种子要求处于对数期或 。 25.菌种保藏的基本依据是根据微生物的生理生化特点，人工制造环境条件，使微生物处于代谢不活泼、生长繁殖受抑制的 。 26.只适用于对芽孢杆菌、产孢子的霉菌、放线菌的保藏方法是 。 27.菌种保藏，包含两方面的内容： 一是 ，即保持其存活和不受污染； 二是 ，使其在相当长时期内维持稳定的遗传潜力，两者缺一不可。 四、分析说明题（本大题共3小题，共34分） 28.根据自己所学知识，简述摇瓶培养技术技术路线和操作步骤。 （12分） 29. 微生物保藏包含的内容有哪些？菌种保藏的基本依据是什么？（10分） 30.根据自己所学知识，简述发酵罐液体深层培养技术的技术路线与注意事项。（12分） 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $ 编写说明：安徽省《农林牧渔类（种植）考纲百套卷》，依据《安徽省普通高校对口招生农林牧渔类专业课考试纲要》编写。每门课程均分三层训练：基础层（具象化支架）拆解考点为微目标，紧扣考纲 “掌握”“理解” 要求编写考点训练卷；巩固层（关联性支架）强化知识交叉与场景关联，按考纲专题编专题训练卷；应用层（引导性支架）聚焦真题突破，结合知识模块与教材编写课程综合卷。 本试卷是第65卷考点训练卷，按《农业生物技术》范围和要求编写。具体内容为:平板培养技术；固体基料培养技术；摇瓶培养技术；发酵罐液体深层培养技术；微生物常见的保藏方法。 安徽省《农林牧渔类（种植）考纲百套卷》 第65卷 《农业生物技术》 农业微生物培养 、保藏技术 考点训练卷 考试时间60分钟 满分100分 班级 姓名 学号 成绩 一、单项选择题（本大题共15小题，每题2分，共30分） 1.（ ）的平板接种常使用划线和涂布的方法。 A.细菌和丝状真菌 B.细菌和单细胞微生物 C.丝状真菌和单细胞微生物 D.丝状真菌和产孢微生物 【答案】B 【解析】平板接种,细菌和单细胞微生物的常使用划线和涂布的方法,而丝状真菌和产孢微生 物常用点种接种方法。 2.微生物培养温度一般在37℃的是( )。 A.细菌 B.真菌 C.人体微生物 D.食用菌 【答案】C 【解析】细菌一般在30℃下培养，真菌一般在28 ℃下培养，人体微生物培养温度一 般在37℃。 3.工业生产中往往为了避免杂菌污染，常选育耐高温菌种，培养温度常在（ ）左右。 A．37 ℃ B．40 ℃ C．45 ℃ D．60 ℃ 【答案】B 【解析】工业生产中往往为了避免杂菌污染，常选育耐高温菌种，培养温度常在40 ℃左右。 4.平板技术培养真菌需要培养( )时间 。 A.24 h B.1～2 d C.2～3 d D.3～4 d 【答案】C 【解析】真菌生长速度慢于细菌，平板培养真菌需要2～3天才能长出明显菌落方便观察计数，因此本题选择C。 5.农业微生物培养完成收集后保藏温度一般是（ ）。 A.0 ℃ B.4 ℃ C.6 ℃ D.10 ℃ 【答案】B 【解析】待培养的微生物培养一定时间，菌落或菌苔丰厚，应该及时收集起来，4 ℃保藏，以免出现老化现象。 6. 摇瓶培养技术中,真菌为（ ），200～300 r/min振荡培养。 A.28℃ B.30℃ C.32 D.35 ℃ 【答案】A 【解析】摇瓶培养技术振荡培养及收获：细菌一般在30℃，380～480 r/min振荡，培养24～48 h；真菌为28℃，200～300 r/min振荡，培养48～72 h，就可以收获了。 7.固体基料培养技术中，基料接种时将基料灭菌后，再接入（ ）基料量的菌种。 A.5% B.10% C.20% D.30% 【答案】B 【解析】固体基料接种时，一般需要接入占基料量10%的菌种，保障菌体能够快速长满基料，减少杂菌污染的概率。 8.平板培养微生物技术操作顺序是 ( )。 A.斜面菌种 → 接种 → 活化 → 培养 → 收获 B.斜面菌种 → 接种 → 培养 → 活化 → 收获 C.斜面菌种 → 活化 → 接种 → 培养 → 收获 D.斜面菌种 → 活化 → 培养 → 接种 → 收获 【答案】C 【解析】平板培养技术路线：斜面菌种—→活化—→平板接种—→培养—→收获 9.下列有关摇瓶培养技术的注意事项叙述不正确的是（ ）。 A.细菌和单细胞微生物的菌悬液浓度要求必须大于108,最好1010 B.产孢微生物的孢子液浓度要求必须大于106,最好108 C.对于以菌丝为主的种子,取生长旺盛的种子，按1:20体积分数进行接种 D.培养时一定注意防止杂菌污染，保证培养环境洁净 【答案】A 【解析】细菌和单细胞微生物的菌悬液浓度要求必须大于106，最好108，因此A选项错误，其余选项表述均正确。 10.固体基料培养中，固体基料发酵的温度控制以（ ）温度为准。 A.基料中心 B.基料表层 C.环境 D.瓶壁 【答案】B 【解析】固体基料发酵的温度控制以基料表层温度为准。 11.发酵罐液体深层培养技术整个培养过程都要维持发酵罐的罐内正压， 一般为（ ） MPa。 A.0.01 B.0.05 C.0.1 D.0.5 【答案】B 【解析】整个培养过程都要维持发酵罐的罐内正压，一般为0.05 MPa，这样可以避免外界空气携带杂菌进入发酵罐，保障培养过程的无菌环境。 12.采用斜面冰箱(4℃)保藏霉菌，保存有效时间为（ ）。 A.1个月 B.2～8个月 C.3个月 D.6个月 【答案】D 【解析】斜面冰箱保藏是一种简单常用的菌种短期保藏方法，对于霉菌来说，采用该方法保藏时，保存有效时间一般为6个月，到期后需要及时转接新的斜面继续保藏，避免菌种老化死亡。 13.能适用于病毒的保藏方法是（ ）。 A.斜面室温保藏 B.冷冻干燥保藏 C.固体曲 D.载体保藏法 【答案】B 【解析】病毒没有完整的细胞结构，必须寄生在活细胞中才能存活，斜面室温保藏一般用于有活性培养物的短期保存，并不适合病毒保藏；固体曲保藏主要用于能产生大量孢子的真菌保藏；载体保藏法更适用于产芽孢的细菌、产孢子真菌等；冷冻干燥保藏可以在低温真空干燥环境下长期维持病毒的结构活性，因此适合病毒保藏。 14.固体曲保藏菌种的方法主要适用于（ ）。 A.产生大量孢子的霉菌 B.各类微生物 C.芽孢杆菌 D.放线菌 【答案】A 【解析】 保藏方法 适用范围 保存有效时间 固体曲 产大量孢子的霉菌 低温1～数年 15.微生物保藏方法中保存有效时间最长的是（ ）。 A.斜面室温保藏 B.液氮保藏法 C.砂土管保藏 D.载体保藏法 【答案】B 【解析】液氮保藏法可以将微生物置于-196℃的超低温环境中，使微生物的代谢活动完全停止，极大程度避免了微生物发生变异或老化，是目前微生物保藏方法中保存有效时间最长的方法。 二、多项选择题（本大题共4小题，每题3分，共12分） 16.平板培养（ ）常用点种接种方法。 A.丝状真菌 B.细菌 C.产孢微生物 D.单细胞微生物 【答案】AC 【解析】细菌和单细胞微生物的平板接种常使用划线和涂布的方法，而丝状真菌和产孢微生 物常用点种接种方法。 17.固体基料培养技术中，基料可以是（　 　）。 A.麸皮 B.锯末 C.马铃薯块 D.蔗糖 【答案】ABC 【解析】基料指为培养微生物而配制的特定固体基质，如麸皮、锯末、马铃薯块、 玉米粒、固体曲。 18.发酵罐液体深层培养技术中，发酵与控制过程中正确的操作有（ ） A.增加温度 B.控pH C.减少通气量 D.控转速 【答案】BD 【解析】发酵罐液体深层培养技术在发酵过程中，要进行控温、控pH、控通气量、控转速、中间补料及消泡等操作，及时检测生物量、残糖量、粗蛋白含量等指标。 19.微生物菌种保藏的条件是（ ） A.低温 B.高温 C.干燥 D.缺氧 【答案】ACD 【解析】菌种保藏的基本依据是根据微生物的生理生化特点，人工制造环境条件，使微生物处于代谢不活泼、生长繁殖受抑制的休眠状态，即采取低温、干燥、缺氧等条件，使菌种暂时处于休眠状态。 三、填空题（本大题共12个空，每空2分，共24分） 20.固体培养基灭菌后倒入无菌培养皿中凝固之后制成 。 【答案】平板 21.固体基料培养技术中，基料接种时先将基料加热灭菌消毒，加热的温度为 ℃,时间是 。 【答案】100 30 min 22.一般情况下，细菌平板培养一般在 ℃下，培养 小时左右能长出可见菌落。 【答案】30 24 23. 农业微生物培养时一定注意 ，保证培养环境洁净。 【答案】防止杂菌污染 24.发酵罐接种一般在 保护下接种，接种量一般为10%,种子要求处于对数期或 。 【答案】火环 快速生长期 25.菌种保藏的基本依据是根据微生物的生理生化特点，人工制造环境条件，使微生物处于代谢不活泼、生长繁殖受抑制的 。 【答案】休眠状态 26.只适用于对芽孢杆菌、产孢子的霉菌、放线菌的保藏方法是 。 【答案】砂土管保藏 27.菌种保藏，包含两方面的内容： 一是 ，即保持其存活和不受污染； 二是 ，使其在相当长时期内维持稳定的遗传潜力，两者缺一不可。 【答案】菌种的保持 菌种的贮存 四、分析说明题（本大题共3小题，共34分） 28.根据自己所学知识，简述摇瓶培养技术技术路线和操作步骤。 （12分） 【答案】（1）技术路线 斜面菌种→活化→摇瓶接种→振荡培养→收获 （2）操作步骤 ①菌种活化：将待保藏的菌种接种于培养基上培养(细菌30℃,真菌28 ℃),随时观察，待试管斜面长成。 ②摇瓶接种: 一般500 mL三角瓶，装液体培养基100 mL，接种量一般为10%。 ③振荡培养及收获：细菌一般在30℃，380～480 r/min振荡，培养24～48 h；真菌为28℃，200～300 r/min振荡，培养48～72 h，就可以收获了。 29. 微生物保藏包含的内容有哪些？菌种保藏的基本依据是什么？（10分） 【答案】菌种保藏，包含两方面的内容： 一是菌种的保持，即保持其存活和不受污染；二是菌种的贮存，使其在相当长时期内维持稳定的遗传潜力，两者缺一不可。 菌种保藏的基本依据是根据微生物的生理生化特点，人工制造环境条件，使微生物处于 代谢不活泼、生长繁殖受抑制的休眠状态，即采取低温、干燥、缺氧等条件，使菌种暂时处于 休眠状态。 30.根据自己所学知识，简述发酵罐液体深层培养技术的技术路线与注意事项。（12分） 【答案】(1)（1）技术路线 斜面菌种→活化→摇瓶种子培养→发酵罐接种→发酵与控制→放罐→收获 (2)注意事项 ①接种时，应注意保持罐压在0.05MPa，停止搅拌，接种要快、准、稳。 ②整个培养过程，都要维持发酵罐的罐内正压，一般为0.05 MPa。 ③培养过程要注意防止染菌，及时取样检查和测定各项指标，保证发酵正常进行。 ④发酵与控制 在发酵过程中，要进行控温、控pH、控通气量、控转速、中间补料及消泡等操作，及时检测生物量、残糖量、粗蛋白含量等指标。 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $