河南南阳市镇平县第一高级中学2025-2026学年高二下学期期中考试仿真模拟生物试题

**基本信息** 这份高二春期中生物模拟卷以传统发酵（如酱油制作）、现代生物技术（如T-DM1抗癌药、克隆猴）和文化素材（如苏轼诗句）为情境，覆盖微生物培养、基因工程等核心知识，通过基础判断与实验分析题，考查生命观念和科学思维。 **题型特征** |题型|题量|知识覆盖|命题特色| |----|----|----------|----------| |单选题|25|传统发酵（白酒生产）、细胞工程（iPS细胞）、分子生物学（糖类功能）|结合咖啡醋醋酸菌分离等实验情境，考查科学思维| |解答题|5|胰岛素合成（蛋白质加工）、微生物发酵（嗜盐菌培养）、基因工程（载体构建）|以三父母男婴、干细胞治疗等前沿科技为背景，突出探究实践能力|

高二年级春期中考试仿真模拟 生物试题 一、单选题 1.关于白酒、啤酒和果酒的生产，下列叙述错误的是（　　） A．在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气 B．白酒、啤酒和果酒酿制的过程也是微生物生长繁殖的过程 C．葡萄糖转化为乙醇所需的酶既存在于细胞质基质，也存在于线粒体 D．生产白酒、啤酒和果酒的原材料不同，但发酵过程中起主要作用的都是酵母菌 2.下列关于微生物的培养与计数的描述正确的是（    ） ①分离分解尿素的细菌要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基 ②对微生物计数可以使用平板划线法和稀释涂布平板法接种微生物 ③纤维素分解菌鉴定时，在培养基中加入酚红指示剂，如果指示剂变红则能初步鉴定 ④在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别较大，则需重新进行实验 ⑤进行微生物培养时要每隔24h统计一次菌落的数目 ⑥获得菌落数目为30~300的平板就说明实验操作成功 A．①④⑤ B．②③⑥ C．②④⑤ D．③⑤⑥ 3.科研人员为了从自然发酵的咖啡醋中分离出产醋酸能力较强的醋酸菌，进行了如图所示的实验，其中N培养基中含有碳酸钙，致使培养基不透明，醋酸菌产生的醋酸能溶解培养基中的碳酸钙。下列相关叙述正确的是（    ） A．过程①②需要采用平板划线法或稀释涂布平板法接种 B．M培养基中除了不含碳酸钙，其余成分与N培养基相同 C．进行高产菌种鉴定时，应挑选周围有较大透明圈的单菌落 D．实验过程中，所用的器材、培养基等都需要进行湿热灭菌 4.传统的酱油制作工艺采用面粉、黄豆做成酱饼，通过蒸熟、发酵、摊晒，然后将酱饼捣碎和盐汤盛入缸中，主要利用黑曲霉发酵，经5—6个月日晒夜露，不断搅动着酱缸里的酱，进行“捣缸”，待酱料完全熟化，再进行压榨过滤。下列说法错误的是（    ） A．“蒸熟”使大豆蛋白质变性，并杀灭附着在原料上的微生物 B．加盐的目的主要是赋予酱油一定的咸味 C．“捣缸”的目的是通风降温，混合均匀，以利于黑曲霉正常生长繁殖 D．黑曲霉产生的蛋白水解酶等多种酶可水解原料中的蛋白质，增加酱油的鲜味 5.草莓营养价值高，被誉为“水果皇后”，我国栽培的草莓品种很多。下图为利用现代生物技术改良草莓品系的设想示意图，相关叙述错误的是（    ）    A．过程1能克服远源杂交不亲和的障碍，定向改变生物的遗传性状 B．过程Ⅱ一般用聚乙二醇诱导细胞融合，得到的细胞属于愈伤组织细胞 C．凤梨味草莓植株的培育过程利用了细胞膜的流动性，体现了细胞的全能性 D．杂种细胞A再生出细胞壁的过程，主要与高尔基体的活动有关 6.人参皂苷是人参的次级代谢产物，具有增强免疫力、改善心血管功能、抗氧化、抗肿瘤等功能。如图为利用植物细胞培养技术工业化生产人参皂苷的流程。下列相关叙述正确的是（    ） A．过程①不需要光照，细胞不发生基因的选择性表达 B．可利用培养的动物癌细胞来检测人参皂苷的抗癌活性 C．人参皂苷属于次级代谢产物，为人参生命活动所必需 D．过程②利用了细胞分裂的原理，体现了细胞的全能性 7.科学家将4个关键基因移植入已分化的肌肉细胞中并表达，使这个细胞成为多能干细胞（iPS细胞）。下图为该实验示意图。下列有关叙述正确的是（　　）    A．应用该技术可大大降低免疫排斥反应，提高器官移植的成功率 B．iPS细胞所携带的遗传信息与肌肉细胞相同 C．关键基因表达使细胞功能趋向专门化，降低了细胞的分化程度 D．图示过程体现了iPS细胞的全能性 8.治疗最凶险乳腺癌“HER2+”的抗体-药物偶联物（T-DM1）被纳入2023年医保目录名单。T-DM1是由曲妥珠单抗、细胞毒性药物DM1偶联形成。T-DM1作用机制如下图，下列有关叙述正确的是（　　）    A．经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞不可直接生产单克隆抗体 B．T-DM1中的抗体主要是发挥治疗效应，杀伤靶细胞 C．T-DM1通过主动运输进入癌细胞 D．曲妥珠单抗制备中可选择DM1作为抗原刺激小鼠产生免疫应答 9.双抗指的是一个抗体可以和两个不同抗原或一个抗原的两个不同表位发生特异性结合。需要人工制备两种单克隆抗体并在体外解偶联后重新偶联制备。最新研究发现春花碱有良好的抗肿瘤效果。下图为人工制备双抗的过程，图右下角为某双抗发挥作用图示。下列叙述错误的是（    ） A．第一次筛选后的细胞进行克隆化培养，传代培养过程中会发生贴壁和接触抑制 B．第二次筛选是为了确定分泌抗体的特异性，可以通过抗原抗体杂交的方式检验 C．该方法制备的二抗与传统的抗体-药物偶联物相比特异性相似 D．将上述过程中春花碱换成荧光蛋白，可能会有助于辅助临床诊断 10.我国科学家突破重重困难，重复多次下图操作过程，获得了两只克隆猴——“中中”和“华华”，率先将体细胞核移植技术成功地应用于非人灵长类动物的克隆。下列有关说法正确的是（　　） A．灭活病毒处理是为了促进体细胞核膜与卵母细胞的细胞膜融合 B．重构胚的培养需要一定浓度CO2、适宜的温度和pH等条件 C．用胎猴的体细胞进行克隆的成功率显著低于成年猴的体细胞 D．克隆猴“中中”和“华华”的遗传物质和性状表现完全相同 11.下表细胞工程技术应用中各组所选择的实验材料及材料特点与实验目的匹配错误的是（    ） 组别 实验目的 实验材料 材料特点 1 克隆高产奶牛 次级卵母细胞与体细胞 次级卵母细胞去核留质 2 培育脱毒草莓 茎尖 分裂能力强，易诱发突变 3 培育西红柿-马铃薯超级杂种 花粉粒 易于获取，易于组织培养 4 烧伤患者皮肤细胞移植 自体皮肤生发层细胞 分裂能力强，且不会引起免疫排斥 A．1和2 B．2和3 C．3和4 D．1和4 12.如图Ⅰ、Ⅱ表示获得胚胎干细胞的两条途径，下列相关叙述不正确的是    （    ）    A．胚胎干细胞在体外培养的条件下，可以增殖不发生分化 B．图中早期胚胎一般是指发育到囊胚时期的胚胎 C．过程Ⅰ、Ⅱ获取早期胚胎过程均属于有性生殖范畴 D．过程Ⅱ获得的早期胚胎在培养液中添加分化诱导因子后可进行分化 13.我国科学家利用猴胚胎干细胞首次创造了人工“猴胚胎”。研究流程如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A．睾丸中的精原干细胞也属于胚胎干细胞 B．③处的细胞将来可发育成胎儿的各种组织 C．需要在充满CO2的培养箱中培养胚胎干细胞 D．人工“猴胚胎”的遗传特性与代孕受体保持一致 14.实时荧光RT—PCR可用于RNA病毒的核酸检测，其原理是：在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合，探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团，新链延伸过程中，DNA聚合酶会破坏探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT=PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法错误的是（　　）    A．做RT—PCR之前，需要先根据cDNA的核苷酸序列合成引物和探针 B．RNA不能作为PCR扩增的模板，故需要将样本中的RNA逆转录为DNA后再进行扩增 C．若有强烈荧光信号发出，说明被检测者没有感染病毒 D．病毒的检测还可以检测病毒的蛋白类物质或病毒引发产生的抗体，其原理都是抗原—抗体杂交 15.OsCLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶，研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽（引导合成的蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如下图所示），利用农杆菌转化法转化水稻，在水稻叶绿体内构建了一条新代谢途径，提高了水稻的产量。下列叙述正确的是（    ）    A．四个基因转录时都以DNA的同一条单链为模板 B．四个基因都在水稻叶绿体内进行转录翻译 C．可用抗原－抗体杂交技术检测四种酶在转基因水稻中的表达量 D．应选用含卡那霉素的培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞 16.自然界中很少出现蓝色的花，天然蓝色花产生的主要原因是花瓣细胞液泡中花青素在碱性条件下显蓝色。我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因（idgS）及其激活基因（sfp）构建基因表达载体（如下图），通过农杆菌转化法导入白玫瑰中，在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝。 下列相关叙述错误的是（    ） A．上述获得蓝色玫瑰的方案中无需转入能调控液泡pH的基因 B．将sfp基因插入Ti质粒时使用的限制酶是PmeI和BamHI C．sfp和idgS基因具有各自的启动子，表达是相互独立进行的 D．农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上 17.融合 PCR 技术采用具有互补末端的引物，形成具有重叠链的PCR 产物，通过 PCR产物重 叠链的延伸，从而将不同来源的任意 DNA片段连接起来。其原理如图所示，据图分析不正确的是（    ） A．上述过程中使用的引物 P2 和 P3 的碱基需要部分互补配对 B．设计引物的目的是能够从其 3'端开始连接脱氧核苷酸 C．融合 PCR 的第一步两条链重叠部位可互为另一条链的引物 D．若融合 PCR 的第二步获得 128个融合基因，理论上该过程消耗了256个引物 18.《齐民要术》中指出“谷田必须岁易”，农谚有云“谷连谷，坐着哭”，均指在同一块土地上连续多年只种谷子，其产量会逐年下降。下列相关叙述错误的是（    ） A．谷子在生长期间从环境中吸收的C、H、O、N较多 B．不同的农作物对土壤矿质元素的需求是有差异的 C．“谷连谷，坐着哭”可能与土壤缺乏某些矿质元素有关 D．谷子秸秆充分晒干后，其体内剩余的物质主要是无机盐 19.糖类在生命活动中起着重要的作用，可参与生物体内多种生命活动。下列相关叙述正确的是（    ） A．多糖都是由许多葡萄糖连接而成，都是生命活动的能源物质 B．细胞膜上糖类与蛋白质、脂质结合形成的糖被参与细胞间的识别 C．细胞内的核糖、脱氧核糖只参与遗传物质的形成，不能作能源物质 D．二糖不一定是还原糖，但二糖的水解产物可与斐林试剂发生反应 20.下面四幅图表示生物体内四种化合物，下列叙述错误的是（　　） A．图丙的元素组成一定与图甲相同，图甲中碱基排列顺序表示遗传信息 B．人体中由乙组成的大分子化合物的功能多样性与其结构多样性相适应 C．组成丙化合物的单糖是核糖，不可作为细胞的能源物质 D．图丁表示二糖，推测在动物体细胞中所有的单糖、二糖和多糖均可相互转化 21.细胞中的某些蛋白质分子可以识别正在合成的多肽或部分折叠的多肽并与多肽的某些部位相结合，从而帮助这些多肽转运、折叠或组装，这一类分子本身并不参与最终产物的形成，因此称为分子伴侣。以下相关叙述错误的是（    ） A．构成分子伴侣的单体是氨基酸，氨基酸都含有C、H、O、N、S元素 B．细胞质基质、内质网可能有分子伴侣的分布 C．分子伴侣对靶蛋白没有高度的专一性 D．分子伴侣可能通过改变自身的空间构象来发挥作用 22.小鼠颌下腺中存在一种表皮生长因子EGF，它是由52个氨基酸组成的单链，其中含有6个二硫键（形成一个二硫键会脱去2个H）。EGF与靶细胞表面的受体结合后，激发了细胞内的信号传递过程，从而促进了细胞增殖。下列说法不正确的是（    ） A．指导EGF合成的基因至少含有312个脱氧核苷酸 B．在氨基酸形成EGF 的过程中，相对分子量减少了 930 C．EGF和高温处理后变性的EGF都能与双缩脲试剂产生紫色反应 D．EGF能促进细胞增殖是因为EGF能进入细胞内发挥调节作用 23.苏轼诗句“小饼如嚼月，中有酥和饴”中，“酥”是酥油，“饴”主要是麦芽糖。下列相关叙述正确的是（    ） A．用显微镜观察苏丹Ⅲ染色后的“小饼”切片，可见细胞中橘黄色脂肪颗粒 B．鉴定“饴”是否含有还原糖，可将其溶解后滴加斐林试剂并水浴加热处理 C．人体细胞直接吸收麦芽糖后可以用于合成多糖，也可以转变成脂肪 D．糖类是细胞的重要能源物质，多食“小饼”等高含糖与脂质的食品有益健康 24.由1分子磷酸、1分子碱基和1分子化合物a构成了化合物b，如图所示，下列叙述正确的是（    ） A．若m为腺嘌呤，则b肯定为腺嘌呤脱氧核苷酸 B．在噬菌体、大肠杆菌体内b均为4种 C．豌豆的遗传物质彻底水解后得到的a一定是脱氧核糖 D．若a为核糖，则由b构成的核酸完全水解，得到的化合物最多有8种 25.青蒿素是从黄花蒿茎叶中提取的无色针状晶体，可用有机溶剂（如无水乙醇）进行提取，其抗疟机理主要在于其活化产生的自由基可攻击疟原虫（单细胞、寄生性的原生动物）的生物膜结构。以下说法错误的是（    ） A．一株黄花蒿的结构层次是：细胞→组织→器官→系统→植物体 B．黄花蒿细胞和疟原虫细胞都含有容易被甲紫溶液染成深色的染色质 C．青蒿素活化产生的自由基可以破坏疟原虫细胞的完整性 D．青蒿素可能属于脂溶性物质 二、解答题 26.胰岛素的合成、加工过程简图如下，①②表示相应过程。回答下列问题： 注：—SH＋—SH→—S—S—＋2H，数字表示氨基酸序号。 （1）图中“基本组成单位”的结构通式为_______。过程①首先发生在_______（填细胞器）中，该过程中会形成_______（填化学键名称）。 （2）若C肽中含35个氨基酸，则合成胰岛素原时，共需要_______个氨基酸。经过程①后，相对分子质量比原先减少了_______。 （3）胰岛素原被内质网膜鼓出形成的_______包裹着，到达高尔基体后进行过程②。过程②需要消耗_______个水分子。加工过程所需能量主要由_______提供。由内质网膜、高尔基体膜等细胞器膜及细胞膜和核膜共同构成的在细胞的生命活动中具有重要作用，例如为多种_______提供附着位点。 （4）某兴趣小组欲通过实验验证胰岛素的化学本质是蛋白质，可取两支试管，向其中一支试管中加入2mL胰岛素溶液，另一支试管中加入_______；再向试管中加入等量双缩脲试剂，摇匀后观察试管中颜色变化。预期实验结果为_______。 27.中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌 H ，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产 PHA 等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的 整体利用价值，工艺流程如图1。回答下列问题： （1）为提高菌株 H对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在培养基中将蔗糖作为____，并不断提高其浓度，经多次传代培养（指培养一段时间后，将部分培 养物转入新配的培养基中继续培养）以获得目标菌株。使用培养基按物理性质分类，属于____培养基。 （2）培养过程中宜采用____法对样品中的活菌进行接种和计数，以评估菌株增殖状况。若某次取样中，对菌液稀释了 105倍后，在每个平板上涂布菌液的体积为0.1ml ，平板上 的平均菌落数为 220个，则菌液中H菌的细胞数为____个/L。菌落数目需要每隔一段时间统计一次，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样做的目的是____。 （3）发酵装置中搅拌器的作用有____。 （4）基于菌株 H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为 60g/L，pH为 10，菌株 H可正常持续发酵 60d 以上。分析该系统不需要灭菌的原因是____。 （5）菌株 H还能通过分解餐厨垃圾 （主要含蛋白质、淀粉、油脂等）来生产PHA，研究小组为筛选能高效分解厨余垃圾的微生物进行了相关实验，配制培养基时，各种 成分溶化装瓶后要进行____（灭菌方式）；待平板凝固后，进行平板划线和纯培养，本实验中还需设置不接菌的空白对照， 目的是____。下图2中菌株____最宜作为目标菌株进行发酵生产，原因是____。 （6）研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH条件下发酵，结果发现 发酵液中菌株 H细胞增殖和 PHA 产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条 件中，限制高密度培养的可能因素是____。 28.美国新希望生殖医学中心张进团队于2016年10月19日在美国生殖医学学会会议上正式宣布，世界首个细胞核移植“三父母”男婴已于2016年4月诞生。下图是该男婴的培育过程示意图，请据图回答问题： （1）上述“三亲婴儿”的核DNA由_____提供，质DNA由_____提供。由此可见，“三亲婴儿”的意义在于可以避免子代_____（填“细胞核或细胞质”）遗传病的发生。 （2）为获取更多的卵细胞，需要对女性注射_____激素。过程③的体外进行时需要对精子进行_____处理。 （3）过程④是_____，需将受精卵移入发育培养液继续培养。以检查受精状况和受精卵的发育能力。 （4）过程⑤是_____技术，取_____ 的滋养层细胞可以对移植前的胚胎进行性别鉴定可采用的鉴定方法是_____法。 29.帕金森病是一种常见的神经系统退行性疾病。科学研究证实，干细胞在治疗帕金森领域有很大潜力。通过干细胞再生，移植到患者体内，补充缺失或缺损的神经细胞，有望从根本上治疗帕金森。 （1）胚胎干细胞存在于早期胚胎，通过体外受精、体外培养获得早期胚胎。 ①精子获得受精能力的生理现象称为_________。常以观察到________作为受精的标志。 ②可以从受精卵培养得到的________等早期胚胎中获得胚胎干细胞。 （2）从早期胚胎中获得人胚胎干细胞存在伦理问题。研究人员把病人的体细胞通过体外诱导，获得类似胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞（简称iPS）。这不仅解决了伦理问题，也避免了异体移植导致的_________问题。 （3）人iPS经体外培养诱导出神经干细胞的过程如图： ①悬浮培养的细胞因为________而停止分裂。贴壁培养的细胞需要用_________处理使之分散成单个细胞，再进行传代培养。 ②研究者在培养基中加入小分子化合物A8301和DMH1，这两种物质能够促进神经干细胞的形成，据图分析最可能的原因是A8301和DMH1能______（促进/抑制）TGF-β和BMP信号通路，使类胚体分化为外胚层进而分化成神经干细胞。 30.白细胞表面抗原 2（SLA-2）在抗原呈递、机体器官移植以及免疫应答方面有着重要作用。 为进一步研究 SLA-2的结构与功能，科研人员以能稳定传代的猪肾上皮细胞为材料，构建了 稳定高表达 SLA-2基因的细胞株，过程如图。其中， AmpT 表示氨苄西林抗性基因， Puror为嘌呤霉素抗性基因， BclI  、 NotI 、XbaI 、Sau3AI  为限制酶酶切位点， 括号内数值表示距复制原点的长度。请回答下列问题。 （1）过程①需要的酶有____；为使获得的 SLA-2基因与质粒1定向连接，扩增时应选用的 1 对引物为____。 （2）过程② 为酶切、连接后的重组质粒转化处于感受态的大肠杆菌，转化后采用含____的平板筛选。 （3）为鉴定与验证重组质粒 3 ，研究人员用 NotI 和Sau3AI 完全酶切质粒 2和重组质粒 3后电 泳并比较。请在图1中相应位置画出重组质粒 3 可能得到的电泳条带____。 （4）研究中，一般利用最小致死浓度（使某种细胞全部死亡的最小浓度）的嘌呤霉素溶液浸染细胞以筛选出转化的猪肾上皮细胞。为确定最小致死浓度，科研人员利用未转化的猪肾上皮细胞进行了相关实验，结果如图2。根据结果，应使用浓度为____的嘌呤霉素溶液浸染，理由是____。 试卷第1页，共3页 试卷第1页，共3页 学科网（北京）股份有限公司 《高二年级春期中考试仿真模拟 生物试题》参考答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 C A C B B B A A A B 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 B C B C C B D D D D 题号 21 22 23 24 25 答案 A D B C A 1．C 【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。 【详解】A、在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气，让酵母菌大量繁殖，再进行酒精发酵，A正确； B、白酒、啤酒和果酒酿制的过程也是微生物生长繁殖的过程，如发酵初期酵母菌大量繁殖，B正确； CD、酒精发酵利用的菌种是酵母菌，葡萄糖转化为乙醇所需的酶存在于细胞质基质，不存在线粒体中，C错误，D正确。 故选C。 2．A 【分析】稀释涂布平板法：稀释涂布平板法除了可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测样品大约含有多少活菌。 【详解】①分离分解尿素的细菌，要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，进行筛选，①正确； ②对微生物计数可以使用稀释涂布平板法接种微生物，平板划线法无法计数，②错误； ③纤维素分解菌鉴定时，在培养基中加入刚果红染色剂，而不是酚红指示剂，③错误； ④在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别较大，则说明实验结果有误，需重新进行实验，④正确； ⑤进行微生物培养时要每隔24h统计一次菌落的数目，以确定培养情况，⑤正确； ⑥获得2个或2个以上菌落数目为30-300的平板，才说明实验操作成功，⑥错误； 综上所述，A正确，BCD错误。 故选A。 3．C 【分析】1、培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 2.微生物常见的接种方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、平板划线法或稀释涂布平板法是向固体培养基上接种的常用方法，但液体培养基不采用这两种方法，A错误； B、M培养基是用于扩大培养的液体培养基，N培养基是用于获得单菌落的固体培养基，因此M培养基中不含凝固剂，N培养基中含凝固剂，B错误； C、进行高产菌种鉴定时，产醋酸能力较强的醋酸菌会将周围培养基中的碳酸钙分解，进而出现透明圈，透明圈越大，初步说明产醋酸能力越强，C正确； D、接种工具如接种环一般采用灼烧灭菌，D错误。 故选C。 4．B 【解析】本题考查传统发酵技术，黑曲霉是一种好氧菌，因此发酵过程中需要提供氧气；发酵前要对材料进行灭菌处理，通过“蒸熟”达到目的；发酵过程中注意氧气供应，黑曲霉产生的蛋白水解酶等多种酶可水解原料中的蛋白质等物质。 【详解】A、“蒸熟”使大豆蛋白质变性，有利于后期发酵，同时起到杀灭附着在原料上的微生物的作用，A正确； B、加盐起到抑制某些腐生微生物的活动，同时赋予酱油一定的咸味的作用，B错误； C、黑曲霉是一种好氧菌，“捣缸”的目的是通风供氧，降低温度，混合均匀，以利于黑曲霉正常生长繁殖，C正确； D、黑曲霉有复杂的酶系统，主要是蛋白水解酶等，多种酶可水解原料中的蛋白质，增加酱油的鲜味，D正确。 故选B。 5．B 【分析】过程Ⅰ是利用基因工程技术把胰岛素基因导入绿色草莓细胞，胰岛素基因得到了表达，产生了产胰岛素的草莓，定向改变了草莓的性状。过程Ⅱ利用植物细胞融合技术获得了具有凤梨味的绿草莓。 【详解】A、过程Ⅰ利用基因工程技术，使导入了胰岛素基因的草莓产生了胰岛素，克服远源杂交不亲和的障碍，能定向改变生物的遗传性状，A正确； B、在进行体细胞杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体，再用聚乙二醇作为化学诱导剂来诱导原生质体的融合，得到的细胞需经过脱分化才属于愈伤组织细胞，B错误； C、凤梨风味绿草莓植株培育的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，培育出完整植株体现了细胞的全能性，C正确； D、杂种细胞A形成的标志是再生出细胞壁，该过程涉及的细胞器主要是高尔基体，D正确。 故选B。 6．B 【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。 【详解】A、过程①为脱分化，不需要光照，细胞发生基因的选择性表达，A错误； B、分析题意，人参皂苷具有抗肿瘤等功能，可利用培养的动物癌细胞来检测人参皂苷的抗癌活性，B正确； C、人参皂苷属于次级代谢产物，但不是人参基本生命活动所必需，C错误； D、细胞全能性是发育为完整植株或分化为其他各种细胞的能力，过程②利用细胞分裂的原理，但未体现细胞具有全能性，D错误。 故选B。 7．A 【分析】分析题图：图示表示将4个关键基因移植入已分化的体细胞中并表达，使这个细胞成为具有类似干细胞的诱导多能干细胞（iPS细胞）。图中形成其他类型细胞的过程表示细胞分化，其实质是基因的选择性表达。用该技术得到的新生器官替换供体病变器官，属于自体移植，不发生免疫排斥反应，这可以大大提高器官移植成功率。 【详解】A、用iPS细胞诱导分化成需要的器官后进行自体移植，没有免疫排斥反应，故提高了器官移植的成功率，A正确； B、iPS细胞中多了4个关键基因，故iPS细胞所带遗传信息与肌肉细胞不同，B错误； C、图中关键基因表达形成iPS细胞，没有使细胞功能趋向专门化，C错误； D、图示过程只是分化形成几种细胞，没有分化出各种细胞或者形成个体，故没有体现iPS细胞的全能性，D错误。 故选A。 8．A 【分析】由于单克隆抗体的特异性强，能特异性识别抗原，因此可以把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、药物等相结合，制成“生物导弹”。借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞。疗效高，副作用小，位置准确。 【详解】A、经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞（含有各种杂交瘤细胞）不可直接生产单克隆抗体，还需经过克隆化培养和抗体检测，A正确； B、T-DM1由曲妥珠单抗、细胞毒性药物DM1偶联生成，分析题图曲妥珠单抗可以与细胞膜表面的HER2+特异性结合，将DM1准确带至乳腺癌细胞，细胞毒性药物才能杀伤靶细胞，B错误； C、T-DM1（大分子）通过胞吞运输进入癌细胞，C错误； D、DM1是细胞毒性药物，不能与HER2+特异性结合，其免疫小鼠后产生的抗体也不能与HER2+特异性结合，所以不选择它作为制备单抗的抗原，D错误。 故选A。 9．A 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞，诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、第一次筛选后的细胞是杂交瘤细胞，具有肿瘤细胞的特征，故克隆化培养不会有接触抑制的现象，A错误； B、第二次筛选为了确定杂交瘤细胞产生的抗体是所需要的，利用抗原抗体特异性结合进行检验，B正确； C、图中的二抗识别肿瘤细胞只依赖一种抗原，传统ADC识别靶细胞也只依赖一种抗原，故特异性相似，C正确； D、将春花碱换成荧光蛋白，临床使用双抗与荧光蛋白即可指示肿瘤细胞位置，起到辅助诊断的效果，D正确。 选A。 10．B 【分析】克隆是用体细胞作为供体细胞进行的细胞核移植，它利用了胚胎细胞进行核移植的传统方式，没有经过雌雄交配，不需要精子和卵子的结合，只需要从动物身上提取一个细胞（供体细胞），从屠宰场的母畜的卵巢内采集卵母细胞，培养至减数第二次分裂的中期，然后显微操作去除卵母细胞的细胞核，将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中，使其重组构建一个重组细胞，并体外培养发育成一个新的胚胎，再将胚胎移植到雌性动物子宫内，就可以孕育出新的个体，“中中”和“华华”的获得就是利用了克隆技术。 【详解】A、灭活病毒处理是为了促进体细胞的细胞膜与卵母细胞的细胞膜融合，A错误； B、 动物组织培养需要一定浓度CO2、适宜的温度和pH等条件，B正确； C、用胎猴的体细胞进行克隆的成功率显著高于成年猴的体细胞，C错误； D、遗传物质相同的个体性状表现不一定完全相同，还受环境因素的影响，D错误。 故选B。 11．B 【分析】卵母细胞适于作为受体细胞，因为卵（母）细胞大，容易操作；卵（母）细胞质多，营养丰富；含有促使细胞全能性表达的物质。愈伤组织细胞分化程度低，全能性较高，细胞分裂能力强。花粉粒能用于单倍体育种，但不能用于植物体细胞杂交。 【详解】克隆动物用次级卵母细胞作为受体细胞，因为卵细胞大，营养丰富，且细胞质物质能有效调控核发育，1组正确；培育脱毒草莓时，应选用根尖或茎尖的材料，选材的原因是茎尖含病毒很少，甚至不含毒，但诱发突变不是选材的原因，2组错误；培育番茄—马铃薯超级杂种植株，应选用两种植物的体细胞，不能选用花粉粒，3组错误；烧伤患者的皮肤移植，可以选用自己的生发层细胞，分裂能力强，不会发生排斥反应，4组正确。 综上所述，2和3错误，B符合题意。 故选B。 12．C 【分析】分析题图：图中Ⅰ、Ⅱ表示获得胚胎干细胞的两条途径，其中Ⅰ表示体外受精，再从早期胚胎中获取胚胎干细胞；Ⅱ表示动物体细胞核移植，再从重组的早期胚胎中获取胚胎干细胞。 【详解】A、胚胎干细胞在体外培养的条件下，可以增殖不发生分化，A正确； B、图中早期胚胎一般是指发育到囊胚时期的胚胎，囊胚中的内细胞团细胞属于胚胎干细胞，B正确； C、过程Ⅰ获取早期胚胎的过程属于有性生殖范畴，而过程Ⅱ获取早期胚胎的过程不属于有性生殖范畴，C错误； D、过程Ⅱ获得的早期胚胎在培养液中添加分化诱导因子后可进行分化，D正确。 故选C。 13．B 【分析】胚胎干细胞具有全能性，利用猴胚胎干细胞首次创造了人工“猴胚胎”，是利用了胚胎干细胞的全能性。 【详解】A、由胚胎干细胞来自早期胚胎或早期原始性腺，精原干细胞不属于胚胎干细胞，A错误； B、③是内细胞团的细胞，具有发育全能性，可发育成胎儿各种组织，B正确； C、动物细胞培养和早期胚胎培养需要在95%空气和5%二氧化碳的环境中培养，C错误； D、人工“猴胚胎”的遗传特性与提供胚胎干细胞的供体基本一致，代孕受体提供营养，D错误。 故选B。 14．C 【分析】根据题意，通过病毒的RNA进行逆转录产生cDNA，cDNA在PCR过程中解旋后可以和引物一起与模板结合，探针两侧有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团，延伸过程DNA聚合酶破坏了探针使淬灭基团分离后发出荧光而检测到是否有cDNA来判断是否有病毒。 【详解】A、PCR需要根据cDNA 的核苷酸序列合成引物，同时RT-PCR还需要探针与待测样本 DNA 混合， 故需要根据cDNA的核苷酸序列合成探针，A正确； B、PCR扩增必须以DNA为模板，RNA不能作为PCR扩增的模板，所以需要将样本中的RNA反转录为DNA后再进行扩增，B正确； C、据图可知，探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团，新链延伸过程中，DNA聚合酶会破坏探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。若检测结果有强烈荧光信号发出，说明被检测者极有可能感染了病毒，C错误； D、RNA病毒的检测方法有：①RNA 检测，即检测病毒的遗传物质 RNA；②特异性抗原蛋白检测，即检测病毒表面的一种糖蛋白；③特异性抗体检测，即检测感染者体内通过免疫反应所产生的某种抗体。后两种方法的原理是抗原-抗体杂交，D正确。 故选C。 15．C 【分析】1、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 2.目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因－-DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质-－抗原－抗体杂交技术。 3.将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其插入植物细胞中染色体的DNA上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。 【详解】A、由题图可知，在同一个T-DNA中OsGLO1启动子启动转录的方向与其他三个基因的不同，四个基因转录时不都以DNA的同一条单链为模板，A错误； B、由题意知，利用农杆菌转化法转化水稻，可使目的基因插入水稻细胞中染色体的DNA上，所以与叶绿体转运肽基因连接的四个基因，在水稻细胞核内进行转录，在核糖体中进行翻译，B错误； C、可用抗原－抗体杂交技术检测四种酶在转基因水稻中的表达量，杂交带相对量越多，表明目的基因翻译成的蛋白质含量越高，C正确； D、卡那霉素抗性基因不在T-DNA中，而潮霉素抗性基因在T-DNA中，应选用含潮霉素的培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞，D错误。 故选C。 16．B 【分析】由图可知，将sfp基因插入Ti质粒时若使用的限制酶是PmeI和BamHI，则会将终止子一同切除，故只能用BamHI；将idgS基因插入Ti质粒时可用SpeI和SacI以避免产生的黏性末端环化，增加构建成功的概率。 【详解】A、靛蓝能够稳定显色，不受pH的影响，故本题方案中无需转入能调控液泡pH的基因，A正确； B、将sfp基因插入Ti质粒时若使用的限制酶是PmeI和BamHI，则会将终止子一同切除，故只能用BamHI，B错误； C、sfp和idgS基因具有各自的启动子，表达是相互独立进行的，C正确； D、将目的基因导入植物细胞可采用农杆菌转化法，故农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上，D正确。 故选B。 17．D 【分析】PCR的原理是DNA的半保留复制，需要经过变性、复性和延伸。 【详解】A、结合图示可知，引物 P2 和 P3 的碱基需要部分互补配对，融合PCR的第一步两条链重叠部位即互补配对，才能合成融合基因，A正确； B、引物为一段核苷酸，引物与DNA模板链结合后，能够从其3'端开始连接脱氧核苷酸，开始子链的合成，B正确； C、融合 PCR 的第一步两条链重叠部位可互为另一条链的引物，进而扩增出融合基因，C正确； D、若融合PCR的第二步获得了128个融合基因，引物数目和新合成的子链数目相同，即该过程消耗了128×2-2=254个引物，D错误。 故选D。 18．D 【分析】1、细胞中含量最多的四种元素为C、H、O、N，主要元素是C、H、O、N、P、S。不同作物细胞内元素种类大体相同，体现生物界的统一性，但元素含量相差较大，体现生物界的差异性。 2.细胞内含量最多的化合物是水，存在形式有自由水和结合水，自由水与细胞代谢强度有关，结合水与抗逆性有关。 【详解】A、C、H、O、N是细胞中含量最多的元素，因此谷子在生长期间从环境中吸收的C、H、O、N较多，A正确； B、不同的农作物细胞内元素的含量相差较大，因此对土壤矿质元素的需求是有差异的，B正确； C、“谷连谷，坐着哭”，均指在同一块土地上连续多年只种谷子，可能造成土壤中缺乏某种元素，导致其产量会逐年下降，C正确； D、谷子秸秆充分晒干后，自由水大量丢失，其体内剩余的物质主要是糖类和蛋白质等有机物，还有少量的结合水以及无机盐，D错误。 故选D。 19．D 【分析】根据水解情况，糖类包括单糖、二糖和多糖三种，糖类是主要的能源物质，也可以参与细胞间的信息交流和细胞的结构组成。 【详解】A、大多数多糖的基本组成单位是葡萄糖，如淀粉、纤维素、糖原，但纤维素不是能源物质，几丁质也是多糖，但其基本组成单位不是葡萄糖，A错误； B、细胞膜上的糖类与蛋白质、脂质结合分别形成糖蛋白、糖脂，这些糖类分子叫作糖被，B错误； C、细胞内的核糖、脱氧核糖可以参与遗传物质的形成，还可以参与其他物质的合成，如核糖参与ATP的合成，C错误； D、二糖有蔗糖、麦芽糖、乳糖等，其中蔗糖不是还原糖，但是二糖的水解产物均为单糖，具有还原性，可与斐林试剂发生反应，D正确。 故选D。 20．D 【分析】分析图示可知，甲为DNA片段，乙为氨基酸结构，丙为核糖核苷酸，丁为二糖。 【详解】A、图丙为核苷酸，其元素组成与图甲（DNA片段）相同，均为C、H、O、N、P，图甲中碱基排列顺序表示遗传信息，A正确； B、人体中由氨基酸（乙）组成的大分子化合物（蛋白质）的功能多样性与其结构多样性相适应，B正确； C、由图可知，组成丙化合物的单糖是核糖，核糖不作为能源物质，C正确； D、图丁表示二糖，动物体内的二糖是乳糖，多糖是糖原，单糖是葡萄糖、五碳糖，构成糖原的单糖是葡萄糖，所以在动物体细胞中不是所有的单糖、二糖和多糖均可相互转化，D错误。 故选D。 21．A 【分析】分子伴侣的化学本质是蛋白质，其基本单位是氨基酸。内质网能对多肽进行加工，故由“分子伴侣能识别正在合成的多肽或部分折叠的多肽”可推知“分子伴侣”主要存在于内质网。 【详解】A、构成分子伴侣的单体是氨基酸，但并非所有氨基酸都含有S元素，A错误； B、细胞质基质中存在游离核糖体合成的蛋白质，内质网参与分泌蛋白的加工，均可能需要分子伴侣协助折叠，细胞质基质、内质网可能有分子伴侣的分布，B正确； C、分子伴侣可识别多种多肽或部分折叠的蛋白质，说明其作用对象较广，不具有高度专一性，C正确； D、分子伴侣发挥作用时可能通过自身构象改变来结合不同靶蛋白，类似酶与底物结合时的诱导契合，D正确。 故选A。 22．D 【分析】蛋白质的基本单位是氨基酸，蛋白质是由基因控制合成，该过程的信使是mRNA。 【详解】A、每个氨基酸由3个碱基对（6个脱氧核苷酸）编码，52个氨基酸对应基因编码区至少含52×3×2=312个脱氧核苷酸，A正确； B、形成肽链脱去51个水（减少51×18=918），6个二硫键脱去12个H（减少12×1=12），总计减少930，B正确； C、双缩脲试剂检测肽键，高温变性不破坏肽键，故EGF和高温处理后变性的EGF都能与双缩脲试剂产生紫色反应，C正确； D、EGF通过结合细胞表面受体传递信号，无需进入细胞，D错误。 故选D。 23．B 【详解】A、 “小饼” 经过加工，已无细胞结构，不能观察到细胞中的脂肪滴，A 错误； B、斐林试剂能鉴定还原糖，将 “饴” 制成溶液后，滴加斐林试剂并水浴加热，若出现砖红色沉淀，说明 “饴” 含还原糖，B 正确； C、麦芽糖是植物二糖，人体细胞无麦芽糖且不能直接吸收麦芽糖，需水解为葡萄糖才能吸收，C 错误； D、糖类和脂肪是能源物质，但过多食用高糖高脂食品会引发高血压、高血糖等疾病，不利于健康，D 错误。 故选B。 24．C 【分析】据图分析可知，a是五碳糖，b是核苷酸，m是含氮碱基。核苷酸有8种，一分子核苷酸由 一分子磷酸、一分子五碳糖和一分子含氮碱基组成；五碳糖有脱氧核糖和核糖两种；含氮碱基有5种，A、T、C、G、U；构成DNA的核苷酸是脱氧核苷酸，有4种；构成RNA的核苷酸是核糖核苷酸，有4种。 【详解】A、若m为腺嘌呤，则b为腺嘌呤脱氧核苷酸或腺嘌呤核糖核苷酸，A错误； B、大肠杆菌体内含有DNA和RNA两种核酸，因此b核苷酸有8种，B错误； C、豌豆的遗传物质是DNA，DNA的基本单位是脱氧核苷酸，脱氧核苷酸含有的五碳糖（a）是脱氧核糖，C正确； D、若a为核糖，b为核糖核苷酸，其构成的核酸为RNA，RNA彻底水解得到的化合物有4种含氮碱基、磷酸、核糖，共6种，D错误。 故选C。 【点睛】 25．A 【分析】生物膜系统指的是真核细胞中叶绿体、线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体等的细胞器膜和核膜、细胞膜等膜结构共同构成细胞的生物膜系统，其中细胞膜是细胞的边界，能使细胞与外界环境分隔开，能控制物质进出，能与其他细胞进行信息交流。 【详解】A、黄花蒿属于植物，植物没有系统，因此一株黄花蒿的结构层次应为：细胞→组织→器官→植物体，A错误； B、黄花蒿细胞和疟原虫细胞都属于真核细胞，都含有容易被甲紫溶液染成深色的染色质，B正确； C、根据题干中“青蒿素抗疟机理主要在于其活化产生的自由基可与疟原蛋白结合，作用于疟原虫的膜结构，使其生物膜系统遭到破坏”可知，青蒿素可以裂解疟原虫，破坏疟原虫细胞的完整性，C正确； D、根据题干中“可用有机溶剂（如无水乙醇）进行提取”可知，青蒿素可能属于脂溶性物质，D正确。 故选A。 26．(1) 核糖体 肽键 (2) 86 1536 (3) 囊泡 2 线粒体 酶 （4） 2mL鸡蛋清稀释液 两支试管内溶液均发生紫色反应，说明胰岛素的化学本质是蛋白质 【分析】1、构成蛋白质的基本单位是氨基酸，每种氨基酸分子至少都含有一个氨基和一个羧基，且都有一个氨基和一个羧基连接在同一个碳原子上，这个碳原子还连接一个氢和一个R基，氨基酸的不同在于R基的不同。 2.氨基酸在核糖体中通过脱水缩合形成多肽链，而脱水缩合是指一个氨基酸分子的羧基和另一个氨基酸分子的氨基相连接，脱出一分子水后形成肽键将两个氨基酸连接起来的过程；氨基酸形成多肽过程中的相关计算：肽键数=脱去水分子数=氨基酸数一肽链数，蛋白质的相对分子质量=氨基酸数目×氨基酸平均相对分子质量一脱去水分子数×18。 3.分泌蛋白最初是在内质网上的核糖体中由氨基酸形成肽链，肽链进入内质网进行加工，形成有一定空间结构的蛋白质。内质网可以出芽，也就是鼓出由膜形成的囊泡，包裹着要运输的蛋白质，离开内质网，到达高尔基体，与高尔基体膜融合，囊泡膜成为高尔基体膜的一部分。高尔基体还能对蛋白质做进一步的修饰加工，然后形成包裹着蛋白质的囊泡。囊泡移动到细胞膜，与细胞膜融合，将蛋白质分泌到细胞外。 【详解】（1）图中“基本组成单位”为氨基酸，氨基酸的结构通式为，过程①为氨基酸脱水缩合形成胰岛素原，发生在核糖体中，该过程中会形成肽键将氨基酸连接起来。 （2）根据题图，胰岛素原通过②过程分解成由二硫键连接的A链和B链，以及一个C肽，A链含有21个氨基酸，B链含有30个氨基酸，若C肽中含35个氨基酸，则合成胰岛素原时，共需要21+30+35=86个氨基酸。经过程①后，脱去85个水分子，并形成3个二硫键，则相对分子质量比原先减少了85×18+2×3=1536。 （3）胰岛素原在内质网中形成二硫键（-S-S-）后，被内质网膜鼓出形成的囊泡包裹，会沿着细胞骨架到达高尔基体，进行过程②进一步加工，该过程有2个肽键断裂，则，需要消耗2个水分子，加工过程所需能量主要由线粒体提供。胰岛素的合成、加工和分泌过程体现了细胞器之间在结构和功能上具有密切联系。由内质网膜、高尔基体膜等细胞器膜及细胞膜和核膜共同构成的生物膜系统在细胞的生命活动中具有重要作用，例如为多种酶提供附着位点。 （4）本实验的原理是蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。可取两支试管，向其中一支试管中加入2mL胰岛素溶液，另一支试管中加入2mL鸡蛋清稀释液，再向试管中加入等量双缩脲试剂，摇匀后观察两支试管中溶液均发生紫色反应，则说明胰岛素的化学本质是蛋白质。 27.(1) 唯一碳源 液体 （2） 稀释涂布平板 2.2×1011 防止因培养时间不足，培养基上部分菌体还未形成肉眼 （3）增加培养液中的氧含量，使菌种和培养液混匀 （4）杂菌因失水过多而死亡，酶变性失活 （5） 湿热灭菌/高压蒸汽灭菌 排除杂菌污染等对实验结果的干扰 ② 菌落直径与透明圈直径比值最小 （6）氧气 【分析】1、在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质） 和无机盐； 2.统计菌落数目的方法： （1） 显微镜直接计数法:利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量； （2） 间接计数法（活菌计数法）：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 【详解】（1）为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，可以在培养基中将蔗糖作为唯一碳源。这样，只有能够利用蔗糖的菌株H才能在该培养基上生长和增殖。通过不断提高蔗糖的浓度，并经过多次传代培养，可以逐步筛选出对蔗糖耐受能力和利用效率更高的菌株H。此外，根据培养基的物理性质，该培养基属于液体培养基。 （2）稀释涂布平板法可以用于统计样品的活菌数目。菌液中H菌的细胞数=220÷0.1×105×103=2.2×1011（个/L），为了防止因培养时间不足，培养基上部分菌体还未形成肉眼可见的菌落（或防止因培养时间不足，导致遗漏菌落的数目），需要选取菌落数目稳定时作为结果，增加实验结果的可信度。 （3）发酵装置中搅拌器可增加培养液中的氧含量（或增加溶解氧或使空气和发酵液充分混合），使菌种和培养液混匀（或提高原料利用率）。 （4）由于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，因此当培养基盐浓度为60g/L，pH为10时，菌株H可正常持续发酵60d以上，而盐浓度太高，其他杂菌因不耐盐，失水过多而死亡；酶发挥作用需要温和的条件下，pH为10的条件下，其他杂菌的酶变性失活，生长繁殖受抑制，故该系统不需要灭菌。 （5）配制培养基时，为了杀死培养基中所有的微生物（包括芽孢和孢子等），保证培养基的无菌环境，各种成分溶化装瓶后要进行高压蒸汽灭菌（或湿热灭菌）。本实验中设置不接菌的空白对照，目的是判断培养基是否被杂菌污染，排除杂菌污染等对实验结果的干扰。在以淀粉为底物的培养基上，菌株②菌落直径与透明圈直径比值最小，意味着其分解淀粉能力最强，而餐厨垃圾含淀粉等成分，所以菌株②最宜作为目标菌株用于发酵生产 PHA。 （6）依据题意可知，扩大培养时营养物浓度、温度、 pH等条件适宜，而发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中氧气不足，使菌种进行无氧呼吸产生乙醇，即氧气（O2或溶解氧）是限制高密度培养的重要因素。 28.(1) 母亲甲和父亲丙 捐献者乙 细胞质 （2） 促性腺激素 获能 （3）早期胚胎培养 （4） 胚胎移植 囊胚期 DNA分析法或染色体鉴定法 【分析】1、分析图解：图中过程①表示将两个卵母细胞进行细胞核移植，过程②表示将重组卵母细胞培养到减数第二次分裂中期，过程③表示体外受精，④表示早期胚胎培养，⑤表示胚胎移植。因此根据图示可以得出，“三亲婴儿”的三亲分别为捐赠者乙（提供细胞质基因）、母亲甲（提供一半细胞核基因）、父亲丙（提供一半细胞核基因）。 2、表示动物细胞培养过程，该过程需要的条件有：①无菌、无毒的环境：消毒、灭菌；添加一定量的抗生素；定期更换培养液，以清除代谢废物。②营养物质。③适宜的温度和pH。④一定的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。 【详解】（1） 看图可知：上述“三亲婴儿”的核DNA由母亲甲和父亲丙提供，质DNA由捐献者乙提供。由此可见，由于细胞质基因不是直接来自亲本，因此“三亲婴儿”的意义在于可以避免子代细胞质遗传病的发生。 （2）为获取更多的卵细胞，需要对女性注射促性腺激素，可得到设想的结果，并且可以避免性激素的副作用，精子获得后不具有受精能力，过程③在体外进行时需要对精子在体外进行精子获能处理，才能与卵细胞受精。 （3）观察图中信息可知，过程④是早期胚胎培养，需将受精卵移入发育培养液继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。 （4）过程⑤是胚胎移植技术，对胚胎进行性别鉴定应取囊胚期的内细胞团滋养层，利用染色体分析法或DNA分析法。 29.(1) 精子获能 两个极体（或雌、雄原核） 桑葚胚、囊胚 （2）免疫排斥 （3） 有害代谢产物积累，营养物质缺乏 胰蛋白酶、胶原酶等 抑制 【分析】胚胎干细胞是早期胚胎（原肠胚期之前）或原始性腺中分离出来的一类细胞，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境，胚胎干细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。 【详解】（1）精子获得受精能力的生理现象称为精子获能，受精的标志是观察到两个极体或雌、雄原核的形成。胚胎干细胞可以从桑葚胚或囊胚等早期胚胎中获得胚胎干细胞。 （2）利用诱导多能干细胞诱导获得的器官移植，可避免异体移植导致的免疫排斥反应问题。 （3）①动物细胞培养过程中，由于有害代谢物积累，营养物质缺乏，悬浮培养的细胞会出现生长停止的现象，需要用胰蛋白酶处理，使之分散成单个细胞，再进行传代培养。 ②分析图2可知，小分子化合物A8301和DMH1，这两种物质能够促进神经干细胞的形成，而TGF-β促进分化形成内胚层，BMP促进中胚层的形成，所以可以推测信号通路A8301和DMH1够抑制TGF-β和BMP信号通路，抑制类胚体分化为内胚层和中胚层，从而促进类胚体分化为外胚层，进而分化成神经干细胞。 30.(1) 逆转录酶、耐高温的DNA聚合酶 b、d （2）氨苄西林 (3) （4） 4.0μg·mL-1 在该浓度下未发生转化的细胞全部死亡，能存活生长的即为已转化的细胞 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。 （4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】（1）过程①为由mRNA获得基因，即以RNA为模板合成DNA，为逆转录过程，此过程需要用到逆转录酶、逆转录出来的基因需要通过PCR扩增，还需要耐高温的DNA聚合酶；引物之间不能进行配对，引物需与经内切酶剪切过的黏性末端互补配对，为防止基因发生自身环化和反向链接，需要双限制酶切，经分析表格中相关内切酶的切割位点和引物序列，氨苄西林抗性基因可被BclⅠ识别，应在剩下的3种酶中选择，依据选项所给序列结合3种限制酶的识别序列可知，应选择XbaⅠ和Sau3AⅠ两种限制酶，对应引物中的bd，故选bd。 （2）重组质粒转化处于感受态的大肠杆菌，质粒含有氨苄西林抗性基因，则转化后采用含氨苄西林的平板筛选。 （3） 基因位于启动子与终止子之间才能正常表达，所以过程⑤需将SLA-2基因插入启动子与终止子之间。根据酶的识别序列可知，Sau3AⅠ也能切割BclⅠ所识别的序列，则用NotⅠ和Sau3AⅠ完全酶切质粒2后获得的序列为177、963、3305。由于使用XbaⅠ和Sau3AⅠ切割质粒和目的基因，结合图示可知，用NotⅠ和Sau3AⅠ完全酶切重组质粒3获得的序列应为：963，1137，3130，结果如图： （4） 最低致死浓度既可以让大部分没有抗性的细胞死亡又不会让具有抗性的细胞死亡即在该浓度下未发生转化的细胞全部死亡，能存活生长的即为已转化的细胞，因此根据实验结果分析可得，最佳的嘌呤霉素筛选浓度为4.0μg·mL-1。 答案第1页，共2页 答案第1页，共2页 学科网（北京）股份有限公司 $