第54练 实验二：微生物的分离、接种与培养实验《生物基础》（厦门大学出版社）一课一练（原卷版+解析版）

编写说明：考虑到中职学生普遍基础知识相对薄弱的情况，我们依据支架式教学理念，精心编制了《生物基础》（厦门大学出版社）一课一练。专辑里的每一份练习，都与课堂所授知识点紧密相关，题目围绕课堂所学知识点呈现。目的在于激发学生的学习兴趣，培养他们的学习自觉性，帮助学生扎实掌握课程的基本概念与基本方法，为他们后续的进一步提升奠定坚实基础。 本卷是《生物基础》（厦门大学出版社）一课一练的第54练，内容涵盖第九章微生物的培养与保藏的第四节实验二：微生物的分离、接种与培养实验。 《生物基础》（厦门大学出版社）第54练 第九章 微生物的培养与保藏 第四节. 实验二：微生物的分离、接种与培养实验 一、单选题 1.大肠杆菌等细菌接种后标准培养温度与培养时长为（） A. 25~28℃，48h B. 32~37℃，24h C. 25~28℃，72h D. 32~37℃，72h 2. 用于检测细菌运动能力、厌氧菌保藏的接种方法是（） A. 划线接种法 B. 涂布接种法 C. 穿刺接种法 D. 三点接种法 3. 平板划线分离微生物时，每划完一个区域转动培养皿的角度约为（） A. 30° B. 70° C. 120° D. 180° 4. 下列哪种接种方式不适合用于菌落计数（） A. 涂布接种法 B. 螺旋接种法 C. 划线接种法 D. 倾注平板法 2、 判断题 5. 霉菌和酵母菌统一放置37℃恒温箱倒置培养24h即可观察结果。（） 6. 倾注平板法适合所有微生物培养，包括好氧菌与热敏性菌株。（） 7. 平板培养基放入恒温箱培养时必须倒置放置。（） 8. 在平板划线纯化时，为充分稀释菌液，每一区划线结束后都需要灼烧接种环，冷却后再进行下一区域划线。（） 3、 简答题 9. 简述划线分离法的实验目的与核心操作逻辑。 10. 实验中平板划线后未得到单菌落，菌苔连成一片，请分析全部可能原因并给出对应解决办法。 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 学科网（北京）股份有限公司 $ 编写说明：考虑到中职学生普遍基础知识相对薄弱的情况，我们依据支架式教学理念，精心编制了《生物基础》（厦门大学出版社）一课一练。专辑里的每一份练习，都与课堂所授知识点紧密相关，题目围绕课堂所学知识点呈现。目的在于激发学生的学习兴趣，培养他们的学习自觉性，帮助学生扎实掌握课程的基本概念与基本方法，为他们后续的进一步提升奠定坚实基础。 本卷是《生物基础》（厦门大学出版社）一课一练的第54练，内容涵盖第九章微生物的培养与保藏的第四节实验二：微生物的分离、接种与培养实验。 《生物基础》（厦门大学出版社）第54练 第九章 微生物的培养与保藏 第四节. 实验二：微生物的分离、接种与培养实验 一、单选题 1.大肠杆菌等细菌接种后标准培养温度与培养时长为（） A. 25~28℃，48h B. 32~37℃，24h C. 25~28℃，72h D. 32~37℃，72h 【答案】B 【解析】细菌最适生长温度接近人体体温，繁殖速度快，24小时即可形成清晰菌落；25~28℃是真菌培养温度。 2. 用于检测细菌运动能力、厌氧菌保藏的接种方法是（） A. 划线接种法 B. 涂布接种法 C. 穿刺接种法 D. 三点接种法 【答案】C 【解析】穿刺接种使用接种针刺入半固体培养基深层，可观察细菌沿穿刺线扩散的情况，以此判断有无鞭毛、运动能力强弱。 3. 平板划线分离微生物时，每划完一个区域转动培养皿的角度约为（） A. 30° B. 70° C. 120° D. 180° 【答案】B 【解析】每次转动70°可以让下一组划线与上一组线条轻微重叠，逐步稀释菌液，最终获得分散的单菌落。 4. 下列哪种接种方式不适合用于菌落计数（） A. 涂布接种法 B. 螺旋接种法 C. 划线接种法 D. 倾注平板法 【答案】C 【解析】划线法依靠梯度稀释分离单菌落，但菌液稀释程度无法定量，不能统计原始样品活菌数量；其余三种方法均可完成计数。 2、 判断题 5. 霉菌和酵母菌统一放置37℃恒温箱倒置培养24h即可观察结果。（） 【答案】错误 【解析】真菌适宜低温培养，酵母菌需25~28℃培养48h，霉菌生长更慢，需要72h才能长出完整菌落。 6. 倾注平板法适合所有微生物培养，包括好氧菌与热敏性菌株。（） 【答案】错误 【解析】倾注法需要和45~50℃融化琼脂混合，高温会损伤热敏微生物；菌落埋藏在琼脂内部，氧气不足，不利于好氧菌生长。 7. 平板培养基放入恒温箱培养时必须倒置放置。（） 【答案】正确 【解析】倒置可防止培养箱冷凝水滴落至培养基表面冲散菌落，同时减少杂菌沉降污染。 8. 在平板划线纯化时，为充分稀释菌液，每一区划线结束后都需要灼烧接种环，冷却后再进行下一区域划线。（） 【答案】错误 【解析】该操作存在误区：仅完成第一区划线后灼烧接种环会过度稀释，无法携带菌种完成后续划线；正确操作是全部划线完成后再灼烧接种环，各区之间不灼烧，依靠线条重叠实现梯度稀释。 3、 简答题 9. 简述划线分离法的实验目的与核心操作逻辑。 【答案】目的：将混杂多种微生物的样品逐步稀释，获得单菌落，完成菌种分离纯化，同时观察单菌落形态特征。 操作逻辑：通过分区连续划线，后段线条仅携带极少量前段菌液，不断降低单位面积微生物数量，最终得到彼此独立的单个菌落。 10. 实验中平板划线后未得到单菌落，菌苔连成一片，请分析全部可能原因并给出对应解决办法。 【答案】原因1：接种环菌液过多，初始菌浓度过高；对策：划线前在空白区域轻划几次，减少环内菌量再分区划线。 原因2：相邻划线区域重叠面积过大，稀释效果不足；对策：每次转动培养皿70°，仅让下一组线条末端与上组轻微相交。 原因3：培养温度过高、培养时间过长，菌落过度蔓延融合；对策：严格按照菌种类型控制温度与培养时长，按时观察。 原因4：琼脂培养基含水量过高，菌落易扩散蔓延；对策：配制培养基时控制加水量，灭菌后避免冷凝水堆积。 原因5：操作全程未无菌，外源杂菌混入加重菌群混杂；对策：全程酒精灯无菌区操作，工具前后充分灼烧 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 学科网（北京）股份有限公司 $