第06讲 光合作用（5大考点梳理）（知识清单）（上海专用）2027年高考生物一轮复习讲练测

该高中生物学高考复习知识清单聚焦光合作用专题，通过知识脑图搭建核心脉络，系统梳理叶绿体结构与色素、光合作用过程、环境因素影响、与呼吸作用综合应用及实验五大考点，构建完整知识体系。 清单以必背知识为基础，配套速记口诀（如“叶绿素喜红蓝，类胡只爱蓝”）和易错易混辨析表（区分光反应与碳反应场所等），结合C3/C5含量变化分析、实验步骤与注意事项等实用设计，培养学生结构与功能观、物质与能量观等生命观念及科学思维，助力学生自主高效复习，为教师提供精准教学辅助。

第06讲 光合作用（知识清单） 目录导航 01知识脑图·核心脉络巧搭建——梳理专题框架，搭建知识体系 02考点梳理·必背知识全突破——深挖高频考点，总结速记易错 考点1 叶绿体将光能转换并储存在糖分子中 考点2 光合作用是物质和能量的转换过程 考点3 光合作用受环境因素影响 考点4 光合作用与呼吸作用的综合应用 考点5 叶绿体色素的提取分离及叶绿素含量的测定（实验） 知识脑图·核心脉络巧搭建 考点梳理·必背知识全突破 考点1 叶绿体将光能转换并储存在糖分子中 必背知识梳理 1． 叶绿体的结构 光合作用主要发生在植物的绿色部位，这些部位的细胞中有叶绿体。电子显微镜下可观察到，叶绿体内部有许多单层膜构成的扁平囊状的类囊体，悬浮在叶绿体的基质中。类囊体膜上分布着丰富的与光合作用有关的色素和蛋白质，是光能吸收和转换的场所。叶片、叶绿体、类囊体、基粒等结构使光吸收面积最大化，有利于捕获更多的光能。 叶绿体结构示意图 2． 叶绿体中的色素 高等植物叶绿体中的色素可分为两大类：一类是叶绿素，包括叶绿素a（呈蓝绿色）和叶绿素b（呈黄绿色）；另一类是类胡萝卜素，主要有胡萝卜素（呈橙黄色）和叶黄素（呈黄色）。正常叶片中叶绿素含量约为类胡萝卜素的3倍，但随着叶片衰老或季节变化，这两类色素的比例会发生改变。 色素种类 色素颜色 含量 吸收光谱 溶解度/扩散速度 叶绿素a 蓝绿色 最多 主要吸收红橙光和蓝紫光 较低、较慢 叶绿素b 黄绿色 较多 主要吸收红橙光和蓝紫光 最低、最慢 胡萝卜素 橙黄色 较少 主要吸收蓝紫光 较高、较快 叶黄素 黄色 最少 主要吸收蓝紫光 最高、最快 3． 叶绿体色素的吸收光谱 叶绿体色素的显著特点是能吸收可见光中特定波长的光：主要集中在蓝紫光和红橙光区域，几乎不吸收绿光。不同色素分子吸收的光的波长有差异，其中叶绿素主要吸收红橙光和蓝紫光，类胡萝卜素主要吸收蓝紫光。在自然界中，晴天的直射光中红橙光的比例高，阴天的散射光中蓝紫光比例高，所以不论在晴天还是阴天，绿色植物都能充分吸收光能。 叶绿体色素吸收光谱 【核心知识】植物叶片呈现绿色的原因是叶片中的色素对绿光的吸收少（而非不吸收），绿光被反射出来。植物的液泡中含有的色素（花青素）不参与光合作用。为提高光能利用率，塑料大棚栽培时常选择“无色塑料”以便透过各色光；而阴天或夜间给温室大棚人工补光时，则宜选择植物吸收利用效率最高的“红橙光或蓝紫光”灯泡。 4． 光合色素的功能 功能 说明 吸收 叶绿素自身能吸收光能 传递 叶绿素把吸收的光能传递给别的分子 转化 少数处于特殊状态的叶绿素a能把光能转变成电能，启动光反应 速记口诀突破 1． 叶绿体结构 口诀：叶绿体双层膜，类囊体堆基粒；基质在内部，光反应膜上起。 解释：叶绿体有外膜和内膜；类囊体堆叠形成基粒；类囊体膜是光反应场所；基质是碳反应场所。 2． 色素分类 口诀：叶绿素a蓝绿多，叶绿素b黄绿和；胡萝卜素橙黄少，叶黄素黄最少过。 解释：四种色素：叶绿素a（蓝绿色，最多）、叶绿素b（黄绿色，较多）、胡萝卜素（橙黄色，较少）、叶黄素（黄色，最少）。 3． 吸收光谱 口诀：叶绿素喜红蓝，类胡只爱蓝；绿光吸收少，叶片才显绿。 解释：叶绿素主要吸收红橙光和蓝紫光；类胡萝卜素主要吸收蓝紫光；绿光吸收少，被反射，所以叶片呈绿色。 易错易混辨析 易错点 正确辨析 光合作用需要的色素和酶分布在叶绿体基粒和基质中 叶绿体基质中不含色素，只含有光合作用需要的酶。光合色素只分布在类囊体膜上。 叶绿体内膜的面积远远大于外膜的面积 叶绿体内膜光滑，和外膜面积相近。类囊体膜才是大大扩大了膜面积的结构的。 植物叶片不吸收绿光 植物叶片对绿光吸收少，但并非不吸收。叶片呈现绿色是因为绿光大部分被反射。 液泡中的花青素参与光合作用 植物的液泡中含有的色素（花青素）不参与光合作用，仅影响花的颜色等。 考点2 光合作用是物质和能量的转换过程 ◆ 必背知识梳理 1． 光合作用的概念与反应式 光合作用是植物细胞叶绿体将太阳能转换成化学能、将CO₂和H₂O变为糖和O₂的过程。总反应式为：CO₂ + H₂O → (CH₂O) + O₂（条件：光能、叶绿体）。 2． 光合作用的研究历程 时间/发现者 主要贡献 1642年 赫尔蒙特 认为植物生长增加的质量主要来源于水，而不是土壤 1771年 普里斯特利 植物能够净化由于蜡烛燃烧、动物呼吸而变得“污浊”的空气 1779年 英格豪斯 发现光照是植物净化空气的必要条件 1785年 明确植物在光下放出的气体是O₂，吸收的是CO₂ 1804年 索绪尔 证明植物体的碳来自植物同化大气中的CO₂ 19世纪中期 迈尔 发现植物把太阳能转化成化学能贮存起来 1864年 萨克斯 证明叶片在光下制造了淀粉 1897年 佩弗 将绿色植物利用太阳能将CO₂和H₂O合成为有机物并释放O₂的过程命名为光合作用 1941年 鲁宾和卡门 用同位素标记法证明光合作用中释放的O₂来自H₂O 20世纪40年代 卡尔文团队 探明了CO₂转化成糖的生化途径（卡尔文循环） 1929年 殷宏章 发现“光色瞬变效应”，证实光合作用有两种光系统 3． 光反应阶段 光反应发生在叶绿体的类囊体膜上，需要光。类囊体膜上的光合色素捕获光能，并将光能转变成活跃化学能、释放O₂。 光反应中光系统与电子传递链 过程 具体内容 光能的捕获与转换 类囊体膜上的光合色素吸收光能并传递到特定的叶绿素a上，使叶绿素a分子激发释放出高能电子 水的光解 失去电子后的叶绿素a分子具强氧化性，从类囊体腔内的H₂O中夺取电子；失去电子后的H₂O裂解为H⁺和O₂，O₂释放到细胞外 高能化合物的形成 高能电子在类囊体膜上传递，最终与NADP⁺及H⁺结合形成NADPH；电子传递过程中H⁺被泵入类囊体腔，顺浓度梯度通过ATP合酶驱动ATP形成 【核心知识】光反应能量转换：光能→ATP和NADPH中活跃的化学能。光反应产生的ATP、NADPH推动叶绿体基质中碳反应的进行。光合作用的光反应阶段产生的ATP只能用于碳反应，不用于其他生命活动过程。 4． 碳反应阶段（卡尔文循环） 碳反应是叶绿体利用ATP、NADPH将CO₂合成糖的过程，发生在叶绿体基质中。 步骤 反应 说明 CO₂固定 CO₂与五碳糖（RuBP）结合，形成2个三碳化合物（C₃） 需要酶的催化 C₃还原 C₃在ATP的驱动下，接受NADPH提供的H⁺和电子，形成三碳糖 活跃化学能→稳定化学能 五碳糖再生 一部分三碳糖再生为五碳糖，继续参与卡尔文循环 维持循环进行 产物输出 另一部分三碳糖转变成蔗糖运输到植物体各部分，或变成淀粉储存在叶绿体中 光合作用的产物 【深度理解】碳反应不需要叶绿素和光直接参与，但需要多种酶，且受光照促进（因为需要光反应提供ATP和NADPH）。碳反应并不能长时间在黑暗条件下进行。光合作用的产物有一部分是淀粉，还有一部分是蔗糖，蔗糖可以进入筛管，再通过韧皮部运输到植株各处。 5． 光反应与碳反应的比较和联系 比较项目 光反应阶段 碳反应阶段 反应场所 叶绿体的类囊体膜上 叶绿体的基质中 与光的关系 必须在光下进行 不需要光直接参与，但受光照促进 物质变化 水的光解、ATP和NADPH的合成 CO₂固定、C₃还原、五碳糖再生 能量变化 光能→ATP和NADPH中活跃的化学能 ATP和NADPH中活跃的化学能→糖分子中稳定的化学能 联系 光反应为碳反应提供NADPH和ATP；碳反应为光反应提供ADP、Pi和NADP⁺ 光反应为碳反应提供NADPH和ATP；碳反应为光反应提供ADP、Pi和NADP⁺ 6． 外界条件改变时C₃和C₅含量的变化 条件变化 C₃含量 C₅含量 NADPH和ATP 光照由强到弱，CO₂供应不变 增加 减少 减少或没有 光照由弱到强，CO₂供应不变 减少 增加 增加 CO₂由充足到不足，光照不变 减少 增加 增加 CO₂由不足到充足，光照不变 增加 减少 减少 【实验提醒】分析某物质含量变化时，要根据其来源和去路分析。停止光照后，NADPH和ATP合成停止、消耗速率不变，二者含量下降；C₃还原减慢，C₃消耗减少、C₅生成减少，而CO₂固定仍进行，故C₃增加、C₅减少。 7． 光系统及电子传递链 光合作用的光反应阶段与类囊体膜上的光系统Ⅰ（PSⅠ）和光系统Ⅱ（PSⅡ）有关。光系统Ⅱ进行水的光解，产生氧气、H⁺和高能电子；光系统Ⅰ主要介导NADPH的产生。电子经过电子传递链中的质体醌→细胞色素b₆f复合体→质体蓝素→光系统Ⅰ→铁氧还蛋白，最终传递给NADPH。电子传递过程中释放的能量用于将H⁺从叶绿体基质泵入类囊体腔，建立质子浓度梯度，驱动ATP合成酶合成ATP。 8． 化能合成作用 某些细菌（如硝化细菌）利用无机物氧化时所释放的能量来制造有机物，这种合成作用叫化能合成作用。与光合作用的相同点是都能将无机物合成有机物；不同点是化能合成作用利用的是化学能，光合作用利用的是光能。 速记口诀突破 1． 光合作用两阶段 口诀：光反应在类囊体，水光解产氧和[H]；ATP和NADPH，活跃化学能来装。 解释：光反应在类囊体膜上进行，水被光解产生O₂、H⁺和电子；同时合成ATP和NADPH，将光能转化为活跃化学能。 2． 碳反应卡尔文循环 口诀：碳反应在基质中，CO₂固定C₃生；ATP供能NADPH还原，糖再生五碳循环行。 解释：碳反应在叶绿体基质中进行；CO₂与五碳糖结合形成C₃；C₃被ATP和NADPH还原形成糖；部分产物再生五碳糖。 3． 光碳反应联系 口诀：光反应产物供碳反，碳反应产物回光反；相互促进又制约，缺一则光合作用停。 解释：光反应为碳反应提供ATP和NADPH；碳反应为光反应提供ADP、Pi和NADP⁺；二者相互依存、相互制约。 4． C₃C₅变化 口诀：光弱CO₂不变，C₃增C₅减；CO₂少光不变，C₃减C₅增。 解释：光照减弱时，C₃还原减慢，C₃积累、C₅减少；CO₂供应不足时，CO₂固定减慢，C₃减少、C₅积累。 易错易混辨析 易错点 正确辨析 光反应将光能转化为稳定的化学能储存在ATP中 光反应将光能转化为储存在ATP和NADPH中活跃的化学能，而不是稳定的化学能。 碳反应中CO₂可直接接受ATP和NADPH释放的能量，并且被NADPH还原 碳反应中，CO₂不能直接被NADPH还原，必须先经过CO₂的固定形成C₃，再在有关酶的催化作用下，C₃接受ATP和NADPH释放的能量，并被NADPH还原。 提取完整的线粒体悬浮液可以独立完成有氧呼吸 线粒体是有氧呼吸的主要场所，但有氧呼吸第一阶段在细胞质基质中进行，因此提取完整的线粒体悬浮液不可以独立完成有氧呼吸。而提取的叶绿体悬浮液在适宜条件下可以独立完成光合作用。 植物细胞都能产生NADPH 只有能进行光合作用的植物细胞（含有叶绿体且能进行光反应）才能产生NADPH。 光反应产生的ATP可用于各项生命活动 光反应产生的ATP一般只用于碳反应，不用于其他生命活动过程。 考点3 光合作用受环境因素影响 必背知识梳理 1． 光合作用强度的概念 光合作用强度又称光合速率，通常用单位面积叶片在单位时间内进行光合作用释放的O₂量或消耗的CO₂量来表示。植物的光合速率不仅受内在因素的控制，还受多种环境因素的影响。植物绿色组织在有光条件下光合作用与细胞呼吸同时进行，测得的数据为净光合速率。 2． 总光合速率、净光合速率和呼吸速率 总光合速率、净光合速率与呼吸速率关系 项目 CO₂表示 O₂表示 有机物表示 呼吸速率 黑暗条件下释放CO₂量（m₁） 黑暗条件下吸收O₂量（n₁） 有机物消耗量 净光合速率 从外界吸收CO₂量（m₂） 释放到外界的O₂量（n₂） 有机物积累量 总光合速率 叶绿体固定/消耗CO₂量（m₁+m₂） 叶绿体产生O₂量（n₁+n₂） 有机物制造量 【核心知识】总光合速率 = 净光合速率 + 呼吸速率。在光照条件下，测得的气体交换数据通常是净光合速率；要计算总光合速率，还需加上呼吸速率。 3． 光照强度对光合作用的影响 光照强度对光合速率的影响 曲线点/段 生理状态 气体交换 应用 A点 只进行呼吸作用 吸收O₂、释放CO₂ AB段 呼吸作用＞光合作用（净光合＜0） 吸收O₂、释放CO₂ B点（光补偿点） 呼吸作用=光合作用（净光合=0） 不与外界进行气体交换 B点以后 呼吸作用＜光合作用（净光合＞0） 吸收CO₂、释放O₂ 温室大棚中适当增强光照强度，以提高光合速率 C-D段 随光照强度增加，光合速率不再增大 限制因素：CO₂浓度、酶、色素等 适当提高CO₂浓度或温度等 4． 光补偿点和光饱和点的移动 环境变化 光补偿点 光饱和点 适当增大CO₂浓度 左移 右移 适当减小CO₂浓度 右移 左移 土壤缺Mg²⁺ 右移 左移 【深度理解】光补偿点是光合速率等于呼吸速率时的光照强度。CO₂浓度增大或叶绿素含量增加，植物在较低光照下就能使光合速率等于呼吸速率，因此光补偿点左移；同时植物能利用更强的光照，光饱和点右移。缺Mg²⁺导致叶绿素合成减少，光补偿点右移、光饱和点左移。 5． CO₂浓度对光合作用的影响 CO₂是光合作用的原料，大气中CO₂浓度约为0.03%。CO₂浓度影响碳反应阶段，制约C₃的形成。在一定范围内，提高CO₂浓度可提高光合速率；超过一定范围后，光合速率不再增加。A点表示CO₂补偿点（光合速率=细胞呼吸速率），B点表示CO₂饱和点。在人工温室栽培时补充室内CO₂浓度，可使一些作物生长加快，增产效果明显。 6． 温度、水和无机盐对光合作用的影响 因素 原理 应用 温度 主要影响酶的活性和蛋白质的功能 温室栽培中控制适宜温度，避免高温抑制酶活性 水 水是光合作用的原料，缺水会导致光合速率减慢甚至停止 合理灌溉 无机盐 影响叶绿素等有关化合物的合成（缺镁影响叶绿素形成，缺氮、缺磷影响ATP、NADPH合成） 合理施肥 光质 白光为复合光，光合作用能力最强；红光、蓝紫光下光合强度较大，绿光下最弱 大棚选无色塑料，补光选红橙光或蓝紫光 7． 影响光合作用的内部因素 影响光合作用的内部因素包括：①植物自身的遗传特性（如阴生植物和阳生植物对光照强度的适应能力不同）；②植物叶片的叶龄、叶绿素含量及酶活性；③叶面积指数等。叶绿素的合成还受光照、温度和矿质元素（如Mg²⁺、N、P）等因素影响。 速记口诀突破 1． 三率关系 口诀：总光合等于净光合加呼吸；测得数据是净的，加上呼吸得总的。 解释：总光合速率 = 净光合速率 + 呼吸速率；光照下测得的一般是净光合速率。 2． 光照强度影响 口诀：A点只呼吸，AB段呼吸强；B点光补偿，以后净光合；C点光饱和，再增光照也没用。 解释：光照强度影响曲线：A点只进行呼吸作用；AB段呼吸＞光合；B点为光补偿点；B点后光合＞呼吸；C点为光饱和点。 3． 环境因素应用 口诀：光强CO₂和温度，水肥光质也相关；大棚无色透光好，补光红蓝效率高。 解释：影响光合作用的环境因素有光照强度、CO₂浓度、温度、水分、无机盐、光质等；无色大棚可透过各种光，红橙光和蓝紫光补光效率最高。 4． 光补偿点移动 口诀：CO₂多或叶绿足，补偿点左移易饱和；缺镁少绿光合弱，补偿点右移饱和左。 解释：CO₂浓度增大或叶绿素含量增加→光补偿点左移、光饱和点右移；缺Mg²⁺→光补偿点右移、光饱和点左移。 易错易混辨析 易错点 正确辨析 生长于较弱光照条件下的植物，当提高CO₂浓度时，其光合速率就随之增加 较弱光照条件下，光反应产生的ATP和NADPH较少，即使CO₂浓度升高，光合速率也不随之增加，此时限制光合作用的环境因素是光照强度。 整株植物处于光补偿点时，叶肉细胞的光合作用强度和细胞呼吸强度相等 整株植物处于光补偿点时，整株植物的光合速率等于呼吸速率；但整株植物所有细胞都进行呼吸作用，而进行光合作用的主要是叶肉细胞，因此叶肉细胞的光合作用强度应大于其自身的细胞呼吸强度。 光照越强，光合速率一定越高 超过光饱和点后，光照强度再增加，光合速率也不再增大，此时限制因素是CO₂浓度、温度、酶活性、色素含量等。 CO₂浓度越高，光合速率一定越高 超过CO₂饱和点后，再增加CO₂浓度，光合速率不再增加；且过高CO₂浓度可能对植物产生毒害。 温度对光合作用没有影响 温度通过影响酶活性影响光合作用，植物有最适温度，高温会使酶失活。 考点4 光合作用与呼吸作用的综合应用 必背知识梳理 1． 光合作用与呼吸作用的联系 光合作用与呼吸作用的关系 比较项目 光合作用 有氧呼吸 代谢类型 合成作用（同化作用） 分解作用（异化作用） 物质变化 无机物→有机物 有机物→无机物 能量变化 光能→化学能（储能） 化学能→ATP、热能（放能） 实质 合成有机物，储存能量 分解有机物，释放能量供细胞利用 场所 叶绿体 细胞质基质、线粒体 条件 只在光下进行 有光、无光都能进行 2． 光合作用与有氧呼吸中各种元素的去向 C：¹⁴CO₂ → ¹⁴C₃ → （¹⁴CH₂O） → 丙酮酸 → ¹⁴CO₂ O：H₂¹⁸O → ¹⁸O₂（光反应）；C¹⁸O₂ → C₃ → （CH₂¹⁸O）（碳反应） H₂¹⁸O也可参与有氧呼吸第二阶段，与丙酮酸反应生成C¹⁸O₂，再进入光合作用形成有机物。 3． 能量转化关系 光合作用：光能 → ATP和NADPH中活跃的化学能 → （CH₂O）中稳定的化学能。 细胞呼吸：（CH₂O）中稳定的化学能 → ATP中活跃的化学能 + 热能。 4． 光合速率与呼吸速率的测定与应用 【核心知识】净光合速率 = 总光合速率 - 呼吸速率。在黑暗条件下测得的是呼吸速率；在光照条件下测得的是净光合速率；总光合速率需要通过计算获得。利用这一关系可以分析植物在不同环境条件下的有机物积累情况。 速记口诀突破 1． 光合作用与呼吸作用 口诀：光合合成有机物，储能只在光下做；呼吸分解有机物，放能有光无光都可。 解释：光合作用合成有机物、储存能量、需要光；呼吸作用分解有机物、释放能量、有光无光都能进行。 2． 元素去向 口诀：碳从CO₂到C₃，再到糖和呼吸CO₂；氧在水和CO₂间，光合产氧水来源。 解释：碳元素：CO₂→C₃→有机物→丙酮酸→CO₂；氧元素：H₂O光解产生O₂，CO₂中的氧进入有机物。 3． 三率关系应用 口诀：黑暗测呼吸，光照测净光；总光等于净光加呼吸，有机积累看净光。 解释：黑暗条件下测呼吸速率；光照条件下测净光合速率；总光合速率=净光合速率+呼吸速率；有机物积累量取决于净光合速率。 易错易混辨析 易错点 正确辨析 光合作用与呼吸作用互不影响 光合作用与呼吸作用相互联系、相互制约。光反应为碳反应提供ATP和NADPH；细胞呼吸为光合作用提供CO₂和能量；光合产物也可作为呼吸作用的原料。 植物白天只进行光合作用，夜晚只进行呼吸作用 白天植物既进行光合作用也进行呼吸作用；夜晚没有光照，只进行呼吸作用和少量其他代谢。 植物生长只需要总光合速率高 植物生长取决于净光合速率（有机物积累量），净光合速率=总光合速率-呼吸速率。 光合作用和呼吸作用的酶都分布在细胞质基质中 光合作用的光反应酶分布在类囊体膜上，碳反应酶分布在叶绿体基质中；呼吸作用相关酶分布在细胞质基质和线粒体中。 考点5 叶绿体色素的提取分离及叶绿素含量的测定（实验） 必背知识梳理 1． 实验原理 实验环节 原理 色素提取 叶绿体色素分布于类囊体膜，具有亲脂性，能溶于有机溶剂，可用乙醇或丙酮从叶片中提取出来 色素分离 不同色素在有机溶剂中的溶解度不同，在吸附载体上的吸附能力不同，随层析液扩散的速率不同，可用层析法分离 叶绿素含量测定 叶绿素具有特定吸收波长，在665 nm和649 nm处的吸光度与叶绿素a、叶绿素b含量有关 2． 实验材料与器具 经干燥处理（65 ℃，24 h）的绿色菠菜（或青菜等）叶片、95%乙醇、剪刀、脱脂棉、聚酰胺薄膜、封口膜、研钵、量筒、玻璃漏斗、试管、烧杯、玻璃毛细管、分光光度计、电子天平等。 3． 色素提取步骤 步骤 操作 注意事项 叶片匀浆 称取1 g经干燥处理的叶片（已除去粗大叶脉），剪碎后放入研钵中，加6 mL 95%乙醇，研磨成匀浆 研磨要充分，乙醇易挥发，操作要迅速 过滤 漏斗内放置滤纸或底部放一层脱脂棉，将叶片匀浆液倒入过滤，收集滤液到试管中，封口膜封住试管口备用 避免乙醇挥发 4． 色素层析分离步骤 步骤 操作 注意事项 薄膜准备 将聚酰胺薄膜剪成2 cm×8 cm的长条 点样 用玻璃毛细管取色素提取液，于距薄膜底边1.5 cm处划线，晾干；重复点样3~5次 一次划线溶液不可过多，等风干后再重复，使线条细而浓 层析 在烧杯中加入适量95%乙醇作为层析液，薄膜点样端朝下放入，点样线不能接触层析液；用培养皿盖住烧杯进行层析 点样线不能浸入层析液，否则色素会溶解在层析液中 观察记录 观察色素带分离现象，直至各色素带位置不变后取出晾干，记录颜色和位置 从上到下依次为胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b 5． 叶绿素含量测定 步骤 操作 提取色素 选取经干燥处理的同种植物不同部位的叶片，加等量95%乙醇研磨后过滤 稀释色素 将色素提取液用95%乙醇稀释到合适倍数（N），摇匀备用 测定吸光度 以95%乙醇为对照调零，在分光光度计中分别测定665 nm、649 nm处的吸光度 数据处理 叶绿素a浓度（mg/L）= 13.70A₆₆₅ - 5.76A₆₄₉；叶绿素b浓度（mg/L）= 25.80A₆₄₉ - 7.60A₆₆₅；总叶绿素浓度 = 叶绿素a浓度 + 叶绿素b浓度 6． 实验结果分析 色素分离后，滤纸条（或薄膜）上从上到下依次出现四条色素带：胡萝卜素（橙黄色，最上）、叶黄素（黄色）、叶绿素a（蓝绿色）、叶绿素b（黄绿色，最下）。胡萝卜素溶解度最大、扩散速度最快；叶绿素b溶解度最小、扩散速度最慢。盛夏到深秋，银杏叶片中叶绿素逐渐分解，类胡萝卜素比例相对增加，叶片逐渐变黄。 速记口诀突破 1． 色素提取 口诀：色素亲脂溶有机，乙醇丙酮可提取；研磨充分快操作，防止挥发要封紧。 解释：叶绿体色素易溶于有机溶剂；用95%乙醇研磨提取；操作要迅速，防止乙醇挥发。 2． 色素分离 口诀：层析法分色素，溶解度大跑得快；从上到下胡叶ab，颜色橙黄黄蓝绿。 解释：用纸层析法分离色素；溶解度大的扩散快；从上到下依次是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b。 3． 叶绿素含量测定 口诀：665和649，吸光度来算浓度；a和b公式不同，相加就是总叶绿素。 解释：测定叶绿素在665 nm和649 nm处的吸光度，代入公式计算叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素浓度。 易错易混辨析 易错点 正确辨析 研磨时加蒸馏水提取色素 应加无水乙醇或95%乙醇等有机溶剂，因为色素易溶于有机溶剂，不溶于水。 点样线可以浸入层析液 点样线不能浸入或接触层析液，否则色素会溶解在层析液中，无法在薄膜上分离。 色素带颜色从上到下依次是蓝绿、黄绿、橙黄、黄 从上到下依次是胡萝卜素（橙黄色）、叶黄素（黄色）、叶绿素a（蓝绿色）、叶绿素b（黄绿色）。 叶绿素含量测定只需测定一个波长 需要同时测定665 nm和649 nm两个波长，因为两个波长下的吸光度分别与叶绿素a和叶绿素b含量有关。 叶片新鲜时研磨效果比干燥叶片好 教材中要求叶片经干燥处理，以减少水分对色素提取浓度的影响，便于定量测定。 / 学科网（北京）股份有限公司 $