第53练 实验一：细菌培养基的制备和灭菌《生物基础》（厦门大学出版社）一课一练（原卷版+解析版）

编写说明：考虑到中职学生普遍基础知识相对薄弱的情况，我们依据支架式教学理念，精心编制了《生物基础》（厦门大学出版社）一课一练。专辑里的每一份练习，都与课堂所授知识点紧密相关，题目围绕课堂所学知识点呈现。目的在于激发学生的学习兴趣，培养他们的学习自觉性，帮助学生扎实掌握课程的基本概念与基本方法，为他们后续的进一步提升奠定坚实基础。 本卷是《生物基础》（厦门大学出版社）一课一练的第53练，内容涵盖第九章微生物的培养与保藏的第三节实验一：细菌培养基的制备和灭菌。 《生物基础》（厦门大学出版社）第53练 第九章 微生物的培养与保藏 第三节. 实验一：细菌培养基的制备和灭菌 一、单选题 1.配制1000mL LB液体培养基，各组分标准添加量是（） A. 酵母提取物5g、蛋白胨10g、NaCl 5g B. 酵母提取物5g、蛋白胨10g、NaCl 10g C. 牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl 5g D. 酵母提取物10g、蛋白胨5g、NaCl 10g 2. 固体、半固体培养基中琼脂常规添加浓度依次为（） A. 0.5%~1%；1.5%~2% B. 1.5%~2%；0.5%~1% C. 1%~1.5%；2%~3% D. 2%~3%；0.1%~0.5% 3. LB细菌培养基适宜pH、霉菌酵母菌偏好生长环境分别是（） A. 7.2；酸性 B. 6.0；碱性 C. 8.0；中性 D. 5.5；偏碱 4. 试管分装固体培养基制斜面、锥形瓶装培养基的容积上限分别是（） A. 试管高度1/4；瓶容积1/5 B.试管高度1/5；瓶容积1/4 C. 试管高度1/3；瓶容积1/2 D. 试管高度1/5；瓶容积1/2 2、 判断题 5. 熔化含琼脂的培养基时，可开大火快速加热，无需持续搅拌。（） 6. LB培养基、牛肉膏蛋白胨培养基高压蒸汽灭菌所需压力与时长完全一致。（ ） 7. 高压灭菌后的固体培养基，冷却至80℃再进行倒平板、摆斜面操作。（） 8. 酸性培养基可提前调好pH再进行高压蒸汽灭菌，不会影响琼脂凝固性能。（） 3、 简答题 9. 完整写出配制通用固体培养基的全部标准操作流程。 10. 配制LB固体培养基后出现两种异常现象：①灭菌后培养基无法凝固；②培养基浑浊有大量沉淀。分别分析诱因并给出对应解决办法 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 学科网（北京）股份有限公司 $ 编写说明：考虑到中职学生普遍基础知识相对薄弱的情况，我们依据支架式教学理念，精心编制了《生物基础》（厦门大学出版社）一课一练。专辑里的每一份练习，都与课堂所授知识点紧密相关，题目围绕课堂所学知识点呈现。目的在于激发学生的学习兴趣，培养他们的学习自觉性，帮助学生扎实掌握课程的基本概念与基本方法，为他们后续的进一步提升奠定坚实基础。 本卷是《生物基础》（厦门大学出版社）一课一练的第53练，内容涵盖第九章微生物的培养与保藏的第三节实验一：细菌培养基的制备和灭菌。 《生物基础》（厦门大学出版社）第53练 第九章 微生物的培养与保藏 第三节. 实验一：细菌培养基的制备和灭菌 一、单选题 1.配制1000mL LB液体培养基，各组分标准添加量是（） A. 酵母提取物5g、蛋白胨10g、NaCl 5g B. 酵母提取物5g、蛋白胨10g、NaCl 10g C. 牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl 5g D. 酵母提取物10g、蛋白胨5g、NaCl 10g 【答案】B 【解析】LB培养基与牛肉膏蛋白胨培养基核心区别在于无机盐用量，LB用于培养大肠杆菌，盐浓度更高；C选项为牛肉膏蛋白胨基础配方，其余选项组分配比存在数值错误。 2. 固体、半固体培养基中琼脂常规添加浓度依次为（） A. 0.5%~1%；1.5%~2% B. 1.5%~2%；0.5%~1% C. 1%~1.5%；2%~3% D. 2%~3%；0.1%~0.5% 【答案】B 【解析】琼脂是凝固剂，浓度越高培养基硬度越高；高浓度琼脂成型稳定，用于平板、斜面；低浓度琼脂可支撑细菌运动，用于动力观察半固体小管。 3. LB细菌培养基适宜pH、霉菌酵母菌偏好生长环境分别是（） A. 7.2；酸性 B. 6.0；碱性 C. 8.0；中性 D. 5.5；偏碱 【答案】A 【解析】细菌细胞内酶体系适配中性偏碱环境；真菌代谢有机酸，自身更适应偏酸环境，两类微生物培养基调酸碱性标准存在明显区分。 4. 试管分装固体培养基制斜面、锥形瓶装培养基的容积上限分别是（） A. 试管高度1/4；瓶容积1/5 B.试管高度1/5；瓶容积1/4 C. 试管高度1/3；瓶容积1/2 D. 试管高度1/5；瓶容积1/2 【答案】D 【解析】固体培养基分装量少，留出充足空气空间便于菌种有氧生长；锥形瓶容量大，装液过半会阻碍灭菌时内部热蒸汽流通，降低灭菌效果。 2、 判断题 5. 熔化含琼脂的培养基时，可开大火快速加热，无需持续搅拌。（） 【答案】错误 【解析】琼脂受热后黏性极强，局部高温会黏附容器底部碳化，不仅失去凝固作用，还会造成容器受热不均炸裂，全程小火搅拌是必要操作。 6. LB培养基、牛肉膏蛋白胨培养基高压蒸汽灭菌所需压力与时长完全一致。（ ） 【答案】正确 【解析】二者均为营养型通用细菌培养基，无特殊热敏成分，采用标准微生物培养基灭菌参数即可充分杀灭全部微生物及其芽孢。 7. 高压灭菌后的固体培养基，冷却至80℃再进行倒平板、摆斜面操作。（） 【答案】错误 【解析】80℃高温会直接杀死后续接种的活菌；冷却至50℃既能维持液态方便铺板，又不会高温损伤菌种，是兼顾操作与活菌存活的适宜温度。 8. 酸性培养基可提前调好pH再进行高压蒸汽灭菌，不会影响琼脂凝固性能。（） 【答案】错误 【解析】高温高压环境下，酸性物质会破坏琼脂多糖链结构，使其丧失凝固能力；需调整操作顺序规避该化学反应带来的培养基失效问题。 3、 简答题 9. 完整写出配制通用固体培养基的全部标准操作流程。 【答案】按照配方准确称量各类营养原料；加入部分蒸馏水加热搅拌，待原料完全溶解后投入琼脂，小火搅拌熔化；补水定容至配制所需总体积；冷却后检测酸碱度，使用稀酸、稀碱缓慢调节至目标pH； 有澄清度要求时趁热过滤去除杂质；分装至试管或锥形瓶，控制分装体积；容器瓶口加棉塞，外层包裹牛皮纸做好标记；高压蒸汽灭菌处理；灭菌后冷却成型，放置37℃环境保温培养完成无菌检测。 10. 配制LB固体培养基后出现两种异常现象：①灭菌后培养基无法凝固；②培养基浑浊有大量沉淀。分别分析诱因并给出对应解决办法 【答案】1.培养基无法凝固：诱因：①灭菌前pH偏低，高温降解琼脂；②琼脂添加量不足，达不到成型所需最低浓度；③加热熔化时琼脂糊底碳化，凝固结构被破坏。 解决办法：灭菌完成冷却后再调节酸性培养基pH；严格按照配方添加凝固剂；熔化琼脂全程小火、不停搅拌。 2.培养基浑浊沉淀：诱因：①蛋白类营养物质溶解不充分，大分子颗粒悬浮；②原料杂质过多未过滤除渣；③灭菌不彻底，残留杂菌大量增殖形成菌落沉淀。 解决办法：配制时充分搅拌至粉末完全溶解；对澄清度有要求的培养基趁热纱布过滤；严格执行灭菌参数，灭菌后37℃恒温培养完成无菌检查 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 学科网（北京）股份有限公司 $