内容正文:
动物细胞融合技术与单克隆
抗体
1
一、动物细胞融合技术
1.概念:使____________动物细胞结合形成一个细胞的技术。
2.原理:________________________。
3.诱导动物细胞融合的常用方法: 融合法、电融合法、________
_________等。
4.结果:形成__________,且具有原来____________细胞的遗传信息。
5.意义:突破了__________的局限,使远缘杂交成为可能。
两个或多个
细胞膜具有一定的流动性
灭活病
毒诱导法
杂交细胞
两个或多个
有性杂交
预 习 梳 理
2
6.应用
(1)成为研究__________、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重
要手段。
(2)利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术,为制造_________
_____开辟了新途径。
细胞遗传
单克隆
抗体
预 习 梳 理
3
二、单克隆抗体及其应用
1.传统抗体的获得
(1)方法:向动物体内反复注射__________,使动物产生抗体,然后从动
物______中分离所需抗体。
(2)缺点:产量低、________、________差。
某种抗原
血清
纯度低
特异性
2.单克隆抗体制备思路:把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨
髓瘤细胞融合,所得到的融合细胞就可能大量增殖,产生足够数量
的特定抗体。
预 习 梳 理
4
3.单克隆抗体优点:能准确地识别抗原的细微差异,与特定抗原发生
特异性结合,并且可以__________。
大量制备
4.单克隆抗体的应用
(1)作为__________,在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要的
作用。
(2)用于__________和__________。
诊断试剂
运载药物
治疗疾病
预 习 梳 理
5
(1)灭活会破坏病毒或细菌的抗原结构,使其失去感染能力。( )
×
[解析] “灭活”是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,
但并不破坏其抗原结构。
(2)制备单克隆抗体时,先利用特定的抗原蛋白饲喂小鼠,再从小鼠
脾脏中分离出B淋巴细胞。( )
×
[解析] 若用抗原蛋白饲喂小鼠,抗原蛋白会被小鼠消化道中的蛋白
酶水解而失去活性,因此应向小鼠注射特定的抗原蛋白,再从小鼠
脾脏中分离出相应的B淋巴细胞。
预 习 检 测
6
(3)单克隆抗体制备过程涉及的生物学原理有细胞增殖和细胞膜的选
择透过性。 ( )
×
[解析] 单克隆抗体的制备过程主要运用的细胞工程技术包括动物细
胞培养和动物细胞融合,原理依次是细胞增殖、细胞膜具有一定的
流动性。
预 习 检 测
7
(4)将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行诱导融合,培养液中融合后的细
胞即为杂交瘤细胞。( )
×
[解析] 将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行诱导融合,培养液中融合后
的细胞有多种,只有B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的细胞才是杂
交瘤细胞。
预 习 检 测
8
(5)为提高单克隆抗体制备成功率,往往需要多次给实验动物注射多
种抗原。( )
×
[解析] 为提高单克隆抗体制备成功率,往往需要多次给实验动物注
射同一种抗原。
(6)需对抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞进行体内或体外培养。( )
√
预 习 检 测
9
(7)抗体—药物偶联物中,单克隆抗体作为抗癌药物能够定向杀死癌
细胞。( )
×
[解析] 抗体—药物偶联物中,单克隆抗体需携带抗癌药物才能定向杀
死癌细胞,单克隆抗体能特异性识别癌细胞,抗癌药物杀死癌细胞。
(8) 中抗体发挥靶向运输作用,药物发挥治疗效应。( )
√
预 习 检 测
10
任务一 动物细胞融合技术
【情境】灭活的病毒可诱导动物细胞融合,其发挥作用的示意图如下:
任 务 活 动
11
(1)动物细胞融合体现了细胞膜在结构上具有________的特点。
流动性
(2)与植物体细胞杂交相比,动物细胞融合前不需要的步骤是_______
_____________,两者都可以使用的诱导方式是__________________
_____,灭活的病毒只适合诱导动物细胞融合。
酶解
法去除细胞壁
电融合法、融
合法
任 务 活 动
12
(3)病毒灭活是指用物理或化学手段使之失去感染能力,但并不破坏
它们的______结构。
抗原
(4)灭活病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的________和一些
酶能够与细胞膜上的________发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜
上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。
糖蛋白
糖蛋白
任 务 活 动
13
(5)动物细胞融合的过程中,首先发生的是________(填“细胞膜”或
“细胞质”)融合。
细胞膜
任 务 活 动
14
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合
原理 细胞膜的流动性和植物细
胞的全能性 细胞膜的流动性
步骤 去壁 诱导原生质体融合
杂种细胞 杂种植株 分散成单个细胞 诱导细
胞融合 杂交细胞
任 务 活 动
15
项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合
诱导方法 物理方法、化学方法 物理方法、化学方法、灭
活病毒
结果 形成杂种植株 形成杂交细胞
相同点 融合原理相同;都可以用物理、化学方法诱导融合
续表
任 务 活 动
16
例1 [2024·海南卷]海南龙血树具有药用和观赏价值,可利用植物
组织培养技术产生愈伤组织,进而获得该种植株。动物细胞融合技
术可将骨髓瘤细胞和产生特定抗体的B淋巴细胞融合形成杂交瘤细胞,
进而制备单克隆抗体。下列有关这两种技术的叙述,正确的是
( )
A.利用的原理均是细胞的全能性
B.使用的培养基均需添加葡萄糖和血清
C.培养时的温度和 均相同
D.产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力
√
任 务 活 动
17
[解析] 利用植物组织培养技术获得海南龙血树,利用的原理是细胞
的全能性;制备单克隆抗体使用了动物细胞培养技术和细胞融合技
术,这两种技术利用的原理分别是细胞的增殖和细胞膜的流动性,A
错误。利用植物组织培养技术获得海南龙血树,使用的培养基中添
加的是蔗糖,不需添加葡萄糖和血清,B错误。由于植物细胞和动物
细胞生长所需的适宜温度和存在差异,所以培养时的温度和 一
般不相同, 错误。愈伤组织是外植体(离体的植物器官、组织或细
胞)经脱分化形成的,杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和产生特定抗体的
B淋巴细胞融合后形成的,因此产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均
具有增殖能力,D正确。
任 务 活 动
18
例2 下列关于动物细胞融合技术及其意义的叙述,错误的是( )
A.动物细胞融合技术是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的
技术
B.可以打破生殖隔离,实现远缘杂交,获得新物种
C.杂交瘤技术是在细胞融合技术基础上发展起来的
D.灭活病毒可以诱导细胞融合与病毒表面的糖蛋白有关
√
任 务 活 动
19
[解析] 动物细胞融合技术是使两个或多个动物细胞结合形成一个细
胞的技术,A正确;动物细胞融合技术不能获得新物种,B错误;杂
交瘤细胞就是骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合形成的,所以杂交瘤技术
是在细胞融合技术基础上发展起来的,C正确;灭活的病毒诱导细胞
融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶与细胞膜上的糖蛋白
发生作用,使细胞相互凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重
新排布,细胞膜打开,细胞发生融合,D正确。
任 务 活 动
20
任务二 单克隆抗体的制备
【资料】阅读教材第48、49页图“米尔斯坦和科勒制备单克隆抗体过
程的示意图”。
(1)补充完善单克隆抗体的制备流程图
产生特定抗体
特定的选择培养基
任 务 活 动
21
杂交瘤细胞
克隆化培养
腹腔
细胞培养液
腹水
任 务 活 动
22
(2)该过程应用的动物细胞工程技术有___________________________
___;其原理是__________________________________。
动物细胞融合、动物细胞培养
细胞膜具有一定的流动性、细胞增殖
(3)若只考虑细胞两两融合,诱导融合后会获得___种类型的细胞。经
特定的选择培养基筛选后,__________________和融合的_________
___的细胞都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞才能生长。
3
未融合的亲本细胞
具有同种核
(4)体外培养和注射到小鼠体内进行培养的细胞具有的特点是_______
_________________________。
(5)图示过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体,理由是_______
___________________________________________________________。
既能
大量增殖又能产生特定抗体
图示
过程生产出的单克隆抗体对人体来说是抗原,存在着免疫排斥反应
任 务 活 动
23
1.将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原因:①每一个B淋巴细胞只能
分泌一种特异性抗体;不同种类的B淋巴细胞分泌的抗体不同。
淋巴细胞在体外培养时不能无限增殖;骨髓瘤细胞能够无限增殖。
2.单克隆抗体制备过程中的筛选过程
项目 第一次筛选 第二次筛选
筛选
原因 诱导融合后会得到多
种杂交细胞,另外还
有未融合的细胞 由于小鼠在生活中还受到其他抗原的
刺激,所以经选择培养获得的杂交瘤
细胞中有能产生其他抗体的细胞
任 务 活 动
24
项目 第一次筛选 第二次筛选
筛选
方法 用特定的选择培养基
筛选:未融合的细胞
和融合的具有同种核
的细胞都会死亡,只
有融合的杂交瘤细胞
才能生长 用96孔板培养,在每个孔中只接种一
个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培
养和抗体检测,经多次筛选得到能产
生特异性抗体的细胞群
筛选
目的 得到杂交瘤细胞 得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞
续表
任 务 活 动
25
例3 下列关于单克隆抗体制备的说法,正确的是 ( )
A.将特定抗原注射到小鼠体内,可以从小鼠血清中获得单克隆抗体
B.经特定抗原免疫过的B淋巴细胞可在体外培养时分泌单克隆抗体
C.诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,发生融合的细胞均为杂交瘤
细胞
D.筛选出杂交瘤细胞后,需利用特定抗原再次筛选出能分泌单克隆
抗体的细胞
√
任 务 活 动
26
[解析] 向小鼠体内注射特定的抗原,小鼠会产生免疫反应,可以从
小鼠血清中获得抗体,但此时的抗体不是单克隆抗体,A错误;经特
定抗原免疫过的B淋巴细胞在体外无增殖能力,无法通过体外培养获
得单克隆抗体,B错误;诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,产生
的融合细胞可能是B淋巴细胞 淋巴细胞、骨髓瘤细胞—骨髓瘤细
胞、B淋巴细胞—骨髓瘤细胞,C错误;单克隆抗体制备过程需要进
行2次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能够产生特定
抗体的杂交瘤细胞,B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞
还需用特定抗原进行抗体检测,筛选出呈阳性的杂交瘤细胞才能进
行体内或体外培养,获得单克隆抗体,D正确。
任 务 活 动
27
例4 [2025·山东日照高二月考]抗原表位指抗
原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团,是抗
原与 细胞或B细胞表面的抗原识别受体及抗体
特异性结合的基本结构单位。下图为单克隆抗体
的制备过程,下列叙述错误的是( )
A.可用灭活的病毒诱导骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合
B.经选择培养基筛选所得的杂交瘤细胞群体具有多样性
C.克隆化培养和抗体检测后的每个杂交瘤细胞只能产生1种抗体
D.由图可知,利用一种抗原经杂交瘤技术只能获得一种单克隆抗体
√
任 务 活 动
28
[解析] 在单克隆抗体制备过程中,灭活的病毒常
用来促进骨髓瘤细胞与B淋巴细胞的融合,A正
确;经选择培养基筛选后,由于B淋巴细胞有多
种,杂交瘤细胞具有多样性,B正确;克隆化培
养和抗体检测的目的是筛选出能产生大量单一抗
体的杂交瘤细胞,C正确;利用一种抗原,可以通过杂交瘤技术获得针
对该抗原不同表位的多种单克隆抗体,D错误。
任 务 活 动
29
任务三 单克隆抗体的应用
【资料】阅读教材第50页思考·讨论“单克隆抗体的应用”,进行分析。
(1)资料1说明,单克隆抗体诊断试剂盒在应用上具有______________
__________的优势。
诊断时间提前、
准确率高
任 务 活 动
30
(2)分析资料2
①抗体—药物偶联物 通常由______、______和______
(如细胞毒素)三部分组成。
②杀伤肿瘤细胞的过程中,识别肿瘤细胞的是抗体—药物偶联物的
______部分,发挥杀伤作用的是______。
③抗体—药物偶联物以______的方式进入肿瘤细胞,最终引起细胞
凋亡。
④使用单克隆抗体制备抗体—药物偶联物杀伤肿瘤细胞的优势是
______________________________________。
抗体
接头
药物
抗体
药物
胞吞
选择性杀伤肿瘤细胞,避免伤害正常细胞
任 务 活 动
31
(3)单克隆抗体诊断试剂盒与单克隆抗体—药物偶联物都利用了抗体
的______性。
特异
任 务 活 动
32
例5 [2024·福建卷]我国科研团队研制出全球首个以尿液中的抗原
为靶标的戊肝诊断试剂盒,该成果属于单克隆抗体在临床上的应用。
下列叙述错误的是( )
A.该试剂盒的研制过程应用了动物细胞融合技术
B.该试剂盒的检测原理为抗原抗体的特异性结合
C.该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤
D.该试剂盒还可用于其他类型病毒性肝炎的检测
√
任 务 活 动
33
[解析] 依据题干信息,戊肝诊断试剂盒属于单克隆抗体的研究成果,
单克隆抗体制备过程需要已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,所
以应用了动物细胞融合技术,A正确;该试剂盒的检测原理为抗原抗
体的特异性结合,B正确;依据题干信息,该试剂盒以尿液中的抗原
为靶标,所以该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤,C正确;
抗体具有特异性,所以戊肝诊断试剂盒只能用于戊肝的检测,不能
用于其他类型病毒性肝炎的检测,D错误。
任 务 活 动
34
例6 [2025·福建漳州高二月考]乳腺癌细
胞的 蛋白是正常组织中的100倍以上,
可作为理想的肿瘤治疗靶标。科研人员通过
A. 蛋白不是乳腺癌细胞膜上特有的蛋白
B.可运用动物细胞培养和动物细胞融合技术制备抗 抗体
C. 被溶酶体酶降解,释放出抗体和细胞毒素使乳腺癌细胞凋亡
D.荧光标记的抗 单克隆抗体可用于乳腺癌的定位诊断
接头将抗抗体与细胞毒素结合,制备出来治疗乳腺癌。 的
作用机制如图所示。下列相关叙述错误的是( )
√
任 务 活 动
35
[解析] 由题干“乳腺癌细胞的 蛋白是正常组织中的100倍以上”
可知蛋白不是乳腺癌细胞特有的蛋白,A正确;制备抗 抗
体运用了动物细胞培养和动物细胞融合技术,B正确;据图可知,
被溶酶体酶降解,释放出的是药物,药物使乳腺癌细胞凋亡,C
错误;荧光标记的抗 单克隆抗体能特异性地与乳腺癌细胞表面
的 蛋白结合,从而用于乳腺癌的定位诊断,D正确。
任 务 活 动
36
备用习题
37
1.下列关于动物细胞融合的说法,不正确的是( )
A. 动物细胞融合前要用酶解法分散成单个细胞
B. 动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性
C. 融合后得到的杂交细胞可能表现出两个亲本细胞的特点
D. 融合后得到的杂交细胞具有两个细胞核
[解析] 动物细胞融合前要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理使其分散成单个细胞,A正确;动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性,B正确;融合后得到的杂交细胞获得了两个亲本细胞的遗传物质,可能表现出两个亲本细胞的特点,C正确;融合后得到的杂交细胞是单核细胞,D错误。
√
备 用 习 题
2.草莓皱缩病毒(SCV)感染草莓时,会使其叶片扭曲皱缩,植株矮化,导致减产。为了能快速有效地检测出该病毒,研究人员利用SCV的病毒粒子免疫健康小鼠,制备相应的单克隆抗体。下列有关叙述错误的是( )
A.从免疫小鼠体内分离获得的B淋巴细胞可无限增殖
B.在获得能分泌相应抗体的杂交瘤细胞的过程中,需要进行两次筛选
C.用单克隆抗体检测草莓是否感染SCV是利用了抗原抗体特异性结合的原理
D.单克隆抗体可与特定抗原发生特异性结合,并且可以大量制备
√
备 用 习 题
[解析]从免疫小鼠体内获得的B淋巴细胞不能无限增殖,A错误;在获得能分泌相应抗体的杂交瘤细胞的过程中,需要进行两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,B正确;用单克隆抗体检测草莓是否感染SCV是利用了抗原—抗体杂交的原理,C正确;单克隆抗体可与特定抗原发生特异性结合,并且可以大量制备,D正确。
备 用 习 题
3.如图为杂交瘤细胞的制备示意图。骨髓瘤细胞
由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT-),
在HAT选择培养液中不能正常合成DNA,无法
生长。下列叙述错误的是( )
A. 可用灭活的病毒诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合
B. 两两融合的细胞都能在HAT选择培养液中生长
C. 杂交瘤细胞需进一步筛选才能用于生产
D. 细胞膜的流动性是细胞融合的基础
√
备 用 习 题
[解析]诱导动物细胞融合的方法有电融合法、PEG融合
法、灭活病毒诱导法等,A正确。两两融合的细胞包
括3种:B淋巴细胞与B淋巴细胞融合细胞、骨髓瘤细胞
与骨髓瘤细胞融合细胞、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融
合的杂交瘤细胞;骨髓瘤细胞虽然能无限增殖,但缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶,在HAT选择培养液中无法生长,B淋巴细胞含次黄嘌呤磷酸核糖转移酶但不能无限增殖,所以在HAT选择培养液中,只有杂交瘤细胞才能生长,B错误。需要进一步把能分泌人类所需抗体的杂交瘤细胞筛选出来,C正确。动物细胞融合是以细胞膜的流动性为基础的,D正确。
备 用 习 题
4.单克隆抗体是指通过克隆形成细胞群,产生出化学性质单一、特异性强的抗体。下图为单克隆抗体制备过程的示意图。下列相关叙述正确的是( )
A. 每个脾B淋巴细胞可产生多种抗体
B. 灭活的病毒促进细胞融合的效率一般不能达到100%
C. 细胞筛选和细胞融合时所用的培养液在成分上没有差异
D. 克隆化培养过程中杂交瘤细胞会出现接触抑制的现象
√
备 用 习 题
[解析]抗体是由浆细胞产生,浆细胞是由B细胞或记
忆细胞经抗原刺激产生的,只能产生针对该抗原的
抗体,一种浆细胞只能产生一种抗体,A错误;灭
活病毒诱导细胞融合的原理:病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞发生融合,因此灭活的病毒促进细胞融合的效率一般不能达到100%,B正确;获得杂交瘤细胞需要在选择培养基上筛选,细胞融合时所用的培养液需要再加入诱导剂,两者的成分上有差异,C错误;杂交瘤细胞具有无限增殖的特点,无接触抑制现象,因此该细胞克隆化培养过程中不会出现接触抑制,D错误。
备 用 习 题
5.将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”,能够用于杀死人类某些癌细胞,其过程如图所示。下列有关叙述错误的是( )
A. 经过程①形成的杂交瘤细胞都能无限增殖并产生特定抗体
B. 过程①的基本原理和植物原生质体融合的基本原理相同
C. 过程②需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞
D. 抗体的靶向作用使过程③具有高度特异性
√
备 用 习 题
[解析]经过程①形成的杂交瘤细胞不一定都能产生特定抗体,需要经过抗体检测筛选出呈阳性的杂交瘤细胞,A错误;过程①的基本原理和植物原生质体融合的基本原理相同,都是细胞膜具有一定的流动性,B正确;过程②需要采用抗体检测筛选出呈阳性的杂交瘤细胞即能产生特定抗体的杂交瘤细胞,然后进行培养(包括体内培养和体外培养),C正确;抗体的靶向作用(特异性地和抗原结合)使过程③具有高度特异性,D正确。
备 用 习 题
6.科研人员制备能产生双抗体的双杂交瘤细胞的实验过程是先制备两种杂交瘤细胞,每种杂交瘤细胞产生的抗体与抗原的结合情况如图甲、乙所示。然后再使二者融合,经过筛选最终得到可以产生双抗体(同时抗α、β两种抗原,如图丙)的双杂交瘤细胞。抗体由两条重链和两条轻链组成,重链和轻链均分为恒定区和可变区,两条重链依赖于A1或B1进行组装(A1与B1相同),重链与轻链的组装依赖于恒定区A2、a或B2、b(a与b相同)。下列叙述错误的是( )
备 用 习 题
A. 三种杂交瘤细胞的制备均可使用灭活病毒作为诱导剂
B. 三种杂交瘤细胞的筛选均需要进行克隆化培养和抗体检测
C. 双杂交瘤细胞产生的抗体可与两种抗原同时发生特异性结合
D. 图丙中的1、2、3、4、5、6可以分别是A2、B2、a、b、β、α
√
备 用 习 题
[解析]诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等,因此三种杂交瘤细胞的制备均可使用灭活病毒作为诱导剂,A正确;根据单克隆抗体的制备过程可知,三种杂交瘤细胞的筛选均需要进行克隆化培养和抗体检测,B正确;根据题意可知,图丙是双杂交瘤细胞产生的双特异性抗体,可与两种抗原同时发生特异性结合,C正确;根据图甲、乙信息判断,1、2、3、4、5、6分别对应A2、B2、a、b、α、β,D错误。
备 用 习 题
练习册
50
题每题2分,共24分]
知识点一 动物细胞融合技术
1.动物细胞融合技术就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的
技术。融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。
下列相关叙述错误的是( )
A.细胞融合技术突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能
B.动物细胞融合技术可以用于研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤等
C.动物细胞融合技术和植物体细胞杂交技术的原理是完全相同的
D.杂交瘤技术是动物细胞融合技术的重要应用,具有重要意义
√
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
51
[解析] 细胞融合技术突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能,A
正确;动物细胞融合已经成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育
生物新品种的重要手段,B正确;动物细胞融合技术的原理是细胞膜的
流动性,植物体细胞杂交技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的
全能性,二者的原理不完全相同,C错误;杂交瘤技术是利用动物细胞
融合技术发展起来的,为制造单克隆抗体开辟了新途径,D正确。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
52
2.[2024·湖北鄂州高二期中]动物细胞融合是使两个或多个动物细
胞结合形成一个细胞的技术。下列关于动物细胞融合的叙述,错误
的是( )
A.单克隆抗体制备的过程中需要进行动物细胞融合
B.动物细胞融合的原理与植物组织培养的原理不同
C.两个单倍体细胞融合后,形成的细胞中含有2个染色体组
D.若将两种细胞放置于培养基中进行两两细胞融合,共有3种融合类型
√
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
53
[解析] 单克隆抗体的制备需要骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,A正确;
动物细胞融合利用了细胞膜的流动性,植物组织培养利用的是植物细
胞的全能性,二者原理不同,B正确;如果单倍体细胞含多个染色体
组,那么融合后的细胞含多个染色体组,而不是2个染色体组,C错误;
若将两种细胞(假设为A型、B型) 放置于培养基中进行两两细胞融合,
会出现型、型、 型三种类型的融合细胞,D正确。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
54
3.[2025·北京房山区高二月考]科学家利用仙台病毒诱导A、B两种
动物细胞进行融合,之后进行细胞培养。已知A、B两种细胞各自的
生活环境如下表所示,且融合细胞只能在选择培养基Ⅱ上生长,下列
说法错误的是( )
A细胞 只能在选择培养基Ⅰ上生长,生长环境的为
B细胞 只能在选择培养基Ⅱ上生长,生长环境的为
A.可用 融合法和电融合法诱导动物细胞融合
B.A、B两种动物细胞融合依赖于细胞膜的流动性
C.选择培养基Ⅱ上存活下来并生长的细胞就是融合细胞
D.将融合后的细胞置于培养箱以维持培养液的
√
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
55
[解析] 诱导动物细胞融合常用的方法有 融合法和电融合法、灭
活病毒诱导法等,A正确;A、B两种动物细胞融合,体现了细胞膜
具有流动性,B正确;虽然融合细胞只能在选择培养基Ⅱ上生长,但
在选择培养基Ⅱ上存活下来并生长的细胞不一定都是融合细胞,有可
能存在B细胞(因为B细胞原本就能在选择培养基Ⅱ上生长),C错误;
将融合后的细胞置于培养箱以维持培养液的 ,D正确。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
56
知识点二 单克隆抗体的制备
4.要想获得大量的单一抗体就必须克隆单一的B淋巴细胞,形成细胞
群。其原因是( )
A.在体外培养条件下,B淋巴细胞可以无限增殖
B.在动物体内B淋巴细胞可产生超过百万种的抗体
C.每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应
D.每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体
√
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
57
[解析] B淋巴细胞属于高度分化的细胞,不能无限繁殖,A不符合题
意;动物在免疫反应的过程中,体内产生的特异性抗体种类可超过
百万种,但是每一个淋巴细胞只分泌一种特异性抗体,因此,要想
获得大量的单一抗体,必须克隆单一的B淋巴细胞,形成细胞群,B
不符合题意,D符合题意;并非每个B淋巴细胞都参与特异性免疫反
应,当有特定的抗原刺激机体时,相应B淋巴细胞才能参与特异性免
疫反应,C不符合题意。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
58
5.[2023·北京卷]甲状旁腺激素 水平是人类多种疾病的重要
诊断指标。研究者制备单克隆抗体用于快速检测 ,有关制备过
程的叙述不正确的是( )
A.需要使用动物细胞培养技术
B.需要制备用 免疫的小鼠
C.利用抗原—抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞
D.筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞
√
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
59
[解析] 单克隆抗体制备过程中需要对骨髓瘤细胞等进行培养,即需
要使用动物细胞培养技术,A正确;该操作的目的是制备单克隆抗体
用于快速检测,故应用 刺激小鼠,使其产生相应的B细胞,
B正确;抗原与抗体的结合具有特异性,可利用抗原—抗体结合的原
理筛选杂交瘤细胞,C正确;由于一种B细胞经分化形成浆细胞后通
常只能产生一种抗体,故筛选出的单个杂交瘤细胞无法分泌多种抗
体,D错误。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
60
6.[2025·安徽蚌埠高二期末]科研人
员利用动物细胞融合技术制备单克隆
抗体的过程如下图所示。下列相关叙
述正确的是( )
A.①过程要多次注射抗原,其目的是刺激小鼠产生更多的抗体
B.与植物体细胞杂交相比,过程②特有的诱导融合的方法是 融合法
C.步骤③筛选出的杂交瘤细胞既能无限增殖又可以分泌特定抗体
D.步骤④需要克隆化培养和抗体检测,从而获得满足需要的杂交瘤细胞
√
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
61
[解析] ①过程要多次注射抗原,其目
的是刺激小鼠产生更多的B淋巴细胞,
A错误;与植物体细胞杂交相比,过
程②特有的诱导融合的方法是灭活的病毒诱导,B错误;步骤③筛选出
的杂交瘤细胞既能无限增殖又可以分泌抗体,经过④专一抗体检测获得
既能无限增殖又可以分泌特定抗体的杂交瘤细胞,C错误;经过③获得
杂交瘤细胞,通过步骤④克隆化培养和抗体检测,从而获得满足需要的
杂交瘤细胞,D正确。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
62
7.某抗原有 四个抗原决定簇,
每个抗原决定簇都只能刺激机体产
生一种抗体,由该抗原刺激产生的
A.B淋巴细胞可来源于该抗原刺激后的动物脾脏
B.过程②需用选择培养基来筛选出分泌所需抗体的杂交瘤细胞
C.该抗原部分结构改变后,可能会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况
D.多抗可以从血清中直接分离,操作简单但不能大量制备
不同抗体统称为多克隆抗体。下图是某同学绘制的制备该抗原单克隆抗
体(单抗)和多克隆抗体(多抗)的过程示意图,相关说法不正确的是
( )
√
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
63
[解析] B淋巴细胞可来源于该抗原刺激后的动物脾脏,从小鼠脾脏
中取出的B淋巴细胞可能有多种类型,A正确;过程①需用选择培养
基来筛选出杂交瘤细胞,过程②利用抗原—抗体杂交筛选出能产生
特定抗体的杂交瘤细胞,B错误;单抗只是针对单一抗原,因此,该
抗原部分结构改变后,可能会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况,
C正确;多抗可从血清中直接分离,操作简单,但不可大量制备,因
为浆细胞不具有增殖的能力,D正确。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
64
8.[2025·山东德州高二月考]为解决杂交瘤细胞在传代培养中出现
来自B淋巴细胞的染色体丢失问题,研究者将抗原刺激后的B淋巴细
胞用(一种病毒颗粒)感染,获得“染色体核型稳定”的 转化细
胞(过程如下图)。转化细胞能够在培养基中存活,但对
敏感。骨髓瘤细胞在培养基中不能存活,对 不敏感。下列分
析正确的是( )
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
65
A.B淋巴细胞可从多次间歇注射某种抗原的动物血清中获得
B.杂交瘤细胞染色体丢失可能会导致其产生抗体的能力下降
C.培养基和 筛选去除的是未融合的 转化细胞
D.图中获得的杂交瘤细胞既能迅速增殖又能产生所需的特定抗体
√
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
66
[解析] 对动物进行间歇注射抗原处理,以刺激动物机体产生相应的
B淋巴细胞;B淋巴细胞来自于骨髓的造血干细胞,可分布于淋巴结
和脾等处,故B淋巴细胞可从多次间歇注射某种抗原的动物脾中获得,
A错误。抗体是由浆细胞分泌的,杂交瘤细胞若丢失来自B淋巴细胞
的染色体,可能会导致其产生抗体的能力下降,B正确。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
67
据题意“转化细胞能够在培养基中存活,但对 敏感;骨髓瘤细胞在培养基中不能存活,对不敏感”可知, 培养基去除的是未与 转化细胞融合的骨髓瘤细胞和自身融合的骨髓瘤细胞,筛选去除的是未与骨髓瘤细胞融合的 转化细胞和自身融合的 转化细胞,C错误。由于动物体内存在多种B淋巴细胞,图示获得的杂交瘤细胞还需要经过进一步的筛选,用专一抗体检测呈现阳性的杂交瘤细胞才能产生所需的特定抗体,D错误。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
9.[2024·江苏扬州中学高二月考]一种杂交瘤细胞只能产生一种抗
体,抗体由两条相同的重链和两条相同的轻链构成。科学家通过动
物细胞融合技术,将两株不同的杂交瘤细胞和 融合形成双杂交
瘤细胞 。双杂交瘤细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖,产生的双
特异性抗体 如图所示。下列相关说法错误的是( )
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
69
A.将杂交瘤细胞A、B混合并诱导融合后,利用选择培养基无法筛选
出双杂交瘤细胞
B.双杂交瘤细胞同时识别 、 抗原后,才能产生双特异性抗体
C.对培养到一定密度的双杂交瘤细胞进行传代培养时,无须使用胰
蛋白酶处理
D.将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔,腹水能为细胞提供糖类、氨基酸、
无机盐、维生素等营养条件
√
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
70
[解析] 单克隆抗体制备过程中需要进行两次筛选,第一次利用选择
培养基筛选出杂交瘤细胞,第二次用抗原—抗体杂交的方法筛选出
能产生特定抗体的杂交瘤细胞,双杂交瘤细胞由两个杂交瘤细胞融
合而成,不能使用选择培养基筛选,A正确;杂交瘤细胞是由已免疫
的B细胞和骨髓瘤细胞融合而成,无须接触抗原就能产生抗体,B错
误;双杂交瘤细胞是悬浮生长的细胞,若要传代培养,可直接用离
心法收集细胞,无须使用胰蛋白酶处理,C正确;将杂交瘤细胞注射
到小鼠腹腔中培养,腹水作为天然培养基,为细胞提供各种营养条
件,D正确。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
71
知识点三 单克隆抗体的应用
10.下列关于单克隆抗体的叙述,不正确的是( )
A.其化学本质是蛋白质
B.单克隆抗体自身也能用于疾病治疗
C.利用单克隆抗体制成诊断试剂,可用于疾病的诊断
D.单克隆抗体只能在体内生产,不能在体外生产
√
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
72
[解析] 单克隆抗体的化学本质是蛋白质,A正确;单克隆抗体自身
也能用于疾病治疗,B正确;单克隆抗体制成诊断试剂,可用于多种
疾病的诊断和病原体的鉴定,C正确;单克隆抗体既能在体内生产,
也能在体外生产,D错误。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
73
11.[2025·河北邢台高二期末]为降低治疗人
乳腺癌的药物的副作用,科研人员尝试在单
A.制备单克隆抗体的过程运用了动物细胞融合技术等
B.步骤①可采用 或灭活的病毒进行诱导
C.步骤②需要用特定的选择培养基进行筛选
D.经步骤③克隆化培养的细胞需要用相应抗体进行检测
克隆抗体技术的基础上,构建抗体—药物偶
联物(ADC),过程如图所示,其中步骤④是将获得的单克隆抗体和治疗
人乳腺癌的药物结合形成 。下列分析错误的是( )
√
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
74
[解析] 制备单克隆抗体的过程中需要诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融
合,运用了动物细胞融合技术,A正确;诱导动物细胞融合可以用
融合法或灭活病毒诱导法,B正确;步骤②为利用选择培养基筛选出
杂交瘤细胞,C正确;经步骤③克隆化培养的细胞需要用相应抗原进
行检测,D错误。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
75
12.人绒毛膜促性腺激素 是女性怀孕后
胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗
单克隆抗体可用于早孕的诊断。如图是
抗 单克隆抗体制备流程示意图,下列有
关说法错误的是( )
A.注射 的目的是使动物产生抗体,过程①常用的方法和植物体细胞杂
交完全相同
B.过程②筛选出的杂交瘤细胞不一定能产生抗 抗体
C.过程③以 为抗原进行检测
D.过程④可以在体内进行,也可在体外进行
√
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
76
[解析] 注射 的目的是使动物产生能
分泌相应抗体的B淋巴细胞,过程①常
用灭活的病毒或 诱导B淋巴细胞和
骨髓瘤细胞融合,而植物体细胞杂交不
能使用灭活病毒诱导法,A错误;过程②筛选出的杂交瘤细胞不一定能
产生抗 抗体,需要进行抗体检测,B正确;过程③进行抗体检测,
即以为抗原筛选出能分泌抗 抗体的杂交瘤细胞,C正确;过程
④为动物细胞培养,可以在体内进行,也可在体外进行,D正确。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
77
13.(14分)[2025·山东菏泽高二期末]人体心肌细胞中的肌钙蛋白由
三种结构不同的亚基组成,即肌钙蛋白、肌钙蛋白 和
肌钙蛋白,其中 在血液中含量上升是心肌损伤的特异性
指标。为制备抗 的单克隆抗体,科研人员完成了以下过程。请
据图分析回答下列问题:
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
78
(1)(2分)动物细胞培养时,培养基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的
营养成分外,往往还需加入一定量的___________,以满足动物细胞
培养的营养需要。动物细胞培养应在含 的恒温培养箱中进
行, 的主要作用是________________。
(动物)血清
维持培养液的
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
79
[解析] 人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚,在使用合成
培养基时,通常需加入血清等一些天然成分。动物细胞培养的气体
环境:空气,是细胞代谢所必需的, 的主要作用
是维持培养液的 。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
80
(2)(2分)每隔2周用 作为抗原注射小鼠1次,共注射3次,其目的
是________________________________________________________。
最后一次免疫后第3天,取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细
胞诱导融合。
加强免疫,刺激小鼠产生更多的(能产生特定抗体的)B淋巴细胞
[解析] 为了刺激小鼠机体产生更多的(能产生特定抗体的)B淋巴细胞,
一般需要多次注射相应抗原。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
81
(3)(4分)甲、乙、丙中,只含杂交瘤细胞的是________,②过程表示
将乙细胞接种到多孔培养板上,进行抗体检测,之后稀释、培养、
再检测,并多次重复上述操作,其目的是筛选获得_______________
_______________。
乙和丙
能产生抗抗
体的杂交瘤细胞
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
82
[解析] 由图可知,需要对甲进行筛选后得到杂交瘤细胞,因此乙和
丙中只含杂交瘤细胞;其中①代表用特定的选择培养基进行筛选,
②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上,进行抗体检测,之后稀
释、培养、再检测,并多次重复上述操作,就能获得足够数量的能
分泌抗 抗体的杂交瘤细胞。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
83
(4)(4分)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的
方法,具体原理如图所示:
据图分析,固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合,这是由于不同抗
体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中,酶标抗体的
作用是________________________________________________,可
通过测定_________________________________________来判断待测
抗原量。
与待测抗原结合,并催化特定底物反应生成检测产物
酶催化特定底物反应(酶促反应)产生的产物量
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
84
[解析] 分析图中过程,两种抗体与检测的抗原均能结合,但结合部
位是不同的,酶标抗体可以与待测抗原结合,并催化特定底物反应,
所以通过检测其产物量就可确定待测抗原的含量。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
85
(5)(2分)单克隆抗体的制备技术是在动物细胞融合技术上发展起来的,
与常规的血清抗体相比,单克隆抗体最大的优点在于_____________
___________________________________________________________。
能准确地识别
抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性结合,并且可以大量制备
[解析] 单克隆抗体的最大优点:准确识别抗原的细微差异,与特定
抗原发生特异性结合,并且可以大量制备。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
86
14.(12分)[2024·安徽黄山高二期末]丙肝病毒引起的丙型肝炎可导
致肝脏慢性炎症坏死和纤维化,部分患者可能发展为肝硬化甚至肝
癌。为研制针对丙肝病毒的单克隆抗体,某研究者以小鼠为实验材
料设计了以下实验流程。回答下列问题:
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
87
(1)(3分)为使单细胞悬液中的B淋巴细胞产生的抗体中一定含有能与
丙肝病毒结合的抗体,需要进行的操作是_______________________
_______________________。融合之前的两种细胞中,能通过动物细
胞培养大量增加数量的是____________。
给小鼠注射(灭活的)丙肝
病毒使小鼠产生免疫反应
骨髓瘤细胞
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
88
[解析] 用(灭活的)丙肝病毒对小鼠进行免疫后,小鼠的B淋巴细胞能
产生抗丙肝病毒的抗体,从该小鼠的脾脏中能获得产生该抗体的B淋
巴细胞。B淋巴细胞在体外培养条件下不能无限增殖,而骨髓瘤细胞
能无限增殖,故融合之前的两种细胞中,能通过动物细胞培养大量
增加数量的是骨髓瘤细胞。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
89
(2)(9分)诱导细胞融合时利用了病毒表面含
有的糖蛋白和一些酶,能够与细胞膜上的
________(填化学本质)发生作用,使细胞
糖蛋白
蛋白质分子和脂质分子
选择培养基
杂交瘤细胞
克隆化培养和抗体检测
能产生所需抗体的杂交瘤细胞
互相凝聚,细胞膜上的______________________重新排布,细胞膜打开,
细胞发生融合。筛选1利用____________进行筛选,目的是筛选出
____________;而筛选2通过多次的______________________来完成,
目的是筛选出____________________________。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
90
[解析] 诱导细胞融合的病毒表面含有的糖
蛋白和一些酶,能够与细胞膜上的糖蛋白
发生作用,使得细胞互相凝聚,细胞膜上
的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。单克
隆抗体制备过程中细胞融合方式有B细胞间的融合、骨髓瘤细胞间的融
合及B细胞和骨髓瘤细胞的融合,会产生三类融合细胞 (只考虑两两融
合)。筛选1是指利用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。由于杂交瘤
细胞产生的抗体除了抗丙肝病毒的抗体外,还可能有其他类型,故筛选
2是指进行多次克隆化培养和专一性抗体检测,以得到能产生所需抗体
的杂交瘤细胞。
练 习 册
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
91
预习梳理 夯基础
一、动物细胞融合技术
1.两个或多个 2.细胞膜具有一定的流动性 3.灭活病毒诱导法
4.杂交细胞 两个或多个 5.有性杂交
6.(1)细胞遗传 (2)单克隆抗体
二、单克隆抗体及其应用
1.(1)某种抗原 血清 (2)纯度低 特异性 3.大量制备
4.(1)诊断试剂 (2)运载药物 治疗疾病
答 案 速 查
92
预习检测 判正误
(1)× (2)× (3)× (4)× (5)× (6)√ (7)× (8)√
任务活动 提素养
任务一 动物细胞融合技术
(1)流动性 (2)酶解法去除细胞壁 电融合法、<m></m>融合法 (3)抗
原 (4)糖蛋白 糖蛋白 (5)细胞膜
反馈评价
例1 D 例2 B
答 案 速 查
任务二 单克隆抗体的制备
(1)产生特定抗体 特定的选择培养基 杂交瘤细胞 克隆化培养
腹腔 细胞培养液 腹水 (2)动物细胞融合、动物细胞培养 细胞
膜具有一定的流动性、细胞增殖 (3)3 未融合的亲本细胞 具有
同种核 (4)既能大量增殖又能产生特定抗体 (5)图示过程生产出
的单克隆抗体对人体来说是抗原,存在着免疫排斥反应
反馈评价
例3 D 例4 D
答 案 速 查
任务三 单克隆抗体的应用
(1)诊断时间提前、准确率高 (2)①抗体 接头 药物 ②抗体
药物 ③胞吞 ④选择性杀伤肿瘤细胞,避免伤害正常细胞 (3)
特异
反馈评价
例5 D 例6 C
答 案 速 查
备用习题
1.D 2.A 3.B 4.B 5.A 6.D
练习册
知识点一 动物细胞融合技术
1.C 2.C 3.C
知识点二 单克隆抗体的制备
4.D 5.D 6.D 7.B 8.B 9.B
知识点三 单克隆抗体的应用
10.D 11.D 12.A
答 案 速 查
综合应用练
13.(1)(动物)血清 维持培养液的<m></m> (2)加强免疫,刺激小鼠产生
更多的(能产生特定抗体的)B淋巴细胞 (3)乙和丙 能产生抗<m></m>
抗体的杂交瘤细胞 (4)与待测抗原结合,并催化特定底物反应生成
检测产物 酶催化特定底物反应(酶促反应)产生的产物量 (5)能准
确地识别抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性结合,并且可以
大量制备
14.(1)给小鼠注射(灭活的)丙肝病毒使小鼠产生免疫反应 骨髓瘤细
胞 (2)糖蛋白 蛋白质分子和脂质分子 选择培养基 杂交瘤细胞
克隆化培养和抗体检测 能产生所需抗体的杂交瘤细胞
答 案 速 查
$